成掺入重组蛋白质的包含体。因此，为了制备活性或更具 活性的物质，可能需要重组蛋白质的重折叠。从细菌包含体中获得正确折叠的异源蛋白 质的几种方法在此领域中是众所周知的。这些方法通常包括从包含体中溶解蛋白质，然 后使用离液试剂完全使蛋白质变性。当半胱氨酸残基在蛋白质的初级氨基酸序列中存在 时，常常需要在可以正确形成二硫键的环境（氧化还原系统）中实施重折叠。重折叠的常 用方法在Kohno,酶学方法，185 :187-195(1990)中公开。EP0433225和共同待审的USSN 08/163,877中描述了其他适用的方法。
[0074] 本发明的IL_13bc蛋白质也可表达为转基因动物的产品，如表达为转基因牛，山 羊，猪或绵羊的奶，其特点在于体细胞或生殖细胞含有编码IL_13bc蛋白质的多核苷酸序 列。
[0075] 本发明的IL_13bc蛋白质可在表达所需蛋白质需要的培养条件下，通过培养转化 宿主细胞的培养物来制备。然后将产物表达蛋白质从培养基或细胞提取物中提纯。本发明 IL-13bc蛋白质的可溶形式可从条件培养基中提纯。本发明的IL-13bc蛋白质的膜结合形 式可通过从表达细胞中制备总膜组分，并用非-离子清洗剂如Triton X-100萃取膜来提 纯。
[0076] IL_13bc蛋白质可使用此领域中的技术人员已知的方法来提纯。如本发明的 IL-13bc蛋白质可使用购得的蛋白质浓缩滤膜，如Amicon或Millipore Pellicon超滤单 元来浓缩。浓缩步骤后，浓缩物可加入到提纯基质如凝胶过滤介质中。可替换地，也可使 用阴离子交换树脂，如具有二乙氨基乙基（DEAE)或聚乙烯亚胺（PEI)侧基团的基质或底 物。基质可以是丙烯酰胺，琼脂糖，右旋糖苷，纤维素或通常使用在蛋白质提纯中的其他种 类。可替换地，也可使用阳离子交换步骤。适当的样离子交换剂包括多种含有磺丙基和 羧甲基基团的不溶基质，。磺丙基是较好的（如S-琼脂糖柱）。从培养物上清液中提纯 IL-13bc蛋白质也可包括流经一个或多个亲和树脂柱的步骤，如伴刀豆球蛋白A-琼脂糖， 肝磷脂-toyopearl或Cibacrom蓝3GA琼脂糖；或使用树脂如苯基醋，丁基醋，或丙基醋通 过疏水相互作用层析步骤；或通过免疫亲和层析步骤。最后，使用疏水RP-HPLC介质，如含 有甲基或其他脂肪族侧基团的硅胶，可实施一个或多个反相高效液相层析（RP-HPLC)步骤 进一步提纯IL_13bc蛋白质。依据已知方法，含有IL-13或其片段的亲和柱或含有IL-13bc 蛋白质抗体的亲和柱也可使用在提纯步骤中。一些或全部前述提纯步骤，以多种组合方式 或连同其他已知方法，都可用来提供基本上纯的分离重组蛋白质。较好地，分离IL-13bc蛋 白质是纯的，以致基本上其不含其他哺乳动物蛋白质。
[0077] 本发明IL_13bc蛋白质可用来筛查能结合IL_13bc或IL-13R的试剂，或筛查干扰 IL-13与IL-13或IL-13bc结合的（胞外或胞内域）并因此能用作为正常结合和细胞因子 活性抑制剂（"IL-13R抑制剂"）的试剂。使用所需蛋白质（固定的或不固定的）的结合 测试法在此领域中是众所周知的，并可使用本发明的IL-13bc蛋白质用作这种目的。基于 提纯细胞的或基于蛋白质（不含细胞）的筛查测试可用来鉴别这种试剂。如，IL_13bc蛋 白质可以提纯形式固定在载体上，在存在和不存在可能的抑制试剂的情况下，测定与提纯 IL-13bc蛋白质的结合。适当的结合测试可以可替换地使用本发明的IL-13bc蛋白质的可 溶形式。其中抑制剂可得到筛查的系统的另一个实施例在如下的实施例2中描述。
[0078] 在这样的筛查测试中，通过将IL-13或其片段与IL_13bc蛋白质结合形成第一结 合混合物，测定在第一结合混合物（B tj)中的结合量。通过将IL-13或其片段，IL-13bc蛋白 质与要进行筛查的化合物或试剂结合形成第二结合混合物，测定第二结合混合物（B)中的 结合量。比较第一结合混合物中和第二结合混合物中的结合量，如，通过计算B/^的比率。 与第一结合混合物相比，如果在第二结合混合物中观察到结合量下降，那么可以认为化合 物或试剂能抑制结合。任意地，IL-13R的第二条链可加入到一种或两种结合混合物中。结 合混合物的配制和优化在此领域技术范围内，这样的结合混合物也可含有需要增强或优化 结合的缓冲液和盐，其他对照测试也包括在本发明的筛查测试中。
[0079] 因此可鉴别发现能将IL_13bc蛋白质与IL-13或其片段结合活性降低到任何程度 的化合物，较好地至少约10%，更好地大于约50%或更多，然后再在其他结合测试中和体 内测试中进行筛查。通过这些方法，也可鉴别对IL-13bc结合具有抑制性活性的适于作治 疗试剂的化合物。
[0080] IL-13bc蛋白质，和编码它们的多核苷酸，也可用作诊断试剂，来检测IL-13bc， IL-13R，IL-13或表达IL-13bc，IL-13R或IL-13的细胞的存在或表达。使用这些种类的物 质，蛋白质或多核苷酸可在标准方法中用作这种目的进行诊断测试。适合的方法对此领域 中的技术人员是众所周知的。
