获取自油棕基材料的新型生物活性化合物的制作方法
【技术领域】
[0001] 本发明整体涉及生物活性化合物，更具体地涉及获取自植物和植物基材料的酚类 化合物，所述化合物表现出高度显著的生物活性性质。
【背景技术】
[0002] 预期对生物活性化合物的需求会随着世界人口的增加而急剧增加，因此对各种工 业和医药用途的需求也会增加，例如在制备用于医疗药物，例如特别是针对流行病爆发情 况的抗病毒药物的用途中。
[0003] 目前，绝大多数生物活性化合物通常以相当低的浓度存在。此外，提取工艺或方法 的成本昂贵。另外，生物活性化合物的稀缺可获得性已妨碍了药物的生产潜力，并从而加剧 了对其它丰富来源的需求。
[0004] 因此，期望探宄生物活性化合物的其它低成本的丰富来源以有助于实现高涨的全 球需求。
[0005] 本申请着重于实现来自棕榈油研磨的植物液和油棕基材料以及棕榈油研磨废液 (POME)作为生物活性化合物来源的价值和潜力。
[0006] 本发明公开了作为生物活性化合物丰富来源的包含棕榈油研磨植物液的油棕基 材料。
【发明内容】
[0007] 在一个方面，提供一种组合物，其包含获取自油棕基材料的生物活性化合物，其中 所述酚类化合物的分子量为482。
[0008] 在另一方面，提供了获取自油棕基材料的化合物的用途，所述化合物用作制备可 用于提供生物活性性质的组合物的活性成分，由此所述化合物的分子量为482。
【附图说明】
[0009] 一些附图中包含颜色标示或实体以说明用于本发明的目的的实验的结果。
[0010] 图1示出关于根据要求保护的本发明的优选实施方式的化合物的基于DPPH清除 测定所获得的结果；以及
[0011] 图2示出关于根据要求保护的本发明的优选实施方式的化合物的基于逆转录酶 测定所获得的结果。
【具体实施方式】
[0012] 本发明所公开的描述和实施例涉及一种生物活性化合物、组合物及其方法，由此 从油棕基材料提取分子量为482的生物活性化合物。
[0013] 可用于本发明中的棕榈植物液的生物活性提取物为根据各种常规的合适方法和 工艺获取自棕榈油研磨过程的植物液的那些提取物。
[0014] 尽管出于标准化的目的，提取物可包含包括酚类化合物、果酸、果糖和甘油、淀粉、 纤维素和半纤维素在内的多种化合物，但所用提取物的浓度是根据酚含量（即没食子酸当 量）来进行测量。
[0015] 本发明的实施方式涉及一种组合物，其包含获取自油棕的任意部分、油棕基材料 (包括棕榈油加工的植物液和棕榈油研磨废液）的生物活性化合物和其它主要酚类化合 物。本发明的组合物可基于可用的或标准的方法来制备。预期所述制备是安全的并且所述 组合物适用于但不限于包括饮食补充剂、营养制品和促进健康目的在内的日常消耗。还应 注意的是，基于本发明的优选实施方式获得的生物活性化合物及其衍生物被认为表现出抗 病毒和抗微生物效果。
[0016] 对本领域的技术人员而言显而易见的是，获取自油棕的任意部分或油棕基材料 (包括来自棕榈油研磨的植物液和棕榈油研磨废液）的粗提取物除了包含新型主要标志生 物活性化合物之外还包含多种其它酚类化合物。
[0017] 已经发现获取自油棕基材料（对于本公开而言更具体地为获取自来自棕榈油研 磨的植物液和棕榈油研磨废液）的提取物在经受根据本发明的方法的分离和纯化阶段时 包含新型生物活性化合物或其衍生物。
[0018] 本发明因此扩及新型生物活性化合物；及其方法，由此所述方法的主要步骤为对 获取自油棕的任意部分、来自棕榈油研磨的植物液和棕榈油研磨废液的粗提取物进行预处 理。此实施方式包括分离分子量为482的基本上纯化的生物活性化合物。应该指出的是，〃 分离的或纯化的"生物活性化合物或其生物活性部分基本上不含其它多孔材料或其它组 分或基本上不含化学前体或其它化学物质。
[0019] 下列实施例仅用于阐述制备生物活性化合物和有关化合物的不同方法，而不应理 解为限制权力要求的范围。根据优选实施方式，获取自油棕基材料的提取物可经受预处理 工艺。此类工艺可根据以下实施例1所述进行。
[0020] 实施例1
[0021] 提取物的预处理
[0022] 制备包含生物活性化合物的组合物的方法的第一步骤是对粗提取物进行预处理 以获得预浓缩的或部分纯化的提取物。这可用下述低严苛性条件进行：使提取物经受快速 色谱法或类似方法，或可选地，使所述提取物经受乙醇沉淀，然后进行高效液相色谱法。此 类方法的一个实例在下文以引用的方式给出并且不应理解为限制权力要求的范围。
[0023] 第一途径涉及的主要步骤为：加载〃sep-pak〃型柱，移除杂质，用甲醇或乙醇洗脱 所述提取物以及使所述提取物在旋转蒸发仪中经历浓缩阶段。第二途径包括以下步骤：向 三种体积的冷乙醇（EtoH)中添加一定量的萃取物，将所述混合物在-20°C的优选温度下储 存过夜，以1500Xg离心至少15分钟，用适量的蒸馏水溶解获取自前一步骤的沉淀物，以及 通过旋转蒸发仪在50°C下浓缩以获得3ml的优选终值。应提及的是，用于两种途径的这些 步骤可用本领域中已知的标准工序的替代步骤来代替以实现类似的目标。
