新的病毒增殖抑制剂/杀病毒方法,以及新的吡嗪核苷酸/吡嗪核苷类似物的制作方法

专利名称：新的病毒增殖抑制剂/杀病毒方法,以及新的吡嗪核苷酸/吡嗪核苷类似物的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种病毒生长抑制和/或杀病毒方法，其特征在于它使用通过激酶产生的吡嗪核苷酸或吡嗪核苷类似物或其盐；一种新的吡嗪核苷酸或吡嗪核苷类似物或其盐和一种使用它们治疗病毒感染的方法。
背景技术：
已认识到感染性病毒疾病(例如流感感染、疱疹病毒感染、获得性免疫缺陷综合征(AIDS)、病毒性肝炎、病毒性出血热等)是重要的医学问题，并已对其治疗进了大量的研究，例如使用疫苗进行的疾病预防或使用药物进行治疗的方法。迄今已研制出许多具有嘌呤碱基和嘧啶碱基的核酸及其衍生物作为用于药物治疗病毒感染的试剂。这些试剂的作用机理是它们在细胞中三磷酸化并抑制病毒聚合酶。这些试剂的实例包括叠氮基胸腺嘧啶和阿昔洛韦[Proceedings of the NationalAcademy of Science of the United States of America(Proc.Natl.Acad.Sd.USA)，第83卷，第8333-8337页(1986)；相同的出版物，第74卷，第5716-5720页(1977)]。
而且，已报道在对应于核酸碱基的部分转化成非天然的化学结构时表现出抗病毒作用的化合物的活性形式是通过在细胞内转化化合物得到的一磷酸化形式，而且它抑制肌苷一磷酸脱氢酶(IMPDH)，从而表现出作用。这种化合物实例包括利巴韦林和EICAR[Proceedings ofthe National Academy of Science of the United States of America(Proc.Natl.Aced.Sci.USA)，第70卷，第1174-1178(1973)；TheJournal of Biological Chemistry(J.Biol.Chem.)，第268卷，第24591-24598页(1993)]。
而且作为含有吡嗪作为碱基的核苷和核苷酸类似物的实例，已知以下的通式化合物 其中R16代表氢原子、甲基或癸基。但是这种化合物表现出无抗病毒活性(无抗绵羊脱髓鞘性脑蛋白质炎病毒活性)[Nucleosides &Nucleotides，第15卷，第11和12期，第1849-1861页(1996)]。另一方面，具有被氨基甲酰基取代的吡嗪环的核苷和核苷酸类似物是未知的。

发明内容
本发明的一个目的是提供一种高度安全的低毒性抗病毒剂，所述抗病毒剂在对应于核酸的碱基部分具有非天然化学结构；本发明还提供一种使用所述抗病毒剂的新的病毒生长抑制和/或杀病毒方法。
本发明者已发现，以下通式[1]代表的吡嗪核苷酸或吡嗪核苷类似物或其盐
其中R1代表氢原子或吡嗪环取代基；R2代表氢原子、酰基或可以被取代的氨基甲酰基烷基或羧基烷基；R3、R4、R5和R6中的每一个可以相同或不同，代表氢原子或可以被取代或保护的羟基；A代表氧原子或亚甲基；Y代表氧原子或亚氨基；而n代表0-3的整数。特别地，一种三磷酸化吡嗪核苷酸类似物或其盐表现出高度安全的、优越的病毒生长抑制和/或杀病毒作用并具有低毒性，它抑制病毒聚合酶，特别是直接抑制RNA聚合酶或抑制其在体内转化的物质的形式。
而且，本发明者已发现一种在体内或细胞内水解或分解以下通式[2]代表的吡嗪核苷酸类似物或其盐的新方法 其中R1、R2、R3、R4、R5、R6、A和Y中的每一个具有与上述相同的含义；而磷酸或膦酸中的R7和R8各自独立地代表保护或未保护的、取代或未取代的的羟基，所述羟基在生理条件下分解，然后通过激酶如核苷酸激酶的作用诱导如此得到的产物成为通式[1]代表的吡嗪核苷酸或吡嗪核苷类似物代表或其盐，以使其表现出病毒生长抑制作用和/或杀病毒作用。
而且，本发明者已发现以下通式[1z]代表的吡嗪核苷酸类似物或其盐
其中R1代表氢原子或吡嗪环取代基；R2代表氢原子、酰基或可以被取代的氨基甲酰基烷基或羧基烷基；R3、R4、R5和R6中每一个相同或不同地代表氢原子或可以被取代或保护的羟基；R代表可以被在生理条件下分解的基团保护或取代的羟基；A代表氧原子或亚甲基；而n代表1-3的整数；它是这样的一种化合物它生理条件下转化，并以与通式[1]相同的方式抑制病毒RNA聚合酶，从而表现出病毒生长抑制作用和/或杀病毒作用。
任何上述的化合物在体内或细胞内转化为以下通式[1y]代表的吡嗪三磷酸核苷酸(pyrazine triphosphate nucleotide)类似物 其中R1代表氢原子或吡嗪环取代基；而Z10、Z11、Z12和Z13中每一个相同或不同地代表氢原子或羟基，且它表现出RNA聚合酶抑制作用。此外，以下所示的通式[1x]代表的化合物是一种在体内或细胞内转化为通式[1y]代表的化合物的RNA聚合酶抑制剂前体
其中R1代表氢原子或吡嗪环取代基；R2代表氢原子、酰基或可以被取代的氨基甲酰基烷基或羧基烷基；R3、R4、R5和R6中每一个相同或不同地代表氢原子或可以被取代或保护的羟基；A代表氧原子或亚甲基；Y代表氧原子或亚氨基；而m代表0-2的整数。
本发明的RNA聚合酶抑制剂前体抑制来源于病毒的RNA聚合酶，且其选择性大于对来源于宿主的RNA聚合酶的选择性。本发明的RNA聚合酶抑制剂前体可以这样的选择性抑制来源于病毒的RNA聚合酶所述选择性优选比对来源于宿主的RNA聚合酶的选择性高出200倍或更大，更优选1,000倍或更大，进一步更优选2,000倍或更大。而且，本发明的RNA聚合酶抑制剂前体几乎不抑制肌苷一磷酸脱氢酶，并且它在体内转化成为三磷酸化形式之后抑制病毒聚合酶。因此，本发明的RNA聚合酶抑制剂前体的特征是它在体内转化之后具有极强的病毒聚合酶抑制作用，且它还具有高度选择性，同时由抑制肌苷一磷酸脱氢酶导致的细胞毒性大大降低。利用这种高度选择性可以获得高度安全的试剂。
本发明的RNA聚合酶抑制剂前体对RNA聚合酶和肌苷一磷酸脱氢酶具有非常高的选择性。在由以下通式[1w]代表的吡嗪核苷或吡嗪一核苷酸类似物结构中
其中R1代表氢原子或吡嗪环取代基；R2代表氢原子、酰基或可以被取代的氨基甲酰基烷基或羧基烷基；R3、R4、R5和R6中每一个相同或不同地代表氢原子或可以被取代或保护的羟基；Y代表氧原子或亚氨基；而p代表0或1；所述前体在体内转化之后对来源于病毒的RNA聚合酶的抑制作用与所述前体对来源于宿主细胞的肌苷一磷酸脱氢酶的抑制作用的比率优选为900∶1或更大，更优选为5,000∶1或更大，进一步更优选10,000∶1或更大。
本发明者已证明，当R1、R3和R5中的每一个为氢原子而R4z、R6z和Rz中的每一个为羟基时，例如在以下通式[3z]代表的吡嗪核苷酸衍生物中 其中R1、R2、R3、R5和Y中的每一个具有与上述相同的含义；Rz代表在生理条件下分解的保护或未保护的、取代或未取代的羟基；R4z和R6z中的每一个相同或不同地代表氢原子或可以被取代或保护的羟基，或者R4z和R6z一起代表可以被取代的表示为-O-亚烷基-O-的基团；并且在给动物施用这种化合物时，在动物的血浆中产生4-[(2R，3R，4S，5R)-3，4-二羟基-5-(羟基甲基)四氢-2-呋喃基]-3-氧代-3，4-二氢-2-吡嗪甲酰胺(代替命名3，4-二氢-3-氧代-4-β-D-呋喃核糖基-2-吡嗪甲酰胺)。
而且，本发明者已证明，当给动物施用通式[3z]代表的吡嗪核苷类似物或其盐如4-[(2R，3R，4S，5R)-3，4-二羟基-5-(羟基-甲基)四氢-2-呋喃基]-3-氧代-3，4-二氢-2-吡嗪甲酰胺时，在动物器官内产生{(2R，3S，4R，5R)-5-[3-(氨基羰基)-2-氧代-1(2H)-吡嗪基]-3，4-二羟基四氢-2-呋喃基}甲基三磷酸酯。
因此，本发明者已发现给哺乳动物施用通式[3z]代表的化合物或其盐或给哺乳动物施用通式[2]代表的化合物或其盐以在体内诱导通式[1]代表的吡嗪核苷酸或吡嗪核苷类似物的方法，表现出新的病毒生长抑制作用和/或新的杀病毒作用，从而完成本发明。
本发明的方法用作一种治疗感染病毒的患者的方法，所述方法包括给感染病毒的患者施用上述吡嗪核苷酸或吡嗪核苷类似物或其盐如通式[3z]代表的化合物或其盐的步骤。更为具体地，本发明的方法还包括将以上的化合物或其盐转化为通式[1y]代表的吡嗪三磷酸核苷酸类似物的步骤。
而且，优选在感染病毒的患者的体内通式[3z]至通式[1y]代表的吡嗪三磷酸核苷酸类似物的转化经过以下通式[1v]代表的吡嗪核苷酸类似物
其中R1代表氢原子或吡嗪环取代基；而Z10、Z11、Z12和Z13中的每一个相同或不同地代表氢原子或羟基。通式[1v]代表的吡嗪核苷酸类似物的特征是它基本上不抑制肌苷来源于宿主细胞的一磷酸酯脱氢酶。而且，通式[1y]代表的吡嗪三磷酸核苷酸类似物的特征是它抑制来源于病毒的RNA聚合酶的选择性大于抑制来源于宿主的RNA聚合酶的选择性。
而且，作为本发明者对本发明的代表性化合物4-[(2R，3R，4S，5R)-3，4-二羟基-5-(羟基甲基)四氢-2-呋喃基]-3-氧代-3，4-二氢-2-吡嗪甲酰胺进行深入研究的结果，他们发现4-[(2R，3R，4S，5R)-3，4-二羟基-5-(羟基甲基)四氢-2-呋喃基]-3-氧代-3，4-二氢-2-吡嗪甲酰胺一水合物在制药过程中具有良好的稳定性。此水合物是一种在用常规方法进行制药的过程中稳定存在的结晶，并且它的飞散性小，且与酐相比不粘附在设备上。因此它能够良好地混合和制粒。
湿法制粒一般用作制药过程中的制粒。在这种湿法制粒过程中，一般使用水和含有粘合的水溶液。但是，已知在使用酐的时候，部分酐依赖于条件地转化成水合物。而且，在此过程中产生的无定形物质造成制药或稳定性方面的问题。因此，当水合物作为结晶多晶形物存在时，由酐制备药剂需要严格的条件。但是，一水合物是一种在常规的制药过程中稳定的结晶，因而它是一种不造成上述问题的优秀的化合物。
此外，这种一水合物在最终的制备过程中不需要有机溶剂，但它可以用水结晶。因此，最终得到的结晶中残留有机溶剂的风险是低的。而且，由于一水合物不需要有机溶剂，它不需要防爆装置。因此，可以说这种化合物在制备工艺方面具有极大的优点。
以下将详细描述本发明的化合物。
本发明的最佳实施方式分别地，在本说明书中，除非另外指出，卤原子意指氟原子、氯原子和碘原子；烷基意指低级烷基，例如C1-5烷基，如甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基和戊基；烷氧基意指低级烷氧基，例如C1-5烷氧基，如甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、异丁氧基、仲丁氧基、叔丁氧基和戊氧基；烷氧基羰基意指低级烷氧基羰基，例如C1-5烷氧基羰基，如甲氧基羰基、乙氧基羰基、正丙氧基羰基、异丙氧基羰基、正丁氧基羰基、异丁氧基羰基、仲丁氧基羰基、叔丁氧基羰基、4-羟基丁氧基羰基和戊氧基羰基；烷基氨基意指，例如一-或二-C1-5烷基氨基，如甲基氨基、乙基氨基、丙基氨基、二甲基氨基、二乙基氨基和甲基乙基氨基；卤代烷基意指，例如卤代C1-5烷基如氟甲基、氯甲基、溴甲基、二氯甲基、三氟甲基、三氯甲基、氯乙基、二氯乙基、三氯乙基和氯丙基；氨基甲酰基烷基意指，例如C1-5氨基甲酰基烷基，如氨基甲酰基甲基、氨基甲酰基乙基、氨基甲酰基-正丙基、氨基甲酰基异丙基、氨基甲酰基-正丁基、氨基甲酰基异丁基和氨基甲酰基戊基；羧基烷基意指，例如C1-5羧基烷基，如羧基甲基、羧基乙基、羧基-正丙基、羧基异丙基、羧基-正丁基、羧基异丁基和羧基戊基；链烯基意指，例如C2-5链烯基如乙烯基和烯丙基；环烷基意指，例如C3-6环烷基如环丙基、环丁基、环戊基和环己基；环烷氧基意指，例如C3-6环烷氧基如环丙氧基、环丁氧基、环戊氧基和环己氧基；芳基意指，例如基团如苯基和萘基；杂环基意指，例如含有至少一个选自氧原子、氮原子和硫原子的杂原子的4至6元或缩合杂环基如氮杂环丁烷基、噻吩基、呋喃基、吡咯基、咪唑基、吡唑基、噻唑基、异噻唑基、噁唑基、异噁唑基、呋咱基、吡咯烷基、吡咯啉基、咪唑烷基、咪唑啉基、吡唑烷基、吡唑啉基、1，3，4-噁二唑基、1，2，3-噻二唑基、1，2，4-噻二唑基、1，3，4-噻二唑基、1，2，3-三唑基、1，2，4-三唑基、噻三唑基基、吡啶基、吡嗪基、嘧啶基、哒嗪基、吡喃基、吗啉基、1，2，4-三嗪基、苯并噻吩基、萘并噻吩基、苯并呋喃基、异苯并呋喃基、色烯基、吲嗪基、异吲哚基、吲哚基、吲唑基、嘌呤基、喹啉基、异喹啉基、2，3二氮杂萘基、萘啶基、喹喔啉基、喹唑啉基、噌啉基、蝶啶基、异色满基、苯并二氢吡喃基、吲哚啉基、异吲哚啉基、苯并噁唑基、三唑并吡啶基、四唑并哒嗪基、四唑并嘧啶基、噻唑并哒嗪基、噻二唑并哒嗪基、三唑并哒嗪基、苯并咪唑基、苯并噻唑基、1，2，3，4-四氢喹啉基、咪唑并[1，2-b][1-2，4]三嗪基和奎宁环基；亚烷基意指，例如直链或支链C1-5亚烷基如亚甲基、亚乙基和亚丙基；烷硫基意指，例如直链或支链C1-5烷硫基如甲硫基、乙硫基、正丙硫基、异丙硫基、正丁硫基、异丁硫基、仲丁硫基、叔丁硫基和戊硫基；芳氧基意指，例如芳基-O-代表的基团，如苯氧基和萘氧基；芳硫基意指，例如芳基-S-代表的基团，如苯硫基和萘硫基；芳基氨基意指，例如苯基氨基和萘基氨基；环烷基氨基意指，例如C3-6环烷基氨基如环丙基氨基、环丁基氨基、环戊基氨基和环己基氨基；酰基意指，例如C2-6烷酰基如甲酰基、乙酰基或丙酰基，芳酰基如苯甲酰基或萘甲酰基和杂环羰基如烟酰基、噻吩甲酰基、吡咯烷羰基或呋喃甲酰基；酰氧基意指，例如C2-6烷酰氧基如乙酰氧基或丙酰氧基，芳酰氧基如苯甲酰氧基或萘甲酰氧基和杂环羰氧基如烟酰氧基、噻吩甲酰氧基、吡咯烷羰氧基或呋喃甲酰氧基；芳基磺酰氧基意指，例如基团如苯基磺酰氧基和对甲苯磺酰氧基；烷基磺酰氧基意指，例如直链或支链C1-5烷基磺酰氧基如甲基磺酰氧基、乙基磺酰氧基、正丙基磺酰氧基、异丙基磺酰氧基、正丁基磺酰氧基、异丁基磺酰氧基、仲丁基磺酰氧基、叔丁基磺酰氧基和戊基磺酰氧基。
在说明书所述的通式中，R1的吡嗪环取代基包括选自以下的基团卤原子；可以被羟基、烷氧基、烷硫基、芳基、氨基或烷基氨基取代的烷基；可以被卤原子取代的烷基或链烯基；环烷基；羟基；烷氧基；环烷氧基；烷氧基羰基；巯基；可以被芳基取代的烷硫基；芳基；芳氧基；芳硫基；芳基氨基；氰基；硝基；可以被酰基取代的氨基；烷基氨基；环烷基氨基；酰基；羧基；氨基甲酰基；硫代氨基甲酰基；烷基氨基甲酰基；和杂环基。而且一个或多个这样的基团可以被取代。
Rz的羟基的保护基和取代基包括，例如可以被取代的酰基、低级烷氧基羰基和酰氧基烷基，更具体地为可以被取代的酰基，例如乙酰基、丙酰基、戊酰基、苯甲酰基、新戊酰基、2-氨基乙酰基、2-氨基丙酰基、2-氨基戊酰基和2-氨基己酰基；低级烷氧基羰基如甲氧基羰基、乙氧基羰基、正丙氧基羰基、异丙氧基羰基、正丁氧基羰基、异丁氧基羰基、仲丁氧基羰基、叔丁氧基羰基和4-羟基丁氧基羰基；和酰氧基烷基如乙酰氧基甲基、丙酰氧基甲基、异丙酰氧基甲基、丁酰氧基甲基、异丁酰氧基甲基、戊酰氧基甲基、异戊酰氧基甲基、新戊酰氧基甲基和1-新戊酰氧基乙基。
R7和R8各自独立地为在磷酸酯或膦酸酯上的在生理条件下分解的羟基的保护基或取代基，而在这种条件下可以分解的R基团是，例如在Progress in Medicinal Chemistry，第34卷，第111-147页(1997)，Elsevier Science B.V.和Current Medicinal Chemistry，第7卷，第995-1039页(2000)中所述的磷酸酯或膦酸酯的保护基或取代基。特定的实例包括芳基如苯基、氯苯基、硝基苯基、氰基苯基、萘基；环水杨基(Saligenyl)如环水杨基(Saligenyl)、5-甲基环水杨基(Saligenyl)；酰胺化基团如甲氧基丙氨酸基和苯氧基丙氨酸基；卤代乙基如三氯乙基；酰氧基烷基如乙酰氧基甲基、丙酰氧基甲基、异丙酰氧基甲基、丁酰氧基甲基、异丁酰氧基甲基、戊酰氧基甲基、异戊酰氧基甲基、新戊酰氧基甲基和1-新戊酰氧基乙基；酰氧基苄基如乙酰氧基苄基、丙酰氧基苄基、异丙酰氧基苄基、丁酰氧基苄基、异丁酰氧基苄基、戊酰氧基苄基、异戊酰氧基苄基、新戊酰氧基苄基；顺式低级酰硫基烷基如乙酰硫基乙基、丙酰硫基乙基、异丙酰硫基乙基、丁酰硫基乙基、异丁酰硫基乙基、戊酰硫基乙基、异戊酰硫基乙基、新戊酰硫基乙基和新戊酰硫基丁基；顺式高级酰硫基烷基如月桂酰硫基乙基；5-芳酰硫基烷基如苯甲酰硫基乙基和萘甲酰硫基乙基；和二硫代二乙基。
短语“在生理条件下分解”意指通过酶如酯酶、磷酸二酯酶、磷酸酰胺酶、水解酶、氨基水解酶、转氨酶或还原酶进行的分解，以及生理氧化、水解和/或还原反应。
激酶的实例包括核苷酸激酶、核苷激酶、核苷磷酸转移酶和5’-核苷酸酶。
