一种云实提取物，该提取物的制备方法及医药用图
【技术领域】
[0001] 本发明涉及中药提取物领域，具体涉及一种云实提取物，该提取物的制备方法及 医药用途，该提取物可以用于抗脑衰老。
【背景技术】
[0002] 药材云实为豆科云实属植物云实的种子，又名员实、天豆（《吴普本草》）、马豆（《本 草图经》）、朝天子（《天目山药用植物志》）。
[0003] 原植物云实（学名Caesalpinia decapetala)，又名药王子、牛网刺、阎王刺。豆科 苏木属，生于我国南部山区，平原地带常栽培做绿蓠，生长于平原、丘陵地、山谷及河边等； 分布于长江流域以南各省区。根圆柱形，弯曲，有分枝，长短不等，直径2-6cm，根头膨大，外 皮灰褐色，粗糙，具横向皮孔，纵皱纹明显。质坚，不易折断，断面皮部棕黄色，木部白色，占 绝大部分。气微，味辛、涩、微苦。根皮呈卷筒状、槽状或不规则碎片状，长短厚薄不一，外表 面灰褐色，粗糙，具疣状突起及灰黄色横向皮孔，常有内陷环纹；内表面浅褐色，略平坦，具 细纵纹。质硬而脆，易折断，断面颗粒性，平整切面可见由石细胞群形成的斑纹。气微，味微 涩。嚼之有砂粒感。以条大、皮厚者为佳。
【发明内容】
[0004] 本发明的目的在于提供一种云实提取物，其制备方法和液相分析方法，含有该提 取物的药物制剂及利用该提取物制备治疗抗脑衰老的药物的用途。
[0005] 本发明的上述目的是通过下面的技术方案得以实现的：
[0006] -种云实提取物，该提取物由以下方法制备：
[0007] (a)以重量计，每100份药材包含干燥的云实80~90份和甘草10~20份，混合粉 碎，用60 %乙醇溶液热回流提取，合并提取液，浓缩至无醇味得到乙醇提取浓缩液；(b)将 步骤（a)所得乙醇提取浓缩液用水稀释，依次用石油醚、乙酸乙酯和水饱和的正丁醇萃取， 减压浓缩，分别得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；（c)正丁醇萃取物用 水溶解，过滤，用大孔树脂富集活性成分，先用8 %乙醇冲洗12个柱体积除去大极性成分， 再用70%乙醇洗脱10个柱体积，收集70%洗脱液，减压浓缩即得。
[0008] 进一步地，步骤（C)中所述大孔树脂为AB-8型大孔树脂。
[0009] 为了能够通过建立HPLC指纹图谱的方法控制不同批次制备的提取物的批间差 异，所述提取物的液相分析方法为：
[0010] 色谱柱：Agilent Zorbax SB-C18 柱（4. 6mmX 250mm，5 μ m);
[0011] 流动相：A为乙腈，B为0. 4%磷酸溶液；
[0012] 梯度洗脱程序：0 ~5min，A 10%-15%;5 ~15min，A 15%-50%;15 ~23min， A 50%- 80% ;23 ~25min，A 80%- 10% ;25 ~30min，A 10% ;
[0013] 流动相流速：1. OmL · min S
[0014] 检测波长：260nm;
[0015] 柱温：30 °C ;
[0016] 进样量：10 μ L。
[0017] 药物制剂，含有治疗有效量的所述提取物和药学上可接受的载体。
[0018] 所述的提取物在制备治疗抗脑衰老的药物中的应用。
[0019] 所述的药物制剂在制备治疗抗脑衰老的药物中的应用。
[0020] 本发明提取物用作药物时，可以直接使用，或者以药物制剂的形式使用。
[0021] 所述药物制剂含有治疗有效量的本发明云实提取物，其余为药物学上可接受的、 对人和动物无毒和惰性的可药用载体和/或赋形剂。
[0022] 所述的可药用载体或赋形剂是一种或多种选自固体、半固体和液体稀释剂、填料 以及药物制品辅剂。将本发明的药物制剂以单位体重服用量的形式使用。本发明提取物可 通过口服或注射的形式施用于需要治疗的患者。用于口服时，可将其制成片剂、缓释片、控 释片、胶囊、滴丸、微丸、混悬剂、乳剂、散剂或颗粒剂、口服液等；用于注射时，可制成灭菌的 水性或油性溶液、无菌粉针、脂质体或乳剂等。
[0023] 本发明的优点：本发明通过对干燥的云实进行提取、除杂、富集处理，能得到具有 抗脑衰老功能的提取物；本发明提供的液相分析方法可以用于建立该提取物的指纹图谱， 用于控制不同批次制备的提取物的批间差异。
【附图说明】
[0024] 图1为云实提取物HPLC液相图谱。
【具体实施方式】
[0025] 下面结合实施例进一步说明本发明的实质性内容，但并不以此限定本发明保护范 围。尽管参照较佳实施例对本发明作了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对 本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的实质和范围。
