（028)，LC/MS表征（LCRS(MH)m/z328. 14)。不进一步纯化而 直接使用（028)。
[0237]化合物（029):
[0238]向（TC的（029)和（006) (117mg，0. 4mmol)、H0BT(70mg，0. 5mmol)和HBTU(170mg， 0. 5mmol)的四氢呋喃（50mL)溶液加入N，N-二异丙基乙胺（0. 5mL，2. 5mmol)的四氢呋 喃（5mL)溶液。室温继续搅拌混合物5小时，混合物变均相。然后用乙酸乙酯（200mL) 稀释，用饱和碳酸氢钠水溶液（2xl0mL)和盐水（10mL)洗涤。硫酸钠干燥有机层，并滤过 Celite-545。减压去除溶剂，HPLC(乙酸铵水溶液和乙腈）纯化残留物得（029) (125mg)， LC/MS表征（LCRS(MH)m/z481. 26);在 20mg/kgP0, > 70%蛋白酶体CT-L抑制。
[0239] 实施例4
[0240] 流程4:实例035的合成
[0241]
[0242]化合物（031):
[0243]向 0°C的Fmoc-L-4-噻唑基丙氨酸（030)(1. 0g，2. 5mmol)的二氯甲烷（4mL)溶液 加入N-甲基-味唑（150ul，1. 9mmol)，一旦混合物变均相便加入MSNT(755mg，2. 55mmol)和 HMPB树脂（800mg，0. 51mmol)。室温震摇所得反应混合物2小时。然后过滤掉树脂，用N，N-二甲基甲酰胺（3x20mL)和二氯甲烷（3x20mL)洗涤，空气干燥得（031)。
[0244]化合物（032):
[0245] 将树脂（031) (360mg，0. 23mmol)置于20%的哌啶的N，N-二甲基甲酰胺（20mL)溶 液中，室温震摇所得混合物1小时。然后过滤掉树脂，用N，N-二甲基甲酰胺（3xl0mL)和二 氯甲烷（3x1OmL)洗涤。
[0246] 向0°C的Fmoc-L-亮氨酸（204mg，0. 58mmol)的N，N_二甲基甲酰胺（4mL)溶液加 入H0BT(124mg，0. 92mmol)、HBTU(349mgO. 92mmol)和N，N-二异丙基乙胺（402ul，2. 3mmol)。 一旦反应混合物变均相便加入树脂。5°C震摇所得混合物5小时。然后过滤掉树脂，用N， N-二甲基甲酰胺（3x20mL)和二氯甲烷（3x20mL)洗涤，空气干燥所得树脂得（032)。
[0247]化合物（033):
[0248] 将树脂（032) (0. 23mmol)置于20%的哌啶的N，N-二甲基甲酰胺（20mL)溶液中， 室温震摇所得混合物1小时。然后过滤掉树脂，用N，N-二甲基甲酰胺（3xl0mL)和二氯甲 烷（3x1OmL)洗涤。
[0249]向 0°C的（022) (123mg，0. 58mmol)的N，N-二甲基甲酰胺（4mL)溶液加入 H0BT(124mg，0. 92mmol)、HBTU(349mg，0. 92mmol)和N，N-二异丙基乙胺（402yL，2. 3mmol)。 一旦所得混合物变均相便加入树脂，室温震摇所得反应混合物过夜。然后过滤掉树脂，用N， N-二甲基甲酰胺（3xl0mL)和二氯甲烷（3xl0mL)洗涤，空气干燥所得树脂得（033)。
[0250]化合物（034):
[0251] 向树脂（033)加入50%的三氟乙酸的二氯甲烷（10mL)溶液，震摇所得混合物30 分钟。然后过滤掉树脂，用二氯甲烷（3xl0mL)洗涤。减压去除挥发物得（34)，LC/MS表征 (LCRS(MH)m/z480.18)。不进一步纯化而直接使用（34)。
[0252]化合物（035):
[0253] 向 0Γ的（034)、（006) (70mg，0· 23mmol)、HOBT(50mg，0· 37mmol)和HBTU(140mg， 0. 37mmol)的四氢呋喃（50mL)溶液加入N，N-二异丙基乙胺（0. 5mL，2. 5mmol)的四氢呋喃 (5mL)溶液。室温搅拌混合物5小时，然后用乙酸乙酯（200mL)稀释。然后用饱和碳酸氢钠 水溶液（2xl0mL)和盐水（10mL)洗涤。硫酸钠干燥有机层，滤过Celite-545,减压去除溶 剂。HPLC(乙酸铵水溶液和乙腈）纯化所得残留物得（035) (15mg)，LC/MS表征（LCRS(MH) m/z633.3);在 40mg/kgP0，>90%蛋白酶体CT-L抑制。