前体意指一种本身通过在体内转化/分解而产生药理学活性物质的物质。
羧基保护基的实例包括所有可以用作常规的羧基保护基的基团，例如低级烷基如甲基、乙基、正丙基、异丙基、1，1-二甲基丙基、正丁基和叔丁基；芳基如苯基和萘基；芳基-低级烷基如苄基、联苯甲基、三苯甲基、对硝基苄基、对甲氧基苄基和双(对甲氧基苯基)甲基；酰基-低级烷基如乙酰基甲基、苯甲酰基甲基、对硝基苯甲酰基甲基、对溴苯甲酰基甲基和对甲磺酰基苯甲酰基甲基；含氧杂环基如2-四氢吡喃基和2-四氢呋喃基；卤代低级烷基如2，2，2-三氯乙基；低级烷基甲硅烷基烷基如2-(三甲基甲硅烷基)乙基；酰氧基烷基如乙酰氧基甲基、丙酰氧基甲基和新戊酰氧基甲基；含氮杂环-低级烷基如邻苯二甲酰亚胺甲基和琥珀酰亚胺甲基；环烷基如环己基；低级烷氧基-低级烷基如甲氧基甲基、甲氧基乙氧基甲基和2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基甲基；芳基-低级烷氧基低级烷基如苄氧基甲基；低级烷硫基-低级烷基如甲硫基甲基和2-甲硫基乙基；芳硫基-低级烷基如苯硫基甲基；低级链烯基如1，1-二甲基-2-丙烯基、3-甲基-3-丁炔基和芳基；和取代的甲硅烷基如三甲基甲硅烷基、三乙基甲硅烷基、三异丙基甲硅烷基、二乙基异丙基甲硅烷基、叔丁基二甲基甲硅烷基、叔丁基联苯甲硅烷基、联苯甲基甲硅烷基和叔丁基甲氧基苯基甲硅烷基。
氨基和亚氨基的保护基的实例包括所有可以用作常规氨基保护基的基团，例如酰基如三氯乙氧基羰基、三溴乙氧基羰基、苄氧基羰基、对硝基苄氧基羰基、邻溴苄氧基羰基、(一、二、三)氯乙酰基、三氟乙酰基、苯基乙酰基、甲酰基、乙酰基、苯甲酰基、叔戊氧基羰基、叔丁氧基羰基、对甲氧基苄氧基羰基、3，4-二甲氧基苄氧基羰基、4-(苯基偶氮)苄氧基羰基、2-糠氧基羰基、联苯甲氧基羰基、1，1-二甲基丙氧基羰基、异丙氧基羰基、邻苯二甲酰基、琥珀酰基、丙氨酰基、亮氨酰基、1-金刚烷氧基羰基和8-喹啉氧基羰基；芳基-低级烷基如苄基、联苯甲基和三苯甲基；芳硫基如2-硝基苯硫基和2，4-二硝基苯硫基；烷烃-或芳烃-磺酰基如甲磺酰基和对甲苯磺酰基；二低级烷基氨基-低级亚烷基如N，N-二甲基氨基亚甲基；芳基-低级亚烷基如亚苄基、2-羟基亚苄基、2-羟基-5-氯亚苄基和2-羟基-1-萘基亚甲基；含氮杂环亚烷基如3-羟基-4-吡啶基亚甲基；环亚烷基如亚环己基、2-乙氧基羰基亚环己基、2-乙氧基羰基亚环戊基、2-乙酰基亚环己基和3，3-二甲基-5-氧亚环己基；二芳基-或二芳基-低级烷基磷酰基如联苯磷酰基和二苄基磷酰基；含氧杂环烷基如5-甲基-2-氧代-2H-1，3-二氧环戊烯-4-基-甲基；和低级烷基取代的甲硅烷基如三甲基甲硅烷基。
羟基保护基的实例包括所有可以用作羟基保护基的基团，例如酰基如苄氧基羰基、4-硝基苄氧基羰基、4-溴苄氧基羰基、4-甲氧基苄氧基羰基、3，4-二甲氧基苄氧基羰基、甲氧基羰基、乙氧基羰基、叔丁氧基羰基、1，1-二甲基丙氧基羰基、异丙氧基羰基、异丁氧基羰基、联苯甲氧基羰基、2，2，2-三氯乙氧基羰基、2，2，2-三溴乙氧基羰基、2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基羰基、2-(苯基磺酰基)乙氧基羰基、2-(三苯基磷鎓基)乙氧基羰基、2-糠氧基羰基、1-金刚烷氧基羰基、乙烯氧基羰基、烯丙氧基羰基、顺式苄硫基羰基、4-乙氧基-1-萘氧基羰基、8-喹啉氧基羰基、乙酰基、甲酰基、氯乙酰基、二氯乙酰基、三氯乙酰基、三氟乙酰基、甲氧基乙酰基、苯氧基乙酰基、新戊酰基和苯甲酰基；低级烷基如甲基、叔丁基、2，2，2-三氯乙基和2-三甲基甲硅烷基乙基；低级链烯基如烯丙基；芳基-低级烷基如苄基、对甲氧基苄基、3-4-二甲氧基苄基、联苯甲基和三苯甲基；含氧和硫杂环基如四氢呋喃基、四氢吡喃基和四氢硫代吡喃基；低级烷氧基-和低级烷硫基-低级烷基如甲氧基甲基、甲硫基甲基、苄氧基甲基、2-甲氧基乙氧基甲基、2，2，2-三氯乙氧基甲基、2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基甲基和1-乙氧基乙基；烷基-和芳基-磺酰基如甲磺酰基和对甲苯磺酰基；和取代的甲硅烷基如三甲基甲硅烷基、三乙基甲硅烷基、三异丙基甲硅烷基、二乙基异丙基甲硅烷基、叔丁基二甲基甲硅烷基、叔丁基二苯基甲硅烷基、二苯基甲基甲硅烷基和叔丁基甲氧基苯基甲硅烷基，且在二羟基的情况下还包括低级亚烷基如亚甲基、亚苄基和亚异丙基、低级烷氧基-低级亚烷基如甲氧基亚甲基和低级烷基取代的甲硅烷基如1，1，3，3-四异丙基二亚硅氧烷基。
R2的氨基甲酰基烷基和羧基烷基可以被一个或多个选自以下的取代基取代卤原子；可以被羟基、烷氧基、烷硫基、芳基、氨基或烷基氨基取代的烷基；卤代烷基；链烯基；环烷基；羟基；烷氧基；环烷氧基；烷氧基羰基；巯基；可以被芳基取代的烷硫基；芳基；芳氧基；芳硫基；芳基氨基；氰基；硝基；可以被酰基取代的氨基；烷基氨基；环烷基氨基；酰基；羧基；氨基甲酰基；硫代氨基甲酰基；烷基氨基甲酰基和杂环基。
R3、R4、R5和R6的羟基可以被一个或多个选自以下取代基取代可以被保护的羧基、烷基、烷氧基羰基、芳基、环烷基、链烯基、卤代烷基和杂环基。
通式[1]和通式[2]的实例包括已知的碱性基团如氨基或酸性基团如羟基、磷酰基、膦酰基或羧基的盐。碱性基团的盐包括，例如与无机酸如盐酸、氢溴酸和硫酸形成的盐；与有机羧酸形成的盐如酒石酸、甲酸和柠檬酸形成的盐；和与磺酸如甲磺酸、苯磺酸、对甲苯磺酸、均三甲苯基磺酸和萘磺酸形成的盐。酸性基团的盐包括，例如与碱金属如钠和钾形成的盐；与碱土金属钙和镁形成的盐；铵盐；以及与诸如以下的含氮有机碱形成的盐三甲基胺、三乙基胺、三丁基胺、吡啶、N，N-二甲基苯胺、N-甲基哌啶、N-甲基吗啉、二乙基胺、二环己基胺、普鲁卡因、二苄基胺、N-苄基-β-苯乙基胺、1-ephenamine和N，N’-二苄基亚乙基二胺。
而且，当通式[1]、[1v]、[1w]、[1x]、[1y]、[1z]、[2]和[3z]代表的化合物及其盐具有异构体(例如光学异构体、几何异构体、互变异构体等)时，本发明包括这些异构体、溶剂化物、水合物和各种结晶形式。
本发明的病毒生长抑制和/或杀病毒方法适用的病毒的实例可以包括流感病毒、RS病毒、AIDS病毒、乳头瘤病毒、腺病毒、甲型肝炎病毒、乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒、戊型肝炎病毒、脊髓灰质炎病毒、艾柯病毒、柯萨奇病毒、肠病毒、鼻病毒、轮状病毒、新城病病毒、流行性腮腺炎病毒、水疱性口炎病毒、狂犬病病毒、拉萨热病毒、麻疹病毒、丝状病毒、日本脑炎病毒、黄热病病毒、登革热病毒或西尼罗河病毒。优选这些实例可以包括流感病毒、RS病毒、甲型肝炎病毒、丙型肝炎病毒、戊型肝炎病毒、脊髓灰质炎病毒、艾柯病毒、柯萨奇病毒、肠病毒、鼻病毒、轮状病毒、新城病病毒、流行性腮腺炎病毒、水疱性口炎病毒、狂犬病病毒、拉萨热病毒、麻疹病毒、丝状病毒、日本脑炎病毒、黄热病病毒、登革热病毒或西尼罗河病毒。特别优选这些实例可以包括流感病毒和丙型肝炎病毒。
优选本发明的化合物可以包括具有下述取代基的化合物。
在本发明所述的各通式中，优选的R1取代基的实例包括氢原子、卤原子、低级烷基和羟基，更优选氢原子、氟原子和氯原子，进一步更优选氢原子。
优选的R2取代基的实例可以包括氢原子、乙酰基、苯甲酰基、新戊酰基、氨基甲酰基甲基和羧基甲基，更优选氢原子、乙酰基和羧基甲基，进一步更优选氢原子。
R3、R4、R5和R6中的每一个优选的取代基的实例可以包括氢原子和可以被低级烷氧基羰基、乙酰基、苯甲酰基或新戊酰氧基甲基取代的羟基，更优选氢原子和可以被乙酰基或苯甲酰基取代的羟基，进一步更优选氢原子和羟基。
R4z和R6z中的每一个优选的取代基的实例可以包括如关于R4和R6所述的相同的取代基和亚甲基，其中R4z和R6z都可以被取代。
优选的Rz取代基的实例可以包括可以被可被取代的酰基、低级烷氧基羰基或酰氧基烷基取代的羟基，更优选可以被异戊酰基，乙酰基或丙酰基(所述的取代基可以被可被保护的氨基取代)、苯甲酰基，新戊酰基、乙氧基羰基、异丙氧基羰基或新戊酰氧基甲基取代的羟基，进一步更优选可以被可被氨基取代的异戊酰基、乙酰基或苯甲酰基取代的羟基。
R7和R9中的每一个优选的取代基的实例可以包括可以被环水杨基(Saligenyl)、新戊酰氧基甲基、1-新戊酰氧基乙基或S-新戊酰基-2-硫代乙基取代的羟基。
优选的Y取代基的实例可以是氧原子。优选的A取代基的实例可以是氧原子。
具体地，优选的通式[3z]代表的化合物的实例是通式[3z’]代表的化合物 其中Ra代表氢或卤原子；而Rb和Rc中的每一个相同或不同地代表氢原子或羟基保护基，或者Rb和Rc一起代表可以被取代的亚烷基。通式[3z’]中的Ra、Rb和Rc中的每一个代表氢原子的化合物为更优选。
以下所示的化合物是本发明的代表性化合物。式中的代码具有以下含义。
Ac乙酰基，Bz苯甲酰基，Me甲基和Et乙基此外，以下代表性化合物的式中的糖链以通常采用的表达来描述。例如下式代表的化合物的构型
意指下式代表的各化合物


下一步将解释用于生产本发明的化合物的方法。
通式[2]代表的吡嗪核苷酸类似物或其盐可以由已知方法、其等同方法或联合使用这些方法来生产。描述生产方法的出版物的实例包括Antiviral Research，第24卷，第69-77页(1994)；AntiviralChemi stry，第9卷，第389-402页(1998)；Journal of ChemicalSociety Perkin Transaction(J.Chem.Soc.PERKIN TRANS.)第1卷，第1239-1245页(1993)；和美国专利5770725。而且，本发明的化合物还可以根据以下所示的生产方法的路线生产。
其中R1、R2、R7和R8中的每一个具有上述的含义；且Z1、Z2、Z3和Z4相同或不同地代表氢原子或保护羟基，但是当Z1、Z2、Z3和Z4具有与二个或更多个不同的碳原子结合的羟基时，各羟基的氧原子和与各羟基结合的碳原子与保护基一起形成环，从而使它们得到保护。
(a)通式[2a]代表的化合物或其盐可以通过以下方法获得(1)使通式[3a]代表的化合物或其盐与磷酸化试剂在存在或不存在添加剂的情况下反应，或者(2)使相同的以上化合物或其盐与亚磷酸化试剂在存在或不存在添加剂的情况下反应，然后与氧化剂反应，例如根据the4th Jikken Kagaku Koza，第22卷，第313-438页(1992)所述的方法。
在根据以上(1)的方法中，在此反应中所用的溶剂没有特别限定，只要它不影响反应。这种溶剂的实例可以包括芳烃如苯、甲苯或二甲苯；醚如二噁烷、四氢呋喃，茴香醚，二甘醇二乙基醚或二甲基溶纤剂；腈如乙腈；酰胺如N，N二甲基甲酰胺或N，N-二甲基乙酰胺；亚砜如二甲亚砜；磷酸酯如磷酸三甲酯；和吡啶。可以例用一类或多类这些溶剂的组合。
可以在此反应中使用任何磷酸化试剂，只要它通常用于羟基的磷酸化。这种试剂的实例可以包括磷酸二乙酯如磷酸二苄基酯；磷酸二硫代酸酯如S，S’-二苯基二硫代酸酯一环己基铵；和磷酰氯如磷酰氯或甲基氯苯基磷酰基P→N-L-丙氨酸酯。对于通式[3a]代表的化合物或其盐，这种磷酸化试剂可以等摩尔或更大的量使用，更优选以1.0∶1.0-5.0∶1.0的摩尔比使用。
用于此反应的添加剂的实例可以包括偶氮化合物如偶氮二甲酸二乙酯或偶氮二甲酸二异丙酯，膦如三苯基膦，丙二烯磺酰氯如2，4，6-三异丙基苯磺酰氯和碱如吡啶或叔丁基氯化镁。这些可以组合使用。对于通式[3a]代表的化合物或其盐，这种添加剂可以等摩尔或更大的量使用，并更优选以1.0∶1.0-5.0∶1.0的摩尔比使用。
此反应一般可以在-50℃至170℃，优选在0℃至100℃下进行1分钟至72小时，优选5分钟至24小时。
在以上(2)的方法中，此反应中所用的溶剂没有特别限定，只要它不影响反应。这种溶剂的实例可以包括芳烃如苯、甲苯或二甲苯；醚如二噁烷、四氢呋喃、茴香醚、二甘醇二乙基醚或二甲基溶纤剂；腈如乙腈；酰胺如N，N-二甲基甲酰胺或N，N-二甲基乙酰胺；亚砜如二甲亚砜；和吡啶。可以使用一类或多类这些溶剂的组合。
可以在此反应中使用任何亚磷酸化试剂，只要它通常用于羟基的亚磷酸化。这种试剂的实例可以包括亚磷酰胺如二烯丙基二异丙基亚磷酰胺或双(S-新戊酰基-2-硫代乙基)N，N-二异丙基亚磷酰胺和氯化亚磷如二烯丙基氯化偶磷(diallyl phosphorochloridite)。对于通式[3a]代表的化合物或其盐，这种亚磷酸化试剂可以等摩尔或更大的量使用，并更优选以1.0∶1.0-3.0∶1.0的摩尔比使用。
此反应所用的添加剂的实例包括含氮杂环如1H-四唑、4-二甲基氨基吡啶、吡啶或可力丁，且这些可以组合使用。对于通式[3a]代表的化合物或其盐，这种添加剂可以等摩尔或更大的量使用，并更优选以1.0∶1.0-5.0∶1.0的摩尔比使用。
此反应中所用的氧化剂的实例可以包括过氧化物如间氯过苯甲酸或叔丁基氢过氧化物和卤化化合物如碘。对于通式[3a]代表的化合物或其盐，这种氧化剂可以等摩尔或更大的量使用，并更优选以1.0∶1.0-5.0∶1.0的摩尔比使用。
此反应一般可以在-78℃至100℃，优选在-50℃至50℃下进行，并持续1分钟至24小时，优选持续5分钟至6小时。
其中R1、R2、Z1、Z2、Z3和Z4中的每一个具有与上述相同的含义；R10和R11中的每一个相同或不同地代表在生理条件下分解的磷酸保护基；而X代表卤原子。
通式[2b]代表的化合物或其盐可以通过根据诸如Journal ofMedicinal Chemistry，第37卷，第3902-3909页(1994)所述的方法，使通式[3b]代表的化合物或其盐与通式[6a]代表的化合物反应而获得。
此反应中所用的溶剂没有特别限制，只要它不影响反应。这种溶剂的实例可以包括芳烃如苯、甲苯或二甲苯；卤代烃如二氯甲烷或氯仿；醚如二噁烷、四氢呋喃、茴香醚、二甘醇二乙基醚或二甲基溶纤剂；腈如乙腈；酰胺如N，N-二甲基乙酰胺；醇如甲醇、乙醇或丙醇；亚砜如二甲亚砜；和水。可以使用一类或多类这些溶剂的组合。
对于通式[3b]代表的化合物或其盐，通式[6a]代表的化合物以等摩尔或更大的量使用，更优选以1.0∶1.0-3.0∶1.0的摩尔比使用。
这种反应一般可以在0℃-170℃下，优选在20℃-120℃下进行，并持续5分钟至24小时，优选持续1至10小时。
其中R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、Z1、Z2、Z3和Z4中的每一个具有与上述相同的含义。
通式[2c]代表的化合物或其盐可以通过使通式[2a]代表的化合物或其盐进行脱保护反应而获得。
此反应中所用的溶剂没有特别限制，只要它不影响反应。这种溶剂的实例可以包括芳烃如苯、甲苯或二甲苯；醚如二噁烷、四氢呋喃、茴香醚、二甘醇二乙基醚或二甲基溶纤剂；腈如乙腈；酰胺如N，N-二甲基乙酰胺；醇如甲醇、乙醇或丙醇；亚砜如二甲亚砜；和水。可以使用一类或多类这些溶剂的组合。
在此反应中可以使用任何通常用于羟基的脱保护的脱保护剂，且这种试剂的优选的实例可以包括碱如甲醇钠、氨气、氨水、丁基胺或肼；酸如甲酸、乙酸水溶液、三氟乙酸水溶液、氢氯酸、溴三甲基硅烷、Dowex 50WX4-200离子交换树脂或Amberlite IR-120离子交换树脂；钯催化剂如四三苯基膦钯(O)；和膦三苯基膦。这些试剂可以组合使用，或者可以在反应体系中生产。对于通式[2a]代表的化合物或其盐，这种脱保护剂可以0.01∶1或更在的摩尔比使用，且该脱保护剂也可以用作溶剂。
此脱保护反应一般可以在-50℃至170℃下，优选在-20℃至100℃下进行，并持续1分钟至100小时，优选持续5分钟至50小时。
其中R1、R7、R8、Z1、Z2、Z3和Z4中的每一个具有与上述相同的含义；且R2a代表酰基。
通式[2d]代表的化合物或其盐可以根据例如Jikken Kagaku Koza，第4版，第22卷，第137-151页和第166-169页(1992)；Journal ofMedicinal Chemistry，第44卷，第777-786页(2001)或JP-A-10-195075所述的方法，使通式[2a’]代表的化合物或其盐在脱酸试剂存在下，在存在或不存在添加剂的情况下进行酰基化反应而获得。
此反应中所用的溶剂没有特别限制，只要它不影响反应。这种溶剂的实例可以包括醚如二噁烷、四氢呋喃、茴香醚、二甘醇二乙基醚或二甲基溶纤剂；芳烃如苯、甲苯或二甲苯；卤代烃如二氯甲烷、氯仿或二氯乙烷；酰胺如N，N-二甲基甲酰胺或N，N-二甲基乙酰胺；和水。这些溶剂也可以组合使用。
