一种药物组合物、其制备方法和应用的制作方法
【专利摘要】本发明属于医药【技术领域】，具体地说，涉及一种药物组合物。本发明所述的药物组合物含有盐酸法舒地尔和核苷酸衍生物，药物组合物中核苷酸衍生物含量为盐酸法舒地尔含量的0.1～25倍。本发明还公开了所述药物组合物的制备方法及其应用。本发明所述的药物组合物具有增加肌球蛋白轻链磷酸酶的活性扩张血管，降低内皮细胞的张力，改善脑组织微循环，保护神经抗凋亡，促进神经再生的作用，从而可预防和改善多种原因引起的血管痉挛，选择性扩张痉挛的血管；抑制脑神经细胞受损，促进神经元轴突生长；减轻受累脑细胞组织的炎性反应。
【专利说明】一种药物组合物、其制备方法和应用
【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种药物组合物、其制备方法和应用，具体地说，涉及盐酸法舒地尔和 核苷酸衍生物所组成的药物组合物、其制备方法及其在制备改善和预防蛛网膜下腔出血术 后的脑血管痉挛及引起的脑缺血症状，治疗脑出血后遗症的用途。
【背景技术】
[0002] 蛛网膜下腔出血（subarachnoid hemorrhage，SAH)是出血性脑血管病的一个类 型，分原发性和继发性两种。原发性蛛网膜下腔出血是由于脑表面和脑底的血管破裂出血， 血液直接流入蛛网膜下腔所致。又称自发性SAH。脑实质或脑室出血、外伤性硬膜下或硬膜 外出血流入蛛网膜下腔为继发性SAH。原发性蛛网膜下腔出血最常见的病因是先天性颅内 动脉瘤和血管畸形。临床上以起病急骤，剧烈头痛，多为撕裂样或剧烈胀痛，频繁呕吐，脑膜 刺激征阳性为主要临床特征。部分患者有烦躁不安、谵妄、幻觉等精神症状，或伴有抽搐及 昏迷等，一般不引起肢体瘫痪。早期脑CT扫描，可见蛛网膜下腔或脑室内有高密度影，腰穿 检查为均匀一致血性脑脊液，压力增高。蛛网膜下腔出血是神经科最常见的急症之一，发病 率占急性脑血管病的6%?10%。
[0003] 盐酸法舒地尔是一种新型的5-异喹啉磺胺衍生物，是首个抑制肌球蛋白轻链磷 酸化的药物，与钙离子拮抗剂不同，盐酸法舒地尔不是单纯阻断钙离子内流，而是作用于细 胞内。它不仅能抑制细胞内钙离子活动，还能抑制MLCK和PKC等多个蛋白酶，通过阻断血 管收缩过程的最终阶段，肌球蛋白轻链磷酸化和自由基的产生，来达到松弛血管平滑肌，扩 张血管，抑制血管痉挛的作用。法舒地尔是Rho激酶特异性抑制剂，对脑缺血再灌注损伤 的保护作用已有报道。其作用机制主要与以下几个方面有关：法舒地尔能增加 eNOS的表 达，法舒张血管增加局部脑血流量，延缓缺血脑组织进入不可逆的细胞死亡过程；法舒地尔 对缺血区神经元有直接的保护作用；法舒地尔可以改善缺血区的微循环功能；法舒尔可以 抑制脑缺血区白细胞的渗出，减轻炎症反应对脑组织织造成的损伤。
[0004] CN102697707A提供盐酸法舒地尔注射液及其制备方法，用于改善预防蛛网膜下腔 出血术后的脑血管痉挛及引起的脑缺血症状。盐酸法舒地尔注射液含有盐酸法舒地尔、无 水乙酸钠及注射用水。其制备方法为：①注入注射用水；②称取盐酸法舒地尔与无水乙酸 钠；③加入无水乙酸钠搅拌均匀溶解；④加入盐酸法舒地尔搅拌至溶液均匀；⑤测量溶液 pH值，使溶液pH值在4. 4?4. 6 ;⑥加注射用水至总量；⑦将溶液过滤；⑧通氮气灌封；⑨ 进行灭菌。
