本发明涉及天然药物和药物化学领域，具体涉及一类一氧化氮供体型原小檗碱类衍生物。本发明还公开了这些一氧化氮供体型原小檗碱类衍生物的制备方法及其在制备抗肿瘤药物方面的应用。
背景技术：
：肿瘤是当前危害人类健康的主要疾病之一。全世界每年因恶性肿瘤死亡的人数达700万，占疾病致死原因的第2位。恶性肿瘤不是一种病，而是一类病，其特征为异常细胞的失控生长，并可由原位向周围组织浸润，或向远处器官转移，侵犯主要器官引起功能衰竭，最后导致死亡。由于恶性肿瘤的发病原因不明，目前尚无有效的预防办法，加上环境日趋恶化，人类寿命延长，恶性肿瘤的发病率居高不下。近年来，许多植物来源的抗肿瘤药物非常引起人们关注。它们不仅具有独特的生理活性，较好的疗效和较低的毒性，更是为化学合成及化学修饰提供了新颖的结构骨架。据统计，目前抗肿瘤药物大约有30％来源于自然资源和天然化合物的衍生物。有报道原小檗碱类生物碱特别是小檗碱或者巴马汀具有一定的抗肿瘤活性。它们可以抑制肿瘤细胞增殖与转移、诱导细胞凋亡与自噬和引起细胞循环阻滞等(GuamánOrtizLM，LombardiP，TillhonM，etal.Molecules2014，19：12349-12367)。此外，研究显示小檗碱在正常肝细胞具有较低的细胞毒性，在肿瘤细胞和正常细胞之间表现出了较好的选择性(LiuB，WangGS，YangJ，etal.PLoSOne2011，6：e21416-21425)。尽管上述这些优异的抗肿瘤性质使得原小檗碱类化合物成为潜在的抗癌候选药物，但其抗癌活性强度中等以及生物利用度较差等限制了它们的临床应用。一氧化氮(NO)气体分子在不同条件下具有促瘤和抗瘤的作用，这种双重作用取决于NO的生成浓度、时间和效应部位。持续高浓度的NO通过产生细胞毒性而发挥抗肿瘤活性。此外，许多NO杂合的药物在肿瘤细胞中不易产生多药耐药性。因此，为获得性能优异的新型抗癌活性候选药物，我们根据孪药原理，通过合适的连接臂，选择性地在原小檗碱类化合物结构中引入NO释放单元，以得到具有原小檗碱类和NO供体双重作用的新型抗肿瘤活性化合物，使得原小檗碱类NO供体衍生物兼具优异的抗肿瘤活性和较高的口服生物利用度，从而为进一步推进其临床应用提供研发基础。值得注意的是，目前现有技术中并未见将NO供体与原小檗碱类化合物结合制备衍生物的相关报道。技术实现要素：本发明的目的之一是提供一类NO供体与原小檗碱类化合物结合的一氧化氮供体型原小檗碱类衍生物或其可药用盐。本发明的另一个目的是提供制备上述一氧化氮供体型原小檗碱类衍生物或其可药用盐的方法。本申请的又一个目的是提供一种包含上述一氧化氮供体型原小檗碱类衍生物或其可药用盐的药物组合物。本申请的再一个目的是提供上述一氧化氮供体型原小檗碱类衍生物或其可药用盐在制备抗肿瘤药物中的应用。为了实现上述发明目的，本发明的一个技术方案提供了一类NO供体与原小檗碱类化合物结合的一氧化氮供体型原小檗碱类衍生物或其可药用盐，其中，一氧化氮供体型原小檗碱类衍生物具有如下通式(I)：其中R1和R2相同或不同，并独立的选自C1-5烷氧基或R1-R2为-OCH2O-或-OCH2CH2O-；R3选自C1-18直链或支链烷基、C2-18直链或支链酰氧基；Y选自氢原子、卤素、C1-12直链或支链烷基；X-选自卤离子、硫酸根离子、磷酸根离子、乙酸根离子、硝酸根离子、柠檬酸根离子、酒石酸根离子、乳酸根离子、马来酸根离子；其中R1和R2相同或不同，并独立的优选自C1-3烷氧基或R1-R2为-OCH2O-；R3优选自C6-12直链或支链烷基、C6-12直链或支链酰氧基；Y优选自氢原子、氟、溴、C6-10直链或支链烷基；X-优选自氯离子、溴离子、硫酸根离子、硝酸根离子、乙酸根离子。其中R1和R2相同或不同，并独立的更优选自-OCH3或R1-R2为-OCH2O-；R3更优选自C6-10直链烷基、C6-10直链酰氧基；Y更优选自氢原子、溴、C6-8直链烷基；X-更优选自溴离子、硝酸根离子。本发明的一氧化氮供体型原小檗碱类衍生物或其可药用盐，其选自：2，3-亚甲二氧基-10-甲氧基9-O-(2-硝氧乙基)原小檗碱溴化物；2，3-亚甲二氧基-10-甲氧基-9-O-(3-硝氧丙基)原小檗碱溴化物；2，3-亚甲二氧基-10-甲氧基-9-O-(4-硝氧丁基)原小檗碱溴化物；2，3-亚甲二氧基-10-甲氧基-9-O-(5-硝氧戊基)原小檗碱溴化物；2，3-亚甲二氧基-10-甲氧基-9-O-(6-硝氧己基)原小檗碱溴化物；2，3-亚甲二氧基-10-甲氧基-9-O-(8-硝氧辛基)原小檗碱溴化物；2，3-亚甲二氧基-10-甲氧基-9-O-(10-硝氧癸基)原小檗碱溴化物；2，3-亚甲二氧基-10-甲氧基-9-O-(12-硝氧十二烷基)原小檗碱溴化物；2，3-亚甲二氧基-10-甲氧基-9-O-(4-硝氧丁酰基)原小檗碱溴化物；2，3-亚甲二氧基-10-甲氧基-9-O-(6-硝氧己酰基)原小檗碱溴化物；2，3-亚甲二氧基-10-甲氧基-9-O-(8-硝氧辛酰基)原小檗碱溴化物；2，3-亚甲二氧基-10-甲氧基-9-O-(10-硝氧癸酰基)原小檗碱溴化物；2，3-亚甲二氧基-10-甲氧基-13-溴-9-O-(8-硝氧辛基)原小檗碱溴化物；2，3-亚甲二氧基-10-甲氧基-13-辛基-9-O-(4-硝氧丁基)原小檗碱硝酸盐；2，3-亚甲二氧基-10-甲氧基-13-辛基-9-O-(6-硝氧己基)原小檗碱硝酸盐；2，3-亚甲二氧基-10-甲氧基-13-辛基-9-O-(6-硝氧己酰基)原小檗碱硝酸盐；2，3，10-三甲氧基-9-O-(8-硝氧辛基)原小檗碱溴化物；2，3，10-三甲氧基-9-O-(10-硝氧癸基)原小檗碱溴化物；2，3，10-三甲氧基-9-O-(12-硝氧十二烷基)原小檗碱溴化物；2，3，10-三甲氧基-13-溴-9-O-(8-硝氧辛基)原小檗碱溴化物；2，3，10-三甲氧基-13-溴-9-O-(10-硝氧癸基)原小檗碱溴化物；2，3，10-三甲氧基-13-溴-9-O-(12-硝氧十二烷基)原小檗碱溴化物。本发明的另一个技术方案提供了上述一氧化氮供体型原小檗碱衍生物或其可药用盐的制备方法，其中，通式(I)所示结构化合物的制备包括下列步骤：a)任选地，原小檗碱化合物在真空高温条件下脱去9-位甲基得9-O-去甲基原小檗碱离子，再直接与二溴C1-18烷烃在有机溶剂中加热制得9-O-溴C1-18烷基原小檗碱中间体；b)将9-O-溴代C1-18烷基原小檗碱以甲醇为溶剂通过硼氢化钠还原制得9-O-溴C1-18烷基四氢原小檗碱中间体；c)任选地，原小檗碱化合物在真空高温条件下9-位去甲基，并用1NHCl乙醇溶液酸化至PH＝4～5制得原小檗红碱，然后通过步骤b)的方法制得四氢原小檗红碱中间体；d)将四氢原小檗红碱在二氯甲烷中与溴代C2-18烷基羧酸催化酯化制得9-O-溴C2-18烷酰基四氢原小檗碱中间体；e)将步骤b)或d)制得的9-O-溴C1-18烷基或C2-18烷酰基四氢原小檗碱在无水乙腈中与硝酸银加热回流制得9-O-硝氧C1-18烷基或C2-18烷酰基四氢原小檗碱中间体；f)将9-O-硝氧C1-18烷基或C2-18烷酰基四氢原小檗碱在有机溶剂中被氧化剂氧化，制得目标产物9-O-硝氧C1-18烷基或C2-18烷酰基原小檗碱；g)将9-O-硝氧C1-18烷基或C2-18烷酰基原小檗碱在有机溶剂中被卤化剂卤代，制得目标产物13-卤-9-O-硝氧C1-18烷基或C2-18烷酰基原小檗碱；h)任选地，以甲醇为溶剂，在无机碱存在下，用硼氢化钠还原原小檗碱为二氢原小檗碱；再以含水乙醇为溶剂，在乙酸存在下与C1-12烷基醛反应制得13-C1-12烷基原小檗碱中间体；i)将13-C1-12烷基原小檗碱经过步骤a)或步骤c)和d)分别制得13-C1-12烷基-9-O-溴C1-18烷基或C2-18烷酰基四氢原小檗碱中间体；j)将13-C1-12烷基-9-O-溴C1-18烷基或C2-18烷酰基四氢原小檗碱与硝酸银加热回流制得目标产物13-C1-12烷基-9-O-硝氧C1-18烷基或C2-18烷酰基原小檗碱。