本发明属于兽药领域，具体涉及一种采用非极性载体制备氟苯尼考亚微乳的方法。
背景技术：
氟苯尼考(Florfenicol)，又名氟甲砜霉素，系甲砜霉素的单氟衍生物，是二十世纪八十年代，美国先灵-保雅公司研发了新型动物专用的广谱抗生素第三代氯霉素类抗生素。从药效上看，它表现出了比氯霉素及甲砜霉素更高的抗菌活性，能抑制或杀死耐氯霉素及甲砜霉素的细菌。与氯霉素相比，没有潜在的致再生障碍性贫血的缺点，更没有致畸形、致癌和致突变的缺陷。目前，氟苯尼考制剂在全球多个国家都有应用。但是氟苯尼考存在水溶性差的缺陷，目前通过固体分散、包和技术等制剂手段虽然使氟苯尼考的水溶性得到了改善，但是仍然不能满足大型养殖场加药器给药的问题。
目前氟苯尼考溶液大都是采用聚乙二醇类、醇类、二甲基甲酰胺、二甲基亚砜等极性溶剂作为氟苯尼考的溶液载体。公告号为CN101152169A，名称为《一种氟苯尼考微乳的制备方法》公开了一种氟苯尼考微乳的制备方法，包括了丙二醇、DMF等极性溶剂，不能解决与水混合后药物析出的问题。公告号CN103800288A，名称为《一种氟苯尼考纳米乳及其制备方法》，其处方中同样含有乙醇等极性溶剂，解决不了溶水后药物析出的问题，其过程中需要昂贵的高压均质机，生产工艺复杂且效率低，不适合兽药产品的大生产。公告号为CN102488648A、名称为《氟苯尼考自微乳的配置方法》，处方中含有OP-10、聚乙二醇400，其中表面活性剂OP-10为烷基酚聚氧乙烯醚，是一种化工原料，非口服药用辅料，其对环境危害性大，正在被印染行业禁用和代用；聚乙二醇400为极性溶剂，同样解决不了产品溶于水后氟苯尼考析出的问题。公告号为CN104434797A，名称为《一种氟苯尼考固体自乳化制剂》，其处方中同样选用了OP-10这种环境危害大的非口服药用辅料，处方中也含有极性溶剂聚乙二醇200和transcutol，其工艺复杂，需要采用冷冻干燥和喷雾干燥这种大型的昂贵设备，且其选用不具有吸附能力的蔗糖和甘露醇为固体吸附材料，其处方可行性不大。
采用极性溶剂作为氟苯尼考载体，只能短暂解决氟苯尼考的水溶性问题。当这些以极性载体做成的氟苯尼考溶液、氟苯尼考乳剂、氟苯尼考纳米乳、氟苯尼考自微乳产品在临床饮水给药过程中，氟苯尼考都会从稀释的混合药液中以针状晶体析出，从而堵塞饮水线，给养殖户带来很大的困扰。
技术实现要素：
针对上述现有技术的缺陷与不足，本发明的目的在于提供一种采用非极性载体制备氟苯尼考亚微乳的方法，以方便兽医临床饮水给药，尤其是加药器给药，并且饮水给药药物不析出。
为实现上述目的，本发明采取的技术方案如下：
一种采用非极性载体制备氟苯尼考亚微乳的方法：
S1、按质量百分比称取：氟苯尼考5~10%、表面活性剂20~30%、油相5~15%和余量的水；所述表面活性剂为聚氧乙烯40氢化蓖麻油RH-40、聚氧乙烯30氢化蓖麻油RH-30中的一种或其组合；所述油相为丙二酸二乙酯、二乙酰单甘油酯、乙酰枸橼酸三丁酯中的一种或其组合；
S2、向氟苯尼考中加入油相，搅拌，待氟苯尼考充分溶解后，加入表面活性剂，继续搅拌至均匀；
S3、向搅拌均匀后的药液中加水，加水的同时不断搅拌，直至形成均匀透明的体系，即得本发明的氟苯尼考亚微乳。
较好地，该亚微乳的粒径在100~1000nm之间。
用途：本发明制备的氟苯尼考亚微乳用于畜禽敏感菌引起的细菌性疾病，如沙门氏菌病、巴氏杆菌病、大肠杆菌病等。
与现有技术相比，本发明具有以下优点：
（1）具有粘度低、稳定性好、分散性强、吸收迅速、靶向释药等特点，并可提高药物的生物利用度、延长药物在体内的半衰期、降低毒副作用；
（2）聚氧乙烯40氢化蓖麻油RH-40、聚氧乙烯30氢化蓖麻油RH-30毒性相对较小，不易受电解质、无机盐类及酸碱的影响；
（3）采用非极性载体，与水混合后具有药物不析出的独特优点，解决了氟苯尼考不能饮水给药，尤其是大型养殖集团的加药器给药的难题；
（4）制备方法简单、能耗低、毒性小、安全性高、不需特殊设备可用于大批量生产，从而用于临床治疗畜禽疾病。
