本发明涉及生物化学领域，更具体的说是涉及一种化合物及其制备方法和应用。
背景技术：
：艾滋病，即获得性免疫缺陷综合症，是人体感染了人类免疫缺陷病毒(HIV)而导致的传染病。HIV是一种能攻击人体免疫系统的病毒。它把人体免疫系统中最重要的T4淋巴组织作为攻击目标，大量破坏T4淋巴组织，产生高致命性的内衰竭。这种病毒在地域内终生传染，破坏人的免疫平衡，使人体成为各种疾病的载体。HIV本身并不会引发任何疾病，而是当免疫系统被HIV破坏后，人体由于抵抗能力过低，丧失复制免疫细胞的机会，并感染其它的疾病导致各种复合感染而死亡。到目前为止，全世界范围内还没有能有效治疗艾滋病的药物和疗法，只能用药物适当控制HIV在人体内的增殖。针对HIV的生命周期，目前已经做了大量相关的研究，药物靶点主要是病毒和细胞的识别融合靶点、反转录酶及相关蛋白靶点、整合酶靶点、蛋白水解酶靶点等。但是，由于HIV的高度变异性，目前迫切需要各种不同作用途径，且有效控制艾滋病病毒在人体内增殖的药物，以此来延缓HIV的增殖速度，为患者争取更长的生存时间。技术实现要素：有鉴于此，本发明的目的在于提供一种化合物，使得该化合物能够抑制HIV病毒的增殖，同时具有潜在解决HIV病毒高度变异所带来的抗药性问题。为实现上述目的，本发明提供一种化合物，该化合物属于巯基类衍生 物，具有式I所示结构：其中，R1、R2、R3、R4、R5独立选自于-H,-(CH2)0-4-CH3,-(CH2)0-4-CH2Cl,-(CH2)0-4-CH2Br,-CF3,-(CH2)0-4-OH,-(CH2)0-4-O-(CH2)0-4-CH3,-(CH2)0-4-O-,CH(O)-(CH2)0-4-CH3,-(CH2)0-4-CH-(CH3)2,-(CH2)0-4-Ar,-C(O)-(CH2)0-4-CH3,-C(O)-O-(CH2)0-4-CH3,-C(O)-NH2,-C(O)-OH,-C(O)-O(CH2)0-4-CH3,-C(O)-O(CH2)0-4-Ar,-C(O)-NH-(CH2)0-4-CH3,-C(O)-N-[(CH2)0-4-CH3]2,-OH,-SH,-O-(CH2)0-4-CH3,-O-C(O)-(CH2)0-4-CH3,-O-(CH2)0-4-CH-(CH3)2,-O-(CH2)0-4-Ar,-NH2,-NH-(CH2)0-4-CH3,-NH-(CH2)0-4-Ar,-NH-(CH2)0-4-NH2,-N(CH3)2,-NH-C(O)-(CH2)0-4-CH3,-NH-C(O)-(CH2)0-4-S-Ar,-NH-Ts,-F,-Cl,-Br,-I,-CN,-CH＝CH-(CH2)0-4-CH3,-(CH2)0-4-CH＝CH2,-CH＝CH-Ar,-CH＝CH-CH＝CH-(CH2)0-4-CH3,-(CH＝CH)0-4-CH＝C(CH3)2,-C≡C-(CH2)0-4-CH3,-C≡C-Ar,-NO2；X独立选自于-O-,-S-,-NH-,-N-(CH2)0-3-CH3,-N-(CH2)0-4-CH(CH3)2,-N-(CH2)0-4-C(CH3)3,-COO-,-C(O)S-；Y独立选自于-OH,-SH,-NH2；n为1-4的整数；Ar是含十个碳原子的芳基。作为优选，R1、R2、R3、R4、R5独立选自于-H,-CH3,-(CH2)0-4-CH3,-(CH＝CH)0-4-CH＝C-(CH3)2,-(CH2)0-4-Ar,-(CH2)0-4-CH＝CH2,-NO2；X独立选自于-O-,-NH-,-S-,-N-(CH2)n-CH3,-COO-,-C(O)S-；Y独立选自于-OH,-SH,-NH2；n为1-3的整数；Ar是含十个碳原子的芳基。