便携式核酸检测箱的制作方法

本实用新型涉及医药生物技术领域，具体的说是便携式核酸检测箱。

背景技术：

众所周知，核酸与病原基因和遗传疾病、基因表达调控、细胞增殖和凋亡以及癌症的发生发展存在着重要的联系。生物的组织、细菌、病毒均具有独特的核酸序列，这些特定序列的检测在基因分析、疾病诊断、食品污染、法医鉴定和环境监测等领域起着重要作用。

随着科学技术的发展，核酸检测已经越来越多地应用于医学诊断、动物疫病诊断、食品安全检测等领域，并且通过核酸来检测致病菌具有灵敏度高、无需用户采血的优点。目前，常用的核酸扩增方法有基于经典普通聚合酶链式反应（PCR）的扩增技术和新兴的恒温扩增技术，如交叉引物恒温扩增技术（CPA）、环介导恒温扩增技术（LAMP）、链置换扩增（SDA）、依赖解旋酶的扩增（HDA）、重组聚合酶扩增（RPA）、重组酶介导的扩增（RAA）等。

现场检测要求快速、准确、操作简单，而目前普遍的样本病毒核酸检测技术包括样本核酸提取，样本RNA反转录和样本DNA阳性检测等，这些均需要专业的人才，技术设备和洁净的环境，而且样本在送往省市级实验室检测过程中也需要大量的时间，这些条件都为样本阳性检验造成了极大地困难，也为疫情的控制增加了难度。

目前市场上的核酸检测设备型号很多，其核酸扩增的温控方式有空气加热冷却、半导体制冷片温控、加热膜温控、红外温控等方式，但试剂和样本普遍是在PCR管里面反应，存在电源能量损耗大、试剂和样本耗费量大，具有成本高昂、体积大笨重、操作复杂、对使用者素质要求高等缺点。

技术实现要素：

本实用新型提供了便携式核酸检测箱，该检测箱便于携带，功能全面，结果准确高效，操作简单安全，适应多种环境，在携带和转运过程中可避免箱内器材之间相互碰撞带来的不必要的损失。

本实用新型为解决上述技术问题采用的技术方案为：便携式核酸检测箱，包括箱体和箱盖，箱体内部竖直设置有多个立板，多个立板将箱体的内部分隔为若干个用于摆放器材的定位槽，多个立板之间以及立板与箱体之间均通过卡扣可拆卸连接，其中两个立板的上方开设有四个伸缩杆槽，伸缩杆槽内垂直设置有伸缩杆，伸缩杆上固定设置有无菌工作台，箱盖内壁开设有与无菌工作台位置匹配的无菌工作台置放槽；

箱体底部沿箱体长度方向水平设置两根支撑杆，支撑杆的两端各设置有一个连接件，支撑杆通过连接件可拆卸连接有拉杆以及与拉杆相连的提手；箱体底部四角处设有万向轮，其中，在箱体的长度方向上，位于箱体同一端的两个万向轮上设置有微型电机，微型电机驱动万向轮同步转动。

作为一种优选方案，所述箱体内部的定位槽设置为八个。

作为一种优选方案，八个定位槽分别为电源槽、PCR仪槽、迷你离心机槽、枪头盒槽、电源适配器槽、1-10ul移液枪置放槽、20-200ul移液枪置放槽和100-1000ul移液枪置放槽。

