专利名称：一种双重载药的复合微球及其制备方法
技术领域：
本发明属于生物医用材料技术领域，具体涉及一种双重载药的复合微球及 其制备方法。
背景技术：
近年来，高分子微球材料的研究和应用发展非常迅速。这类材料具有其特 殊的尺寸和形貌，具备其它形态材料所不具备的特殊功能。总的说来，高分子 微球的应用分为如下几个领域纳米技术、功能材料、分析领域、生物医学领 域等。高分子微球除具有固相载体特有的易于分离和提纯的优点外，还具有廉 价、比表面积大、单分散性好、易于制备及功能化等优点。微球用于药物载体 的研究开始于20世纪70年代中期，由于其对器官和组织的靶向性及药物释放
的缓释性，已经成为缓控释给药的研究热点。微球可以供注射(静脉注射、肌肉 注射)、口服、滴鼻、皮下埋植或是关节腔给药使用。将药物与微球载体连接制 备成药物一一载体结合物，以改善和控制药物在体内的转运和代谢，实现缓释 给药和定向给药，从而提高药物的生物利用度和治疗指数，这是现代药物研究 领域的一个新分支。
在人工合成高分子中，聚乳酸(PLA)及乳酸一羟基乙酸共聚物(PLGA)具有 良好生物相容性和生物降解性，它们的降解产物乳酸能参与人体的新陈代谢。 由于它们是人工合成的高分子，可通过控制分子量和单体共聚的比例来控制降 解时间，这使它们已成为当前生物医学领域中最受重视的材料之一，并己被美国药品食品管理局(FDA)批准用于人体。聚乳酸及其共聚物主要用于药物控 制释放体系、骨内固定物、组织修复及细胞培养材料及医用手术缝合线等。聚 乳酸微球作为缓控释给药体系，具有十分广泛的应用前景，主要用于制备小分 子药物、多肽及蛋白质药物等的载体。然而聚乳酸微球存在如下的缺点，限制 了它的实际应用(l)聚乳酸中有大量的酯键，为疏水性物质，降低了它的生物 相容性；(2)在药物释放初期出现药物的大量突释。(3)微球的降解产物引起的酸 性环境。
在PLGA微球的研究中，减缓早期的突释是一个难点问题。总结目前解决 突释问题的方法主要有两类 一是通过改进载体的成分，以提高药物和微球基 体的亲和力；二是改进制备的过程防止药物溶出，比如，加快溶剂的挥发，在 外包裹隔离层等。这些都主要着力于减缓或消除突释，以致于延长药物有效传 递的时间。
売聚糖(chitosan， CS)是天然聚合物甲壳素脱乙酰基的产物，是天然多糖 中唯一的碱性阳离子多糖，成粒性好，具有许多独特的物理化学特性和生物功 能。壳聚糖及其分解产物无毒，具有好的生物相容性、生物可降解性及可被吸 收利用等特点，具有抗酸、抗菌消炎、抗溃疡，促进伤口愈合的能力，可阻止 或减弱药物在胃中的刺激作用，因此是一种良好的药物释放载体。壳聚糖是一 种阳离子多糖，它有丰富的-OH、 -NHR功能基团，可用具有双官能团的醛或酸 酐等交联，有制备微球的优良特性。壳聚糖微球作为药物载体较其他材料的微 球具有如下的优势:(l)壳聚糖微球表面有丰富的功能基团，可吸附或包裹不同
特性的药物；(2)売聚糖微球粘附性好，用于口、鼻、胃肠等粘膜给药，特别 是投递抗原、佐剂，有其独特的优势；(3)壳聚糖微球表面有丰富的多糖链， 能被特异性细胞(或组织)所识别，可以靶向投递药物至病灶部位贮存释放；(4)壳聚糖分子能影响细胞间F —肌动蛋白功能，打开细胞通道，有利于提高药物 在细胞间瞬间渗透的能力。但天然的壳聚糖微球的不足在于由于每批次的来 源不同，原料存在差异；降解过快导致的药物释放过快和力学的过早丧失；以 及不适宜作为亲脂性药物的载体；质量难以控制等。