[0005] CN102525897A公开了一种盐酸法舒地尔组合物注射液及其制备方法。本发明所述 盐酸法舒地尔组合物注射液每毫升含有法舒地尔15mg、氯化钠8mg、苯甲醇0. 5V/v%，余量 为注射用水。体积比为0. 5%的苯甲醇不仅可以减轻疼痛、抑制微生物繁殖，而且增强了盐 酸法舒地尔的抗脑血管痉挛的效应。试验表明，本发明所述盐酸法舒地尔组合物注射液抗 脑血管痉挛的效应增强，脑保护作用提高，并且稳定性好，可广泛应用于脑梗塞、椎基底动 脉供血不足、蛛网膜下腔出血引起的迟发性脑血管病、脑外科手术后及介入治疗后引起的 脑血管痉挛、短暂性脑缺血发作的治疗。
[0006] CN1813762A公开了一种盐酸法舒地尔口服制剂，特别是一种用于蛛网膜下腔出血 后脑血管痉挛等引起的缺血性脑血管疾病症状的改善的盐酸法舒地尔的口服药物制剂，优 选的是片剂、胶囊和颗粒剂。
[0007] 然而，上述含有盐酸法舒地尔的制剂的疗效并不显著。
[0008] 核苷酸衍生物的种类很多，目前主要的作为药物生产的品种有三磷酸腺苷二钠、 环磷腺苷钙或二丁酰环磷腺苷钙。三磷酸腺苷二钠是核苷酸衍生物，参与体内脂肪、蛋白 质、糖、核酸以及核苷酸的代谢。当体内吸收、分泌、肌肉收缩及进行生化合成反应等需要能 量时，三磷酸腺苷即分解成二磷酸腺苷及磷酸基，同时释放出能量。临床用于因组织损伤、 细胞酶活力下降所致的各种疾病。如心力衰竭，心肌炎、心肌梗塞、脑动脉硬化、冠状动脉硬 化、进行性肌萎缩、脑出血后遗症、急慢性肝炎、肝硬化和听力障碍等。
[0009] 注射用环磷腺苷为蛋白激酶致活剂，系核苷酸的衍生物。它是在人体内广泛存在 的一种具有生理活性的重要物质，由三磷酸腺苷在腺苷环化酶催化下生成，能调节细胞的 多种功能活动。作为激素的第2信使，在细胞内发挥激素调节生理机能和物质代谢作用，能 改变细胞膜的功能，促使网织肌浆质内的钙离子进入肌纤维，从而增强心肌收缩，并可促进 呼吸链氧化酶的活性，改善心肌缺氧，缓解冠心病症状及改善心电图。此外，对糖、脂肪代 谢、核酸、蛋白质的合成调节等起着重要的作用。适应症为用于心绞痛、心肌梗死、心肌炎及 心源性休克。对改善风湿性心脏病的心悸、气急、胸闷等症状有一定的作用。对急性白血病 结合化疗可提高疗效，亦可用于急性白血病的诱导缓解。此外，对老年慢性支气管炎、各种 肝炎和银屑病也有一定疗效。
[0010] 注射用二丁酰环磷腺苷钙系化学合成的环磷腺苷的衍生物，属蛋白激酶激活剂。 对细胞的渗透性比环磷腺苷强，且能对抗机体内磷酸二酯酶的降解作用，作用时间较为持 久和迅速。可改善心肌缺氧、扩张冠脉、增强心肌收缩力、增加心排血量等。适应症为蛋白 为蛋白激酶致活剂。可用于心绞痛、急性心肌梗死的辅助治疗，亦可用于心肌炎、心源性休 克，手术后网膜下出血和银屑病，并可辅助其他抗癌药治疗白血病。
[0011] 现有技术中未见有盐酸法舒地尔和核苷酸衍生物的药物组合物，有鉴于此，特提 出本发明。
【发明内容】
[0012] 本发明的第一目的在于提供一种药物组合物，该药物组合物可用于预防和治疗蛛 网膜下腔出血术后的脑血管痉挛及引起的脑缺血症状，其疗效显著。