作为一种优选方案，所述箱盖的外壁上设置有太阳能面板。

作为一种优选方案，所述箱体上还设置有用于平衡检测箱内外气压的放气阀。

作为一种优选方案，所述箱体一侧通过转轴与箱盖铰接，箱体上与转轴相对的另一侧设有若干用于将箱体和箱盖扣合的锁扣。

作为一种优选方案，所述伸缩杆包括内杆和外杆，所述外杆套设在内杆上，内杆侧壁上设有多个弹扣，外杆侧壁上对应于弹扣的位置处设有多个限位孔。

作为一种优选方案，所述立板的高度不大于箱体的高度。

作为一种优选方案，所述无菌工作台为长方形箱体，无菌工作台的上方装有紫外灯，无菌工作台的一端设置有与紫外灯电连接的紫外灯开关，无菌工作台的其中一个侧面开设有门。

作为一种优选方案，所述连接件包括旋钮和限位块，所述拉杆的半径小于支撑杆的半径，且拉杆和支撑杆上均设置有用于穿设旋钮的圆孔，限位块设置在支撑杆的内壁上。

与现有技术相比，本实用新型具有以下有益效果：

（1）本实用新型提供了便携式核酸检测箱，无需其他辅助设施，便可实现野外现场病毒核酸检测，实现了随时随地检测的功能；本检测箱功能全面，操作简便，可以在1.5小时以内完成样本RNA提取，核酸检测和数据分析的工作，将原有的1-3天的样本检测时间进行了极大幅度的缩短，可以在最短时间内确定和控制病情；手机蓝牙或者平板电脑与便携式PCR仪连接使用，可以根据实地情况灵活选择程序，实时监控数据；

（2）本实用新型提供了便携式核酸检测箱，本检测箱应用广泛，尤其适用于卫生防疫部门、监督部门现场开展畜禽样本快速检测之用，对及时准确判断畜禽样本是否感染病毒起到了快速的筛查作用；箱体中间设置有伸缩杆，伸缩杆上固定设置无菌工作台，无菌工作台的上方装有紫外灯，紫外灯打开可以进行灭菌，避免实验操作过程中各种病毒之间以及在检测一种病毒时，取样过程中所造成的污染；同时，伸缩杆伸展，可将无菌工作台作为操作台，便于实验过程中的操作；无菌工作台侧面开设有门，便于实验员在无菌工作台里进行RNA提取以及核酸检测中的取样；箱盖内开设有与无菌工作台位置匹配的无菌工作台置放槽，当合上检测箱时，伸缩杆收缩，无菌工作台置放于无菌工作台置放槽内，节约空间，使用方便；

（3）本实用新型提供了便携式核酸检测箱，在箱体的长度方向上，位于箱体一端的两个万向轮上设置有微型电机，微型电机驱动万向轮同步转动，同时，支撑杆通过连接件与提手可拆卸连接，这样，一端的装有微型电机的万向轮可用于上坡时使用，另一端没有装电机的万向轮可用于下坡或者走平路，拉手通过连接件可拆卸设置在箱体的两侧，同时，支撑杆上设置的四个旋钮，在箱体平放时，旋钮触地将箱体支撑起来，可以防止万向轮滚动，起到固定作用。

附图说明

图1为本实用新型整体结构示意图；

图2为支撑杆与提手可拆卸连接结构示意图；

附图标记：1、箱体，2、箱盖，3、拉杆，4、提手，5、万向轮，6、锁扣，7、定位槽，8、立板，9、放气阀，10、微型电机，11、无菌工作台，12、伸缩杆、13、转轴，14、无菌工作台置放槽，15、支撑杆，16、旋钮，17、紫外灯，18、门，19、紫外灯开关，20、限位块。

具体实施方式

下面结合附图对本实用新型的实施例作详细说明，本实施例以本实用新型技术方案为前提，给出了详细的实施方式和具体的操作过程，但本实用新型的保护范围不限于下述的实施例。

便携式核酸检测箱，包括箱体1和箱盖2，箱体1内部竖直设置有多个立板8，多个立板8将箱体1的内部分隔为若干个用于摆放器材的定位槽7，作为优选的，所述多个立板8包括四个平行于箱体1宽度方向的立板和三个平行于箱体1长度方向的立板，四个平行于箱体1宽度方向的立板中，其中三个立板的长度和箱体内壁之间的宽度相同，另外一个立板的长度小于箱体内壁之间的宽度；三个平行于箱体1长度方向的立板中，其中一个立板与长度小于箱体内壁之间宽度的立板垂直交叉设置，另外两个立板分别垂直设置在的长度和箱体内壁之间宽度相同的三个立板的任意两个之间，以形成八个定位槽7；多个立板8之间以及立板8与箱体1之间均通过卡扣可拆卸连接，其中两个立板8的上方开设有四个伸缩杆槽，伸缩杆槽内垂直设置有伸缩杆12，伸缩杆12上固定设置有无菌工作台11，箱盖2内壁开设有与无菌工作台11位置匹配的无菌工作台置放槽14；

