生产吡嗪并[2，1-c][1，2，4]三嗪化合物的方法
【专利摘要】生产4?(((6S，9S)?1?(苄基氨基甲酰基)?2，9?二甲基?4，7?二氧代?8?(喹啉?8?基甲基)八氢?1H?吡嗪并[2，1?c][1，2，4]三嗪?6?基)甲基)苯基磷酸二氢酯的方法，其包括将含有(6S，9S)?N?苄基?6?(4?羟基苄基)?2，9?二甲基?4，7?二氧代?8?(喹啉?8?基甲基)八氢?1H?吡嗪并[2，1?c][1，2，4]三嗪?1?甲酰胺、三乙胺和溶剂的反应溶液1添加到含有磷酰化剂和溶剂的反应混合物2中的步骤。
【专利说明】
生产吡嗪并[2,1-c][1，2,4]三嗪化合物的方法
技术领域
[0001] 本发明涉及4-(((6S，9S)-1-(苄基氨基甲酰基)-2,9_二甲基_4,7_二氧代-8-(喹 啉-8-基甲基)八氢-IH-吡嗪并[2，l-c][l，2,4]三嗪-6-基）甲基)苯基磷酸二氢酯（以下被 称为化合物1)的生产方法。
【背景技术】
[0002] 在专利文献1中所描述的化合物1是通过在Wnt信号转导途径中抑制CREB结合蛋白 (CBP)而抑制TCF4/i3-连环蛋白转录途径的化合物，并且该化合物是预期用于治疗各种癌症 (例如，肺癌、乳腺癌、胃癌、胰腺癌、肝癌、子宫癌、卵巢癌、神经胶质瘤、黑色素瘤、直肠结肠 癌、淋巴瘤、白血病）、关于血管成形术的再狭窄、血管生成畸形、多囊肾、结节性硬化症、阿 尔茨海默氏病、神经退行性疾病(例如，青光眼、黄斑变性、帕金森氏病、阿尔茨海默氏病)和 纤维化(例如，特发性肺纤维化）。 文献列表 专利文献
[0003] 专利文献 1:W0 2009/148192 发明概述 本发明所要解决的问题
[0004] 在专利文献1中，化合物1是通过将磷酰氯添加到（6S，9S)-N_苄基-6-(4-羟基苄 基)-2,9_二甲基-4,7-二氧代-8-(喹啉-8-基甲基)八氢-IH-吡嗪并[2，l-c][l，2,4]三嗪-1-甲酰胺(下文被称为化合物2)和三乙胺在四氢呋喃中的溶液中以进行反应而生产的。
[0005] 然而，已经需要相比于专利文献1所公开的生产方法，以更高的收率和更高的纯度 提供化合物1的工业上优异的生产方法。因此，本发明的一个目标是提供一种以更高的收率 和更高的纯度提供化合物1的工业上更优异的生产方法。解决问题的方法
[0006] 本发明人已经进行了深入的研究并且发现了一种以更高的收率和更高的纯度提 供化合物1的生产方法，并且完成了本发明。
[0007] 也就是说，本发明提供以下的[1]_[9]。
[1] 一种生产4-(((63,93)-1-(苄基氨基甲酰基)-2,9-二甲基-4,7-二氧代-8-(喹啉-8-基甲基)八氢-IH-吡嗪并[2，1-c ][ 1，2，4 ]三嗪-6-基）甲基)苯基磷酸二氢酯的方法，其包 括将含有(6S，9S) -N-苄基-6-( 4-羟基苄基)-2，9-二甲基-4，7-二氧代-8-(喹啉-8-基甲基） 八氢-IH-吡嗪并[2，l-c][l，2,4]三嗪-1-甲酰胺、有机碱和溶剂的反应混合物1添加到含有 磷酰化剂和溶剂的反应混合物2中的步骤。
[2] 所述[1 ]的生产方法，其进一步包括将上述提及的反应混合物1和上述提及的反应 混合物2的混合物溶液与无机碱混合的步骤。
[3] 所述[1]的生产方法，其包括将上述提及的反应混合物1和上述提及的反应混合物2 的混合物溶液添加到包含无机碱和水的反应混合物3中。
[4] 所述[2]或[3]的生产方法，其中上述提及的无机碱是氢氧化钠。
[5] 方案[1]-[4]的任一项的生产方法，其中上述提及的反应混合物1中的溶剂是四氢 呋喃。
[6] 方案[1]_[5]的任一项的生产方法，其中上述提及的反应混合物2中的溶剂是四氢 呋喃。