进一步优选，R1、R2、R3、R4、R5独立选自于-H,-CH3,-(CH2)3-CH3, -CH＝CH-CH＝C-(CH3)2,-NO2；X独立选自于-O-,-S-,-COO-,-C(O)S-；Y独立选自于-OH,-SH,-NH2；N为1-2的整数。进一步优选，所述化合物具有选自如下各项的结构。HIV病毒在体内的转录过程需要赖氨酸乙酰化的病毒反式激活因子(HIV-Tat)和人体反式转录共激活因子PCAFBRD以及和SWI/SNF染色质改造络合物PBAF相互作用来维系HIV的活性，这意味着在HIV病毒人体转录过程中，HIV-Tat(反式转录激活因子)起着非常关键的作用，而HIV-Tat的活性需要和一些细胞蛋白络合物共同作用才能实现，如上述的PCAFBRD等。因此，只要能抑制HIV-Tat和PCAFBRD之间结合的活性，就可以达到抑制HIV转录的目的，最终抑制HIV的增殖。PCAFBRD是宿主细胞蛋白而非病毒蛋白，因此PCAFBRD蛋白结构域基因相对保守，变异性较低，PCAFBRD作为药物靶点能够很好的解决HIV病毒本身变异带来的抗药性问题。通过体外Elisa试验(Elisa实验步骤参考文献J.Am.Chem.Soc.2005,127,2376-2377.)证明本发明所述式I所示化合物具有较好的抑制PCAFBRD和Tat结合的活性，其中，试验结果显示部分抑制性较好的化合物IC50值在10μM左右。本发明根据SFDA(抗HIV药物非临床药效学研究技术指导原则)采用国际通用试验方法对本发明所述式I所示化合物的抗HIV活性进行检测，获得其细胞毒性CC50以及抗HIV活性EC50，结果显示，式I所示化合物具有较好的抑制HIV病毒的增殖的活性，且对人正常淋巴细胞的毒性较低。因此，本发明还提供了式I所示化合物在制备抑制HIV病毒增殖的药物中的应用。其中，所述抑制HIV病毒增殖的药物包含有效量的式I所示化合物或其药用盐，以及药用载体。按照药学常识，式I所示化合物具有抑制HIV病毒的增殖的活性，那么其药用盐也相应具有这方面的活性。另外，所述药用载体可根据具体制备的剂型来进行确定，属本领域人员公知，不做具体限定。此外，本发明还提供了式I所示化合物的制备方法，所述方法包括如下步骤：步骤1、式II所示化合物和1,3-二溴丙烷或1,2-二溴已烷以及叔丁醇钾在DMF中室温反应，生成式III所示化合物；步骤2、式III所示化合物与硫化钠在DMSO中反应，或式III所示化合物与氨水在四氢呋喃(THF)中反应，生成式I所示化合物；其中，X独立选自-O-,-S-,-NH-,-N-(CH2)0-3-CH3,-N-(CH2)0-4-CH(CH3)2,-N-(CH2)0-4-C(CH3)3,-COO-,-C(O)S-；n是1或2；R1、R2、R3、R4、R5独立选自于–H,-(CH2)0-4-CH3,-(CH2)0-4-CH2Cl,-(CH2)0-4-CH2Br,-CF3,-(CH2)0-4-OH,-(CH2)0-4-O-(CH2)0-4-CH3,-(CH2)0-4-O-,CH(O)-(CH2)0-4-CH3,-(CH2)0-4-CH-(CH3)2,-(CH2)0-4-Ar,-C(O)-(CH2)0-4-CH3,-C(O)-O-(CH2)0-4-CH3,-C(O)-NH2,-C(O)-OH,-C(O)-O(CH2)0-4-CH3,-C(O)-O(CH2)0-4-Ar,-C(O)-NH-(CH2)0-4-CH3,-C(O)-N-[(CH2)0-4-CH3]2,-OH,-SH,-O-(CH2)0-4-CH3,-O-C(O)-(CH2)0-4-CH3,-O-(CH2)0-4-CH-(CH3)2,-O-(CH2)0-4-Ar,-NH2,-NH-(CH2)0-4-CH3,-NH-(CH2)