箱体1底部沿箱体1长度方向水平设置两根支撑杆15，支撑杆15的两端各设置有一个连接件，支撑杆15通过连接件可拆卸连接有拉杆3以及与拉杆3相连的提手4，作为优选的，所述箱体1、箱盖2、拉杆3和提手4均采用PP＋玻纤合成材料制成，具有抗冲击力强、耐酸碱腐蚀、阻燃高、不易老化和防水等优点；箱体1底部四角处设有万向轮5，其中，在箱体1的长度方向上，位于箱体1同一端的两个万向轮5上设置有微型电机10，微型电机10驱动万向轮5同步转动。

以上为本实用新型的基本实施方式，可在以上基础上作进一步的改进、优化或限定。

进一步的，所述箱体1内部的定位槽7设置为八个。

进一步的，八个定位槽7分别为电源槽、PCR仪槽、离心机槽、枪头盒槽、电源适配器槽、1-10ul移液枪置放槽、20-200ul移液枪置放槽和100-1000ul移液枪置放槽，作为优选的，所述PCR仪为便携式PCR仪，所述离心机为掌上离心机或者迷你离心机，电源可为离心机和便携式PCR仪提供稳定的220V交流电，所述离心机可在样本核酸提取过程中起到离心作用，便携式PCR仪起到检测样本核酸是否含有特定的病毒序列从而鉴定样本是否感染的作用，所述枪头盒为提取和检测过程中必不可少的耗材，所述电源适配器为PCR仪和电源充电提供稳定匹配的电压和电流，在使用检测箱前，需确保电源剩余电量在50%以上方可完整进行一次检测。此外，箱体1内还包括U盘、对应电源线及连接线等箱内仪器及配件，每种U盘对应一种病毒检测，PCR仪可以自动识别U盘中的操作程序，并且在手机或者平板电脑出故障时可以代替其使用，快捷方便。

进一步的，所述箱盖2的外壁上设置有太阳能面板，作为优选的，太阳能面板设置在箱体1外壁设置的凹槽中，在阳光充足的情况下，可以户外随时充电。

进一步的，所述箱体1上还设置有用于平衡检测箱内外气压的放气阀9，作为优选的，所述放气阀9为PP＋玻纤＋金属铜螺丝材料，为释放箱内压力，防水之用。

进一步的，所述箱体1一侧通过转轴13与箱盖2铰接，箱体1上与转轴13相对的另一侧设有若干用于将箱体1和箱盖2扣合的锁扣6，箱体1设计结构合理，箱体1和箱盖2可呈120度打开，在多种环境下均可正常工作。

进一步的，所述伸缩杆12包括内杆和外杆，所述外杆套设在内杆上，内杆侧壁上设有多个弹扣，外杆侧壁上对应于弹扣的位置处设有多个限位孔。

进一步的，所述立板8的高度不大于箱体1的高度。

进一步的，所述无菌工作台11为长方形箱体，无菌工作台11的上方装有紫外灯17，无菌工作台11的一端设置有与紫外灯17电连接的紫外灯开关19，无菌工作台11的其中一个侧面开设有门18，所述门18有两个，便于实验员将手伸进无菌工作台11里进行RNA提取以及核酸检测中的取样。

进一步的，如图2所示，所述连接件包括旋钮16和限位块20，拉杆3的半径小于支撑杆15的半径，且拉杆3和支撑杆15上均设置有用于穿设旋钮16的圆孔，限位块20设置在支撑杆15的内壁上。其中，每个支撑杆15的两端均安装有一个旋钮16。

