一种利用超高效合相色谱同时快速检测白酒中4种维生素e的方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及检测技术领域，具体地说是一种利用超高效合相色谱串接二极管阵列 检测器同时快速检测白酒中4种维生素 E的方法，属于酒类分析技术领域。
【背景技术】
[0002] 针对全球饮食不足的现状，食品生产商正依法增强许多食品和饮料产品的安全意 识，以增加消费者的营养水平。鉴于此，食品生产商需要快速的、可信赖的和利润高的方法 来分析他们的产品中的营养组分，以确保他们宣传的真实性。维生素经常是存在的，但其即 使是被强化之后，在挑战性的基质中的浓度水平仍然很低，这就使得准确分析很费力。
[0003] 现在，水溶性维生素化合物都是单独分析的，或在小组里，使用广大范围的不同的 分析方法，如微生物测试法、比色法、滴定法、荧光法和HPLC法。这就意味着分析实验室需 要一笔可观的费用用于各种各样不同仪器的财政支出，以便于多种维生素分析，同时如果 有一系列的分析需要进行的话，还需要投入大量的员工时间和努力。所以，一个快速的、选 择性好的解决方案的同时分析水溶性维生素化合物的能力，可以给商业带来以下潜力：提 高生产率；由于提高了效率而引起的财政收入的增加、加速样品周转，以及减少劳动力和培 训成本。
[0004] 本发明描述了一个用来同时分析4种水溶性维生素 E的快速的、选择性好的解决 方案，这个方案尤其适用于希望得到与UV检测器相比更高灵敏度、更高选择性和更快的样 品周转时间的水溶性维生素分析方法。
【发明内容】
[0005] 本发明的目的在于提供一种利用超高效合相色谱仪串接二极管阵列检测器同时 快速检测白酒中4种维生素 Ε(α-维生素 Ε，β-维生素 Ε，γ-维生素 Ε，δ-维生素 E)的 方法。本发明可以为白酒中维生素检测的准确判定、快速检测提供科学依据。
[0006] 本发明所采用的技术方案为：
[0007] 本发明利用超高效合相色谱同时快速检测白酒中4种维生素 E的方法，其特点在 于：
[0008] 所用仪器为：超高效合相色谱仪（配有二极管阵列检测器）；c18色谱柱 (3. OX 100mm，L 7 μ m);祸旋仪；移液枪。
[0009] 方法包括如下步骤：
[0010] ⑴对待测白酒酒样进行前处理：
[0011] 移取5mL待测白酒酒样于IOmL比色管中，加入2mL正己烷，涡旋lmin，移取I. 5mL 上层溶液作为待测溶液注入2mL样品瓶，待进样；
[0012] (2)设定超高效合相色谱仪的条件为：
[0013] 色谱柱：C18色谱柱（3. OX 100mm，1. 7 μπι);柱温：30 ~50°C ;
[0014] 样品室温度：10~20°C
[0015] 流动相：二氧化碳（A相）+甲醇〇相）；流速：2~3mL/min ;洗脱方式：梯度洗脱； 进样量：1 UL ;时间：5min ;ABPR 压力：1885psi ;
[0016] 二极管阵列检测器PDA的条件设定为：
[0017] 3D 通道：200nm-410nm
[0018] 分离度：1. 2 ~2. Onm
[0019] 采样速率：20~50点/秒
[0020] (3) 4种维生素 E的标准曲线的绘制
[0021] 取α -维生素 Ε、β -维生素 Ε、γ -维生素 E和δ -维生素 E配制质量浓度范围在 12. 5~250ug/mL的混合系列标准工作溶液，然后按照（2)所设定的仪器的条件取I. 5mL各 标准工作溶液进样，作UPC2检测，以待测物的峰面积对其所相应的质量浓度进行线性回归， 获得4种维生素 E的线性回归方程，各线性回归方程所对应的曲线，即为相应维生素的标准 曲线；
[0022] 所述的4种维生素 E对应的线性回归方程及相关系数r2见表1，
[0023] 表1 :4种维生素 E的线性回归方程、相关系数、检出限、定量限
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[0025] (4)待测样品的测试
[0026] 将待测白酒酒样按步骤（1)的方式进行前处理后，取I. 5mL按步骤（2)的条件作 UPC2检测，通过使用3D波长扫描，获得待测样品的色谱图，对待测白酒酒样根据保留时间进 行定性分析，然后根据4种维生素 E的标准曲线对待测白酒酒样进行定量分析。
[0027] 对本发明方法作如下灵敏度测试：灵敏度测试包括仪器的灵敏度与方法的灵敏 度，仪器的灵敏度用仪器的检出限表示，取信噪比多3的维生素 E的混合标准溶液的最小浓 度为仪器检出限；方法的灵敏度用方法的定量限表示，取信噪比多9的维生素 E混合标准溶 液的最小浓度为方法定量限。所得的相关数据见表1。
[0028] 对本发明方法作如下准确性及重现性实验：选用同一个白酒样品经前处理后作为 空白样品，分为3份，分别加入混合标准工作溶液进行加标回收实验，计算回收率；选取1个 白酒样品按照同一前处理方法处理6个，分别进行实验，通过计算其相对标准偏差（RSD)的 范围来判断分析方法的重现性。所述的准确性用回收率来表示，见表2,方法的重现性用相 对标准偏差（RSD)来表示，见表3。可以看出回收率在80~120%，RSD〈10%。
[0029] 表2 :4种维生素 E的加标回收率实验
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[0031] 表3 :4种维生素 E的重现性实验
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[0033] 本发明的有益效果体现在：
[0034] 1、本发明建立了一种利用超高效合相色谱串接二极管阵列检测器同时快速检测 白酒中4种维生素 E的方法，能够准确地对白酒中的维生素 E进行定性、定量，为白酒中维 生素 E的准确判定、快速检测提供科学依据。
[0035] 2、本发明超高效合相色谱串接二极管阵列检测器操作简单快捷、准确可靠、重复 性好。
[0036] 3、本发明C18色谱柱（3. OX 100mm，1. 7 μπι)与0)2和甲醇流动相的选择对白酒中4 种维生素 E达到了优异的分离效果。
[0037] 4、本发明的前处理操作步骤少，从而降低了实验误差并提高了数据的准确性。
[0038] 5、本发明的检测方法是一项环保的"绿色"技术。分析中采用的主要流动相二氧 化碳来自于其它工业释放的回收二氧化碳，实验中的使用二氧化碳不会再产生新的温室气 体。使用此方法时，每次进样所消耗的改性剂（甲醇）仅为〇.9mL，与同类检测方法相比，降 低了 90 %的有机溶剂使用量。
[0039] 6、本发明通过减少实验室消耗品的使用