0-4-Ar,-NH-(CH2)0-4-NH2, -N(CH3)2,-NH-C(O)-(CH2)0-4-CH3,-NH-C(O)-(CH2)0-4-S-Ar,-NH-Ts,-F,-Cl,-Br,-I,-CN,-CH＝CH-(CH2)0-4-CH3,-(CH2)0-4-CH＝CH2,-CH＝CH-Ar,-CH＝CH-CH＝CH-(CH2)0-4-CH3,-(CH＝CH)0-4-CH＝C(CH3)2,-C≡C-(CH2)0-4-CH3,-C≡C-Ar；Y独立选自于-OH、-SH、-NH2；Ar是含十个碳原子的芳基。作为优选，R1、R2、R3、R4、R5独立选自于-H,-(CH2)0-4-CH3,-(CH＝CH)0-4-CH＝C-(CH3)2,-(CH2)0-4-Ar,-(CH2)0-4-CH＝CH2,-NO2；X独立选自于-O-,-NH-,-S-,-N-(CH2)n-CH3,-COO-,-C(O)S-；Y独立选自于–OH,-SH,-NH2；n为1-3的整数；Ar是含十个碳原子的芳基。进一步优选，R1、R2、R3、R4、R5独立选自于–H,-CH3,-(CH2)3-CH3,-CH＝CH-CH＝C-(CH3)2,-NO2；X独立选自于-O-,-S-,-COO-,-C(O)S-；Y独立选自于-OH,-SH,-NH2；N为1-2的整数。反应式如下：其中步骤1所述反应需室温搅拌3-48小时；步骤2所述反应需室温搅拌1-12小时。作为优选，所述式II所示化合物和1,3-二溴丙烷或1,2-二溴乙烷以及叔丁醇钾的物质的量之比为1:3:1.5，所述式III所示化合物和硫化钠的物质的量之比为1:2。由以上技术方案可知，本发明所述式I所示化合物以宿主自身保守细胞蛋白PCAFBRD为作用靶点，有效地解决了HIV病毒高度变异性问题，具有较好的抑制HIV病毒的增殖的活性，且对人正常淋巴细胞的毒性较 低，能够应用于抑制HIV病毒增殖的药物的制备中。注：本申请书中缩写对照：Ar是含十个碳原子的芳基，DMF是N,N-二甲基甲酰胺，DMSO是二甲基亚砜,THF是四氢呋喃，TBDPSCl是叔丁基二苯基氯硅烷。附图说明图1所示为2-[4-(4-甲基-1,3-戊二烯)苯硫基]乙硫醇化合物的1H核磁共振(400MHz)谱图，其中，R1为-H，R2为-H，R3为-CH＝CH-CH＝C(CH3)2，R4为-H，R5为-H，X为-S-，Y为-SH,n为1。图2所示为3-[4-(4-甲基-1,3-戊二烯)苯氧基]丙烷-1-硫醇化合物的1H核磁共振(400MHz)谱图，其中，R1为-H，R2为-H，R3为-CH＝CH-CH＝C(CH3)2，R4为-H，R5为-H，X为-O-，Y为-SH,n为2。图3所示为3-(对甲苯基硫代)-1-丙胺化合物的1H核磁共振(400MHz)谱图，其中，R1为-H，R2为-H，R3为-CH3，R4为-H，R5为-H，X为-S-,Y为-NH2，n为2。图4所示为3-巯丙基-2-硝酸苯甲酸硫酯化合物的1H核磁共振(400MHz)谱图，其中，R1为-H，R2为-H，R3为-H，R4为-H，R5为-NO2,X为-C(O)S-，Y为-SH,n为2。图5所示为3-(2-硝基苯硫基)丙烷-1-硫醇化合物的1H核磁共振(400MHz)谱图，其中，R1为-H，R2为-H，R3为-H，R4为-H，R5为-NO2，X为-S-，Y为-SH,n为2。图6所示为3-羟基-2-硝酸苯甲酸丙酯化合物的1H核磁共振(400MHz)谱图，其中，R1为-H，R2为-H，R3为-H，R4为-H，R5为-NO2,X为-C(O)O-，Y为-OH,n为2。图7所示为3-(邻硝基苯基硫代)-1-丙胺化合物的1H核磁共振(400MHz)谱图，其中，R1为-H，R2为-H，R3为-H，R4为-H，R5为-NO2，X为-S-,Y为-NH2，n为2。