具有抗病毒活性的化合物及其制备方法与应用的制作方法
【专利摘要】本发明属于医药【技术领域】，涉及一种中药抗病毒化合物，该化合物的制备方法为用适量水溶解双黄连样品或者采用木犀科植物连翘Forsythia suspensa（Thunb）的果实，通过水煎煮提取，水溶液通过大孔吸附树脂色谱柱，分别以水、10%、30%、95%乙醇-水梯度洗脱，收集95％乙醇洗脱部分浓缩干燥后制得。采用硅胶开放柱进行吸附，采用氯仿-甲醇-水溶剂系统梯度洗脱，经ODS制备液相纯化获得。本发明公开所述的化合物在抗病毒方面的应用。
【专利说明】具有抗病毒活性的化合物及其制备方法与应用
【技术领域】
[0001] 本发明涉及医药【技术领域】，特别涉及一类从中药中获得的具有抗病毒活性的化合 物及其作用。
【背景技术】
[0002] 病毒是最小的生物病原体，是引发人类多种感染性疾病的主要元凶，其危害性极 大、影响面甚广。在目前的主要流行性传染病中，病毒感染引起的疾病占据了一半以上。全 世界已发现的病毒超过3600多种，由病毒引发的疾病有：流感、麻疹、腮腺炎、小儿麻痹症、 传染性肝炎、乙型肝炎、艾滋病、疱疹病毒等。而且新的病毒还在不断被发现，这已是人类卫 生健康事业所面临的最大困惑之一。
[0003] 目前，市场上有很多抗病毒药物，其中中药双黄连具有清热解毒、表里双解、气血 两清、燥湿泻火、消痈肿、散热结之功效，双黄连制剂是从金银花、黄芩、连翘三种中药中提 取制备而成，金银花清热解毒、疏风散热，连翘清热解毒、疏散风热，两药均有透营传气之 功，黄芩清热燥湿、泻火解毒，善清上焦之热。临床主要用于呼吸系统、消化系统、循环系统、 外科、妇科等感染性疾病的治疗，其治疗效果确切、安全、有效。近年来在临床中的应用越来 越广泛。
[0004] 近年来对金银花、黄芩及连翘化学成分研究表明，金银花的化学成分主要为 挥发油类、黄酮类、有机酸类、三萜皂苷类物质等。挥发油是金银花的有效成分。通过 气质联用分离出芳樟醇（linalool)、双花醇、棕榈酸（palmitic acid)、二氢香華醇 (dihydrocarveol)、二十四碳酸甲酯（tetracosanoic acid methylester)、十八碳二烯酸 乙酯（9, 12-octadecadienoate)、掠榈酸乙酯（palmitic acid ethylester)、1,1'-联二环 己烧（1,1' -bicyclohexyl)等成分。绿原酸类化合物是金银花的主要有效成分，包括绿 原酸（chlorogcnic acid)异绿原酸（isocholrogenic acid)和咖啡酸（caffeic acid), 其他有机酸还有肉豆蘧酸（myristic acid)及棕榈酸（palmitic acid)。前三者是金银花 的主要活性成分。另外金银花中目前鉴定出的黄酮类化合物包括木犀草素（luteolin)、 忍冬苷（lonicerin)、木犀草素 7-〇- a -D 葡萄糖苷（luteolin_7-〇- a -D-glucoside)、木 犀草素-7_〇-β -D 半乳糖苷（luteolin-7-Ο-β -D-galatoside)、槲皮素-3-〇-β -D-葡萄 糖苷（qucrcotin-3-Ο-β -D-glucoside)、金丝桃苷（hypcroside)、corymbosin 和 5_ 轻基 3'，4'，7_ 三甲基黄酮（5_hydroxyl-3'，4'，7-trimethoxyflavone)。