[0013] 本发明的第二目的在于提供一种含有本发明所述的药物组合物的药物制剂及其 制备方法，该药物制剂可用于预防和治疗蛛网膜下腔出血术后的脑血管痉挛及引起的脑缺 血症状，其疗效显著。
[0014] 本发明的第三目的在于提供上述药物组合物或药物制剂在制备治疗或预防蛛网 膜下腔出血、蛛网膜下腔出血术后的脑血管痉挛及引起的脑缺血或脑出血后遗症疾病方面 的应用。
[0015] 为实现本发明的第一目的，本发明采用如下技术方案：
[0016] 一种药物组合物，所述的药物组合物中含有盐酸法舒地尔和核苷酸衍生物，其中 核苷酸衍生物的质量为盐酸法舒地尔质量的0. 1?25倍，优选0. 5?20倍，更优选0. 8? 10倍。
[0017] 本发明中，所述的核苷酸衍生物为三磷酸腺苷二钠、环磷腺苷钙或二丁酰环磷腺 苷隹丐中的一种或多种。
[0018] 本发明所提供的药物组合物可进一步与药学上可接受的辅料制备成药学上可接 受的各种剂型，如片剂、胶囊、注射液等。
[0019] 为实现本发明的第二目的，本发明采用如下技术方案：
[0020] -种含有本发明所述的药物组合物的药物制剂，其中，所述的药物制剂是由本发 明所述的药物组合物与药学上可接受的辅料制成的药学上可接受的药物制剂，优选片剂、 胶囊剂、颗粒剂、口服溶液、注射液或冻干粉针剂，更优选注射液或冻干粉针剂。
[0021] 本发明中，所述的各种药物制剂是按照本领域技术人员常用的方法制备而成的。
[0022] 进一步的，当所述的药物制剂为注射液或冻干粉针剂时，所述的药学上可接受的 辅料为渗透压调节剂和pH调节剂。
[0023] 所述的渗透压调节剂的用量为调节溶液渗透压至260?330m0sm/kgH20，优选 280?310m0sm/kgH 20 ;所述的pH调节剂的用量为调节总混溶液的pH值至6. 0±0. 5,优选 6. 0±0. 2。
[0024] 所述的渗透压调节剂为氯化钠、磷酸钠、磷酸二氢钠、磷酸氢二钠、磷酸二氢钾、磷 酸氢二钾、碳酸钠、碳酸氢钠、乙二胺四乙酸二钠、氯化钾或碳酸氢钾中的一种或几种；优选 氯化钠。
[0025] 所述的pH调节剂为lmol/L的氢氧化钠溶液和/或0· lmol/L的盐酸溶液。
[0026] 作为本发明药物制剂的一种优选方案，本发明所述的注射液或冻干粉针剂由如下 重量份的组分制成：
[0027] 盐酸法舒地尔 10?50重量份 核苷酸衍生物 10?50重量份
[0028] 氯化钠 4?45重量份 0. Imol/LNaOH溶液或HC1溶液 适量 注射用水 500?5000重量份
[0029] 其中，所述的核苷酸衍生物为三磷酸腺苷二钠、环磷腺苷钙或二丁酰环磷腺苷钙 中的一种或多种。
[0030] 上述组分中，氯化钠作为渗透压调节剂，用以调节溶液渗透压至260?330m0sm/ kgH20，优选280?310m0sm/kgH20,从而保证药物的渗透压与血楽渗透压相等。
[0031] 0. lmol/L的氢氧化钠溶液或盐酸溶液作为pH调节剂，保证溶液的pH值在 6. 0±0. 5的范围内，能够保证配制和存储过程中药液的稳定性，且在该pH值范围内，对动 物的血管刺激性较小。
[0032] 本发明还进一步提供所述的药物制剂的制备方法。