图8所示为2-[4-(4-甲基-1,3-戊二烯)苯硫基]乙醇化合物的1H核磁共振(400MHz)谱图，其中，R1为-H，R2为-H，R3为-CH＝CH-CH＝C(CH3)2， R4为-H，R5为-H，X为-S-，Y为-OH，n为1。图9所示为3-[4-乙烯基苯氧基]-丙烷-1-硫醇化合物的1H核磁共振(400MHz)谱图，其中，R1为-H，R2为-H，R3为-CH＝CH2，R4为-H，R5为-H，X为-O-，Y为-SH，n为2。图10所示为(E)-3-[4-苯乙烯基苯氧基]-丙烷-1-硫醇化合物的1H核磁共振(400MHz)谱图，其中，R1为-H，R2为-H，R3为–(E)-CH＝CH-Ph，R4为-H，R5为-H，X为-O-，Y为-SH，n为2。具体实施方式本发明公开了一种化合物，还公开了该化合物的制备方法和应用，本领域技术人员可以借鉴本文内容，适当改进工艺参数实现。特别需要指出的是，所有类似的替换和改动对本领域技术人员来说是显而易见的，它们都被视为包括在本发明。本发明所述化合物、方法及应用已经通过较佳实施例进行了描述，相关人员明显能在不脱离本
发明内容、精神和范围内对本文所述的方法和应用进行改动或适当变更与组合，来实现和应用本发明技术。下面结合实施例，进一步阐述本发明，实验所用试剂清单见表1。表1主要试剂清单名称CAS号厂家2-氯乙醇107-07-3国药集团化学试剂有限公司TBDPSCl58479-61-1西亚试剂咪唑288-32-4九鼎化学(上海)科技有限公司劳森试剂19172-47-5阿拉丁对羟基苯甲醛123-08-0九鼎化学(上海)科技有限公司1,3-二溴丙烷109-64-8九鼎化学(上海)科技有限公司碘化钾7681-11-0国药集团化学试剂有限公司氢化钠7646-69-7阿拉丁硫化钠1313-82-2国药集团化学试剂有限公司对甲基苯硫酚106-45-6九鼎化学(上海)科技有限公司水合肼10217-52-4国药集团化学试剂有限公司4-硝基苯甲酸62-23-7九鼎化学(上海)科技有限公司1,3-二巯基丙烷109-80-8九鼎化学(上海)科技有限公司邻氯硝基苯88-73-3九鼎化学(上海)科技有限公司1,3-丙二醇504-63-2国药集团化学试剂有限公司实施例11、制备本发明所述式I所示化合物(R1为-H，R2为-H，R3为-CH＝CH-CH＝C(CH3)2，R4为-H，R5为-H，X为-S-，Y为-SH,n为1)名称为2-[4-(4-甲基-1,3-戊二烯)苯硫基]乙硫醇。10mmol2-氯乙醇、10mmolTBDPSCl和12mmol咪唑在20mLDMF中室温反应2-5h,然后萃取、柱层析分离投下一步。先将10mmol4-(4-甲基-1,3-戊二烯)苯硫酚、20mmol碳酸氢钠在25mLDMF中搅拌半小时后，把上述所得产物慢慢滴加进去后反应5-10小时，反应结束后萃取、柱层析得淡黄色固体。将上述固体溶于DCM后，加入两当量乙酰氯及若干滴甲醇，室温反应2-8小时,柱层析分离得产物2-[4-(4-甲基-1,3-戊二烯)苯硫基]乙醇。最后将2-[4-(4-甲基-1,3-戊二烯)苯硫基]乙醇溶于甲苯并加入0.6当量的劳森试剂，在80℃下反应5-10小时，反应结束后冷却旋干柱层析即可得最终产物2-[4-(4-甲基-1,3-戊二烯)苯硫基]乙硫醇。反应式如下：将所制备的化合物进行1H核磁共振(400MHz)检测，溶剂为CD3OD，检测结果见图1，结果显示所制备的化合物与式I所示结构一致。2、细胞毒性试验以及HIV抑制试验材料将人体T淋巴细胞系C8166和HIV-1实验株HIV-1IIIB[1-2]均以含10％胎牛血清的RPMI-1640完全培养基进行培养；病毒贮存液分装后， 置-70℃保存；细胞系和病毒按常规方法冻存和复苏。