优选地，步骤a)中的9-O-去甲基原小檗碱离子与二溴C1-18烷烃的摩尔比为1∶3～15；优选地，步骤a)中的有机溶剂为乙腈，N，N-二甲基甲酰胺，二甲亚砜或N-甲基2-吡咯烷酮；优选地，步骤a)中的加热的温度为50～100℃；优选地，步骤b)中的9-O-溴C1-18烷基原小檗碱与硼氢化钠的摩尔比1∶1.5～10；优选地，步骤d)中的催化酯化的催化剂为EDCI与DMAP，DCC与DMAP，或EDCI与HOBt；优选地，步骤e)中的9-O-溴C1-18烷基四氢原小檗碱或9-O-溴C2-18烷酰基四氢原小檗碱与硝酸银的摩尔比1∶1.5～5；优选地，步骤f)中的氧化剂为单质卤，N-卤代丁二酰亚胺，DQQ或双氧水；优选地，步骤f)中的9-O-硝氧C1-18烷基或C2-18烷酰基四氢原小檗碱中间体与氧化剂的摩尔比1∶1.1～5；优选地，步骤f)中的有机溶剂为氯仿，二氯甲烷，乙酸，N，N-二甲基甲酰胺或四氢呋喃；优选地，步骤g)中的卤化剂为单质卤或N-卤代丁二酰亚胺；优选地，步骤g)中的9-O-硝氧C1-18烷基或C2-18烷酰基原小檗碱与卤化剂的摩尔比1∶1.1～5；优选地，步骤g)中的有机溶剂为氯仿，二氯甲烷，乙酸或N，N-二甲基甲酰胺；优选地，步骤h)中的无机碱为K2CO3，Na2CO3，NaOH，KOH或其组合物；优选地，步骤h)中的原小檗红碱与硼氢化钠的摩尔比1∶0.5～3；优选地，步骤h)中的含水乙醇中乙醇所占的百分数为50～95％；优选地，步骤h)中的乙酸与含水乙醇的体积比1∶1～10；优选地，步骤h)中的二氢原小檗碱与C1-12烷基醛的摩尔比1∶3～15；优选地，步骤j)中的13-C1-12烷基-9-O-溴C1-18烷基或C2-18烷酰基四氢原小檗碱与硝酸银的摩尔比为1∶3～10。本发明的一氧化氮供体型原小檗碱衍生物可按下述方法纯化：任选地，将制得的反应产物混合物冷却至室温，过滤得到黄色固体粗品，再用95％的乙醇重结晶，过滤得黄色固体产物纯品；任选地，将制得的反应产物混合物加水，然后用二氯甲烷萃取，合并二氯甲烷并干燥，过滤，减压蒸去溶剂，得黄色粗品，用二氯甲烷和甲醇混合溶剂为展开剂经硅胶柱层析得黄色固体产物纯品。本申请的又一个技术方案提供了一种含有上述一氧化氮供体型原小檗碱类衍生物及其可药用盐的药物组合物，其包括通式(I)所示结构的化合物或其可药用盐，及可药用载体。本申请的又一个技术方案提供了上述一氧化氮供体型原小檗碱类衍生物及其可药用盐在制备抗肿瘤药物中的应用。与现有技术相比，本申请具有如下有益效果：在原小檗碱类化合物结构中通过脂溶性烷基连接臂引入硝酸酯类NO供体，一方面提高了原小檗碱类化合物的生物利用度；另一方面，硝酸酯作为一氧化氮释放单元可释放出NO，与原小檗碱类化合物起协同抗肿瘤作用。药理试验证明，本发明的一氧化氮供体型原小檗碱类衍生物具有有效地抗肿瘤作用，可以用于制备抗肿瘤药物。优选治疗的肿瘤疾病是肝癌、结肠癌、胃癌、早幼粒白血病、肺癌、黑色素瘤。具体实施方式下面结合实施例对本发明做进一步阐述。这些实施例仅是出于解释说明的目的，本发明的保护范围并不受其限制。实施例12，3-亚甲二氧基-10-甲氧基9-O-(2-硝氧乙基)原小檗碱溴化物的制备：1)2，3-亚甲二氧基-10-甲氧基9-O-(2-溴乙基)四氢原小檗碱中间体的制备将1mmol小檗碱在温度190℃，真空度20～30mmHg下热解脱去9-位甲基，然后直接在5mL无水乙腈中与5mmol的1，2-二溴乙烷回流反应8h，冷却至室温，过滤得2，3-亚甲二氧基-10-甲氧基9-O-(2-溴乙基)原小檗碱粗品，产率88％。MS(ESI)m/z：428.01[M-Br]+.2)2，3-亚甲二氧基-10-甲氧基9-O-(2-溴乙基)四氢原小檗碱中间体的制备将0.8mmol2，3-亚甲二氧基-10-甲氧基9-O-(2-溴乙基)原小檗碱粗品直接溶解在5mL甲醇中，加入3mmol的硼氢化钠，室温反应1h，将反应液旋干，用10mL二氯甲烷溶解，依次用水，饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压旋去有机溶剂，以石油醚∶乙酸乙酯＝8∶1(V/V)为洗脱剂柱层析得到淡黄色液体产物，产率为82％。MS(ESI)m/z：432.07[M+H]+.3)2，3-亚甲二氧基-10-甲氧基9-O-(2-硝氧乙基)四氢原小檗碱中间体的制备将0.6mmol2，3-亚甲二氧基-10-甲氧基9-O-(2-溴乙基)四氢原小檗碱溶于5mL无水乙腈中，加入1.2mmol的硝酸银回流反应4h，将反应液旋干，用10mL二氯甲烷溶解，依次用水，饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压旋去有机溶剂，以石油醚∶乙酸乙酯＝4∶1(V/V)为洗脱剂柱层析得到淡黄色液体产物，产率为81％。MS(ESI)m/2：415.12[M+H]+.4)2，3-亚甲二氧基-10-甲氧基9-O-(2-硝氧乙基)原小檗碱的制备将0.5mmol2，3-亚甲二氧基-10-甲氧基9-O-(2-硝氧乙基)四氢原小檗碱溶于5mL氯仿中，加入1.5mmolN-溴代丁酰亚胺，在60℃下反应1h，冷却至室温，待固体析出后过滤得黄色固体粗品。进一步用2mL的95％乙醇重结晶得黄色固体纯品，产率65％。1HNMR(300MHz，DMSO)1HNMR(300MHz，DMSO)δ9.88(s，1H)，8.96(s，1H)，8.22(d，J＝9.2Hz，1H)，8.03(d，J＝9.2Hz，1H)，7.81(s，1H)，7.11(s，1H)，6.18(s，2H)，5.05-4.98(m，2H)，4.98-4.87(m，2H)，4.64-4.56(m，2H)，4.06(s，3H)，3.28-3.14(m，2H)；13CNMR(75MHz，DMSO)δ150.09，149.78，147.61，145.32，141.88，137.42，132.83，130.57，126.39，123.86，121.29，120.31，120.11，108.38，105.36，102.06，73.07，69.86，57.01，55.26，26.26；HRMS(ESI)calculatedforC21H19N2O7[M-Br]+411.1187，found411.1193.