具有nos抑制作用的杂环化合物的制作方法

专利名称：：具有nos抑制作用的杂环化合物的制作方法
技术领域：
：本发明涉及杂环化合物，更确切地涉及由通式(1)代表的具有一氧化氮合成酶(NOS)抑制作用的化合物，它抑制一氧化氮(NO)的产生，从而证实有效对抗被认为涉及过量NO或NO代谢物的病症和疾病，即脑血管疾病(脑出血、蛛网膜下出血、脑梗塞(动脉粥样化血栓性梗塞、腔隙性梗塞和心原性栓塞)、短暂性局部缺血发作和脑水肿)、外伤性脑损伤、脊髓损伤、疼痛(头痛(偏头痛、紧张性头痛、丛集性头痛和慢性阵发性头痛))、帕金森氏病、阿尔茨海默氏病、癫痫发作和吗啡耐受或依赖。本发明也涉及所述化合物的可能的互变异构体、立体异构体和旋光活性体，以及其药学上可接受的盐。本发明进一步涉及含有所述化合物或药学上可接受的盐作为活性成分的预防剂和治疗剂。
背景技术：
：日本脑血管疾病的死亡数在1970年达到最高，此后开始下降，这主要是由于急性期疗法的改进。尽管如此，脑血管疾病在成人疾病中仍然是仅次于癌症的第二个致死原因。关于脑血管疾病的发病率，大量统计调查显示它一般是恒定不变的，而且，日本老人发病数的增加速度大大快于世界上其他任何国家，鉴于这样一个事实，估计未来脑血管疾病患者数量将会增加，而不是减少。不断降低的死亡率和不断增加的老龄人口共同使脑血管疾病慢性期的情况多起来，这已经成为一个全国性的问题，不仅是个别的患者和普遍的社会，而且从医学经济学观点来看都是如此，这是因为慢性脑血管疾病患者不可避免地需要长期照顾。脑血管疾病最常见的情况是脑梗塞，也就是脑血管闭塞，血液从阻滞部位一直到外周部位都是缺乏的，导致局部缺血状态。脑梗塞在慢性期的症状几乎都是由神经元损失而引起的，而且为了从这些症状完全恢复，非常难以研制出药物或制定治疗方法。因此，不夸张地说，脑梗塞的治疗效果的改善取决于急性期患者如何能够进行具体目的在于保护神经元的治疗，他们的症状在多大程度上能够在急性期内得到改善。不过，目前在临床上使用的大多数药物都是抗血小板药、抗凝剂和血栓溶解剂，没有一个具有直接的神经保护作用(见峰松一夫等，《医药》，医学书院出版，32，1995；水泽英洋等，《内科》，南江堂出版，79，1997)。因此，需要研制出这样一种药物，它提供对脑血管疾病、特别是脑梗塞的有效治疗作用，其作用机理是完全新颖的，与常规的药物不同。目前，基于基因DNA分析而得出的主要理论认为，NOS至少以三种异构形式存在，即，参与构成神经元的钙依赖性nNOS(1型)、参与构成血管内皮细胞的钙依赖性eNOS(3型)和钙依赖性iNOS(2型)，2型是由巨噬细胞及其他多种细胞中的细胞因子和／或脂多糖(LPS)的刺激作用所诱发合成的(Nathan等，《FASEBJ．》16，3051-3064，1992；Nagafuji等，《分子化学与神经病理学》26，107-157，1995)。人们已经提出了最有可能解释伴有脑缺血的脑组织损害的机理，它是一种包含下列顺序的途径细胞外谷氨酸水平的升高、突触后上的谷氨酸受体的过度活化、细胞内钙水平的升高和钙依赖性酶的活化(Siesjo，《J．Cereb．BloodFlowMetab．》1，155-185，1981；Siesjo，《神经外科杂志》60，883-908，1984；Choi，《神经科学趋势》11，465-469，1988；Siesjo和Bengstsson，《J．Cereb．BloodFlowMetab．》9，127-140，1989)。已如上述，nNOS是钙依赖性的，因此这种类型NOS异构形式过度活化的抑制作用有助于NOS抑制剂的神经保护作用(Dawson等，《神经病学年鉴》32，297-311，1992)。事实上，nNOS的mRNA水平和含有nNOS神经元的数量在大鼠病灶性脑缺血后早期开始升高，它们的暂时改变与梗塞的发展一致(Zhang等，《脑研究》654，85-95，1994)。在利用NOS抑制剂NG-硝基-L-精氨酸(L-NA)建立的小鼠病灶性脑缺血模型中，nNOS活性的抑制百分率和梗塞体积的减少百分率至少在产生明显的梗塞体积减少作用的剂量范围内是彼此相关的(Carreau等，《欧洲药理学杂志》256，241-249，1994)。另外据报道，在nNOS麻醉的小鼠中，病灶性脑缺血后所观察到的梗塞体积显著小于对照(Huang等，《科学》265，1883-1885，1994)。至于NO，它是内皮衍生松弛因子(EDRF)要素的至少一种，因此据信参与血管张力和血流的调节(Moncada等，《药理学评论》43，109-142，1991)。事实上，据报道，当将大剂量L-NA对大鼠给药后，发现随着血压升高，脑血流以剂量依赖的方式降低(松居彻等，《实验医学》11，55-60，1993)。大脑具有这样一种机理，尽管血压在特定范围内变化，脑血流仍可维持在恒定水平(通常称之为“自动调节机理”)(《NOSOTCHUJIKKENHANDBOOK》，遵照KeijiSANO，IPC出版，247-249，1990)。松居等人的报道提示了这种“自动调节机理”在操作上的失败。因此，如果eNOS在脑缺血的发作中被抑制尤其超过一定限度，那么脑血管将收缩，脑血流将降低，从而恶化微循环的动力学，可能导致局部缺血损害的扩大。另据报道，在eNOS麻醉的小鼠中，病灶性脑缺血后所观察到的梗塞大于对照，但是通过L-NA给药可显著减小(Huang等，《J．Cereb．BloodFlowMetab．》16，981-987，1996)。这些报道显示，eNOS衍生的NO也许通过血管舒张作用、血小板聚集抑制作用等对脑组织起到保护作用。本发明人曾发现，已知为NOS抑制剂的L-NA对实验性脑缺血所导致的脑水肿和脑梗塞具有改善效果(Nagafuji等，《神经科学快报》147，159-162，1992；日本专利公开192080／1994)，以及对神经元细胞坏死具有改善效果(Nagafuji等，《Eur．J．Pharmacol．Env．Tox．》248，325-328，1993)。另一方面，相对较大剂量的NOS抑制剂据报道对缺血性脑损害完全无效，有时还会加重损害(Idadecola等，《J．Cereb．BloodFlowMetab．》14，175-192，1994；长藤寿昭和松居彻，《实验医学》13，127-135，1995；Nagafuji等，《分子化学与神经病理学》26，107-157，1995)。不过，事实上应当强调的是，所有报道了NO或与NO有关的代谢物在永久性或暂时性脑缺血模型的脑和血液中的改变的文献都在结果上达成一致，即这些物质的浓度增加了(长藤寿昭和松居彻，《实验医学》13，127-135，1995；Nagafuji等，《分子化学与神经病理学》26，107-157，1995)。关于NOS抑制剂对脑缺血模型的功效，已经作出了有冲突的报道，能够解释这样一个事实的原因之一在于所用NOS抑制剂对nNOS的选择性较低。