用于免疫疗法的组合物和方法
【专利说明】用于免疫疗法的组合物和方法
[0001] 相关申请的夺叉引用
[0002] 本申请是非临时申请，要求于2012年10月2日提交的美国临时申请序列号 61/709, 072的优先权，其内容并入本申请以作参考。
[0003] 序列表
[0004] 本申请包含于2013年9月30日创建的序列表；文件呈ASCII格式，被命名为 3314040AW0_Sequence Listing_ST25. txt且大小为27. 5kb。序列表文件在此以其整体并 入本申请以作参考。
【背景技术】
[0005] 前列腺癌是在美国男性中最频见的癌症并且是每年近31，000例死亡的成因。当 早期被确诊时，癌症能够通过手术或放疗被有效地治疗。术后的残留疾病需要放疗和/或 激素疗法，其可以防止肿瘤进展和转移。目前，没有对于激素难治性的转移性前列腺癌的有 效治疗。免疫疗法是原则上提供用于这些癌症的治疗的靶向疗法。
[0006] 利用基因修饰自体T细胞的靶向T细胞疗法开始表现出在黑色素瘤和惰性B细胞 恶性肿瘤中的治疗效力的证据。当前的T细胞工程策略通过转导T细胞受体（TCR)或嵌 合抗原受体（CAR)使患者T细胞重定位于肿瘤抗原。但是，该引起有效免疫反应的新发现 的能力，给出了将免疫攻击局限于肿瘤且避免针对可表达目标抗原的正常组织的反应的需 求。因此，真正的（truly)肿瘤限制性抗原的有限可及性往往使达到高度特异性靶向受阻。 在妨碍达到高度特异性靶向的限制中是真正的肿瘤限制性抗原的有限可及性。因此，迫切 需要治疗瘤形成（neoplasia)的新方法。
【发明内容】
[0007] 本发明大体提供免疫应答细胞，上述免疫应答细胞包括T细胞和自然杀伤（NK)细 胞，其表达具有免疫细胞激活活性的抗原结合受体（例如，CAR或TCR)和嵌合共刺激受体 (CCR)，还提供使用其用于治疗瘤形成、传染病和其他病理学的方法。
[0008] 在一方面，本发明提供分离的免疫应答细胞，其具有以低亲和力与第一抗原结合 (其中该结合激活免疫应答细胞）的抗原识别受体以及与第二抗原结合并刺激免疫应答细 胞的嵌合共刺激受体（CCR)。
[0009] 在另一方面，本发明提供诱导受试者中的肿瘤细胞死亡的方法，该方法包括施用 有效量的免疫应答细胞，所述免疫应答细胞包括以低亲和力与第一抗原结合（其中该结合 激活免疫应答细胞）的抗原识别受体以及与第二抗原结合并刺激免疫应答细胞的嵌合共 刺激受体（CCR)，从而在受试者中诱导肿瘤细胞死亡。
[0010] 在又一方面，本发明提供治疗或预防受试者中的瘤形成的方法，该方法包括施用 有效量的免疫应答细胞，所述免疫应答细胞包括以低亲和力与第一抗原结合（其中该结合 激活免疫应答细胞）的抗原识别受体以及与第二抗原结合并刺激免疫应答细胞的嵌合共 刺激受体（CCR)，从而治疗或预防受试者中的瘤形成。 toon] 在又一方面，本发明提供治疗有需要的受试者中的前列腺癌的方法，该方法包括 向受试者施用治疗有效量的T细胞，该T细胞包括以低亲和力与PSCA或CD 19结合（其中 该结合激活免疫应答细胞）的抗原识别受体以及与PSM结合并刺激免疫应答细胞的嵌合 共刺激受体（CCR)，从而治疗受试者中的前列腺癌。
[0012] 在又一方面，本发明提供制备抗原特异性的免疫应答细胞的方法，该方法包括向 免疫应答细胞引入编码嵌合共刺激受体（CCR)的核酸序列，其中该嵌合共刺激受体具有与 刺激免疫应答细胞的细胞内信号转导域（intracellular signaling domain)结合的抗原 结合域，其中该免疫应答细胞具有以低亲和力与第一抗原结合（其中该结合激活免疫应答 细胞）的抗原识别受体。
[0013] 在相关方面，本发明提供药物组合物，其包括在药学可接受赋形剂中的有效量的 本发明免疫应答细胞（例如，用于治疗瘤形成的药物组合物中的肿瘤抗原特异性T细胞）。
