，诸如曲罗尼尔（treprostinil)、伊洛前列素（iloprost)和 贝前列素化eraprost);硝酸异山梨醋（isosorbidedinitrate);和鸟巧酸环化酶活化剂， 诸如cinaciguat和利奥西狐（riociguat)。
[0120] 也可W使用抗凝血剂或阻断或抑制凝血酶的化合物，诸如华法林和基于=肤基序 D-Phe-Pro-Arg的化合物；例如LY287045等。许多化合物（诸如伊诺加群（inogatran)和 美拉加群（melagatran))是本领域中已知的，并且也可W使用。对于非限制性例子，见美国 专利No. 6, 326, 386 ;6, 232, 315 ;6, 201，006 ;6, 174, 855 ;6, 060, 451 ;及 5, 985, 833 等。
[0121] 可W与antimiR-145 -起使用的别的药剂包括血管紧张肤转化酶抑制剂；烟碱受 体激动剂；提高一氧化氮浓度的药剂（抗血管发生剂）；TGF-e受体激动剂；和死亡域受体 配体。
[0122] 也可W与miR-145抑制剂组合使用W治疗、预防或阻止PAH的血管紧张肤转化酶 抑制剂（ACE-I)包括但不限于卡托普利（captopril)、贝那普利化enaz巧ril)、依那普利 (enalapril)、福辛普利（fosinopril)、赖诺普利（Iisinopril)、哇那普利（quinapril)、雷 米普利（Ramipril)、咪达普利（imidapril)、培噪普利（perindopril)、特下胺（erbumine)、 和群多普利（trandolapril)。也可W替换ACE抑制剂或与ACE抑制剂一起使用ACE受 体阻断剂，并且运些包括但不限于氯沙坦（Iosartan)、厄贝沙坦（irbesartan)、坎地沙坦 kandesartan)、环庚塞kilexetil)、和鄉沙坦（valsartan)。
[0123] 烟碱受体激动剂（例如烟碱（S-3-(l-甲基-2-化咯烷基）化晚）和实质上特异 性结合烟碱受体并且提供药理学效果的其它化合物）也可W与antimiR-145组合使用， 诸如W治疗、预防或阻止PAH。烟碱受体激动剂涵盖天然存在的化合物（包括但不限于小 分子、多肤、肤等，诸如天然存在的植物生物碱）、内源配体（例如从天然来源纯化，重组生 成，或合成的，并且进一步包含此类内源配体的衍生物和变体），和合成生成的化合物（例 如小分子，肤等）。术语"烟碱"进一步包含烟碱的任何药理学可接受衍生物或代谢物， 其展现出与烟碱相似的药物治疗特性。此类衍生物、代谢物、和代谢物的衍生物是本领域 中已知的，并且包括但不必然限于可替宁（COtinine)、降可替宁（norcotinine)、降烟碱 (nornicotine)、烟碱N-氧化物、可替宁N-氧化物、3-径基可替宁和5-径基可替宁或其药 学可接受盐。
[0124]antimiR-145也可W与一种或多种提高一氧化氮的药剂一起使用W治 疗、预防或阻止PAH。一氧化氮促进剂的例子包括但不限于S-亚硝基青霉胺 (S-nitrosopenicillamine)、石肖普钢（sodiumnitroprusside)、N-乙基-2-(1-乙基-2-美圣 基-2亚硝基阱基）乙胺（N0C12)等。细胞因子（诸如丫-干扰素、肿瘤坏死因子、IL-1、 IL-2和内毒素）也可W由于其对酶（一氧化氮合酶）的影响而调控一氧化氮的生成。通 过细胞因子增加NO合酶的可诱导形式，并且组成形式似乎通过细胞因子减少。已经发现了 HMG-CoA还原酶抑制剂上调内皮细胞NOS活性，如由Liao等的美国专利No. 6, 147, 109描述 的。可WW蛋白质或自其衍生的活性片段，或者W用于表达的DNA构建体利用任何一氧化 氮合酶形式。
[01巧]也可W与antimiR-145组合使用具有抗血管发生效应的药剂，诸如W治疗、预防 或阻止PAH、新血管内膜形成、再狭窄、或高血压。运些包括但不限于抗血管发生多肤：血管 他下（angiostatin);内皮他下（endostatin);和抗血管发生抗凝血酶III等，并且进一步 包含其功能活性变体和衍生物。其它抗血管发生剂包括基质金属蛋白酶的抑制剂，例如氨 憐汀（amifostine)、WR-1065 ;马立马司他（marimastat)、primomastat、a-1 抗膜蛋白酶； 銷氨醇等。
[0126]TGF-0受体激动剂也是感兴趣的。TGF-0受体I型和II型介导TGF-0的大多 数活性。配体包括TGF-0，及其模拟物和生物学活性衍生物。
