专利名称：一种注射用红细胞冻干粉制剂及其制备方法
技术领域：
本发明涉及一种注射用冻干粉制剂，特别涉及一种红细胞的注射用冻干粉制剂。
背景技术：
红细胞主要由细胞膜和血红蛋白组成，是血液的重要成分，主要功能是输送氧气和二氧化碳。在氧分压较高的肺部，血红蛋白与氧结合成氧合血红蛋白，然后随血液流到氧分压较低的组织，血红蛋白分离，将携带的氧气释放，再与组织所产生的二氧化碳结合，运输至肺部，排出体外。人体在大量失血后需要补充血液。随着成分输血技术的推广，失血后已不必补充全血，而是给予一定量的红细胞等血液组分即可。因此，红细胞的体外保存和生物活性的保持成为成分输血技术的技术前体。现用红细胞的保存方法主要有液体保存法、冷冻保存法和冷冻干燥法。其中液体法一般指的是 4°C低温保存法，冷冻保存指-80°C或_196°C深低温保存。冷冻干燥法是将其适当脱水后经干燥制成，比液体法和冰冻法有明显的优势，其制品可以室温保存，易于水化，重量大大减轻，便于运输，减少浪费。目前，液体保存红细胞已广泛应用于临床，并得到不断的完善；冷冻保存红细胞已开始应用于临床；冷冻干燥保存红细胞的技术尚未成熟，缺乏实用性。红细胞保存的研究倍受重视。其保存期的长短已成为衡量一个国家临床输血水平的一个重要指标。目前研究认为，采用冻干技术可以延长红细胞的保存期，研究中常用的冷冻保护剂等关键辅料包括海藻糖、二甲基亚砜、聚乙烯吡咯烷酮和牛血清白蛋白等。海藻糖是一种稳定的非还原性双糖，其羟基能代替水分子同蛋白质表面部分结合，进入细胞后会形成保护层，对细胞形成保护。但只有当海藻糖达到一定浓度并均勻分布在细胞膜内外时，才能在冻干过程中对红细胞起到保护作用。因此，冻干前有效负载海藻糖至胞内是红细胞冻干保存成功的主要因素之一。然而红细胞膜对海藻糖具有非渗透性，因此将海藻糖负载进入红细胞胞内，需要复杂的工艺过程，耗时长达4小时，并需要引入更多种化学物质。使得工艺问题和安全性问题成为困扰红细胞冻干粉应用的难题之一。二甲基亚砜可防止冻干过程中形成冰晶对细胞造成损伤。温度接近0°C时，二甲基亚砜使溶液的凝固点下降，无冰晶形成；温度继续降低时，细胞外液中形成冰晶，而红细胞内溶液不冻结。红细胞胞外水不断形成冰晶，胞外浓度增大，会使细胞内的自由水透过细胞膜渗出到胞外，如果降温速度足够慢，即可使红细胞逐渐脱水而不会形成冰晶。但是，二甲基亚砜作为一种化学试剂，对人体具有一定的毒性作用，不适于注射给药，残留的二甲基亚砜可能会在长期输注冻干红细胞的患者体内逐渐积累而形成伤害，所以使用前需要反复冲洗，从而造成红细胞回收率降低的问题。聚乙烯吡咯烷酮与海藻糖相似，是非渗透性细胞保护剂，对冻干细胞具有一定的保护作用。牛血清白蛋则是一种膜保护剂。目前实验室研究结果认为，红细胞冻干过程中，需要海藻糖、聚乙烯吡咯烷酮、牛血清白蛋白组合使用才能对冻干过程中的红细胞发挥一定的保护作用。而海藻糖需要二甲基亚砜才能有效进入细胞发挥作用。并且，目前研发的各种红细胞冻干工艺和处方，因成分复杂，工艺参数不易控制等原因，存在红细胞回收率低、冻干红细胞形态变异、冻干红细胞酶活性降低等诸多问题。因此，寻找新的安全性高且能够维持冻干红细胞高回收率和高活性的红细胞冻干粉处方和工艺，已成为已成为制约红细胞临床使用的关键因素。