中，所述受体激动剂选自盐酸克伦特罗、沙丁胺醇、妥布特 罗、特布他林、非诺特罗、福莫特罗、莱克多巴胺、异丙喘宁中的一种或多种。
[0039] 其中，在盐酸特伦特罗的分析中，以m/z 259. 1±0. 1作为定性离子和以m/ z 203. 0±0. 1作为定量离子是基于以下考虑：克伦特罗分子在正离子DART离子化方式 下，产生质子化的分子离子[M+H]+，m/z 277. 1 ±0.1及m/z 279. 1 ±0.1，前者为含Cl元 素的同位素35±0. 1，后者为Cl元素的同位素37±0. 1。在三级四级杆质谱的碰撞活化 室内，发生的分子离子碰撞活化，[M+H]+，m/z 277.1±0.1产生子离子m/z 259.1±0.1 及 m/z 203.1±0.1。同样，[M+H]+，m/z 279·1±0·1 产生子离子 m/z 261·1±0·1 及 m/ z 205. 1±0. 1。我们选用含Cl元素的同位素35±0. 1的克伦特罗的分子离子[M+H]+m/ z277. 1±0. 1作为母离子，其产生的子离子m/z 259. 1±0. 1作为定性离子，而m/z 203. 1±0. 1作为定量离子。
[0040] 其中，以m/z 203. 0±0. 1作为研宄对象，根据信噪比（S/N)大于3作为 检出限和信噪比大于10作为定量限评判标准，经试验计算得出本申请的检出限为 0· 0050±0· 0005 μ g/mL，定量限为(λ 010±0· 001 μ g/mL。
[0041] 本领域的技术人员将理解的是，本申请的上述检出限（约为5ppb)和定量限（约 IOppb)是在样品不经任何富集、制备、分离的情况下，以尿样直接采集分析待测物质的信号 而获得的。相比其他现有的繁琐、冗长的方法，要达到一致或类似或甚至更好的检出限和定 量限的范围，本申请的方法要更为直接、更为快速。
[0042] 本领域的技术人员还将理解的是，本申请的质谱分析方法及快速定性和定量分析 方法也可以用于其它受体激动剂的分析检测中，必要时，本领域的技术人员可以根据 其技术常识并通过常规的实验手段来进一步优化具体检测样品的测试条件。
[0043] 与现有技术相比，本申请的β -受体激动剂的快速定性和定量检测的方法具有不 需要对检测样品进行前处理的突出的有益效果，及以下的有益效果：
[0044] 1、无基质效应；
[0045] 2、定性及定量检测结果可靠性及准确性高；
[0046] 3、便于实时、无损、现场采样和检测；
[0047] 4、方法实施简便，分析操作人员不需要特别的专业质谱学知识；
[0048] 5、方法不使用溶剂或色谱耗材，大大减少对溶剂和耗材的依赖，绿色、低碳、经济。
【附图说明】
[0049] 附图用来提供对本申请的进一步理解，构成本申请的一部分，本申请的示意性实 施例及其说明用于解释本申请，但其并不构成对本申请的不当限定。在附图中：
[0050] 图1是实时直接分析质谱装置的示意图，其中1为DART，2为载样玻棒，3为轨道， 4为真空泵，5为串联的质谱仪；
[0051] 图2显示用50%的乙腈水溶液配制的盐酸克伦特罗溶液的标准曲线；
[0052] 图3Α-Β分别显示以m/z 203. 0±0. 1定量离子峰为研宄对象，用于测定方法的检 出限（0· 005±0· 0005 μ g/mL，η = 3, S/N>3. 0)和定量限（0· 010±0· 001 μ g/mL，η = 3, S/ Ν> 10. 0)的图；
[0053] 图4显示温度对质谱图中的m/z 203. 0±0. 1离子所对应的信号的峰面积的影响 (η = 3,取平均值）；
[0054] 图5显示用空白猪尿中配制的不同浓度的盐酸克伦特罗溶液（0. 05、0. 10、0. 25、 0. 50 μ g/mL，η = 3)的多反应监测谱图；
[0055] 图6为显示用50%的乙腈水溶液配制的不同浓度的盐酸克伦特罗标准溶液和用 空白猪尿配制的不同浓度的盐酸克伦特罗标准溶液的m/z 203. 0±0. 1定量离子的峰面积 的柱形图（η = 3,取平均值）。
【具体实施方式】
[0056] 下面通过实施例来描述本申请的实施方式，本领域的技术人员应当认识到，这些 具体的实施例仅表明为了达到本申请的目的而选择的实施技术方案，并不是对技术方案的 限制。根据本申请的教导，结合现有技术对本申请技术方案的改进是显然的，均属于本申请 保护的范围。
[0057] 仪器与试剂
[0058] API 5000三重串联四极杆质谱仪（美国AB SCIEX公司）；实时直接分析离子源 (DART，美国IonSense公司）；盐酸克伦特罗标准品购自Sigma ;乙腈（高效液相色谱级，美 国Merck公司）；实验室用水为经Milli-Q净水系统（0. 22 μ m过滤膜）过滤的去离子水； 猪尿样品取自北京某养殖场。
