包含顺式环(l-亮氨酸-l-脯氨酸)或顺式环(l-苯丙氨酸-l-脯氨酸)的抗菌及抗病毒用组 ...的制作方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及顺式环（L-亮氨酸-L-脯氨酸）的新用途。进一步说明即是，本发明 是将顺式环（L-亮氨酸-L-脯氨酸）用作有效成分的抗链球菌或抗链球菌组合物的技术。
[0002] 本发明涉及顺式环（L-亮氨酸-L-脯氨酸）及顺式环（L-苯丙氨酸-L-脯氨酸）新 用途的技术。进一步说明即是，本发明是将顺式环（L-亮氨酸-L-脯氨酸）或顺式环（L-苯 丙氨酸-L-脯氨酸）用作有效成分的抗病毒组合物的技术。
【背景技术】
[0003] 通常而言，乳酸发酵功效主要依赖于有机酸的积累和基质氧化。[1' 2'3]乙醛、二乙酰 化合物、过氧化氢及二氧化碳等代谢产物，能有效控制细菌、病菌及腐败菌的生长。 [1'2'3]另 据研宄报告，非蛋白质基质还能有效遏制革兰阳性菌、发霉菌及革兰阴性菌的滋长。 [4]
[0004] 最初，低分子量的乳酸杆菌（Reutericyclin)抗生素是从发酵面包所含有的乳酸 菌LTH2584 (Lactobacillus reuteri LTH2584)中提炼而成的。乳酸杆菌对革兰阳性菌、革 兰阴性菌、酵母菌、霉菌等微生物比较敏感。[5]长期以来，乳酸杆菌或乳酸菌（Lactic acid bacteria:LAB)被用作人类及动物的食物，正如酵母一样，在食品发酵及储藏时起到了极为 重要的作用。 [1，2,3]
[0005] 通常而言，LAB会分泌出细胞外的拮抗剂化合物，以对抗诸多的微生物，并通 过内源性代谢产物变化细胞外环境。 [6]在通过LAB排泄出来的化合物中，各种抗菌代 谢物可分类成1000以下低分子量的化合物和被评估为拥有1000以下分子量的细菌素 (bacteriocins) [7]。至今为止，关于LAB抗菌活性作用的研宄课题主要集中在对细菌素的 研宄。从LAB中生成的细菌素，在活性、作用方式、分子量、遗传源及生化特性方面，属于具 有光谱差异的抗菌肽和蛋白质的异类（heterogeneous)组之一，[8, 9]而此类肽和蛋白质 在成熟肽及前导肽（Pr印印tide)的基础上分为三种类型。[1°'n' 12'13]片球菌素是滋生于戊 糖片球菌（Pediococcus pentecostals)的细菌素之一种，[14]大部分与此相同的化合物中 均含有阳离子高分子和小基质。[ 15]此外，这种化合物还被用于杀灭芽孢杆菌（Bacillus subtilis)、李斯特菌（Listeria species)、金黄色葡萄球菌菌株（Staphylococcus aureus)等革兰氏阳性球菌和病原性球菌。[16' 17'18]此外，有些细菌素还可以杀灭大肠菌 (Escherichia coli)和沙门氏菌一样的食品病原性球菌。[19]至今为止，主要对含脯氨酸 环二肽的 2, 5_ 环缩二胺酸（Proline-containing 2, 5-diketopiperazine)进行了集中研 宄和调查。[6'2°' 22'23'24'25'26' 27]-直以来，这种环肽或环二肽被认为在生物学中起到基质的作 用，[22'23' 24'25'26]尤其这样的环二肽在潜在的治疗及预防功效方面，具有对抗细菌、霉菌、病 毒及癌细胞的抗菌活性作用。 [6'23'26'27'28]此外，这种抗菌活性环二肽是在培养酵母、地衣类 植物及霉时得以确认的。 [2°'29]另据有关资料，从链霉菌中分离出环二肽a-亮氨酰-1-丙 烷基）和环二肽a-苯丙氨酰基-1-脯氨酰基）。 [2°'24'25'29]在自然界的任何地方都能找到 抗菌活性作用肽，并对有助于人类生存的生物靶标具有极其重要的影响。 [22'23'25]