[0254] 实施例5
[0255] 流程5:实例039的合成
[0256]
[0257]化合物（036):
[0258] 将树脂（031) (800mg，0. 23mmol)置于20%的哌啶的N，N-二甲基甲酰胺（20mL)溶 液中，室温震摇所得混合物1小时。过滤掉树脂，用N，N-二甲基甲酰胺（3xl0mL)和二氯甲 烷（3xl0mL)洗涤。
[0259]向 0°C的Fmoc-L-Ser(OMe) -〇H(435mg，1. 3mmol)的N，N-二甲基甲醜胺（lOmL) 溶液加入11(?1'(27611^，2.0111111〇1)、邢1'1](71011^，2.0111111〇1)和1^二异丙基乙胺（0.911^， 5.lmmol)。一旦反应混合物变均相便加入树脂。5°C震摇所得混合物5小时。然后过滤掉 树脂，用N，N-二甲基甲酰胺（3x20mL)和二氯甲烷（3x20mL)洗涤，空气干燥得（036)。
[0260]化合物（037):
[0261] 将树脂（036)置于20%的哌啶的N，N_二甲基甲酰胺（20mL)溶液中，室温震摇所 得混合物1小时。过滤掉树脂，用N，N-二甲基甲酰胺（3x20mL)和二氯甲烷（3x20mL)洗 涤。
[0262]向 0°C的（009) (162mg，1. 3mmol)的N，N-二甲基甲酰胺（4mL)溶液加入 H0BT(276mg，2.0mmol)、HBTU(710mg，2.0mmol)和N，N-二异丙基乙胺（0.9mL，5.lmmol)。一 旦所得混合物变均相便加入树脂，室温震摇所得反应混合物过夜。然后过滤掉树脂，用N， N-二甲基甲酰胺（3xl0mL)和二氯甲烷（3xl0mL)洗涤，空气干燥得（037)。
[0263]化合物（038):
[0264] 向（037)加入50%的三氟乙酸的二氯甲烷（10mL)溶液，震摇所得混合物30分 钟。然后过滤掉树脂，用二氯甲烷（3xl0mL)洗涤。减压去除挥发物得（38)，LC/MS表征 (LCRS(MH)m/z383.09)。不进一步纯化而直接使用（38)。
[0265]化合物（039):
[0266] 向（TC的（038)、（006) (156mg，0. 51mmol)、H0BT(lllmg，0· 82mmol)和HBTU(311mg， 0. 82mmol)的四氢呋喃（50mL)溶液加入N，N-二异丙基乙胺（0. 5mL，2. 5mmol)的四氢呋喃 (5mL)溶液。室温搅拌混合物5小时，混合物变均相。然后用乙酸乙酯（200mL)稀释，用饱 和碳酸氢钠水溶液（2xl0mL)和盐水（10mL)洗涤。硫酸钠干燥有机层，并滤过Celite-545。 减压去除溶剂，HPLC纯化残留物（乙酸铵水溶液和乙腈）得（039) (22mg)，LC/MS表征 (LCRS(MH)m/z536. 21);在 20mg/kgP0, > 75%蛋白酶体CT-L抑制。
[0267] 实施例6
[0268] 流程6:实例045的合成（方法A)
[0269]
[0270]化合物（041):
[0271]向 0°C的Fmoc-L-丙氨酸（040) (1. 0g，3. 2mmol)的二氯甲烷（30mL)溶液加入 N-甲基-咪唑（190μL，12. 4mmol)，一旦混合物变均相然后便加入MSNT(950mg，3. 2mmol) 和HMPB树脂（1. 0g，0. 64mmol)。室温震摇所得反应混合物2小时。然后过滤掉树脂，用N， N-二甲基甲酰胺（3x20mL)和二氯甲烷（3x20mL)洗涤得（041)。
[0272]化合物（042):
[0273] 将树脂（041)置于20%的哌啶的N，N_二甲基甲酰胺（20mL)溶液中，室温震摇所 得混合物1小时。过滤掉树脂，用N，N-二甲基甲酰胺（3x20mL)和二氯甲烷（3x20mL)洗 涤。