此反应中所用的酰基化试剂的实例可以包括羧酸如乙酸；受保护的氨基酸如N-(叔丁氧基羰基)-L-缬氨酸；酸卤化物如新戊酸氯化物；酸酐如乙酸酐；咪唑如1，1’-羰基二咪唑；羧酸酯如乙酸甲酯；和酰胺缩醛如N，N-二甲基乙酰胺二甲基缩醛。这些试剂可以在反应体系中生产。对于通式[2a’]代表的化合物，这种酰基化试剂可以等摩尔或更大的量使用，并优选以1.0∶1.0-2.0∶1.0的摩尔比使用。
此反应中所用的脱酸试剂的实例可以包括吡啶、三乙基胺、氢化钠、叔丁醇钾、碳酸钾和碳酸氢钠。对于通式[2a’]代表的化合物，这种脱酸试剂可以等摩尔或更大量使用，并优选以1.0∶1.0-2.0∶1.0的摩尔比使用。
此反应中所用的添加剂的实例可以包括1，3-二环己基碳化二亚胺、偶氮二甲酸二乙酯和三苯基膦。对于通式[2a’]代表的化合物，这种添加剂可以等摩尔或更大的量使用，并优选以1.0∶1.0-2.0∶1.0的摩尔比使用。
此反应一般可以在0℃-100℃下，优选在20℃-60℃下进行，并持续5分钟至24小时，优选持续30分钟至10小时。
其中R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7和R8具有与上述相同的含义。
通式[2e]代表的化合物或其盐可以通过根据例如Jikken KagakuKoza，第4版，第22卷，第371-424页(1992)；和Journal ofMedicinal Chemistry(J.Med.Chem)，第38卷，第1372-1379页(1995)所述的方法，使通式[7b]代表的化合物或其盐与反应试剂在存在或不存在添加剂的情况下反应而获得。
此反应中所用的溶剂没有特别限制，只要它不影响反应。这种溶剂的实例可以包括芳烃如苯、甲苯或二甲苯；醚如二噁烷、四氢呋喃、茴香醚、二甘醇二乙基醚或二甲基溶纤剂；腈如乙腈；酰胺如N，N-二甲基甲酰胺或N，N-二甲基乙酰胺；脲如N，N’-二甲基亚丙基脲；亚砜如-二甲基亚砜；和吡啶。也可以使用一类或多类这些溶剂的组合。
在此反应中可以使用任何在磷酸酯基团的取代反应中常规使用的反应试剂。用于此反应的反应试剂的实例可以包括卤代烷基化合物如新戊酰氧基甲基氯化物或1-(新戊酰氧基)乙基氯化物；醇和苯酚如4-溴苯酚、4-氯苯酚、S-(2-羟基乙基)硫代新戊酸酯或S-(4-羟基丁基)硫代异丁酸酯；和胺如丙氨酸甲酯。对于通式[7b]代表的化合物或其盐，这种反应试剂可以等摩尔或更大的量使用，并优选以1.0∶1.0-5.0∶1.0的摩尔比使用。
在此反应中所用的添加剂的实例可以包括卤化化合物如五氯化磷或碘化钠；含氮杂环化合物如1-甲基咪唑或1，1’-羰基二咪唑；偶氮化合物如偶氮二甲酸二乙酯或偶氮二甲酸二异丙酯；膦如三苯基膦；丙二烯磺酰氯如2，4，6-三异丙基苯磺酰氯；和碱如三乙基胺、吡啶或叔丁基氯化镁。这些添加剂可以组合使用。对于通式[7b]代表的化合物或其盐，这种添加剂可以0.01∶1-10∶1的摩尔比使用，优选以0.05∶1-5.0∶1的摩尔比使用。
反应一般可以在-50℃至170℃，优选在0℃-100℃下进行，并持续1分钟至72小时，优选持续5分钟至24小时。
其中R1、R2、R7、R8、Z1、Z2、Z3、Z4和Y中的每一个具有与上述相同的含义。
式[2i]代表的化合物或其盐可以通过使用通式[3i]代表的化合物或其盐，进行根据生产方法1而获得。
其中R1、R2、Z1、Z2、Z3、Z4、R10、R11、X和Y中的每一个具有与上述相同的含义。
通式[2j]代表的化合物或其盐可以通过使用通式[3j]代表的化合物或其盐，进行根据生产方法2的方法而获得。
其中R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、Z1、Z2、Z3、Z4和Y中的每一个具有与上述相同的含义。
通式[2k]代表的化合物或其盐可以通过使用通式[2i]代表的化合物或其盐，进行根据生产方法3的反应而获得。
其中R1、R2a、R7、R8，Z1、Z2、Z3、Z4和Y中的每一个具有与上述相同的含义。
通式[2m]代表的化合物或其盐可以通过使用通式[2l]代表的化合物或其盐，进行根据生产方法4的反应而获得。
接着将解释用于生产通式[3a]、[3e]和[3f]代表的化合物或其盐的方法。
其中R1、R2、Z1、Z2、Z3和Z4中的每一个具有上述的含义；R12代表低级烷基或芳基；R13代表卤原子、酰氧基、烷基磺酰氧基或芳基磺酰氧基；Z5、Z6、Z7和Z8中的每一个相同或不同地代表氢原子或被保护的羟基；Z9代表氢原子或羟基保护基；而Z10、Z11、Z12和Z13中的每一个相同或不同地代表氢原子或羟基。
(a)通式[3f]代表的化合物或其盐可以通过以下方法获得(1)根据常用的甲硅烷基化方法在存在或不存在添加剂的情况下诱导通式[4b]代表的化合物或其盐成为通式[4a]代表的化合物或其盐，然后(2)使所得的通式[4a]代表的化合物或其盐与通式[6b]代表的化合物或其盐在存在或不存在路易斯酸的情况下反应。
在这些反应中所用的溶剂没有特别限制，只要它不影响反应。这种溶剂的实例可以包括芳烃如苯、甲苯或二甲苯；醚如二噁烷、四氢呋喃、茴香醚、二甘醇二乙基醚或二甲基溶纤剂；腈如乙腈；酰胺如N，N-二甲基甲酰胺或N，N-二甲基乙酰胺；亚砜如二甲亚砜；和卤代烃如二氯甲烷、氯仿或二氯乙烷。可以使用一类或多类这些溶剂的组合。
在以上反应(1)中可以使用任何甲硅烷基化试剂，只要它通常用于将羰基转化为甲硅烷基烯醇醚。这种甲硅烷基化试剂的实例包括1，1，1，3，3，3-六甲基二硅氮烷、N，O-双(三甲基甲硅烷基)乙酰胺和三甲基甲硅烷基氯。对于通式[4b]代表的化合物或其盐，这种甲硅烷基化试剂可以等摩尔或更大量使用，并优选以1.0∶1.0-10.0∶1.0的摩尔比使用。
硫酸铵是此反应中必需使用的添加剂。对于通式[4b]代表的化合物或其盐，这种添加剂可以0.01∶1.0-10.0∶1.0的摩尔比使用，优选以0.05∶1.0-5.0∶1.0的摩尔比使用。
此反应一般可以在0℃-200℃下，优选在0℃-150℃下进行，并持续5分钟至24小时，优选持续5分钟至12小时。
对于通式[4a]代表的化合物或其盐，在以上的反应(2)中所用的通式[6b]代表的化合物或其盐可以0.5∶1-10∶1的摩尔比使用，优选以0.5∶1-5∶1的摩尔比使用。
在此反应中必需使用的路易斯酸的实例可以包括三氟甲磺酸三甲基甲硅烷基酯、氯化锡(IV)、氯化钛(IV)和氯化锌。对于通式[4a]代表的化合物或其盐，这种路易斯酸可以0.5mole或更大的量使用，优选以0.5∶1-10∶1的摩尔比使用。
此反应一般可以在0℃-100℃下，优选在0℃-50℃下进行，并持续1分钟至72小时，优选持续5分钟至24小时。
(b)通式[3e]代表的化合物或其盐可以通过使用通式[3f]代表的化合物或其盐，进行根据生产方法3的反应而获得。
(c)通式[3a]代表的化合物或其盐可以通过在存在或不存在酸催化剂或碱的情况下使用试剂保护通式[3e]代表的化合物或其盐而获得。
在此反应中所用的溶剂没有特别限制，只要它不影响反应。这种溶剂的实例可以包括芳烃如苯、甲苯或二甲苯；醚如二噁烷、四氢呋喃、茴香醚、二甘醇二乙基醚或二甲基溶纤剂；腈如乙腈；酰胺如N，N-二甲基乙酰胺；醇如甲醇、乙醇或丙醇；亚砜如二甲亚砜；酮如丙酮；和水。可以使用一类或多类这些溶剂的组合。
可以在此反应中使用任何常用于羟基保护的试剂。优选的实例包括2，2-二甲氧基丙烷、乙酰氯和苯甲酰氯。这些试剂还可以在反应体系中生产。对于通式[3e]代表的化合物或其盐，这种试剂可以等摩尔或更大的量使用，并优选以1.0∶1.0-10∶1.0的摩尔比使用。
此反应中所用的酸催化剂或碱的实例可以包括吡啶鎓对甲苯磺酸盐、对甲苯磺酸和三乙基胺。对于通式[3e]代表的化合物或其盐，这种酸催化剂或碱可以0.01∶1-10∶1的摩尔比使用，优选以0.05∶1-10∶1的摩尔比使用。
此反应一般可以在-50℃至170℃下，优选在0℃至150℃下进行，并持续1分钟至24小时，优选持续5分钟至10小时。
通式[4b]代表的化合物或其盐可以通过购买可商购的产品而获得，或者可以通过已知的方法、其等同方法或它们的组合应用而生产。所述的生产物方法描述在诸如以下的出版物中Journal of AmericanChemical Society(J.Am.Chem.Soc.)，第71卷，第78页(1949)；相同的出版物，第78卷，第242-244页(1956)；Journal ofHeterocyclic Chemistry(J.Heterocyd.Chem.)，第15卷，第4期，第665-670页(1978)；Journal of Chemical Society(J.Chem.Soc.)，第1379页(1955)；美国专利5597823；或国际专利公开WO00/10569。
下面，将解释用于生产通式[3b]代表的化合物或其盐的方法。
其中R9代表烷基；而R1、R2、R12、R13、Z1、Z2、Z3、Z4、Z5、Z6、Z7、Z8、Z9、Z10、Z11、Z12、Z13和X中的每一个具有与上述相同的含义。
(a)通式[3h]代表的化合物或其盐可以通过使用通式[4d]代表的化合物或其盐，进行根据生产方法A(a)的反应而获得。
(b)通式[3g]代表的化合物或其盐可以通过使用通式[3h]代表的化合物或其盐，进行根据生产方法3的反应而获得。
(c)通式[3d]代表的化合物或其盐可以通过使用通式[3g]代表的化合物或其盐进行根据生产方法A(c)的反应而获得。
(d)通式[3c]代表的化合物或其盐可以通过以下方法获得根据例如Jikken Kagaku Koza，第4版，第19卷，第416-482页(1992)所述的方法，(1)在存在或不存在添加剂的情况下使通式[3d]代表的化合物或其盐与卤化剂反应，或者(2)在存在脱酸试剂的情况下使相同的化合物或其盐与磺化剂反应，然后与卤化剂反应。
在根据以上(1)的方法中，用于此反应的溶剂没有特别限制，只要它不影响反应。这种溶剂的实例可以包括芳烃如苯、甲苯或二甲苯；卤代烃如二氯甲烷、氯仿；醚如二噁烷、四氢呋喃、茴香醚、二甘醇二乙基醚或二甲基溶纤剂；腈如乙腈；酰胺如N，N-二甲基甲酰胺或N，N-二甲基乙酰胺；醇如甲醇、乙醇或丙醇；亚砜如二甲亚砜；和水。可以使用一类或多类这些溶剂的组合。
在此反应中所用的卤化剂没有特别限制，只要它是常用于羟基的卤化反应的试剂。这种卤化剂的优选的实例可以包括碘、溴、氯、氢碘酸、氢溴酸、溴化钠、溴化钾、磺酰氯、N-溴琥珀酰亚胺、N-氯琥珀酰亚胺、四溴化碳或磷化合物如三苯基碘膦酸酯。对于通式[3d]代表的化合物或其盐，这种卤化剂可以1∶1-50∶1的摩尔比使用，优选以1∶1-20∶1的摩尔比使用。
用于此反应的必需的添加剂没有特别限制，只要它是常用于羟基的卤化反应的试剂。这种添加剂的优选的实例可以包括膦如三苯基膦；偶氮化合物如偶氮二甲酸二乙酯；和甲硅烷如三甲基甲硅烷基氯化物或六甲基二甲硅烷。可以使用一类或多类这些添加剂的组合。对于通式[3d]代表的化合物或其盐，这种添加剂可以0.01∶1-10∶1的摩尔比使用，优选以0.1∶1-10∶1的摩尔比使用。
此反应一般可以在-80℃至170℃下，优选在-80℃至100℃下进行，并持续1分钟至72小时，优选持续5分钟至48小时。
在根据以上(2)的方法中，在磺化反应中所用的溶剂没有特别限制，只要它不影响反应。这种溶剂的实例可以包括芳烃如苯、甲苯或二甲苯；卤代烃如二氯甲烷或氯仿；醚如二噁烷、四氢呋喃、茴香醚、二甘醇二乙基醚或二甲基溶纤剂；腈如乙腈；酰胺如N，N-二甲基甲酰胺或N，N-二甲基乙酰胺；醇如甲醇、乙醇或丙醇；亚砜如二甲亚砜；和水。可以使用一类或多类这些溶剂的组合。
在此反应中所用的磺化剂没有特别限制，只要它是常用于羟基的磺化反应的试剂。这种磺化剂的优选的实例可以包括卤代磺酰基如甲磺酰氯或对甲苯磺酰氯；磺酸酐如三氟甲烷磺酸酐；和磺酸如三氟甲磺酸。对于通式[3d]代表的化合物或其盐，这种磺化剂可以1∶1-20∶1的摩尔比使用，优选以1.0∶1.0-5.0∶1.0的摩尔比使用。
用于此反应的必需脱酸试剂没有特别限制，只要它是常用于羟基的磺化反应的试剂。这种脱酸试剂的优选的实例可以包括碱如吡啶、2，6-二甲基吡啶、三乙基胺或甲醇钠，并可以使用一类或多类这些脱酸试剂的组合。对于通式[3d]代表的化合物或其盐，这种脱酸试剂可以0.01∶1-20∶1的摩尔比使用，并优选以0.1∶1-10∶1的摩尔比使用。
此反应一般可以在-80℃至100℃下，优选在-20℃至50℃下进行，并持续1分钟至24小时，优选持续5分钟至12小时。
用于卤化反应的溶剂没有特别限制，只要它不影响反应。这种溶剂的实例可以包括芳烃如苯、甲苯或二甲苯；卤代烃如二氯甲烷或氯仿；醚如二噁烷、四氢呋喃、茴香醚、二甘醇二乙醚或二甲基溶纤剂；腈如乙腈；酰胺如N，N-二甲基甲酰胺或N，N-二甲基乙酰胺；酮如丙酮；醇如甲醇、乙醇或丙醇；亚砜如二甲亚砜；和水。可以使用一类或多类这些溶剂的组合。
用于此反应的卤化剂没有特别限制，只要它是常用于磺酸酯基的卤化反应的试剂。这种卤代剂的优选的实例可以包括溴化钠、碘化钠、碘化钾和碘化镁。对于通式[3d]代表的化合物或其盐，这种卤化剂可以1∶1-50∶1的摩尔比使用，并优选以1∶1-20∶1的摩尔比使用。
此反应一般可以在-80℃至170℃下，优选在-80℃至100℃下进行，并持续1分钟至72小时，优选持续5分钟至12小时。
(e)通式[3b]代表的化合物或其盐可以通过在存在或不存在催化剂的情况下使通式[3c]代表的化合物或其盐进行羧酸酯的氨解反应而获得。
此反应中所用的溶剂没有特别限制，只要它不影响反应。这种溶剂的实例可以包括芳烃如苯、甲苯或二甲苯；卤代烃如二氯甲烷或氯仿；醚如二噁烷、四氢呋喃、茴香醚、二甘醇二乙醚或二甲基溶纤剂；腈如乙腈；酰胺如N，N-二甲基甲酰胺或N，N-二甲基乙酰胺；醇如甲醇、乙醇或丙醇；亚砜如二甲亚砜；和水。可以使用一类或多类这些溶剂的组合。此反应可以使用在芳香羧酸酯的氨解反应中常用的试剂和条件完成。可以优选使用氨气、液体氨或氨水。对于通式[3c]代表的化合物或其盐，这种试剂可以等摩尔或更大量使用。此外，所述试剂还可以用作溶剂。用于此反应的必需催化剂的实例可以包括酸性铵盐如氯化铵；碱如甲醇钠或丁基锂；和碱金属酰胺如酰胺钠。对于通式[3c]代表的化合物或其盐，这种催化剂可以0.01∶1-100∶1的摩尔比使用，优选以0.01∶1-20∶1的摩尔比使用。
此反应一般可以在-100℃至250℃下，优选在-78℃至100℃下进行，并持续1分钟至72小时，优选持续30分钟至50小时。
通式[4d]代表的化合物或其盐可以通过购买可商购的产品而获得，或者可以通过已知的方法、等同的方法或它们的联合应用生产。以上关于通式[4b]代表的化合物的生产方法所述的出版物是描述通式[4d]代表的化合物或其盐的生产方法的出版物的实例。
接着将解释用于生产通式[7b]代表的化合物或其盐的方法。
其中R1、R2、R3、R4、R5、R6、R9、Z1、Z2、Z3和Z4中的每一个具有与上述相同的含义。
(a)通式[8d]代表的化合物或其盐可以通过使用通式[8a]代表的化合物或其盐进行根据生产方法3的反应而获得。
(b)通式[7b]代表的化合物或其盐可以通过以下方法获得(1)根据生产方法3将通式[8d]代表的化合物或其盐脱保护，然后根据生产方法B(e)将所得的化合物酰胺化；或者(2)根据生产方法B(e)将以上的化合物或其盐酰胺化，然后根据生产方法3将所得的产物脱保护。
(c)通式[8b]代表的化合物或其盐可以通过使用通式[8c]代表的化合物或其盐进行根据生产方法4的反应而获得。
(d)通式[8f]代表的化合物或其盐可以通过根据生产方法3将通式[8b]代表的化合物脱保护而获得。
下面，将解释用于生产通式[8a]和[8b’]代表的化合物或其盐的方法。
其中R1、R2、R1、R9、R12、R13、Z1、Z2、Z3和Z4中的每一个具有与上述相同的含义。
(a)通式[8a]代表的化合物或其盐可以通过根据生产方法B(a)，使通式[9a]代表的化合物或其盐与通式[10a]代表的化合物或其盐反应而获得。
(b)通式[8b’]代表的化合物或其盐可以通过根据生产方法B(a)，使通式[9c]代表的化合物或其盐与通式[10a]代表的化合物或其盐反应而获得。
下面，将解释用于生产通式[10a]代表的化合物或其盐的方法。
其中R9、R13、Z1、Z2、Z3、Z4、Z10、Z11、Z12和Z13中的每一个具有与上述相同的含义。
(a)通式[10c]代表的化合物或其盐可以通过使用通式[10b]代表的化合物或其盐进行根据生产方法A(c)的反应而获得。
(b)通式[10a]代表的化合物或其盐可以通过根据如Journal ofOrganic Chemistry(J.Org.Chem.)第55卷，第3853-3857页(1990)所述的方法，使通式[10c]代表的化合物或其盐进行取代反应而获得。