[7] 方案[1]_[6]的任一项的生产方法，其中上述提及的反应混合物1中的水含量是小 于O· 5% 〇
[8] 方案[1]_[7]的任一项的生产方法，其中上述提及的反应混合物1中的水含量是小 于O · 1 % 〇
[9] 方案[1]-[8]的任一项的生产方法，其中当将上述提及的反应混合物1添加到上述 提及的反应混合物2中时，将上述提及的反应混合物2冷却至-15°C至-HTC。 本发明的效果
[0008]根据本发明，通过添加反应混合物1到反应混合物2中，可以降低待使用的磷酰化 剂和如有机碱等的试剂的量。此外，根据本发明，可以抑制如二聚物等杂质的产生，并且可 以获得具有更高收率和更高纯度的化合物1。此外，根据本发明，也可以减少环境负担。 实施方案的描述
[0009]通过显示在本说明书中所使用的符号、术语等的定义等，在下面对本发明进行详 细说明。
[0010] 本发明的生产方法在下面被说明。
[0011] 本发明包括将含有化合物2、有机碱和溶剂的反应混合物1添加到含有磷酰化剂和 溶剂的反应混合物2中的步骤(步骤A)，和将反应混合物1和反应混合物2的混合物溶液与无 机碱混合的步骤(步骤B)。
[0012] (步骤 A) 在步骤A中，将含有化合物2、有机碱和溶剂的反应混合物1添加到含有磷酰化剂和溶剂 的反应混合物2中。
[0013] 在反应混合物1中待使用的溶剂是没有被特别限制的，只要该溶剂溶解化合物2和 有机碱，并且该溶剂不抑制随后待进行的反应。这样的溶剂的实例包括如四氢呋喃、二甲氧 基乙烷、叔丁基甲基醚、2-甲基四氢呋喃、甲苯、庚烷和乙酸乙酯，优选四氢呋喃。
[0014] 反应混合物1待使用的溶剂的量是5-20mL，优选是8-12mL每Ig质量的化合物2。
[0015] 反应混合物1的水含量优选是小于0.5%，更优选小于0.1 %。反应混合物1的水含 量可以例如通过卡尔费歇尔(Karl Fischer)法测量。当反应混合物1的水含量在上述提及 的范围内时，可以以更高收率获得化合物1。
[0016] 当反应混合物1的水含量高于上述提及的范围时，可以通过用甲苯、四氢呋喃等重 复共沸蒸馏操作来降低水含量。优选的是四氢呋喃，因为它可以溶解在步骤A中使用的试 剂。
[0017]在反应混合物1中待使用的有机碱是没有被特别限制的，只要它是有机化学领域 中通常使用的有机碱。作为这样的有机碱，优选的是三烷基胺，并特别优选的是三乙胺。在 步骤A中待使用的有机碱的摩尔数是不少于1当量，优选是1至8当量，更优选是1.5-5当量， 基于化合物2的摩尔数作为1当量。
[0018] 反应混合物1的温度优选是10-40°c，更优选是20-30°C。
[0019] 在反应混合物2中待使用的溶剂是没有被特别限制的，只要该溶剂溶解磷酰化剂， 并且该溶剂不抑制随后待进行的反应。这样的溶剂的实例包括如四氢呋喃、二甲氧基乙烷、 叔丁基甲基醚、2-甲基四氢呋喃、甲苯、庚烷和乙酸乙酯，优选四氢呋喃。
[0020] 该磷酰化剂是没有被特别限制的，只要它将化合物2磷酸化以产生化合物1。这样 的磷酰化剂的实例包括磷酸卤化物，如磷酸氯化物(phosphoric acid chloride)、磷酸溴 化物等;双(二甲基氨基)磷酰氯和双(二乙基氨基)磷酰氯。该磷酰化剂优选是磷酸氯化物， 更优选是磷酰氯。在步骤A中待使用的磷酰化剂的摩尔数是不少于1当量，优选是1至8当量， 更优选是1.5-5当量，基于化合物2的摩尔数作为1当量。
[0021] 在使用中该反应混合物2的温度优选是不高于(TC，更优选是_15°C至_10°C。在这 样的温度范围内，倾向于更抑制杂质的产生，其从反应温度的控制和经济效率的方面而言 是优选的。