[0033] 所述的制备方法为：按质量配比将盐酸法舒地尔和核苷酸衍生物混合均匀，得到 所述的药物组合物；向所得的药物组合物中加入药学上可接受的辅料按照制备药学上可接 受的剂型的常规方法制备成药学上可接受的剂型，优选片剂、胶囊剂、颗粒剂、口服溶液、注 射液或冻干粉针剂，更优选注射液或冻干粉针剂。
[0034] 当制备成注射液或冻干粉针剂时，所述的药学上可接受的辅料为渗透压调节剂和 pH调节剂。
[0035] 具体地说，当所述的药物组合物制成注射液或冻干粉针剂时，其制备方法为：
[0036] 按质量配比称取盐酸法舒地尔与核苷酸衍生物，加入渗透压调节剂，混匀，再加入 适量注射用水溶解盐酸法舒地尔、核苷酸衍生物与渗透压调节剂的混合物，调节溶液渗透 压为260?330m0sm/kgH 20,加注射用水至全量，得到总混溶液，用pH调节剂调节所得总混 溶液的pH值至6. 0±0. 5之间，加入活性炭，搅拌，粗滤脱炭，至缓冲罐中循环后，回流取样 检测pH值和含量；待合格后，将药液除菌过滤，然后灌装至安瓿瓶中经终端灭菌制成注射 液；或灌装至西林瓶中经冷冻干燥制成冻干粉针剂。
[0037] 为实现本发明的第三目的，本发明采用如下技术方案：
[0038] -种本发明所述的药物组合物或上述的药物制剂在制备治疗或预防蛛网膜下腔 出血、蛛网膜下腔出血术后的脑血管痉挛及引起的脑缺血或脑出血后遗症疾病方面的应 用。
[0039] 本发明所述的药物组合物能增加肌球蛋白轻链磷酸酶的活性扩张血管，降低内皮 细胞的张力，改善脑组织微循环，不产生和加重脑的盗血，同时可拮抗炎性因子，保护神经 抗凋亡，促进神经再生。可预防和改善多种原因引起的血管痉挛，选择性扩张痉挛的血管； 改善心、脑缺血能力改善脑灌注，增强大脑抗缺氧能力；抑制脑神经细胞受损，促进神经元 轴突生长；减轻受累脑细胞组织的炎性反应；从而能够应用在制备治疗或预防蛛网膜下腔 出血、蛛网膜下腔出血术后的脑血管痉挛及引起的脑缺血或脑出血后遗症疾病方面的药物 中，为这些疾病的治疗提供了新的药物选择。
【具体实施方式】
[0040] 以下为本发明的【具体实施方式】，所述的实施例是为了进一步描述本发明，而不是 限制本发明。
[0041] 实施例1、含有盐酸法舒地尔和核苷酸衍生物的注射液
[0042] 处方：
[0043] 盐酸法舒地尔 30g 三磷酸腺苷二钠 20g 氯化钠 16g 0.1 mol/LNaOH 溶液 Μ.: 0.1mol/L盐酸溶液 适量 注射用水_2000ml_ 制成 1000支
[0044] 制备方法：
[0045] 少量注射用水溶解处方量的盐酸法舒地尔、三磷酸腺苷二钠和氯化钠后，加入全 量的80 %的注射用水，搅拌，混匀，再加注射用水至全量，得到总混溶液；然后使用适量的 0· Imol/LNaOH溶液或0· lmol/L盐酸溶液调节所得总混溶液的pH值至5. 8?6. 2后，加入 总配制体积量的0.02 % (w/v)的活性炭，然后充分循环搅拌20分钟，打开卫生泵，经钛棒 过滤器（或中性滤纸）粗滤脱炭，至缓冲罐中循环5分钟后，回流取样检测pH值和含量待 合格后，启动卫生泵将药液经二级〇. 22 μ m除菌过滤到灌封间已灭菌的容器中，然后灌装 至1000支安瓿瓶中经终端灭菌制成1000支注射液。
[0046] 实施例2、含有盐酸法舒地尔和核苷酸衍生物的注射液
[0047] 处方：