用于此反应的溶剂没有特别限制，只要它不影响反应。这种溶剂的实例可以包括芳烃如苯、甲苯或二甲苯；卤代烃如二氯甲烷或氯仿；醚如二噁烷、四氢呋喃、茴香醚、二甘醇二乙基醚或二甲基溶纤剂；腈如乙腈；酰胺如N，N-二甲基乙酰胺；醇如甲醇、乙醇或丙醇；亚砜如二甲亚砜；和水。可以使用一类或多类这些溶剂的组合。
用于此反应的反应试剂可以是常用于酸性条件下的内半缩醛的取代反应的反应试剂。这种反应试剂的实例可以包括有机酸和酸酐如乙酸或乙酸酐；无机酸如氯化氢气体、盐酸、氢溴酸、硫酸或氢氟酸；卤素化合物如氯或溴；路易斯酸如四溴化钛或氯三甲基甲硅烷；和硫代化合物如硫代苯酚或甲硫基三甲基甲硅烷。对于通式[10c]代表的化合物或其盐，这种反应试剂可以1∶1-20∶1的摩尔比使用，优选以1∶1-10∶1的摩尔比使用，并可以用作溶剂。
此反应一般可以在0℃-200℃下，优选在0℃-100℃下进行，并持续5分钟至48小时，优选持续30分钟至24小时。
通式[10b]代表的化合物可以根据Journal of Chemical SocietyChemical Communication(J.Chem.Soc.，Chem.Commun.)第40-41页(1989)所述的方法获得。
下面，将解释用于化学合成其中的A为氧原子的通式[1]代表的吡嗪核苷酸类似物的方法。
其中R1、R2、R3、R4、R5、R6、Z1、Z2、Z3和Z4具有与上述相同的含义；R14代表可以被保护的一磷酸酯基或一磷氯化物；而R15代表可以被保护的二磷酸酯酸或三磷酸酯基。
(a)通式[5c]代表的化合物或其盐可以通过使用通式[3v]代表的化合物或其盐，进行根据生产方法3的反应而获得。
(b)通式[5b]代表的化合物或其盐可以通过使用通式[5c]代表的化合物或其盐进行根据生产方法1的反应而获得。
(c)通式[5a]代表的化合物或其盐可以通过根据如ChemicalReview(Chem.Rev.)，第100卷，第2047-2059页(2000)；Journal of有机Chemistry(J.Org Chem.)，第55卷，第1834-1841页(1990)；或Acta Biochimica Biophysica AcademiaScientiarum Hungaricae(Acta Biochim.et Biophys.Acad.Sci.Hung.)，第16卷，第131-133页(1981)所述的方法，在存在或不存在缩合剂的情况下，使通式[5b]代表的化合物与磷酸化试剂反应而获得。
用于此反应的溶剂没有特别限制，只要它不影响反应。这种溶剂的实例可以包括芳烃如苯、甲苯或二甲苯；醚如二噁烷、四氢呋喃、茴香醚、二甘醇二乙基醚或二甲基溶纤剂；腈如乙腈；酰胺如N，N-二甲基甲酰胺或N，N-二甲基乙酰胺；亚砜如二甲基亚砜；磷酸酯如磷酸三甲酯；和吡啶。可以使用一类或多类这些溶剂的组合。
用于此反应的磷酸化试剂可以是常用于一磷酸酯基的磷酸化的磷酸化试剂。这种磷酸化试剂的实例可以包括磷酸盐如三正丁基磷酸铵或三正丁基焦磷酸铵。这些试剂也可以在反应体系中生产。对于通式[5b]代表的化合物或其盐，这种磷酸化试剂可以等摩尔或更大的量使用，优选以1∶1-10∶1的摩尔比使用。缩合试剂的实例可以包括咪唑如1，1’-羰基二咪唑或N-甲基咪唑以及胺如吗啉或二异丙基胺。也可以使用这些试剂的组合。对于通式[5b]代表的化合物或其盐，这种缩合试剂可以等摩尔或更大的量使用，并优选以1∶1-5∶1的摩尔比使用。
此反应一般可以在-50℃至100℃下，优选在0℃至50℃下进行，并持续1分钟至72小时，优选持续5分钟至24小时。
(d)通式[5a]代表的化合物或其盐可以通过使用通式[5c]代表的化合物或其盐，进行根据生产方法F(c)的反应而获得。
(e)通式[5a]代表的化合物或其盐可以通过以下方法获得根据生产方法1使通式[3v]代表的化合物或其盐进行反应以诱导成为通式[5c]代表的化合物或其盐，然后根据生产方法F(d)使所得到化合物或其盐在相同的体系中反应。
其中R1、R2、R12、R13、Rz、Z1、Z2、Z3、Z4、Z5、Z6、Z7、Z8、Z9、Z10、Z11、Z12、Z13和Y中的每一个具有与上述相同的含义。
(a)通式[3l]、[3m]和[3i]代表的化合物或其盐可以通过使用通式[4f]代表的化合物或其盐进行根据生产方法A的反应而获得。
(b)通式[3n]代表的化合物可以通过使用通式[3i]代表的化合物或其盐进行根据生产方法4的反应而获得；或者它可以通过根据如Shin Jikken Kagaku Koza，第14卷，第567-587页(The ChemicalSociety of Japan编，1977)所述的方法，在存在或不存在酸或碱的情况下使通式[3i]代表的化合物或其盐发生烷基化而获得。
用于此反应的溶剂没有特别限制，只要它不影响反应。这种溶剂的实例可以包括醚如二噁烷、四氢呋喃、茴香醚、二甘醇二乙基醚或二甲基溶纤剂；芳烃如苯、甲苯或二甲苯；卤代烃如二氯甲烷、氯仿或二氯乙烷；酰胺如N，N-二甲基甲酰胺或N，N-二甲基乙酰胺；亚砜如二甲基亚砜；和水。可以使用这些试剂的组合。
用于此反应的烷基化试剂的实例可以包括卤代烷基如苄基溴；酯如硫酸二乙酯；二偶氮化合物如联苯二偶氮甲烷；烯烃如2-甲基丙烯；和酰胺缩醛如N，N二甲基乙酰胺二甲基缩醛。对于通式[3i]代表的化合物，这种烷基化试剂可以等摩尔或更大的量使用，优选以1.0∶1.0-2.0∶1.0的量使用。
用于此反应的酸的实例可以包括对甲苯磺酸和硫酸。用于此反应的碱的实例可以包括三乙基胺、甲醇钠、氢化钠、叔丁醇钾、碳酸钾和金属钠。对于通式[3i]代表的化合物或其盐，这种酸或碱可以等摩尔或更大的量使用，优选以1.0∶1.0-2.0∶1.0的摩尔比使用。
此反应一般可以在0℃至100℃下，优选在20℃至60℃下进行，并持续5分钟至24小时，优选持续30分钟至10小时。
(c)通式[3o]代表的化合物或其盐可以通过使用通式[3n]代表的化合物或其盐，进行根据生产方法3的反应而获得。
(d)通式[3j’]代表的化合物或其盐可以通过使用通式[3m]代表的化合物或其盐，进行根据生产方法B(d)的反应而获得。
其中R1、R2、Z5、Z6、Z7、Z8、Z10、Z11、Z12、Z13和Y中的每一个具有与上述相同的含义；R14代表氨基保护基；而R18代表可以被保护的氨基酸残基。
(a)通式[3p]代表的化合物或其盐可以通过根据常规方法，如Protective Groups in Organic Synthesis，第3版，Theodora W.Greene，第494-653页(1999)所述的方法，使通式[3n’]代表的化合物或其盐与脱保护剂在存在或不存在催化剂的情况下反应而获得。
用于此反应的溶剂没有特别限制，只要它不影响反应。这种溶剂的实例可以包括水；醇如甲醇、乙醇或丙醇；硫醇如乙烷硫醇或硫代苯酚；芳烃如苯，甲苯或二甲苯；卤代烃如二氯甲烷、氯仿或1，2-二氯乙烷；醚如二噁烷、四氢呋喃、茴香醚、二甘醇二乙基醚或二甲基溶纤剂；硫醚如二甲基硫醚；酮如丙酮或甲基乙基酮；腈如乙腈；酰胺如N，N-二甲基甲酰胺或N，N-二甲基乙酰胺；亚砜如二甲基亚砜；无机酸如硫酸或盐酸；羧酸如乙酸或三氟乙酸；磺酸如三氟甲磺酸；硝基链烷如硝基甲烷；和有机碱如吡啶或三乙基胺。可以使用一类或多类这些溶剂的组合。
用于此反应的脱保护剂没有特别限制，且这里可以使用在受保护的氨基的脱保护中常用的脱保护剂。这种脱保护剂的优选的实例可以包括氢气体；甲酸铵；锌；钠；酸性氯化物如氯甲酸乙烯酯或乙酰氯；有机甲硅烷如三乙基硅烷或三甲基甲硅烷基碘；三丁基氢化锡；碱金属醇盐如叔丁醇钾；碱金属硫醇盐如硫代甲醇钠；2，3-二氯-5，6-二氰基-1，4-苯醌；硼氢化钠；碱金属盐如氟化钾或碘化钠；路易斯酸如三溴化硼、氯化铝、氯化钌或氯化锌；无机酸如盐酸、氢溴酸或硫酸；有机酸如三氟乙酸、甲磺酸或对甲苯磺酸；无机碱如碳酸钾、碳酸氢钠或氢氧化钠；有机碱如哌啶；胺如氨或肼；有机锂如甲基锂；硝酸铯二铵；和过氧化物如过氧化氢、臭氧或高锰酸。对于通式[3n’]代表的化合物或其盐，这种脱保护剂可以0.01∶1-1000∶1的摩尔比使用，优选以0.1∶1-100∶1的摩尔比使用。
用于此反应的的必需催化剂没有特别限制，只要它常用于受保护的氨基的脱保护。这种催化剂的优选的实例可以包括钯催化剂如钯-碳；铑；阮内镍；和氧化铂(IV)。对于通式[3n’]代表的化合物，可以使用重量比0.01∶1-10∶1，优选0.01∶1-5∶1的催化剂如钯-碳或阮内镍。对于通式[3n’]代表的化合物或其盐，可以使用摩尔比为0.01∶1-10∶1，优选0.01∶1-5∶1的除了钯-碳和阮内镍之外的催化剂。
此反应一般可在以-80℃至200℃下，优选在0℃至160℃下完成，并持续1分钟至48小时，优选持续5分钟至12小时。
(b)通式[3o’]代表的化合物或其盐可以通过使用通式[3p]代表的化合物或其盐进行根据生产方法3的反应而获得。
(c)通式[3q]代表的化合物或其盐可以通过使用通式[3n’]代表的化合物或其盐，进行根据生产方法3的反应而获得。
(d)通式[3o’]代表的化合物或其盐可以通过使用通式[3q]代表的化合物或其盐，进行根据生产方法H(a)的反应而获得。
(e)通式[3o’]代表的化合物或其盐可以通过使用通式[3n’]代表的化合物或其盐，进行根据生产方法3或生产方法H(a)的反应而获得。
其中R1、R2a、Z5、Z6、Z7、Z8、Z9、Z10、Z11、Z12、Z13和Y中的每一个具有与上述相同的含义。
(a)通式[3l’]代表的化合物或其盐可以通过使用通式[3r]代表的化合物或其盐进行根据生产方法4的反应而获得。
(b)通式[3m’]代表的化合物或其盐可以通过使用通式[3l’]代表的化合物或其盐进行根据生产方法3的反应而获得。
其中R1、R2和R12中的每一个具有与上述相同的含义。
(a)通式[4h]代表的化合物或其盐可以通过根据如Shin JlkkenKagaku Koza，第14卷，第1599-1602页(1978)所述的方法，在存在或不存在酸催化剂的情况下使通式[4g]代表的化合物或其盐与醇反应而获得。
此反应中所用的溶剂没有特别限制，只要它不影响反应。这种溶剂的实例可以包括芳烃如苯、甲苯或二甲苯；卤代烃如二氯甲烷、氯仿或二氯乙烷；醚如二噁烷、四氢呋喃、茴香醚、二甘醇二乙基醚或二甲基溶纤剂；酰胺如N，N-二甲基甲酰胺或N，N-二甲基乙酰胺；和亚砜如二甲基亚砜。可以使用一类或多类这些溶剂的组合。
用于此反应的醇的实例可以包括甲醇、乙醇和苯酚。对于通式[4g]代表的化合物或其盐，这种醇可以等摩尔或更大的量使用。而且，醇还可以用作溶剂。
常用于腈的亚胺基化的试剂可以用作此反应中所用的酸催化剂。氯化氢是这种酸催化剂的一个实例。对于通式[4g]代表的化合物或其盐，这种酸催化剂可以0.1∶1或更大的摩尔比使用。
用于此反应的碱的实例可以包括金属醇盐如甲醇钠、乙醇钠或酚钠。这些碱也可以在反应体系中生产。对于通式[4g]代表的化合物或盐，这种碱可以0.01∶1或更大的摩尔比使用，优选以1.0∶1.0-5.0∶1.0的摩尔比使用。
此反应一般可以在-78℃至170℃下，优选在-40℃至120℃下进行，并持续1分钟至72小时，优选持续5分钟至24小时。
(b)[4f’]代表的化合物或其盐可以通过根据如Shin JikkenKagaku Koza，第14卷，第1614-1617页(1978)所述的方法使通式[4h]代表的化合物或其盐与试剂反应而获得。
用于此反应的溶剂没有特别限制，只要它不影响反应。这种溶剂的实例可以包括芳烃如苯、甲苯或二甲苯；卤代烃如二氯甲烷、氯仿或二氯乙烷；醚如二噁烷、四氢呋喃、茴香醚、二甘醇二乙基醚或二甲基溶纤剂；酰胺如N，N-二甲基甲酰胺或N，N-二甲基乙酰胺；和亚砜如二甲亚砜。可以使用一类或多类这些溶剂的组合。
可以在此反应中使用常用于imidate的脒化的试剂。这种试剂的实例可以包括氨气体、氨醇溶液、氨水或酸性铵盐如氯化铵；和可以被保护的氨基酸，如甘氨酸乙酯或其盐。对于通式[4h]代表的化合物或其盐，这种试剂可以等摩尔或更大的量在此反应中使用，而且它还可以用作溶剂。
此反应一般可以在-78℃至170℃下，优选在0℃-120℃进行，并持续1分钟至72小时，优选持续5分钟至24小时。
其中R1、R2和R9中的每一个具有与上述相同的含义。
通式[4b]代表的化合物或其盐可以通过在存在或不存在催化剂的情况下使通式[4i]代表的化合物或其盐发生缩合反应而获得。
用于此反应的溶剂没有特别限制，只要它不影响反应。这种溶剂的实例可以包括芳烃如苯、甲苯或二甲苯；卤代烃如二氯甲烷或氯仿；醚如二噁烷、四氢呋喃、茴香醚、二甘醇二乙基醚或二甲基溶纤剂；腈如乙腈；酰胺如N，N-二甲基甲酰胺或N，N-二甲基乙酰胺；醇如甲醇、乙醇或丙醇；亚砜如二甲基亚砜；和水。可以使用一类或多类这些溶剂的组合。此反应可以使用在使用芬香羧酸酯和胺的缩合反应中所用的试剂和条件。这里优选使用的胺的实例可以包括氨如氨气体、液体氨或氨水和伯胺如L-天门冬氨酸二乙酯。对于通式[4i]代表的化合物或其盐，这种胺可以等摩尔或更大的量使用。本发明中所用的必需催化剂的实例可以包括酸性铵盐如氯化铵；碱如三乙基胺、甲醇钠或丁基锂；和碱金属酰胺如酰胺钠。对于通式[4i]代表的化合物或其盐，这种催化剂可以0.01∶1-100∶1的摩尔比使用，优选以0.01∶1-20∶1的摩尔比使用。
此反应一般可以在-100℃至250℃，优选在-78℃至100℃的温度下进行，并持续1分钟至72小时，优选持续30分钟至50小时。
其中R1、R2a和Y中的每一个具有与上述相同的含义。
通式[4f”]代表的化合物或其盐可以通过使用通式[4j]代表的化合物或其盐进行根据生产方法4的反应而获得。
其中R1、R2、R3、R4、R5、R6、R9、Rz、Z1、Z2、Z3和Z4中的每一个具有与上述相同的含义。
(a)通式[3t]代表的化合物或其盐可以通过使用通式[3d]代表的化合物或其盐进行根据生产方法G(b)的反应而获得。
(b)通式[3s]代表的化合物或其盐可以通过使用通式[3t]代表的化合物或其盐进行根据生产方法3的反应而获得。
(c)通式[3a’]代表的化合物或其盐可以通过使用通式[3s]代表的化合物或其盐进行根据生产方法K的反应而获得。
其中R1、R2、R5、R6、R7、R8、R9、R10、R11、R12、R13和Y中的每一个具有与上述相同的含义。
通式[3u]代表的化合物或其盐可以通过使用通式[3l]代表的化合物或其盐进行根据生产方法3的反应而获得。
当由以上的生产方法获得的化合物具有异构体(例如光学异构体、几何异构体、互变异构体等)时，也可以使用这些异构体。此外，也可以使用溶剂化物、水合物和多种结晶形式。而且在完成本发明之后，可以将有用的反应产物直接用于以下的反应而不将它分离。
如果以上生产方法获得的化合物具有氨基、羟基或羧基，则这些基团还可以事先用常规的保护基保护，并在完成反应之后通过常规方法除去保护基。
通式[1]代表的化合物或其盐可以根据常规方法如萃取、结晶或柱色谱法分离、纯化或重结晶。
当本发明的化合物用作药物时，它可以由常规方法，使用常规药剂中所用的药物载体制备成为药物组合物。这里可以使用多种类型的常用于普通制药的载体，如赋形剂、粘合剂、崩解剂、润滑剂、着色剂、矫味剂、调味剂或表面活性剂。
本发明化合物的给药没有特别限制，但它可以根据治疗目的而适宜地选择。更为具体地，这种给药形式的实例可以包括肠胃外试剂如注射液、栓剂或外部制剂(软膏、热敷剂等)；气溶胶；和口服药如片剂、散剂、细颗粒、粒剂、胶囊、液体、丸剂、悬浮液、糖浆或乳剂。
可以由常规方法将上述的多种类型的试剂制成药物。
当将本发明的化合物制成用于口服的固体药剂如片剂、散剂、细颗粒或粒剂时，这里所用的载体的实例可以包括赋形剂(乳糖、蔗糖、氯化钠、葡萄糖、淀粉、碳酸钙、高龄土、结晶纤维素、磷酸氢钙酸酐、海藻酸等)；粘合剂(单糖浆、葡萄糖溶液、淀粉溶液、明胶溶液、聚乙二醇、聚乙烯基醚、聚乙烯吡咯烷酮、羧甲基纤维素、虫胶、甲基纤维素、乙基纤维素、藻酸钠、阿拉伯胶、羟丙基甲基纤维素、羟丙基纤维素、它们的水和/或乙醇溶液等)；崩解剂(淀粉、海藻酸、交联聚乙烯吡咯烷酮、交联羧甲基纤维素钠、羧甲基纤维素钙、羟乙酸淀粉钠等)；释放控制剂(高级脂肪酸、高级脂肪醇、可可油、氢化油、水溶液性聚合物、溶于胃液的聚合物、溶于肠液的聚合物等)；和润滑剂(纯化的滑石、硬脂酸盐、硅酸、聚乙二醇等)。
如果需要的话，可以将片剂转化成包有常规包衣的片剂，例如糖包衣片、明胶包衣片、包有溶于胃液的包衣的片剂、包有溶于肠液的包衣的片剂或包有水溶性薄膜的片剂。
可以通过以下方法制备胶囊将化合物与上述的多种类型的载体混合，然后将所得的混合物填充到硬明胶胶囊、软胶囊等。
液体药物可以是水或油悬浮液、溶液、糖浆或酏剂，而且这些药物可以通过常规方法使用常规添加剂制备。