实施例22，3-亚甲二氧基-10-甲氧基9-O-(3-硝氧丙基)原小檗碱溴化物的制备用1，3-二溴丙烷代替1，2-二溴乙烷，其他条件与实施例1相同，制得黄色固体产物，总产率为28％。1HNMR(300MHz，DMSO)δ9.83(s，1H)，8.96(s，1H)，8.21(d，J＝9.2Hz，1H)，8.01(d，J＝9.1Hz，1H)，7.81(s，1H)，7.10(s，1H)，6.18(s，2H)，4.95(t，J＝6.0Hz，2H)，4.84(t，J＝6.3Hz，2H)，4.39(t，J＝6.1Hz，2H)，4.05(s，3H)，3.22(t，J＝5.9Hz，2H)，2.35-2.27(m，2H)；13CNMR(75MHz，DMSO)δ150.16，149.73，147.58，145.31，142.29，137.33，132.88，130.57，126.42，123.52，121.38，120.33，120.10，108.35，105.35，102.05，71.07，70.61，56.98，55.19，27.03，26.24；HRMS(ESI)calculatedforC22H21N2O7[M-Br]+425.1343，found425.1354.实施例32，3-亚甲二氧基-10-甲氧基9-O-(4-硝氧丁基)原小檗碱溴化物的制备用1，4-二溴丁烷代替1，2-二溴乙烷，其他条件与实施例1相同，制得黄色固体产物，总产率为31％。1HNMR(300MHz，DMSO)δ9.78(s，1H)，8.95(s，1H)，8.21(d，J＝9.1Hz，1H)，8.00(d，J＝9.2Hz，1H)，7.81(s，1H)，7.10(s，1H)，6.18(s，2H)，5.02-4.88(m，2H)，4.71-4.60(m，2H)，4.36-4.26(m，2H)，4.06(s，3H)，3.27-3.16(m，2H)，1.96(s，4H)；13CNMR(75MHz，DMSO)δ150.32，149.72，147.57，145.23，142.54，137.29，132.89，130.57，126.43，123.41，121.48，120.34，120.12，108.34，105.34，102.05，73.63，73.53，56.96，55.24，26.26，25.79，22.81；HRMS(ESI)calculatedforC23H23N2O7[M-Br]+439.1500，found439.1505.实施例42，3-亚甲二氧基-10-甲氧基9-O-(5-硝氧戊基)原小檗碱溴化物的制备用1，5-二溴戊烷代替1，2-二溴乙烷，其他条件与实施例1相同，制得黄色固体产物，总产率为34％。1HNMR(300MHz，DMSO)δ9.77(s，1H)，8.95(s，1H)，8.21(d，J＝9.2Hz，1H)，8.00(d，J＝9.1Hz，1H)，7.81(s，1H)，7.10(s，1H)，6.18(s，2H)，4.95(t，J＝6.0Hz，2H)，4.59(t，J＝6.5Hz，2H)，4.29(t，J＝6.5Hz，2H)，4.06(s，3H)，3.21(t，J＝5.9Hz，2H)，1.97-1.87(m，2H)，1.84-1.75(m，2H)，1.64-1.54(m，2H).13CNMR(75MHz，DMSO)δ150.34，149.71，147.57，145.21，142.67，137.29，132.91，130.56，126.45，123.32，121.53，120.36，120.13，108.34，105.35，102.04，73.86，73.80，56.95，55.25，28.93，26.25，25.77，21.58；HRMS(ESI)calculatedforC24H25N2O7[M-Br]+453.1656，found453.1657.实施例52，3-亚甲二氧基-10-甲氧基9-O-(6-硝氧己基)原小檗碱溴化物的制备用1，6-二溴己烷代替1，2-二溴乙烷，其他条件与实施例1相同，制得黄色固体产物，总产率为27％。1HNMR(300MHz，DMSO)δ9.75(s，1H)，8.95(s，1H)，8.20(d，J＝9.2Hz，1H)，7.99(d，J＝9.1Hz，1H)，7.80(s，1H)，7.10(s，1H)，6.18(s，2H)，5.02-4.89(m，2H)，4.55(t，J＝6.5Hz，2H)，4.28(t，J＝6.6Hz，2H)，4.05(s，3H)，3.26-3.16(m，2H)，1.92-1.87(m，2H)，1.75-1.70(m，2H)，1.62-1.38(m，4H)；13CNMR(75MHz，DMSO)δ150.33，149.71，147.57，145.21，142.72，137.29，132.92，130.57，126.48，123.27，121.54，120.37，120.13，108.34，105.36，102.04，74.00，73.81，56.96，55.25，29.23，26.26，25.98，24.84，24.80；HRMS(ESI)calculatedforC25H27N2O7[M-Br]+467.1813，found467.1817.实施例62，3-亚甲二氧基-10-甲氧基9-O-(8-硝氧辛基)原小檗碱溴化物的制备用1，8-二溴辛烷代替1，2-二溴乙烷，其他条件与实施例1的步骤1)-3)相同，与实施例1的步骤4)区别在于纯化方法：将反应液加水，用二氯甲烷萃取，有机层用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压蒸去溶剂，得黄色粗品，用二氯甲烷∶甲醇＝40∶1(V/V)为展开剂经硅胶柱层析得黄色固体产物，总产率为33％。1HNMR(300MHz，DMSO)δ9.76(s，1H)，8.96(s，1H)，8.18(d，J＝9.2Hz，1H)，7.99(d，J＝9.1Hz，1H)，7.77(s，1H)，7.09(s，1H)，6.17(s，2H)，4.98(s，2H)，4.53(t，J＝6.5Hz，2H)，4.27(t，J＝6.6Hz，2H)，4.05(s，3H)，3.22(s，2H)，1.97-1.80(m，2H)，1.77-1.60(m，2H)，1.49(s，2H)，1.37(s，6H)；13CNMR(75MHz，DMSO)δ150.34，149.71，147.58，145.23，142.76，137.29，132.92，130.57，126.50，123.26，121.56，120.38，120.14，108.34，105.36，102.04，74.16，73.85，56.96，55.25，29.41，28.59，28.49，26.26，25.98，25.11，25.02；HRMS(ESI)calculatedforC27H31N2O7[M-Br]+495.2126，found495.2133.