3、HIV-1感染性滴定将HIV-1IIIB贮存液在96孔板上作4倍稀释，10个梯度，每梯度6个重复孔，同时设置对照孔6孔。每孔加入C8166细胞50μL(4×105/mL)，每孔终体积为200μL。37℃，5％CO2培养。第三天补加新鲜RPMI-1640完全培养基100μL，第七天在倒置显微镜下观察每孔中HIV-1IIIB诱导的细胞病变效应(Cytopathiceffect,CPE)，以每孔是否有合胞体(SyncytiμM)的形成确定，按Reed&Muench方法计算病毒的TCID50(半数组织培养感染剂量)。4、C8166细胞的毒性试验将本实施例制备的化合物在96孔微量培养板上用RPMI-1640完全培养基(含10％FBS)进行5倍倍比稀释(起始终浓度为100μg/mL，共6个稀释度)，每个稀释度设3孔，每孔100μL。同时设置不含药物的对照孔。每孔加入4×105/mL的C8166细胞100μL。37℃，5％CO2培养3天，采用MTT比色法检测细胞毒性。ELx800酶标仪测定OD值，测定波长为595nm，参考波长为630nm。计算得到CC50值(50％Cytotoxicconcentration，即对50％的正常T淋巴细胞系C8166产生毒性时的化合物浓度)为大于200μM。5、HIV-1IIIB致细胞病变(CPE)的抑制实验将本实施例制备的化合物在96孔微量培养板上用RPMI-1640完全培养基(含10％FBS)进行5倍倍比稀释(起始终浓度为100μg/mL，共6个稀释度)，每个稀释度设3个重复孔，每孔100μL。同时设置不含药物的对照孔。每孔加入8×105/mL的C8166细胞50μL，然后加入50μL的HIV-1IIIB稀释上清，1300TCID50/孔。AZT(购自于葛兰素威康制药公司)为阳性药物对照。37℃，5％CO2培养3天，倒置显微镜下(100×)计数合胞体的形成并得出EC50(50％Effectiveconcentration，即抑制合胞体形成50％时的化合物浓度)为86.80μM。结合CC50以及EC50的结果可以看出，本发明所述式I所示化合物具有显著的抑制HIV病毒增殖的活性，且对人正常淋巴细胞的毒性较低，符合药物学的规定，具有应用到制备抑制HIV病毒增殖的药物中的前景。实施例21、制备本发明所述式I所示化合物(R1为-H，R2为-H，R3为-CH＝CH-CH＝C(CH3)2，R4为-H，R5为-H，X为-O-，Y为-SH,n为2)名称为3-[4-(4-甲基戊基-1,3-二烯)苯氧基]丙烷-1-硫醇。10mmol对羟基苯甲醛、11mmol1，3-二溴丙烷、12mmol碳酸钾和催化量的碘化钾在DMF中回流过夜，柱色谱分离得到1-(4-甲酰基苯基)-3-溴-丙醇；再将6mmol氢化钠和5mmol的(2-甲基烯丙基)三苯基溴化膦溶解在THF中，冰浴冷却至0℃，往上述溶液中滴加10mmol1-(4-甲酰基苯基)-3-溴-丙醇的THF溶液,滴加完毕转移至室温反应10-15小时。然后柱色谱分离得1-(3-溴丙氧基)-4-(4-甲基戊基-1,3-二烯基)苯。最后将上述得到的产物与两当量的硫化钠在DMSO中室温反应过夜，萃取、干燥、柱色谱分离即可得产物3-[4-(4-甲基戊基-1,3-二烯)苯氧基]丙烷-1-硫醇。反应式如下：将所制备的化合物进行1H核磁共振(400MHz)检测，溶剂为CDCl3，检测结果见图2，结果显示所制备的化合物与式I所示结构一致。2、细胞毒性试验以及HIV抑制试验按照实施例1中方法得到本实施例制备的化合物CC50大于200μM，EC50为62.90μM。