当将本发明的化合物制备成为注射剂时，这里所用的载体的实例可以包括稀释剂(水、乙醇、聚乙二醇(Macrogol)、丙二醇等)；pH控制剂或缓冲剂(柠檬酸、乙酸、磷酸、乳酸和它们的盐、硫酸、氢氧化钠等)；和稳定剂(焦亚硫酸钠、亚乙基二胺四乙酸、巯基乙酸、硫代乳酸等)。在这种情况下，在药物组合物中可以包含足量的常规的盐、葡萄糖、甘露糖醇或甘油以制备等渗溶液。此外，可以往其中加入常规的增溶剂、缓和剂或局部麻醉剂。
可以根据患者的年龄、体重和症状来适宜地选择给药方法、剂量和服药次数。当患者为成人时，本发明的化合物可以0.1-1000mg/kg的剂量，每天一次或分成多次进行口服或肠胃外给药(例如注射、输注、对直肠给药等)本发明的病毒生长抑制和/或杀病毒方法的特征在于它包括以下步骤。
其中R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、Rz、A和Y中的每一个具有与上述相同的含义。
步骤A通式[2]代表的吡嗪核苷酸类似物或其盐在体内转化成为通式[2a]代表的化合物或其盐。
步骤B通式[3z]代表的吡嗪核苷类似物或其盐在体内转化成为通式[2a]代表的化合物或其盐。
步骤C(1)通式[3z]代表的吡嗪核苷类似物或其盐在体内通过酶如核苷酶转化成为通式[4f]代表的化合物，然后(2)所得的化合物在体内通过酶如磷酸核糖基转移酶转化成为通式[2a]代表的化合物或其盐。
关于步骤B、C(1)和C(2)，也可以在体内发生逆转化。
作为以上步骤的结果产生的通式[2a]代表的化合物或其盐进一步在体内通过酶如核苷酸激酶[Advances in Antiviral Drug Design，第2卷，167-172页(1996)]转化成为通式[1b]代表的化合物(吡嗪核苷酸三磷酸酯)或其盐。这种化合物或其盐通过抑制病毒聚合酶而表现出病毒生长抑制和/或杀病毒作用。而且，也可以在体内发生这种逆转化。
而且，其中的Y为亚氨基的化合物在以上步骤中转化成为化合物如氧原子，从而表现出药理学作用。
实施例将在以下的试验实施例中描述本发明。但是，本发明不限于此。在以下的试验实施例中，化合物A代表在实施例29中得到的化合物4-[(2R，3R，4S，5R)-3，4-二羟基-5-(羟基甲基)四氢-2-呋喃基]-3-氧代-3，4-二氢-2-吡嗪甲酰胺；化合物B代表在参考实施例7中得到的化合物6-氯-4-[(2R，3R，4S，5R)-3，4-二羟基-5-(羟基甲基)四氢-2-呋喃基]-3-氧代-3，4-二氢-2-吡嗪甲酰胺；而在表示试验结果的表中所示的化合物指代在参考实施例和实施例中得到的产物。
试验实施例1[检测细胞中的磷酸酯化合物]将5ml含有已在吡嗪环的2位标记14C的化合物6-氟-3-羟基-2-[2-14C]吡嗪甲酰胺的E’-MEM培养基(含有1％牛血清白蛋白和3％维生素溶液)加到已在55cm2培养皿中进行单层培养MDCK细胞。在35℃和5％CO2的条件下完成培养20小时之后，用66.6％乙腈溶液从细胞部分萃取6-氟-3-羟基-2-[2-14C]吡嗪甲酰胺和转化的化合物。将萃取物冻干并浓缩，然后在以下所示的HPLC分析条件下完成分析。
结果是检测一磷酸酯(参考实施例15中的化合物；回收时间23.3分钟)和三磷酸酯(参考实施例16中的化合物；回收时间34.0分钟)。
HPLC分析条件仪器泵HITACHI L-6200检测器HITACHI L-4000放射性检测器Packard FLO-ONE500
分析条件分离柱Develosil ODS-MG-5(4.6×250mm)流动相A0.2M TEAA，pH6.6流动相B10％乙腈，0.2M TEAA，pH6.6混合比0-10分钟；B 5％10-35分钟；B 5％-75％(线性)35-50分钟；B 75％试验实施例2[检测细胞中脱保护的化合物]将实施例2中的化合物加到悬浮在Hank平衡盐溶液中的MDCK细胞，并将混合物于37℃下培养1小时。然后将所得的产物层铺至硅油(KF-99)，然后在4℃下离心。将来自沉淀的细胞部分悬浮并在冻冷-融化在下述的流动相中，并在以下所示的HPLC分析条件下分析所得的溶液。
结果是，检测一磷酸酯(回收时间14.3分钟)为脱保护化合物。
HPLC分析条件仪器泵HITACHI L-6000检测器HITACHI L-7500分析条件分离柱Develosil ODS-MG-5(4.6×250mm)流动相0.02M磷酸盐缓冲溶液，pH3.0试验实施例3-1[聚合酶抑制试验(流感病毒)]用溶解的溶液(100mM Tris-HCl(pH8)，100mM KCl，5mM MgCl2，1.5mM DTT，5％甘油，1.5％ Triton N101，1％ LPC)处理流感病毒颗粒，并将这些颗粒用作聚合酶粗酶。将不同的浓度的每种试验化合物加到反应缓冲液(100mM Tris-HCl(pH8.0)，100mM KCl，5mM MgCl2，1-DTT，0.25％ Triton N101，0.25mM ApG，0.1mM ATP，0.05mM CTP，0.05mM UTP，0.0005mM GTP，32P-GTP，粗酶)，然后在30℃下培养60分钟。随后，往其中加入10％三氯乙酸(TCA)并在冰上保持混合物60分钟。然后将其滴到GF/C过滤器，接着用5％TCA洗涤过滤器。将过滤器干燥，并向其中加入闪烁鸡尾酒。使用液体闪烁计数器测定放射性。给出测定值作为50％抑制浓度，条件是其中没有加入试验化合物的组定义为100％。结果如表1所示。
化合物 50％抑制浓度(μM)参考实施例160.14参考实施例170.33参考实施例220.076参考实施例230.25参考实施例2528试验实施例3-2[聚合酶抑制试验(丙型肝炎病毒(HCV))]在大肠杆菌中生产丙型肝炎病毒的NS5B区，并将其用作试验用HCV聚合酶。通过体外转录方法制备HCV的3’-区的序列，并将其用作试验用RNA模板。
将不同浓度的每种试验化合物加到反应缓冲液(20mM Tris-HCl(pH8.0)，0.05mM MnCl2，1mM DTT，20单位RNase抑制剂，[α-32P]GTP，0.05mM的每种ATP，CTP和UTP和2μg/mL RNA模板)，然后在30℃下培养2小时。然后加入10％ TCA以终止反应。然后将反应溶液滴加到DE81过滤器，然后用5％ TCA洗涤过滤器。将过滤器干燥，并向其中加入闪烁鸡尾酒。用液体闪烁计数器测定放射性。给出测定值作为50％抑制浓度，条件是没有加入试验化合物的组定义为100％。结果如表1-2所示。
化合物 50％抑制浓度(μM)参考实施例160.75参考实施例172.7参考实施例220.088参考实施例232.2参考实施例251.6试验实施例3-3[人RNA聚合酶抑制试验]将Hela细胞核萃取物(Promega)用作试验用人RNA聚合酶。用限制酶切割pCMP原本，然后纯化，并将其用作试验用DNA模板。
将不同浓度的各种试验化合物加到反应缓冲液(Hela细胞核萃取物，3mM MgCl2，0.4mM的各种ATP，UTP和CTP，0.016mM GTP，16μg/mL DNA模板，0.4mCi/mL[α-32P]GTP)，然后在30℃下培养1小时。在反应完成后，将反应溶液滴到DE81过滤器，然后用5％ Na2HPO4溶液将过滤器洗涤3次，持续30分钟，然后用蒸馏水洗涤1次，持续1分钟。将过滤器干燥并向其中加入闪烁鸡尾酒。用液体闪烁计数器测定放射性。给出测定值作为50％抑制浓度，条件是没有加入试验化合物的组定义为100％。结果如表1-3所示。
化合物 50％抑制浓度(μM)参考实施例16＞200参考实施例17＞200参考实施例22＞200
参考实施例23＞200参考实施例25＞200试验实施例4[抗流感作用]用70 PFU/孔的流感病毒A/PR/8/34感染已在6孔培养皿中完全生长的MDCK细胞。60分钟后移出感染溶液并往其中加入含有纯化琼脂、1％牛血清白蛋白和3μg/mL乙酰基胰蛋白酶的并含有100μg/mL试验化合物的E’-MEM培养基。使混合物完全固化，然后将其上下翻动。在35℃，100％湿度和5％ CO2的条件下将其培养3天。除去培养基后，用1％中性红将存活的细胞染色，并用10％福尔马林固定。然后用流动的水移出琼脂培养基，然后计算空斑数。通过与没有加入试验化合物的对照组比较所得的百分率来表示斑(plaque)抑制率。结果如表2所示。
化合物 抑制率(％)参考实施例742参考实施例12 78实施例2100实施例6100实施例11 24实施例22 33实施例29 100实施例31 44实施例32 100试验实施例5[抗BVDV作用]
用70 PEU/孔的牛腹泻病毒(BVDV)NADL感染在6孔培养皿中完全生长的MDBK细胞。60分钟后，移出感染溶液并往其中加入含有5％马血清和1％琼脂(SeaPlaque琼脂)并含有100μg/mL试验化合物的试验培养溶液(E’-MEM)。将混合物完全固化，然后在37℃，100％的湿度和5％CO2的条件下培养3天。完成培养后，用3％甲醛溶液固定试验平板，并用流动的水移出琼脂培养基，然后用1％结晶紫溶液染色用以计数斑数。通过与没有加入试验化合物的对照物比较所得的百分率来表示斑抑制率。结果如表3所示。
化合物 抑制率(％)实施例2100实施例468实施例657实施例29 100实施例32 100试验实施例6[证明施用化合物A的小鼠的肝脏中存在磷酸酯形式的试验]以300mg/kg的剂量给小鼠的尾静脉施用化合物A。施用后30分钟，切除1.6g肝脏，然后在冰冷条件下研磨，同时向其中加入22.5mL已冷却至-20℃的70％甲醇，以萃取化合物A和磷酸酯形式。使用用12mL甲醇和12mL的每一种1.0M和0.005M KCl预处理的固体萃取筒(Varian BONDS ELUT SAX HF 2g/12mL；用0.01M-1.0M KCl洗脱)将在4℃下离心10分钟的10mL的萃取的上清液于以下所示的条件下纯化。
在5mL 3号0.05M KCl洗脱物和合成一磷酸酯化合物(参考实施例30得到的化合物)中所含的磷酸酯形式在HPLC条件中所述的HPLC分析(HPLC-1)的HPLC保留时间和UV光谱方面相同。此外，在5mL 1号0.5M KCl洗脱物和合成二磷酸酯化合物(参考实施例31得到的化合物)中所含的磷酸酯形式在HPLC条件中所述的HPLC分析(HPLC-2)的HPLC保留时间方面相同。而且，在5mL 2号0.5M KCl洗脱物和合成三磷酸酯化合物(参考实施例22得到的化合物)中所含的磷酸酯形式在HPLC条件中所述的HPLC分析(HPLC-3)的HPLC保留时间方面相同。
将0.5mL 0.5M Tris-HCl(pH8.0)和0.5mL 0.1M MgCl2加到4mL以上3号0.05M KCl洗脱物，然后进一步向其中加入0.5mL由小牛肠制备的碱性磷酸酶(EC3.1.3.1.，20U/mL)，随后在37℃下培养1小时。同样地，将0.5mL 0.5M Tris-HCl(pH8.0)和0.5mL 0.1MMgCl2加到4mL以上1号0.5M KCl洗脱物，然后进下向其中加入0.5mL由小牛肠制备的碱性磷酸酶(EC3.1.3.1.，20U/mL)，随后在37℃下培养1小时。同样地，将0.2mL 0.5M Tris-HCl(pH8.0)和0.1mL 0.1M MgCl2加到1.6mL以上2号0.5M KCl洗脱物，然后进下向其中加入0.5mL由小牛肠制备的碱性磷酸酶(EC3.1.3.1.，20U/mL)，随后在37℃下培养1小时。
通过在HPLC条件中所述的HPLC分析(HPLC-4)，证实3号的0.05M KCl洗脱物中一磷酸酯消失，而新产生的化合物和化合物A在HPLC保留时间和UV光谱方面相同。同样地，通过HPLC条件中所述的HPLC分析(HPLC-4)，证实1号的0.5M KCl洗脱物中二磷酸酯形式消失，而新产生的化合物和化合物A在HPLC保留时间和UV光谱方面相同。同样地，通过HPLC条件中所述的HPLC分析(HPLC-4)，证实2号的0.5M KCl洗脱物中三磷酸酯消失，而新产生的化合物和化合物A在HPLC保留时间和UV光谱方面相同。
根据这些结果，证实化合物A在体内转化成为一磷酸酯，然后转化成为二磷酸酯，然后转化成为三磷酸酯。
使用固体萃取筒的纯化条件洗涤按照以下的顺序使用溶剂完成洗涤。
水(用冰冷却)12mL
60％甲醇(用冰冷却)12mL水(用冰冷却)12mL洗脱在以下的浓度条件下连续地进行洗脱。以5mL为单位进行洗脱。“×2”和″×3″意指5ml的洗脱分别用每种浓度进行二次和三次。馏分依次定义为1号洗脱物，2号洗脱物和3号洗脱物)。
0.01M KCl(5mL×2)0.05M KCl(5mL×3)0.1M KCl(5mL×3)0.5M KCl(SmL×2)1.0M KCl(SmL×2)HPLC分析条件HPLC-1柱4.6×250mm，Nomura Chemical Co.，Ltd.，DevelosilODS-MG-5流动相0.02M磷酸盐缓冲溶液(pH7.0)检测UV 200-400nmHPLC-2柱4.6×250mm，Whatman Partisil 10-SAX流动相0.2M磷酸盐缓冲溶液(pH3.5)检测UV200 to 400nmHPLC-3柱4.6×250mm，Whatman Partisil 10-SAX流动相0.6M磷酸盐缓冲溶液(pH3.5)检测UV200-400nm
HPLC-4柱4.6×250mm，Nomura Chemical Co.，Ltd.，DevelosilODS-MG-5流动相2％乙腈 0.02M磷酸盐缓冲溶液(pH5.0)检测UV 200-400nm所用的测定仪器二极管阵列检测器Agilent 1100系列四元(Quatemary)泵Agilent 1100系列自动进样器Agilent 1100系列ChemStation Agilent 1100系列试验实施例7[检测口服给药的试验化合物的小鼠的血浆中化合物A的浓度]给试验组中的2只小鼠(ICR)一次性口服试验化合物。给药后30分钟收集血液。将400μL乙腈加到200μL离心的血浆中。将混合物离心并除去离心的蛋白。将所得的上清液在减压下浓缩，然后在以下HPLC条件下测定血浆中化合物A的浓度。结果如表4所示。
HPLC条件柱Develosil 005-MG-S，4.6×250mm(Nomura ChemicalCo.，Ltd.)Guard柱Develosil 005-MG-S，4.6×10mm(NomuraChemical Co.，Ltd.)检测UV 350nm流动相2％乙腈0.02M磷酸盐缓冲溶液(pH5.0)测定仪器检测器Shimadzu SPD-6A泵HITACHI L-6000[表4]试验化合物 剂量mg/mL 血浆中化合物A的浓度μg/mL参考实施例42000.2实施例17 50 1.6实施例19 50 3.5实施例21 50 0.4实施例22 50 3.1实施例28 50 0.3实施例34 50 12.5实施例36 41 5.7试验实施例8[测定口服给药的试验化合物的小鼠的血浆中化合物B的浓度]给试验组中的2只ICR小鼠一次性口服200mg/kg参考实施例6中的化合物。给药后30分钟和60分钟收集血液。完成与试验实施例7相同的操作，并通过HPLC测定血浆中化合物B的浓度。结果如表5所示。
HPLC条件柱Develosil ODS-MG-S，4.6×250mm(Nomura ChemicalCo.，Ltd.)Guard柱Develosil ODS-MG-5，4.6×10mm(NomuraChemical Co.，Ltd.)检测波长UV 350nm流动相5％乙腈0.04M 磷酸盐缓冲溶液(pH6.0) 试验化合物血浆中化合物B的浓度(μg/mL)30分钟后 60分钟后参考实施例6 1.64.6试验实施例9[通过加入3-羟基-2-吡嗪甲酰胺来检测细胞中的磷酸酯化合物]将5ml含有3-羟基-2-吡嗪甲酰胺(最终浓度5000μM)的E’-MEM培养基(含有1％牛血清白蛋白和3％维生素溶液)加到已在55cm2的培养皿上进行单层培养的MDCK细胞，并在37℃和5％ CO2的条件下培养24小时。在冰冷条件下将已冷却至-20℃的1mL 70％甲醇加到细胞部分，并萃取其中的化合物A和磷酸酯。使用用1mL甲醇和1mL的每种1.0M和0.005 M KCl预处理的固体萃取药筒(Varian BOND ELUT SAXHF 100mg/1mL；用0.01M-1.0M KCl洗脱)，将0.7mL在4℃下离心10分钟的萃取物的上清液在以下所示的条件下纯化。