[0005] 黄苳（Scutellaria baicalensis Georgi)含有多种活性化学成分，主要为黄酮类 化合物，另外，黄芩还含有木脂素类、酚、醇和有机酸及其苷类等化学成分。
[0006] 连翘属植物主要含有萜类、苯乙醇及其苷类、木脂素类、黄酮类、C6_C2天然醇类 和一些醇、酯、醚、醛、酮等类化合物。挥发油主要存在于连翘种子中，从连翘种子挥发油 中得到，α-菔烯、坎烯、β-菔烯、对聚伞花烯等单萜类化合物，而三萜成分白桦脂酸、 齐墩果酸、熊果酸普遍存在于连翘属植物中。1991年，胡旺云等还首次从连翘的二氯甲 烧可溶部位分离得到乙醜化三廠 Iso-Bauerenlacetate和20(s)-Dammar-24-ene-3_i3 -20-diol-3-aeetateS(胡旺云，罗士德.连翘中三个乙酰化三萜的分离和鉴定[J].中 草药，1991，22(4) : 147-152.)。除上面提到的五个单萜化合物外，还有醇、酯、醛、酮类 化合物，如龙脑、樟脑、黄樟醚及香叶醛等。木脂素及其苷类是连翘属植物中较早被认 识的一类活性成分，其中，连翘苷是连翘药材的主要成分之一，也是国家药典所规定的 连翘质盆控制指标性成分。除上述成分外，匡海学等已从连翘中分离得到了正三十一 烷、β_谷甾醇等化合物（匡海学，张宁，陆志博.青翘的化学成分研究[J].中医药信 息，1985, 6(3) :25.)，俞崇灵从连翘中分离得到连翘酚(愈崇灵.连翘抗菌成分的研究[J]. 药学学报，I960, 8(6) :241-243.)，陈玉俊等从连翘乙醇提取物中首次分离得到硬脂酸（陈 玉俊，项进，许美娟等.连翘化学成分的研究[J].中国中药志，1999, 24(5):296.),周成 萍等首次分离得到β -谷留酸、琥珀酸，王伟芳等从连翘果实中分离到连翘醇酯。
[0007] 基于以上研究，本发明人对双黄连继续深入研究，经过大量试验，最终提取分离得 到了新的化合物，而且通过药理实验研究该类化合物具有抗病毒活性，该化合物提取方法 适合工业化大生产。再根据双黄连指纹图谱研究以及化合物的基源关系，认为这些新的化 合物来源于连翘药材。
【发明内容】
[0008] 本发明目的是提供一类从中药中分离获得的新的化合物，该类化合物或含有该类 化合物的组合物具有抗病毒活性。
[0009] 本发明的另一目的是提供一种含有上述具有抗病毒化合物的组合物。
[0010] 本发明的又一目的是提供一种从双黄连或中药连翘制备该组合物及上述新化合 物的提取方法。
[0011] 本发明再一目的是提供该类化合物在制备抗病毒药物中的应用。
[0012] 本发明的化合物结构如下：
[0013]
【权利要求】
1. 一种抗病毒化合物，其特征在于，该化合物为：
2. -种具有抗病毒药物的组合物，其特征在于，包含治疗有效量的权利要求1所述的 化合物是从中药双黄连中提取获得的。
3. -种具有抗病毒药物的组合物，其特征在于，包含治疗有效量的权利要求1所述的 化合物是从连翘药材中提取获得的。
4. 如权利要求3所述的连翅为木犀科植物连翅Forsythia suspensa(Thunb)的果实。
5. 如权利要求2所述，该类抗病毒组合物通过如下方法制得：用适量水溶解双黄连样 品，水溶液通过大孔吸附树脂色谱柱，分别以水、10%、30%、95%乙醇-水梯度洗脱，收集95 % 乙醇洗脱部分浓缩干燥后制得。