综上可见，既能实现药物从微球的长期有效的释放，又能克服PLGA引起
的酸性问题，是一个具有挑战的问题。
发明内容
本发明的目的在于提供一种双重载药的复合微球，该复合微球具有可载两 种药物、减少药物的早期突释、延长给药时间和分阶段控制给药的特征。
本发明的另一目的在于提供上述复合微球的制备方法。
一种双重载药的复合微球，所述复合微球具有球中球结构，基体由位于内 部的乳酸-羟基乙酸共聚物微球和位于外层的壳聚糖外壳构成，药物分别被包埋
在上述内部微球和外壳中，其中，总载药率为1-10%，内部微球的平均粒径为 100-1000nm，且球面光滑而没有孔洞结构，复合微球的平均粒径为10-100pn， 且球面粗糙多皱褶，无孔洞。
所述乳酸-羟基乙酸共聚物的相对分子质量为5-100KDa。 所述乳酸-羟基乙酸共聚物中乳酸乙醇酸的摩尔百分比为50:50-75:25。 所述壳聚糖的相对分子质量为10-50KDa。
所述药物为水溶性蛋白、多肽或生长因子，且内部包埋的药物和外壳中包 埋的药物相同或不同。水溶性蛋白如牛血清白蛋白,卵清蛋白，溶菌酶等，多肽如 Peptide-24或Peptide-17，生长因子如BMP-2 。
所述内部微球和壳聚糖外壳的质量比为1: (5-10)。一种双重载药的复合微球的制备方法，按照如下操作步骤进行
(1) 采用乳化一溶剂挥发法制备乳酸-羟基乙酸共聚物内部微球悬液，其中，药 物用量是乳酸-羟基乙酸共聚物用量的l-10wt%; PLGA的溶剂采用二氯甲烷 (DCM)，内水相药物的溶剂采用水，外水相的表面活性剂选用Tween 80或者 Montanox70。乳化时采用不同超声强度和超声时间作为控制内球粒径的因素。
(2) 将上述内部微球悬液置于质量百分比浓度为0.5-5%的壳聚糖溶液中，其中， 壳聚糖溶液的溶剂为0.5-3%醋酸，搅拌至分散均匀；然后加入药物水溶液，继 续搅拌至分散均匀，得复合悬液，其中，药物用量是壳聚糖用量的l-10wt%;
(3) 将步骤(2)的复合悬液加入到含山梨醇酯类乳化剂的油相中，油相为液体 石蜡或植物油，以500-3000rpm的速度搅拌乳化30-60分钟，得到乳液，其中， 乳化剂与油相的体积比为1/60-1/15;
(4) 然后在上述搅拌状态下，将交联剂水溶液滴加至步骤(3)所制备的乳液中， 滴加完后继续以500-3000rpm的速度搅拌2-4小时，静置过夜，得微球悬液， 其中，交联剂的用量为壳聚糖质量的1.5-3倍；
(5) 依次以石油醚和异丙醇洗涤步骤(4)所得微球悬液l-5次，再以去离子水 洗l-5次后，得到双重载药的复合微球，冷冻干燥后得到干燥的复合微球。
所述山梨醇酯类乳化剂为Span 80、 Sorbon S-60和Sorgen 50中的一种或 多种。
所述交联剂水溶液为5%或10%三聚磷酸钠水溶液。控制TPP的量和交联 时间，可以制备不同释药特性和不同降解特性的微球。
使用上述方法制备的本发明复合微球总的药物包埋率可高达70-80%。
本发明所说的复合微球的制备过程中，药物的投放，分为两次投放，即制备PLGA内球时和制备CS外层时分别投药。可根据应用的需要控制两次药物
投放的量或药物的浓度或药物的种类，以达到最佳给药曲线。
本发明所说的复合微球的释药特性，主要通过以下参数得到控制(1)
PLGA内部微球基体的分子量；(2)PLGA内球的固化时间；(3)内球中药物的投 放比例；(4)外层基体CS的分子量；(5)外层CS的交联度；(6)外层CS中药 物的投放比例；(7)内球、外层的质量比例；(8)药物的配制浓度。(9)内外药物 种类的选择。