在1mL 0.05M KCl洗脱物和合成一磷酸酯化合物(参考实施例30所得的化合物)中的磷酸酯形式在HPLC分析(HPLC-5)的HPLC保留时间和UV光谱方面相同。此外，在1mL 0.25M KCl洗脱物和合成二磷酸酯化合物(参考实施例31所含的化合物)中的磷酸酯形式在HPLC分析(HPLC-6)的HPLC保留时间方面相同。而且，在1mL 0.5M KCl洗脱物和合成三磷酸酯化合物(参考实施例22所得的化合物)中的磷酸酯形式在HPLC分析(HPLC-6)的HPLC保留时间方面相同。
向0.8mL的每一种以上的KCl洗脱物中加入0.1mL 0.5M Tris-HCl(pH8.0)和0.1mL MgCl2。然后取出0.8mL混合物，往其中加入0.08mL由小牛肠制备的碱性磷酸酶(EC3.1.3.1.，20U/mL)，然后在37℃下培养1小时。
通过HPLC分析(HPLC-7)，证实0.05M KCl洗脱物中一磷酸酯消失，而新产生的化合物和化合物A在HPLC保留时间方面相同。而且，通过HPLC分析(HPLC 8)，证实新产生的化合物和化合物A在UV光谱方面相同。同样地，通过HPLC分析(HPLC-7)，证实0.25M KCl洗脱物中的二磷酸酯消失，而新产生的化合物和化合物A在HPLC保留时间方面相同。而且，通过HPLC分析(HPLC-8)，证实新产生的化合物和化合物A在UV光谱方面相同。同样地，通过HPLC分析(HPLC-7)，证实0.5M KCl洗脱物中三磷酸酯消失，而新产生的化合物和化合物A在HPLC保留时间方面相同。
根据这些结果，证实3-羟基-2-吡嗪甲酰胺在细胞内转化为化合物A，一磷酸酯(参考实施例30所得的化合物)，然后转化为二磷酸酯形式(参考实施例31所得的化合物)，然后转化为三磷酸酯(参考实施例22所得的化合物)。
使用固体萃取筒的纯化条件洗涤按照以下顺序使用溶剂进行洗涤。
水(用冰冷却)1mL60％甲醇(用冰冷却)1mL水(用冰冷却)1mL洗脱洗脱在以下的浓度下连续地进行。(洗脱以1mL为单位进行)。
0.01M KCl (1mL)0.05M KCl (1mL)0.1M KCl (1mL)0.25M KCl (1mL)0.5M KCl (1mL)1.0M KCl (1mL)HPLC分析条件HPLC-5柱4.6×250mm，Nomura Chemical Co.，Ltd.，DevelosilODS-MG-5流动相0.02M磷酸盐缓冲液(pH7.0)
检测UV 200 to 400nm所用的测定仪器二极管阵列检测器Agilent 1100系列四元泵Agilent 1100系列自动进样器Agilent 1100系列ChemStation Agilent 1100系列HPLC-6柱4.6×250mm，Whatman Partisil 10-SAX流动相0.75M磷酸盐缓冲液(pH3.5)检测UV 350nm所用的测定仪器Shimadzu SPD-6A UV分光光度检测器HITACHI L-6000泵HPLC-7柱4.6×250mm，Nomura Chemical Co.，Ltd.，DevelosilODS-MG-5流动相5％乙腈0.02M磷酸盐缓冲溶液(pH5.0)检测UV 350nm所用的测定仪器Shimadzu SPD-6A UV分光光度检测器HITACHI L-6000泵HPLC-8柱4.6×250mm，Nomura Chemical Co.，Ltd.，DevelosilODS-MG-5流动相2％乙腈0.02M磷酸盐缓冲溶液(pH5.0)检测UV 200-400nm
所用的测定仪器二极管阵列检测器Agilent 1100系列四元泵Agilent 1100系列自动进样器Agilent 1100系列ChemStation Agilent 1100系列试验实施例10[通过加入化合物A检测细胞中的三磷酸酯化合物]将10ml含有化合物A的E’-MEM培养基(含5％牛胎儿血清)加到已在55cm2培养皿上进行单层培养的MDBK细胞。在37℃和5％ CO2的条件下完成24小时的培养之后，用细胞刮刀移出培养物，并通过离心移出培养基。然后将5％三氯乙酸加到所得的细胞部分，从而萃取转化的化合物。将含有等量20％三辛基胺的戊烷加到萃取物，然后用离心浓缩器将所得的水层浓缩。在以上浓缩物中，检测HPLC保留时间与合成的化合物三磷酸酯(参考实施例22所得的化合物)匹配的组分。
HPLC条件仪器泵HITACHI L-6000检测器HITACHI L-4000分析条件分离柱Develosil ODS-MG-S(4.6×250nm)流动相7％乙腈，5mM四丁基溴化铵，0.1M磷酸盐缓冲溶液(pH7.0)测定波长350nm试验实施例11[通过加入化合物A而检测细胞中的一磷酸酯和二磷酸酯化合物]
将5ml含有化合物A(最终浓度5000μM)的E’-MEM培养基(含有1％牛血清白蛋白和3％维生素溶液)加到已在55cm2培养皿上进行单层培养的MDCK细胞，并在37℃和5％CO2的条件下完成24小时的培养。在冰冷却下将已冷却至-20℃的1mL 70％甲醇加到细胞部分，并从中萃取化合物A和磷酸酯。使用用1mL甲醇和1mL的每一种1.0M和0.005M KCl预处理的固体萃取筒(Varian BOND ELUT SAX HF 100mg/imL；用0.01M-1.0M KCl洗脱)，将0.7mL在4℃下离心10分钟的萃取物的上清液于下述条件下纯化。
在1mL 0.05M 1号KCl洗脱物和合成一磷酸酯化合物(参考实施例30所得的化合物)中的磷酸酯形式在HPLC分析(HPLC-9)的HPLC保留时间和UV光谱方面相同。此外，在1mL 0.5M KCl洗脱物和合成二磷酸酯化合物(参考实施例31所含的化合物)中的磷酸酯形式在HPLC分析(HPLC-10)的HPLC保留时间方面相同。
向0.8mL以上0.05M KCl一号洗脱物中加入0.1mL 0.5MTris-HCl(pH8.0)和0.1mL 0.1M MgCl2。然后取出0.5mL混合物，向其中加入0.06mL由小牛肠制备的碱性磷酸酶(EC3.1.3.1.，20U/mL)，然后在37℃下培养1小时。通过HPLC分析(HPLC-11)，证实0.05M KCl洗脱物中一磷酸酯消失，而新产生的化合物和化合物A在HPLC保留时间和UV光谱方面相同。
根据这些结果，证实化合物A在细胞中转化为一磷酸酯(参考实施例30所得的化合物)和二磷酸酯形式(参考实施例31所得的化合物)。
使用固体萃取筒的纯化条件洗涤按照以下的顺序使用3种溶剂进行洗涤。
水(用冰冷却)1mL60％甲醇(用冰冷却)1mL水(用冰冷却)1mL洗脱在以下的浓度条件下连续地进行洗脱。(以1mL为单位进行洗脱。“×2”意指每种浓度的1mL的洗脱进行二次。馏分依次定义为1号洗脱物和2号洗脱物)
0.01M KCl (1mL)0.05M KCl (1mL×2)0.1M KCl (1mL)0.5M KCl (1mL)1.0M KCl (1mL)HPLC分析条件HPLC-9柱4.6×250mm，Nomura Chemical Co.，Ltd.，DevelosilODS-MG-5流动相0.02M磷酸盐缓冲液(pH7.0)检测UV 200 to 400nm所用的测定仪器二极管阵列检测器Agilent 1100系列四元泵Agilent 1100系列自动进样器Agilent 1100系列ChemStation Agilent 1100系列HPLC-10柱4.6×250mm，Whatman Partisil 10-SAX流动相0.2M磷酸盐缓冲溶液(pH3.5)检测UV 350nm所用的测定仪器Shimadzu SPD-6A UV分光光度检测器HITACHI L-6000泵HPLC-11柱4.6×250mm，Nomura Chemical Co.，Ltd.，DevelosilODS-MG-5流动相2％乙腈0.02M磷酸盐缓冲溶液(pH5.0)检测UV 200-400nm所用的测定仪器二极管阵列检测器Agilent 1100系列四元泵Agilent 1100系列自动进样器Agilent 1100系列ChemStation Agilent 1100系列试验实施例12[肌苷一磷酸脱氢酶(IMPDH)抑制试验]将培养皿上的MDCK细胞悬浮在0.05M Tris-HCl(pH8.0)中，并用Downs均化器将悬浮液均化以得到细胞匀浆。将细胞匀浆在16000×g下离心，并将如此得到上清液用作IMPDH酶溶液。
作为反应组合物，使用0.1M Tris-HCl(pH8.0)，0.1M KCl，30mM EDTA，5mM NAD，5mg/mL牛血清白蛋白和0.04mM[8-14C]-肌苷5’-一磷酸酯。在37℃下反应1小时完成后，加入2体积的乙腈以终止反应，并浓缩反应产物。在以下所述的HPLC条件下对所得的浓缩物进行分析，得到反应底物([14C]-肌苷5’-一磷酸酯)和反应产物([14C]-黄嘌呤核苷5’-一磷酸酯)之间的比率，并计算反应率。一磷酸利巴韦林用作对照化合物。结果如表6所示。
HPLC分析条件分离柱Develosil ODS-MG-5(4.6×250mm)流动相20％乙腈，5mM丁基氯化铵，0.02M磷酸盐缓冲溶液(pH7.0)放射检测器Packard FLO-ONE500[表6]
试验化合物 50％抑制浓度(μM)参考实施例30 980实施例37 740对照化合物 1.9接着将在参考实施例和实施例中解释本发明的化合物。但是，本发明不限于这些。
洗脱物中的混合物都表示为体积比。硅胶BW-127ZH(Fuji SilysiaChemical Ltd.)用作柱色谱法的介质；YMC GEL ODS-AM 120-S50(YMCCo.，Ltd.)用作逆相硅胶柱色谱法的载体；而DEAE纤维素(Wako PureChemical Industries，Ltd.)用作离子交换柱色谱法的载体。用于对照实施例和实施例的符号含义如下DMSO-d6氘化二甲亚砜，Ms甲烷磺酰基，Ph苯基，而Et乙基。
参考实施例1 将1.52g 3-羟基-2-吡嗪甲酸甲酯悬浮在12.2mL 1，1，1，3，3，3-六甲基二硅氮烷，并将悬浮液加热回流1小时。静置至冷却后，在减压下除去溶剂，并在氮气氛下将所得的残余物溶于30mL二氯乙烷。连续地往其中加入4.98g β-D-呋喃核糖-1-乙酸酯-2，3，5-三苯甲酸酯和1.73mL氯化锡(IV)，并将混合物于室温下再搅拌14小时。用30mL氯仿和30mL碳酸氢钠水溶液稀释反应混合物，并过滤除去沉淀，从而得到有机层。用水将所得的有机层连续洗涤，然后用饱和盐水溶液洗涤。随后，用无水硫酸镁干燥层，并在减压下除去溶剂。通过硅胶柱色谱法[洗脱剂；正己烷∶乙酸乙酯1∶1]纯化所得的残余物，得到3.4g白色固体，4-{(2R，3R，4R，5R)-3，4-双(苯甲酰氧基)-5-[(苯甲酰氧基)甲基]四氢-2-呋喃基}-3-氧代-3，4-二氢-2-吡嗪甲酸甲酯。
IR(KBr)cm-11734，16601H-NMR(CDCl3)δ3.96(3H，s)，4.71(1H，dd，J＝4.0，12.4Hz)，4.8-4.9(2H，m)，5.8-5.9(2H，m)，6.45(1H，d，J-4.0Hz)，7.34(1H，d，J＝4.2Hz)，7.3-7.6(9H，m)，7.70(1H，d，J＝4.2Hz)，7.9-8.0(4H，m)，8.0-8.1(2H，m)参考实施例2 将36.3g 4-{(2R，3R，4R，5R)-3，4-双(苯甲酰氧基)-5-[(苯甲酰氧基)甲基]四氢-2-呋喃基}-3-氧代-3，4-二氢-2-吡嗪甲酸甲酯悬浮在400mL甲醇，并在冰冷却下向其中加入11.7g 28％甲醇钠甲醇溶液。将混合物于相同的温度下搅拌1小时，使用2M盐酸将反应溶液调节至pH4，然后在减压下除去溶剂。用反相硅胶柱色谱法[洗脱剂；乙腈∶水1∶4]纯化所得的残余物，得到12.6g浅黄固体，4-[(2R，3R，4S，5R)-3，4-二羟基-5-(羟基甲基)四氢-2-呋喃基]-3-氧代-3，4-二氢-2-吡嗪甲酸甲酯。
IR(KBr)cm-117401H-NMR(DMSO-d6)δ3.6-3.65(1H，m)，3.75-3.8(1H，m)，3.33(3H，s)，3.9-4.0(3H，m)，5.13(1H，d，J＝5.2Hz)，5.29(1H，t，J＝5.2Hz)，5.64(1H，d，J＝2.4Hz)，5.91(1H，d，J＝2.4Hz)，7.48(1H，d，J＝4.4Hz)，8.31(1H，d，J＝4.4Hz)
参考实施例3 0.5g 4-[(2R，3R，4S，5R)-3，4-二羟基-5-(羟基甲基)四氢-2-呋喃基]-3-氧代-3，4-二氢-2-吡嗪甲酸甲酯悬浮在5mL丙酮和1mL原甲酸三酯，并向其中连续地加入33mg对甲苯磺酸一水合物。将混合物加热回流1小时，然后在减压下除去溶剂。通过柱色谱法[洗脱剂乙酸乙酯]纯化所得的残余物，得到0.49g白色固体，4-[(3aR，4R，6R，6aR)-6-(羟基甲基)-2，2-二甲基四氢呋喃并[3，4-d][1，3]间二氧杂环戊烯-4-基]-3-氧代-3，4-二氢-2-吡嗪甲酸甲酯。
IR(KBr)cm-117281H-NMR(CDCl3)δ1.35(3H，s)，1.60(3H，s)，2.55(1H，t，J＝4.6Hz)，3.8-3.9(1H，m)，3.97(3H，s)，3.95-4.0(1H，m)，4.4-4.5(1H，m)，4.97(1H，dd，J＝3.2，6.3Hz)，5.01(1H，dd，J＝2.4，6.3Hz)，5.80(1H，d，J＝2.4Hz)，7.49(1H，d，J＝4.3Hz)，7.69(1H，d，J＝4.3HZ)参考实施例4
将6.78g 4-[(3aR，4R，6R，6aR)-6-(羟基甲基)-2，2-二甲基四氢呋喃并[3，4-d]-吡嗪甲酸甲酯溶于68mL甲醇，然后在冰冷却下向其中加入氨气体以饱和。在相同的温度下反应1.5小时后，过滤收集沉淀的固体，得到2.34g浅黄色固体，4-[(3aR，4R，6R，6aR)-6-(羟基甲基)-2，2-二甲基四氢呋喃并[3，4-d][1，3]间二氧杂环戊烯-4-基]-3-氧代-3，4-二氢-2-吡嗪甲酰胺。浓缩滤液，以进一步得到2.54g以上的化合物。
IR(KBr)cm-11701，16541H-NMR(DMSO-d6)δ1.29(3H，s)，1.51(3H，s)，3.5-3.6(1H，m)，3.6-3.7(1H，m)，4.3-4.4(1H，m)，4.7-4.8(1H，m)，4.8-4.9(1H，m)，5.22(1H，t，J＝4.7Hz)，5.98(1H，s)，7.55(1H，d，J＝4.0Hz)，7.76(1H，brs)，8.04(1H，d，J＝4.0HZ)，8.36(1H，brs)参考实施例5 在80℃至90℃下将15mL磺酰氯滴到含有20g 3-羟基-2-吡嗪甲酰胺的80mL N，N-二甲基甲酰胺悬浮液。将混合物在95℃至100℃的温度下搅拌10小时，然后将其倾入200mL冰水和200mL乙酸乙酯的混合溶液。分离有机层。用100mL乙酸乙酯将水层萃取5次，然后将其与有机层合并。用饱和盐水溶液洗涤混合物。然后用活性碳处理混合物，并在减压下除去溶剂。将所得的残余物悬浮在50mL水中，向其中加入3.2g碳酸氢钠并溶解。然后向其中加入浓盐酸以调节溶液至pH2。过滤收集沉淀，得到4.8g白色固体，6-氯-3-羟基-2-吡嗪甲酰胺。
IR(KBr)cm-116601H-NMR(DMSO-d6)δ8.51(2H，brs)，8.73(1H，s)，13.60(1H，brs)参考实施例6 将含有1.5g 6-氯-3-羟基-2-吡嗪甲酰胺的7.5mL 1，1，1，3，3，3-六甲基二硅氮烷悬浮液加热回流30分钟。冷却后，减压浓缩。向其中加入5mL甲苯，并在减压下除去溶剂。然后向其中加入5mL甲苯并再次在减压下除去溶剂。将15mL乙腈加到所得的残余物并溶解，并在冰冷却下向其中连续地加入β-D-呋喃核糖1，2，3，5-四乙酸酯和氯化锡(IV)，然后在室温下搅拌5小时。用30mL乙酸乙酯和20mL水稀释反应混合物，然后通过加入饱和碳酸氢钠水溶液调节至pH7。接着，过滤除去沉淀，并分离有机层。用10mL乙酸乙酯将水层萃取3次，然后与有机层合并。用饱和盐水溶液洗涤所得的混合物，然后用无水硫酸镁干燥，在减压下除去溶剂，将二乙基醚加到所得的残余物，并过滤收集混合物，得到2.8g浅黄色固体，(2R，3R，4R，5R)-4-(乙酰氧基)-2-[(乙酰氧基)甲基]-5-[3-(氨基羰基)-5-氯-2-氧代-1(2H)-吡嗪基]四氢-3-呋喃基乙酸酯。
IR(KBr)cm-11756，1733，1701，16481H-NMR(CDCl3)δ2.09(3H，s)，2.18(3H，s)，2.23(3H，s)，4.45(2H，s)，4.5-4.6(1H，m)，5.2-5.3(1H，m)，5.45-5.5(1H，m)，6.14(1H，d，J＝2.0Hz)，6.22(1H，brs)，8.06(1H，s)，8.84(1H，s)。