实施例72，3-亚甲二氧基-10-甲氧基9-O-(10-硝氧癸基)原小檗碱溴化物的制备用1，10-二溴癸烷代替1，8-二溴辛烷，其他条件与实施例6相同，制得黄色固体产物，总产率为31％。1HNMR(300MHz，DMSO)δ9.76(s，1H)，8.95(s，1H)，8.20(d，J＝9.2Hz，1H)，7.99(d，J＝9.1Hz，1H)，7.80(s，1H)，7.10(s，1H)，6.18(s，2H)，4.95(t，J＝5.9Hz，2H)，4.51(t，J＝6.6Hz，2H)，4.28(t，J＝6.8Hz，2H)，4.05(s，3H)，3.21(t，J＝5.9Hz，2H)，1.92-1.83(m，2H)，1.68-1.61(m，2H)，1.56-1.42(m，2H)，1.31(s，10H)；13CNMR(75MHz，DMSO)δ150.34，149.71，147.58，145.23，142.76，137.29，132.93，130.57，126.50，123.25，121.56，120.37，120.14，108.33，105.36，102.04，74.18，73.83，56.96，55.25，29.45，28.89，28.78，28.51，26.27，25.97，25.21，25.04；HRMS(ESI)calculatedforC29H35N2O7[M-Br]+523.2439，found523.2451.实施例82，3-亚甲二氧基-10-甲氧基9-O-(12-硝氧十二烷基)原小檗碱溴化物的制备用1，12-二溴十二烷代替1，8-二溴辛烷，其他条件与实施例6相同，制得黄色固体产物，总产率为33％。1HNMR(300MHz，DMSO)δ9.76(s，1H)，8.95(s，1H)，8.20(d，J＝9.1Hz，1H)，7.99(d，J＝9.2Hz，1H)，7.81(s，1H)，7.10(s，1H)，6.18(s，2H)，4.95(s，2H)，4.50(t，J＝6.5Hz，2H)，4.28(t，J＝6.7Hz，2H)，4.05(s，3H)，3.21(s，2H)，1.95-1.76(m，2H)，1.70-1.55(m，2H)，1.48(s，2H)，1.27(s，14H)；13CNMR(75MHz，DMSO)δ150.32，149.70，147.57，145.22，142.75，137.26，132.92，130.54，126.47，123.24，121.55，120.36，120.14，108.32，105.35，102.04，74.17，73.81，56.95，55.24，29.46，29.01，28.98，28.91，28.82，28.51，26.27，25.97，25.23，25.03；HRMS(ESI)calculatedforC31H39N2O7[M-Br]+551.2752，found551.2759.实施例92，3-亚甲二氧基-10-甲氧基9-O-(4-硝氧丁酰基)原小檗碱溴化物的制备1)2，3-亚甲二氧基-10-甲氧基-9-O-四氢原小檗红碱中间体的制备将1mmol小檗碱在温度190℃，真空度20～30mmHg下热解脱去9-位甲基后直接在5mL1NHCl乙醇溶液中室温搅拌1h，旋干反应液得小檗红碱，然后直接溶解在5mL甲醇中，加入3mmol的硼氢化钠，室温反应1h，将反应液旋干，用10mL二氯甲烷溶解，依次用水，饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压旋去有机溶剂，以石油醚∶乙酸乙酯＝4∶1(V/V)为洗脱剂柱层析得到红色液体产物，产率为61％。MS(ESI)m/z：326.29[M+H]+.2)2，3-亚甲二氧基-10-甲氧基9-O-(4-溴丁酰基)四氢原小檗碱中间体的制备将0.6mmol2，3-亚甲二氧基-10-甲氧基9-O-四氢原小檗红碱与0.72mmol4-溴丁酸5mL溶解二氯甲烷中，再加入0.72mmolEDCI和0.06mmolDMAP，室温反应6h，反应液用10mL二氯甲烷稀释，依次用水，饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压旋去有机溶剂，以石油醚∶乙酸乙酯＝4∶1(V/V)为洗脱剂柱层析得到淡黄色液体产物，产率为85％。MS(ESI)m/z：474.04[M+H]+.3)2，3-亚甲二氧基-10-甲氧基9-O-(4-硝氧丁酰基)四氢原小檗碱中间体的制备用2，3-亚甲二氧基-10-甲氧基9-O-(4-溴丁酰基)四氢原小檗红碱代替2，3-亚甲二氧基-10-甲氧基9-O-(2-溴乙基)四氢原小檗碱，其他条件与实施例1的步骤3)相同，制得淡黄色液体产物，产率为85％。MS(ESI)m/z：457.13[M+H]+.4)2，3-亚甲二氧基-10-甲氧基-9-O-(4-硝氧丁酰基)原小檗碱的制备用2，3-亚甲二氧基-10-甲氧基-9-O-(4-硝氧丁酰基)四氢原小檗碱代替2，3-亚甲二氧基-10-甲氧基9-O-(2-硝氧乙基)四氢原小檗碱，其他条件与实施例1的步骤4)相同，制得黄色固体产物，产率为61％。1HNMR(300MHz，DMSO)δ9.90(s，1H)，9.04(s，1H)，8.30(d，J＝9.0Hz，1H)，8.21(d，J＝9.5Hz，1H)，7.82(s，1H)，7.11(s，1H)，6.19(s，2H)，4.91(m，2H)，4.70(t，J＝6.1Hz，2H)，4.04(s，3H)，3.23(m，2H)，3.02(t，J＝7.1Hz，2H)，2.18-2.10(m，2H).13CNMR(75MHz，DMSO)δ169.92，150.29，149.98，147.70，144.34，138.10，133.28，132.87，130.78，126.77，125.85，121.01，120.53，120.28，108.39，105.48，102.12，72.62，57.21，55.39，29.57，26.14，21.62.MS(ESI)m/z：453.10[M-Br]+.实施例102，3-亚甲二氧基-10-甲氧基-9-O-(6-硝氧己酰基)原小檗碱溴化物的制备用6-溴丁酸代替4-溴丁酸，其他条件与实施例9相同，制得黄色固体产物，总产率为22％。1HNMR(300MHz，DMSO)δ9.86(s，1H)，9.03(s，1H)，8.30(d，J＝9.3Hz，1H)，8.20(d，J＝9.2Hz，1H)，7.82(s，1H)，7.11(s，1H)，6.19(s，2H)，5.01-4.85(m，2H)，4.58(t，J＝6.4Hz，2H)，4.04(s，3H)，3.29-3.14(m，2H)，2.88(t，J＝7.2Hz，2H)，1.84-1.71(m，4H)，1.59-1.47(m，2H)；13CNMR(75MHz，DMSO)δ170.45，150.30，149.94，147.66，144.29，138.04，133.42，132.85，130.76，126.62，125.81，121.07，120.51，120.28，108.38，105.45，102.11，73.69，57.15，55.34，32.94，26.13，25.77，24.48，23.77；HRMS(ESI)calculatedforC25H25N2O8[M-Br]+481.1605，found481.1607.