[0022] 通过将反应混合物1添加到反应混合物2中来进行步骤A。为了添加反应混合物1， 使用用于添加少量的设备，如注射栗、滴液漏斗等，由此可以实现所期待的较少产生杂质 (如二聚物等)的反应。
[0023] 在完成将反应混合物1添加到反应混合物2中之后，反应时间优选是5分钟至5小 时，更优选是15分钟至1小时。
[0024] (步骤 B) 步骤B包括将反应混合物1和反应混合物2的混合物溶液与无机碱进行混合的步骤(步 骤Bl )，用有机溶剂洗涤在步骤Bl中获得的溶液(混合物1)的步骤(步骤B2)，和将酸添加到 在上述提及的洗涤后所获得的混合物2中以沉淀化合物1的步骤(步骤B3)。
[0025] 在步骤Bl中，将反应混合物1和反应混合物2的混合物溶液与无机碱混合。
[0026] 在步骤Bl中待使用的无机碱是没有被特别限制的，只要它分解在步骤A中残留的 磷酰化剂。这样的无机碱的实例包括氢氧化钠、氢氧化钾、碳酸氢钠和碳酸钠，优选氢氧化 钠。当该无机碱是氢氧化钠时，可以抑制在磷酰化剂分解期间的发泡。
[0027] 在步骤Bl中待使用的无机碱优选是以含有无机碱和水的反应混合物3的形式使 用。使用反应混合物3的形式的无机碱，可以抑制与所述磷酰化剂分解相关的热产生，可以 进行均匀混合，并且可以更有效地分解残留的磷酰化剂。
[0028] 此外，将混合物1添加到反应混合物3中的方法可以进一步抑制如二聚物等的杂质 的产生，并且可以以更高的纯度和收率获得化合物1。
[0029] 当混合物1与无机碱混合时，混合物1的温度优选是不高于15°C，更优选5-10°C。
[0030] 在步骤BI中待使用的无机碱的量是没有被特别限制的，只要它可以分解在步骤A 的反应混合物中残留的磷酰化剂。这样的无机碱的量优选是1-20当量，更优选是1-10当量， 基于磷酰化剂的摩尔数作为1当量。
[0031] 在步骤B2中，用有机溶剂洗涤混合物1。
[0032] 在步骤B2中用于洗涤的有机溶剂是没有被特别限制的，只要它是不与化合物1反 应的有机溶剂。这样的有机溶剂优选是乙酸乙酯。通过用乙酸乙酯洗涤可以更有效地去除 二聚物。
[0033]在步骤B3中，将酸添加到在步骤B2之后获得的混合物2中，以沉淀化合物1。
[0034] 在添加酸到混合物2之前，可以用有机溶剂稀释混合物2。作为这样的有机溶剂，可 以提及乙醇。可以适当地调节这样的有机溶剂的量以防止化合物1的沉淀速率的降低。
[0035] 待添加到混合物2中的酸是没有被特别限制的，只要它释放质子。这样的酸的实例 包括盐酸和硫酸，优选盐酸。
[0036] 在步骤B3中，在添加酸到混合物2期间，优选搅拌混合物2。通过搅拌混合物2,所述 酸可以更均匀地扩散，并且可以抑制化合物1以大体积状(bulky state)沉淀。
[0037] 通过过滤和干燥来收集沉淀物可以在步骤B3中获得化合物1。
[0038] 可以通过在减压下加热或用热空气加热来干燥化合物1。
[0039] 本发明的一个实施方案可以包括使N-苄氧羰基-L-丙氨酸、羰基二咪唑与N-甲氧 基-N-甲胺盐酸盐反应的步骤(步骤C)，使1_(甲氧基（甲基)氨基)-1_氧代丙烷-2-基氨基甲 酸(S)-苄酯与双(2-甲氧基乙氧基)氢化铝钠反应的步骤(步骤D)，使1-氧代丙烷-2-基氨基 甲酸(S)-苄酯与原甲酸三乙酯反应的步骤(步骤E)，或者使用溴乙酸乙酯、一甲基肼和异氰 酸苄酯作为起始材料通过一锅法反应而获得2-(2-(苄基氨基甲酰基)-1-甲基肼基）乙酸的 步骤(步骤F )。
[0040] 当包括步骤C-F时，倾向于抑制光学纯度的降低，由于步骤数目减少可以降低待使 用的试剂和溶剂的量，并且可以提供一种在经济上有利的方法。步骤C-F在下面被说明。
[0041] (步骤 C) 在步骤C中，使N-苄氧羰基-L-丙氨酸、羰基二咪唑和N-甲氧基-N-甲胺盐酸盐反应。 很烟步骤u通]史用丄I上头用的讯介|」，
