卵m 17 4. 2, 174. 0, 148. 2, 144. 0, 139. 3, 135. 2, 133. 3, 132. 9, 130. 8, 129. 7(X2), 129. 6, 129 .3 (X2), 129. 04, 128. 98, 127. 3, 125. 9, 123. 9, 122. 3, 67. 1, 58.8, 55.8, 41.8, 30. 7, 29. 5, 26. ：34, 26. 29, 26. 26, 23. 0, 21. 7.IR(邸r) 2921，1683, 1647, 1525, 1351，1231，757cm1. MS州SI) :m/z(% )= 512(100) [M+田+，534(95) [M+Na]+。
[0057]实施例8: 阳05引在10血反应试管中，依次加入磁子、甲苯（3mL)，1，2, 3, 4-四氨异哇嘟 (0. 75mmol) ,3-甲酯基[I比晚化75mmol) ,4-甲基苯甲酸（0. 5mmol)、环己基异腊（0. 5mmol) 和分子筛（120mg)。反应试管密封后，将反应混合液在60°C揽拌过夜。反应混合液经减压 浓缩，柱层析得到产物。产品经iH-NMR检测确定为所需产物（式V-h)，产率为95%，iH-NMR 和结构如下：
[0059]
[0060]
[0061]1h匪R(400MHz,CDCI3) 5邮m8. 45(dd,J= 4.8, 1. 2Hz, 1H),8. 28(d,J= 1. 2Hz,IH)，7.68(d,J=8.OHz, 2H)，7. 32 (d,J=8.OHz,IH)，7. 21-7. 18 (m, 5H)，7. 08 (dd,J =7.6, 4.8Hz,IH)，7. 02-7. 00 (m,IH)，4. 5 (s,IH)，4. 08-4. 01 (m,IH)，3. 42and3. 36(ABq,J =13.6, 13.6Hz, 2H)，2. 93-2. 85 (m,IH)，2. 71-2. 63 (m,IH)，2. 57-2. 51 (m,IH)，2. 41 (s, 3H)， 2. 39-2. 33 (m,IH)，2. 08-1. 92 (m, 2H)，1. 80-1. 72 (m, 4H)，1. 56 (d,J= 12. 4Hz,IH)，1. 25-1. 15 (m，2H), 1.13-1. 07 (m，lH)."CNMR(100MHz，CDCl3) 5 卵m174. 4,173. 8,149. 9,148. 6,14 3. 9, 137. 0, 133. 4, 133. 1, 132. 6, 130. 8, 129. 7, 129. 7(X2), 129. 3(X2), 129. 0, 127. 2, 125 .8, 123. 3, 67. 0, 58. 7, 53. 6, 41. 4, 30. 8, 29. 5, 26. 4, 26. 3, 25. 3, 22. 9, 21. 7.IR(film) 2927, 1694, 1655, 1276, 736cm1.MS片ESI) :m/z(% )= 457(100) [M+H]+,479(98) [M+Na]\ W62] 实施例9 : 阳06引在10血反应试管中，依次加入磁子、甲苯（3血)，1，2, 3, 4-四氨异哇嘟 (0. 75mmol)，异戊醒化75mmol)，4-甲基苯甲酸（0. 5mmol)、环己基异腊化5mmol)和分子 筛（120mg)。反应试管密封后，将反应混合液在60°C揽拌过夜。反应混合液经减压浓缩，柱 层析得到产物。产品经iH-NMR检测确定为所需产物（式V-i)，产率为27%，iH-NMR和结构 如下：
[0064]
阳0化]电NMR(400MHz，CDCI3) 5 卵m7. 70 (d,J=8.OHz, 2H)，7. 25 (d,J=8.OHz, 1H)，7 .22-7. 14 (m, 4H)，7. 00 (dd,J=8. 4, 2.OHz,IH)，4. 15-4. 08 (m,IH)，4. 07 (s,IH)，2. 87-2. 79 (m,IH), 2. 73-2. 65(m, 2H), 2. 41(s, 3H), 2. 40-2. ：M(m，IH), 2. 29-2. 22(m,IH), 2. 01-1. 91(m ，IH)，1. 83-1. 72 (m,6H)，1. 56 (d,J= 12. 4Hz,IH)，1. 29-1. 20 (m, 3H)，1. 14-1. 03 (m, 2H)，0 .99-0. 89(m, 1H)，0. 74(d,J=6. 4Hz，3H)，0. 71(d,J=6. 4Hz，3H)."CNMR(100MHz，CDCl3) 5 卵m173.6, 170. 0, 142. 9, 133. 9, 133.8, 131. 2, 130. 2, 129. 1 (X2), 129. 0(X2), 128.6 ，126. 9, 125.6,66. 3, 57.6, 49. 7, 40.8, ：M.8, 31. 1，29. 4, 26. 9, 26. 34, 26. 25, 25. 4, 23. 0， 22. 9, 22. 5, 21. 6.IR(film) 2932, 1691，1651，1265, 1227, 736cm1.MS片ESI) :m/z( % )= 447(100) [M+H]+。
[0066] 实施例10 :M1T法检测受试化合物对K562细胞（人白血病细胞株）的抗增殖活性 测试。