6. 如权利要求3所述，该类抗病毒组合物通过如下方法制得：将连翘药材通过水煎煮 提取，提取液过滤，减压浓缩成适当体积的水溶液，该水溶液通过大孔吸附树脂色谱柱，分 别以水、10%、30%、95%乙醇-水梯度洗脱，收集95%乙醇洗脱部分浓缩干燥后制得。
7. 如权利要求1所述的化合物，再根据上述任一权利要求5-6,进一步提供了制备 具有抗病毒活性化合物的方法，所述的具体的步骤为：将95%乙醇-水梯度洗脱部分用 硅胶开放柱色谱分离，采用氯仿-甲醇-水溶剂系统梯度洗脱，洗脱液以1/3柱体积为 一份收集，根据硅胶薄层色谱斑点不同将洗脱液进行合并，最后共得到10个流分。其中 氯仿-甲醇-水按照体积比100:0:0(简写为CHCl 3-Me0H-H20100:0:0)洗脱得到流分1， CHCl3-Me0H-H209:1:0. 1 洗脱得到流分 2-5，CHCl3-Me0H-H208:2:0. 2 洗脱得到流分 6-8， CHCl3-Me0H-H207:3:0. 5洗脱得到流分9, MeOH洗脱得到流分10。
8. 如权利要求1所述的化合物1-2,在根据权利要求7进一步提供了制备该化合物的 具体方法：用CHCl3-Me0H-H 209:1:0. 1洗脱的流分5经ODS柱色谱分离，采用甲醇-水系统 洗脱，甲醇梯度为30%、50%、70%，每个浓度梯度洗脱4个保留体积，每1/3保留体积为一份收 集，根据硅胶薄层色谱斑点情况进行合并，共得到5A-5J共10个流分。其中30%甲醇-水 洗脱的流分5B经HW-40柱色谱分离，以20%，40%甲醇-水洗脱得到B1-B5共5个流分，其 中20%甲醇-水洗脱的流分B2经ODS制备液相（洗脱液为30%甲醇-水）分离，收集保留 时间为35. Omin和42. 5min的色谱峰，即为化合物1和化合物2。
9. 如权利要求1所述的化合物3-4,在根据权利要求7进一步提供了制备该化合物的 具体方法：用CHCl3-Me0H-H 208:2:0. 2洗脱的流分8经ODS柱色谱分离，采用甲醇-水系统 洗脱，甲醇梯度为30%、50%、70%，每个浓度梯度洗脱4个保留体积，每1/3保留体积为一份收 集，根据硅胶薄层色谱斑点情况进行合并，共得到8A-8J共10个流分。其中30%甲醇-水 洗脱的流分8D经HW-40柱色谱分离，以20%、40%甲醇-水洗脱得到D1-D5共5个流分，其 中20%甲醇-水洗脱的流分D2经ODS制备液相（洗脱液为30%甲醇-水）分离，收集保留 时间为55. Omin的色谱峰，即为化合物4。 用CHCl3-Me0H-H207:3:0. 5洗脱的流分9经ODS柱色谱分离，采用甲醇-水系统洗脱， 甲醇梯度为30%、50%、70%，每个浓度梯度洗脱4个保留体积，每1/3保留体积为一份收集，根 据硅胶薄层色谱斑点情况进行合并，共得到9A-9J共10个流分。其中50%甲醇-水洗脱的 流分9D经HW-40柱色谱分离，以20%，40%甲醇-水洗脱得到D1-D6共6个流分，其中20% 甲醇-水洗脱的流分D2经ODS制备液相（洗脱液为40%甲醇-水）分离，收集保留时间为 62. Omin的色谱峰，即为化合物3。
10. 如权利要求1所述的化合物在制备抗病毒药物中的应用。
【文档编号】C07H15/26GK104231018SQ201310221149
【公开日】2014年12月24日 申请日期:2013年6月6日 优先权日:2013年6月6日
【发明者】张树祥, 姚新生, 戴毅, 李畅, 王立成, 王颖 申请人:黑龙江省松花江药业有限公司