[0048] 盐酸法舒地尔 30g 环磷腺苷 20g 氯化钠 16g 0.1 mo丨/LNaOH 溶液 Μ: 0.lmol/L盐酸溶液 适量 注射用水_2000ml_ 制成 1000支
[0049] 制备方法：同实施例1。
[0050] 实施例3、含有盐酸法舒地尔和核苷酸衍生物的注射液
[0051] 处方：
[0052] 盐酸法舒地尔 30g 二丁酰环磷腺苷钙 40g 氯化钠 16g 0.1 ηιο丨/LNaOH 溶液 迠 O.lmol/L^酸溶液 适量 注射用水 2000ml 制成 1000支
[0053] 制备方法：同实施例1。
[0054] 实施例4、含有盐酸法舒地尔和核苷酸衍生物的冻干粉针剂
[0055] 处方：
[0056] 盐酸法舒地尔 30g 二丁酰环磷腺苷钙 40g 氯化钠 16g O.lmol/LNaOH'i^f 诂 m O.lmol/L盐酸溶液 适量 注射用水 2000ml 制成 1000支
[0057] 制备方法：
[0058] 少量注射用水溶解处方量的盐酸法舒地尔、二丁酰环磷腺苷钙和氯化钠后，力口 入全量的80 %的注射用水，搅拌，混匀，再加注射用水至全量，得到总混溶液；然后使用 0· Imol/LNaOH溶液或0· lmol/L盐酸溶液调节所得总混溶液的pH值至5. 8?6. 2后，加入 总配制体积量的0.02 % (w/v)的活性炭，然后充分循环搅拌20分钟，打开卫生泵，经钛棒 过滤器（或中性滤纸）粗滤脱炭，至缓冲罐中循环5分钟后，回流取样检测pH值和含量待 合格后，启动卫生泵将药液经二级〇. 22 μ m除菌过滤到灌封间已灭菌的容器中，然后灌装 至西林瓶中经冷冻干燥制成冻干粉针剂。
[0059] 实施例5、含有盐酸法舒地尔和核苷酸衍生物的片剂
[0060] 处方：
[0061] 盐酸法舒地尔 30g 环磷腺苷钙 50g 乳糖 I50g 羟丙基纤维素 4g 注射用水 560ml 欧巴代AMB 12.5g 羧甲基淀粉钠 12g 滑石粉 8g 钛白粉_6g 制成 1000片
[0062] 制备方法：
[0063] 将30g盐酸法舒地尔和50g环磷腺苷钙溶于250ml注射用水中，配成盐酸法舒地 尔和环磷腺苷钙的水溶液。将4g羟丙基纤维素溶于150ml注射用水中，配成羟丙基纤维素 的水溶液。采用流化床沸腾制粒法，将150g乳糖和12g羧甲基淀粉钠放进流化室筛网上 于60°C的热空气中呈沸腾状态，喷入盐酸法舒地尔和环磷腺苷钙的水溶液，沸腾状态的乳 糖和羧甲基淀粉钠的混合物与主药开始聚结成粒状，经过反复喷雾、干燥，得颗粒。将得到 颗粒加入羧甲基淀粉钠4g、滑石粉8g，混匀，压片，制成素片。再将12. 5g欧巴代AMB溶于 160ml注射用水中，往该溶液中加入6g钛白粉，混匀，得到包衣混悬液。在包衣锅内用喷雾 法将包衣溶液均匀喷洒在滚动着的素片上，使均匀涂布，吹热风至干燥，如此反复操作，素 片表面形成防水薄膜层，即得盐酸法舒地尔核苷酸片剂。
[0064] 实施例6、含有盐酸法舒地尔和核苷酸衍生物的颗粒剂
[0065] 处方：
[0066] 盐酸法舒地尔 15g 三磷酸腺苷二钠 75g 二丁酰环磷腺苷钙 75g 乳糖 300g 羟丙基纤维素 8g 注射用水 400mi 羧甲基淀粉钠 _24g 制成 1000片
[0067] 制备方法：