本发明所制备的PLGA/CS双重载药复合微球材料具有十分显著的优点
(1) 良好的生物相容性和可降解性。该复合微球所用的基材(PLGA和CS)， 均具有良好的生物相容性，和可调的降解性。在PLGA中有大量的酯键，为疏 水性物质，把它和CS联合使用，可以增强材料的亲水性，有利于水溶性药物 的附载和增加微球的相容性。
(2) 根据应用的需要，进行分阶段给药。该复合微球的投药是分两次投入， 第一次投入的药物主要分布于内部PLGA微球，第二次投入的药物分布于外层 CS，内外药物因扩散路径的长短不同或因基体降解的时间表不同，使它们释放 的峰值显现出先后顺序。可以通过调节两次给药的种类、药量和浓度、内层 PLGA和CS的质量比以及它们的分子量，以达到整体控制药物的释放动力学 的目的。
(3) 减少突释。对于内外载同种药的本复合微球，可以通过减小外层药量、 增大内层药量或增加外层CS比例的方式，在达到相同的载药量的同时，减少 早期药物的突释行为。
(4) 缓解PLGA降解引起的酸性问题。CS含有丰富的-OH、 -NHR功能基团，大量的CS包覆在这可以PLGA微球外面，当PLGA降解产生酸性产物时， 这些基团能有效的缓冲。实验证明，能维持pH值在人体正常pH值左右。
图1是载BMP-2的PLGA/CS复合微球的表面形貌图2是载BSA的PLGA内球形貌图； 图3是载BMP-2的PLGA/CS复合微球的断面形貌图； 图4是PLGA/CS复合微球和CS微球在PBS浸泡过程中BSA的释放曲线； 图5是PLGA内球和PLGA/CS复合微球在PBS浸泡液中pH值的变化曲线。
具体实施例方式
下面将结合实施例进一步阐明本发明的内容，但这些实施例并不限制本发 明的保护范围。
以下实施例中使用的BCA蛋白试剂盒，购自北京赛驰生物科技有限公司；
微球的平均粒径测定方法将微球分散于去离子水中，用激光粒度分析仪 (Mastersizer2000,英国)测定其平均粒径；
本发明复合微球的内外球的质量比、复合微球的总包埋率和总的载药率的 测定方法
将已知质量W ,e、的干燥复合微球溶于2%的醋酸中，离心后取上清液，沉 淀物干燥后称重为W rt，再用含2.5% (w/v)十二垸基硫酸钠的0.2mol/LNaOH 溶液溶解沉淀物，完全溶解后用1 mol/L的HC1将溶液调至呈中性，以BCA蛋 白试剂盒分别测定两次蛋白上清液的浓度，计算出总的蛋白量P,，然后根据下 面公式计算内外球的质量比、复合微球的总包埋率和总的载药率。
内外球的质量比W内/(W总-W内)；微球的总包埋率二P i/制备复合微球过程中加入的总的蛋白量； 总的载药率-P!/W总。 实施例l:本发明复合微球的制备I
1) 制备PLGA内部微球 取0.4mL的5。/。(w/v)的牛血清白蛋白(BSA)水溶液 置于2mL的含10% (w/v) PLGA(分子量50KDa, LA:GA摩尔百分比为75:25) 的DCM溶液中，以60w的强度超声乳化10秒，间隔10秒，再重复5次"超声 一间隔"过程，制得内乳液(w/o);在30mL去离子水中，加入0.3mLTween80， 机械搅拌至分散均匀，制得外水相；将内乳液加入外水相，超声乳化，以400w 的超声强度乳化10秒，间隔10秒，重复5次，制得复乳液(w/o/w);将该液中 速搅拌2小时待DCM挥发，静置过夜。离心后，水洗三次，得到PLGA内球 悬液。