事实上，包括L-NA和NG-硝基-L-精氨酸甲基酯(L-NAME)在内的现有NOS抑制剂对特定NOS异构形式都不具有高度选择性的抑制作用(Nagafuji等，《神经报道》6，1541-1545，1995；Nagafuji等，《分子化学与神经病理学》26，107-157，1995)。因此，足可以得出这样的结论，所需的缺血性脑血管疾病治疗剂应当对nNOS具有选择性抑制作用(Nowicki等，《欧洲药理学杂志》204，339-340，1991；Dawson等，《美国国家科学院院报》88，6368-6371，1991；Iadecola等，《J．Cereb．BloodFlowMetab．》15，52-59，1995；Iadecola等，《J．Cereb．BloodFlowMetab．》15，378-384，1995；ToshiakiNAGAFUJI和ToruMATSUI，《实验医学》13，127-135，1995；Nagafuji等，《分子化学与神经病理学》26，107-157，1995；Iadecola等，《美国生理学杂志》R286-R292，1995)。有人还提示，nNOS抑制剂是潜在的下列疾病治疗剂外伤性脑损伤(Oury等，《生物化学杂志》268，15394-15398，1993；MacKenzie等，《神经报道》6，1789-1794，1995；Mesenge等，《神经外伤杂志》13，11-16，1996；Wallis等，《脑研究》710，169-177，1996)、头痛和其他疼痛(Moore等，《英国药理学杂志》102，198-202，1991；0lesen．，《药理学趋势》15，149-153，1994)、帕金森氏病(Youdim等，《神经病学进展》60，259-266，1993；Schulz等，《神经化学杂志》64，936-939，1995；Hantraye等，《天然药物》2，1017-1021，1996)、阿尔茨海默氏病(Hu和EI-FaKahany，《神经报道》4，760-762，1993；Meda等，《自然》374，647-650，1995)、癫痫发作(Rigaud-Monnet等，《J．Cereb．BloodFlowMetab．》14，581-590，1994)和吗啡耐受与依赖(Kolesnikov等，《欧洲药理学杂志》221，399-400，1992；Cappendijk等，《神经科学快报》162，97-100，1993)。迄今报道对nNOS具有一定程度选择性的NOS抑制剂是NG-环丙基-L-精氨酸(L-CPA)(Lamberte等，《欧洲药理学杂志》216，131-134，1992)、L-NA(Furfine等，《生物化学》32，8512-8517，1993)、S-甲基-L-硫代瓜氨酸(L-MIN)(Narayanan和Griffith，《医药化学杂志》37，885-887，1994；Furfine等，《生物化学杂志》37，885-887，1994；Furfine等，《生物化学杂志》269，26677-26683，1994；WO95／09619；Narayanan等，《生物化学杂志》270，11103-11110，1995；Nagafuji等，《神经报道》6，1541-1545，1995)、S-乙基-L-硫代瓜氨酸(L-EIN)(Furfine等，《生物化学杂志》269，26677-26683，1994；WO95／09619；Narayanan等，《生物化学杂志》270，11103-11110，1995)和ARL17477(Gentile等，WO95／05363；Zhang等，《J．Cereb．BloodFlowMetab．》16，599-604，1996)。WO96／18608列举了显示nNOS抑制活性的化合物。发明的公开本发明的一个目的是提供新颖的化合物，它对参与构成脑、特别是神经元的钙依赖性nNOS具有选择性抑制作用，可用作下列疾病的治疗剂脑血管疾病(脑出血、蛛网膜下出血、脑梗塞(动脉粥样化血栓性梗塞、腔隙性梗塞和心原性栓塞)、短暂性局部缺血发作和脑水肿)、外伤性脑损伤、脊髓损伤、疼痛(头痛(偏头痛、紧张性头痛、丛集性头痛和慢性阵发性头痛))、帕金森氏病、阿尔茨海默氏病、癫痫发作和吗啡耐受或依赖。为了达到所述目的，本发明人进行了深入研究，结果发现，由通式(1)代表的杂环化合物，或所述化合物的可能的互变异构体、立体异构体和旋光活性体，以及其药学上可接受的盐，具有大于任何现有NOS抑制剂的nNOS抑制作用或选择性，从而表现出显著的脑血管疾病治疗剂的功效(尤其是缺血性脑血管疾病治疗剂)(其中R1是可选被取代的氨基烷基，其烷基部分具有1-6个碳原子；R2是氢原子、低级烷基或卤原子；R3是可选被取代的低级烷基、SR4、OR4或NR5R6，其条件是R4是可以被卤原子取代的低级烷基，R5和R6可以相同或不同，代表氢原子、低级烷基或硝基，或者可以共同构成3至6元环；Ar是可选被取代的5或6元芳族杂环基)。本发明是在这项发现的基础上完成的。烷基部分具有1-6个碳原子的氨基烷基指的是烷基部分是具有1-6个碳原子的直链烷基的氨基烷基，或烷基部分是具有3-6个碳原子的环烷基的氨基烷基，实例包括氨基甲基、2-氨基乙基、3-氨基丙基、4-氨基丁基、5-氨基戊基、6-氨基己基、1-氨基环丙基、2-氨基环丙基、1-氨基环丁基、2-氨基环丁基、3-氨基环丁基、1-氨基环戊基、2-氨基环戊基、3-氨基环戊基、1-氨基环己基、2-氨基环己基、3-氨基环己基、4-氨基环己基等。低级烷基指的是具有1-6个碳原子的直链烷基、或具有3-8个碳原子的支链烷基或环烷基，实例包括甲基、乙基、正丙基、正丁基、正戊基、正己基、异丙基、异丁基、仲丁基、叔丁基、异戊基、新戊基、叔戊基、异己基、环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基、环辛基等。卤原子是氟原子、氯原子、溴原子或碘原子。5或6元芳族杂环基含有至少一个氮原子，可选地还可以含有一个氧原子或一个硫原子，实例包括吡咯-1-基、吡咯-2-基、吡咯-3-基、吡唑-1-基、吡唑-3-基、吡唑-4-基、咪唑-1-基、咪唑-2-基、咪唑-4-基、1，2，3-三唑-1-基、1，2，4-三唑-1-基、1，2，4-三唑-3-基、1H-四唑-1-基、异噁唑-3-基、异噁唑-4-基、异噁唑-5-基、异噻唑-3-基、异噻唑-4-基、异噻唑-5-基、噁唑-2-基、噁唑-4-基、噁唑-5-基、噻唑-2-基、噻唑-4-基、噻唑-5-基、吡啶-2-基、吡啶-3-基、吡啶-4-基、哒嗪-3-基、哒嗪-4-基、嘧啶-2-基、嘧啶-4-基、嘧啶-5-基、吡嗪-2-基、1，2，4-三嗪-3-基、1，2，4-三嗪-5-基、1，2，4-三嗪-6-基、1，3，5-三嗪-2-基等。R1和Ar中的取代基可以例如低级烷基、苯基、苄基和苯乙基。