结合CC50以及EC50的结果可以看出，本发明所述式I所示化合物具有显著的抑制HIV病毒增殖的活性，且对人正常淋巴细胞的毒性较低，符合药物学的规定，具有应用到制备抑制HIV病毒增殖的药物中的前景。实施例31、制备本发明所述式I所示化合物(R1为-H，R2为-H，R3为-CH3，R4为-H，R5为-H，X为-S-,Y为-NH2，n为2)名称为3-(对甲苯基硫代)-1-丙胺。10mmol对甲苯硫酚、30mmol2-(3-溴丙基)异吲哚林-1,3-二酮和 11mmol叔丁醇钾在20mLDMF中室温反应8小时，柱色谱分离得到2-[3-(对甲苯基硫代)丙基]异吲哚林-1,3-二酮；将5mmol2-[3-(对甲苯基硫代)丙基]异吲哚林-1,3-二酮和20mmol的水合肼在20mL乙醇中回流过夜，抽滤、旋干、然后柱色谱分离得3-(对甲苯基硫代)-1-丙胺。反应式如下：将所制备的化合物进行1H核磁共振(400MHz)检测，溶剂为CDCl3，检测结果见图3，结果显示所制备的化合物与式I所示结构一致。2、细胞毒性试验以及HIV抑制试验按照实施例1中方法得到本实施例制备的化合物CC50为43.38μM，EC50为8.97μM。结合CC50以及EC50的结果可以看出，本发明所述式I所示化合物具有显著的抑制HIV病毒增殖的活性，且对人正常淋巴细胞的毒性不高，符合药物学的规定，具有应用到制备抑制HIV病毒增殖的药物中的前景。实施例41、制备本发明所述式I所示化合物(R1为-H，R2为-H，R3为-H，R4为-H，R5为-NO2,X为-C(O)S-，Y为-SH,n为2)名称为3-巯丙基-2-硝酸苯甲酸硫酯。5mmol邻硝基苯甲酸溶于10mL二氯甲烷中，冰浴条件下慢慢滴加10mmol二氯亚砜的二氯甲烷溶液，滴加完后加热回流3-6小时。旋除溶剂后，再加入15mL氯仿和10mmol1,3-二巯基丙烷加热回流过夜，后柱色谱分离得到3-巯丙基-2-硝酸苯甲酸硫酯。反应式如下：将所制备的化合物进行1H核磁共振(400MHz)检测，溶剂为CDCl3，检测结果见图4，结果显示所制备的化合物与式I所示结构一致。2、细胞毒性试验以及HIV抑制试验按照实施例1中方法得到本实施例制备的化合物CC50大于200μM，EC50为110.78μM。结合CC50以及EC50的结果可以看出，本发明所述式I所示化合物具有显著的抑制HIV病毒增殖的活性，且对人正常淋巴细胞的毒性较低，符合药物学的规定，具有应用到制备抑制HIV病毒增殖的药物中的前景。实施例51、制备本发明所述式I所示化合物(R1为-H，R2为-H，R3为-H，R4为-H，R5为-NO2，X为-S-，Y为-SH,n为2)名称为3-(2-硝基苯硫基)丙烷-1-硫醇。2mmol邻硝基氯苯、4mmol1,3-二巯基丙烷和2mmol碳酸氢钠在5mLDMF中加热反应5-8小时，点板检测反应完后萃取、干燥、旋干，再柱色谱分离得到3-(2-硝基苯硫基)丙烷-1-硫醇。反应式如下：将所制备的化合物进行1H核磁共振(400MHz)检测，溶剂为CDCl3，检测结果见图5，结果显示所制备的化合物与式I所示结构一致。2、细胞毒性试验以及HIV抑制试验按照实施例1中方法得到本实施例制备的化合物CC50大于800μM，EC50为63.06μM。结合CC50以及EC50的结果可以看出，4-硝基苯磺酸2-(N-(4-丁基苯基)-4-硝基苯基磺酰胺基)乙酯具有显著的抑制HIV病毒增殖的活性，且对人正常淋巴细胞的毒性较低，符合药物学的规定，具有应用到制备抑制HIV病毒增殖的药物中的前景。实施例61、制备本发明所述式I所示化合物(R1为-H，R2为-H，R3为-H，R4为-H，R5为-NO2,X为-C(O)O-，Y为-OH,n为2)名称为3-羟基-2-硝酸苯甲酸丙酯。