[0067] 将上述实施例制备的化合物，WK562细胞（人白血病细胞株）作为实验对象，进 行药理实验，实验采用四甲基偶氮挫盐微量酶反应比色法（M1T法），活性用半数抑制浓度 表不（IC5。）。
[0068] 具体实验步骤如下：
[0069] 分别取对数生长期肿瘤细胞，用含10%FBS的DMEM或者RPMI1640培养液培养， 然后用0. 25%膜蛋白酶消化成单细胞悬液，浓度为0. 5~2. 5X104细胞/ml。于96孔培养 板内每孔接种200y1 (含1000~5000个肿瘤细胞），给药组加入含有不同浓度样品，设6 个剂量组，使得药物的浓度为 50. 0yg/ml、10. 0yg/ml、2. 0yg/ml、0. 4yg/ml、0. 08yg/ml 和0. 016yg/ml，每组设S个平行孔。对照组加入与药等体积的溶剂。置37°C，5%C〇2溫箱 中培养4化后弃去培养液，每孔加入20y1 5mg/mlM1T溶液（用0. 01M的PBS溶解）。37°C 解育4小时，终止培养，小屯、吸去孔内培养上清液，每孔加入DMS0 150y1，满旋震荡仪（转 速巧00转/min)上震荡lOmin，使结晶物充分溶解。用酶标仪在570nm处进行实验检测，测 定光密度值（0D)，取3复孔0D值求平均值，计算化合物对肿瘤细胞的抑制率。W溶剂对照 处理的肿瘤细胞为对照组，计算药物对肿瘤细胞的抑制率，计算公式为：抑制率=(1-T0D/ COD)X100%，其中T0D为给药组0D均值，COD为溶剂对照组0D均值。W药物的不同浓度 及对细胞的抑制率作图可得到剂量反应曲线，从中求出药物的半数抑制浓度（ICJ。
[0070]
[0071] 通过上表数据可W看出：本发明制备的化合物，对于K562肿瘤细胞具有明显的抑 制活性，可W单独制备抗肿瘤药物、也可W作为活性成分与其他抗肿瘤药物制备抗肿瘤组 合物。
【主权项】
1. 一种I- (I-酷亚胺基）-2-芳基甲基-1，2, 3, 4-四氨异哇嘟衍生物，其结构如式 (V)所示：式中：Ri为氨或2, 6-二甲氧基；R2为4-甲基苯基，、3-硝基苯基、2-漠代苯基，、3-化 晚基、2-巧喃基或异下基；R3为4-甲基苯基、3-硝基苯基、4-甲氧基苯基、4-乙締基苯基、 2-漠-4-氣苯基、3-化晚基、2-巧喃基、2-苯并巧喃基、甲基；R4为环己基、苄基。2. -种权利要求1所述1- (1-酷亚胺基）-2-芳基甲基-1，2, 3, 4-四氨异哇嘟衍生 物的合成方法，其特征在于，包括W下步骤：在有机溶剂中，将一定量的1，2, 3, 4-四氨异 哇嘟、醒、簇酸、异腊和分子筛混合后在一定溫度下揽拌10-24小时，即得如式（V)所示的 1- (1-酷亚胺基）-2-芳基甲基-1，2, 3, 4-四氨异哇嘟衍生物。3. 根据权利要求2所述1- (1-酷亚胺基)-2-芳基甲基-1，2, 3, 4-四氨异哇嘟衍生物 的合成方法，其特征在于：所述有机溶剂为甲苯。4. 根据权利要求2所述1- (1-酷亚胺基)-2-芳基甲基-1，2, 3, 4-四氨异哇嘟衍生物 的合成方法，其特征在于：所述1，2, 3, 4-四氨异哇嘟为取代的1，2, 3, 4-四氨异哇嘟。5. 根据权利要求2所述1- (1-酷亚胺基)-2-芳基甲基-1，2, 3, 4-四氨异哇嘟衍生物 的合成方法，其特征在于：所述醒为芳醒或脂肪醒。6. 根据权利要求2所述1- (1-酷亚胺基)-2-芳基甲基-1，2, 3, 4-四氨异哇嘟衍生物 的合成方法，其特征在于：所述酸为芳基酸或脂肪酸。7. 根据权利要求2所述1- (1-酷亚胺基)-2-芳基甲基-1，2, 3, 4-四氨异哇嘟衍生物 的合成方法，其特征在于：所述异腊为芳基异腊或脂肪异腊。8. 根据权利要求2所述1- (1-酷亚胺基)-2-芳基甲基-1，2, 3, 4-四氨异哇嘟衍生物 的合成方法，其特征在于：所述1，2, 3, 4-四氨异哇嘟、醒、簇酸、异腊四种原料的物质的量 之比为 1:1:1:1 ~1:1. 5:1. 5:1. 5。9. 根据权利要求2所述1- (1-酷亚胺基)-2-芳基甲基-1，2, 3, 4-四氨异哇嘟衍生物 的合成方法，其特征在于：所述反应溫度为60-120 °C。10. -种权利要求1所述1- (1-酷亚胺基）-2-芳基甲基-1，2, 3, 4-四氨异哇嘟衍生 物在制备抗肿瘤药物方面的应用。
【专利摘要】本发明提供了一种1-（1-酰亚胺基）-2-芳基甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉衍生物及其制备方法与应用，本发明以1,2,3,4-四氢异喹啉、醛、羧酸和异腈为原料，分子筛为添加剂，在有机溶剂甲苯中，一定温度下搅拌10-24小时。反应混合液经减压浓缩、柱层析等操作得到高纯度1-（1-酰亚胺基）-2-芳基甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉类衍生物。本发明原料简单易得、反应条件温和、操作简单，且易得到取代基多样的1-（1-酰亚胺基）-2-芳基甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉衍生物，可很好满足高通量筛选对四氢异喹啉衍生物的需求，具有很好的应用和市场价值。
【IPC分类】C07D401/12, C07D217/26, C07D401/06, C07D405/12, A61P35/00
【公开号】CN105198812
【申请号】CN201510615141
【发明人】齐陈泽, 尹钰芸, 李 昊, 钱诗筠, 冯高峰, 张耀红
【申请人】绍兴文理学院
【公开日】2015年12月30日
【申请日】2015年9月24日