59°C ? IR(KBr)cm hieAS, 1588. 4 NMR(400MHz, CDC13) : 8 7. 99 - 7. 92 (m, 2H), 7. 80 (d, J = 15. 4Hz, 1H), 7. 54 (d, J =8. 7Hz, 2H) , 7. 49 - 7. 42 (m, 2H) , 7. 26 (d, J = 1 5. 4Hz, 1H) , 6. 56 (d, J = 8. 8Hz, 2H), 3. 37 (t, J = 6. 6Hz, 4H), 2. 10 - 2. 02 (m, 4H). 13C NMR (101MHz, CDC13) :8 189. 2, 149. 8, 146. 7, 138. 3, 137. 6, 130. 8, 129. 7, 128. 7, 121. 9, 115. 5, 111. 8, 47. 6, 25. 5,
[0031] I -8:黄色固体，总收率54%;m.p. :164-165°C ? IROffiricmhieTS, lSgS.i NMR( 400MHz，CDCl3):S7.90(s，lH)，7.64(d，J = 8.5Hz，2H)，7.45 - 7.36(m，3H)，7.31(s，lH)，7. 23 (s, 1H), 6. 99 (d, J = 16. OHz, 1H), 6. 17 (s, 2H), 3. 87 (s, 3H), 3. 79 (s, 6H). 13C NMR(101MHz ,CDC13) : S 193. 6, 162. 7, 159. 0, 141. 9, 138. 3, 135. 4, 134. 3, 130. 8, 129. 9, 129. 7, 121. 3, 1 17. 8, 111. 7, 90. 8, 56. 0, 55. 5.
[0032] I -9:橘黄色固体，总收率53 % ;m. p. :168-169°C ? IR(KBr)cm hies], 1586. 4 匪R (400MHz, CDC13): 5 7.87 (d，J = 8. 4Hz，2H), 7.77 (d，J = 15.5Hz, 1H), 7.62 (d，J =8. 4Hz，2H)，7.55 (d，J = 8. 7Hz，2H)，7.30 (d，J = 15.5Hz，1H)，6.89 (d，J = 8. 7Hz，2H)，3. 40 - 3. 27(m，4H)，2. 62 - 2. 50(m，4H)，2. 34(s，3H). 13C匪R(101MHz，CDC13) :8 189. 4, 152. 8, 145. 8, 137. 6, 131. 8, 130. 3, 129. 9, 127. 3, 125. 0, 117. 7, 114. 7, 54. 8, 47. 6, 46. 2.
[0033] I -10:橘黄色固体，总收率69% ;m.p. :167-168°C ? IROffiricmhieSS, 1597.iH 匪R (400MHz, CDC13): 5 7.42 (d，J = 8. 4Hz，2H), 7.27 (d，J = 15.7Hz, 1H), 6.85 (d，J =8. 4Hz, 2H) , 6. 81(d,J = 15. 7Hz, 1H) , 6. 16(s,2H) , 3. 85(s,3H) , 3. 75(s, 6H), 3. 35 - 3. 21 (m, 4H), 2. 60 - 2. 49 (m, 4H), 2. 34(s,3H). 13C NMR(101MHz, CDC13) :8 194. 5, 162. 1, 158. 6, 152. 5, 144. 9, 129. 9, 125. 7, 125. 3, 114. 8, 113. 5, 90. 8, 55. 9, 55. 4 ,54. 7, 47. 7, 46. 1.
[0034] I -11:橘黄色固体，总收率66% ;m.p. :161-162°C ? IROffiricmhieAS, lSSO.i 匪R (400MHz, CDC13): 5 7.87 (d，J = 8. 5Hz，2H), 7.80 (d，J = 15.4Hz, 1H), 7.61 (d，J =8. 5Hz, 2H), 7. 53 (d, J = 8. 7Hz, 2H), 7. 24 (d, J = 15. OHz, 1H), 6. 55 (d, J = 8. 8Hz, 2H), 3. 36 (t, J = 6. 6Hz, 4H), 2. 11 - 1. 96 (m, 4H). 13C NMR (101MHz, CDC13) :8 189. 4, 149. 8, 146. 8, 138. 0, 131. 7, 130. 8, 129. 9, 127. 0, 121. 9, 115. 5, 111. 8, 47. 6, 25. 5.
[0035] I -12:橘黄色固体，总收率55 % ;m.p. :169-170 °C ? IR(KBr) cm :: 1640, 1589. :H NMR(400MHz, CDC13) : 8 7. 39 (d, J = 8. 7Hz, 2H), 7. 26 (d, J = 15. 8Hz, 1H), 6. 76(d,J= 15. 8Hz, 1H), 6. 49 (d,J= 8. 8Hz, 2H), 6. 16 (s, 2H), 3. 85 (s, 3H)，3.75(s，6H)，3.32(t，J= 6.6Hz，4H)，2.06 - 1.96(m，4H).13C匪R(101MHz，CDC13) :8 194. 6, 162. 0, 158. 6, 149. 4, 146. 4, 130. 4, 123. 8, 122. 0, 112. 5, 111. 6, 90. 8, 55. 9, 55. 5 ,47. 6, 25. 4.