2) 取2mLPLGA上述内球悬液置于10 mL 3% (w/v) CS (分子量10KDa，溶于2% 的醋酸溶液)溶液中，机械搅拌至分散均匀；再加入0.12mL5y。的BSA水溶液， 继续搅拌分散均匀，得w相；取1.8mLSpan80至60mL液体石蜡中，机械搅拌 混合均匀得o相；将所制备的w相加入o相，以3000rpm的速度乳化30分钟， 得到乳液；在搅拌状态下，将16mL的5% (w/v) TPP溶液缓慢匀速(0.2ml/min) 滴加至所制备的乳液中；滴加完后继续以3000rpm搅拌2小时，静置过夜，得 微球悬液；所得微球悬液以异丙醇和石油醚分别洗涤3次，再以去离子水洗3 次后，得到双重载药的PLGA/CS复合微球悬液。在-4(TC冷冻干燥24小时得到 干燥的复合微球。
所得复合微球的平均粒径为53.8(im,内部微球的平均粒径790nm，外部CS 质量与内部PLGA质量比为5.21/1，总包埋率为76%,总载药率为3.21%。实施例2本发明复合微球的制备II
1) 制备PLGA内部微球
取0.2mL的5。/。的牛血清白蛋白(BSA)水溶液置于2mL的含5% (w/v) PLGA(分子量5KDa，LA:GA摩尔百分比为75:25)的DCM溶液中，以100w的强 度超声乳化10秒，间隔10秒，再重复5次"超声—间隔"过程，制得内乳液(w/o); 在30mL去离子水中，加入0.3mLTween 80，机械搅拌至分散均匀，制得外水 相；将内乳液加入外水相，超声乳化，以800w的超声强度乳化10秒，间隔IO 秒，重复3次，制得复乳液(w/o/w);将该液中速搅拌2小时待DCM挥发，静 置过夜。离心后，水洗三次，得到PLGA内球悬液，PLGA内球形貌图见图2。
2) 取2mLPLGA内球悬液置于10mL2%(w/v) CS(50KDa，溶于0.5%的醋酸溶液) 溶液中，机械搅拌至分散均匀；再加入0.12mL5。/。的BSA水溶液，继续搅拌分 散均匀，得w相；取1.2mLSpan80至40mL液体石蜡中，机械搅拌混合均匀 得o相；将所制备的w相加入o相，以2000rpm的速度乳化50分钟，得乳液； 在搅拌状态下，将12mL的5% (w/v) TPP溶液缓慢匀速(0.2ml/min)滴加至所制 备的乳液中；滴加完成后继续搅拌2小时，静置过夜，得微球悬液；所得微球 悬液以异丙醇和石油醚分别洗漆4次，再以去离子水洗2次后，得到双重载药 的PLGA/CS复合微球悬液。在-4(TC冷冻干燥24小时得到干燥的复合微球。
所得复合微球的平均粒径为63.0)Lim，内部微球的平均粒径108nm，外部CS 质量与内部PLGA质量比为7.15/1，总包埋率为72%，总载药率为2.26%。
实施例3本发明复合微球的制备III
1)制备PLGA内部微球
取0.2mL的5%的庆大霉素水溶液置于2mL的含5% (w/v) PLGA(分子量100KDa, LA:GA摩尔百分比为50:50)的DCM溶液中，以40w的强度超声乳化 10秒，间隔10秒，再重复5次"超声一间隔"过程，制得内乳液(w/o);在30mL 去离子水中，加入0.3mLTween 80，机械搅拌至分散均匀，制得外水相；将内 乳液加入外水相，超声乳化，以400w的超声强度乳化10秒，间隔10秒，重 复3次，制得复乳液(w/o/w);将该液中速搅拌2小时待DCM挥发，静置过夜。 离心后，水洗三次，得到PLGA内球悬液。