实施例112，3-亚甲二氧基-10-甲氧基-9-O-(8-硝氧辛酰基)原小檗碱溴化物的制备用8-溴辛酸代替4-溴丁酸，其他条件与实施例9相同，制得黄色固体产物，总产率为26％。1HNMR(300MHz，DMSO)δ9.86(s，1H)，9.03(s，1H)，8.30(d，J＝9.2Hz，1H)，8.20(d，J＝9.3Hz，1H)，7.82(s，1H)，7.11(s，1H)，6.19(s，2H)，5.00-4.85(m，2H)，4.54(t，J＝6.6Hz，2H)，4.03(s，3H)，3.28-3.19(m，2H)，2.86(t，J＝7.3Hz，2H)，1.81-1.65(m，4H)，1.41(s，6H)；13CNMR(75MHz，DMSO)δ170.57，150.32，149.94，147.66，144.31，138.04，133.51，132.89，130.78，126.61，125.85，121.10，120.53，120.30，108.38，105.48，102.10，73.83，57.17，55.29，33.12，28.17，28.08，26.13，25.96，24.94，24.09；HRMS(ESI)calculatedforC27H29N2O8[M-Br]+509.1918，found509.1928.实施例122，3-亚甲二氧基-10-甲氧基-9-O-(10-硝氧癸酰基)原小檗碱溴化物的制备用10-溴癸酸代替4-溴丁酸，其他条件与实施例9相同，制得黄色固体产物，总产率为24％。1HNMR(300MHz，DMSO)δ9.85(s，1H)，9.03(s，1H)，8.29(d，J＝9.3Hz，1H)，8.20(d，J＝9.1Hz，1H)，7.82(s，1H)，7.11(s，1H)，6.19(s，2H)，4.99-4.85(m，2H)，4.52(t，J＝6.5Hz，2H)，4.03(s，3H)，3.29-3.16(m，2H)，2.85(t，J＝7.3Hz，2H)，1.80-1.62(m，4H)，1.45-1.23(m，10H)；13CNMR(75MHz，DMSO)δ170.55，150.32，149.95，147.68，144.30，138.05，133.51，132.87，130.76，126.59，125.85，121.09，120.51，120.29，108.38，105.46，102.11，73.83，57.15，55.33，33.13，28.70，28.59，28.46，28.26，26.14，25.98，25.03，24.21；HRMS(ESI)calculatedforC29H33N2O8[M-Br]+537.2231，found537.2236.实施例132，3-亚甲二氧基-10-甲氧基-13-溴-9-O-(8硝氧辛基)原小檗碱溴化物的制备将0.5mmol2，3-亚甲二氧基-10-甲氧基9-O-(8-硝氧辛基)原小檗碱溴化物溶于5mL氯仿中，加入3.0mmolN-溴代丁酰亚胺，在60℃下反应3h，将反应液加水，用二氯甲烷萃取，有机层用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压蒸去溶剂，得黄色粗品，用二氯甲烷∶甲醇＝80∶1(V/V)为展开剂经硅胶柱层析得黄色固体产物，产率为44％。1HNMR(300MHz，CDCl3)δ10.50(s，1H)，8.17(d，J＝9.3Hz，1H)，7.95(d，J＝9.4Hz，1H)，7.81(s，1H)，6.87(s，1H)，6.12(s，2H)，5.29(s，2H)，4.56(t，J＝6.8Hz，2H)，4.46(t，J＝6.7Hz，2H)，4.09(s，3H)，3.25(s，2H)，2.12-1.98(m，2H)，1.80-1.66(m，2H)，1.55(s，2H)，1.41(s，6H)；13CNMR(75MHz，CDCl3)δ151.33，150.41，147.16，146.54，145.57，136.26，134.26，132.98，126.20，123.43，121.55，119.92，119.13，110.85，108.21，102.23，75.83，73.61，58.10，57.01，30.15，29.16，29.02，28.57，26.69，25.56，25.53；HRMS(ESI)calculatedforC27H30BrN2O7[M-Br]+573.1231，found573.1230.实施例142，3-亚甲二氧基-10-甲氧基-13-辛基-9-O-(4-硝氧丁基)原小檗碱硝酸盐的制备1)2，3-亚甲二氧基-9，10-二甲氧基-13-辛基原小檗碱氯化物中间体的制备将溶有2.2mmol硼氢化钠的5％氢氧化钠溶液(0.5mL)逐滴加入至含2mmol小檗碱和6mmol碳酸钾的10mL甲醇溶液中，室温反应2h，抽滤得二氢小檗碱粗品，然后直接溶解在10mL80％乙醇中，依次加入12mmol的正辛醛，2mL乙酸，加热至90℃回流6h，将反应液减压浓缩，得深红色油状物，加入5mL乙醚搅拌2h，过滤，向乙醚层加入5％的盐酸溶液酸化至PH＝1～2，继续搅拌2h，过滤，干燥后得黄色固体产物，产率51％。MS(ESI)m/z：448.19[M-Cl]+.2)2，3-亚甲二氧基-10-甲氧基-13-辛基-9-O-(4-溴丁基)四氢原小檗碱的制备用2，3-亚甲二氧基-9，10-二甲氧基-13-辛基原小檗碱氯化物代替小檗碱，1，4-二溴丁烷代替1，2-二溴乙烷，其他条件与实施例1的步骤1)-2)相同，制得黄色固体产物，总产率为68％。MS(ESI)m/z：572.20[M+H]+。3)2，3-亚甲二氧基-10-甲氧基-13-辛基-9-O-(4-硝氧丁基)原小檗碱硝酸盐的制备将0.6mmol2，3-亚甲二氧基-10-甲氧基9-O-(2-溴丁基)四氢原小檗碱溶于5mL无水乙腈中，加入2.4mmol的硝酸银回流反应4h，将反应液旋干，用10mL二氯甲烷溶解，依次用水，饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压旋去有机溶剂，以二氯甲烷∶甲醇＝50∶1(V/V)为洗脱剂柱层析得到黄色固体产物，产率为61％。