减量剩余污泥微生物复合菌剂的筛选、制备和使用方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及生活污水处理的技术领域，具体说是一种减量剩余污泥微生物复合菌 剂的筛选、制备和使用方法。
【背景技术】
[0002] 我国面临着水量型缺水和水质型缺水的双重考验，人均水资源占有量低于世界平 均水平，居民用水量逐渐加大，对于水环境质量的关注和要求日渐提高。大量未处理生活污 水的直接排放对于我国水环境的质量造成了安全隐患如引起附近水体的富营养化等。生活 污水主要来源于洗涤、厨房、冲厕，特征污染物为COD、TN、TP、SS、氨氮，其中有机污染物含量 高，污水可生化性强，重金属及有毒有害物质含量较低。
[0003] 生物处理技术是利用微生物的代谢作用将有机污染物分解为0)2和H 20,或者有机 酸和醇等，从而达到净化污水的目的。与物理化学方法相比，生物处理法费用低廉，同时用 于污水处理的微生物繁殖快，容易培养，适应不同种类废水环境的能力强。在生物处理技术 领域通常对高效降解生活污水中特征污染物的菌株进行筛选，以实现对污水的生物降解处 理。
[0004] 目前，用于高效降解生活污水的菌株筛选方法主要是通过检测菌株的相关酶活 性，如降解生活污水中脂肪、蛋白质、纤维素等大分子物质的相应酶活性，然而，生活污水中 含有的有机物种类较多，仅仅检测污水中特定的几种有机物降解酶活性并不能反应菌株降 解污水中有机物的总体效果，并且测定酶活时的影响因素较多如温度、PH等，且每次测定结 果的稳定性较差。
【发明内容】
[0005] 本发明要解决的技术问题是提供一种减量剩余污泥微生物复合菌剂的筛选、制备 和使用方法。
[0006] 本发明为解决公知技术中存在的技术问题所采取的技术方案是： 本发明的减量剩余污泥微生物复合菌剂的筛选方法，选取具有降解蛋白质、纤维素和 淀粉的高产酶能力的芽孢杆菌，通过限制性培养，以绝干污泥作为限制性培养基内的唯一 氮源，将菌株种子液按5%v/v的比例接种，于30°C，150rpm/min条件下振荡培养，每72h进 行一次传代，传代过程接种的为上一代菌株摇床培养液，传代接种量5%v/v，共传3代；以传 代过程中菌株稳定性和对污泥有机质及TN的降解效果为标准进行筛选，得到污泥降解菌 株。
[0007] 本发明还可以采用以下技术措施： 限制性培养基中各组分浓度为：绝干污泥l〇g/L、葡萄糖10g/L、磷酸氢二钾6g/L、磷酸 二氢钾 3g/L、硫酸镁 0· 41g/L，pH 7. 0,121°C灭菌 20 min。
[0008] 筛选得到的污泥降解菌株分别为CGMCC地衣芽孢杆菌Bacillus licheniformis， 购买于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，菌种编号CGMCC No. I. 1630 ;枯 草芽孢杆菌Baci I Ius subti I i s，购买于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心， 菌种编号CGMCC No. 1.234 ;解淀粉芽抱杆菌Bacillus amyloliquefaciens,购买于中国微 生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，菌种编号CGMCC No. 1. 1226。
[0009] 本发明的减量剩余污泥微生物复合菌剂的制备方法，包括以下步骤： (1) 设定生长曲线分析仪温度37°C，测定污泥降解菌株的生长曲线，根据生长曲线确定 其取样时间； (2) 根据取样时间选取单菌种子液，以脱脂奶粉作为保护剂，按添加量7%w/v分别制备 单菌混合液，并通过喷雾干燥机制备菌剂，设定喷雾干燥进口温度ll〇°C，出口温度60°C， 进料速度16ml/min，雾化驱动，压力0. 4Mpa，过100目筛收集得到粉状菌剂。
[0010] 地衣芽孢杆菌Bacillus Iicheniformis的取样时间为14h，枯草芽孢杆菌 Bacillus subtilis 的取样时间为 22h，解淀粉芽抱杆菌 Bacillus amyloliquefaciens 的 取样时间为15h。