[0006] 因此，迫切需要研发出具有对于多种细菌，尤其是对于链球菌（Streptococcus) 属或志贺氏菌（Shigella)属菌具有卓越抗菌活性作用的新型物质。
[0007] 本说明书参考并引用了许多论文及专利文献的内容。此外，本说明书中引用的论 文及专利文献内容，其目的在于更详细说明本发明所属的技术领域及其内容。
【发明内容】
本发明的技术课题
[0008] 本发明旨在研发出各种细菌，尤其是对于链球菌（Streptococcus)属或志贺氏菌 (Shigella)属具有卓越抗菌活性作用的新型物质。据本发明的研宄结果，二肽中的顺式环 (L-亮氨酸-L-脯氨酸）（cis-cyclo (L-Leu-L-Pro))对链球菌属或志贺氏菌属具有特殊的 抗菌活性作用。
[0009] 本发明的目的在于，提供一种将顺式环（L-亮氨酸-L-脯氨酸）用作有效成分，并 对链球菌属或志贺氏菌属具有抗菌活性作用的组合物。
[0010] 本发明的另一目的在于，提供一种将顺式环（L-亮氨酸-L-脯氨酸）用作有效成 分，并对链球菌属或志贺氏菌属具有抗菌活性作用的农药组合物。
[0011] 此外，本发明还旨在提供一种对链球菌（Streptococcus)属或志贺氏菌 (Sh i ge 11 a)属具有抗菌作用的抗菌剂的制造方法。
[0012] 下面将通过对本发明的详细说明、权利要求及图纸，进一步说明有关本发明的其 它目的及优点。 技术课题的解决方案
[0013] 本发明将提供一种将顺式环（L-亮氨酸-L-脯氨酸）（cis-cyclo (L-Leu-L-Pro)) 用作有效成分，并对链球菌属或志贺氏菌属具有特殊抗菌活性作用的抗菌组合物。
[0014] 本发明旨在研发出各种细菌，尤其是对于链球菌（Streptococcus)属或志贺氏菌 (Shigella)属具有卓越抗菌活性作用的新型物质。据本发明的研宄结果，二肽中的顺式环 (L-亮氨酸-L-脯氨酸）（cis-cyclo (L-Leu-L-Pro))对链球菌属或志贺氏菌属具有特殊的 抗菌活性作用。
[0015] 本发明对链球菌（Streptococcus)属或志贺氏菌（Shigella)属具有卓越的抗菌 活性作用。
[0016]本说明书中采用的"抗菌"一词代表遏制细菌的生长、增殖以及杀灭作用，并且与 本说明中的"抗细菌"是同一个意思。
[0017] 本发明中被用作有效成分的顺式环（L-亮氨酸-L-脯氨酸）包含自然界中的顺式 环（L-亮氨酸-L-脯氨酸）。此外，有关顺式环（L-亮氨酸-L-脯氨酸）的化学结构式如本 发明附图21所示。
[0018] 如本发明实施例所示，在本发明中被用作有效成分的顺式环（L-亮氨酸-L-脯氨 酸）是从明串珠菌属（Leuconostoc)菌中分离出来的顺式环（L-亮氨酸-L-脯氨酸）[0019] 本发明中被用作有效成分的顺式环（L-亮氨酸-L-脯氨酸）在从明串珠菌属中 分离时的明串珠菌属中，包含在由肠膜状明串珠菌（Leuconostoc mesenteroides)、乳明串 珠菌（Leuconostoc Iactis)、冷明串珠菌（Leuconostoc gelidum)组成的菌群中选定的 一个以上的明串珠菌属。此外，从明串珠菌属分离出在本发明中被用作有效成分的顺式环 a-亮氨酸-L-脯氨酸）时，明串珠菌属是肠膜状明串珠菌。
[0020] 本发明中的顺式环（L-亮氨酸-L-脯氨酸）对链球菌具有抗菌活性作用
[0021 ] 根据本发明实施例，本发明中的链球菌属是从肺炎链球菌（Streptococcus pneumoniae)、无乳链球菌(Streptococcus agalactiae)、牛链球菌(Streptococcus bovis)、口腔链球菌（Streptococcus oralis)、化胺性链球菌（Streptococcus pyogenes)、 草绿色链球菌（Streptococcus viridans)组成的菌群中选定一个以上的链球菌。更为正 确的是从肺炎链球菌、化脓性链球菌、无乳链球菌组成的菌群中选定一个以上的链球菌属， 最为正确的是牛链球菌。