R3中的取代基可以例如卤原子、低级烷氧基和低级烷硫基。低级烷氧基指的是具有1-6个碳原子的直链烷氧基、或具有3-8个碳原子的支链烷氧基或环烷氧基，实例包括甲氧基、乙氧基、正丙氧基、正丁氧基、正戊氧基、正己氧基、异丙氧基、异丁氧基、仲丁氧基、叔丁氧基、异戊氧基、新戊氧基、叔戊氧基、异己氧基、环丙氧基、环丁氧基、环戊氧基、环己氧基、环庚氧基、环辛氧基等。低级烷硫基指的是具有1-6个碳原子的直链烷硫基、或具有3-8个碳原子的支链烷硫基或环烷硫基，实例包括甲硫基、乙硫基、正丙硫基、正丁硫基、正戊硫基、正己硫基、异丙硫基、异丁硫基、仲丁硫基、叔丁硫基、异戊硫基、新戊硫基、叔戊硫基、异己硫基、环丙硫基、环丁硫基、环戊硫基、环己硫基、环庚硫基、环辛硫基等。R3代表的可选被取代的低级烷基优选为具有1-4个碳原子的低级烷基，碳原子可以被卤原子、低级烷氧基或低级烷硫基取代，实例包括甲基、氟甲基、甲氧基甲基、乙氧基甲基、甲硫基甲基、乙硫基甲基、乙基、2-氟乙基、2，2，2-三氟乙基、2-氯乙基、2-甲氧基乙基、2-甲氨基乙基、正丙基、异丙基、1-甲硫基丙基、正丁基、异丁基等。R3代表的SR4的优选实例为具有1-3个碳原子的低级烷硫基，碳原子可以被卤原子取代，例如甲硫基、乙硫基、2-氟乙硫基、2，2，2-三氟乙硫基、2-氯乙硫基、正丙硫基、异丙硫基等；乙硫基是特别优选的。R3代表的OR4的优选实例为具有1-3个碳原子的低级烷氧基，碳原子可以被卤原子取代，例如甲氧基、乙氧基、2-氟乙氧基、2，2，2-三氟乙氧基、2-氯乙氧基、正丙氧基、异丙氧基等。R5和R6代表的低级烷基优选为具有1-3个碳原子的低级烷基。R5和R6可以共同构成的3至6元环优选为含有至少一个氮原子的5或6元杂环基。R3代表的NR5R6的优选实例为可以被1-3个碳原子的低级烷基或硝基取代的伯氨基或仲氨基、或含有至少一个氮原子的5或6元杂环基，例如氨基、甲氨基、乙氨基、正丙氨基、异丙氨基、二甲氨基、乙基甲氨基、硝基氨基、吡咯烷-1-基、哌啶子基、吗啉代、吡咯-1-基、吡咯-2-基、吡咯-3-基、吡唑-1-基、吡唑-3-基、吡唑-4-基、咪唑-1-基、咪唑-2-基、咪唑-4-基、1，2，3-三唑-1-基、1，2，4-三唑-1-基、1，2，4-三唑-3-基、1H-四唑-1-基、吡啶-2-基、吡啶-3-基、吡啶-4-基、哒嗪-3-基、哒嗪-4-基、嘧啶-2-基、嘧啶-4-基、嘧啶-5-基、吡嗪-2-基、1，2，4-三嗪-3-基、1，2，4-三嗪-5-基、1，2，4-三嗪-6-基、1，3，5-三嗪-2-基等。R1的优选实例为氨基烷基，其氨基部分是具有1-3个碳原子的直链烷基，氨基甲基是特别优选的。R2的优选实例为氢原子或低级烷基，氢原子或甲基是特别优选的。R3的优选实例为SR4，低级烷硫基是更优选的，乙硫基是特别优选的。Ar的优选实例为5元芳族杂环基；更优选的实例为含有一个氮原子的芳族杂环基，吡咯-1-基和吡唑-1-基是特别优选的。除了R2和Ar以外，苯环优选是间位取代的。由通式(1)代表的化合物的优选实例包括N-(3-氨基甲基-4-(吡唑-1-基)苯基)-S-乙基异硫脲、N-(3-氨基甲基-4-(吡咯-1-基)苯基)-S-乙基异硫脲和N-(3-氨基甲基-2-甲基-4-(吡唑-1-基)苯基)-S-乙基异硫脲。实施发明的最佳方式由通式(1)代表的本发明化合物可以根据R3的具体类型采取不同的方法合成，示范如下。上式(2)-(16)中，R1是可选被取代的氨基烷基，其烷基部分具有1-6个碳原子，R2是氢原子、低级烷基或卤原子，R4是可以被卤原子取代的低级烷基，R7是可选被取代的低级烷基，R8是叔丁氧羰基或苄氧羰基，R9和R10可以相同或不同，代表氢原子或低级烷基，或者可以共同构成3至6元环，Ar是可选被取代的5或6元芳族杂环基，L是离去基团，例如氯原子、溴原子、碘原子、三氟甲磺酰氧基、对甲苯磺酰氧基或甲磺酰氧基。在由式(1)代表的化合物中，由式(5)代表的、其中R3是R7的化合物可以按照下列方法合成从由式(2)代表的化合物开始，得到由式(4)代表的化合物中间体。具体来说，使由式(2)代表的化合物与由式(3)代表的化合物反应，反应在有或没有4-二甲氨基吡啶的存在下进行，反应溶剂是一种惰性溶剂，例如一种醇(例如甲醇、乙醇或异丙醇)或氯仿、二氯甲烷、1，2-二氯乙烷、甲苯或二甲基甲酰胺，优选为二氯甲烷，反应温度在0℃与反应混合物沸点之间，优选为室温，从而得到由式(4)代表的化合物。由式(4)代表的所得化合物具有由R8代表的脒基保护基团，在通常条件下除去该保护基团，得到由式(5)代表的化合物。除去脒基保护基团的反应因保护基团的类型而异。如果它是叔丁氧羰基，反应进行的条件优选为在一种惰性溶剂中，例如甲醇、乙醇或1，4-二噁烷，或者在无溶剂的条件下，反应温度在0℃与室温之间，并使用一种去保护剂，例如三氟乙酸、盐酸、硫酸或甲磺酸。特别优选的是在室温、无水条件下使用三氟乙酸。如果脒基保护基团是苄氧羰基，通过催化还原反应除去之，反应使用钯-碳或阮内镍或氧化铂作为催化剂，反应溶剂是一种惰性溶剂，例如乙醇、甲醇、乙酸乙酯、乙酸或1，4-二噁烷，优选为乙醇或甲醇，反应在氢气氛下进行，反应温度在室温与反应混合物沸点之间，优选为室温。在由式(1)代表的化合物中，由式(8)代表的、其中R3是SR4的化合物可以按照下列方法合成从由式(2)代表的化合物开始，得到由式(6)代表的化合物中间体。具体来说，使由式(2)代表的化合物与苯甲酰异硫氰酸酯反应，反应溶剂是一种惰性溶剂，例如四氢呋喃、氯仿、二氯甲烷或二甲基甲酰胺，反应温度在-20℃与反应混合物沸点之间，优选为丙酮、室温。如果必要的话，在反应结束后将反应混合物浓缩，进一步进行反应，反应溶剂是一种惰性溶剂，例如甲醇，反应在一种无机碱的存在下进行，例如碳酸钾或氢氧化钠，反应温度在0℃与反应混合物沸点之间，优选为甲醇、在碳酸钾的存在下和室温，从而得到由式(6)代表的化合物。由式(6)代表的化合物也可以如下得到按照T．Makino等人的方法(WO96／18608)，对式(2)化合物进行反应。具体来说，首先使由式(2)代表的化合物与硫光气反应，反应在一种无机碱的存在下进行，例如碳酸钙或碳酸钾，或者在一种有机碱的存在下进行，例如三乙胺或4-二甲氨基吡啶，反应溶剂是一种惰性溶剂，例如氯仿、二氯甲烷、水或二甲基甲酰胺，反应温度在0℃与反应混合物沸点之间，优选为在4-二甲氨基吡啶的存在下、二氯甲烷和室温，随后用浓氨水或饱和氨甲醇溶液处理，得到式(6)化合物。式(6)化合物也可以如下得到首先使式(2)化合物与苯甲酰氯或硫氰酸铵反应，反应溶剂是一种惰性溶剂，例如丙酮，反应温度在室温与反应混合物沸点之间，优选为室温，然后将反应混合物与10％氢氧化钠溶液一起加热回流。下一步，使式(6)化合物与由式(7)代表的化合物反应，反应溶剂是一种惰性溶剂，例如乙腈、丙酮、1，4-二噁烷、甲醇或乙醇，反应温度在室温与反应混合物沸点之间，优选为乙腈、反应混合物加热回流，从而得到由式(8)代表的化合物。