具体实施方式
实施例1
配制药物浓度为5wt%的氟苯尼考亚微乳，处方为：RH40 20g、丙二酸二乙酯 5g、氟苯尼考 5g，余量为蒸馏水。
制备方法：
（1）称取处方量的丙二酸二乙酯和氟苯尼考，置恒温磁力搅拌器上，在50℃、200rmp/min条件下充分搅拌，待氟苯尼考充分溶解后，加入RH40，搅拌均匀；
（2）搅拌均匀后的药液缓慢滴加蒸馏水，滴加的同时不断搅拌，直至形成均匀透明的体系，即得本发明的药物浓度为5wt%的氟苯尼考亚微乳。
实施例2
配制药物浓度为7wt%的氟苯尼考亚微乳，处方为：RH30 25g、乙酰枸橼酸三丁酯 10g、氟苯尼考 7g，余量为蒸馏水。
制备方法：
（1）称取处方量的乙酰枸橼酸三丁酯和氟苯尼考，置恒温磁力搅拌器上，在60℃、300rmp/min条件下充分搅拌，待氟苯尼考充分溶解后，加入RH30，搅拌均匀；
（2）搅拌均匀后的药液缓慢滴加蒸馏水，滴加的同时不断搅拌，直至形成均匀透明的体系，即得本发明的药物浓度为7wt%的氟苯尼考亚微乳。
实施例3
配制药物浓度为10wt%的氟苯尼考亚微乳，处方为：RH40 30g、二乙酰单甘油酯 15g、氟苯尼考 10g，余量为蒸馏水。
制备方法：
（1）称取处方量的丙二酸二乙酯和氟苯尼考，置恒温磁力搅拌器上，在70℃、400rmp/min条件下充分搅拌，待氟苯尼考充分溶解后，加入RH30，搅拌均匀；
（2）搅拌均匀后的药液缓慢滴加蒸馏水，滴加的同时不断搅拌，直至形成均匀透明的体系，即得本发明的药物浓度为10wt%的氟苯尼考亚微乳。
试验例1--稳定性试验
本发明的氟苯尼考亚微乳进行高速离心和在-4 ℃、室温、60 ℃条件下进行留样观察看其稳定性，是否有分层和结晶析出。
1、高速离心试验对亚微乳稳定性的影响
分别取实施例1~3制备的氟苯尼考亚微乳10mL于离心管中，密封管口，置高速离心机中，以12000r/min的转速进行离心，经20 min离心纳米乳液仍保持澄清透明，未见氟苯尼考析出及油水分层现象。
2、留样观察实验
分别取实施例1~3制备的氟苯尼考亚微乳，分装于几个玻璃瓶中，每个实施例3瓶，每瓶内装10 mL，密封之后同一实施例的三瓶分别置于冰箱-4℃、室温25℃、60℃条件下留样考察60d，每隔5d取样观察。结果表明，实施例1~3制备的亚微乳在三种温度条件下均保持澄清透明的外观，未破乳、分层和结晶析出。透射电子显微镜下观察，氟苯尼考亚微乳的液滴呈球形，其粒径大小为100~1000nm，且分布均匀，分散性良好。
本发明的氟苯尼考亚微乳呈淡黄色澄清透明的液体，在低温-4℃下长期放置没有结晶析出，在60℃高温条件下也无混浊现象，可见是一种稳定的药物剂型。
试验例2--本发明药物的临床药效试验结果
将雏鸡引入后，在干净卫生，消毒过的环境中饲养一周去应激，确保健康状况良好。将鸡随机分7组，每组30只，雌雄各半，其饲养密度、温度、湿度按该品种鸡的要求提供，试验期间除受试药物外不再饲喂其它任何药物。实验组及感染不用药组鸡的感染方法采用将复活的大肠杆菌菌液，菌浓度1.0×108个/ml，2ml/只，胸部肌肉注射方式进行感染，攻毒一次。不感染不用药组采用同样方法注射等量的生理盐水。试验分组情况及用药情况见表1。
试验结果：感染不用药组（Ⅶ组）于攻毒感染后第2天开始出现临床症状，精神萎靡，两翅下垂，离群独卧，饮水量和采食量明显下降，在第4天症状最严重，呼吸急促，并开始有鸡死亡。从整个试验过程比较看，以Ⅶ组最严重(死亡12只)，对死亡鸡进行剖检，其心脏、肝脏外包一层浑浊的纤维素膜，气囊浑浊，是典型的鸡大肠杆菌感染特征。各组的具体情况如表2。
本次试验中，从所得结果来看，同等用药量和实验条件下，无论是从动物增重率还是存活率看，氟苯尼考亚微乳都要比氟苯尼考粉和氟苯尼考溶液疗效更优越。
上述实施例为本发明优选的实施方式，但本发明的实施方式并不受上述实施例的限制，其他的任何未背离本发明所作的改变均应为等效的置换方式，都包含在本发明的保护范围之内。