[0059] 进样方式
[0060] 采用中通量液体自动样品进样模块进样方式：样品管蘸取样品，每一个样品重复 3根样品管。将样品管置于DART-MS离子源气流出口与质谱进样口之间，即可得到该猪尿样 品的实时质谱图。
[0061] 在以下实例中，仅以盐酸克伦特罗为例，其他β_受体激动剂也可以按照与以下 的方法相类似的方法来检测，必要时，本领域的技术人员可以根据其技术常识并通过常规 的实验手段来进一步优化具体检测样品的测试条件。
[0062] 实施例1
[0063] 样品中的盐酸克伦特罗的定性分析
[0064] 使用实时直接分析串联三级四极杆质谱仪（DART-MS/MS)(如图1所示）（其中串 联的质谱仪为API 5000MS/MS)在正离子模式下对样品中的盐酸克伦特罗进行检测，得到 包括各种碎片离子的信号的质谱图，以其中的m/z 259. 1±0. 1作为定性离子来判断检测 样品中是否含有盐酸克伦特罗，其中所述DART实时直接分析离子源的测试条件为：氦气作 为反应气，流速为2. 5L/min，表头压力为0. 55MPa ;离子源加热器温度350°C;去簇电压50V ; 轨道移动速度0. 4mm/s。
[0065] 所述检测样品为未经任何前处理的猪尿中，重复3次（η = 3)。
[0066] 其中，盐酸克伦特罗的质谱条件如表1所示。
【主权项】
1. 一种用于快速分析e-受体激动剂的方法，所述方法使用实时直接分析串联质谱仪 对样品中的e-受体激动剂进行检测。
2. 根据权利要求1所述的方法，其中所述方法使用实时直接分析串联三级四极杆质谱 仪在正离子模式下，优选在正离子多级反应监测扫描模式下，对样品中的e-受体激动剂 进行检测。
3. 根据权利要求2所述的方法，其中所述方法使用实时直接分析串联三级四极杆质谱 仪在正离子模式下对样品中的盐酸克伦特罗进行检测，得到包括各种碎片离子的信号的质 谱图，以其中的m/z259. 1±0. 1作为定性母离子来判断检测样品中是否含有盐酸克伦特 罗，其中实时直接分析离子源的测试条件为：氦气作为反应气，流速为2. 5-3.OL/min;离子 源加热器温度为350°C-400°C;优选地，离子源加热器温度为350°C。
4. 根据权利要求3所述的方法，其中用于控制实时直接分析的进样的轨道移动速度为 0. 2-〇. 6mm/s〇
5. 根据权利要求1-4中任一项所述的方法，其中用于检测的样品为动物的尿液、血液、 饲料、组织或生鲜熟食制品。
6. 根据权利要求3所述的方法，在所得到的包括各种碎片离子的信号的质谱图中，以 其中的m/z203. 0±0. 1为定量离子，并对m/z203. 0±0. 1所对应的信号的峰面积进行积 分，结合标准曲线方程和m/z203. 0±0. 1所对应的信号的峰面积来计算检测样品中的盐 酸克伦特罗的含量。
7. 根据权利要求6所述的方法，其中标准曲线方程的获得包括以下步骤： 配制浓度为 〇? 〇25、0. 05、0. 1、0. 25、0. 5、1. 0、5. 0、10. 0、50. 0、100. 0yg/mL的盐酸克 伦特罗标准溶液； 除了将检测样品换成盐酸克伦特罗标准溶液以外，实施如权利要求1-6中任一项所述 的方法，得到包括各种碎片离子的信号的质谱图，以其中的m/z203. 0±0. 1为定量离子， 并对m/z203. 0±0. 1所对应的信号的峰面积进行积分，以m/z203. 0±0. 1所对应的信号 的峰面积对盐酸克伦特罗的浓度作图，并对图中符合线性范围的点实行线性拟合，得到盐 酸克伦特罗标准溶液的标准曲线方程。
8. 根据权利要求7所述的方法，其中用30% -70%的乙腈水溶液来配制盐酸克伦特罗 标准溶液。
9. 根据权利要求8所述的方法，其中用50%的乙腈水溶液来配制盐酸克伦特罗标准溶 液。
10. 根据权利要求1所述的方法，其中所述e-受体激动剂选自盐酸克伦特罗、沙丁胺 醇、妥布特罗、特布他林、非诺特罗、福莫特罗、莱克多巴胺、异丙喘宁中的一种或多种。
【专利摘要】一种快速分析样品中的β-受体激动剂的方法，所述方法使用实时直接分析串联质谱仪对样品中的β-受体激动剂进行检测。本申请的方法不需要对检测样品进行特殊的前处理，无基质效应，并且可以快速地定性及定量地检测β-受体激动剂如盐酸克伦特罗，检测结果的可靠性和准确性高。
【IPC分类】G01N27-62
【公开号】CN104792855
【申请号】CN201510174088
【发明人】刘春胜
【申请人】华质泰科生物技术（北京）有限公司
【公开日】2015年7月22日
【申请日】2015年4月13日