[0081] 如本文所使用的，"IL-13R"是指IL-13bc和/或称为"IL-13Ra 1"或"NR4"第二 条IL-13受体链（参看：鼠科动物受体链，Hilton等人，Proc. Natl. Acad. Sci. USA1996,93 : 497-501 ;人类受体链，Aman等人，生物化学期刊，1996, 271 :29265-70,和Gauchat等人，欧 洲免疫学期刊，1997, 27 :971-8)。
[0082] IL-13bc作为IL-13已知生物活性的中介体。因此，IL-13bc蛋白质（较好地是可 溶IL-13bc蛋白质），IL-13R抑制剂（即，IL-13与IL-13R相互作用的拮抗剂（如，IL-13R 的抗体（具体包括IL_13bc或IL-13R a 1的抗体）））和其片段，IL-13的抗体和其片段，可 溶IL-13Ra 1蛋白质，和IL-13与IL-13R相互作用（包括与IL-13bc和/或与IL-13Ra 1 的相互作用）的小分子和其他抑制剂，可用在治疗或调理多种IL-3与其有关或受到IL-13 的活性（或其降低）影响的医学病况（总称"与IL-13相关病况"）。结合IL-13R的IL-4 的突变形式也可用作为IL-13诘抗剂（参看，如在Shanafelt等人，Proc. Natl. Acad. Sci. USA1998,95 :9454-8 ;Aversa 等人，医学专家期刊，1993,178 :2213-8 ;和 Grunewald 等人， 免疫学期刊，1998,160 :4004-9中所描述的）。
[0083] 与IL-13相关病况包括但不限于Ig-调节的病况和疾病，具体地是IgE调节的病 况[包括但不限于遗传性过敏症，过敏性病况，哮喘，免疫复合疾病（如，狼疮，肾病综合症， 肾炎，血管球性肾炎，甲状腺炎和Grave症）];肺的炎性病况；免疫缺损，造血祖细胞的特异 缺损，和与其相关的病变；癌症和其他疾病。这种病理状况可由疾病，放射或药物治疗引起， 包括如，白血球减少症，细菌性和病毒性感染，B细胞或T细胞缺少如骨髓移植后免疫细胞 或造血细胞缺损。因为IL-13抑制巨噬细胞活化，所以IL-13bc蛋白质也可用来增强巨噬 细胞活化（即，在疫苗中，治疗真菌或胞内微生物，或寄生性感染）。
[0084] IL_13bc蛋白质还可用来在体内和体外加强IL-13的作用。如，IL_13bc蛋白质可 与具有IL-13活性的蛋白质（较好地是IL-13)结合，产生的组合物可与除IL-13bc链外表 达至少一条IL-13R链细胞接触（较好地所有链是IL-13R不是IL-13bc，如IL-13R α 1)。较 好地，接触步骤通过给哺乳动物受试体体内服用治疗上有效量的这种组合物来实施。预建 立的IL-13蛋白质和IL-13bc蛋白质的缔合可协助形成特定信号所需的完全IL-13/IL-13R 复合物。参看实施例，由Economides等人描述的方法，科学，270 ;1351 (1995)。
[0085] 从细胞中提纯或重组制备的，IL_13bc蛋白质和IL-13R抑制剂，当与药学可接受 的载体组合时，可用作为药学组合物。这样的组合物可含有，除了 IL-13bc或抑制剂和载体 夕卜，多种稀释剂，填充剂，盐，缓冲液，稳定剂，溶剂，和其他此领域中众所周知的物质。"药学 可接受的"意指不干扰活性组分的生物活性效果的无-毒性物质。载体的特性将取决于服 用途径。
[0086] 本发明的药学组合物也可含有细胞因子，淋巴因子，或其他造血因子如M-CSF， GM-CSF，IL-1，IL-2, IL-3, IL-4, IL-5, IL-6, IL-7, IL-8, IL-9, IL-10, IL-11，IL-12, IL-14， IL-15，G-CSF，干细胞因子，和促红细胞生成素。药学组合物也可包括抗细胞因子抗体。药 学组合物可含有溶血栓因子或抗-溶血栓因子，如血纤蛋白溶酶原激活物和因子VIII。药 学组合物还进一步包括其他抗炎性试剂。这种额外的因子和/或试剂可包括在药学组合物 中，以与分离IL_13bc蛋白质或IL-13bc抑制剂一起产生配合效果，或减小由分离IL-13bc 蛋白质或IL-13bc抑制剂产生的副作用。相反地，分离IL-13bc或IL-13bc抑制剂可包含在 具体细胞因子，淋巴因子，其他造血因子，溶血栓因子或抗溶血栓因子，或抗-炎性试剂的 配方中，以减小细胞因子，淋巴因子，其他造血因子，溶血栓因子或抗溶血栓因子，或抗-炎 性试剂的副作用。
[0087] 本发明的药学组合物可以是在脂质体形式中，其中，除了其他药学可接受的载体， 分离IL-13bc蛋白质和IL-13bc抑制剂与两亲性试剂组合，两亲性试剂如以聚集形式如胶 束，不溶单层，液晶，或水溶液中的片晶形式存在的脂质。适合脂质体配方的脂质包括，没有 限制地，单酸甘油酯，甘油二酯，硫脂，溶血卵磷脂，磷脂，皂角苷，胆酸等等。这种脂质体配 方的制备在此领域中技术范围内，如在美国专利No. 4, 235, 871 ;美国专利No. 4, 501，728 ; 美国专利No. 4, 837, 028 ;美国专利No. 4, 737, 323中所描述的，所有