一种微生物一步发酵转化制备地塞米松中间体的方法与流程

技术特征：

1.一种微生物一步发酵转化制备地塞米松中间体的方法，所述的地塞米松中间体是指地塞米松环氧水解物，其特征在于，该方法包括如下步骤：

（1）菌种培养

将简单节杆菌和巨大芽孢杆菌的斜面培养物分别做摇瓶种子培养，得到简单节杆菌种子培养液和巨大芽孢杆菌种子培养液，备用；

（2）发酵转化

将步骤（1）得到的简单节杆菌种子培养液接入已灭菌的发酵培养基中，接种量为10~15%；随后将巨大芽孢杆菌种子培养液接入发酵培养基中，接种量为1~5%，于温度30±1℃下培养18~24hr后投入底物中间体I，在转化温度为33±1℃下继续培养，至底物中间体I含量≤1.0%；

（3）提取、精制

发酵转化结束后，发酵液灭活后冷却到室温，抽滤得到滤饼，用二氯甲烷和甲醇的混合溶剂反复萃取滤饼，萃取液加活性炭脱色过滤后，滤液浓缩至干得到地塞米松环氧水解物粗品，再经精制得到地塞米松环氧水解物精品，

主要的结构式有：

，。

2.如权利要求1所述的一种微生物一步发酵转化制备地塞米松中间体的方法，其特征在于，所述的步骤（1）中摇瓶种子培养是指将简单节杆菌或巨大芽孢杆菌的斜面培养物接种于种子培养基中，于转速为160~180rpm和温度为30±1℃条件下培养18~30hr。

3.如权利要求1所述的一种微生物一步发酵转化制备地塞米松中间体的方法，其特征在于，所述的步骤（1）中摇瓶种子培养采用的种子培养基配比为：葡萄糖12g/L、酵母浸粉10g/L、KH₂PO₄ 1g/L、pH7.0~7.2。

4.如权利要求1所述的一种微生物一步发酵转化制备地塞米松中间体的方法，其特征在于，所述的步骤（2）中发酵培养基配比为：葡萄糖5g/L、玉米浆10g/L、蛋白胨1g/L、KH₂PO₄0.5g/L 、水1L、pH7.0~7.2。

5.如权利要求1所述的一种微生物一步发酵转化制备地塞米松中间体的方法，其特征在于，所述的步骤（2）中投入粉碎细度在80目以上的底物中间体I，投料浓度为不超过30g/L。

6.如权利要求1所述的一种微生物一步发酵转化制备地塞米松中间体的方法，其特征在于，所述的步骤（3）中：发酵液于温度85~95℃下灭活。

7.如权利要求1所述的一种微生物一步发酵转化制备地塞米松中间体的方法，其特征在于，所述的步骤（3）中：滤饼用15~20倍的二氯甲烷和甲醇混合溶剂反复萃取，其中，二氯甲烷和甲醇混合比例为4:1。

8.如权利要求1所述的一种微生物一步发酵转化制备地塞米松中间体的方法，其特征在于，所述的步骤（3）中的精制按下述方法操作：将地塞米松环氧水解物粗品用二氯甲烷和甲醇混合溶剂全溶后，常压浓缩至无二氯甲烷，继续减压浓缩至甲醇剩余1~1.5倍量，冷却到25℃以下离心或抽滤，重复精制若干次后得到白色晶体，即为地塞米松环氧水解物精品。