其中，图2为图1的主视方向下的支撑杆与提手的纵切剖面图，作为优选的，在图1工作状态，旋钮16竖直放置时的高度大于万向轮5的直径，以达到在箱体1平放时，两根支撑杆15两端的四个旋钮16触地，将箱体1支撑起来，可以防止万向轮5滚动，起到固定作用；支撑杆15和拉杆3均为圆杆，且拉杆3为可伸缩杆，将拉杆3通过连接件固定后，可以伸缩调节拉杆3的长度。

下面举例说明利用本实用新型便携式核酸检测箱进行畜禽样本核酸检测的步骤(所有器材、检测仪器等均为本实用新型便携式核酸检测箱箱内物品，检测试剂为另购本检测箱配套试剂)：

实施例1：禽流感病毒检测。

RNA提取：取待测样本的口腔拭子200μl,使用移液枪配合1000μl枪头加入提取试剂盒中的缓冲液A 600μl混合均匀后静置3分钟，使用掌上离心机离心1分钟，使用移液枪配合枪头取400μl上清液加入提取试剂盒中配套的新的无RNA酶的EP管中，配合移液枪和枪头加入200μl提取试剂盒中缓冲液B，混匀后加入提取试剂盒中配套的吸附柱中，离心一分钟；弃去收集管中的废液，使用移液枪向吸附柱中加入800μl缓冲液C离心一分钟；将收集管放入掌上离心机中配平后离心1min，抛弃收集管将吸附柱放入新的无RNA酶的1.5mlEP管中，加入60ul洗脱液，放入掌上离心机，配平后离心1min，EP管中收集到的液体即为样本RNA,此外，样品采集过程中必须做好专业的防护措施，皮肤任何部位不得直接接触待测样本；移液枪使用后需调回最大量程；掌上离心机和便携式PCR仪在使用过程中均需对称放置样品。

核酸检测：用移液枪提取20ul扩增缓冲液加入扩增体系中，充分溶解后加入提取的样本RNA 5ul，同样的方法分别加入检测试剂盒中的5ul阳性对照、阴性对照。混合均匀后使用掌上离心机瞬时离心。将需要检测的100ulEP管对称放入便携式PCR仪的样本孔中，并记住与其相对应的编号，将便携式PCR仪与平板电脑连接后各自插上电源。打开平板电脑上便携式PCR仪对应的软件，选择与待检测病毒相匹配的检测程序，确定便携式PCR仪同电脑成功连接，点击开始运行。

数据分析：待程序结束后保存并重新打开保存的结果，使用软件对数据结果进行分析，通过数据曲线和阴性阳性对照判断其待测样本是否感染病毒。

实施例2：检测伪狂犬病毒

DNA提取：取待测个体的病灶部位的血清液10ul用水稀释至200μl,提取试剂盒中的缓冲液A 600μl混合均匀后静置3分钟，使用掌上离心机5000r/min离心1分钟，使用移液枪配合枪头取400μl上清液加入提取试剂盒中配套的新的无RNA酶的EP管中，配合移液枪和枪头加入200μl提取试剂盒中缓冲液B，混匀后加入提取试剂盒中配套的吸附柱中，离心一分钟；弃去收集管中的废液，使用移液枪向吸附柱中加入800μl缓冲液C离心一分钟；将收集管放入掌上离心机中配平后5000r/min离心1min，抛弃收集管将吸附柱放入新的无RNA酶的1.5mlEP管中，加入60ul洗脱液，放入掌上离心机，配平后5000r/min离心1min，EP管中收集到的液体即为样本DNA。

核酸检测：用移液枪提取20ul扩增缓冲液加入扩增体系中，充分溶解后加入提取的样本RNA 5ul，同样的方法分别加入检测试剂盒中的5ul阳性对照、阴性对照。混合均匀后使用掌上离心机瞬时离心。将需要检测的100ulEP管对称放入便携式PCR仪的样本孔中，并记住与其相对应的编号。将便携式PCR仪与平板电脑连接后各自插上电源。打开平板电脑上便携式PCR仪对应的软件，选择与待检测病毒相匹配的检测程序，确定便携式PCR仪同电脑成功连接，点击开始运行。