四氢嘧啶，化学名为1，4，5，6-四氢-2-甲基_4_嘧啶羧酸或2-Methyl-l，4，5，6 -tetrahydropyrimidine-4-carboxylic acid 或(S)_2_methyl_l， 4, 5, 6-tetra-hydro pyrimidine-4-carboxylic acid 或 1,4,5,6-tetrahydro-2-methyl-4-pyrimidine carbonic acid, CAS号为96702-03-3，是1985年从海洋生物体内发现的氨基酸衍生物，具有保湿、防紫外线照射等作用，近年来已被用于化妆品作为保湿性成分或辅料。
发明内容
针对上述现有技术，本发明的目的在于提供一种注射用冻干粉制剂，具体的说是一种注射用红细胞冻干粉制剂。另一方面，本发明还提供了一种注射用红细胞冻干粉制剂的制备方法。为实现上述目的，本发明采用的技术方案为
一种注射用红细胞冻干粉制剂，由红细胞和冷冻保护剂组成，所述冷冻保护剂由非渗透性冷冻保护剂和四氢嘧啶或羟基四氢嘧啶组成，所述非渗透性冷冻保护剂选自聚乙烯吡咯烷酮、牛血清白蛋白和海藻糖中的任意一种；所述四氢嘧啶或羟基四氢嘧啶用量为每 IO12个红细胞细胞用5mg-80mg，所述非渗透性冷冻保护剂的用量为每IO12个红细胞细胞用 2mg_50mgo所述四氢嘧啶或羟基四氢嘧啶的用量为每IO12个红细胞细胞用10mg-30mg。所述非渗透性冷冻保护剂的用量为每IO12个红细胞细胞用aiig-20mg。所述非渗透性冷冻保护剂为聚乙烯吡咯烷酮。所述聚乙烯吡咯烷酮的用量为每IO12个红细胞细胞用ang-Hmg。所述注射用红细胞冻干粉制剂的制备方法，步骤为
1)配液:
将红细胞用生理盐水洗涤2次，用灭菌注射用水配成浓度为2X IO9细胞/ml的悬液， 然后加入非渗透性冷冻保护剂和四氢嘧啶或羟基四氢嘧啶，静置1小时；
2)冻干
a、预冻将分装于西林瓶的溶液以10°C /分钟的速度从_20°C降至_50°C，维持冷冻2 小时；b、一次干燥抽真空至7Pa-15I^，然后以5°C /分钟的升温速度升温至_10°C，维持干燥6小时；
c、二次干燥一次干燥后，以0. I0C /分钟的升温速度升温至25V，维持干燥5小时， 灭菌分装即得。本发明的技术方案中所述的四氢嘧啶，化学名为2-Methyl-l，4，5，6-tetra hydropyrimidine-4-carboxylic acid 或(S)-2-methyl-l, 4, 5, 6-tetra-hydro pyrimidine-4-carboxylic acid 或 1, 4, 5, 6-tetrahydro-2-methyl-4-pyrimidine carbonic acid。1，4，5，6-四氢-2-甲基-5-羟基-4-嘧啶羧酸俗称羟基四氢嘧啶，CAS号为96702-03-3，这是本领域技术人员周知的。本发明人在实验研究中惊奇的发现，四氢嘧啶与某些非渗透性冷冻保护剂的混合物，对冻干红细胞有出乎意料的保护作用，红细胞与四氢嘧啶及其衍生物和非渗透性冷冻保护剂混合后冻干，所得的注射用红细胞冻干粉制剂安全性高，稳定性强，回收率、体内存活时间和红细胞功能相对较高，冻干对红细胞的影响极小，利于红细胞的长期贮存和运输。
图1光镜下实施例9制备的注射用红细胞冻干粉复水后的红细胞形态。