[0127] 与antimiR-14 -起使用（例如W治疗、预防或阻止PAH)的感兴趣的其它药剂包 括死亡域受体配体，其是结合包含死亡域或其同系物或直向同系物的哺乳动物细胞表面受 体的化合物，通常是多肤化合物，并且通过结合，因此将调亡信号投递至细胞。通过运些受 体触发的胞内蛋白相互作用可W归于死亡域的结合相互作用，所述死亡域与TNF-Rl的C 端附近的约80个氨基酸的域同源，并且负责信号传导细胞毒性。TNF受体死亡域家族包括 TNF-Rl、化S(CD95)、TRAMP(wsI/Ap〇-3/DR-3)、TRAIkRl0R-4)和TRAIkR2 值R-5、TRICK2、 KILLER)。死亡域配体包括通过结合特定死亡域受体调节细胞增殖和分化的蛋白质。运些 配体包括TNF家族，例如TNF、淋己毒素、CD30配体、4-1BB配体、CD40配体、CD27配体、和 TRAILCTNF相关的调亡诱导配体）、及其同系物和类似物。
[0128]雷帕霉素（rapamycin)类似物（诸如他克莫司（tacrolimus) (FK-506)、西罗莫 司（sirolimus)和依维莫司（everolimus))(其通常用作免疫抑制剂，但是新近发现还展 现出血管平滑肌细胞的增殖）也可W与antimiR-145组合使用。c-myc(-种对于细胞复 制进展重要的蛋白质）的反义敲低是抑制动脉壁中的细胞增殖的另一种方法，并且可W与 miR-145抑制剂组合使用。
[0129] 在一个实施方案中，抗血小板剂的共价或非共价附着也是感兴趣的，包括GPHb/ IIIa抑制剂，例如化eoPro,其可W与miR-145抑制剂组合使用。治疗或疗法（诸如氧疗） 也可W与antimiR-145的施用组合使用。
[0130] 本发明还包括试剂盒，该试剂盒包含本文中描述的antimiR-145和施用装置。在 某些实施方案中，施用装置是设计为经由鼻或口将miR-145抑制剂投递至肺（诸如W治疗 或预防PAH)的装置。例如，适合于肺投递的施用装置包括但不限于点滴器、拭子、烟雾器、 吹入器、喷雾器、吸入器（例如基于气溶胶的计量剂量吸入器）、干粉末分散装置、和其它肺 投递装置，包括手工激活的、气体推进的、声波驱动的、等。在一些实施方案中，antimiR-145 配制为施用装置内含有的粉末。在其它实施方案中，antimiR-145配制为施用装置内含有 的液体气溶胶。在一个具体的实施方案中，施用装置是吸入器。在要静脉内或动脉内投递 antimiR-145的实施方案中，试剂盒可W包含导管其它类似的合适施用装置。试剂盒可W进 一步包含用于对受试者施用有效剂量的antimiR-145W抑制、治疗或预防肺高血压、新血 管内膜形成、再狭窄、和/或高血压的用法说明。在一些实施方案中，试剂盒包含一种或多 种别的药剂或疗法，诸如上文描述。
[0131] 通过下述附加的实施例进一步例示本发明，该实施例不应理解为限制的。本领域 技术人员根据本公开内容应当理解，在不偏离本发明精神和范围的情况下，可W对公开的
【具体实施方式】进行多种变化而仍能获得相似或类似的结果。 实施例
[013引实施例1 :AntimiR-145化合物的体内效力。
[0133] 为了优化祀向肺中的miR-145的化合物，使用肺中miR-145的直接mRNA祀物的去 阻抑作为体内功能性的读出实施体内筛选。
[0134] 在大鼠中测试总共9种不同antimiR设计，如表1中描绘：
[0137] 表2;符号白勺描述
[013 引
[0139] 在Sprague-Dawley大鼠中对表I中的9种antimiR化合物测定祀物去阻抑。W 25mg/kg剂量的来自表1的antimiR化合物皮下注射49至52天龄的Sprague-Dawley大鼠。 使用盐水和具有相似LNA和DNA百分比巧/7)的寡核巧酸作为对照。设计寡核巧酸对照分 子号M-10591W祀向秀丽隐杆线虫（C.elegans)特异性miRNA，并且用作化学对照。在注 射后48小时收集肺组织。通过在总肺RNA中的实时PCR测量Klf4、Kl巧、Lrrc71、Nedd41、 Igflr、Secl412、Me奸6、Fmod、Ankrdl2、Golgal、Gpbpl、His1:3h2a、Rapgef2、和Snedl的 mRNA。在图I中W相对于经盐水处理的动物的倍数变化值显示结果。
