专利名称：莫诺苷的制备方法
技术领域：
本发明涉及一种山茱萸提取物在制备预防或治疗急慢性肝损伤和肝纤维化的药物中的应用，具体涉及莫诺苷在制备预防或治疗急慢性肝损伤和肝纤维化方面的药物中的应用。近年来病毒性肝炎，肝纤维化，脂肪肝，酒精肝，药物性肝损害及肝硬化，肝癌等肝病是当今社会威胁人类健康的主要疾病之一。我国是肝病大国，据最新统计病毒性肝炎和乙肝病毒携带者在我国人群当中有14%以上人口感染。病情加重则发展到肝纤维化，肝腹水，肝腹化和肝癌。每年死于肝硬化，肝癌的患者就是就有一百多万。肝纤维化是各种慢性肝病的共同病理基础，是肝硬化发生过程的重要阶段，常由肝内慢性炎症、胆汁淤积、免疫损伤等原因引起。有资料显示慢性肝炎肝纤维化的发病率为 85. 1%，肝纤维化持续发展将有25% -40%发展为肝硬化。研究证实肝纤维化是可逆性病变。莫诺苷是从中药山茱萸中提取得到的水溶性的环烯醚萜类化合物，文献报道山茱萸水提物具有降血糖、免疫抑制、抗炎、抗休克、强心、、抗心律失常、抗疲劳、抗衰老和增强记忆力等作用。但莫诺苷在预防或治疗急慢性肝损伤及肝纤维化的药理作用未见报道，本发明人通过大量的实验研究，证实了莫诺苷在预防或治疗急慢性肝损伤及肝纤维化的药物中的应用。
HC
￠3 Ii莫诺苷结构式(分子式为=C17H26O11,分子量406. 38)
发明内容
本发明提供了莫诺苷在制备预防或治疗急慢性肝损伤及肝纤维化的药物中的应
背景技术：
CH3OW用。本发明提供了莫诺苷在制备预防或治疗急性肝损伤的药物中的应用。本发明提供了莫诺苷在制备预防或治疗慢性肝损伤的药物中的应用。本发明提供了莫诺苷在制备预防或治疗肝纤维化的药物中的应用。本发明提供的莫诺苷在用于上述任一用途时，注射使用剂量范围为20 lOOOmg， 优选剂量范围为20 500mg ；其口服使用剂量范围为50 2000mg，优选剂量范围为50 lOOOmg。本发明提供的以莫诺苷为活性成分的药物组合物，可以以注射剂、片剂、丸剂、颗粒剂、胶囊、糖浆等剂型存在，优选为冻干粉针和胶囊。本发明提供的各种剂型均可以采用药学常规方法制备而成。本发明提供的莫诺苷按以下方法制备山茱萸药材粉碎后水洗醇沉；醇沉液浓缩，调节PH值至1 3上非极性 弱极性的大孔树脂，水洗至无色，再用10% 30%的乙醇溶液洗脱3 5倍柱体积，收集洗脱液，浓缩；浓缩液上非极性 弱极性的大孔树脂，水洗， 再用10% 30%的乙醇溶液洗脱3 5倍柱体积，收集洗脱液，低温减压干燥，结晶即得。本发明人通过下列实验证实了莫诺苷具有对急慢性肝损伤和肝纤维化的抑制作用，但并不意味着本发明仅限于此。
具体实施例方式实施例1莫诺苷的制备山茱萸药材50Kg，粉碎，加水500L，浸泡2小时，加热煎煮3次，每次2小时，过滤， 合并提取过滤液，减压浓缩至相对密度为1. 02(40°C测定)，加入95%乙醇，搅拌，至乙醇浓度为80%，静置12小时，过滤乙醇溶液，少量乙醇洗涤滤渣，弃掉滤渣，滤液浓缩至无醇，调节PH值为2，上样到AB-8大孔树脂柱，水洗至无色，10%乙醇溶液洗脱3倍柱体积，30%乙醇溶液洗脱3倍柱体积，接收洗脱液，浓缩；浓缩液上样到HPD300树脂柱，纯化水洗3倍柱体积，10%液乙醇溶液洗3倍柱体积，接收洗脱液，低温减压干燥，结晶。称重，制得莫诺苷 150g，检测，含量91%。实施例2莫诺苷的制备山茱萸药材50Kg粉碎，加水500L，浸泡2小时，加热煎煮3次，每次2小时，过滤，合并提取过滤液，减压浓缩，至相对密度1. 03 (40°C测定)，加入95%乙醇，搅拌，至醇浓度为 80%，静置6小时，过滤乙醇溶液，用少量乙醇洗涤滤渣，弃掉滤渣，滤液浓缩至无乙醇；浓缩液调节PH为2，上样到HZ-818大孔树脂柱，水洗至无色，10%乙醇洗脱3倍柱体积，20% 乙醇洗脱3倍柱体积，30%乙醇洗脱3倍柱体积，接收洗脱液，浓缩；浓缩液上样到HPD300 柱，水洗3个柱体积，10%乙醇洗3倍柱体积，接收洗脱液，低温减压干燥，结晶。称重，制得莫诺苷140g，检测，含量95%。实施例3莫诺苷注射液的制备按处方量取莫诺苷2g，氯化钠225g，用注射用水25000ml溶解，搅拌；加入活性炭 25g，搅拌20分钟，溶液经过微孔滤膜过滤澄明，分装于250ml输液瓶中，灭菌，检查合格后包装即可。实施例4莫诺苷固体制剂的制备