2)取2mLPLGA内球悬液置于6mL5% (w/v) CS(分子量25KDa,溶于3%的 醋酸溶液)溶液中，机械搅拌至分散均匀；再加入0.6mL5。/。的庆大霉素水溶液， 继续搅拌分散均匀，得w相；取lmL Sorbon S-60至60mL液体石蜡中，机械 搅拌混合均匀得o相；将所制备的w相加入o相，以3000rpm的速度乳化30 分钟，得乳液；在搅拌状态下，将12mL的5% (w/v) TPP溶液缓慢匀速(0.2ml/min) 滴加至所制备的乳液中；滴加完后继续搅拌2小时，静置过夜；所得微球悬液 以石油醚和异丙醇分别洗涤2次，再以去离子水洗4次后，得到双重载药的 PLGA/CS复合微球悬液。在-40'C冷冻干燥24小时得到千燥的复合微球。
所得复合微球的平均粒径为53.8pm，内部微球的平均粒径957nm，外部CS 质量与内部PLGA质量比为8.09/1，总包埋率为69.8%,总载药率为3.67%。
实施例4本发明复合微球的制备IV
1 )制备PLGA内部微球取0.04mL的5。/。(w/v)的骨形态发生蛋白一2(BMP-2) 水溶液置于2mL的含2.5。/。PLGA(分子量50KDa, LA:GA的摩尔百分比为75:25) 的DCM溶液中，以60w的强度超声乳化10秒，间隔10秒，再重复5次"超声 一间隔"过程，制得内乳液(w/o);在30mL去离子水中，加入0.3mLTween80， 机械搅拌至分散均匀，制得外水相；将内乳液加入外水相，超声乳化，以600w
12的超声强度乳化10秒，间隔10秒，重复5次，制得复乳液(w/o/w);将该液中 速搅拌2小时待DCM挥发，静置过夜。离心后，水洗三次，得到PLGA内球悬液。
2)取2mLPLGA内球悬液置于20mL 0.5% (w/v) CS(分子量25KDa,溶于2% 的醋酸溶液)溶液中，机械搅拌至分散均匀；再加入0.2mL5。/。的BMP-2水溶液， 继续搅拌分散均匀，得w相；取4mLSorgen 50至60mL液体石蜡中，机械搅 拌混合均匀得o相；将所制备的w相加入o相，以1000rpm的速度乳化30分 钟，得乳液；在搅拌状态下，将4mL的5% (w/v) TPP溶液缓慢匀速(0.2ml/min) 滴加至所制备的乳液中；滴加完后继续搅拌2小时，静置过夜，得微球悬液；所 得微球悬液以异丙醇和石油醚分别洗涤1次，再以去离子水洗4次后，得到双 重载药的PLGA/CS复合微球悬液。在-4(TC冷冻干燥24小时得到干燥的复合微 球。
所得复合微球的表面形貌图见图1，断面形貌图见图3，复合微球的平均粒 径为89.1pm ，内部微球的平均粒径782nm，外部CS质量与内部PLGA质量比 为7.23/1，总包埋率为70.4%,总载药率为3.03%。
实施例5本发明复合微球的制备V
l)制备PLGA内部微球 取0.05mL的5%的骨形态发生蛋白_2(BMP-2) 水溶液置于4mL的含5% (w/v) PLGA(分子量20KDa,LA:GA的摩尔百分比为 60:40)的DCM溶液中，以60w的强度超声乳化10秒，间隔10秒，再重复5 次"超声一间隔"过程，制得内乳液(w/o);在30mL去离子水中，加入0.3mLTween 80，机械搅拌至分散均匀，制得外水相；将内乳液加入外水相，超声乳化，以 400w的超声强度乳化10秒，间隔10秒，重复5次，制得复乳液(w/o/w);将该液中速搅拌2小时待DCM挥发，静置过夜。离心后，水洗三次，得到PLGA 内球悬液。