在由式(1)代表的化合物中，由式(10)代表的、其中R3是OR4的化合物可以按照从下列由式(2)代表的化合物开始的方法合成。使式(2)化合物与氰基溴和由式(9)代表的适当类型的醇反应，反应温度在0℃与反应混合物沸点之间，优选为室温，得到由式(10)代表的化合物。在由式(1)代表的化合物中，由式(13)代表的、其中R3是NR9R10的化合物可以按照下列方法合成从由式(2)代表的化合物开始，得到由式(12)或(14)代表的化合物中间体。具体来说，按照M．A．Poss(《四面体快报》33，5933-5936，1992)的方法，使由式(2)代表的化合物与由式(11)代表的化合物反应，从而得到式(12)化合物，除去叔丁氧羰基保护基团，得到由式(13)代表的化合物。另一种选择是，按照C．A．Maryanoff等人的方法(《有机化学杂志》51，1882-1884，1986)，使由式(6)代表的化合物转化为由式(14)代表的化合物，然后与由式(15)代表的胺反应，得到由式(13)代表的化合物。在由式(1)代表的化合物中，由式(16)代表的、其中R3是NHNO2的化合物可以按照下列从式(2)化合物开始的方法合成。使由式(2)代表的化合物与N-甲基-N’-硝基-N-亚硝基胍反应，反应溶剂是一种惰性溶剂，例如乙腈、乙醇、甲醇或水，优选为乙腈，反应温度在室温与反应混合物沸点之间，优选为室温，可选地加入三乙胺或乙酸，从而得到式(16)化合物。在合成由上式(4)、(5)、(6)、(8)、(10)、(12)、(13)、(14)和(16)代表的化合物的方法中，如果存在需要保护基团的取代基，那么按照取代基的类型进行保护反应和去保护反应。原则上，两种反应都可以按照下述方法进行Greene和Wuts，《有机合成中的保护基团》第2版，JohnWiley&amp;SonsInc．。例如，如果需要保护基团的取代基是伯氨基或仲氨基，适合的保护基团包括叔丁氧羰基、苄氧羰基和三氟乙酰基。氨基保护反应，例如叔丁基羰基化反应，可以通过与重碳酸二叔丁酯的反应完成，反应溶剂是一种惰性溶剂，例如一种醇(例如甲醇、乙醇或异丙醇)或二氯甲烷、二甲基甲酰胺或1，4-二噁烷，反应在一种有机碱的存在下进行，例如三乙胺或4-二甲氨基吡啶，反应温度在0℃与室温之间。另一种氨基保护反应例如苄氧羰基化反应，可以通过与氯碳酸苄基酯的反应完成，反应溶剂是一种惰性溶剂，例如二氯甲烷，反应在一种有机碱的存在下进行，例如三乙胺或4-二甲氨基吡啶，反应温度在0℃与室温之间。还有另一种氨基保护反应，例如三氟乙酰化反应，可以通过与三氟乙酸酐的反应完成，反应溶剂是一种惰性溶剂，例如二氯甲烷，反应在一种有机碱的存在下进行，例如三乙胺或吡啶，反应温度在0℃与室温之间。至于氨基去保护反应，如果保护基团是叔丁氧羰基或苄氧羰基，那么该反应可以在与除去脒基保护基团的反应相同的条件下进行。在另一种保护基团的情况下，例如三氟乙酰基，去保护反应既可以通过与碳酸钾在室温、甲醇中的反应完成，也可以通过在60℃4NHCl中的反应完成。如果由通式(1)代表的本发明化合物在其结构中具有不对称的碳，那么可以通过本领域的已知工艺得到纯的立体异构体和旋光活性体，例如在旋光异构体分离柱上进行的色谱法和分步结晶法。由通式(1)代表的本发明化合物的药学上可接受的盐可以是任意类型的，只要它们是药学上可接受的盐即可，典型实例包括与无机酸所形成的盐，酸例如盐酸、硫酸、硝酸、氢溴酸和氢碘酸，与有机酸所形成的盐，酸例如甲酸、乙酸、富马酸和酒石酸，与碱金属所形成的盐，金属例如钠和钾，以及与碱土金属所形成的盐，金属例如钙和镁。利用适当的赋形剂、助剂、润滑剂、防腐剂、崩解剂、缓冲剂、黏合剂、稳定剂、湿润剂、乳化剂、着色剂、矫味剂、香料等，可以将本发明化合物或其盐配制成片剂、颗粒剂、微颗粒剂、药粉、胶囊剂、糖浆剂、酏剂、混悬液、乳剂、注射剂等，用于口服或胃肠外给药。当所治疗的脑血管疾病处于超急性期(刚刚发病)、急性期(发病至2或3天后)或亚急性期(发病后2或3天至2周)时，预期主要通过肌内或静脉内注射进行给药。另外，口服给药可以在慢性期(发病后三周以上)内进行，如果患者可以进食的话。本发明化合物或其盐的给药剂量可以因下列因素而异患者的体质、年龄、身体状况、疾病的严重性、疾病发作后经过的时间和其他因素；典型的每日剂量预期为0．1至100mg／人。一般应当引起注意的是，即使给以相同剂量，血浆浓度有时也可能因患者而异；因此，药物的最优剂量理想上应当在监测药物血浆浓度的基础上，因具体患者而定。如果本发明化合物或其盐配制成内服制剂，适合用作载体的有乳糖、蔗糖、山梨糖醇、甘露糖醇、诸如马铃薯淀粉或玉米淀粉等淀粉、淀粉衍生物和诸如纤维素衍生物或明胶等常用添加剂，同时可选地加入润滑剂，例如硬脂酸镁、碳蜡和聚乙二醇；所得混合物可以用通常的方法配制成颗粒剂、片剂、胶囊剂或其他适用于内服的剂型。如果本发明化合物或其盐配制成含水制剂，可以将有效量的主要成分溶于注射用水，酌情加入抗氧化剂、稳定剂、溶解助剂、缓冲剂、防腐剂等，形成完全的溶液后，用通常的方法过滤、灌装到安瓿中并密封，用适当的介质灭菌，例如高压蒸汽，或用干热法灭菌，制得注射剂。如果本发明化合物或其盐配制成冻干制剂，将主要成分溶于注射用水，将所得水溶液用通常的方法冷冻干燥；根据需要，可以用通常的方法在冷冻干燥前加入提供易于冻干性质的赋形剂，例如糖(例如乳糖、麦芽糖和蔗糖)、糖醇(例如甘露糖醇和肌醇)、甘氨酸等，以制备所需制剂。下面参考实施例详细描述本发明化合物的制备，不过应当这样理解，本发明决不限于这些实施例。为了说明本发明的实用性，进行试验以评价所选式(1)化合物在抑制不同类型NOS中的功效。实施例下表1列出了本发明实施例中制备的化合物。表1实施例1二盐酸N-(3-氨基甲基-4-(吡咯-1-基)苯基)-S-乙基异硫脲的合成实施例1a5-硝基-2-(吡咯-1-基)苯甲酸的合成将2-氨基-5-硝基苯甲酸(475mg)、2，5-二甲氧基四氢呋喃(345mg)和乙酸(10ml)的混合物加热回流3小时，然后在减压下浓缩。向所得残余物中加入盐水，混合物用乙酸乙酯萃取。有机层用无水硫酸钠干燥，然后在减压下浓缩。所得残余物用硅胶柱色谱法纯化(洗脱剂∶乙酸乙酯∶正己烷=1∶1)，得到标题化合物(产率73％)。1H-NMR(CDCl3)δ6．38(2H，t，J=2．0Hz)，6．88(2H，t，J=2．0Hz)，7．55(1H，d，J=8．9Hz)，8．43(1H，dd，J=2．6，8．9Hz)，8．76(1H，d，J=2．6Hz)实施例1b5-硝基-2-(吡咯-1-基)苯甲醇的合成在氮气氛下，向实施例1a所得化合物(392mg)的无水四氢呋喃(10ml)溶液中滴加硼烷-四氢呋喃配合物(1．0M，2．2ml)。反应混合物加热回流3小时后，加入水，混合物在减压下浓缩。