[0140] 来自运些实验的结果显示了M-11318具有最高的效力，接着是M-11319、M-11321 和M-11239。M-11244和M-11320具有相似的效力，并且比M-11239具有更低的效力。最后， 在9种化合物中，M-10934、M-11242、和M-11241具有最低的效力。
[0141] 图2中描绘了雷达图，其代表9种miR-145基因祀物及其相对于盐水的去阻抑倍 数变化。M-11318显示了所有9种基因的最大面积，该面积代表积累倍数变化值。M-11319 是第二大的面积。W黑线显示的对照寡核巧酸M-10591与活性化合物相比具有更小的祀物 去阻抑活性。
[0142] 实施例2 :AntimiR-145化合物的MiR-145特异性。
[0143] 用25mg/kg剂量的盐水或M-11318皮下注射49至52天龄的Sprague-Dawley大 鼠。用微阵列序型分析对来自经M-11318处理的大鼠和经盐水处理的大鼠的肺的总RNA进 行全基因组序型分析。在比较经M-11318处理的大鼠的肺的总RNA与来自经盐水处理的 大鼠的肺的总RNA时，含有miR-145种子的基因在上调基因标签中富集（对于差异表达， P-值<0.01)。使用超几何分布函数计算富集的P-值（图3)。此结果指示M-11318引发对 miR-145特异性的基因祀物去阻抑。
[0144] 实施例3 :通过AntimiR-145化合物M-11318的剂量依赖性祀物去阻抑。
[0145]用 25mg/kg剂量的盐水、25mg/kg剂量的M-10591、25mg/kg剂量的M-10934 或 5mg/ kg、lOmg/kg、或 25mg/kg剂量的M-11318 皮下注射 49 至 52 天龄的Sprague-Dawley大鼠。 在注射后72小时收集肺组织。通过实时PCR测量总肺RNA中的Kl巧的mRNA。图4中W相 对于经盐水处理的动物的倍数变化值显示结果。实时PCR结果指示了KLF5祀物去阻抑对 M-11318处理是剂量响应的。
[0146] 实施例4 :通过AntimiR-145化合物M-11318和M-11319的剂量依赖性祀物去阻 抑。
[0147]用 25mg/kg剂量的盐水，25mg/kg剂量的M-10591 ;25mg/kg剂量的M-10934 ;5mg/ kg，lOmg/kg，或 25mg/kg剂量的M-11318 ;或 5mg/kg，lOmg/kg，或 25mg/kg剂量的M-11319 皮下注射49至52天龄的Sprague-Dawl巧大鼠。在注射后48小时收集肺组织。通过实时 PCR测量总肺RNA中的化dd41的mRNA。图5中W相对于经盐水处理的动物的倍数变化值 显示结果。实时PCR结果指示了化dd41祀物去阻抑对M-11318和M-11319处理是剂量响 应的。
[0148] 实施例5 :AntimiR-145降低系统性血压和动脉硬化的指数。
[0149] 将16周龄时的自发性高血压（SHR)大鼠经受每周四次25mg/kg皮下剂量的 antimiR。在18周时，在饮用水中施用L-NG-硝基精氨酸甲醋化-NAME) (50mg/L)，任意给 予2周W在脉搏波速度（PWV)测量中创建治疗窗。在研究结束时，此时大鼠为20周龄，测 量末端脉搏波速度、beta指数、和血压（图6A)。研究中包括培噪普利（一种ACE抑制剂） 作为一种用于高血压的护理标准的基准。
[0150]antimiR-145(M-10934)显示了脉搏波速度（图她）、beta指数（图6C)、和均值系 统压力（图抓）的统计学显著降低。重要地，两种其它对照antimiR(对照1和对照2)用此 剂量和方案没有显示相似的益处，由此显示此治疗效果的microRNA特异性。（图6B-6D)。 运些结果共同证明了miR-145抑制在高血压的大鼠SHR/L-NAME中具有治疗益处。
[0151] 本文中讨论和引用的所有出版物、专利和专利申请通过提及完整收入本文。应当 理解，公开的发明不限于描述的特定方法、方案和材料，因为运些可W变化。还应当理解，本 文中使用的术语是仅为了描述具体的实施方案，而不意图限制本发明的范围，其仅会限于 所附的权利要求书。
[0152] 本领域技术人员会认可或仅仅使用常规方法能够确认本文中描述的发明的具体 实施方案的许多等同方案。所附权利要求书意图涵盖此类等同方案。
[0153] 参考文献
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