具体实施例方式下面结合实施例对本发明作进一步的解释。应当理解的是，以下实施例仅用于解释本发明，而不是限制本发明的保护范围。实施例1注射用红细胞冻干粉处方及制备
红细胞细胞2X IO9细胞/ml 1000ml
四氢嘧啶12mg
聚乙烯吡咯烷酮IOmg
1)配液:
将红细胞用生理盐水洗涤2次，用灭菌注射用水配成浓度为IX IO9细胞/ml的悬液， 然后加入四氢嘧啶和聚乙烯吡咯烷酮，静置1小时；
2)冻干
a、预冻将分装于西林瓶的溶液以10°C /分钟的速度从_20°C降至_50°C，维持冷冻2 小时；b、一次干燥抽真空至12Pa，然后以5°C /分钟的升温速度升温至-10°C，维持干燥 6小时；C、二次干燥一次干燥后，以0. 1°C /分钟的升温速度升温至25°C，维持干燥5小时，灭菌分装即得。实施例2注射用红细胞冻干粉处方及制备
红细胞细胞2X IO9细胞/ml 1000ml
羟基四氢嘧啶20mg
聚乙烯吡咯烷酮7mg
1)配液:
将红细胞用生理盐水洗涤2次，用灭菌注射用水配成浓度为2X IO9细胞/ml的悬液， 然后加入羟基四氢嘧啶和聚乙烯吡咯烷酮，静置1小时；
2)冻干
a、预冻将分装于西林瓶的溶液以10°C /分钟的速度从_20°C降至_50°C，维持冷冻2 小时；b、一次干燥抽真空至9Pa，然后以5°C /分钟的升温速度升温至-10°C，维持干燥6 小时；c、二次干燥一次干燥后，以0. 1°C /分钟的升温速度升温至25V，维持干燥5小时，灭菌分装即得。实施例3 红细胞细胞羟基四氢嘧啶海藻糖 1)配液:
注射用红细胞冻干粉处方及制备
2 X IO9 细胞/ml 1000ml 30mg 45mg将红细胞用生理盐水洗涤2次，用灭菌注射用水配成浓度为2X IO9细胞/ml的悬液， 然后加入羟基四氢嘧啶和海藻糖，静置1小时； 2)冻干
a、预冻将分装于西林瓶的溶液以10°C /分钟的速度从_20°C降至_50°C，维持冷冻2 小时；b、一次干燥抽真空至10Pa，然后以5°C /分钟的升温速度升温至-10°C，维持干燥 6小时；C、二次干燥一次干燥后，以0. 1°C /分钟的升温速度升温至25°C，维持干燥5小时，灭菌分装即得。实施例4 注射用红细胞冻干粉处方及制备
红细胞细胞2X IO9细胞/ml 1000ml
羟基四氢嘧啶4ang
牛血清白蛋白18mg
1)配液:
将红细胞用生理盐水洗涤2次，用灭菌注射用水配成浓度为2X IO9细胞/ml的悬液， 然后加入羟基四氢嘧啶和牛血清白蛋白，静置1小时；
2)冻干a、预冻将分装于西林瓶的溶液以10°C/分钟的速度从_20°C降至_50°C，维持冷冻2小时；b、一次干燥抽真空至10Pa，然后以5°C /分钟的升温速度升温至-10°C， 维持干燥6小时；C、二次干燥一次干燥后，以0. 1°C /分钟的升温速度升温至25V，维持干燥5小时，灭菌分装即得。实施例5 注射用红细胞冻干粉处方及制备
红细胞细胞2X IO9细胞/ml 1000ml
四氢嘧啶26mg
聚乙烯吡咯烷酮IOmg
1)配液:
将红细胞用生理盐水洗涤2次，用灭菌注射用水配成浓度为2X IO9细胞/ml的悬液， 然后加入四氢嘧啶和聚乙烯吡咯烷酮，静置1小时；
2)冻干