向所得残余物中加入盐水，混合物用乙酸乙酯萃取。有机层用无水硫酸钠干燥，然后在减压下浓缩。所得残余物用硅胶柱色谱法纯化(洗脱剂∶乙酸乙酯∶二氯甲烷=1∶19)，得到标题化合物(产率70％)。1H-NMR(CDCl3)δ1．99(1H，t，J=5．6Hz)，4．72(2H，d，J=5．6Hz)，6．40(2H，t，J=2．0Hz)，6．91(2H，t，J=2．0Hz)，7．45(1H，d，J=8．6Hz)，8．23(1H，dd，J=2．6，8．6Hz)，8．53(1H，d，J=2．6Hz)实施例1h二盐酸N-(3-氨基甲基)-4-(吡咯-1-基)苯基)-S-乙基异硫脲的合成将实施例1g所得化合物(40mg)和4NHCl(10ml)的混合物在室温下搅拌1小时，然后在减压下浓缩，得到标题化合物(28mg；产率96％)。1H-NMR(D2O)δ1．44(3H，t，J=7．3Hz)，3．26(2H，q，J=7．3Hz)，4．18(2H，s)，6．44-6．54(2H，m)，6．98-7．08(2H，m)，7．54-7．65(3H，m)实施例2二盐酸N-(3-氨基甲基)-4-(吡唑-1-基)苯基)-S-乙基异硫脲的合成实施例2aN-(5-硝基-2-(吡唑-1-基)苯基甲基)亚氨基二羧酸二叔丁酯的合成在冰冷却下，向吡唑(1．0g)和二甲基亚砜(50ml)的混合物中加入氢化钠(0．54g)。反应混合物在冰冷却下搅拌1小时，然后加入N-(2-氟-5-硝基苯基甲基)亚氨基二羧酸二叔丁酯(5．0g)的二甲基亚砜(50ml)溶液。反应混合物在室温下搅拌15小时，然后加入水，用乙酸乙酯萃取。有机层用盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥，然后在减压下浓缩。所得残余物用硅胶柱色谱法纯化(洗脱剂∶乙酸乙酯∶正己烷=1∶4)，得到标题化合物(产率73％)。1H-NMR(CDCl3)δ8．22-8．19(2H，m)，7．79-7．78(2H，m)，7．50(1H，d，J=9．6Hz)，6．53(1H，dd，J=2．3，2．0Hz)，4．95(2H，s)，1.46(18H，s)实施例2dN-(3-((叔丁氧羰基)氨基甲基)-4-(吡唑-1-基)苯基)-S-乙基异硫脲的合成使用实施例2c所得化合物作为原料，与实施例1g相同的操作得到标题化合物(产率97％)。1H-NMR(CDCl3)δ7．71(1H，d，J=1．3Hz)，7．64(1H，d，J=2．3Hz)，7．23(1H，d，J=8．3Hz)，7．13-7．11(1H，m)，6．97-6．83(1H，m)，6．44(1H，dd，J=2．3，1．3Hz)，5．67-5．53(1H，m)，4．68-4．50(2H，m)，4．11(2H，d，J=6．3Hz)，3．15-2．93(2H，m)，1．41-1．35(12H，m)实施例2e二盐酸N-(3-氨基甲基)-4-(吡唑-1-基)苯基)-S-乙基异硫脲的合成使用实施例2d所得化合物作为原料，与实施例1h相同的操作得到标题化合物(产率88％)。1H-NMR(DMSO-d6)δ11．97(1H，brs)，9．55(2H，brs)，8．61(3H，brs)，8．30(1H，d，J=2．3Hz)，7．85(1H，d，J=1．3Hz)，7．82-7．76(1H，m)，7．67(1H，d，J=8．3Hz)，7．50(1H，dd，J=8．3，2．0Hz)，6．63(1H，dd，J=2．3，1．3Hz)，4．06(2H，q，J=4．6Hz)，4．38(2H，q，J=7．3Hz)，1．35(3H，t，J=7．3Hz)实施例3三盐酸N-(3-氨基甲基)-4-(1，2，4-三唑-1-基)苯基)-S-乙基异硫脲的合成用1，2，4-三唑代替吡唑，与实施例2相同的操作得到标题化合物。1H-NMR(D2O)δ8．93(1H，s)，8．77-8．63(2H，m)，8．33(1H，s)，7．80(1H，d，J=8．3Hz)，4．19(2H，s)，3．27(2H，q，J=7．3Hz)，1．44(3H，t，J=7．3Hz)实施例4二盐酸N-(3-氨基甲基)-4-(吡唑-1-基)苯基)-O-乙基异硫脲的合成实施例4aN-(5-氰基氨基-2-(吡唑-1-基)苯基甲基)氨基甲酸叔丁酯的合成将实施例2c所得化合物(315mg)、对甲苯磺酰氯(190mg)和吡啶(2ml)的混合物在室温下搅拌70分钟。向反应混合物中加入水，用二氯甲烷萃取。有机层用盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥，然后在减压下浓缩。所得残余物用硅胶柱色谱法纯化(洗脱剂∶乙酸乙酯∶正己烷=1∶1)，得到标题化合物(产率87％)。1H-NMR(CDCl3)δ8．06(1H，brs)，7．74(1H，d，J=1．3Hz)，7．68(1H，d，J=2．3Hz)，7．28(1H，d，J=8．5Hz)，7．09(1H，d，J-2．3Hz)，7．05(1H，dd，J=8．5，2．3Hz)，6．47(1H，dd，J=2．3，1．3Hz)，5．77(1H，t，J=6．3Hz)，4．12(2H，d，J=6．3Hz)，1．44(9H，s)IR(KBr)2233．16cm-1实施例4b二盐酸N-(3-氨基甲基)-4-(吡唑-1-基)苯基)-O-乙基异硫脲的合成将实施例4a所得化合物(243mg)和饱和HCl-乙醇(10ml)的混合物在室温下搅拌29小时。反应混合物在减压下浓缩，所得残余物从乙醇-乙酸乙酯中重结晶，得到标题化合物(产率61％)。1H-NMR(DMSO-d6)δ11．46(1H，brs)，9．60-9．08(2H，m)，8．54(3H，brs)，8．26(1H，d，J=2．0Hz)，7．83(1H，d，J=1．6Hz)，7．68(1H，d，J=2．0Hz)，7．62(1H，d，J=8．6Hz)，7．49(1H，dd，J=8．6，1．6Hz)，6．60(1H，dd，J=2．0，2．0Hz)，4．54(2H，q，J=6．9Hz)，3．99(2H，q，J=4．3Hz)，1．40(3H，t，J=6．9Hz)实施例5N-(3-氨基甲基)-4-(4-甲基吡唑-1-基)苯基)-O-乙基异硫脲的合成实施例5aN-(2-(4-甲基吡唑-1-基)-5-硝基苯基甲基)亚氨基二羧酸二叔丁酯的合成用4-甲基吡唑代替吡唑，与实施例2a相同的操作得到标题化合物(产率53％)。1H-NMR(CDCl3)δ8．18(1H，d，J=9．6Hz)，8．17(1H，d，J=2．3Hz)，7．59(1H，s)，7．53(1H，s)，7．47(1H，dd，J=9．6，2.3Hz)，4．98(2H，s)，2．18(3H，s)，1．46(18H，s)实施例5bN-(5-氨基-2-(4-甲基吡唑-1-基)苯基甲基)亚氨基二羧酸二叔丁酯的合成使用实施例5a所得化合物作为原料，与实施例2b相同的操作得到标题化合物(产率64％)。