聚集上清液一，底部聚集沉淀一，弃上清液一，收集沉淀一；
[0031 ] 步骤3、向步骤2所得沉淀一中加入ImL溶液一，溶液一为乙醚、丙酮和无水乙醇的混合溶液，三者的体积比为1:1:1，
[0032]步骤4、选用安装有去掉尖嘴的枪头的移液器，反复吸打使其悬浮，得悬浮液一；
[0033]步骤5、将步骤4所得悬浮液一进行超声处理，超声处理功率为35W，处理时间为10s，静置30s后得上清液二和沉淀二，弃上清液二，收集沉淀二 ；
[0034]步骤6、向上述沉淀二中加入溶液二，溶液二为甲醇和无水乙醇的混合溶液，二者的体积比为1:1，
[0035]步骤7、选用去掉尖嘴枪头的移液器，反复吸打使其悬浮，得悬浮液二 ；
[0036]步骤8、将步骤6所得悬浮液二进行超声处理，超声处理功率为35W，处理时间为10s，洗去悬浮液二中矿物表面的附着物及其色素，静置30s后得上清液三和沉淀三，弃上清液三，收集沉淀三；
[0037]步骤9、向步骤8所得沉淀三中加入溶液三即无水乙醇，进行多次洗涤，直至矿物沉淀变为白色为止，即得矿化产物。
[0038]下面结合具体实施例进一步详细说明:
[0039]实施例1:
[0040]本发明，集胞藻诱导矿物结束后，将集胞藻细胞培养液装于锥形瓶中，将装有集胞藻细胞培养液的锥形瓶置于超声波清洗器中震荡，频率为35W，时间为360s ;
[0041]将震荡完的集胞藻培养液斜放于支架上，斜放的目的是使矿物沉淀汇聚于锥形瓶底部某一区域，大约静置10分钟后即可观察到在最底部有大量的矿物沉淀；
[0042]为了防止枪头尖嘴太尖会戳伤矿物沉淀，移液器安装去掉尖嘴的枪头后吸取底部汇聚的集胞藻矿化沉淀lmL，置于1.5mL的离心管中，12000rpm离心2min，弃去上清液一，得沉淀一；
[0043]向所得沉淀一中加入I毫升溶液一，溶液一选用的是乙醚、丙酮和无水乙醇的混合溶液，其体积比乙醚:丙酮:无水乙醇等于1:1:1，移液器安装去掉尖嘴的枪头，反复吸打使沉淀悬浮，得悬浮液一；
[0044]将悬浮液一超声处理，超声波清洗器频率为35W，时间为10s，静置30s后弃去上清液二，收集沉淀二 ；
[0045]将沉淀二中加入溶液二，溶液二选用的是甲醇和无水乙醇的混合溶液，其体积比甲醇:无水乙醇等于1:1，移液器安装去掉尖嘴的枪头，反复吸打，得悬浮液二 ；
[0046]将悬浮液二进行超声处理10s，功率35W，洗去矿物表面的附着物及其色素，静置30s后弃去上清液三，收集沉淀三；
[0047]向沉淀三中加入溶液三，溶液三选用无水乙醇，用无水乙醇洗涤多次，直至矿物沉淀为白色为止，静置后可得矿物晶体。
[0048]本实施例分离得到的矿化产物做扫描电镜分析，如图2所示，矿物晶体颗粒是完整的，表面为呈鱼鳞状的若干片层矿物叠加而成，其上有少许孔洞，该处理方法得到的矿物表面形貌未遭受破坏，保持完好无损。
[0049]对比例2:
[0050]与上述实施例1不同之处在于:本实施例溶液一、溶液二和溶液三选用的均为30%的过氧化氢溶液，本实施例分离得到的矿化产物做扫描电镜分析，如图3所示，整个矿物晶体已经没有了具体的形状，矿物表面好像长满了刺一样，矿物周围还可见散在的从该矿物颗粒上脱落下来的微小矿物，该矿物已受到了严重的损毁，表面形貌已发生重大改变。
【主权项】
1.一种快速分离集胞藻细胞与其矿化产物的方法，其特征在于，依次包括以下步骤: a、取一定量的集胞藻细胞培养液，将其放置于培养瓶中进行超声处理； b、将上述超声处理后的培养液斜置，在培养瓶底部聚集一定量的矿物沉淀； C、选用移液器，该移液器上安装去掉尖嘴的枪头，将步骤b所得矿物沉淀移至离心管一中，进行离心处理，顶部聚集上清液一，底部聚集沉淀一，弃上清液一，收集沉淀一； d、向步骤c所得沉淀一中加入溶液一，所述溶液一为乙醚、丙酮和无水乙醇的混合溶液，三者的体积比为1: 1: 1，选用安装有去掉尖嘴枪头的移液器，反复吸打使其悬浮，得悬浮液一； e、将步骤d所得悬浮液一进行超声处理，静置30s后得上清液二和沉淀二，弃上清液二，收集沉淀二； f、向上述沉淀二中加入溶液二，所述溶液二为甲醇和无水乙醇的混合溶液，二者的体积比为1:1，选用安装有去尖嘴枪头的移液器反复吸打使其悬浮，得悬浮液二 ； g、将步骤f所得悬浮液二进行超声处理，洗去悬浮液二中矿物表面的附着物及其色素，静置一段时间，静置30s后得上清液三和沉淀三，弃上清液三，收集沉淀三； h、向步骤g所得沉淀三中加入溶液三进行多次洗涤，直至沉淀三颜色变为白色，所述溶液三为无水乙醇，多次洗涤静置后，即得矿化产物。
2.根据权利要求1所述的快速分离集胞藻细胞与其矿化产物的方法，其特征在于:步骤a中，超声处理功率为35W，处理时间为360s。
3.根据权利要求1所述的快速分离集胞藻细胞与其矿化产物的方法，其特征在于:步骤c中，离心处理时，控制转速为12000rpm，离心时间为2min。
4.根据权利要求1所述的快速分离集胞藻细胞与其矿化产物的方法，其特征在于:步骤e中，超声处理功率为35W，处理时间为10s。
5.根据权利要求1所述的快速分离集胞藻细胞与其矿化产物的方法，其特征在于:步骤g中，超声处理功率为35W，处理时间为10s。
【专利摘要】本发明公开了一种快速分离集胞藻细胞与其矿化产物的方法，其首先将一定量的集胞藻细胞培养液放置于培养瓶中进行超声处理，然后将培养瓶斜置，在培养瓶底部会聚集一定量的矿物沉淀，将其移至离心管一中，进行离心处理收集沉淀一；向该沉淀一中加入含有乙醚、丙酮和无水乙醇的混合溶液，反复吸打使其悬浮，得悬浮液一；将该悬浮液一进行超声处理后收集沉淀二；向沉淀二中加入甲醇和无水乙醇的混合溶液，反复吸打使其悬浮，得悬浮液二；对悬浮液二进行超声处理收集沉淀三；向沉淀三中加入无水乙醇进行多次洗涤，即得矿化产物。本发明分离得到的矿化产物，其表面形貌未被破坏，极有利于扫描电镜分析其表面结构。
【IPC分类】C12Q1-64, C12R1-01
【公开号】CN104531836
【申请号】CN201410815795
【发明人】韩作振, 闫华晓, 赵辉, 周仕学, 韩梅, 高丽华, 王兆鹏, 赵延洋, 孙彬, 宋志刚
【申请人】山东科技大学
【公开日】2015年4月22日
【申请日】2014年12月24日