a、预冻将分装于西林瓶的溶液以10°C /分钟的速度从_20°C降至_50°C，维持冷冻2 小时；b、一次干燥抽真空至10Pa，然后以5°C /分钟的升温速度升温至-10°C，维持干燥 6小时；C、二次干燥一次干燥后，以0. 1°C /分钟的升温速度升温至25°C，维持干燥5小时，灭菌分装即得。实施例6 注射用红细胞冻干粉处方及制备
红细胞细胞2X IO9细胞/ml 1000ml
四氢嘧啶58mg
海藻糖50mg
1)配液:
将红细胞用生理盐水洗涤2次，用灭菌注射用水配成浓度为2X IO9细胞/ml的悬液， 然后加入四氢嘧啶和海藻糖，静置1小时；
2)冻干
a、预冻将分装于西林瓶的溶液以10°C /分钟的速度从_20°C降至_50°C，维持冷冻2注射用红细胞冻干粉处方及制备 2 X IO9 细胞/ml 60mg
3mg
小时；b、一次干燥抽真空至12Pa，然后以5°C /分钟的升温速度升温至-10°C，维持干燥 6小时；C、二次干燥一次干燥后，以0. 1°C /分钟的升温速度升温至25°C，维持干燥5小时，即得。实施例7 注射用红细胞冻干粉处方及制备
红细胞细胞2X IO9细胞/ml 1000ml
四氢嘧啶7ang
牛血清白蛋白23mg
1)配液:
将红细胞用生理盐水洗涤2次，用灭菌注射用水配成浓度为2X IO9细胞/ml的悬液， 然后加入四氢嘧啶和牛血清白蛋白，静置1小时；
2)冻干
a、预冻将分装于西林瓶的溶液以10°C /分钟的速度从_20°C降至_50°C，维持冷冻2 小时；b、一次干燥抽真空至10Pa，然后以5°C /分钟的升温速度升温至-10°C，维持干燥 6小时；C、二次干燥一次干燥后，以0. 1°C /分钟的升温速度升温至25°C，维持干燥5小时，灭菌分装即得。实施例8 红细胞细胞2X IO9细胞/ml 1000ml 四氢嘧啶聚乙烯吡咯烷酮
1)配液:
将红细胞用生理盐水洗涤2次，用灭菌注射用水配成浓度为2X IO9细胞/ml的悬液， 然后加入四氢嘧啶和聚乙烯吡咯烷酮，静置1小时；
2)冻干
a、预冻将分装于西林瓶的溶液以10°C /分钟的速度从_20°C降至_50°C，维持冷冻2 小时；b、一次干燥抽真空至12Pa，然后以5°C /分钟的升温速度升温至-10°C，维持干燥 6小时；C、二次干燥一次干燥后，以0. 1°C /分钟的升温速度升温至25°C，维持干燥5小时，灭菌分装即得。实施例9 红细胞细胞2X IO9细胞/ml 1000ml 四氢嘧啶聚乙烯吡咯烷酮
1)配液:
将红细胞用生理盐水洗涤2次，用灭菌注射用水配成浓度为2X IO9细胞/ml的悬液， 然后加入四氢嘧啶和聚乙烯吡咯烷酮，静置1小时；
2)冻干
a、预冻将分装于西林瓶的溶液以10°C /分钟的速度从_20°C降至_50°C，维持冷冻2 小时；b、一次干燥抽真空至15Pa，然后以5°C /分钟的升温速度升温至-10°C，维持干燥 6小时；C、二次干燥一次干燥后，以0. 1°C /分钟的升温速度升温至25°C，维持干燥5小时，灭菌分装即得。
注射用红细胞冻干粉处方及制备 2 X IO9 细胞/ml 15mg
12g
实施例10 注射用红细胞冻干粉处方及制备
红细胞细胞2X IO9细胞/ml 1000ml
四氢嘧啶17mg
聚乙烯吡咯烷酮19mg
1)配液:
将红细胞用生理盐水洗涤2次，用灭菌注射用水配成浓度为2X IO9细胞/ml的悬液， 然后加入四氢嘧啶和聚乙烯吡咯烷酮，静置1小时；
2)冻干
a、预冻将分装于西林瓶的溶液以10°C /分钟的速度从_20°C降至_50°C，维持冷冻2 小时；b、一次干燥抽真空至9Pa，然后以5°C /分钟的升温速度升温至-10°C，维持干燥6 小时；c、二次干燥一次干燥后，以0. I0C /分钟的升温速度升温至25V，维持干燥5小时，灭菌分装即得。实施例11 注射用红细胞冻干粉处方及制备
红细胞细胞2X IO9细胞/ml 1000ml
羟基四氢嘧啶20mg
聚乙烯吡咯烷酮IOmg
1)配液:
将红细胞用生理盐水洗涤2次，用灭菌注射用水配成浓度为2X IO9细胞/ml的悬液， 然后加入羟基四氢嘧啶和聚乙烯吡咯烷酮，静置1小时；
2)冻干
a、预冻将分装于西林瓶的溶液以10°C /分钟的速度从_20°C降至_50°C，维持冷冻2 小时；b、一次干燥抽真空至10Pa，然后以5°C /分钟的升温速度升温至-10°C，维持干燥 6小时；C、二次干燥一次干燥后，以0. 1°C /分钟的升温速度升温至25°C，维持干燥5小时，灭菌分装即得。实施例12 注射用红细胞冻干粉处方及制备
红细胞细胞2X IO9细胞/ml 1000ml
羟基四氢嘧啶iang
牛血清白蛋白15mg
1)配液:
将红细胞用生理盐水洗涤2次，用灭菌注射用水配成浓度为2X IO9细胞/ml的悬液， 然后加入羟基四氢嘧啶和牛血清白蛋白，静置1小时；
2)冻干
a、预冻将分装于西林瓶的溶液以10°C /分钟的速度从_20°C降至_50°C，维持冷冻2 小时；b、一次干燥抽真空至10Pa，然后以5°C /分钟的升温速度升温至-10°C，维持干燥 6小时；C、二次干燥一次干燥后，以0. 1°C /分钟的升温速度升温至25°C，维持干燥5小时，灭菌分装即得。实施例13 注射用红细胞冻干粉处方及制备
红细胞细胞2X IO9细胞/ml 1000ml
四氢嘧啶18mgCN 102327289 A
说明书7/9页
海藻糖59mg
1)配液:
将红细胞用生理盐水洗涤2次，用灭菌注射用水配成浓度为2X IO9细胞/ml的悬液， 然后加入四氢嘧啶和海藻糖，静置1小时；
2)冻干
a、预冻将分装于西林瓶的溶液以10°C /分钟的速度从_20°C降至_50°C，维持冷冻2 小时；b、一次干燥抽真空至10Pa，然后以5°C /分钟的升温速度升温至-10°C，维持干燥 6小时；C、二次干燥一次干燥后，以0. 1°C /分钟的升温速度升温至25°C，维持干燥5小时，灭菌分装即得。实施例14 注射用红细胞冻干粉处方及制备
红细胞细胞2X IO9细胞/ml 1000ml
四氢嘧啶Ilmg
海藻糖75mg
1)配液:
将红细胞用生理盐水洗涤2次，用灭菌注射用水配成浓度为2X IO9细胞/ml的悬液， 然后加入四氢嘧啶和海藻糖，静置1小时；
2)冻干
a、预冻将分装于西林瓶的溶液以10°C /分钟的速度从_20°C降至_50°C，维持冷冻2 小时；b、一次干燥抽真空至10Pa，然后以5°C /分钟的升温速度升温至-10°C，维持干燥 6小时；C、二次干燥一次干燥后，以0. 1°C /分钟的升温速度升温至25°C，维持干燥5小时，灭菌分装即得。实施例15 注射用红细胞冻干粉处方及制备