1H-NMR(CDCl3)δ7．47(1H，s)，7．31(1H，s)，7．06(1H，d，J=8．3Hz)，6．58-6．52(2H，m)，4．64(2H，s)，3．72(2H，brs)，2．14(3H，s)，1．42(18H，s)实施例5cN-(3-(二(叔丁氧羰基)氨基甲基)-4-(4-甲基吡唑-1-基)苯基)硫脲的合成使用实施例5b所得化合物作为原料，与实施例2c相同的操作定量得到标题化合物。1H-NMR(CDCl3)δ7．97(1H，brs)，7．54(1H，s)，7．43(1H，s)，7．35(1H，d，J=7．9Hz)，7．20-7．14(2H，m)，6．11(2H，brs)，4．81(2H，s)，2．16(3H，s)，1．45(18H，s)实施例5dN-(5-氰基氨基-2-(4-甲基吡唑-1-基)苯基甲基)氨基甲酸叔丁酯的合成使用实施例5c所得化合物作为原料，与实施例4a相同的操作得到标题化合物(产率75％)。1H-NMR(CDCl3)δ7．52(1H，s)，7．38(1H，s)，7．25(1H，d，J=8．6Hz)，6．98(1H，dd，J=8．6，2.3Hz)，6．89(1H，d，J=2．3Hz)，4．75(2H，s)，2．16(3H，s)，1．42(18H，s)IR(KBr)2235．09cm-1实施例5e二盐酸N-(3-氨基甲基-4-(4-甲基吡唑-1-基)苯基)-O-乙基异硫脲的合成使用实施例5d所得化合物作为原料，与实施例4b相同的操作得到标题化合物(产率54％)。1H-NMR(DMSO-d6)δ11．44(1H，brs)，9．52-9．05(2H，m)，8．50(3H，brs)，8．02(1H，s)，7．70-7．64(2H，m)，7．57(1H，d，J=7．9Hz)，7．52-7．43(1H，m)，4．54(2H，q，J=6．9Hz)，4．00(2H，q，J=5．3Hz)，2．14(3H，s)，1．41(3H，t，J=6．9Hz)实施例6二盐酸N-(3-氨基甲基-4-(4-甲基吡唑-1-基)苯基)-S-乙基异硫脲的合成实施例6aN-(3-((叔丁氧羰基)氨基甲基)-4-(4-甲基吡唑-1-基)苯基)-S-乙基异硫脲的合成使用实施例5a所得化合物作为原料，与实施例1g相同的操作得到标题化合物(产率53％)。1H-NMR(CDCl3)δ7．51(1H，s)，7．40(1H，s)，7．20(1H，d，J=7．9Hz)，7．13-7．08(1H，m)，6．92-6．78(1H，m)，5．61(1H，brs)，4．68-4．42(2H，m)，4．11(2H，d，J=6．3Hz)，3．10-2．92(2H，m)，2．15(3H，s)，1．48-1．36(12H，m)实施例6b二盐酸N-(3-氨基甲基-4-(4-甲基吡唑-1-基)苯基)-S-乙基异硫脲的合成使用实施例6a所得化合物作为原料，与实施例1h相同的操作得到标题化合物(产率35％)。1H-NMR(DMSO-d6)δ11．88(1H，s)，9．60(2H，s)，8．55(3H，brs)，8．07(1H，s)，7．78-7．72(1H，m)，7．67(1H，s)，7．62(1H，d，J=8．6Hz)，7．50-7．44(1H，m)，4．04(2H，q，J=4．6Hz)，3．50-3．23(2H，m)，2．15(3H，s)，1．35(3H，t，J=7．3Hz)二盐酸N-(3-氨基甲基-2-甲基-4-(吡唑-1-基)苯基)-S-乙基异硫脲的合成实施例7a4-溴-5-氟-2-硝基甲苯的合成将5-氟-2-硝基甲苯(1．00g)、硫酸银(2．21g)、溴(0．37ml)和浓硫酸(6ml)的混合物在冰冷却下搅拌1小时。将反应混合物滴加到冰水中，然后用氯仿萃取。有机层用饱和碳酸氢钠溶液洗涤，用无水硫酸镁干燥，然后在减压下浓缩，得到标题化合物和其位置异构体的混合物，二者比例为5∶3(产率83％)。1H-NMR(CDCl3)δ2．77(3H，s)，7．39(1H，d，J=11．0Hz)，8．82(1H，d，J=7．1Hz)实施例7bN-(3-溴-2-氟-6-甲基-5-硝基苯基甲基)-2，2，2-三氟乙酰胺的合成将实施例7a所得化合物(1．25g)、2，2，2-三氟乙酰胺甲醇(0．84g)和30％发烟硫酸(5ml)的混合物在室温下搅拌2小时。反应混合物加热至70℃，搅拌1小时，然后冷却至室温。将反应混合物滴加到冰水中，然后用氯仿萃取。有机层用饱和碳酸氢钠溶液洗涤，用无水硫酸镁干燥，然后在减压下浓缩。所得残余物从己烷-乙酸乙酯中重结晶，过滤除去副产物。母液在减压下浓缩，得到标题化合物(产率45％)。1H-NMR(CDCl3)δ2．56(3H，s)，4．72(2H，dd，J=2．3，5．9Hz)，6．50-6．75(1H，m)，8．08(1H，d，J=6．6Hz)实施例7cN-(3-溴-2-氟-6-甲基-5-硝基苯基甲基)氨基甲酸叔丁酯的合成将实施例7b所得化合物(0．77g)、浓HCl(4ml)和甲醇(10ml)的混合物加热回流2小时，然后在减压下浓缩。向所得残余物中加入1N氢氧化钠溶液，用氯仿萃取。有机层用无水硫酸镁干燥，然后在减压下浓缩。向所得残余物中加入重碳酸二叔丁酯(0．51g)和二氯甲烷(10ml)；混合物在室温下搅拌2小时，然后在减压下浓缩。所得残余物用硅胶柱色谱法纯化(洗脱剂∶乙酸乙酯∶正己烷=1∶4)，得到标题化合物(产率83％)。1H-NMR(CDCl3)δ1．33(9H，s)，2．50(3H，s)，4．35-4．50(2H，m)，5．00-5．15(1H，m)，7．90(1H，d，J=6．3Hz)实施例7dN-(3-溴-6-甲基-5-硝基-2-(吡唑-1-基)苯基甲基)氨基甲酸叔丁酯的合成将实施例7c所得化合物(233mg)、吡唑(53mg)、碳酸钠(82mg)和二甲基甲酰胺(6ml)的混合物在100℃下搅拌2小时。向反应混合物中加入水，用乙酸乙酯萃取。有机层用盐水洗涤，用无水硫酸镁干燥，然后在减压下浓缩。所得残余物用硅胶柱色谱法纯化(洗脱剂∶乙酸乙酯∶正己烷=1∶3)，得到标题化合物(产率62％)。1H-NMR(CDCl3)δ1．43(9H，s)，2．54(3H，s)，2．85-4．80(2H，m)，5．25-5．45(1H，m)，6．56(1H，dd，J=1．3，2．0Hz)，7．64(1H，d，J=2．0Hz)，7．83(1H，d，J=1．3Hz)，8．01(1H，s)实施例7eN-(3-((叔丁氧羰基)氨基甲基)-2-甲基-4-(吡唑-1-基)苯基)硫脲的合成将实施例7d所得化合物(163mg)、10％钯-碳(20mg)和甲醇(10ml)的混合物在室温氢气氛下搅拌6小时。将反应混合物过滤以除去钯-碳，所得滤液在减压下浓缩。