5mmol邻硝基苯甲酸溶于10mL二氯甲烷中，冰浴条件下慢慢滴加10mmol二氯亚砜的二氯甲烷溶液，滴加完后加热回流3-6小时。旋除溶剂后，再加入15mL氯仿和10mmol丙二醇加热回流过夜，后柱色谱分离得到3-羟基-2-硝酸苯甲酸丙酯。反应式如下：将所制备的化合物进行1H核磁共振(400MHz)检测，溶剂为CDCl3，检测结果见图6，结果显示所制备的化合物与式I所示结构一致。2、细胞毒性试验以及HIV抑制试验按照实施例1中方法得到本实施例制备的化合物CC50大于200μM，EC50为小于200μM。结合CC50以及EC50的结果可以看出，本发明所述式I所示化合物具有一定的抑制HIV病毒增殖的活性，且对人正常淋巴细胞的毒性较低，符合药物学的规定，具有应用到制备抑制HIV病毒增殖的药物中的前景。实施例71、制备本发明所述式I所示化合物(R1为-H，R2为-H，R3为-H，R4为-H，R5为-NO2，X为-S-，Y为-NH2，n为2)名称为3-(邻硝基苯基硫代)-1-丙胺。10mmol邻硝基苯硫酚、30mmol2-(3-溴丙基)异吲哚林-1,3-二酮和11mmol叔丁醇钾在20mLDMF中室温反应8小时，柱色谱分离得到2-[3-(邻硝基苯基硫代)丙基]异吲哚林-1,3-二酮；将5mmol2-[3-(邻硝基苯基硫代)丙基]异吲哚林-1,3-二酮和20mmol的水合肼在20mL乙醇中回流过夜，抽滤、旋干、然后柱色谱分离得3-(邻硝基苯基硫代)-1-丙胺。反应式如下：将所制备的化合物进行1H核磁共振(400MHz)检测，溶剂为D2O，检测结果见图7，结果显示所制备的化合物与式I所示结构一致。2、细胞毒性试验以及HIV抑制试验按照实施例1中方法得到本实施例制备的化合物CC50为14.52μM，EC50为8.49μM。结合CC50以及EC50的结果可以看出，本发明所述式I所示化合物具有显著的抑制HIV病毒增殖的活性，但对人正常淋巴细胞的有毒性，不过仍然符合药物学的规定，具有应用到制备抑制HIV病毒增殖的药物中的前景。实施例81、制备本发明所述式I所示化合物(R1为-H，R2为-H，R3为-CH＝CH-CH＝C(CH3)2，R4为-H，R5为-H，X为-S-，Y为-OH，n为1)名称为2-[4-(4-甲基-1,3-戊二烯)苯硫基]乙醇。10mmol2-氯乙醇、10mmolTBDPSCl和12mmol咪唑在20mLDMF中室温反应2-5h,然后萃取、柱层析分离投下一步。先将10mmol4-(4-甲基-1,3-戊二烯)苯硫酚、20mmol碳酸氢钠在25mLDMF中搅拌半小时后，把上述所得产物慢慢滴加进去后反应5-10小时，反应结束后萃取、柱层析得淡黄色固体。将上述固体溶于DCM后，加入两当量乙酰氯及若干滴甲醇，室温反应2-8h,柱层析分离即可得产物2-[4-(4-甲基-1,3-戊二烯)苯硫基]乙醇。反应式如下：将所制备的化合物进行1H核磁共振(400MHz)检测，溶剂为CDCl3，检测结果见图8，结果显示所制备的化合物与式I所示结构一致。2、细胞毒性试验以及HIV抑制试验按照实施例1中方法得到本实施例制备的化合物CC50为121.33μM，EC50为41.91μM。结合CC50以及EC50的结果可以看出，本发明所述式I所示化合物具有显著的抑制HIV病毒增殖的活性，且对人正常淋巴细胞的毒性较低，符合药物学的规定，具有应用到制备抑制HIV病毒增殖的药物中的前景。实施例91、制备本发明所述式I所示化合物(R1为-H，R2为-H，R3为-CH＝CH2，R4为-H，R5为-H，X为-O-，Y为-SH，n为2)名称为3-[4-乙烯基苯氧基]-丙烷-1-硫醇。