红细胞细胞2X IO9细胞/ml 1000ml
四氢嘧啶Ilmg
牛血清白蛋白32mg
1)配液:
将红细胞用生理盐水洗涤2次，用灭菌注射用水配成浓度为2X IO9细胞/ml的悬液， 然后加入四氢嘧啶和牛血清白蛋白，静置1小时；
2)冻干
a、预冻将分装于西林瓶的溶液以10°C /分钟的速度从_20°C降至_50°C，维持冷冻2 小时；b、一次干燥抽真空至7Pa，然后以5°C /分钟的升温速度升温至-10°C，维持干燥6 小时；c、二次干燥一次干燥后，以0. I0C /分钟的升温速度升温至25V，维持干燥5小时，灭菌分装即得。实施例16 注射用红细胞冻干粉处方及制备
红细胞细胞2X IO9细胞/ml 1000ml
四氢嘧啶19mg
海藻糖41mg
1)配液:
将红细胞用生理盐水洗涤2次，用灭菌注射用水配成浓度为2X IO9细胞/ml的悬液，然后加入四氢嘧啶和海藻糖，静置1小时； 2)冻干
a、预冻将分装于西林瓶的溶液以10°C /分钟的速度从_20°C降至_50°C，维持冷冻2 小时；b、一次干燥抽真空至10Pa，然后以5°C /分钟的升温速度升温至-10°C，维持干燥 6小时；C、二次干燥一次干燥后，以0. 1°C /分钟的升温速度升温至25°C，维持干燥5小时，灭菌分装即得。实施例17 注射用红细胞冻干粉制剂的急性毒性实验
SPF级KM小鼠，雌雄各半，体重16g-30g，称重后随机分为17组，一组尾静脉注射给予未冻干的红细胞，其余16组分别静脉注射给予实施例1-实施例16所制备的冻干粉(冻干粉用生理盐水复溶)，以红细胞细胞个数计算给药剂量为IO12/只，给药后连续观察14天。观察项目包括毒性反应、体重和组织病理学。结果表明，小鼠尾静脉注射给予红细胞冻干粉， 以红细胞细胞个数计为IO14/只时，无明显毒性反应，给药前后及实验结束时小鼠体重无明显差异，组织病理学观察，未发现显著异常。说明本发明的注射用红细胞冻干粉制剂安全性良好。实施例18 注射用红细胞冻干粉制剂的长期毒性实验
Wister大鼠，雌雄各半，420g-600g，称重后随机分为17组，一组尾静脉注射给予未冻干的红细胞，其余16组分别静脉注射给予实施例1至实施例16所制备的冻干粉(冻干粉用生理盐水复溶)，以红细胞细胞个数计算给药剂量为2 X IO9/只，每两天给药1次，共30天， 恢复期为14天。给药期间及恢复期内，观察大鼠给药前及给药后进行大体观察，记录大鼠的一般症状、记录给药前及给药后大鼠的体重，并定期进行血液学、尿液学和血生化检查， 记录给药前及给药后大鼠的心电图。结果显示，各组动物体重与对照组无显著差异，大体观察未发现异常。实验组动物的血液学、尿液学和血生化数据与对照组无显著差异。说明四注射用红细胞冻干粉制剂长期给药的安全性良好，耐受性符合临床用药的要求。实施例19 注射用红细胞冻干粉制剂的红细胞回收率
体外红细胞细胞回收率=(复水后红细胞数目/冻干前红细胞数目)χιοο% 将实施例1-实施例16所制备的冻干粉用生理盐水复水，对各组红细胞细胞复水前及复水后个数进行计数，计算各组红细胞细胞回收率(每组取三份样品测定后取平均值)。结果表明，各组冻干粉的体外红细胞细胞回收率(均值)为85. 7%-96. 0%，其中实施例1、实施例 2、实施例9和实施例11制备的由四氢嘧啶或羟基四氢嘧啶与聚乙烯吡咯烷酮组成的冻干粉的体外红细胞细胞回收率集中于87. 1%-98. 3%，显著高于其他各组。实施例20 注射用红细胞冻干粉制剂的红细胞复水后的细胞形态学观察