[0014] 在另一方面，本发明提供用于治疗瘤形成、病原体感染、自身免疫性疾病或同种异 体移植的试剂盒，该试剂盒包含这样的免疫应答细胞，其中免疫应答细胞具有与第一抗原 结合并激活免疫应答细胞的抗原识别受体，以及与第二病毒抗原结合并刺激免疫应答细胞 的嵌合共刺激受体（CCR)。该试剂盒还可包括使用免疫应答细胞来治疗具有瘤形成、病原体 感染、自身免疫性疾病或同种异体移植的受试者的书面说明。
[0015] 在本文所述方面的任一者的多个实施方式中，该免疫应答细胞被选择为具有亲和 力低的抗原识别受体。这可涉及到免疫应答细胞被选择为具有以低亲和力与第一抗原结合 的抗原识别受体。在本文所述方面的任一者的多个实施方式中，该抗原识别受体被选择为 具有低亲和力用于在细胞中表达。这可涉及到引入编码嵌合抗原受体的第二核酸序列，其 中该嵌合抗原受体包括与激活免疫应答细胞的第二细胞内信号转导域结合的第二抗原结 合域。在本文所述方面的任一者的多个实施方式中，抗原识别受体是T细胞受体（TCR)或 嵌合抗原受体（CAR)。在多个实施方式中，所述抗原识别受体的细胞内信号转导域是CD-3 链信号转导域。在多个实施方式中，该嵌合共刺激受体（CCR)的细胞内信号转导域是CD97、 CDlla-CD18、CD2、ICOS、CD27、CD154、CD5、0X40、4-1BB 或者 CD28 信号转导域。
[0016] 在本文所述方面的任一者的多个实施方式中，抗原识别受体是外源或内源的。在 本文所述方面的任一者的多个实施方式中，抗原识别受体经重组表达。在多个实施方式中， 抗原识别受体从载体中表达。在多个实施方式中，嵌合共刺激受体（CCR)从载体中表达。在 特定实施方式中，免疫应答细胞表达重组的或内源性抗原受体，19zl或Pzl。
[0017] 在本文所述方面的任一者的多个实施方式中，免疫应答细胞是T细胞、自然杀伤 (NK)细胞、细胞毒性T淋巴细胞、调节性T细胞、人类胚胎干细胞、或从其中可分化出淋巴样 细胞的多能干细胞。在本文所述方面的任一者的多个实施方式中，权利要求1-9中任一项 的免疫应答细胞，其中所述的免疫应答细胞是自体的。
[0018] 在本文所述方面的任一者的多个实施方式中，抗原是肿瘤或病原体抗原。在本文 所述方面的任一者的多个实施方式中，一个或多个抗原结合域是肿瘤抗原结合域。在本 文所述方面的任一者的多个实施方式中，抗原或肿瘤抗原选自CAIX、CEA、CD5、CD7、CD10、 CD19、CD20、CD22、CD30、CD33、CD34、CD38、CD41、CD44、CD49f、CD56、CD74、CD133、CD138、巨 细胞病毒化1^)感染细胞抗原46?-236?-404?0411、6吐-82,3,4、？8?、胎儿型乙酰胆碱受 体、叶酸受体_a、⑶2、⑶3、HER-2、hTERT、IL13R-a2、X-轻链、KDR、LeY、Ll细胞黏附分子、 MAGE-A1、MUC1、间皮素、NKG2D 配体、NY-ES0-1、癌胚抗原（h5T4)、PSCA、PSMA、R0Rl、TAG-72、 VEGF-R2和WT-I。在多个实施方式中，第一和第二抗原选自⑶133、巨细胞病毒（CMV)感染 细胞抗原、erbB2、KDR、间皮素、NKG2D 配体、NY-ES0-1、癌胚抗原（h5T4)、PSCA、PSMA、CD19、 VEGF-R2和WT-1。在特定实施方式中，第一和第二抗原选自HER2、MUCl、CD44、CD49f、EpCAM、 CEA、CD133、巨细胞病毒（CMV)感染细胞抗原、EGP-2、EGP-40、EpCAM、erb-B2,3,4、FBP、KDR、 间皮素、NKG2D 配体、NY-ES0-1、癌胚抗原（h5T4)、PSCA、PSMA、VEGF-R2 或 WT-1。在特定的 实施方式中，第一和第二抗原选自CDlO和CD19。在其它的实施方式中，第一和第二抗原选 自⑶56和⑶138。在某些实施方式中，第一和第二抗原选自间皮素、叶酸受体-a、⑶44和 CD133。
[0019] 在本文所述方面的任一者的多个实施方式中，瘤形成选自前列腺癌、乳腺癌、B细 胞白血病、多发性骨髓瘤以及卵巢癌。在本文所述方面的任一者的多个实施方式中，该方法 降低受试者中的肿瘤细胞数目，减小受试者中的肿瘤尺寸，和/或根除受试者中的肿瘤。