[0274] 向0 °C的Fmoc-Ser (OMe)-〇H(546mg，1. 6mmol)的N，N-二甲基甲醜胺（10mL)溶 液加入Η0ΒΤ (346mg，2. 6mmol)、HBTU (970mg，2. 6mmol)和N，N-二异丙基乙胺（1.lmL， 6. 4mmol)。一旦反应混合物变均相便加入树脂。5°C震摇所得混合物5小时。然后过滤掉 树脂，用N，N-二甲基甲酰胺（3x20mL)和二氯甲烷（3x20mL)洗涤，空气干燥得（042)。
[0275]化合物（043):
[0276] 将树脂（042) (0. 23mmol)置于20%的哌啶的N，N-二甲基甲酰胺（20mL)溶液中， 室温震摇所得混合物1小时。过滤掉树脂，用N，N-二甲基甲酰胺（3xl0mL)和二氯甲烷 (3xl0mL)洗涤。
[0277]向 0°C的（009) (203mg，1. 6mmol)的N，N-二甲基甲酰胺（10mL)溶液加入 Η0ΒΤ(346mg，2. 6mmol)、HBTU(970mg，2. 6mmol)和N，N-二异丙基乙胺（1.lmL，6. 4mmol)。一 旦所得混合物变均相便加入树脂，室温震摇所得反应混合物过夜。然后过滤掉树脂，用N， N-二甲基甲酰胺（3x20mL)和二氯甲烷（3x20mL)洗涤，空气干燥得（043)。
[0278]化合物（044):
[0279] 向（043)加入50%的三氟乙酸的二氯甲烷（10mL)溶液，震摇所得混合物30分 钟。然后过滤掉树脂，用二氯甲烷（3xl0mL)洗涤。减压去除挥发物得（044)，LC/MS表征 (LCRS(MH)m/z300.11)。不进一步纯化而直接使用（028)。
[0280]化合物（045):
[0281]向 0°C的上述中间体（044)和（006) (195mg，0. 64mmol)、H0BT(137mg，1.Ommol)和 HBTU(357mg，1.0mmol)的四氢咲喃（50mL)溶液加入N，N-二异丙基乙胺（0.5mL，2.5mmol) 的四氢呋喃（5mL)溶液。室温搅拌混合物4小时。然后用乙酸乙酯（200mL)稀释，用饱和碳 酸氢钠水溶液（2xl0mL)和盐水（10mL)洗涤。硫酸钠干燥有机层，并滤过Celite-545。减压 去除溶剂，HPLC纯化残留物（乙酸铵水溶液和乙腈）得（045) (84mg)，LC/MS表征（LCRS(MH) 111/2 453.23);在2〇11^/1^?0，>80%蛋白酶体(：1'-1^抑制。
[0282] 实施例7
[0283] 流程7:实例045的合成（方法B)
[0284]
[0285]化合物（047):
[0286] 10分钟内向0°C的N-Boc-丝氨酸（甲基醚）（001) (6. 57g，33mmol)、L-丙氨酸节 酯盐酸盐（046)(6.458,30臟〇1)、!1(?1'(5.058,33臟〇1)和邢1'1](11.88,33臟〇1)的四氢呋喃 (400mL)溶液加入N，N-二异丙基乙胺（9.0g，70mmol)的四氢呋喃（50mL)溶液。混合物变 均相，室温继续搅拌混合物5小时。然后减压去除大部分溶剂，用乙酸乙酯（500mL)稀释所 得物质。用饱和碳酸氢钠水溶液（2xl50mL)和盐水（200mL)洗涤，硫酸钠干燥有机层，滤过 Celite-545。减压去除溶剂，快速柱层析（己烷和乙酸乙酯）纯化残留物得（047) (11.8g)， LC/MS表征（LCRS(MH)m/z381.19)。
[0287]化合物（048):
[0288] 10分钟内向0°C的（047) (11. 8g，31.Ommol)的二氯甲烷（100mL)溶液加入三氟乙 酸（50mL)，在相同温度继续搅拌所得混合物3小时。然后减压去除溶剂，将残留物置于高真 空中过夜得LC/MS表征的（048)的TFA盐（LCRS(MH)m/z281. 15)，不进一步纯化而直接使 用048)的TFA盐。
[0289]化合物（049):
