Isg20蛋白及其编码基因在抗流感病毒中的应用的制作方法
【专利摘要】本发明公开了一种ISG20蛋白及其编码基因在抗流感病毒中的应用。本发明所提供的应用具体为由序列表中序列1所示的氨基酸序列组成的蛋白质或其编码基因在制备抗流感病毒的药物中的应用。实验证明，本发明所提供的蛋白质具有核酸内切酶活性，能够抑制流感病毒的聚合酶活性，从mRNA转录水平和蛋白水平上抑制流感病毒的复制，达到清除病毒、治疗疾病的目的，非常适用于甲型H1N1流感病毒的预防，易于大范围推广和应用。
【专利说明】ISG20蛋白及其编码基因在抗流感病毒中的应用
【技术领域】
[0001]本发明属于生物【技术领域】，涉及一种ISG20蛋白及其编码基因在抗流感病毒中的应用。
【背景技术】
[0002]流感病毒是一种能引起人类和其他动物患流行性感冒的负链RNA病毒，属于正粘病毒科流行性感冒病毒属。根据病毒的核衣壳蛋白(NP)和基质蛋白(Ml)的抗原性的不同可以将流感病毒分为3类:A型、B型和C型流感病毒，又分别称为甲、乙、丙型。流感病毒的基因组有8个RNA片段，一共能够编码14个病毒蛋白。根据其血凝素蛋白(HA)和神经氨酸酶蛋白(NA)的不同，又可以将其分为不同的亚型。流感病毒能够通过空气传播，引起宿主的呼吸道感染，严重的甚至能危及生命，甲型HlNl流感病毒属于A型流感病毒，包含有禽流感、人流感和猪流感三种流感病毒的核糖核酸基因片段，容易发生变异，对人类致病性高，2009年3月在墨西哥暴发后迅速蔓延全球，近年来在我国呈现季节性流行趋势。
[0003]流感病毒感染宿主会引起宿主机体内大量干扰素诱导基因(interfeixmstimulated genes, ISGs)的转录的表达，ISGs是干扰素发挥生物学功能的真正效应分子，对干扰素打通机体免疫信号通路等方面发挥着重要作用，因此深度分析这些基因的表达水平及功能，对抗流感病毒药物的研发具有指导意义。近年来，高通量RNA深度测序即转录组测试技术(简称“RNA-seq”)是系统性地分析宿主转录组学最有利的方法，它能够把宿主或某个特定细胞转录水平的 mRNA、small RNA, NON coding RNA通过高通量测序技术测出相应序列，从而反应各种基因表达水平的变化，RNA-seq不仅能从整体水平分析转录本各基因的功能和水平，而且能发现未知转录本和稀有转录本，因此对深入分析病毒感染后宿主体内基因的变化具有重要作用。
【发明内容】
[0004]本发明的一个目的是提供一种ISG20蛋白及其编码基因在抗流感病毒中的应用。
[0005]本发明所提供的应用，具体为如下A或B:
[0006]A:蛋白质(命名为ISG20)在制备抗流感病毒的药物中的应用。
[0007]B:蛋白质的编码基因(命名为ISG20)在制备抗流感病毒的药物中的应用；
[0008]所述蛋白质为如下(a)或(b):
[0009](a)由序列表中序列I所示的氨基酸序列组成的蛋白质；
[0010](b)将序列I的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有抗流感病毒活性的由序列I衍生的蛋白质。
[0011]为了便于ISG20蛋白的纯化，可在由序列表中序列I的氨基酸残基序列组成的蛋白质的氨基末端或羧基末端连接上如下表所示的标签。
[0012]表:标签的序列
[0013]
【权利要求】
1.蛋白质或其编码基因在制备抗流感病毒的药物中的应用； 所述蛋白质为如下(a)或(b): (a)由序列表中序列I所示的氨基酸序列组成的蛋白质； (b)将序列I的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有抗流感病毒活性的由序列I衍生的蛋白质。
2.蛋白质或其编码基因在如下(al)和/或(a2)和/或(a3)中的应用: (al)制备能够抑制流感病毒复制的药物； (a2)制备能够抑制流感病毒mRNA转录的药物； (a3)制备能够抑制流感病毒的聚合酶活性的药物。
3.根据权利要求1或2所述的应用，其特征在于:所述蛋白质的编码基因是如下I)至4)中任一所述的DNA分子: 1)序列表中序列2所不的DNA分子； 2)序列表中序列3所示的DNA分子； 3)在严格条件下与I)或2)所限定的DNA分子杂交且编码所述蛋白质的DNA分子； 4)与1)-3)任一限定的DNA分子具有90%以上同源性且编码所述蛋白质的DNA分子。
4.根据权利要求1-4中任一所述的应用，其特征在于:所述流感病毒为Hl型流感病毒。
5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于:所述Hl型流感病毒为HlNl型流感病毒。
6.根据权利要求4所述的应用，其特征在于:所述HlNl型流感病毒为HlNl型流感病毒 A/WSN/33 株。
7.DNA分子,为序列表中序列2所不的DNA分子。
8.含有权利要求7所述DNA分子的重组载体、表达盒、转基因细胞系或重组菌。
9.根据权利要求8所述的重组载体，其特征在于:所述重组载体中启动所述DNA分子转录的启动子为5’AOXl启动子；或 根据权利要求8所述的重组菌，其特征在于:所述重组菌为将所述DNA分子导入毕赤酵母菌-X33后得到的重组菌。
10.扩增权利要求7所述DNA分子的全长或其任意片段的引物对。
【文档编号】C12N15/81GK104013954SQ201410258176
【公开日】2014年9月3日 申请日期:2014年6月11日 优先权日:2014年6月11日
【发明者】刘文军, 贾晓娟, 瞿洪仁, 崔亮, 徐磊 申请人:中国科学院微生物研究所