2)取2mL步骤1)的PLGA内部微球悬液至12mL 3% (w/v) CS(分子量 25KDa,溶于2。/。的醋酸溶液)溶液中，机械搅拌至分散均匀；再加入0.1mL5o/。的 Peptide-24水溶液，继续搅拌分散均匀，得w相；取1.2mLSpan 80至40mL植 物油中，机械搅拌混合均匀得o相；将所制备的w相加入o相，以1000rpm的 速度乳化60分钟，得到乳液；在搅拌状态下，将6mL的5% (w/v) TPP溶液缓 慢匀速(0.2ml/min)滴加至所制备的乳液中；滴加完后继续搅拌2小时，静置过 夜，得微球悬液；所得微球悬液以异丙醇和石油醚分别洗涤5次，再以去离子 水洗2次后，得到双重载药的PLGA/CS复合微球悬液。在-4(TC冷冻干燥24 小时得到干燥的复合微球。
所得复合微球的平均粒径为91.5pm ,内部微球的平均粒径467nm，外部 CS质量与内部PLGA质量比为6.80/1;内部微球中BMP-2的包埋率为76.4%， 外壳CS中的Peptide-24的包埋率为78.2%,总载药率1.2%。
实施例6药物释放实验
1)按照实施例2的方法分别制备内球PLGA理论载药率为10%，外壳理论
载药率为2%的复合微球，即P10/C2;内球PLGA理论载药率为5%，外壳理
论载药率为2%的复合微球，即P5/C2;
再按照如下方法制备理论载药率为2%的CS微球，即C2，具体方法如下 取0.1mL5。/。的BSA水溶液置于12mL 3% (w/v) CS(分子量25KDa,溶于2%的
醋酸溶液)溶液中，机械搅拌至分散均匀，得到w相，取1.2mLSpan 80至40mL
植物油中，机械搅拌混合均匀得o相；将所制备的w相加入o相， 1000rpm的速度乳化60分钟，得到乳液；在搅拌状态下，将12mL的5% (w/v) TPP溶 液缓慢匀速(0.2ml/min)滴加至所制备的乳液中；滴加完后继续搅拌2小时，静 置过夜，得微球悬液；所得微球悬液以异丙醇和石油醚分别洗涤5次，再以去 离子水洗2次后，得到载BSA的CS微球悬液。在-40。C冷冻干燥24小时得到 干燥的CS微球。所得CS微球的平均粒径为85.3jmi ,微球中BSA的包埋率为 87.4%,载药率2.70%
以上微球所载药物均为BSA。 所述理论载药率是指制备过程中实际加入的药物量与加入的基体(PLGA和 CS)质量和药物量之和的百分比。
2)将上述三种微球10mg分别浸泡于lml的PBS溶液中,定时取出1/2的上清 液用BCA蛋白试剂盒测定释放的BSA的量,操作方法参照说明书，再累计每 个时间点的释放总量。每次测定完成后向溶液中加入1/2体积的新鲜的PBS溶 液继续浸泡至下一个时间点，每个样品做平行的三个样，结果为平均值+标准 偏差。以每个取样时间点为横坐标，每个取样时间点上累计的BSA的释放总量 为纵坐标，绘制图4。
结果见图4， P10/C2和P5/C2两种复合微球释放BSA的特征与CS微球(C2) 相比，突释明显减少且释放时间增长。
实施例7本发明复合微球缓解PLGA降解引起的酸性证明实验
1)按照实施例2的方法制备内球PLGA理论载药率为10%，外壳理论载药率 为5%的复合微球，即P10/C5;按照实施例2中步骤l)的方法分别制备理论载 药率为5%和10。/o的PLGA微球，艮卩P5禾nP10; P10/C2， P5/C2， C2取自实施 例6。以上微球所载药物均为BSA。
2)将上述6种微球15mg分别浸泡于1.5ml的PBS溶液中，于15天，30天,60 天,90天，120天时取出上清液，用pH计测定浸泡液的pH变化。结果见图5.
