一种水产品抑菌剂的制备方法及应用
【技术领域】
[0001] 本发明设及生物技术领域，尤其设及一种水产品抑菌剂的制备方法及应用。
【背景技术】 阳00引卡拉胶（Carrageenan),又称角叉菜胶、鹿角菜胶，是自红藻中提取的一种酸性多 糖，具有1，4-D-半乳化喃糖和1，3-D-半乳化喃糖（或3, 6-内酸-D-半乳化喃糖）二糖单 元骨架结构。研究发现卡拉胶具有降血脂、抗凝血、抗血栓、免疫调节、刺激结缔组织生长等 多种生物学活性，但由于卡拉胶分子量较大，溶解性和可吸收性较差，限制了其应用。
[0003] 卡拉胶寡糖由卡拉胶降解酶降解卡拉胶得到，相对卡拉胶而言，卡拉胶寡糖分子 量较小、溶解性较好、稳定性和安全性都有所改善，同时因分子链上的活性基团充分暴露， 其原有的活性得到提高，甚至产生了新的活性。卡拉胶寡糖具有调节免疫、抗肿瘤、抗福射、 抗菌和抗病毒等作用。卡拉胶寡糖的凝胶化作用和增厚作用可显著增加免疫器官的重量， 提高机体免疫IL-2(白细胞介素）和TNF-a(肿瘤坏死因子）的含量；卡拉胶寡糖能够明显 减轻福射引起的脾脏NK细胞活性的降低，造血功能受抑制、血细胞来源减少等症状，提高 机体免疫功能，对福射损伤有明显的防护作用；卡拉胶寡糖对单纯瘤疹病毒1型化SV-1)的 吸附有抑制作用，并且呈现明显的量效关系，卡拉胶寡糖对肉仔鸡肠道菌增殖的抑制作用、 促进小肠微绒毛生长发育和提高免疫反应及生产性能的实验中发现，卡拉胶寡糖对肉仔鸡 盲肠内容物中大肠杆菌有抑制作用。
[0004] 卡拉胶寡糖抗菌活性的应用已有报道，如申请号为201410043525. 3 (申请公布号 CN103789241A)的中国发明专利《一株I-卡拉胶降解酶及其发酵方法和应用》中披露了 酶解得到的t-卡拉胶寡糖在制备抗菌药物、抗病毒药物、免疫调节剂、抗氧化剂等中的应 用；又如申请号为201510062479. 6(申请公布号为CN104606659A)的中国发明专利《一种 抗菌、抗病毒、调节代谢、增强免疫的口服液》中一种具有抗菌、抗病毒、调节代谢、增强免疫 功效的口服液，卡拉胶寡糖为其主要有效原料之一。
【发明内容】
[0005] 本发明所要解决的第一个技术问题是针对现有技术而提供一种水产品抑菌剂的 制备方法，该制备方法成本低、工艺简单，且制备的水产品抑菌剂具有较好的抑菌效果。
[0006] 本发明所要解决的第二个技术问题是针对现有技术而提供一种上述抗菌剂在水 产品保鲜中的应用。
[0007] 本发明解决第一个技术问题所采用的技术方案为：一种水产品抑菌剂的制备方 法，其特征在于包括W下步骤：
[0008] (1)取适量卡拉胶寡糖溶解于去离子水中，调节抑至5. 5~6. 5,加入质量比为 1:2~4氯化亚铁和氯化锋混合物，卡拉胶寡糖、氯化亚铁和氯化锋混合物的质量比为5~ 8:1，同时加入Vc加W保护，Vc加入量与氯化亚铁的质量比为1:8~10,反应溫度25~ 30°C，反应时间为2~化；
[0009] 似反应结束后，乙醇沉淀、离屯、后，获得的壳寡糖-金属衍生物沉淀物，经冷冻干 燥后获得卡拉胶寡糖-金属衍生物；
[0010] (3)将制得的卡拉胶寡糖-金属衍生物与卡拉胶寡糖W1~2. 5:1混合均匀即得 所需的水产品抑菌剂。
[0011] 作为优选，所述卡拉胶寡糖-金属衍生物中卡拉胶寡糖-亚铁衍生物与卡拉胶寡 糖-锋衍生物的质量比为2~4:1~3。
[0012] 作为优选，所述卡拉胶寡糖的分子量为1000~3000化。
[0013] 本发明解决第=个技术问题所采用的技术方案为：上述抑菌剂在水产品保鲜中的 应用。
[0014] 作为优选，上述抑菌剂在水产品保鲜中的应用包括W下步骤：取上述抑菌剂溶于 无菌水中制成溶度为0. 5~1. 5%的抑菌剂溶液，将新鲜水产品经前处理后进行快速冷冻， 在冷冻的水产品表面喷涂所述抑菌剂溶液，最后将水产品包装并于-20~-18°C下储藏；或 取上述抑菌剂溶于无菌水中制成溶度为0. 5~1. 5%的抑菌剂溶液，将新鲜水产品经前处 理后浸没于抑菌剂溶液中3~5s后，进行快速冻结，最后将水产品包装并于-20~-18°C下 储藏。
[0015] 进一步，所述快速冷冻的溫度为-30°C~-35°C。
[0016]与现有技术相比，本发明的优点在于：本发明由卡拉胶寡糖制备卡拉胶寡糖-金 属衍生物（卡拉胶寡糖-亚铁衍生物和卡拉胶寡糖-锋衍生物），该卡拉胶寡糖-金属衍生 物与卡拉胶寡糖混合溶于无菌水制得水产品抑菌剂，该水产品抑菌剂制备工艺简单，当用 于水产品保鲜时，卡拉胶寡糖-金属衍生物和卡拉胶寡糖能协同发挥抑菌效应，且该抑菌 剂的质地均匀，喷洒于冰冻水产品表面时能较好地渗透扩散于冰冻层中，从而对水产品进 行较好地抑菌保护，且食用时易清洗无残留，在抑菌保鲜的同时能有效保证水产品的食用 安全性。
【具体实施方式】
[0017]W下结合实施例对本发明作进一步详细描述。 阳01引实施例1 :
[0019] 取卡拉胶寡糖（分子量为lOOODa)溶解于去离子水中，调节抑至5. 5,加入质量比 为1:2的氯化亚铁和氯化锋混合物，其中卡拉胶寡糖、氯化亚铁和氯化锋混合物的质量比 为5:1，同时加入Vc加W保护，Vc加入量与氯化亚铁的质量比为1:8,反应溫度25°C，反应 时间为化。反应结束后，乙醇沉淀、离屯、后，获得的壳寡糖-金属衍生物沉淀物，经冷冻干燥 后获得卡拉胶寡糖-金属衍生物，该卡拉胶寡糖-金属衍生物由卡拉胶寡糖-亚铁衍生物 和卡拉胶寡糖-锋衍生物组成。
[0020] 将制得的卡拉胶寡糖-金属衍生物与卡拉胶寡糖W质量比1:1混合形成混合物得 所需水产品抑菌剂，其中卡拉胶寡糖-金属衍生物中卡拉胶寡糖-亚铁衍生物与卡拉胶寡 糖-锋衍生物的质量比为2:1。 阳OW 实施例2:
[0022]取卡拉胶寡糖（分子量为2500Da)溶解于去离子水中，调节抑至6,加入质量比 为1:3的氯化亚铁和氯