[0068] 将15g盐酸法舒地尔、75g三磷酸腺苷二钠和75g二丁酰环磷腺苷钙溶于250ml注 射用水中，配成盐酸法舒地尔核苷酸衍生物的水溶液。采用流化床沸腾制粒法，将300g乳 糖和24g羧甲基淀粉钠放进流化室筛网上于60°C的热空气中呈沸腾状态，喷入盐酸法舒地 尔核苷酸衍生物的水溶液，沸腾状态的乳糖和羧甲基淀粉钠的混合物与主药开始聚结成粒 状，经过反复喷雾、干燥，得含有盐酸法舒地尔和核苷酸衍生物的颗粒剂。
[0069] 实施例7、含有盐酸法舒地尔和核苷酸衍生物的胶囊剂
[0070] 处方：
[0071] 盐酸法舒地尔 40g 二丁酰环磷腺苷钙 32g 乳糖 150g 羟丙基纤维素 8g 注射用水 560ml 羧甲基淀粉钠 12g 滑石粉 8g 乙醉 80m! 制成 1000粒
[0072] 制备方法：
[0073] 将40g盐酸法舒地尔和32g二丁酰环磷腺苷钙溶于250ml注射用水中，配成盐酸 法舒地尔核苷酸衍生物的水溶液。将4g羟丙基纤维素溶于150ml注射用水中，配成羟丙基 纤维素的水溶液。采用流化沸腾制粒法，将150g乳糖和12g羧甲基淀粉钠放进流化室筛网 上于60°C的热空气中呈沸腾状态，喷入盐酸法舒地尔核苷酸衍生物的水溶液，沸腾状态的 乳糖和羧甲基淀粉钠的混合物与主药开始聚结成粒状，经过反复喷雾、干燥，得颗粒。整粒 后，再将预先配好的适量的5%的羟丙基纤维素的乙醇溶液亦用流化床沸腾制粒法对进入 流化室的颗粒、滑石粉进行包衣。过筛整粒后，装三号胶囊，即得含有盐酸法舒地尔和核苷 酸衍生物的胶囊剂。
[0074] 实施例8、含有盐酸法舒地尔和核苷酸衍生物的注射液
[0075] 处方与制备方法同实施例1，所不同的是渗透压调节剂由磷酸钠替代氯化钠。
[0076] 实施例9、含有盐酸法舒地尔和核苷酸衍生物的注射液
[0077] 处方与制备方法同实施例1，所不同的是渗透压调节剂由磷酸二氢钠替代氯化钠。
[0078] 实施例10、含有盐酸法舒地尔和核苷酸衍生物的注射液
[0079] 处方与制备方法同实施例1，所不同的是渗透压调节剂由磷酸氢二钠替代氯化钠。
[0080] 实施例11、含有盐酸法舒地尔和核苷酸衍生物的注射液
[0081] 处方与制备方法同实施例1，所不同的是渗透压调节剂由磷酸二氢钾替代氯化钠。
[0082] 实施例12、含有盐酸法舒地尔和核苷酸衍生物的注射液
[0083] 处方与制备方法同实施例1，所不同的是渗透压调节剂由磷酸氢二钾替代氯化钠。
[0084] 实施例13、含有盐酸法舒地尔和核苷酸衍生物的注射液
[0085] 处方与制备方法同实施例1，所不同的是渗透压调节剂由碳酸钠替代氯化钠。
[0086] 实施例14、含有盐酸法舒地尔和核苷酸衍生物的注射液
[0087] 处方与制备方法同实施例1，所不同的是渗透压调节剂由碳酸氢钠替代氯化钠。
[0088] 实施例15、含有盐酸法舒地尔和核苷酸衍生物的注射液
[0089] 处方与制备方法同实施例1，所不同的是渗透压调节剂由乙二胺四乙酸二钠替代 氯化钠。
[0090] 实施例16、含有盐酸法舒地尔和核苷酸衍生物的注射液
[0091] 处方与制备方法同实施例1，所不同的是渗透压调节剂由氯化钾替代氯化钠。
[0092] 实施例17、含有盐酸法舒地尔和核苷酸衍生物的注射液