[0290] 10 分钟内向 0°C的（048)、5_ 甲基-异囉唑-3-甲酸（009) (3. 93g，31mmol)、 H0BT(4.7g，35mmol)和HBTU(12.5g，35mmol)的四氢呋喃（400mL)溶液加入N，N-二异丙 基乙胺（20mL)的四氢呋喃（100mL)溶液，所得混合物的pH为~8。室温继续搅拌混合物 5小时。然后减压去除大部分溶剂，用乙酸乙酯（1.0L)稀释。然后用饱和碳酸氢钠水溶 液（2xl00mL)和盐水（100mL)洗涤，硫酸钠干燥有机层，滤过Celite-545。减压去除溶剂， 快速柱层析（己烷和乙酸乙酯）纯化残留物得（049) (10.8g)，LC/MS表征（LCRS(MH)m/z 390. 16)〇
[0291]化合物（044):
[0292]向 0°C的（049) (3. 28g，8. 4mmol)的四氢呋喃（100mL)溶液加入 10% Pd/ C(500mg)。在1个大气压的氢气中搅拌所得混合物4小时。然后使混合物滤过Celite-545， 用四氢呋喃洗涤滤饼。减压浓缩有机滤液，置于高真空中2小时得（044)，LC/MS表征 (LCRS(MH)m/z28L15)。不进一步纯化而直接使用（044)。
[0293]化合物（045):
[0294] 向 0°C的（044)、（006) (1. 9g，8. 5mmol)、H0BT(2. 0g，13mmol)和HBTU(5. 4g， 14mmol)的四氢呋喃（200mL)溶液加入N，N-二异丙基乙胺（5.4g，42mmol)的四氢呋喃 (10mL)溶液。室温继续搅拌混合物5小时。然后减压去除大部分溶剂，用乙酸乙酯（400mL) 稀释所得物质。然后用饱和碳酸氢钠水溶液（2x50mL)和盐水（50mL)洗涤，硫酸钠干燥有 机层，滤过Celite-545。减压去除溶剂，HPLC(乙酸铵水溶液和乙腈）纯化残留物得（045) (1. 35g)，LC/MS表征（LCRS(MH)m/z453. 23)。
[0295]实施例8
[0296] 流程8 :实例055的合成
[0297]
[0298」化甘物（051):
[0299]向0°C的N-Boc-L-2-吡啶基丙氨酸（050)(1.0g，3. 76mmol)、L-苯丙氨酸苄酯盐 酸盐（002)(1.3g，3.76mmol)、H0BT(0.68g，5.0mmol)和HBTU(1.8g，5.0mmol)的四氢呋喃 (100mL)溶液加入N，N-二异丙基乙胺（1.6mL)的四氢呋喃（10mL)溶液。室温继续搅拌混合 物3小时，然后用乙酸乙酯（200mL)稀释，用饱和碳酸氢钠水溶液（2x50mL)和盐水（100mL) 洗涤，硫酸钠干燥有机层，滤过Celite-545。减压去除溶剂，快速柱层析（己烷和乙酸乙酯） 纯化残留物得（051) (1. 45g)，LC/MS表征（LCRS(MH)m/z504. 24)。
[0300]化合物（052):
[0301] 向0°C的（051)的四氢呋喃（100mL)溶液加入10%Pd/C(100mg)，在1个大气压的 氢气中搅拌所得混合物4小时。然后使混合物滤过Celite-545,用四氢呋喃洗涤滤饼。然 后减压浓缩有机滤液，置于高真空中得（〇52)，LC/MS确认（LCRS(MH)m/z414. 2)。不进一 步纯化而直接使用（052)。
[0302]化合物（053):
[0303] 向 0°C的（052)、（006) (0· 85g，3. 9mmol)、Η0ΒΤ(0· 70g，5. 3mmol)和HBTU(1. 70g， 4.9mmol)的四氢呋喃（lOOmL)溶液加入N，N-二异丙基乙胺（3mL)的四氢呋喃（lOmL)溶 液，室温搅拌混合物过夜。然后用乙酸乙酯（200mL)稀释，用饱和碳酸氢钠水溶液（2x50mL) 和盐水（50mL)洗涤。硫酸钠干燥有机层，滤过Celite-545,减压去除溶剂，快速柱层析（己 烷和乙酸乙酯）和HPLC(乙酸铵水溶液和乙腈）纯化残留物得（053) (1. 51g)，LC/MS表征 (LCRS(MH)m/z567. 21) 〇
[0304]化合物（054):
[0305] 向0 °C的（053) (200mg，0· 352mmol)的二氯甲烷（10mL)溶液加入三氟乙酸 (10mL)，在相同温度继续搅拌所得溶液1小时。减压浓缩溶液，置于高真空中得（054)，LC/ MS确认（LCRS(ΜΗ)m/z467. 26)。不进一步纯化而直接使用（054)。