参考实施例7 将1.8g(2R，3R，4R，5R)-4-(乙酰氧基)-2-[(乙酰氧基)甲基]-5-[3-(氨基羰基)-5-氯-2-氧代-1(2H)-吡嗪基]四氢-3-呋喃基乙酸酯悬浮在27mL甲醇中，并在冰冷却下向其中加入2.4g 28％甲醇钠甲醇溶液，然后在相同的温度下搅拌30分钟。向其中加入0.95mL乙酸并在减压下除去溶剂。用硅胶柱色谱法[洗脱剂；氯仿∶甲醇＝3∶1]纯化所得的残余物，得到0.73g浅黄色固体，6-氯-4-[(2R，3R，4S，5R)-3，4-二羟基-5-(羟基甲基)四氢-2-呋喃基]-3-氧代-3，4-二氢-2-吡嗪甲酰胺。
IR(KBr)cm-116931H-NMR(DMSO-d6)δ3.35(3H，brs)，3.65(1H，d，J＝12.0Hz)，3.8-3.9(1H，m)，3.9-4.0(3H，m)，5.81(1H，s)，7.92(1H，brs)，8.44(1H，brs)，8.70(1H，s)。
参考实施例8
将0.3g 6-氯-4-{(2R，3R，4S，5R)-3，4-二羟基-5-(羟基甲基)四氢-2-呋喃基]-3-氧代-3，4-二氢-2-吡嗪甲酰胺溶于0.6mL丙酮和1.5mLN，N二甲基甲酰胺的混合溶剂，然后向其中连续地加入3mL 2，2-二甲氧基丙烷和0.12g对甲苯磺酸吡啶鎓盐，随后在50℃下搅拌5小时。冷却后，向其中加入5mL乙酸乙酯和5mL水的混合物溶剂，并分离有机层。用水洗涤层，然后用饱和盐水溶液洗涤，随后用无水硫酸镁干燥，接着在减压下除去溶剂。通过硅胶柱色谱法[洗脱剂；氯仿∶甲醇＝10∶1]，得到0.18g浅黄色固体，4-[(3aR，4R，6R，6aR)-6-(羟基甲基)-2，2-二甲基四氢呋喃并[3，4-d][1，3]间二氧杂环戊烯-4-基]-6-氯-3-氧代-3，4-二氢-2-吡嗪甲酰胺。
IR(KBr)cm-117001H-NMR(DMSO-d6)δ1.29(3H，s)，1.50(3H，s)，3.5-3.6(1H，m)，3.7-3.8(1H，m)，4.3-4.4(1H，m)，4.74(1H，dd，J＝2.9，6.1Hz)，4.88(1H，dd，J＝2.0，6.1Hz)，5.37(1H，t，J＝4.6Hz)，5.95(1H，d，J＝1.7Hz)，7.93(1H，brs)，8.32(1H，s)，8.41(1H，brs)参考实施例9
将1.0g 4-[(3aR，4R，6R，6aR)-6-(羟基甲基)-2，2-二甲基四氢呋喃并[3，4-d][1，3]间二氧杂环戊烯-4-基]-3-氧代-3，4-二氢-2-吡嗪甲酸甲酯溶解于5.0mL吡啶，并在10℃下向其中加入0.36mL甲磺酰氯，然后在室温下搅拌0.5小时。将反应混合物倾入20mL乙酸乙酯和20mL水的混合溶液。分离有机层，并用20mL乙酸乙酯将水层萃取3次。随后将其与有机层合并。用饱和盐水溶液洗涤混合物，并用无水硫酸镁干燥。然后，在减压下除去溶剂，得到1.2g无色油产物，4-[(3aR，4R，6R，6aR)-2，2-二甲基-6-[[(甲基磺酰基)氧基]甲基]四氢呋喃并[3，4-d][1，3]间二氧杂环戊烯-4-基]-3-氧代-3，4-二氢-2-吡嗪甲酸甲酯。
IR(KBr)cm-11734，16691H-NMR(CDCl3)δ1.35(3H，s)，1.58(3H，s)，3.02(3H，s)，3.98(3H，s)，4.51(2H，s)，4.8-5.2(3H，m)，5.73(1H，brs)，7.43(2H，brs)参考实施例10 将1.2g 4-[(3aR，4R，6R，6aR)-2，2-二甲基-6-[[(甲基磺酰基)氧基]甲基]四氢呋喃并[3，4-d][1，3]间二氧杂环戊烯-4-基]-3-氧代-3，4-二氢-2-吡嗪甲酸甲酯溶于12mL丙酮。向其中加入2.3g碘化钠，然后将混合物加热回流2小时。将反应混合物冷却至室温，随后将其倾入20mL乙酸乙酯和20mL水的混合溶液。分离有机层，分离有机层并用20mL乙酸萃取水层。然后将其与有机层合并。用硫代硫酸钠水溶液连续地洗涤混合物，然后用饱和盐水溶液洗涤，随后用无水硫酸镁干燥。接着在减压下除去溶剂。用硅胶柱色谱法[洗脱剂；甲苯∶乙酸乙酯＝2∶1]纯化所得的残余物，得到1.0g黄色油产物，4-[(3aR，4R，6S，6aR)-6-(碘甲基)-2，2-二甲基四氢呋喃并[3，4-d][1，3]间二氧杂环戊烯-4-基]-3-氧代-3，4-二氢-2-吡嗪甲酸酯。
IR(KBr)cm-11734，1670，16541H-NMR(CDCl3)δ1.36(3H，s)，1.59(3H，s)，3.3-3.7(2H，m)，3.98(3H，s)，4.3-4.5(1H，m)，4.9-5.1(2H，m)，5.76(1H，d，J＝1.7Hz)，7.5-7.6(2H，m)参考实施例11 将0.55g 4-[(3aR，4R，6S，6aR)-6-(碘甲基)-2，2-二甲基四氢呋喃并[3，4-d][1，3]间二氧杂环戊烯-4-基]-3-氧代-3，4-二氢-2-吡嗪甲酸甲酯溶于5mL甲醇，并在冰冷条件下向其中加入氨气体至饱和。在相同的温度下搅拌1小时后，在减压下除去溶剂。将二丙基醚加到所得的残余物，并过滤收集沉淀，得到0.45g黄色固体，4-[(3aR，4R，6S，6aR)-6-(碘甲基)-2，2-二甲基四氢呋喃并[3，4-d][1，3]间二氧杂环戊烯-4-基]-3-氧代-3，4-二氢-2-吡嗪甲酰胺。
IR(KBr)cm-11684，16541H-NMR(DMSO-d6)δ1.30(3H，s)，1.51(3H，s)，3.3-3.5(2H，m)，4.3-4.4(1H，m)，4.79(1H，dd，J＝3.6，6.4Hz)，5.13(1H，dd，J＝1.2，6.0Hz)，6.00(1H，d，J＝1.6Hz)，7.53(1H，d，J＝4.4Hz)，7.76(1H，brs)，7.90(1H，d，J＝4.4Hz)，8.20(1H，brs)参考实施例12 在氮气流下将5.3g 6-氟-3-羟基-2-吡嗪甲酰胺悬浮在53mL乙腈中，并在冰冷却下向其中加入8.4mL N，O-双(三甲基甲硅烷基)乙酰胺，然后在室温下搅拌1.5小时。在冰冷下连续地将含有已用Carbohydrate Research(Carbohydr.Res.)，第203卷，第9期，第324-329页(1990)所述的方法单独制备的9.4g(2R，3R，4R)-4，5-双(乙酰氧基)-2-(羟基甲基)四氢-3-呋喃基乙酸酯的53mL乙腈溶液以及7.2mL氯化锡(IV)加到反应混合物，将如此得到的混合物于室温下搅拌20分钟。将反应混合物倾入100mL乙酸乙酯和300mL饱和碳酸氢钠水溶液的混合溶液。分离有机层，然后用700mL乙酸乙酯萃取水层。合并这种有机层，然后用无水硫酸镁干燥有机层。接着在减压下除去溶剂。将所得的残余物溶于200mL甲醇，并向其中加入100mL 80％乙酸水溶液，然后在室温下搅拌2小时。在减压下除去溶剂，并用硅胶柱色谱法纯化所得的残余物[洗脱剂；氯仿∶甲醇＝40∶1]。随后向其中加入氯仿和二异丙醚，并过滤收集混合物以得到9.3g浅黄色固体，(2R，3R，4R，5R)-4-(乙酰氧基)-2-[3-(氨基羰基)-5-氟-2-氧代-1(2H)-吡嗪基]-5-(羟基甲基)四氢-3-呋喃基乙酸酯。
IR(KBr)cm-11752，16861H-NMR(DNSO-d6)δ2.04(3H，s)，2.10(3H，s)，3.64(1H，ddd，J＝2.5，5.0，13Hz)，3.86(1H，ddd，J＝2.5，5.0，13Hz)，4.29(1H，d，J＝6.0Hz)，5.35(1H，t，J＝6.0Hz)，5.49(1H，dd，J＝3.0，5.0Hz)，5.65(1H，t，J＝5.0Hz)，6.11(1H，d，J＝3.0Hz)，7.96(1H，brs)，8.42(1H，d，J＝5.0Hz)，8.49(1H，brs)参考实施例13 在氮气流下将1.5g(2R，3R，4R，5R)-4-(乙酰氧基)-2-[3-(氨基羰基)-5-氟-2-氧代-1(2H)-吡嗪基]-5-(羟基甲基)四氢-3-呋喃基乙酸酯和0.84g 1H-四唑溶于30mL乙腈。然后在冰冷却下向其中加入含有1.4mL二烯丙基二异丙基亚磷酰胺(phosphoramidite)的20mL乙腈溶液，并将混合物搅拌20分钟。将含有1.4g间氯过苯甲酸的10mL乙腈溶液加到反应混合物，然后搅拌10分钟。将60mL乙酸乙酯加到反应混合物，然后将所得的混合物倾入60mL水。分离有机层，并用90mL乙酸乙酯萃取水层。将有机层合并，并向其中加入30mL水。通过加入饱和碳酸氢钠水溶液而将混合物调节至pH8，然后分离水层。用饱和盐水沉溶液洗涤有机层，然后用无水硫酸镁干燥，接着在减压下除去溶剂。用硅胶柱色谱法[洗脱剂；氯仿∶甲醇＝40∶1]纯化所得的残余物，得到1.3g黄色固体，(2R，3R，4R，5R)-4-(乙酰氧基)-2-[3-(氨基羰基)-5-氟-2-氧代-1(2H)-吡嗪基]-5-([[双(烯丙氧基)磷酰基]氧基]甲基)-四氢-3-呋喃基乙酸酯。
IR(KBr)cm-11753，1694，1H-NMR(CDCl3)δ2.11(3H，s)，2.15(3H，s)，4.32-4.35(1H，m)，4.47-4.52(2H，m)，4.58-4.64(4H，m)，5.27(2H，dt，J＝1.0，10.5Hz)，5.37-5.44(4H，m)，5.90-5 6.00(2H，m)，6.28(1H，d，J＝4.0Hz)，6.32(1H，brs)，7.99(1H，d，J＝6.0Hz)，9.02(1H，brs)
参考实施例14 将0.23g(2R，3R，4R，5R)-4-(乙酰氧基)-2-[3-(氨基羰基)-5-氟-2-氧代-1(2H)-吡嗪基]-5-([[双(烯丙氧基)磷酰基]氧基]甲基)四氢-3-呋喃基乙酸酯溶于4.0mL甲醇，并在冰冷却下向其中加入0.17g28％甲醇钠甲醇溶液，然后搅拌5分钟。向其中加入0.15mL乙酸并在减压下除去溶剂。使1.0g(2R，3R，4R，5R)-4-(乙酰氧基)-2-[3-(氨基羰基)-5-氟-2-氧代-1(2H)-吡嗪基]-5-([[双(烯丙氧基)磷酰基]氧基]甲基)四氢-3-呋喃基乙酸酯进行与上述相同的反应。合并反应混合物，并用硅胶柱色谱法[洗脱剂；氯仿∶甲醇＝40∶1]纯化所得的混合物，得到0.35g黄色固体，[(2R，3S，4R，5R)-5-[3-(氨基羰基)-5-氟-2-氧代-1(2H)-吡嗪基]-3，4-二羟基四氢-2-呋喃基]甲基二烯丙基磷酸酯。
IR(KBr)cm-116841H-NMR(DMSO-d6)δ3.1-4.7(9H，m)，5.1-5.5(4H，m)，5.7-6.2(3H，m)，7.94(1H，d，J＝6.0Hz)参考实施例15
在氮气流下将0.82g[(2R，3S，4R，5R)-5-[3-(氨基羰基)-5-氟-2-氧代-1(2H)-吡嗪基]-3，4-二羟基四氢-2-呋喃基]甲基二烯丙基磷酸酯溶于8.2mL甲醇和8.2mL四氢呋喃的混合溶液。向其中连续地加入0.11g四三苯基膦钯(O)和0.28g三苯基膦，并将混合物于室温下搅拌30分钟。在水冷却下将含有0.68mL甲酸的1.9mL四氢呋喃溶液和含有1.1mL正丁基胺的8.2mL四氢呋喃溶液连续地加到反应混合物，并将所得的混合物于30℃-50℃的温度下搅拌1小时，并在40℃-45℃的温度下搅拌2小时。用10mL水稀释反应混合物，然后在减压下除去有机溶剂。用20mL氯仿洗涤所得的水溶液，并用30mL水萃取洗涤液。合并所有的水层，并在减压下除去溶剂。通过反相硅胶柱色谱法[洗脱剂；水]纯化所得的残余物，得到0.29g[(2R，3S，4R，5R)-5-[3-(氨基羰基)-5-氟-2-氧代-1(2H)-吡嗪基]-3，4-二羟基四氢-2-呋喃基]甲基二氢磷酸酯的正丁基铵盐黄色固体。
IR(KBr)cm-116851H-NMR(DNSO-d6)δ0.75-0.90(3H，m)，1.25-1.40(2H，m)，1.45-1.70(2H，m)，2.70-2.80(2H，m)，3.3-4.7(8H，m)，5.33(1H，d，J＝10Hz)，5.42(1H，d，J＝17Hz)，5.90(2H，brs)，7.95(1H，brs)，8.34(1H，d，J＝5.0Hz)，8.63(1H，brs)参考实施例16 将0.21g[(2R，3S，4R，5R)-5-[3-(氨基羰基)-5-氟-2-氧代-1(2H)-吡嗪基]-3，4-二羟基四氢-2-呋喃基]甲基二氢磷酸酯的正丁基铵盐悬浮在4.2mL乙腈和8.4mL N，N-二甲基甲酰胺的混合溶液，然后向其中加入0.15g 1，1’-羰基二咪唑，随后在室温下搅拌2小时。接着将19μL甲醇加到反应混合物，然后搅拌30分钟。随后将含有0.86g三正丁基焦磷酸铵的2.0mL N，N-二甲基甲酰胺溶液加到反应混合物，并将所得的混合物进一步搅拌14小时。在减压下除去溶剂，并连续地用离子交换柱色谱法[洗脱剂；0.10mol/L三乙基碳酸氢铵溶液]和反相柱色谱法[洗脱剂；水]纯化所得的残余物。将0.90mL甲醇加到所得的固体，并向其中加入含有0.17g高氯酸钠的4.5mL丙酮溶液。将沉淀离心，然后用丙酮洗涤，得到60mg浅黄色固体的钠盐，[[2R，3S，4R，5R]-5-[3-(氨基羰基)-5-氟-2-氧代-1(2H)-吡嗪基]-3，4-二羟基四氢-2-呋喃基]甲基三磷酸酯。
IR(KBr)cm-13422，1686，1252，11081H-NMR(D2O)δ4.3-4.5(5H，m)，6.09(1H，s)，8.41(1H，d，J＝5.1Hz)参考实施例17 将0.12g 6-氯-4-[(2R，3R，4S，5R)-3，4-二羟基-5-(羟基甲基)四氢-2-呋喃基]-3-氧代-3，4-二氢-2-吡嗪甲酰胺悬浮在1.2mL磷酸三甲酯，并在冰冷却下向其中加入38μL氧氯化磷，然后在相同的温度下搅拌1小时。在冰冷却下将反应混合物倾入含有0.30mL正三丁基胺和0.72g正三丁基焦磷酸铵的3.0mL二甲基甲酰胺溶液，并将所得的溶液于相同的温度下搅拌5分钟。将10mL 0.1mol/L三乙基碳酸氢铵溶液和10mL水连续地加到反应混合物，并通过离子交换柱色谱法[洗脱剂；0.07mol/L三乙基碳酸氢铵溶液]和反相硅胶柱色谱法[洗脱剂；水]纯化所得的混合物，得到41mg由{(2R，3S，4R，5R)-5-[3-(氨基羰基)-5-氯-2-氧代-1(2H)-吡嗪基]-3，4-二羟基四氢-2-呋喃基}甲基三磷酸酯的三乙基铵盐组成的固体。将41mg所得的{(2R，3S，4R，5R)-5-[3-(氨基羰基)-5-氯-2-氧代-1(2H)-吡嗪基]-3，4-二羟基四氢-2-呋喃基}甲基三磷酸酯的三乙基铵盐溶于0.43mL甲醇，然后向其中加入含有78mg高氯酸钠的2.2mL丙酮溶液。将所得的固体离心，然后用2.2mL丙酮洗涤，得到26mg(2R，3S，4R，5R)-5-[3-(氨基羰基)-5-氯-2-氧代-1(2H)-吡嗪基]-3，4-二羟基四氢-2-呋喃基}甲基三磷酸酯的钠盐白色固体。
IR(kBr)cm-11700，16541H-NMR(D2O)δ4.25-4.5(5H，m)，6.08(1H，s)，8.44(1H，s)参考实施例18 43mg已由Journal of Chemical Society ChemicalCommunication(J.Chem.Soc.，Chem.Commun.)，第40-41页(1989)所述的方法制备的2-[(2R，3S，4R，5R)-3，4-二羟基-5-甲氧基四氢-2-呋喃基]乙基膦酸二乙酯和82μL三乙基胺溶于1mL二氯甲烷。然后向其中连续地加入0.21mL苯甲酰氯和10mg 4-二甲基氨基吡啶，并将混合物在室温下搅拌1小时。以与上述相同的方式处理0.80g2-[(2R，3S，4R，5R)-3，4-二羟基-5-甲氧基四氢-2-呋喃基]乙基膦酸乙酯。然后将10mL水加到所得的反应混合物，分离有机层，并用20mL氯仿萃取水层二次。合并有机层，然后连续地用水和饱和盐水溶液洗涤。接着用无水硫酸镁干燥，并在减压下除去溶剂。用硅胶柱色谱法纯化所得的残余物[洗脱剂；氯仿]，得到1.38g(2R，3R，4R，5R)-4-(苯甲酰氧基)-5-[2-(二乙氧基磷酰基)乙基]-2-甲氧基四氢-3-呋喃基苯甲酸酯，其为无色油产物。