[0026] 实施例1 :提取物制备（云实85份，甘草15份）
[0027] 药材来源：云实和甘草干燥根茎购自安徽亳州中药材市场。
[0028] 主要试剂：食品级乙醇购自上海凌峰化学试剂有限公司；医药级AB-8大孔树脂购 自天津波鸿树脂有限公司；乙腈为HPLC级，购于TEDIA ;85 %磷酸为HPLC级，购于TEDIA ; 色谱用纯净水为哇哈哈纯净水。
[0029] 制备方法：将8. 5kg干燥的云实和I. 5kg的甘草干燥根茎混合粉碎，用60 %乙醇 溶液热回流提取（25LX3次），合并提取液，浓缩至无醇味得到乙醇提取浓缩液（2L);将所 得乙醇提取浓缩液用水稀释至3L，依次用石油醚（3LX3次）、乙酸乙酯（3LX3次）和水饱 和的正丁醇（3LX3次）萃取，减压浓缩，分别得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇 萃取物212g ; (c)正丁醇萃取物用I. 5L水溶解，医用脱脂棉过滤，用AB-8大孔树脂（2kg， 柱体积I. 5L)富集活性成分，先用8 %乙醇冲洗12个柱体积（18L)除去大极性成分，再用 70%乙醇洗脱10个柱体积（15L)，收集70%洗脱液，减压浓缩，即得云实提取物约120g。
[0030] 实施例2 :提取物制备（云实80份，甘草20份）
[0031 ] 制备方法：将8kg干燥的云实和2kg的甘草干燥根茎混合粉碎，用60 %乙醇溶液 热回流提取（25LX3次），合并提取液，浓缩至无醇味得到乙醇提取浓缩液（2L);将所得乙 醇提取浓缩液用水稀释至3L，依次用石油醚（3LX3次）、乙酸乙酯（3LX3次）和水饱和的 正丁醇（3LX3次）萃取，减压浓缩，分别得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取 物212g ; (c)正丁醇萃取物用I. 5L水溶解，医用脱脂棉过滤，用AB-8大孔树脂（2kg，柱体 积I. 5L)富集活性成分，先用8%乙醇冲洗12个柱体积（18L)除去大极性成分，再用70% 乙醇洗脱10个柱体积（15L)，收集70 %洗脱液，减压浓缩，即得云实提取物约120g。
[0032] 实施例3 :提取物制备（云实90份，甘草10份）
[0033] 制备方法：将9kg干燥的云实和Ikg的甘草干燥根茎混合粉碎，用60 %乙醇溶液 热回流提取（25LX3次），合并提取液，浓缩至无醇味得到乙醇提取浓缩液（2L);将所得乙 醇提取浓缩液用水稀释至3L，依次用石油醚（3LX3次）、乙酸乙酯（3LX3次）和水饱和的 正丁醇（3LX3次）萃取，减压浓缩，分别得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取 物212g ; (c)正丁醇萃取物用I. 5L水溶解，医用脱脂棉过滤，用AB-8大孔树脂（2kg，柱体 积I. 5L)富集活性成分，先用8%乙醇冲洗12个柱体积（18L)除去大极性成分，再用70% 乙醇洗脱10个柱体积（15L)，收集70 %洗脱液，减压浓缩，即得云实提取物约120g。
[0034] 实施例4 :提取物制备（云实75份，甘草25份）
[0035] 制备方法：将7. 5kg干燥的云实和2. 5kg的甘草干燥根茎混合粉碎，用60 %乙醇 溶液热回流提取（25LX3次），合并提取液，浓缩至无醇味得到乙醇提取浓缩液（2L);将所 得乙醇提取浓缩液用水稀释至3L，依次用石油醚（3LX3次）、乙酸乙酯（3LX3次）和水饱 和的正丁醇（3LX3次）萃取，减压浓缩，分别得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇 萃取物212g ; (c)正丁醇萃取物用I. 5L水溶解，医用脱脂棉过滤，用AB-8大孔树脂（2kg， 柱体积I. 5L)富集活性成分，先用8 %乙醇冲洗12个柱体积（18L)除去大极性成分，再用 70%乙醇洗脱10个柱体积（15L)，收集70%洗脱液，减压浓缩，即得云实提取物约120g。
[0036] 实施例5 :提取物制备（云实95份，甘草5份）
[0037] 制备方法：将9. 5kg干燥的云实和0. 5kg的甘草干燥根茎混合粉碎，用60 %乙醇 溶液热回流提取（25LX3次），合并提取液，浓缩至无醇味得到乙醇提取浓缩液（2L);将所 得乙醇提取浓缩液用水稀释至3L，依次用石油醚（3LX3次）、乙酸乙酯（3LX3次）和水饱 和的正丁醇（3LX3次）萃取，减压浓缩，分别得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇 萃取物212g ; (c)正丁醇萃取物用I. 5L