1HNMR(300MHz，CDCl3)δ10.39(s，1H)，7.96(d，J＝9.40，1H)7.92(d，J＝9.39，1H)，7.12(s，1H)，6.90(s，1H)，6.12(s，2H)，5.19(s，2H)，4.66(t，J＝6.3Hz，2H)，4.50(t，J＝6.3Hz，2H)，4.09(s，3H)，3.39-3.21(m，2H)，3.14(s，2H)，2.22-2.05(m，4H)，1.98-1.76(m，2H)，1.60-1.45(m，2H)，1.30(s，8H)，0.89(t，J＝6.6Hz，3H).13CNMR(75MHz，CDCl3)δ150.38，149.73，147.25，145.37，145.25，136.07，134.47，133.80，133.01，125.21，122.22，120.35，120.28，109.08，108.50，102.14，74.38，73.62，57.53，56.92，31.72，31.17，29.88，29.52，29.12，28.99，28.66，26.34，23.54，22.55，14.05.MS(ESI)m/z：551.20[M-NO3]+.实施例152，3-亚甲二氧基-10-甲氧基-13-辛基-9-O-(6-硝氧己基)原小檗碱硝酸盐的制备用1，6-二溴己烷代替1，4-二溴丁烷，其他条件与实施例14相同，制得黄色固体产物，总产率为21％。1HNMR(300MHz，CDCl3)δ10.24(s，1H)，8.06-7.92(m，2H)，7.13(s，1H)，6.90(s，1H)，6.13(s，2H)，5.18(s，2H)，4.53-4.40(m，4H)，4.11(s，3H)，3.40-3.24(m，2H)，3.17(s，2H)，2.13-1.95(m，2H)，1.94-1.71(m，4H)，1.64-1.46(m，6H)，1.43-1.16(m，8H)，0.88(t，J＝6.9Hz，3H)；13CNMR(75MHz，CDCl3)δ150.34，149.62，147.16，144.89，144.79，135.91，134.56，133.63，132.90，125.51，122.08，120.30，120.20，109.01，108.40，102.10，74.96，73.56，57.65，56.96，31.62，31.08，29.78，29.68，29.41，29.03，28.90，28.58，26.55，25.30，25.19，22.46，13.98；MS(ESI)m/z：579.20[M-NO3]+.实施例162，3-亚甲二氧基-10-甲氧基-13-辛基-9-O-(6-硝氧己酰基)原小檗碱硝酸盐的制备1)2，3-亚甲二氧基-10-甲氧基-13-辛基-9-O-(6-溴己酰基)四氢原小檗碱用2，3-亚甲二氧基-9，10-二甲氧基-13-辛基原小檗碱氯化物代替小檗碱，6-溴己酸代替4-溴丁酸，其他条件与实施例9的步骤1)-2)相同，制得黄色固体产物，总产率为53％。MS(ESI)m/z：614.19[M+H]+.2)2，3-亚甲二氧基-10-甲氧基-13-辛基-9-O-(6-硝氧己酰基)原小檗碱硝酸盐的制备用2，3-亚甲二氧基-10-甲氧基-13-辛基-9-O-(6-硝氧己酰基)四氢原小檗碱代替2，3-亚甲二氧基-10-甲氧基-13-辛基-9-O-(6-硝氧丁基)四氢原小檗碱，其他条件与实施例14的步骤3)相同，制得黄色固体产物，总产率为56％。1HNMR(300MHz，CDCl3)δ10.91(s，1H)，8.16(d，J＝9.4Hz，1H)，7.99(d，J＝9.5Hz，1H)，7.13(s，1H)，6.89(s，1H)，6.13(s，2H)，5.26(s，2H)，4.50(t，J＝6.5Hz，2H)，4.07(s，3H)，3.42-3.24(m，2H)，3.16(t，J＝7.2Hz，2H)，3.07(s，2H)，1.96-1.77(m，6H)，1.69-1.57(m，2H)，1.56-1.45(m，2H)，1.43-1.19(m，8H)，0.89(t，J＝6.6Hz，3H)；13CNMR(75MHz，CDCl3)δ171.34，150.73，149.90，147.36，144.96，140.02，136.50，134.80，133.81，132.69，124.58，123.55，122.03，120.03，109.07，108.52，102.22，73.39，57.12，57.07，33.61，31.70，31.32，29.88，29.47，29.10，28.97，28.53，26.46，24.93，24.01，22.53，14.04；MS(ESI)m/z：593.21[M-NO3]+.实施例172，3，10-三甲氧基-9-O-(8-硝氧辛基)原小檗碱溴化物的制备用巴马汀代替小檗碱，其他条件与实施例6相同，制得黄色固体产物，产率为27％。1HNMR(300MHz，CDCl3)δ9.92(s，1H)，8.91(s，1H)，8.08(d，J＝8.5Hz，1H)，7.δ4(d，J＝8.6Hz，1H)，7.50(s，1H)，6.67(s，1H)，5.16(s，2H)，4.47(t，J＝6.6Hz，2H)，4.37(t，J＝6.6Hz，2H)，4.10(s，3H)，4.00(s，3H)，3.95(s，3H)，3.30(s，2H)，2.03-1.91(m，2H)，1.81-1.68(m，2H)，1.54(s，2H)，1.42(s，6H)；13CNMR(75MHz，CDCl3)δ151.56，149.97，149.07，144.76，143.17，137.38，133.55，127.49，125.27，123.87，121.80，120.76，118.71，110.26，108.60，74.86，73.49，57.10，56.65，56.25，56.07，30.05，29.10，28.97，27.05，26.62，25.61，25.52；HRMS(ESI)calculatedforC28H35N2O7[M-Br]+511.2439，found511.2449.实施例182，3，10-三甲氧基-9-O-(8-硝氧癸基)原小檗碱溴化物的制备用1，10-二溴癸烷代替1，8-二溴辛烷，其他条件与实施例17相同，制得黄色固体产物，产率为22％。1HNMR(300MHz，CDCl3)δ9.90(s，1H)，9.00(s，1H)，8.11(d，J＝9.1Hz，1H)，7.62(d，J＝9.0Hz，1H)，7.53(s，1H)，7.28(s，1H)，6.66(s，1H)，5.17(s，2H)，4.46(t，J＝6.7Hz，2H)，4.38(t，J＝6.8Hz，2H)，4.11(s，3H)，4.00(s，3H)，3.95(s，3H)，3.36-3.27(m，2H)，2.03-1.90(m，2H)，1.79-1.67(m，2H)，1.52(s，2H)，1.34(s，10H)；13CNMR(75MHz，CDCl3)δ151.48，149.88，149.01，144.53，143.04，137.30，133.55，127.35，125.16，123.90，121.74，120.87，118.68，110.19，108.64，74.85，73.47，57.14，56.59，56.27，56.02，30.07，29.35，29.27，29.24，28.96，27.02，26.59，25.70，25.51；HRMS(ESI)calculatedforC30H39N2O7[M-Br]+539.2752，found539.2762.