由图5可见，复合微球(P10/C2,P10/C5和P5/C2)与PLGA微球(P5和P10) 相比，复合微球能够缓解PLGA降解引起的酸性。
权利要求
1、一种双重载药的复合微球，其特征在于，所述复合微球具有球中球结构，基体由位于内部的乳酸-羟基乙酸共聚物微球和位于外层的壳聚糖外壳构成，药物分别被包埋在上述内部微球和壳聚糖外壳中，其中，总载药率为1-10％，内部微球的平均粒径为100-1000nm，且球面光滑而没有孔洞结构，复合微球的平均粒径为10-100μm，且球面粗糙多皱褶，无孔洞。
2、 根据权利要求1所述双重载药的复合微球，其特征在于，所述乳酸-羟基乙 酸共聚物的相对分子质量为5-100KDa。
3、 根据权利要求1所述双重载药的复合微球，其特征在于，所述乳酸-羟基乙 酸共聚物中乳酸乙醇酸的摩尔百分比为50:50-75:25。
4、 根据权利要求1所述双重载药的复合微球，其特征在于，所述壳聚糖的相对 分子质量为10-50KDa。
5、 根据权利要求1所述双重载药的复合微球，其特征在于，所述药物为水溶性 蛋白、多肽或生长因子，且内部包埋的药物和外壳中包埋的药物相同或不同。
6、 根据权利要求1所述双重载药的复合微球，其特征在于，所述内部微球和壳 聚糖外壳的质量比为1: (5-10)。
7、 一种双重载药的复合微球的制备方法，其特征在于，包括以下步骤(1) 采用乳化一溶剂挥发法制备乳酸-羟基乙酸共聚物内部微球悬液，其中，药 物用量是乳酸-羟基乙酸共聚物用量的l-10wt%;(2) 将上述内部微球悬液置于质量百分比浓度为0.5-5%的壳聚糖溶液中，其中， 壳聚糖溶液的溶剂为0.5-3%醋酸，搅拌至分散均匀；然后加入药物水溶液，继 续搅拌至分散均匀，得复合悬液，其中，药物用量是壳聚糖用量的l-10wt%;(3) 将步骤(2)的复合悬液加入到含山梨醇酯类乳化剂的油相中，油相为液体石蜡或植物油，以500-3000rpm的速度搅拌乳化30-60分钟，得到乳液，其中， 乳化剂与油相的体积比为1/60-1/15;(4) 然后在上述搅拌状态下，将交联剂水溶液滴加至步骤(3)所制备的乳液中， 滴加完后继续以500-3000rpm的速度搅拌2-4小时，静置过夜，得微球悬液， 其中，交联剂的用量为壳聚糖质量的1.5-3倍；(5) 依次以石油醚和异丙醇洗涤步骤(4)所得微球悬液l-5次，再以去离子水 洗l-5次后，得到双重载药的复合微球，冷冻干燥后得到干燥的复合微球。
8、 根据权利要求7所述的制备方法，其特征在于，所述山梨醇酯类乳化剂为 Span 80、 Sorbon S-60禾B Sorgen 50中的一种或多种。
9、 根据权利要求7所述的制备方法，其特征在于，所述交联剂水溶液为5% 或10%三聚磷酸钠水溶液。
全文摘要
本发明公开了属于生物医用材料技术领域的一种双重载药的复合微球及其制备方法。所述复合微球具有球中球结构，基体由位于内部的乳酸-羟基乙酸共聚物微球和位于外层的壳聚糖外壳构成，药物分别被包埋在上述内部微球和外壳中，其中，总载药率为1-10％，内部微球的平均粒径为100-1000nm，复合微球的平均粒径为10-100μm。本发明还公开了该复合微球的制备方法。本发明的复合微球具有良好的生物相容性和可降解性，能够根据应用的需要控制两次药物投放的量或药物的浓度或药物的种类，减少突释，缓解PLGA降解引起的酸性问题。
文档编号A61K9/16GK101658497SQ200910092500
公开日2010年3月3日 申请日期2009年9月16日 优先权日2009年9月16日
发明者冯庆玲, 王明波 申请人:清华大学