[0011] 本发明的减量剩余污泥微生物复合菌剂的使用方法，将喷雾干燥后的菌剂分 别投加到污泥中，上污泥摇床，经过72h摇床处理；其中菌剂地衣芽孢杆菌Bacillus Iicheniformis的添加量为0· 40~0· 50w/v%、枯草芽抱杆菌Bacillus subtilis的添加量 为0. 75~0. 85w/v%、解淀粉芽孢杆菌Bacillus amyloliquefaciens的添加量为的添加量 为 0·55 ~0· 65w/v%。
[0012] 地衣芽抱杆菌Bacillus Iicheniformis的添加量为0. 45w/v%、枯草芽抱杆菌 Bacillus subtilis 的添加量为 0.80w/v%、解淀粉芽抱杆菌 Bacillus amyloliquefaciens 的添加量为〇. 60w/v%。
[0013] 本发明具有的优点和积极效果是： 本发明的减量剩余污泥微生物复合菌剂的筛选方法中，以绝干污泥作为限制性培养基 内的唯一氮源，以传代过程中菌株稳定性和对污泥有机质及TN的降解效果为标准进行筛 选，得到污泥降解菌株，本发明的筛选方法目的明确，筛选过程直接有效。本发明的减量剩 余污泥微生物复合菌剂的制备方法中，采用喷雾干燥的方式获得粉状菌剂，工艺简单，且使 产品便于保管。本发明的减量剩余污泥微生物复合菌剂的使用方法中，将菌剂分别投加到 污泥中，通过改变菌种间的投加量获得最佳污泥降解效果，使用方法简单易行，处理效果良 好。
【具体实施方式】
[0014] 以下通过实施例对本发明的技术方案进行详细说明。
[0015] 本发明的减量剩余污泥微生物复合菌剂的筛选方法，选取具有降解蛋白质、纤维 素和淀粉的高产酶能力的芽孢杆菌，通过限制性培养，以绝干污泥作为限制性培养基内的 唯一氮源，将菌株种子液按5%v/v的比例接种，于30°C，150rpm/min条件下振荡培养，每 72h进行一次传代，传代过程接种的为上一代菌株摇床培养液，传代接种量5%v/v，共传3 代；以传代过程中菌株稳定性和对污泥有机质及TN的降解效果为标准进行筛选，筛选得 到的污泥降解菌株分别为CGMCC地衣芽孢杆菌Bacillus licheniformis，购买于中国微 生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，菌种编号CGMCC No. 1. 1630 ;枯草芽孢杆菌 Bacillus subtilis，购买于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，菌种编号 06]\0^1^〇.1.234;解淀粉芽抱杆菌1^(3；[11118&1117101丨9116€&(^6118，购买于中国微生物菌种 保藏管理委员会普通微生物中心，菌种编号CGMCC No. I. 1226。
[0016] 限制性培养基中各组分浓度为：绝干污泥10g/L、葡萄糖10g/L、磷酸氢二钾6g/L、 磷酸二氢钾 3g/L、硫酸镁(λ 41g/L，pH 7. 0,121°C 灭菌 20min。
[0017] 本发明的减量剩余污泥微生物复合菌剂的制备方法，包括以下步骤： (1) 设定生长曲线分析仪温度37°C，测定污泥降解菌株的生长曲线，根据生长曲 线确定其取样时间；从而得到地衣芽孢杆菌Bacillus Iicheniformis的取样时间为 14h，枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis的取样时间为22h，解淀粉芽孢杆菌Bacillus amyloliquefaciens 的取样时间为 15h ; (2) 根据上述取样时间分别选取单菌种子液，以脱脂奶粉作为保护剂，按添加量7%w/v 分别制备单菌混合液，并通过喷雾干燥机制备菌剂，设定喷雾干燥进口温度ll〇°C，出口温 度60°C，进料速度16ml/min，雾化驱动，压力0. 4Mpa，过100目筛收集得到三种粉状菌剂。
[0018] 本发明的减量剩余污泥微生物复合菌剂的使用方法，将喷雾干燥后的菌剂分 别投加到污泥中，上污泥摇床，经过72h摇床处理；其中菌剂地衣芽孢杆菌Bacillus Iicheniformis的添加量为0· 40~0· 50w/v%、枯草芽抱杆菌Bacillus subtilis的添加量 为0. 75~0. 85w/v%、解淀粉