实施例192，3，10-三甲氧基-9-O-(8-硝氧十二烷基)原小檗碱溴化物的制备用1，12-二溴癸烷代替1，8-二溴辛烷，其他条件与实施例17相同，制得黄色固体产物，产率为24％。1HNMR(300MHz，CDCl3)δ9.87(s，1H)，9.01(s，1H)，8.12(d，J＝8.2Hz，1H)，7.62(d，J＝8.7Hz，1H)，7.53(s，1H)，6.66(s，1H)，5.15(s，2H)，4.45(t，J＝6.7Hz，2H)，4.37(t，J＝6.7Hz，2H)，4.11(s，3H)，4.00(s，3H)，3.94(s，3H)，3.32(s，2H)，2.03-1.89(m，2H)，1.78-1.66(m，2H)，1.51(s，2H)，1.29(s，14H)；13CNMR(75MHz，CDCl3)δ151.45，149.85，148.98，144.44，142.98，137.28，133.52，127.33，125.17，123.89，121.72，120.88，118.67，110.17，108.62，74.83，73.47，57.11，56.57，56.25，56.00，30.05，29.49，29.44，29.33，29.31，29.23，28.96，27.00，26.56，25.71，25.48；HRMS(ESI)calculatedforC32H43BrN2O7[M-Br]+567.3065，found567.3074.实施例202，3，10-三甲氧基-13-溴-9-O-(8-硝氧辛基)原小檗碱溴化物的制备用2，3，10-三甲氧基-9-O-(8-硝氧辛基)原小檗碱溴化物代替2，3-亚甲二氧基-10-甲氧基9-O-(8-硝氧辛基)原小檗碱溴化物，其他条件与实施例13相同，制得黄色固体产物，产率为48％。1HNMR(300MHz，CDCl3)δ10.47(s，1H)，8.15(d，J＝9.3Hz，1H)，7.93(d，J＝9.4Hz，1H)，7.85(s，1H)，6.86(s，1H)，5.28(s，2H)，4.51(t，J＝6.7Hz，2H)，4.42(t，J＝6.6Hz，2H)，4.0δ(s，3H)，3.97(s，3H)，3.93(s，3H)，3.27(s，2H)，2.08-1.94(m，2H)，1.77-1.62(m，2H)，1.51(s，2H)，1.36(s，6H)；13CNMR(75MHz，CDCl3)δ151.82，151.20，147.22，147.16，145.46，136.45，133.07，132.46，126.27，123.30，121.54，118.77，118.74，114.01，110.34，75.78，73.62，58.30，57.02，56.41，56.33，30.14，29.15，29.00，28.09，26.68，25.55，25.52；HRMS(ESI)calculatedforC28H34BrN2O7[M-Br]+589.1552，found589.1544.实施例212，3，10-三甲氧基-13-溴-9-O-(10-硝氧癸基)原小檗碱溴化物的制备用2，3，10-三甲氧基-9-O-(10-硝氧癸基)原小檗碱溴化物代替2，3，10-三甲氧基-9-O-(8-硝氧辛基)原小檗碱溴化物，其他条件与实施例20相同，制得黄色固体产物，产率为43％。1HNMR(300MHz，CDCl3)δ10.46(s，1H)，8.14(d，J＝9.3Hz，1H)，7.93(d，J＝9.4Hz，1H)，7.85(s，1H)，6.86(s，1H)，5.27(s，2H)，4.53(t，J＝6.6Hz，2H)，4.41(t，J＝6.6Hz，2H)，4.06(s，3H)，3.97(s，3H)，3.93(s，3H)，3.27(s，2H)，2.06-1.93(m，2H)，1.77-1.60(m，2H)，1.49(s，2H)，1.29(s，10H)；13CNMR(75MHz，CDCl3)δ151.83，151.20，147.23，147.18，145.53，136.43，133.08，132.42，126.29，123.26，121.54，118.75，114.02，110.34，75.88，73.57，58.29，57.01，56.41，56.33，30.23，29.45，29.39，29.33，29.07，28.08，26.69，25.68，25.60；HRMS(ESI)calculatedforC30H38BrN2O7[M-Br]+617.1856，found617.1857.实施例222，3，10-三甲氧基-13-溴-9-O-(12-硝氧十二烷基)原小檗碱溴化物的制备用2，3，10-三甲氧基-9-O-(12-硝氧十二烷基)原小檗碱溴化物代替2，3，10-三甲氧基-9-O-(10-硝氧癸基)原小檗碱溴化物，其他条件与实施例20相同，制得黄色固体产物，产率为44％。1HNMR(300MHz，CDCl3)δ10.52(s，1H)，8.17(d，J＝9.3Hz，1H)，7.95(d，J＝9.4Hz，1H)，7.89(s，1H)，6.89(s，1H)，5.31(s，2H)，4.57(t，J＝6.8Hz，2H)，4.45(t，J＝6.7Hz，2H)，4.09(s，3H)，4.00(s，3H)，3.96(s，3H)，3.32(t，J＝5.6Hz，2H)，2.11-1.97(m，2H)，1.79-1.66(m，2H)，1.59-1.46(m，2H)，1.45-1.24(m，14H)；13CNMR(75MHz，CDCl3)δ151.83，151.21，147.31，147.23，145.65，136.44，133.10，132.50，126.21，123.20，121.59，118.76，118.70，114.03，110.34，75.96，73.56，58.30，56.99，56.41，56.32，30.27，29.63，29.58，29.48，29.37，29.10，28.11，26.71，25.73，25.61；HRMS(ESI)calculatedforC32H42BrN2O7[M-Br]+645.2170，found645.2171.实施例23取上述配方，用常规方法制备成片剂。下面是本发明化合物的药效学试验及结果，药效学试验中所用化合物代号的化学结构见上述实施例：1.体外抗肿瘤活性评价试验1.1.实验设备与试剂仪器超净工作台(苏州艾可林净化设备有限公司)恒温CO2培养箱(日本SANYO)酶联免疫检测仪(美国BIO-RAD)倒置生物显微镜(日本OLYMPUS)试剂青、链霉素混合液(江苏凯基生物技术股份有限公司)胰蛋白酶消化液(江苏凯基生物技术股份有限公司)PBS(江苏凯基生物技术股份有限公司)DMEM(GIBCO)MTT(BIOSHARP)DMSO(SIGMA)细胞株人肝癌细胞HepG2(江苏凯基生物技术股份有限公司)人结肠癌细胞HCT-116(江苏凯基生物技术股份有限公司)人早幼粒白血病细胞HL-60(江苏凯基生物技术股份有限公司)1.2.