規垂一咪哗，η」以以咼叹毕犾侍1-〈中'氧垂 (甲基)氨基)-1-氧代丙烷-2-基氨基甲酸(S)-苄酯。
[0043]步骤C可以在溶剂中或无溶剂下进行，其中有机溶剂是没有被特别限制的，只要它 们不影响反应。这样的溶剂的实例包括乙腈、四氢呋喃、二甲氧基乙烷、叔丁基甲基醚、2-甲 基四氢呋喃、甲苯、庚烷和乙酸乙酯，优选乙腈。
[0044] 步骤C的反应温度优选是0-30°C，更优选是20-25°C。
[0045](步骤 D) 在步骤D中，使1-(甲氧基（甲基)氨基)-1-氧代丙烷-2-基氨基甲酸(S)-苄酯和双(2-甲 氧基乙氧基)氢化铝钠反应。
根据步骤D，使用工业上实用的试剂双(2-甲氧基乙氧基)氢化铝钠，可以获得1-氧代丙 烷-2-基氨基甲酸(S)-苄酯，并且可以进一步抑制光学纯度的降低。
[0047]在步骤D中待使用的溶剂是没有被特别限制的，只要它们是不影响反应的有机溶 剂。这样的溶剂的实例包括二异丙醚和四氢呋喃，优选四氢呋喃。
[0048] 步骤D的反应温度优选是-40 °C至(TC，更优选是-25 °C至-10 °C。
[0049](步骤 E) 在步骤E中，使1-氧代丙烷-2-基氨基甲酸(S)-苄酯和原甲酸三乙酯反应。
根据步骤E，可以以高收率获得1，1_二乙氧基丙烷-2-基氨基甲酸(S)-苄酯，并且可以 进一步抑制在步骤E中获得的1，1_二乙氧基丙烷-2-基氨基甲酸（S)-苄酯的光学纯度的降 低。
[0051]在步骤E中，优选添加酸性催化剂。这样的酸性催化剂优选是具有质子的酸，更优 选是酸性加成盐，如叔胺、吡啶等。叔胺、吡啶等的酸性加成盐的实例包括对甲苯磺酸吡啶 鑰。当酸性催化剂是叔胺、吡啶等的酸性加成盐时，可以进一步抑制在步骤E中获得的1，1_ 二乙氧基丙烷-2-基氨基甲酸(S)-苄酯的光学纯度的降低。
[0052]在步骤E中待使用的酸性催化剂的量是0.3-0.01当量，优选是0.1-0.03当量，基于 1-氧代丙烷-2-基氨基甲酸(S)-苄酯的摩尔数作为1当量。
[0053]步骤E的反应温度优选是0-30°C，更优选是15-25Γ。在这样的温度范围内，倾向于 进一步抑制在步骤E中获得的1，1_二乙氧基丙烷-2-基氨基甲酸（S)-苄酯的光学纯度的降 低。
[0054]在步骤F中，使用溴乙酸乙酯、一甲基肼和异氰酸苄酯作为起始材料，通过一锅法 反应而获得2-( 2-(苄基氨基甲酰基)-1 -甲基肼基）乙酸。
根据步骤F，使溴乙酸乙酯与甲基肼反应。之后，将异氰酸苄酯添加到所获得的反应混 合物中，并且该混合物进一步水解以以高收率产生2-(2-(苄基氨基甲酰基)-1-甲基肼基） 乙酸，而不需在步骤中间进行纯化。
[0056]通过一锅法反应的生产可以减少每个反应和纯化中待使用的溶剂的量。因此，从 减少环境负担和成本的方面而言，步骤F是优选的。当通过一锅法反应的生产是可能的时， 特别地，在常规方法的每个步骤中用于纯化所必需的试剂、溶剂等不再是必需的，并且可以 在更短的时间内有效地生产2-( 2-(苄基氨基甲酰基)-1 -甲基肼基)乙酸。 实施例
[0057] 尽管本发明的实施例在下文被详细描述，但这些实施例不是限制性的。此外，在实 施例中出现的"eq"显示按照Imol组分表示为"leq"的使用的摩尔(mol)数，和"vol"显示按 照Ig组分表示为"leq"的使用的体积(mL)。光学纯度被表示为对映体过量（％ee)。