[0036] 实施例3上述化合物的抗人神经母瘤活性测定：
[0037] 1?实验方法：
[0038] 筛选所用化合物均是由本发明合成、纯化而得；样品储备液：称取3_5mg样品置于 1. 5mLEP管中，然后用DMS0配制成浓度是128X103yg/mL的溶液，4°C保存放置，实验时根 据所需浓度利用培养基稀释。
[0039] 2?初筛
[0040] 取对数生长期的细胞，消化计数后，用培养基调整细胞密度，以4000-5000个 cell/孔接种至96孔板中，每孔150yL，培养24h后，弃去培养基，加入用培养基稀释好的 药物（50yg/mL、100yg/mL)，每个浓度设6个复孔，另设空白对照组及阴性对照组。药物作 用72h后，每孔加入20yLMTT，继续培养4h后，吸去液体，加入150mL的DMS0,振荡均勾，酶 标仪490nm处检测吸光度值，计算抑制率，计算公式如下：
[0041] 抑制率（％ ) = (1-给药组吸光度值/空白组吸光度值）X100%
[0042] 3、细筛
[0043] 50yg/mL时抑制率大于50 %的样品，重新设置浓度进行细筛。即将待测样品以 0? 25yg/mL、0. 5yg/mL、1yg/mL、2yg/mL、4yg/mL、8yg/mL、16yg/mL、32yg/mL浓度加 入96孔板中，培养72h后，检测。试验结果采用SPSS软件计算IC5。值和相关系数。实验结 果见表1。
[0044] 表1化合物抑制人神经母瘤细胞株（SK-N-SH)的IC50值
[0045]
[0046]3每个数值用平均值土标准偏差（mean土SD)表示，方差分析：p〈0. 05.
[0047] 实验结果表明，本发明所提供的苯联氮杂环查尔酮衍生物对SK-N-SH肿瘤细胞具 有一定的抑制作用，其中化合物1-8的体外抗肿瘤活性明显优于5-氟脲嘧啶，可作为进一 步开发的候选或者先导化合物，应用于制备抗人神经母瘤药物。
【主权项】
1. 苯联氮杂环查尔酮衍生物，其特征在于，具有如下所示结构通式：札为4-氟、4-氯、4-溴或2, 4, 6-三甲氧基； R2SN-甲基哌嗪、吗啉、咪唑、四氢吡咯或哌啶； X为F或H。2. 如权利要求1所述的苯联氮杂环查尔酮衍生物，其特征在于，选如下化合物之一：3. 如权利要求1所述的苯联氮杂环查尔酮衍生物在制备药物中的应用，其特征在于， 将其做为活性成分用于制备抗人神经母瘤药物。4. 制备如权利要求1所述的苯联氮杂环查尔酮衍生物的方法，其特征在于，包括以下 步骤：(1) 化合物（m)的制备方法： 溶剂中，将含氮杂环在碱性条件下和对氟苯甲醛或3,4_二氟苯甲醛（II)反应得到化 合物III，所用的碱是氢氧化钠、氢氧化钾、碳酸钠、碳酸钾、磷酸钠、十二水磷酸钠、磷酸钾、 碳酸氢钾、碳酸氢钠中的一种；所用的溶剂为乙醇、甲醇、N，N-二甲基甲酰胺、二甲基亚砜、 四氢呋喃、二氧六环中之一或其中任意两种的混合物；反应在0_90°C之间进行； (2) 通式（I)的制备方法： 溶剂中，化合物（III)与取代苯乙酮在碱性条件下反应，待反应完成后，冷凝，析出固 体，抽滤即得到通式（I)化合物；所用的溶剂为丙酮、乙腈、乙醇、甲醇、异丙醇、蒸馏水中之 一或其中任意两种或三种的混合物；反应在0-90°C之间进行； 所述取代苯乙酮选4-氟苯乙酮、4-氯苯乙酮、4-溴苯乙酮或2,4,6-三甲氧基苯乙酮。
【专利摘要】本发明公开了一类苯联氮杂环查尔酮衍生物及其制备方法和应用，属于药物化学领域。本发明将含氮杂环与查尔酮母核骨架拼接，简单高效，绿色环保的合成了12个苯联氮杂环查尔酮衍生物。其具有如下结构通式：R1为卤素或三甲氧基。R2为N-甲基哌嗪、吗啉、咪唑、四氢吡咯、哌啶。X为卤素或H。该类化合物体外抗癌活性试验表明对人神经母瘤细胞株(SK-N-SH)具有一定的抑制作用，可作为进一步开发的候选或者先导化合物，应用于制备抗人神经母瘤药物。
【IPC分类】A61P35/00, C07D233/60, C07D295/112
【公开号】CN105130927
【申请号】CN201510577293
【发明人】张雁冰, 付冬君, 张赛扬, 刘宏民
【申请人】郑州大学
【公开日】2015年12月9日
【申请日】2015年9月11日