实验方法1)取对数生长期的受试细胞，经消化、计数，以5×104个/mL的浓度接种于96孔培养板内，每孔内100μL(每孔4×103个细胞)，于37℃，5％CO2培养箱中培养24h；2)用DMEM培养基稀释待测药物至不同浓度，每孔加入100μL相应的含药培养基，同时设立阴性对照组，溶媒对照组，阳性对照组；于37℃继续培养72h；3)每孔加入20μLMTT(5mg/mL)溶液后于37℃继续培养4h后，弃去上清液，每孔加入150μLDMSO溶解，室温振荡10分钟后在酶标仪490nm处测量每个孔的吸光度值(OD值)，利用下列公式(式1)求得肿瘤细胞生长抑制率；所求结果代入IC50计算软件SPSS17.0，求出IC50值。式11.3.试验结果表1实施例1-22的衍生物对人类癌细胞抗增殖活性的IC50值(μM)实施例HepG2HCT-116HL-60小檗碱49.01±2.4539.95±5.7227.42±4.17巴马汀＞100＞100＞100实施例115.11±1.7820.15±1.5214.15±1.35实施例29.31±0.6411.42±0.9610.07±0.87实施例37.30±0.477.05±0.626.24±0.53实施例43.26±0.294.12±0.312.52±0.18实施例54.78±0.333.06±0.151.68±0.21实施例62.47±0.241.58±0.451.02±0.12实施例74.34±0.172.32±0.141.07±0.11实施例82.52±0.321.21±0.091.53±0.22实施例920.23±1.2418.54±1.6215.18±1.31实施例1018.52±1.6315.27±1.1212.14±1.09实施例1115.43±1.1612.91±1.2810.32±1.11实施例1214.27±2.3111.42±0.959.41±0.79实施例134.14±0.132.75±0.271.85±0.68实施例140.48±0.070.31±0.030.24±0.02实施例150.56±0.100.42±0.020.29±0.03实施例1610.43±2.5210.17±1.138.56±0.64实施例174.91±0.363.89±0.411.57±0.53实施例185.59±0.413.21±0.242.05±0.16实施例192.55±0.272.12±0.121.21±0.09实施例201.36±0.161.29±0.321.26±0.11实施例213.01±0.081.92±0.141.31±0.18实施例221.98±0.141.27±0.111.12±0.10顺铂7.10±0.284.07±0.183.71±0.42体外抗肿瘤活性评价显示，所得NO供体型原小檗碱类衍生物对受试肿瘤细胞表现出了较好的抑制活性，所有衍生物活性均明显强于小檗碱和巴马汀母核，并且大多衍生物的活性强于阳性药顺铂或与其相当。2.一氧化氮体外释放评价试验2.1.实验设备与试剂仪器酶联免疫检测仪(美国BIO-RAD)卧式恒温摇床(金坛市城西春兰仪器厂)试剂磷酸二氢钾(国药集团化学试剂有限公司)磷酸氢二钾(国药集团化学试剂有限公司)磺胺(国药集团化学试剂有限公司)N-(1-萘基)乙二胺二盐酸盐(国药集团化学试剂有限公司)85％磷酸(国药集团化学试剂有限公司)亚硝酸钠(国药集团化学试剂有限公司)L-半胱氨酸(国药集团化学试剂有限公司)DMSO(SIGMA)2.2.溶液的配制1)pH7.4的磷酸盐缓冲液(PBS)：50mMKH2PO4和50mMNa2HPO4溶于500mL蒸馏水中混匀；2)空白溶液：10mLDMSO和190mLPBS混合；3)Griess试剂：磺胺(sulfanilamide)4.0g、N-(1-萘基)乙二胺二盐酸盐0.2g和10mL85％的H3PO4溶于90mL蒸馏水中，搅拌至澄清溶液；4)L-半胱氨酸溶液：半胱氨酸精确称量后，加入一定量的PBS，配制成200μM的溶液；5)受试化合物溶液：受试化合物精确称量后，用DMSO溶解并稀释至浓度为1mM，然后用PBS稀释，使其浓度为200μM。2.3.标准曲线的制定用空白溶液分别配制亚硝酸钠标准溶液浓度：0，0.78，1.56，3.13，6.25，12.5，25，50，100μmol/L，各个浓度每次取150μL，分别加入50μL的Griess试剂混匀，在37℃恒温摇床中孵化30min小时后，酶标仪于540nm处测定各管吸光度，分别减去空白溶液读数后回归得标准曲线方程。2.4.试验方法将配好的受试化合物溶液和L-半胱氨酸溶液各取2.5mL混合，在37℃恒温摇床中孵化120min，每15min各取混合液150μL，分别加入50μL的Griess试剂混匀，在37℃恒温摇床中再孵化30min后，酶标仪于540nm处测定各管吸光度，分别减去空白溶液读数后将数值代入标准曲线，即求得NO释放量。2.5.试验结果记录并统计部分实施例的衍生物于不同时间点的NO体外释放结果(如下表2)：表2部分实施例的衍生物的NO体外释放结果由表2数据可以看出，一氧化氮供体型原小檗碱衍生物具有优异的体外NO释放活性。3.体内抗肿瘤活性评价试验3.1.试验材料雄性ICR小鼠5周，体重18-22g由上海灵畅生物科技有限公司提供H22小鼠肝癌细胞由江苏凯基生物技术股份有限公司提供3.2.试验方法取ICR小鼠32只，收集培养的H22肝癌细胞，计数，调整使细胞悬液浓度为1.0×107个/mL，于裸小鼠右侧腋窝皮下每只接种0.1mL细胞悬液；将接种后的小鼠随机分为5组，每组8只，分别记为模型组、对照组(小檗碱和巴马汀)、试验组(实施例6和实施例20)；所有小鼠均在接种第二天开始以尾静脉注射方式给药，每天1次，持续21次，给药21天后处理小鼠，通过手术剥离瘤块，称重。计算肿瘤抑制率(％)，用SPSS17.0对结果进行分析，组间用t检验进行统计学分析处理，其计算公式如下式2：式2其中，药物组溶液配制的方法如下：受试化合物用DMF溶解并配制成浓度为60mg/mL的母液，再将母液用溶媒(生理盐水：DMF∶Tween80＝88∶10∶2)稀释至6mg/ml；模型组是对小鼠注射同体积的溶媒；对照组是分别对小鼠注射小檗碱和巴马汀30mg/kg；试验组是分别对小鼠注射实施例6和实施例20的衍生物30mg/kg。3.3.试验结果各组小鼠体内抗肿瘤活性试验结果如下表3：表3实施例6和实施例20的衍生物体内抗肿瘤活性试验结果由表3的数据明显可以看出，本申请实施例6和实施例20制得的一氧化氮供体型原小檗碱类衍生物具有优异的体内抗肿瘤活性，在30mg/kg的给药剂量下，活性明显优于母体化合物小檗碱和巴马汀；肿瘤生长抑制率大于60％。上述实施例仅作为说明的目的，本发明的范围并不受此限制。对本领域的技术人员来说进行修改是显而易见的，本发明仅受所附权利要求范围的限制。当前第1页1 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