[0306]化合物（055):
[0307]向 0°C的（054)、5_ 甲基-异曝唑-3-甲酸（009) (127mg，1.Ommol)、H0BT(135mg， 1.0臟〇1)和耶1'11(35〇11^，1.〇1111]1〇1)的四氢咲喃（10〇1]11^溶液加入1'1，1'1-二异丙基乙胺 (0. 5mL)的四氢呋喃（2mL)溶液。室温搅拌混合物5小时。然后用乙酸乙酯（200mL)稀释，用 饱和碳酸氢钠水溶液（2xl0mL)和盐水（10mL)洗涤。硫酸钠干燥有机层，滤过Celite-545， 减压去除溶剂，HPLC(乙酸铵水溶液和乙腈）纯化残留物得（055) (40mg)，LC/MS表征 〇^0?(]\^)111/2 576.27);在2〇11^/1^?0，>80%蛋白酶体(：1'-1^抑制。
[0308] 实施例9
[0309] 流程9 :实例061的合成
[0310]
[0311]化合物（057):
[0312]向0 °C的N-Boc-L-n-结|氨酸（056) (1. 0g，4. 6mmol)、1-苯丙氨酸节酯盐酸盐 (002)(1.4g，4.6mmol)、H0BT(1.0g，7.4mmol)和HBTU(2.8g，7.4mmol)的四氢呋喃（100mL) 溶液加入N，N-二异丙基乙胺（3. 2mL，18.4mmol)的四氢呋喃（10mL)溶液。室温搅拌混合 物3小时，然后用乙酸乙酯（200mL)稀释，用饱和碳酸氢钠水溶液（2x50mL)和盐水（100mL) 洗涤，硫酸钠干燥有机层，滤过Celite-545。减压去除溶剂，快速柱层析（己烷和乙酸乙酯） 纯化残留物得（057)，LC/MS表征（LCRS(MH)m/z455. 25)。
[0313]化合物（058):
[0314]向 0°C的（057) (1. 30g，2. 875mmol)的四氢呋喃（100mL)溶液加入 10% Pd/ C(100mg)。在1个大气压的氢气中搅拌所得混合物4小时。使混合物滤过Celite-545,用 四氢呋喃洗涤滤饼。然后减压浓缩滤液，置于高真空中得（〇58)，LC/MS确认（LCRS(MH)m/z 365. 2)。不进一步纯化而直接使用（058)。
[0315]化合物（059):
[0316]向（TC的（058)、（006) (0· 99g，4. 6mmol)、H0BT(0. 62g，4. 6mmol)和HBTU(1. 70g， 4.9mmol)的四氢呋喃（lOOmL)溶液加入N，N-二异丙基乙胺（2.4mL)的四氢呋喃（lOmL)溶 液。室温搅拌混合物过夜，然后用乙酸乙酯（200mL)稀释，用饱和碳酸氢钠水溶液（2x50mL) 和盐水（50mL)洗涤。硫酸钠干燥有机层，并滤过Celite-545。然后减压去除溶剂，HPLC(乙 酸铵水溶液和乙腈）纯化残留物得（059) (1. 21g)，LC/MS表征（LCRS(MH)m/z518. 32)。
[0317]化合物（060):
[0318]向0°C的（〇59) (25〇mg，0.48臟〇1)的二氯甲烷（10mL)溶液加入三氟乙酸（10mL)， 在相同温度继续搅拌所得溶液1小时。减压浓缩有机层，置于高真空中得（060)，LC/MS确 认（LCRS(MH)m/z418. 26)。不进一步纯化而直接使用（060)。
[0319]化合物（061):
[0320]向（TC的（060)、（022) (122mg，0. 58mmol)、H0BT(104mg，0. 77mmol)和HBTU(292mg， 0.72mm〇l)的四氢呋喃（lOOmL)溶液加入N，N-二异丙基乙胺（0.35mL)的四氢呋喃（2mL) 溶液，室温继续搅拌混合物4小时。然后用乙酸乙酯（200mL)稀释，用饱和碳酸氢钠水溶 液（2xl0mL)和盐水（10mL)洗涤。硫酸钠干燥有机层，并滤过Celite-545。减压去除溶 剂，HPLC(乙酸铵水溶液和乙腈）纯化残留物得（061) (88. 4mg)，LC/MS表征（LCRS(MH)m/z 612. 33);在 40mg/kgP0, > 80%蛋白酶体CT-L抑制。