1.一种大花斑叶兰组织培养及快速繁殖的方法,其特征在于:基本培养基及不同培养阶段的培养基的组分及其含量如下:
1)基本培养基:MS或改良N6培养基,其中,蔗糖或白糖15~30g/L,琼脂条7~10g/L,香蕉肉50~100g/L,pH5.5~6.2;
2)诱导培养基:MS或改良N6+KT0.2~1.0mg/L+6-BA2.0~4.5mg/L+NAA0.2~1.0mg/L或IBA0.2~1.0 mg/L;
3)增殖培养基:MS或改良N6+6-BA2.0~4.0mg/L+NAA0.5~1.0mg/L或IBA0.2~1.0 mg/L;
4)生根壮苗培养基:MS或改良N6+NAA0.2~1.0mg/L或IBA0.2~0.5mg/L+活性炭0.5~1.5g/L。
2.根据权利要求1所述的大花斑叶兰组织培养及快速繁殖的方法,其特征在于:基本培养基及不同培养阶段的培养基的组分及其含量如下:
(1)基本培养基:MS或改良N6培养基,其中,蔗糖或白糖15g/L,琼脂条7g/L,香蕉肉50g/L,pH5.5;
(2)诱导培养基:MS或改良N6+KT0.2mg/L+6-BA2.0mg/L+NAA0.2mg/L或IBA0.2mg/L;
(3)增殖培养基:MS或改良N6+6-BA2.0mg/L+NAA0.5mg/L或IBA0.2mg/L;
(4)生根壮苗培养基:MS或改良N6+NAA0.2mg/L或IBA0.2mg/L+活性炭0.5g/L。
3.根据权利要求1所述的大花斑叶兰组织培养及快速繁殖的方法,其特征在于:基本培养基及不同培养阶段的培养基的组分及其含量如下:
(1)基本培养基:MS或改良N6培养基,其中,蔗糖或白糖30g/L,琼脂条10g/L,香蕉肉100g/L,pH6.2;
(2)诱导培养基:MS或改良N6+KT1.0mg/L+6-BA4.5mg/L+NAA1.0mg/L或IBA1.0 mg/L;
(3)增殖培养基:MS或改良N6+6-BA4.0mg/L+NAA1.0mg/L或IBA1.0 mg/L;
(4)生根壮苗培养基:MS或改良N6+NAA1.0mg/L或IBA0.5mg/L+活性炭1.5g/L。
4.根据权利要求1所述的大花斑叶兰组织培养及快速繁殖的方法,其特征在于:基本培养基及不同培养阶段的培养基的组分及其含量如下:
(1)基本培养基:MS或改良N6培养基,其中,蔗糖或白糖20g/L,琼脂条8g/L,香蕉肉75g/L,pH5.9;
(2)诱导培养基:MS或改良N6+KT0.6mg/L+6-BA3.3mg/L+NAA0.6mg/L或IBA0.6 mg/L;
(3)增殖培养基:MS或改良N6+6-BA3.0mg/L+NAA0.8mg/L或IBA0.6 mg/L;
(4)生根壮苗培养基:MS或改良N6+NAA0.6mg/L或IBA0.4mg/L+活性炭1.0g/L。
5.一种根据权利要求1-4任一项所述的大花斑叶兰组织培养及快速繁殖的方法,其特征在于:包括如下步骤:
(1)外植体的选取与表面灭菌:取大花斑叶兰的茎尖或茎段为外植体,经消毒后,用无菌水清洗备用;
(2)诱导培养:在无菌条件下将处理好的外植体接种在诱导培养基中进行培养,温度20~28℃,光照500~2000Lux,经过30~50天诱导出初代芽或丛生芽或拟原球茎;
(3)增殖培养:将诱导出的初代芽或丛生芽或拟原球茎接种到增殖培养基中进行继代培养,45~60天为一个继代周期;
(4)生根壮苗培养:将继代过程中的幼芽接种到生根壮苗培养基中进行生根壮苗培养,温度20~28℃,光照500~2000Lux,经过30~50天,植株高达4~6cm;
(5)组培苗驯化与移栽:将生长达4~6cm以上的组培苗常温下驯化适应10~30天后,打开瓶盖再适应3~5天,用清水洗净苗子根部的培养基后移栽入基质中。
6.根据权利要求5所述的大花斑叶兰组织培养及快速繁殖的方法,其特征在于:步骤(5)所述常温下驯化适应的条件为将生长达4~6cm以上的组培苗的培养瓶放到常温遮光的日光塑料膜棚里进行驯化适应。
7.根据权利要求5所述的大花斑叶兰组织培养及快速繁殖的方法,其特征在于:步骤(5)所述栽培基质包括椰糠、碎树皮、锯末、泥炭土和珍珠岩中的一种或多种。