[0058] 实施例1 化合物1的生产方法 将在WO 2009/148192中描述的化合物2的脱水物(anhydride) (10.2克，Ieq)放置在茄 形烧瓶1中，在室温下添加四氢呋喃(70mL，7vo 1)和三乙胺(9.6mL，4. Oeq)，并且搅拌所获得 的混合物(下文被称为反应混合物1)。搅拌之后，通过卡尔费歇尔法测量反应混合物1中的 水含量，以确认该水含量小于500ppm。将四氢呋喃(80mL，8vol)放置在另一个茄形烧瓶2中， 冷却至-15 °C，并且添加磷酰氯(3.2mL，2. Oeq)以产生混合物(下文被称为反应混合物2)。使 用注射栗，在70分钟内，将反应混合物1逐滴添加到盛有反应混合物2的茄形烧瓶中，同时保 持内部温度在-17. TC至-16.3°C。用四氢呋喃(5mL，0.5vo 1)洗涤盛有反应混合物1的茄形 烧瓶，并且将该洗涤液添加到茄形烧瓶2中。搅拌35分钟后，通过HPLC确认该反应终止。 将5N氢氧化钠水溶液(25.4mL，7.35eq)和水(224.6mL，22.5vo 1)放置在茄形烧瓶3中， 并用冰水冷却（下文被称为反应混合物3)。通过使用特氟龙套管，在5分钟内，将茄形烧瓶2 中的反应混合物1和反应混合物2的混合物逐滴添加到反应混合物3中，同时保持内部温度 在3.6 °C至12.2 °C。在逐滴添加完成之后，在6 °C的外部温度下将混合物搅拌65小时，并且将 该反应混合物温热至室温。添加水(27.5mL，2.75vo 1)以完全溶解无机盐(pH=9.7，液体量 435mL，43.5to 1)。将乙酸乙酯（IOOmL，IOvo 1)添加到所获得的溶液中（约20 %的溶液用于参 考实施例8以制备化合物1水合物的晶体(晶种），并使用剩余的溶液），并将该混合物在分液 漏斗中振荡、静置并丢弃顶层。重复此操作四次以产生含有化合物1的水溶液（液体量 274mL，27.4vol)。 将乙醇（65mL，6.84vo 1)添加到含有化合物1的水溶液(260mL，对应于9.5克化合物2) (pH=8.0)中。将37质量％的盐酸(总量3.14mL，0.33to 1)缓慢逐滴添加到所获得的溶液中， 同时用20°C的冷却剂冷却，随后将在后面提及的参考实施例8中获得的化合物1的水合物 (111. 35mg)添加到其中。在确认沉淀物增加之后，进一步搅拌该混合物约20分钟。然后，用 37质量％的盐酸（0.29!1^，0.03￥〇1)进一步酸化该混合物(？!1 = 4.0)，在5小时内逐步冷却 至-15°C的内部温度，并且搅拌该混合物11小时。加热母液到约20°C，添加37质量％的盐酸 (2 · 28mL，0 · 24voI) (pH= 2 · 3)，并在4小时内将混合物逐步冷却至-10°C的内部温度，并且搅 拌约15小时。熟化的母液被吸滤，并用冷水-乙醇(体积比8: 2，28.5mL，3vol)、冷水(47.5mL， 5voI)、冷水-乙醇(体积比8:2，28.5mL，3voI)以该顺序洗涤所获得的沉淀物。随后在45 °C下 减压下将沉淀物干燥约8小时，以产生化合物1的水合物(收率9.4克，87 %，转换为化合物1 的收率)。 1H-NMlKeOOMHz，甲醇-d4)S(ppm):1.15(d，J = 6Hz，3H)，2.65(s，3H)，3.12(d，J= 18Hz， lH)，3.35(d，J = 7Hz，2H)，3.48(d，J=18Hz，lH)，4.15(m，lH)，4.32(d，J=15Hz，lH)，4.40 (d，J=15Hz，lH)，5.33(d，J=16Hz，lH)，5.41(d，J=16Hz，lH)，5.44(d，J = 7Hz，lH)，5.64 (d，J=10Hz，lH)，7.07(dd，J = 9，lHz，2H)，7.15(d，J = 9Hz，2H)，7.24(t，J = 7Hz，lH)，7.27 (d，J = 7Hz，2H)，7.34(t，J = 8Hz，2H)，7.55(dd，J = 8,4Hz，lH)，7.60(brd，J = 6Hz，lH)，7.62 (dd，J = 8,7Hz，lH)，7.88(dd，J = 8，lHz，lH)，8.38(dd，J = 8,2Hz，lH)，8.90(dd，J = 4,2Hz， 1Η)〇