将实施例1至实施例16所制备的注射用红细胞冻干粉用生理盐水复溶后，红细胞涂片作姬姆萨染色(Giemsa stain)，新鲜红细胞经同样涂片染色后作为正常对照；光学显微镜观察并照相。结果表明实施例1至实施例16所制备的注射用红细胞冻干粉用生理盐水复溶后，红细胞形态未见异常。实施例9注射用红细胞冻干粉复水后的红细胞形态见图1。实施例21 注射用红细胞冻干粉制剂的红细胞复水后的三磷酸腺苷酶和葡萄糖-6-磷酸脱氢酶活性测定
将实施例1至实施例16所制备的注射用红细胞冻干粉用生理盐水复溶后，使用试剂盒测定三磷酸腺苷酶(ATP)和葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G-6-PD)活性。新鲜红细胞和洲标准红细胞悬液作同样测定作为对照。结果见表1。
表 权利要求
1.一种注射用红细胞冻干粉制剂，其特征在于由红细胞和冷冻保护剂组成，所述冷冻保护剂由非渗透性冷冻保护剂和四氢嘧啶或羟基四氢嘧啶组成，所述非渗透性冷冻保护剂选自聚乙烯吡咯烷酮、牛血清白蛋白和海藻糖中的任意一种；所述四氢嘧啶或羟基四氢嘧啶用量为每IO12个红细胞细胞用5mg-80mg，所述非渗透性冷冻保护剂的用量为每IO12个红细胞细胞用ang-50mg。
2.根据权利要求1所述的注射用红细胞冻干粉制剂，其特征在于所述四氢嘧啶或羟基四氢嘧啶的用量为每IO12个红细胞细胞用10mg-30mg。
3.根据权利要求1所述的注射用红细胞冻干粉制剂，其特征在于所述非渗透性冷冻保护剂的用量为每IO12个红细胞细胞用ang-20mg。
4.根据权利要求1-3所述的注射用红细胞冻干粉制剂，其特征在于所述非渗透性冷冻保护剂为聚乙烯吡咯烷酮。
5.根据权利要求4所述的注射用红细胞冻干粉制剂，其特征在于所述聚乙烯吡咯烷酮的用量为每IO12个红细胞细胞用2mg-Hmg。
6.权利要求1-5所述的注射用红细胞冻干粉制剂的制备方法，其特征在于，步骤为1)配液:将红细胞用生理盐水洗涤2次，用灭菌注射用水配成浓度为2X IO9细胞/ml的悬液， 然后加入非渗透性冷冻保护剂和四氢嘧啶或羟基四氢嘧啶，静置1小时；2)冻干a、预冻将分装于西林瓶的溶液以10°C/分钟的速度从_20°C降至_50°C，维持冷冻2 小时；b、一次干燥抽真空至7Pa-15I^，然后以5°C/分钟的升温速度升温至_10°C，维持干燥6小时；c、二次干燥一次干燥后，以0.1°C /分钟的升温速度升温至25°C，维持干燥5小时， 灭菌分装即得。
全文摘要
本发明涉及一种注射用冻干红细胞制剂及其制备方法，冻干保护剂由非渗透性保护剂与四氢嘧啶或羟基四氢嘧啶组成。本发明的注射用冻干红细胞制剂安全性高，稳定性强，回收率、体内存活时间和红细胞功能相对较高，冻干对红细胞的影响极小，利于红细胞的长期贮存和运输。
文档编号A61K47/32GK102327289SQ20111031273
公开日2012年1月25日 申请日期2011年10月17日 优先权日2011年10月17日
发明者厉保秋, 厉凌子, 高继友 申请人:济南环肽医药科技有限公司