[0093] 处方与制备方法同实施例1，所不同的是渗透压调节剂由碳酸氢钾替代氯化钠。
[0094] 试验例1、盐酸法舒地尔与核苷酸衍生物不同配比对蛛网膜下腔出血后迟发性脑 血管痉挛的影响
[0095] 1、材料与方法
[0096] 1. 1动物、仪器及主要试剂
[0097] 雄性Sprague Dawley(SD)大鼠102只，由西安交通大学医学院动物实验中心提 供，体重（250 ±30) g。
[0098] 1. 2动物分组
[0099] 102只SD大鼠随机分至各组，其中Normal组6只：不做任何处死取材前处理；Sham 组8只：枕大池二次穿刺但不注血；SAH组8只：SAH模型建立后（见1. 3)腹腔注射生理 盐水；盐酸法舒地尔组8只：SAH模型建立后腹腔注射盐酸法舒地尔；盐酸法舒地尔和三磷 酸腺苷二钠不同配比组各8只：SAH模型建立后腹腔注射盐酸法舒地尔和三磷酸腺苷二钠 (盐酸法舒地尔和三磷酸腺苷二钠的质量比分别为：〇. l:l、〇. 5:1、0. 8:1、1:1、5:1、10:1、 20:1、25:1和25. 5:1)不同配比的药物组合物。
[0100] 1. 3枕大池二次注血模型的建立
[0101] 100mL/L水合氯醒（3mL/kg)腹腔注射麻醉，将5. 5号头皮针从环枕膜缓慢穿入枕 大池，穿入枕大池后可见脑脊液流出，约〇.2mL后。夹闭头皮针塑料管，固定针头。穿刺同 时，断尾取血约〇.8mL/kg。沿头皮针将血液缓慢注入枕大池。注血成功后，常规腹腔注射抗 生素预防感染，保持头低脚高位，48h后重复上述过程。Sham组不注血，余手术过程同SAH 模型组。
[0102] 1.4给药方式
[0103] 造模完成后将大鼠放回笼中饲养，保证每天的饲料和饮水充足，每天观察大鼠的 精神、行为、饮食等情况进行记录。于第1次注血后30min开始第1次给药。从第1天至第 7天总共给药7天，盐酸法舒地尔组每日腹腔注射1次盐酸法舒地尔5 X 104U/kg (稀释成 lmL)，盐酸法舒地尔和三磷酸腺苷二钠不同配比组每日腹腔注射1次盐酸法舒地尔和三磷 酸腺苷二钠不同配比（各配比同上）的药物组合物5X104U/kg(稀释成lmL)，SAH组每日 给予1次生理盐水（约lmL)腹腔注射，Normal及Sham组不注射任何药物及液体。所有受 试动物于第8天处死，常规麻醉开胸，经主动脉灌注Hanks平衡盐溶液（pH7. 4 ;37°C ) 300ml 后，再灌注4%多聚甲醛Hanks平衡盐溶液（pH7. 4 ;37°C ) 200ml。开颅取含有基底动脉全 长的脑干及脑组织，将标本置于4%多聚甲醛溶液行后固定24h，备组织学检查及管径的测 量。
[0104] 1.5HE 染色
[0105] 光学显微镜下观察基底动脉血管壁变化，并采用德国LEICA公司Q550CW图像分析 采集系统分析，量化分析实验动物基底动脉的形态变化以及血管周径，判断血管痉挛程度。
[0106] 2、结果
[0107] 2. 1基底动脉周径
[0108] 血管形态学测定各组数据经正态性检验及方差齐性检验，符合正态分布且方差齐 (P < 0· 05,表 1)。
[0109] 表1、基底动脉周径及D/T值的比较
[0110]
【权利要求】