[0022] 此外，本发明对链球菌具有特殊的抗菌活性作用
[0023] 另据本发明实施例，本发明中的链球菌属是从索氏志贺菌（Shigella sonnei)、 鲍氏志贺菌（Shigella boydii)、痢疾志贺菌（Shigella dysenteriae)、福氏志贺氏菌 (Shigella flexneri)组成的菌群中选定一个以上的链球菌。更为正确的是从痢疾志贺菌、 索氏志贺菌组成的菌群中选定一个以上的链球菌，最为正确的是痢疾志贺菌。
[0024] 根据本发明的另一种样式，本发明将顺式环（L-亮氨酸-L脯氨酸） (cis-cyclo (L-Leu-L-Pro))用作有效成分，并提供对链球菌（Streptococcus)或志贺氏菌 (Shigella)具有特殊抗菌活性作用的农药组合物。
[0025] 此外，本发明提供的组合物是一种含有上述顺式环（L-亮氨酸-L脯氨酸）农药有 效成分的农药组合物。
[0026] 本发明提供的农药组合物是从顺式环（L-亮氨酸-L脯氨酸）的农药有效成分以 及（b)在农药学上认可的溶剂、载体、乳化剂及分散剂组成的群中选定一个以上成分或添 加物的农药组合物。本说明中的术语"农药有效成分"是指对上述顺式环（L-亮氨酸-L脯 氨酸）链球菌（Streptococcus)或志贺氏菌（Shigella)的抗菌功效或达到活性的充足量。
[0027] 在将本发明中的组合物制成农药组合物时，本发明的农药组合物中将含有在农药 学上认可的溶剂。此外，上述溶剂中含有水、芳香族溶剂（例如，芳烃油溶剂（Solvesso))产 品、二甲苯、石蜡（例如，矿物油分馏物质质）、酒精（例如，甲醇、乙醇、戊醇，甲苯九郡）、 酮（例如，环己酮、Y-丁内酯）、吡咯烷酮（NMP、N0P)、醋酸纤维（乙二醇醋酸纤维）、乙二 醇、脂肪酸二甲氨基、脂肪酸及脂肪酸酯（原则上讲，还可以利用溶剂混合物）。
[0028] 此外，在将本发明中的组合物制成农药组合物时，本发明的农药组合物中含有在 农药学上认可的载体。例如，上述载体中包括粉碎的天然矿物质（例如，高岭土、粘土、滑 石、白垩）及粉碎的合成矿物（例如，高分散的二氧化硅、硅酸盐）。
[0029] 此外，在将本发明中的组合物制成农药组合物时，本发明的农药组合物含农药学 上认可的乳化剂。例如，上述乳化剂包括非离子性及阴离子性乳化剂（例如，聚氧乙烯脂肪 酒精醚、烷基矿酸盐、芳基矿酸盐）。
[0030] 此外，在将本发明中的组合物制成农药组合物时，本发明的农药组合物中含有在 农药学上认可的分散剂。例如，上述分散剂包括Lignin sulfite废液、甲基纤维素。
[0031] 本发明是含有包含于抗菌用组合物中的顺式环（L-亮氨酸-L脯氨酸） (cis-cyclo (L-Leu-L-Pro))有效成分的农药组合物。为了避免在本说明中过多重复说明， 从而省略了关于这两种成分的相同内容。
[0032] 根据本发明的另一实施例，利用本发明组合物，制造对链球菌（Streptococcus) 属或志贺氏菌（Shigella)属具有抗菌作用的抗菌剂的方法分为如下两个阶段：即，（a)培 养乳酸菌后制造乳酸菌培养液的阶段；(b)将上述培养液中的顺式环（L-亮氨酸-L脯氨 酸）（cis-cyclo (L-Leu-L-Pro))浓缩成适合抗菌浓度的阶段。
[0033] 在本发明的（a)阶段，将明串珠菌属用作乳酸菌时，上述明串珠菌属是在肠膜状 明串珠菌（Leuconostoc mesenteroides)、乳明串珠菌（Leuconostoc Iactis)、冷明串珠菌 (Leuconostoc gelidum)、类肠系膜明串珠菌（Leuconostoc paramesenteroides)、梓檬明 串珠菌（Leuconostoc citreum)、假肠膜明串珠菌（Leuconostoc pseudomese