向所得残余物中加入丙酮(10ml)，然后在室温下滴加苯甲酰异硫氰酸酯(0．064ml)。反应混合物在室温下搅拌16小时，然后加入水，用乙酸乙酯萃取。有机层用无水硫酸镁干燥，然后在减压下浓缩。所得残余物用硅胶柱色谱法纯化(洗脱剂∶乙酸乙酯∶正己烷=1∶3)，得到N-苯甲酰-N’-(3-((叔丁氧羰基)氨基甲基)-2-甲基-4-(吡唑-1-基)苯基)硫脲(产率78％)。将所得硫脲化合物(143mg)、碳酸钾(64mg)和甲醇(4ml)的混合物在室温下搅拌2小时。反应混合物在减压下浓缩，向所得残余物中加入水，用乙酸乙酯萃取。有机层用盐水洗涤，用无水硫酸镁干燥，然后在减压下浓缩。所得残余物用硅胶柱色谱法纯化(洗脱剂∶乙酸乙酯∶正己烷=1∶2)，定量得到标题化合物。1H-NMR(CDCl3)δ1．43(9H，s)，2．43(3H，s)，4．10(2H，d，J=5．9Hz)，5．70-5．80(1H，m)，6．00-6．45(2H，m)，6．49(1H，dd，J=2．0，2．3Hz)，7．19(1H，d，J=8．3Hz)，7．29(1H，d，J=8．3Hz)，7．67(1H，d，J=2．3Hz)，7．76(1H，d，J=2．0Hz)，8．67(1H，s)实施例7fN-(3-((叔丁氧羰基)氨基甲基)-2-甲基-4-(吡唑-1-基)苯基)-S-乙基异硫脲的合成将实施例7e所得化合物(47mg)、乙基碘(0．026ml)和乙腈(1ml)的混合物加热回流4小时，然后在减压下浓缩。向所得残余物中加入饱和碳酸氢钠溶液，用氯仿萃取。有机层用无水硫酸镁干燥，然后在减压下浓缩。所得残余物用硅胶柱色谱法纯化(洗脱剂∶氯仿∶甲醇=15∶1)，得到标题化合物(产率95％)。1H-NMR(CDCl3)δ1．39(3H，t，J=7．3Hz)，1．44(9H，s)，2．31(3H，s)，3．10(2H，q，J=7．3Hz)，4．07(2H，d，J=5．9Hz)，4．20-5．00(2H，m)，5．55-5．70(1H，m)，6．44(1H，dd，J=2．0，2．3Hz)，6．88(1H，d，J=8.3Hz)，7．08(1H，d，J=8．3Hz)，7．62(1H，d，J=2．3Hz)，7．72(1H，d，J=2．0Hz)实施例7g二盐酸N-(3-氨基甲基-2-甲基-4-(吡唑-1-基)苯基)-S-乙基异硫脲的合成将实施例7f所得化合物(47mg)和6NHCl(6ml)的混合物在室温下搅拌3小时。反应混合物在减压下浓缩，得到标题化合物(产率93％)。1H-NMR(DMSO-d6)δ1．35(3H，t，J=7．3Hz)，2．39(3H，s)，3．20-3．45(2H，m)，3．80-4．05(2H，m)，6．63(1H，dd，J=2．0，2．3Hz)，7．50(2H，s)，7．86(1H，d，J=2．0Hz)，8．26(1H，d，J=2．3Hz)，8．40-8．65(3H，m)，8．65-10．00(2H，m)，11．9(1H，s)MS(m／z)289(M+)C14H21N5SCl2计算值C，46．41；H，5．84；N，19．33实测值C，46．34；H，6．09；N，19．05实施例8二盐酸N-(3-氨基甲基-2-甲基-4-(吡唑-1-基)苯基)-O-乙基异硫脲的合成实施例8aN-(3-氰基氨基-2-甲基-6-(吡唑-1-基)苯基甲基)氨基甲酸叔丁酯的合成使用实施例7e所得化合物作为原料，与实施例4a相同的操作得到标题化合物(产率88％)。1H-NMR(CDCl3)δ1．44(9H，s)，2．35(3H，s)，4．06(2H，d，J=5．9Hz)，5．70-5．87(1H，m)，6．46(1H，dd，J=1．6，2．6Hz)，6．90(1H，s)，7．18(1H，d，J=8.6Hz)，7．25(1H，d，J=8．6Hz)，7．62(1H，d，J=2．6Hz)，7．74(1H，d，J=1．6Hz)实施例8b二盐酸N-(3-氨基甲基-2-甲基-4-(吡唑-1-基)苯基)-O-乙基异硫脲的合成使用实施例8a所得化合物作为原料，与实施例4b相同的操作得到标题化合物(产率40％)。1H-NMR(DMSO-d6)δ1．37(3H，t，J=7．3Hz)，2．43(3H，s)，3．90-3．98(2H，m)，4．50(2H，q，J=7．3Hz)，6．62(1H，dd，J=2．0，2．3Hz)，7．46(1H，d，J=8．9Hz)，7．53(1H，d，J=8．9Hz)，7．85(1H，d，J=2．0Hz)，8．23(1H，d，J=2．3Hz)，8．33-8．53(3H，m)，8．60-9．60(2H，m)，11．10(1H，s)试验例试验例1评价了所选本发明化合物抑制目前已知的三种NOS异构形式的能力，并与五种现有的NOS抑制剂进行比较。对照化合物如下L-NA，L-CPA，L-MIN，L-EIN，L-NAME。按照下列操作制备各NOS异构形式的粗酶(Nagafuji等，《神经报道》6，1541-1545，1995)。按照下列操作制备nNOS的粗酶。将正常未经处理的SpragueDawley(SD)大鼠(体重300-400g)去头；立即从各动物取出全脑，在冰上分离脑皮质。然后，加入5体积的含有1mMDTT的50mMTrisHCl(pH7．4)，混合物匀化3分钟，以1000xg离心10分钟。所得上清液进一步以100000xg离心60分钟，使用最终所得上清液的可溶性胞溶部分作为nNOS的粗酶。按照下列操作制备eNOS的粗酶。在含有20％FBS的MEM培养基上培养母牛肺动脉内皮细胞(CPAE)。若干天后，用含有1mMEDTA的0．25％胰蛋白酶溶液将细胞与烧瓶分离，加入适量FBS后，以1000rpm离心10分钟。向起沉淀作用的细胞中加入适量不含Ca和Mg的磷酸盐缓冲液(pH7．4)，以1000rpm离心10分钟。重复同样的步骤洗涤细胞，加入含有1％TritonX-100和1mMDTT的50mMTris-HCl(pH7．4)后在冰中保持1小时。随后，混合物匀化3分钟，在冰中保持30分钟，偶尔搅拌。最后，混合物以100000xg离心60分钟，使用所得上清液作为eNOS的粗酶。测量NOS活性的方法基本上与已被本发明人所报道的相同，包括定量测定底物L-[3H]精氨酸向反应产物L-[3H]瓜氨酸的转化作用(Nagafuji等，《脑水肿》IX(Ito等编)60，pp．285-288，1994；Nagafuji等，《神经报道》6，1541-1545，1995)。反应溶液由1OOnML-[3H]精氨酸、所制备的粗NOS酶样本(10-30μg／ml蛋白质)、1．25mMCaCl2、1mMEDTA、10μg／ml钙调蛋白、1mMNADPH、100μM四氢生物蝶呤、10μMFAD、10μMFMN和50mMTris-HCl(pH7．4)组成，向其中加入一种本发明化合物或一种对照化合物。