专利名称：一种抗癌药物新制剂——紫杉醇微乳的制作方法
紫杉醇(paclitaxel，商品名taxol)是Wani等最早从短叶红豆杉(Taxus bravifolia Nutt.)的树皮中提取的一种二萜类化合物，具有稳定微管并促进其聚合和组装的独特作用，成为对实体瘤和白血病单用或联合用药时显示良好前景的新抗癌药。由于紫杉醇不溶于水，现行的注射制剂采用聚氧乙基蓖麻油和无水乙醇(50∶50)作为助溶载体，前者易导致组织胺释放，引起严重的过敏反应。本发明涉及的紫杉醇o/w微乳，具有良好的水化性，粒径小于100nm，是一种控释缓释剂型，对肿瘤组织具有靶向作用。不仅静脉注射具有更好的生物利用度，并且口服用药的生物利用度也有所提高。
微乳的组成中因含有两亲性聚乙二醇-二硬脂酰磷脂酰乙醇胺的交联物(PEG-DSPE)，经高压匀质器器处理，使得微乳粒径≤100nm。小于100nm的粒子不易被网状内皮系统(RES)捕获。另外，微乳中的PEG-DSPE可以在微乳表面形成位阻层，阻止血浆蛋白的吸附，因而影响了网状内皮系统对微乳的识别和结合，逃避网状内皮系统对其捕获和吞噬，延长血循环时间，有利于靶向到癌组织，增强抗癌活性。实施例2形态观察、粒径及其分布测定取样品溶液经超速冷冻离心分离后，取沉淀物，加蒸馏水少量使分散，滴于镀膜后的电镜抽样铜网上，自然干燥后，放入电镜中，观察形态并拍照。
取制备的微乳样品适量，稀释至主药浓度为0.5mg·ml-1，用粒径测定仪经乱反射测定微乳粒径及分布。
电镜下观察紫杉醇微乳呈均匀规则的球形粒子。
实验测得的紫杉醇微乳粒径分布均匀，平均直径为(80±14)nm，在50～100nm范围内的微乳占总数93.55％以上。依据乳剂分散相液滴的大小，该乳剂属于微乳。粒径小于100nm的乳剂有较好的稳定性和生物利用度。
按Bliss法软件程序计算紫杉醇微乳LD50和95％可信限为706.6mg(含药33.21mg)·kg-1·d-1(紫杉醇27.21～39.21mg·kg-1·d-1)。在泰素注射液临床前的紫杉醇急性毒性实验中，CD2F1小鼠的LD50为82mg·m-1·d-1，按实验动物体表面积换算体重，其LD50为24.6mg·kg-1·d-1。实验表明，紫杉醇微乳比泰素配方的急性毒性降低了10％～60％。微乳中含有的聚乙二醇修饰的二硬酯酰磷脂酰乙醇胺，不但使得微乳能部份逃避网状内皮系统的捕获和吞噬，同时在某些组织如心脏组织摄取量显著低于游离型药物，从而减低了对心脏的毒性作用。
给药及采样 取日本大耳白兔15只，♀，体重(4.5±0.25)kg，随机分为3组静注组、口服组和以泰素为参比标准的对照组，每组5只，按4mg·kg-1剂量单次耳缘静脉和口服给药。分别于给药后不同时间白兔另一耳缘静脉取血1ml，于2000～3000r·min-1离心10min，分离血浆。取血浆300μl，以地西泮为内标，用叔丁基甲醚两步提取，常温下氮气吹干，残渣用移动相溶解，进样20μl。
标准曲线制作 精密称取紫杉醇标准品，用空白血浆分别制作浓度为0.03，0.10，0.50，1.00，2.00，3.00，5.00mg·L-1的标准系列，其操作同血浆标本处理方法。以紫杉醇浓度c为横坐标，紫杉醇峰高与内标峰高之比为纵坐标绘制标准曲线。
本分析方法和标准曲线在16.4～3500ng·ml-1血浆浓度范围内呈良好的线性关系，最低检测浓度为10mg·ml-1，回收率88.1％～91.8％。
数据处理方法 血药浓度数据用中国药理学会数学药理委员会编制的3P87药动学程序进行处理。药-时曲线下面积(AUC0～∞)由梯形法求得的AUC0～tz和ctz/λ(AUCtz～∞)这和求得，并经对数转换后进行方差分析。
本实验采用兔以泰素静脉注射制剂为参比标准，测得静注和口服紫杉醇微乳的绝对生物利用度分别为(107±2)％和22.4％，但口服吸收机制尚不清楚，有待进一步进行药代动力学的研究。紫杉醇属一种水不溶性药物，单纯口服其生物利用度几近于零。微乳作为药物载体，兔口服生物利用度达到22.4％。
权利要求
1 一种抗癌药物新制剂—紫杉醇微乳，其特点为采用两亲性聚乙二醇-二硬脂酰磷脂酰乙醇胺(PEG-DSPE)作为表面活性剂和以蛋黄磷脂酰胆碱(EPC)作为乳化剂，制成O/W微乳剂型。
2 根据权利要求1，该种微乳的粒径小于100nm。
3 根据权利要求2，采用超声和高压匀质器处理，使紫杉醇微乳的粒径达到100nm以下。
4 根据权利要求1，紫杉醇微乳可以作为静脉注射制剂，也可以口服。
全文摘要
本发明提供一种抗癌药物的新制剂紫杉醇微乳的制备方法及其稳定性和静注、口服生物利用度的测定。蛋黄磷脂(EPC)，紫杉醇和PEG－DSPE的氯仿溶液在氮气流下减压成膜，加入经水化超声处理的玉米油，进一步超声处理后，通过高压匀质器使其微乳化。所得微乳粒径50～100nm，包封率≥99.2％，免绝对生物利用度静注107.7％，口服22.4％。
文档编号A61P35/00GK1416810SQ0215367
公开日2003年5月14日 申请日期2002年12月5日 优先权日2002年12月5日
发明者阎家麒 申请人:阎家麒