按处方量取莫诺苷50g，糊精100g，淀粉70g，羧甲基淀粉钠10g，硬脂酸镁适量，混和，加入50%乙醇适量制粒，干燥，整粒，压片，检查合格后，包装。实施例5莫诺苷冻干粉针的制备取莫诺苷50g，溶解于10000ml含1 %甘露醇的注射用水溶液中，加入活性炭10g， 搅拌30分钟，溶液经过微孔滤膜过滤，得到无热原的澄清溶液，分装于IOml西林瓶中，2ml/ 支，按冻干粉针工艺冻干，制成每支含IOmg的冻干粉针。试验例1 莫诺苷对四氯化碳引起小鼠急性肝损伤的影响1.1材料、仪器及动物四氯化碳(分析纯，烟台三和化学试剂公司，批号05012 ；莫诺苷按制备例2 制备；联苯双酯(滴丸，北京协和制药厂，规格1. 5mg，批号=050512) ；ALT/GPT试剂盒(中生北控生物科技股份有限公司，批号060281) ；ASP/G0T试剂盒(中生北控生物科技股份有限公司，批号060201)；全自动生化分析仪(意大利)。清洁级昆明种小鼠，体重18g 22g，雌雄各半，山东绿叶制药股份有限公司实验动物中心提供，合格证号SYXK (鲁)20030020。1. 2 方法小鼠130只，随机分为13组，即正常对照组、模型组、联苯双酯灌胃10. 0mg/kg组、 莫诺苷静脉注射 2. 0mg/kg 组、5. 0mg/kg 组、20. 0mg/kg 组、100. 0mg/kg 组和 200. 0mg/kg 组； 莫诺苷灌胃 5. 0mg/kg 组、10. 0mg/kg 组、50. 0mg/kg 组、200. 0mg/kg 组和 400. 0mg/kg 组，各静脉给药组连续给药3天，各灌胃给药组连续给药7天，末次给药前16小时除正常对照组外各组用0. 2%的四氯化碳油溶液腹腔注射，注射体积0. 25ml/只，正常对照组给与等体积的生理盐水，随即禁食16小时，末次给药1小时后眼眶采血，离心(4000rpm，IOmin)，收集血清，用药盒检测ALT/GPT、ASP/G0T活性。数据以数据用表示，以组间t检验进行统计学处理。1. 3 结果结果如表1 所示，莫诺苷静脉注射 5. 0mg/kg、20. 0mg/kg、100. 0mg/kg 和 200. Omg/ kg 组；莫诺苷灌胃 10. 0mg/kg、50. 0mg/kg、200. 0mg/kg 和 400. 0mg/kg 组明显降低 GOT、GPT 水平(与模型对照组比较，ρ < 0. 05或0. 01)。表1莫诺苷对CCL4肝损伤小鼠的GOT、GPT的影响
权利要求
1.一种莫诺苷的制备方法，采用以下方法制备山茱萸药材粉碎后水洗醇沉；醇沉液浓缩，调节PH值至1 3上非极性 弱极性的大孔树脂，水洗至无色，再用10% 30%的乙醇溶液洗脱3 5倍柱体积，收集洗脱液，浓缩；浓缩液上非极性 弱极性的大孔树脂，水洗，再用10% 30%的乙醇溶液洗脱3 5倍柱体积，收集洗脱液，低温减压干燥，结晶即得。
2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征为山茱萸药材50Kg粉碎，加水500L，浸泡 2小时，加热煎煮3次，每次2小时，过滤，合并提取过滤液，减压浓缩，至40°C测定相对密度 1. 03，加入95%乙醇，搅拌，至醇浓度为80%，静置6小时，过滤乙醇溶液，用少量乙醇洗涤滤渣，弃掉滤渣，滤液浓缩至无乙醇；浓缩液调节PH为2，上样到HZ-818大孔树脂柱，水洗至无色，10%乙醇洗脱3倍柱体积，20%乙醇洗脱3倍柱体积，30%乙醇洗脱3倍柱体积，接收洗脱液，浓缩；浓缩液上样到HPD300柱，水洗3个柱体积，10%乙醇洗3倍柱体积，接收洗脱液，低温减压干燥，结晶。
3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征为山茱萸药材50Kg，粉碎，加水500L，浸泡2小时，加热煎煮3次，每次2小时，过滤，合并提取过滤液，减压浓缩至40°C测定相对密度为1. 02，加入95 %乙醇，搅拌，至乙醇浓度为80 %，静置12小时，过滤乙醇溶液，少量乙醇洗涤滤渣，弃掉滤渣，滤液浓缩至无醇，调节PH值为2，上样到AB-8大孔树脂柱，水洗至无色，10%乙醇溶液洗脱3倍柱体积，30%乙醇溶液洗脱3倍柱体积，接收洗脱液，浓缩；浓缩液上样到HPD300树脂柱，纯化水洗3倍柱体积，10%液乙醇溶液洗3倍柱体积，接收洗脱液，低温减压干燥，结晶。
全文摘要
本发明提供一种莫诺苷的制备方法，采用山茱萸药材粉碎后水洗醇沉；醇沉液浓缩，调节pH值至1～3上非极性～弱极性的大孔树脂，水洗至无色，再用10％～30％的乙醇溶液洗脱3～5倍柱体积，收集洗脱液，浓缩；浓缩液上非极性～弱极性的大孔树脂，水洗，再用10％～30％的乙醇溶液洗脱3～5倍柱体积，收集洗脱液，低温减压干燥，结晶即得。
文档编号C07H1/08GK102329353SQ201110280760
公开日2012年1月25日 申请日期2007年9月13日 优先权日2007年9月13日
发明者刘广, 耿桂华 申请人:山东绿叶天然药物研究开发有限公司