加入L-[3H]精氨酸开始反应。在37℃下培养10分钟后，加入含有1mMEDTA的50mMTris-HCl(pH5．5)并将混合物放在冰上以终止反应。使反应溶液通过阳离子交换树脂柱(DowexAG50WX-8，Na+型，3．2ml)，以从残留的未反应的底物L-[3H]精氨酸中分离反应产物L-[3H]瓜氨酸。将洗脱液与另一份使一定量蒸馏水通过柱子所得到的洗脱液合并，装入小瓶内，回收L-[3H]瓜氨酸。然后，加入一种闪烁流体，用液体闪烁计数器测量所含有的放射性，以测定L-[3H]瓜氨酸的量。测定nNOS或eNOS的活性的方法是，从在CaCl2和钙调蛋白的存在下所检测到的活性中减去没有CaCl2和钙调蛋白的存在下所检测到的活性。用BioRadCo．的微测定试剂盒测定各粗酶样本的蛋白质浓度。每项实验重复进行两次。表2列出了所有供试化合物对各NOS异构形式的IC50值(抑制50％活性所需的浓度)。表中也列出了各IC50值之比，作为反映选择性的指标。表2<tablesid="table1"num="001"><table>实施例编号或对照化合物IC50值(nM)IC50值之比nNOS(1型)eNOS(3型)iNOS(2型)eNOS／nNOSiNOS／nNOSeNOS／iNOS13．71920793051521200．243L-MIN5．735．82486．2843．30．14526．351302050081632600．250L-EIN8．4732676087．2805O．108L-NA16．968．234604．03205O．0197722．421100n．d．943--L-CPA27．31540715056．4262O．215L-NAME79．4670135008．441710．0495</table></tables>注符号“n．d．”代表“未测定”，“-”代表“不可计算”。表2证明了下列两点1、在试验条件下，实施例1化合物比L-MIN具有更强的nNOS抑制活性，后者是现有NOS抑制剂中作用最强的；2、在试验条件下，实施例1、2和7化合物比L-EIN对nNOS而不是eNOS具有更高的选择性抑制作用，后者从对nNOS的选择性抑制作用上来说是现有NOS抑制剂中最好的。工业实用性本发明化合物表现了突出的nNOS抑制活性，或者对nNOS而不是eNOS表现了更高的选择性抑制活性，作为治疗剂可用于脑血管疾病(脑出血、蛛网膜下出血、脑梗塞(动脉粥样化血栓性梗塞、腔隙性梗塞和心原性栓塞)、短暂性局部缺血发作和脑水肿)、外伤性脑损伤、脊髓损伤、疼痛(头痛(偏头痛、紧张性头痛、丛集性头痛和慢性阵发性头痛))、帕金森氏病、阿尔茨海默氏病、癫痫发作和吗啡耐受或依赖。权利要求1.由通式(1)代表的化合物、或该化合物的可能的互变异构体、立体异构体或旋光活性体、或其药学上可接受的盐其中R1是可选被取代的氨基烷基，其烷基部分具有1-6个碳原子；R2是氢原子、低级烷基或卤原子；R3是可选被取代的低级烷基、SR4、OR4或NR5R6，其条件是R4是可以被卤原子取代的低级烷基，R5和R6可以相同或不同，代表氢原子、低级烷基或硝基，或者可以共同构成3至6元环；Ar是可选被取代的5或6元芳族杂环基。2.根据权利要求1的通式(1)化合物、或该化合物的可能的互变异构体、立体异构体或旋光活性体、或其药学上可接受的盐，其中R3是OR4。3.根据权利要求1的通式(1)化合物、或该化合物的可能的互变异构体、立体异构体或旋光活性体、或其药学上可接受的盐，其中R3是可选被取代的低级烷基、SR4或NR5R6；Ar是取代的5或6元芳族杂环基。4.根据权利要求1的通式(1)化合物、或该化合物的可能的互变异构体、立体异构体或旋光活性体、或其药学上可接受的盐，其中R3是可选被取代的低级烷基、SR4或NR5R6；Ar是5元芳族杂环基。5.根据权利要求1-4任意一项的通式(1)化合物、或该化合物的可能的互变异构体、立体异构体或旋光活性体、或其药学上可接受的盐，其中R1是氨基甲基。6.根据权利要求1、2、4和5任意一项的通式(1)化合物、或该化合物的可能的互变异构体、立体异构体或旋光活性体、或其药学上可接受的盐，其中Ar是吡咯-1-基或吡唑-1-基。7.根据权利要求1-6任意一项的通式(1)化合物、或该化合物的可能的互变异构体、立体异构体或旋光活性体、或其药学上可接受的盐，其中除了R2和Ar以外，苯环都是间位取代的。8.根据权利要求1的通式(1)化合物、或该化合物的可能的互变异构体、立体异构体或旋光活性体、或其药学上可接受的盐，所述化合物选自由下列化合物组成的组N-(3-氨基甲基-4-(吡唑-1-基)苯基)-S-乙基异硫脲；N-(3-氨基甲基-4-(吡咯-1-基)苯基)-S-乙基异硫脲；和N-(3-氨基甲基-2-甲基-4-(吡唑-1-基)苯基)-S-乙基异硫脲。9.药物组合物，含有根据权利要求1-8任意一项的化合物作为活性成分。1O、nNOS抑制剂，含有根据权利要求1-8任意一项的化合物作为活性成分。11.脑血管疾病治疗剂，含有根据权利要求1-8任意一项的化合物作为活性成分。12.根据权利要求11的治疗剂，其中脑血管疾病的类型是脑出血。13.根据权利要求11的治疗剂，其中脑血管疾病的类型是蛛网膜下出血。14.根据权利要求11的治疗剂，其中脑血管疾病的类型是脑梗塞。15.根据权利要求14的治疗剂，其中脑梗塞的亚型是动脉粥样化血栓性梗塞。16.根据权利要求14的治疗剂，其中脑梗塞的亚型是腔隙性梗塞。17.根据权利要求14的治疗剂，其中脑梗塞的亚型是心原性栓塞。18.根据权利要求11的治疗剂，其中脑血管疾病的类型是短暂性局部缺血发作(TIA)。19.根据权利要求11的治疗剂，其中脑血管疾病的类型是脑水肿。20.外伤性脑损伤治疗剂，含有根据权利要求1-8任意一项的化合物作为活性成分。21.脊髓损伤治疗剂，含有根据权利要求1-8任意一项的化合物作为活性成分。22.止痛剂，含有根据权利要求1-8任意一项的化合物作为活性成分。23.根据权利要求22的治疗剂，其中疼痛的类型是头痛。24.根据权利要求23的治疗剂，其中头痛的亚型是偏头痛。25.根据权利要求23的治疗剂，其中头痛的亚型是紧张性头痛。26.根据权利要求23的治疗剂，其中头痛的亚型是丛集性头痛或慢性阵发性头痛。27.帕金森氏病治疗剂，含有根据权利要求1-8任意一项的化合物作为活性成分。28.阿尔茨海默氏病治疗剂，含有根据权利要求1-8任意一项的化合物作为活性成分。29.癫痫发作治疗剂，含有根据权利要求1-8任意一项的化合物作为活性成分。3O、有效对抗吗啡耐受或依赖的治疗剂，含有根据权利要求1-8任意一项的化合物作为活性成分。全文摘要由通式(1)代表的化合物:(其中R文档编号C07D207/335GK1280565SQ98811694公开日2001年1月17日申请日期1998年11月4日优先权日1997年11月4日发明者牧野俊彦申请人:中外制药株式会社