[0059] 根据实施例1的生产方法，可以抑制杂质的产生，并且收率是87%，其比专利文献I 的实施例1-7中描述的收率(60%)高。此外，相比于专利文献1中所描述的生产方法，实施例 1的生产方法可以生产更大量的化合物1。
[0060] 参考实施例1 1-(甲氧基（甲基)氨基)-1-氧代丙烷-2-基氨基甲酸(S)-苄酯的合成 将N-苄氧羰基-L-丙氨酸（9.8克，43.9mmol)、N-甲氧基-N-甲胺盐酸盐（I. leq)、1-乙 基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐（10克，1.2eq)和N，N_二甲基-4-氨基吡啶(0.53 克，0.1eq)溶解在N，N-二甲基甲酰按（IOOmL，IOvol)中，并且在室温下在30分钟内逐滴添加 N，N-二异丙基乙胺(23mL，3eq)。搅拌5小时后，将2N盐酸(200mL)添加到该反应混合物中，并 且用乙酸乙酯（200mL)萃取该混合物。用IN氢氧化钠溶液(200mL)洗涤该萃取物以去除未反 应的起始材料。用饱和盐水洗涤所获得的有机层，并且在无水硫酸镁上干燥。在减压下蒸发 溶剂，并且所得油从甲基叔丁基醚(20mL)和正庚烷（IOOmL)中结晶。通过过滤收集所获得的 晶体，用正庚烷(20mL)洗涤，在减压下干燥，以产生作为白色固体的标题化合物(收率4.74 克，41%) 〇
[0061 ] 参考实施例2 将N-苄氧羰基-L-丙氨酸(5.0克，22.4mmo I，I eq)溶解在乙腈(50mL，10to 1)中，并在数 分钟内添加粉末形式的羰基二咪唑（2.4克，I. Ieq)，同时在室温下搅拌该混合物。在搅拌30 分钟之后，在数分钟内添加粉末形式的N-甲氧基-N-甲胺盐酸盐（I. Ieq)。1.5小时后，将IN 盐酸(50mL)添加到反应混合物中，并且用乙酸乙酯（50mL)萃取该混合物。用碳酸氢钠水溶 液-盐水(50mL)洗涤该有机层，并且在无水硫酸镁上干燥。在减压下蒸发溶剂，将乙酸乙酯 (IOmL)添加到所获得固体中，并在60°C下溶解，并在室温下从正庚烷(50mL)中结晶。通过过 滤收集所获得的晶体，用正庚烷(20mL)洗涤，在减压下干燥，以产生作为白色固体的标题化 合物(收率5.22克，88%)。
[0062] 参考实施例3 在15 °C下，在15分钟内，将羰基二咪唑(80克，I. I eq)在乙腈(7 V01)中的悬浮液逐滴添 加到N-苄氧羰基-L-丙氨酸（100克，leq)在乙腈(3vol)中的溶液中。（观察到发泡，并且反应 温度上升约4 °C。在逐滴添加10分钟之后，不溶性材料沉淀）。搅拌15分钟之后，在5分钟内添 加粉末形式的N-甲氧基-N-甲胺盐酸盐(48克，I. leq)(有时在添加后立即观察到产生热）。 在室温下搅拌30分钟后，通过TLC确认起始材料消失。将IN盐酸（1000 mL)添加到反应混合物 中，并且用乙酸乙酯萃取该混合物(一次用50〇11^，一次用30〇1]11)。用碳酸氢钠-盐水(30〇1]^) 和水(300mL)洗涤该萃取层，在减压下浓缩所获得的有机层，并用乙醇共沸蒸馏脱水，以产 生目标粗产物（150克）。在60°C下，将所获得的粗产物溶解于乙酸乙酯（150mL)中，在搅拌下 从正庚烷(600mL)中结晶，并通过过滤收集所沉淀的固体，以产生作为初生晶体的标题化合 物(收率94.6克，80% )。从母液中获得作为二次晶体的标题化合物(收率18.7克，15.7% )。 通过HPLC测量初生晶体和二次晶体的纯度和光学纯度，发现两者的纯度>99.5%，和两者 的光学纯度为几乎100%ee。初生晶体和二次晶体的总收率是113.3克，95.2%。