[0024] 用于制备如本文所述的组合物的方法的下一必要步骤包括从部分纯化的或预处 理的提取物中分离酚类化合物并对其进行纯化。这可通过基于低严苛性条件或参数的常规 高效液相色谱法（HPLC)来进行。此类方法的一个实例在下文以引用的方式给出并且不应 理解为限制权力要求的范围。
[0025] 实施例2
[0026] 酚类化合物从油棕基材料的分离和纯化
[0027] 准备econosil C185 μ m粒度，优选柱长25cmX IOmm id，流速3ml/分钟。优选的 流动相梯度可包括两种溶剂，一种溶剂由〇. 1%三氟乙酸（TFA)和一定量的水组成，另一种 溶剂由10/90的0-1% TFA/乙腈（ACN) v/v组成。在此研宄中，注射柱为Iml并且取280nm 处的读数。通过HPLC使混合物经受分离，并且观察到存在若干个峰，至少一个峰指示30至 35分钟内的化合物洗脱。峰的其它细节将在下一实施例（峰分离章节）中进行描述。
[0028] 然而应理解，HPLC的柱和参数的选择可变化以获得所述洗脱时间的类似结果。可 将洗脱馏分适当收集并以粉末或液体形式提供以用于进一步的分析。
[0029] 实施例3
[0030] 峰分离
[0031] 观察获取自浓缩样品注射的HPLC色谱图。峰馏分的鉴定基于保持时间。从该色 谱图观察到存在若干个峰，其中使每个峰馏分别经受结构和化学鉴定。
[0032] 实施例4
[0033] 峰的分子量
[0034] 使用标准液相色谱-质谱法（LC-MS)获得所收集的六个主峰的分子量。从结果中 观察到峰6的分子质量为482。
[0035] 实施例5
[0036] 概述-自由基清除
[0037] 进一步分析馏分1至6在自由基清除中的性质。DPPH的自由基形式为紫色并且在 515nm的波长处吸收度最高。诸如某些酚类化合物的抗氧化剂能够清除DPPH的自由基，从 而导致紫色强度降低，这可通过分光光度法测量。
[0038] 自由基清除测定
[0039] 将DPPH的储液用水稀释至0. 025mg/ml，得到在50%甲醇中的最终溶液。制备浓 度为300ppm(300 μ g/ml)的没食子酸。在水中制备待测试物质以得到300ppm GAE的浓度。 [0040] 向透明小容器中的975 μ I DPPH溶液中添加25 μ 1样品。515nm波长处的吸光度 通过分光光度法以0. 1分钟的间隔监测2分钟。将对照以相同的方式进行处理，不同的是 将样品替代成水。空白对照包含替代DPPH的50%的甲醇以及替代样品的水。从测试值中 扣除空白对照的值。
[0041 ] 任何特定吸光度下的DPPH浓度根据DPPH标准曲线使用式y = aX+b进行计算
[0042] 其中Y =吸光度（515nm处）
[0043] X = DPPH 的浓度（μ g/mL)
[0044] a=线性回归系数
[0045] b = y 截距
[0046] 由于标准曲线穿过原点，因此b = 0
[0047] 对该式进行重新整理，
【主权项】
1. 一种组合物，其包含获取自油棕基材料的生物活性化合物，其中所述化合物的分子 量为482。
2. 如权利要求1所述的组合物，其中所述生物活性化合物是从棕榈油基废料提取。
3. 如权利要求2所述的组合物，其中所述生物活性化合物是从油棕榈植物液提取。
4. 如权利要求1所述的组合物，其中所述化合物是从棕榈油研磨废液提取。
5. 获取自油棕基材料的化合物的用途，所述化合物用作制备可用于提供生物活性性质 的组合物的活性成分，由此所述化合物的分子量为482。
6. 如权利要求5所述的用途，其中所述化合物获取自棕榈油基废料。
7. 如权利要求5所述的用途，其中所述化合物获取自油棕榈植物液。
8. 如权利要求5所述的用途，其中所述化合物获取自棕榈油研磨废液。
【专利摘要】本公开涉及一种获取自油棕基材料的新型生物活性化合物和包含所述生物活性化合物的组合物。根据本发明获得的生物活性化合物的分子质量为482。所述生物活性化合物还具有强效的HIV逆转录酶活性和抗氧化活性。
【IPC分类】A61K31-05, A61K36-889, A61P31-12
【公开号】CN104853762
【申请号】CN201380049180
【发明人】拉维加德维·沙姆巴沙穆提, 谭友爱, 赛义德·费罗斯·赛义德·阿布·贝克, 彻·阿尼莎斯·彻·艾德斯, 利欧·宋·森, 莫哈德·贾米勒·埃利亚斯, 万·萨里德哈·万·奥马尔, 莫哈德·索菲安·穆罕默德·埃德瑞思, 加巴日亚海·穆德·阿林
【申请人】马来西亚棕榈油协会
【公开日】2015年8月19日
【申请日】2013年7月26日
【公告号】EP2877193A2, US20150202245, WO2014017900A2, WO2014017900A3