1. 一种药物组合物，其特征在于，所述的药物组合物中含有盐酸法舒地尔和核苷酸衍 生物，其中核苷酸衍生物的质量为盐酸法舒地尔质量的〇. 1?25倍，优选0. 5?20倍，更 优选0.8?10倍。
2. 根据权利要求1所述的药物组合物，其特征在于，所述的核苷酸衍生物为三磷酸腺 苷二钠、环磷腺苷钙或二丁酰环磷腺苷钙中的一种或多种。
3. -种含有权利要求1或2所述的药物组合物的药物制剂，其特征在于，所述的药物制 剂由所述的药物组合物与药学上可接受的辅料制成药学上可接受的药物制剂，优选片剂、 胶囊剂、颗粒剂、口服溶液、注射液或冻干粉针剂，更优选注射液或冻干粉针剂。
4. 根据权利要求3所述的药物制剂，其特征在于，所述的药物制剂为注射液或冻干粉 针剂时，所述的药学上可接受的辅料为渗透压调节剂和pH调节剂。
5. 根据权利要求4所述的药物制剂，其特征在于，所述的渗透压调节剂的用量为调节 溶液渗透压至260?330m0sm/kgH 20，优选280?310m0sm/kgH20 ;所述的pH调节剂的用量 为调节总混溶液的pH值至6. 0±0. 5,优选6. 0±0. 2。
6. 根据权利要求4或5所述的药物制剂，其特征在于，所述的渗透压调节剂为氯化钠、 磷酸钠、磷酸二氢钠、磷酸氢二钠、磷酸二氢钾、磷酸氢二钾、碳酸钠、碳酸氢钠、乙二胺四乙 酸二钠、氯化钾或碳酸氢钾中的一种或几种，优选氯化钠； 所述的pH调节剂为lmol/L的氢氧化钠溶液和/或0· lmol/L的盐酸溶液。
7. -种权利要求3?6任意一项所述的药物制剂的制备方法，其特征在于，所述的制 备方法为：按质量配比将盐酸法舒地尔和核苷酸衍生物混合均匀，得到所述的药物组合物； 向所得的药物组合物中加入药学上可接受的辅料按照制备药学上可接受的剂型的常规方 法制备成药学上可接受的剂型，优选片剂、胶囊剂、颗粒剂、口服溶液、注射液或冻干粉针 齐U，更优选注射液或冻干粉针剂。
8. 根据权利要求7所述的制备方法，其特征在于，当所述的药物组合物制备成注射液 或冻干粉针剂时，所述的药学上可接受的辅料为渗透压调节剂和pH调节剂。
9. 根据权利要求8所述的制备方法，其特征在于，当所述的药物组合物制备成注射液 或冻干粉针剂时，其制备方法为： 按质量配比称取盐酸法舒地尔与核苷酸衍生物，加入渗透压调节剂，混匀，再加入适量 注射用水溶解盐酸法舒地尔、核苷酸衍生物与渗透压调节剂的混合物，调节溶液渗透压为 260?330m0sm/kgH20,加注射用水至全量，得到总混溶液，用pH调节剂调节所得总混溶液 的pH值至6. 0±0. 5之间，加入活性炭，搅拌，粗滤脱炭，至缓冲罐中循环后，回流取样检测 pH值和含量；待合格后，将药液除菌过滤，然后灌装至安瓿瓶中经终端灭菌制成注射液；或 灌装至西林瓶中经冷冻干燥制成冻干粉针剂。
10. -种权利要求1或2所述的药物组合物或权利要求3?6任意一项所述的药物制 剂在制备治疗或预防蛛网膜下腔出血、蛛网膜下腔出血术后的脑血管痉挛及引起的脑缺血 或脑出血后遗症疾病方面的应用。
【文档编号】A61K31/7076GK104138388SQ201410387841
【公开日】2014年11月12日 申请日期:2014年8月7日 优先权日:2014年8月7日
【发明者】钟正明, 潘正斐 申请人:海南合瑞制药股份有限公司