一种快速分析β-受体激动剂的方法
【技术领域】
[0001] 本申请涉及物质的分析检测领域，具体涉及一种快速定性和定量分析β-受体激 动剂如盐酸克伦特罗的实时直接分析串联质谱（DART-MS/MS)分析方法。
【背景技术】
[0002] β -受体激动剂比如盐酸克伦特罗能够促进动物体内营养物质从脂肪组织向肌肉 组织转移[1]。不法商贩在动物饲料以及食物中添加盐酸克伦特罗，以提高动物胴体的瘦肉 率，获取利润，从而导致食用其饲料的动物组织和肌肉中存在不同程度的残留。长期食用含 有β -受体激动剂残留的食品将对人体健康产生极大的危害，可诱发和加重心率失常病人 的病情；另外还能引起代谢紊乱，对糖尿病人可发生酸中毒或酮中毒[2]。目前，为了保护 人身安全，中国卫生部、农业部、国家药品监督管理局发布的第176号公告（2002)和第1519 号公告（2010)《禁止在饲料和动物饮用水中使用的药物品种目录》中包括盐酸克伦特罗在 内的多种β-受体激动剂类药物。盐酸克伦特罗在欧盟也已禁止使用，同时在体育赛事中 也是违禁使用药物[3]。
[0003] 目前用于检测β-受体激动剂之一盐酸克伦特罗的方法有电化学法[4]、酶联免 疫法（ELISA) [5]、高效液相色谱法（HPLC) [6]、高效液相色谱或超高效液相色谱-串联质谱 法（HPLC 或 UPLC-MS/MS) [7-8]、气相色谱-质谱法（GC-MS) [9]等。
[0004] 其中，酶联免疫法优点在于便捷快速，但易出现假阳性；HPLC灵敏度相对较低，不 能满足痕量检测要求；GC-MS除了要求样品需要大量的前处理之外，要求样品衍生化，步骤 相对复杂；HPLC-MS/MS由于具有高效的分离能力和精确的定性、定量等特点，被广泛采用， 但是该方法同样需要大量的样品萃取（LLE、SPE、MIP等）、制备和分离过程，成本高，操作繁 琐耗时，并在化合物离子化过程中存在严重的离子抑制和基质效应。
[0005] 同时，在常规的质谱分析中，常规的ESI和APCI离子源存在严重的离子抑制和基 质效应现象，影响测量结果的准确性；并且两种离子源分别被局限为分析热稳定、极性较强 和热不稳定，极性较弱的化合物。
[0006] 因此建立一种快速、高灵敏、简化甚至无需样品前处理的检测方法迫在眉睫。
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【发明内容】
[0024] 本申请的目的是提供一种利用实时直接分析串联质谱仪（DART-MS/MS)来快速分 析样品中的β-受体激动剂如盐酸克伦特罗的方法。
[0025] 其中，快速分析包括快速的定性分析和定量分析，且质谱可以是本领域常用的质 谱，比如三级四极杆、QT0P、QTRAP等。并且，β -受体激动剂包括盐酸克伦特罗、沙丁胺醇、 妥布特罗、特布他林、非诺特罗、福莫特罗、莱克多巴胺、异丙喘宁。
[0026] 具体地，在一个方面，本申请提供一种用于快速分析β -受体激动剂的方法，所述 方法使用实时直接分析串联质谱仪对样品中的β-受体激动剂进行检测。
[0027] 在以上或其他实施方式中，所述方法可以使用实时直接分析串联三级四极杆质谱 仪（DART-MS/MS)在正离子模式下，优选在正离子多级反应监测扫描模式下，对样品中的 β-受体激动剂进行检测。
[0028] 在以上或其他实施方式中，所述方法可以使用实时直接分析串联三级四极杆质谱 仪（DART-MS/MS)在正离子模式下对样品中的盐酸克伦特罗进行检测，得到包括各种碎片 离子的信号的质谱图，以其中的m/z 259. 1±0. 1作为定性母离子来判断检测样品中是否 含有盐酸克伦特罗，其中DART实时直接分析离子源的测试条件可以为：氦气作为反应气， 流速为2. 5-3. 0L/min，表头压力为0. 50-0. 55MPa ;离子源加热器温度为350°C -400°C，优选 地，离子源加热器温度为350°C ;去簇电压50-80V。
[0029] 在以上或其他实施方式中，所述方法使用实时直接分析串联三级四极杆质谱仪 (DART-MS/MS)在正离子模式下对样品中的盐酸克伦特罗进行检测，得到包括各种碎片离子 的信号的质谱图，以其中的m/z 259. 1±0. 1作为定性母离子来判断检测样品中是否含有 盐酸克伦特罗，其中所述DART实时直接分析离子源的测试条件为：氦气作为反应气，流速 为2. 5-3. 0L/min，表头压力为0. 50-0. 55MPa ;离子源加热器温度为350°C -400°C，优选地离 子源加热器温度为350°C ;去簇电压50-80V。
[0030] 其中，轨道移动速度决定了峰宽，移动速度太快，样品来不及离子化，移动速度太 慢，峰形不好，因此，在一些实施方式中，用于控制DART实时直接分析进样的轨道移动速度 可以为0. 2-0. 6mm/s ;在另外的实施方式中，用于控制DART实时直接分析进样的轨道移动 速度可以为〇. 4-0. 5mm/s，优选地可以为0. 4mm/s。
[0031] 在一些实施方式中，用于检测的样品可以为动物的尿液、血液、饲料、组织或生鲜 熟食制品。优选地，所述动物的尿液可以为猪尿。并且，所述检测样品不需要进行任何的预 处理或前处理。
[0032] 在以上或其他实施方式中，在所得到的包括各种碎片离子的信号的质谱图中，以 其中的m/z 203. 0±0. 1为定量离子，并对m/z 203. 0±0. 1所对应的信号的峰面积进行积 分，结合标准曲线方程和m/z 203. 0±0. 1所对应的峰面积来计算检测样品中的盐酸克伦 特罗的含量。
[0033] 在一些实施方式中，盐酸克伦特罗的标准曲线方程的获得可以包括以下步骤：
[0034] 配制浓度为 0· 025、0· 05、0· 1、0· 25、0· 5、1· 0、5· 0、10· 0、50· 0、100· 0 μ g/mL 的盐 酸克伦特罗标准溶液；
[0035] 实施如上所述的方法，得到包括各种碎片离子的信号的质谱图，以其中的m/z 203. 0±0. 1为定量离子，并对m/z 203. 0±0. 1所对应的信号的峰面积进行积分，以m/z 203. 0±0. 1所对应的峰面积对盐酸克伦特罗的浓度作图，并对图中符合线性范围的点实行 线性拟合，得到盐酸克伦特罗标准溶液的标准曲线方程。
[0036] 在一些实施方式中，可以用30-70%的乙腈水溶液来配制盐酸克伦特罗标准溶液。
[0037] 在一些实施方式，可以用50%的乙腈水溶液来配制盐酸克伦特罗标准溶液。
[0038] 在一些实施方式