数据分析：待程序结束后保存并重新打开保存的结果，使用软件对数据结果进行分析，通过数据曲线和阴性阳性对照判断其待测样本是否感染病毒。

实施例3：USB连接检测伪狂犬病毒

DNA提取：取待测个体的病灶部位的血清液10ul用水稀释为200μl,使用移液枪配合1000μl枪头加入提取试剂盒中的缓冲液A 600μl混合均匀后静置3分钟，使用掌上离心机5000r/min离心1分钟，使用移液枪配合枪头取400μl上清液加入提取试剂盒中配套的新的无RNA酶的EP管中，配合移液枪和枪头加入200μl提取试剂盒中缓冲液B，混匀后加入提取试剂盒中配套的吸附柱中，离心一分钟；弃去收集管中的废液，使用移液枪向吸附柱中加入800μl缓冲液C离心一分钟；将收集管放入掌上离心机中配平后5000r/min离心1min，抛弃收集管将吸附柱放入新的无RNA酶的1.5mlEP管中，加入60ul洗脱液，放入掌上离心机，配平后5000r/min离心1min，EP管中收集到的液体即为样本DNA。

核酸检测：用移液枪提取20ul扩增缓冲液加入扩增体系中，充分溶解后加入提取的样本RNA 5ul，同样的方法分别加入检测试剂盒中的5ul阳性对照、阴性对照。混合均匀后使用掌上离心机瞬时离心。将需要检测的100ulEP管对称放入便携式PCR仪的样本孔中，并记住与其相对应的编号。将与该病毒对应的检测程序以.PPF格式保存在U盘中,将PCR以连接电源后将该U盘通过USB插口插入便携式PCR仪底部，PCR仪将自动识别程序并开始运行。运行结束后PCR仪底座位置的光环会变为多色相间的彩色。

数据分析：待程序结束后将U盘拔掉插入装有PCR仪配套软件的电脑上，在U盘中选择保存的数据用软件打开后，通过数据曲线和阴性阳性对照判断其待测样本是否感染病毒。

实施例4：USB连接检测口蹄疫病毒

RNA提取：取待测个体的病灶部位的水泡液10ul用水稀释为200μl,使用移液枪配合1000μl枪头加入提取试剂盒中的缓冲液A 600μl混合均匀后静置3分钟，使用掌上离心机5000r/min离心1分钟，使用移液枪配合枪头取400μl上清液加入提取试剂盒中配套的新的无RNA酶的EP管中，配合移液枪和枪头加入200μl提取试剂盒中缓冲液B，混匀后加入提取试剂盒中配套的吸附柱中，离心一分钟；弃去收集管中的废液，使用移液枪向吸附柱中加入800μl缓冲液C离心一分钟；将收集管放入掌上离心机中配平后5000r/min离心1min，抛弃收集管将吸附柱放入新的无RNA酶的1.5mlEP管中，加入60ul洗脱液，放入掌上离心机，配平后5000r/min离心1min，EP管中收集到的液体即为样本RNA。

核酸检测：用移液枪提取20ul扩增缓冲液加入扩增体系中，充分溶解后加入提取的样本RNA 5ul，同样的方法分别加入检测试剂盒中的5ul阳性对照、阴性对照。混合均匀后使用掌上离心机瞬时离心。将需要检测的100ulEP管对称放入便携式PCR仪的样本孔中，并记住与其相对应的编号。将与该病毒对应的检测程序以.PPF格式保存在U盘中,将PCR以连接电源后将该U盘通过USB插口插入便携式PCR仪底部，PCR仪将自动识别程序并开始运行。运行结束后PCR仪底座位置的光环会变为多色相间的彩色。

数据分析：待程序结束后将U盘拔掉插入装有PCR仪配套软件的电脑上，在U盘中选择保存的数据用软件打开后，通过数据曲线和阴性阳性对照判断其待测样本是否感染病毒。

本产品所述的实施例是说明性的，而非限定性的，上述实施例只是帮助理解本实用新型，因此本实用新型并不限于具体实施方式中所述的实施例，凡是由本领域技术人员根据本实用新型的技术方案得出的其他具体实施方式，同样属于本实用新型保护的范围。