[0063] 参考实施例4 1，1-二乙氧基丙烷-2-基氨基甲酸(S)-苄酯的合成 将1_(甲氧基（甲基)氨基)-1_氧代丙烷-2-基氨基甲酸(S)-苄酯(5.0克，18.Smmol)溶 解在四氢呋喃（50mL，10vol)中，并在30分钟内在-KTC下伴随搅拌逐滴添加双(2-甲氧基乙 氧基)氢化铝钠的70%甲苯溶液(6.8mL，1.6eq)。搅拌30分钟后，在15分钟内逐滴添加2N盐 酸（IOOmL)，并在室温下将混合物搅拌30分钟。用乙酸乙酯（50mL)萃取该反应混合物，并用 5%碳酸氢钠水溶液(50mL)_水(50mL)洗涤该有机层。在减压下蒸发溶剂以产生作为粗产物 的1-氧代丙烷-2-基氨基甲酸（S)-苄酯（3.82克）。将乙醇（25mL)、原甲酸三乙酯（2eq)和对 甲苯磺酸吡啶鑰(〇. Ieq)添加到残留物中，并在室温下搅拌该混合物18小时。将5%的碳酸 氢钠水溶液(50mL)添加到该反应混合物中，并用正庚烧(50mL，2次)萃取该混合物。用水洗 涤合并的有机层，并在减压下蒸发溶剂（用甲苯共沸蒸馏水），以产生作为无色油的标题化 合物（收率4.42克，84%，光学纯度99.6%ee) 〇
[0064] 参考实施例5 将1_(甲氧基（甲基)氨基)-1-氧代丙烷-2-基氨基甲酸(S)-苄酯(90克，0.338mol)溶解 在四氢呋喃（5.5vol)中，并在30分钟内在-20°C下逐滴添加双(2-甲氧基乙氧基)氢化铝钠 (127克，1.3eq)，同时保持内部温度不高于_5°C。在逐滴添加之后，在_20°C下搅拌该混合物 30分钟，并且通过TLC确认起始材料消失。在-20 °C下搅拌5N盐酸(500mL)并且在40分钟内向 其中逐滴添加反应混合物。分配该反应混合物，并用乙酸乙酯（5.5vol)萃取含水层，并与有 机层合并。用5 %碳酸氢钠水溶液(4vo 1)和水(4vo 1)洗涤该混合物，并在减压下蒸发溶剂。 用乙醇共沸蒸馏水以产生作为粗产物的1-氧代丙烷-2-基氨基甲酸(S)-苄酯（76克）。将乙 醇（5vol)、原甲酸三乙酯（112mL，2eq)和对甲苯磺酸吡啶鑰(4.2克，0.05eq)添加到残留物 中，并且搅拌该混合物2天用于缩醛。通过添加正庚烷（5vol)和5%的碳酸氢钠水溶液 (5vol)，分配该反应混合物，并且用正庚烷(5vol，2次)萃取含水层。用水(5vol)洗涤合并的 有机层，并在减压下蒸发溶剂（用甲苯共沸蒸馏水和过量的原甲酸三乙酯），以产生标题化 合物（收率84克，88 %，光学纯度99 · 8 % ee) 〇
[0065] 参考实施例6 (S)-I，1-二乙氧基丙-2-胺的合成 将1，1_二乙氧基丙烷-2-基氨基甲酸（S)-苄酯（65克，0.231mol)溶解在乙醇（130mL， 2vol)中，添加10 %的Pd/C(6.5克，50 %湿度），并在0.35MPa的氢气下进行催化还原12小时。 过滤催化剂，并使用Vigreux精馏柱在下述条件下蒸馏该滤液。测量作为主要馏出物(收率 28.1克，83% )的所获得的化合物的NMR和GC以确认它是标题化合物。 蒸馏条件 第一馏出物：> 30 °C/50mmHg (加热温度:50 °C) 中间馏出物:60 °C /15mmHg (加热温度:85 °C) 1 · 84克 主要馏出物:60°C/15mmHg (加热温度:85°〇28.1克