10mmol对羟基苯甲醛、11mmol1，3-二溴丙烷、12mmol碳酸钾和催化量的碘化钾在DMF中回流过夜，柱色谱分离得到1-(4-甲酰基苯基)-3-溴-丙醇；再将6mmol氢化钠和5mmol的甲基三苯基溴化膦溶解在THF中，冰浴冷却至0℃，往上述溶液中滴加10mmol1-(4-甲酰基苯基)-3-溴-丙醇的THF溶液,滴加完毕转移至室温反应10-15小时。然后柱色谱分离得1-(3-溴丙氧基)-4-乙烯基苯。最后将上述得到的产物与两当量的硫脲在乙醇中反应回流过夜，旋干得到的产物加入五当量氢氧化钠在水中回流反应，反应完全后，萃取，旋干，柱色谱分离即可得产物3-[4-乙烯基苯氧基]-丙烷-1-硫醇。反应式如下：将所制备的化合物进行1H核磁共振(400MHz)检测，溶剂为CDCl3，检测结果见图9，结果显示所制备的化合物与式I所示结构一致。2、细胞毒性试验以及HIV抑制试验按照实施例1中方法得到本实施例制备的化合物CC50大于200μM，EC50为32.90μM。结合CC50以及EC50的结果可以看出，本发明所述式I所示化合物具有显著的抑制HIV病毒增殖的活性，且对人正常淋巴细胞的毒性较低，符合药物学的规定，具有应用到制备抑制HIV病毒增殖的药物中的前景。实施例101、制备本发明所述式I所示化合物(R1为-H，R2为-H，R3为–(E)-CH＝CH-Ph，R4为-H，R5为-H，X为-O-，Y为-SH，n为2)名称为(E)-3-[4-苯乙烯基苯氧基]-丙烷-1-硫醇。10mmol对羟基苯甲醛、11mmol1，3-二溴丙烷、12mmol碳酸钾和催化量的碘化钾在DMF中回流过夜，柱色谱分离得到1-(4-甲酰基苯基)-3-溴-丙醇；再将6mmol氢化钠和5mmol的苄基三苯基溴化膦溶解在THF中，冰浴冷却至0℃，往上述溶液中滴加10mmol1-(4-甲酰基苯基)-3-溴-丙醇的THF溶液,滴加完毕转移至室温反应10-15小时。然后柱色谱分离得E-1-(3-溴丙氧基)-4-苯乙烯基苯。最后将上述得到的产物与两当量的硫脲在乙醇中反应回流过夜，旋干得到的产物加入五当量氢氧化钠在水中回流反应，反应完全后，萃取，旋干，柱色谱分离即可得产物(E)-3-[4-苯乙烯基苯氧基]-丙烷-1-硫醇。反应式如下：将所制备的化合物进行1H核磁共振(400MHz)检测，溶剂为CDCl3，检测结果见图10，结果显示所制备的化合物与式I所示结构一致。2、细胞毒性试验以及HIV抑制试验按照实施例1中方法得到本实施例制备的化合物CC50大于200μM，EC50为20.90μM。结合CC50以及EC50的结果可以看出，本发明所述式I所示化合物具有显著的抑制HIV病毒增殖的活性，且对人正常淋巴细胞的毒性较低，符合药物学的规定，具有应用到制备抑制HIV病毒增殖的药物中的前景。以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本
技术领域：
的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。参考文献[1]QiangWang,RuiruiWang,BaiqunZhang,etal.SmallorganicmoleculestargetingPCAFbromodomainaspotentinhibitorsofHIV-1replication[J].Med.Chem.Commun.,2013,4,737-740.[2]PingHu,XinghuiWang,BaiqunZhang,etal.FluorescencePolarizationfortheEvaluationofSmall-MoleculeInhibitorsofPCAFBRD/Tat-AcK50Association[J].ChemMedChem,2014,9,928-931.当前第1页1 2 3