[0066] 参考实施例7 2-(2-(苄基氨基甲酰基)-1-甲基肼基）乙酸的合成 将溴乙酸乙酯（32.7克，0.9eq)溶解在四氢呋喃（180mL)中，并在-20°C下伴随搅拌，在 35分钟内，逐滴添加一甲基肼（10克，Ieq)和三乙胺（20.9克，0.95eq)在水（25mL)_乙醇 (50mL)中的溶液中，同时保持内部温度不高于-4.6°C。在搅拌90分钟后，确认一甲基肼消 失，并且在40分钟内逐滴添加异氰酸苄酯(27.4克，0.95eq)，同时保持内部温度不高于-1.8 °C。搅拌该混合物90分钟，并且确认2-(2-(苄基氨基甲酰基)-1 -甲基肼基）乙酸乙酯的产 生。随后，逐滴添加5N氢氧化钠水溶液（130mL)到反应混合物中。逐滴添加完成之后，在20°C 下搅拌该混合物14小时，并且确认2-(2-(苄基氨基甲酰基)-1-甲基肼基）乙酸乙酯的消失。 用乙酸异丙酯（250mL，4次)和甲基叔丁基醚(250mL)洗涤反应混合物。用5N盐酸(84mL)酸化 含水层(pH= 2.5 )，并且添加晶种（IOOmg)。在5°C下搅拌23小时后，过滤该混合物，用冷乙醇 (25mL)-水(75mL)洗涤，并在50°C下减压下干燥4小时，以产生作为白色固体的标题化合物 (31.7克）（以一甲基肼作为标准的收率:61.6%，以溴乙酸乙酯作为标准的收率:68.5%)。 [0067] 参考实施例8 化合物1的水合物 将4.0mL的乙醇/水混合溶液(体积比1:1)添加到在WO 2009/148192中所描述的化合物 1 (149.72mg)中，并在加热下搅拌该混合物，并且在约93 °C下混合物完全溶解。缓慢冷却该 混合物至室温，并且确认固体沉淀。通过玻璃过滤器过滤收集沉淀物，用庚烷洗涤，并在60 °C下空气干燥，以产生作为白色固体的标题化合物(产量111. 35mg)。
【主权项】
1. 一种生产4-(((6S，9S)-1-(苄基氨基甲酰基)-2,9_二甲基-4,7-二氧代-8-(喹啉-8-基甲基)八氢-1H-吡嗪并[2，l-c][l，2,4]三嗪-6-基）甲基)苯基磷酸二氢酯的方法，其通过 使(6S，9S)-N-苄基-6-(4-羟基苄基)-2,9_二甲基-4,7-二氧代-8-(喹啉-8-基甲基)八氢-1H-吡嗪并[2，l- C][l，2,4]三嗪-1-甲酰胺与磷酰化剂反应，所述方法包括将含有(6S，9S)-N-苄基-6-(4-羟基苄基）-2,9-二甲基-4,7-二氧代-8-(喹啉-8-基甲基）八氢-lH-吡嗪并 [2，1-c] [ 1，2，4]三嗪-1-甲酰胺、有机碱和溶剂的反应混合物1添加到含有磷酰化剂和溶剂 的反应混合物2中的步骤。2. 根据权利要求1的生产方法，其进一步包括将所述反应混合物1和所述反应混合物2 的混合物溶液与无机碱混合的步骤。3. 根据权利要求1的生产方法，其进一步包括将所述反应混合物1和所述反应混合物2 的混合物溶液添加到包含无机碱和水的反应混合物3中的步骤。4. 根据权利要求2或3的生产方法，其中所述无机碱是氢氧化钠。5. 根据权利要求1-4中任一项的生产方法，其中所述反应混合物1中的溶剂是四氢呋 喃。6. 根据权利要求1-5中任一项的生产方法，其中所述反应混合物2中的溶剂是四氢呋 喃。7. 根据权利要求1-6中任一项的生产方法，其中所述反应混合物1中的水含量小于 0.5%〇8. 根据权利要求1-7中任一项的生产方法，其中所述反应混合物1中的水含量小于 0.1%〇9. 根据权利要求1-8中任一项的生产方法，其中当将所述反应混合物1添加到所述反应 混合物2中时，将所述反应混合物2冷却至-15至-10°C。
【文档编号】A61P35/00GK105829331SQ201480050456
【公开日】2016年8月3日
【申请日】2014年9月9日
【发明人】矶村峰孝, 小坂由纪, 永井光雄, 小田上刚直, 小路弘行
【申请人】株式会社棱镜制药