IR(neat)cm-117291H-NMR(CDCl3)δ1.3-1.35(6H，m)，1.8-2.2(4H，m)，3.46(3H，s)，4.0-4.2(4H，m)，4.3-4.45(1H，m)，5.10(1H，s)，5.52(1H，t，J＝5.1Hz)，5.59(1H，d，J＝5.1Hz)，7.33(2H，t，J＝7.8Hz)，7.41(2H，t，J＝7.8Hz)，7.5-7.6(2H，m)，7.90(2H，d，J＝7.3Hz)，7.99(2H，d，J＝7.3Hz)参考实施例19 将1.34g(2R，3R，4R，5R)-4-(苯甲酰氧基)-5-[2-(二乙氧基磷酰基)乙基]-2-甲氧基四氢-3-呋喃基苯甲酸酯和1.30mL乙酸酐溶于20mL乙酸，然后在冰冷却下向其中加入0.13mL浓硫酸。升温后，将混合物在室温下静置16小时。将反应混合物倾入50mL乙酸乙酯、50mL冰和100mL饱和碳酸氢钠水溶液的混合溶液。分离有机层，并用50mL乙酸乙酯萃取水层二次。合并有机层，然后用饱和盐水溶液洗涤。接着用无水硫酸镁干燥，并在减压下除去溶剂。用硅胶柱色谱法[洗脱剂；甲苯∶乙酸乙酯＝1∶1]纯化所得的残余物，以得到1.19g无色油产物，(2S，3R，4R，5R)-2-(乙酰氧基)-4-(苯甲酰氧基)-5-[2-(二乙氧基磷酰基)乙基]四氢-3-呋喃基苯甲酸酯。
IR(neat)cm-11729
1H-NMR(CDCl3)δ1.3-1.35(6H，m)，1.8-2.2(4H，m)，2.11，2.16(3H，2s)，4.05-4.2(4H，m)，4.45-4.5(1H，m)，5.45-5.7(2H，m)，6.37，6.62(1H，2d，J＝1.0，3.9Hz)，7.3-7.5(4H，m)，7.5-7.6(2H，m)，7.85-7.9(2H，m)，7.95-8.05(2H，m)参考实施例20 将50mg 3-羟基-2-吡嗪甲酸甲酯悬浮在1.6mL 1，1，1，3，3，3-六甲基二硅氮烷，并在氮气氛下将溶液加热回流1小时。静置冷却后，在减压下除去溶剂并向其中加入含有0.17g(2S，3R，4R，5R)-2-(乙酰氧基)-4-(苯甲酰氧基)-5-[2-(二乙氧基磷酰基)乙基]四氢-3-呋喃基苯甲酸酯的乙腈溶液。然后在减压下除去溶剂。在氮气氛下将所得的残余物悬浮在2.00mL乙腈，然后在冰冷却下向其中加入67μL氯化锡(IV)，接着使其在室温下静置24小时。以与上述相同的方式处理300mg3-羟基-2-吡嗪甲酸甲酯，并将所得的反应混合物倾入50mL乙酸乙酯、50mL冰和100mL饱和碳酸氢钠水溶液的混合溶液。过滤除去沉淀，分离有机层，并用50mL乙酸乙酯萃取水层。合并有机层，并用饱和盐水溶液洗涤所得的有机层，然后用无水硫酸镁干燥。接着在减压下除去溶剂。用硅胶柱色谱法[洗脱剂；乙酸乙酯∶甲醇＝100∶1]纯化所得的残余物，得到0.76g无色油产物，4-{(2R，3R，4R，5R)-3，4-双(苯甲酰氧基)-5-[2-(二乙氧基磷酰基)乙基]四氢-2-呋喃基}-3-氧代-3，4-二氢-2-吡嗪甲酸甲酯。
IR(neat)cm-11734，1670
1H-NMR(CDCl3)δ13-1.35(6H，m)，1.85-2.3(4H，m)，3.97(3H，s)，4.05-4.2(4H，m)，4.45-4.S5(1H，m)，5.65(1H，t，J＝6.SHz)，5.74(1H，dd，J＝3.6，5.9Hz)，6.24(1H，d，J＝3.6Hz)，7.3-7.4(4H，m)，7.5-7.6(4H，m)，7.85-7.95(4H，m)参考实施例21通过已知的方法、其等同的方法或它们的联合应用，以[2-14C]丙二酸二乙酯为原料生产6-氟-3-羟基-2-[2-14C]吡嗪甲酰胺(放射化学纯度99.0％)。例如，国际专利公开WO00/10569描述了这种生产方法。
参考实施例22 以与参考实施例17相同的方式，由136mg4-[(2R，3R，4S，SR)-3，4-二羟基-5-(羟基甲基)四氢-2-呋喃基]-3-氧代-3，4-二氢-2-吡嗪甲酰胺得到140mg(2R，3S，4R，5R)-5-[3-(氨基羰基)-2-氧代-1(2H)-吡嗪基]-3，4-二羟基四氢-2-呋喃基}甲基三磷酸酯的钠盐白色固体。
1H-NMR(D2O)δ4.30-4.39(4H，m)，4.45-4.48(1H，m)，6.14(1H，s)，7.86(1H，d，J＝3.6Hz)，8.34(1H，d，J＝3.6Hz)参考实施例23
以与参考实施例17相同的方式，由0.1g 4-[(2R，3R，4S，5R)-3，4-二羟基-5-(羟基甲基)四氢-2-呋喃基]-6-甲基-3-氧代-3，4-二氢-2-吡嗪甲酰胺得到0.06g(2R，3S，4R，5R)-5-[3-(氨基羰基)-5-甲基-2-氧代-1(2H)-吡嗪基]-3，4-二羟基四氢-2-呋喃基甲基三磷酸酯的钠盐白色固体。
IR(KBr)cm-11684，16541H-NMR(D2O)δ2.44(3H，s)，4.31-4.47(5H，m)，6.12(1H，s)，8.20(1H，s)参考实施例24 以与参考实施例17相同的方式，由0.06g4-[(2R，3R，4S，5R)-3，4-二羟基-5-(羟基甲基)四氢-2-呋喃基]-3-氧代-6-苯基-3，4-二氢-2-吡嗪甲酰胺得到0.02g钠盐黄色固体，(2R，3S，4R，5R)-5-[3-(氨基羰基)-2-氧代-5-苯基-1(2H)-吡嗪基]-3，4-二羟基四氢-2-呋喃基}甲基三磷酸酯。
IR(KBr)cm-11684，1654
1H-NMR(D2O)δ4.07-4.41(5H，m)，6.22(1H，s)，7.47-7.60(3H，m)，7.99(2H，d，J＝7.8Hz)，8.58(1H，s)参考实施例25 以与参考实施例17相同的方式，由128mg 4-[(2R，3R，5S)-3-羟基-5-(羟基甲基)四氢-2-呋喃基]-3-氧代-3，4-二氢-2-吡嗪甲酰胺得到146mg{(2S，4R，5R)-5-[3-(氨基羰基)-2-氧代-1(2H)-吡嗪基]-4-羟基四氢-2-呋喃基}甲基三磷酸酯的钠盐白色固体。
1H-NMR(D2O)δ2.04-2.18(2H，m)，4.23-4.29(1H，m)，4.50-104.58(2H，m)，4.78-4.88(1H，m)，6.03(1H，s)，7.86(1H，d，J＝3.8Hz)，8.41(1H，d，J＝3.8Hz)参考实施例26 将0.9g 4-[(2R，3R，4S，5R)-3，4-二羟基-5(羟基甲基)四氢-2-呋喃基]-3-氧代-3，4-二氢-2-吡嗪甲酸甲酯悬浮在9mL N，N-二甲基乙酰胺。向其中加入2.3mL苯甲醛二甲基缩醛和160mg吡啶鎓对甲苯磺酸盐，并将混合物于65℃下搅拌7小时。然后，将反应溶液倾入10mL乙酸乙酯和5mL水的混合溶液。过滤收集沉淀的固体，得到0.24g白色固体，4-[(3aR，4R，6R，6aR)-6-(羟基甲基)-2-苯基四氢呋喃并[3，4-d][1，3]间二氧杂环戊烯-4-基]-3-氧代-3，4-二氢-2-吡嗪甲酸甲酯。然后分离滤液，并连续地用5mL水和5mL饱和氯化钠水溶液洗涤，并用无水硫酸镁干燥。在减压下除去溶剂，并用乙酸乙酯洗涤残余物，得到0.40g白色固体，4-[(3aR，4R，6R，6aR)-6-(羟基甲基)-2-苯基四氢呋喃并[3，4-d][1，3]间二氧杂环戊烯-4-基]-3-氧代-3，4-二氢-2-吡嗪甲酸甲酯IR(KBr)cm-13440，17311H-NMR(DMSO-d6)δ3.61-3.71(2H，m)，3.83(3H，s)，4.50-4.53(1H，m)，4.86(1H，dd，J＝2.2，6.6Hz)，5.01(1H，dd，J＝2.0，6.3Hz)，5.23(1H，t，J＝4.9Hz)，5.95(1H，s)，6.07(1H，d，J＝2.0Hz)，7.45-7.47(3H，m)，7.49(1H，d，J＝4.4Hz)，7.54-7.57(2H，m)，8.09(1H，d，J＝4.4Hz)参考实施例27 将0.30g 3-羟基-2-吡嗪甲酸甲酯溶于1.5mL二甲亚砜，然后连续地向其中加入0.70mL三乙基胺和0.54gL-天门冬氨酸二乙酯盐酸盐，接着在室温下搅拌8小时。在将氯仿和水加到反应溶液之后，用2mol/L盐酸调节混合物至pH2，并分离有机层。用水洗涤所得的有机层，然后用无水硫酸镁干燥，并在减压下除去溶剂。将甲苯和正己烷加到所得的残余物，并过滤收集沉淀，得到0.18g(2S)-2-{[(3-羟基-2-吡嗪基)羰基]氨基}丁二酸二乙酯。
1H-NMR(CDCl3)δ1.27(3H，t，J＝7.2Hz)，1.30(3H，t，J＝7Hz)，2.94(1H，dd，J＝4.4，17.2Hz)，3.15(1H，dd，J＝4.8，17.2Hz)，4.14-4.23(2H，m)，4.24-4.32(2H，m)，4.99-5.02(1H，m)，8.15(1H，d，J＝2.6Hz)，8.40(1H，d，J＝1.5Hz)，8.78(1H，d，J＝5.9Hz)，12.4(1H，brs)参考实施例28 将2.0g 3-氧代-3，4-二氢-2-吡嗪甲腈溶于20mL甲醇，然后在冰冷却下向其中加入氯化氢气体至饱和。在相同的温度下搅拌6小时后，向其中加入乙酸乙酯，并过滤收集沉淀，得到2.3g黄色固体，3-氧代-3，4-二氢-2-吡嗪亚甲氨酸(carboximidate)甲酯盐酸盐。
1H-NMR(DNSO-d6)δ4.27(3H，s)，7.88(1H，d，J＝3.4Hz)，7.91(1H，brs)，8.07(1H，brs)，8.15(1H，d，J＝3.4Hz)，8.71(1H，brs)参考实施例29 将0.40g 3-氧代-3，4-二氢-2-吡嗪亚甲氨酸甲酯盐酸盐溶于4mL25％氨水，然后在室温下搅拌2小时。向其中加入甲醇，并过滤收集沉淀，得到0.21g浅黄色固体，3-氧代-3，4-二氢-2-吡嗪亚甲酰胺(carboximidamide)。
1H-NMR(DMSO-d6，D2O)δ7.60(1H，s)，8.19(1H，s)参考实施例30 将0.2g 4-[(2R，3R，4S，5R)-3，4-二羟基-5-(羟基甲基)四氢-2-呋喃基]-3-氧代-3，4-二氢-2-吡嗪甲酰胺悬浮在4mL乙腈，然后在冰冷却下向其中加入0.2mL二磷酰氯，随后在相同的温度下搅拌20分钟。用1mol/L三乙基碳酸氢铵溶液将反应溶液调节至pH7，然后在减压下浓缩。用反相硅胶柱色谱法[洗脱剂；水]纯化所得的残余物，得到0.29g(2R，3S，4R，5R)-5-[3-(氨基羰基)-2-氧代-1(2H)-吡嗪基]-3，4-二羟基四氢-2-呋喃基}甲基磷酸酯的三乙基铵盐固体。
1H-NMR(D2O)δ1.28(9H，t，J＝7.3Hz)，3.20(6H，q，J＝7.3Hz)，4.15-4.20(1H，m)，4.28-4.40(4H，m)，6.11(1H，d，J＝2.0Hz)，7.80(1H，d，J＝4.2Hz)，8.34(1H，d，J＝4.2Hz)室温下将含有0.35g高氯酸钠的7ml丙酮溶液加到含有0.28g以上的一磷酸的三乙基铵盐的1.4mL甲醇悬浮液，并将混合物在相同的温度下搅拌1小时。过滤收集沉淀，然后用丙酮洗涤，得到0.19g钠盐白色固体，(2R，3S，4R，5R)-5-[3-(氨基羰基)-2-氧代-1(2H)-吡嗪基]-3，4-二羟基四氢-2-呋喃基}甲基磷酸酯。
IR(KBr)cm-116621H-NMR(D2O)δ4.15-4.19(1H，m)，4.29-4.38(4H，m)，6.12(1H，s)，7.80(1H，d，J＝3.8Hz)，8.35(1H，d，J＝3.8Hz)参考实施例31
将0.11g 4-[(2R，3R，4S，5R)-3，4-二羟基-S-(羟基甲基)四氢-2-呋喃基]-3-氧代-3，4-二氢-2-吡嗪甲酰胺悬浮在2.0mL磷酸三甲酯，然后在冰冷却下向其中加入0.11mL氧氯化磷，随后在相同的温度下搅拌2小时。将含有1.2mL三丁基胺和1.12g三丁基磷酸铵的6.0mL二甲基甲酰胺溶液加到反应混合物，并将所得的混合物于相同的温度下搅拌1小时。将0.1mol/L三乙基碳酸氢铵溶液加到反应混合物，并所得的混合物于室温下静置12小时。在减压下除去溶剂。用离子交换柱色谱法[洗脱剂；0.07mol/L三乙基碳酸氢铵溶液]纯化所得的残余物，以收集含有{(2R，3S，4R，5R)-5-[3-(氨基羰基)-2-氧代-1(2H)-吡嗪基]-3，4-二羟基四氢-2-呋喃基甲基二磷酸酯的三乙基铵盐的馏分和含有{(2R，3S，4R，5R)-5-[3-(氨基羰基)-2-氧代-1(2H)-吡嗪基]-3，4-二羟基四氢-2-呋喃基}甲基三磷酸酯的三乙基铵盐的馏分。结果是得到143mg固体和113mg另一种固体。将143mg所得的{(2R，3S，4R，5R)-5-[3-(氨基羰基)-2-氧代-1(2H)-吡嗪基]-3，4-二羟基四氢-2-呋喃基}甲基二磷酸酯的乙基铵盐中的110mg溶于3.0mL甲醇，然后向其中加入含有0.28g高氯酸钠的7.5mL丙酮溶液。将固体离心，然后用丙酮洗涤，得到64mg钠盐白色固体，{(2R，3S，4R，5R)-5-[3-(氨基羰基)-2-氧代-1(2H)-吡嗪基]-3，4-二羟基四氢-2-呋喃基}甲基二磷酸酯。
IR(KBr)cm-13418，1682，1236，983，9051H-NMR(D2O)δ4.2-4.5(5H，m)，6.12(1M，s)，7.83(1H，d，J＝3.7Hz)，8.35(1H，d，J＝3.7Hz)
实施例1 将65mg 4-[(3aR，4R，6R，6aR)-6-(羟基甲基)-2，2-二甲基四氢呋喃并[3，4-d][1，3]间二氧杂环戊烯-4-基]-3-氧代-3，4-二氢-2-吡嗪甲酰胺、44mg 1H-四唑和10mg分子筛4A悬浮在2.0mL乙腈。在冰冷却下向其中分部分加入含有0.16g已通过Journal of MedicinalChemistry(J.Med.Chem.)第38卷，第20期，第3941-3950期(1995)所述的方法单独制备的双(S-新戊酰基-2-硫乙基)-N，N-二异丙基亚磷酰胺(phosphoramidite)的3.0mL乙腈溶液，并将所得的混合物于相同的温度下搅拌40分钟。将含有78mg间氯过苯甲酸的1.0mL乙腈溶液加到反应混合物，并将所得的混合物在相同的温度下再搅拌10分钟。将10mL乙酸乙酯和10mL加到反应混合物。分离有机层，并用20mL乙酸萃取水层。合并所有的有机层，并用饱和碳酸氢钠洗涤合并的层，然后用无水硫酸镁干燥。在减压下除去溶剂。用硅胶柱色谱法[洗脱剂；氯仿∶甲醇＝50∶1]纯化所得的残余物得到68mg黄色油产物，2，2-二甲基-硫代丙酸S-(2-{[(3aR，4R，6R，6aR)-6-(3-氨基甲酰基-2-氧代-2H-吡嗪-1-基)-2，2-二甲基四氢呋喃并[3，4-d][1，3]间二氧杂环戊烯-4-基甲氧基]-[2-(2，2-二甲基-丙酰基硫烷基)-乙氧基]-磷酰氧基}-乙基)-酯。
IR(neat)cm-116841H-NMR(CDCl3)δ1.22(9H，s)，1.23(9H，s)，1.40(3H，s)，1.65(3H，s)，3.08(2H，t，J＝，6.9Hz)，3.10(2H，t，J＝6.8Hz)，4.04-4.12(4H，m)，4.29-4.36(1H，m)，4.39-4.45(1H，m)，4.59-4.64(1H，m)，4.86-4.88(2H，m)，6.02(1H，brs)，6.05(1H，d，J＝1.SHz)，7.84(1H，d，J＝4.3Hz)，7.87(1H，d，J＝4.3Hz)，9.17(1H，brs)实施例2 将60mg 2，2-二甲基-硫代丙酸S-(2-{[(3aR，4R，6R，6aR)-6-(3-氨基甲酰基-2-氧代-2H-吡嗪-1-基)-2，2-二甲基-四氢呋喃并[3，4-d][1-3]间二氧杂环戊烯-4-基甲氧基]-[2-(2，2-二甲基-丙酰基硫烷基)-乙氧基]-磷酰氧基}-乙基)-酯溶于2.4mL水和2.4mL甲醇的混合溶剂，然后向其中分部分加入1.2g Dowex 50WX4-200离子交换树脂(H+形式)，并将混合物于室温下搅拌3小时。将反应混合物过滤，用甲醇洗涤移出的树脂，并合并滤液和洗涤液。然后在减压下除去有机溶剂。过滤收集沉淀，得到36mg白色固体，2，2-二甲基-硫代丙酸S-(2-[[(2R，3S，4R，5R)-5-(3-氨基甲酰基-2-氧代-2H-吡嗪-1-基)-3，4-二羟基-四氢呋喃-2-基甲氧基]-[2-(2，2-二甲基-丙酰基硫烷基)-乙氧基]-磷酰氧基]-乙基)酯。
IR(KBr)cm-11677，16601H-NMR(CDCl3)δ1.22(9H，s)，1,23(9H，s)，3.11(4H，t，J＝7.0Hz)，3.67(1H，brs)，4.05-4.15(4H，m)，4.25-4.38(3H，m)，4.44-4.52(2H，m)，4.67(1H，brs)，6.04(1H，d，J＝3.7Hz)，6.10(1H，brs)，7.90(1H，d，J＝4.1Hz)，8.08(1H，d，J＝4.1Hz)，8.95(1H，brs)
实施例3 以与实施例1相同的方式，由40mg 4-[(3aR，4R，6R，6aR)-6-(羟基甲基)-2，2-二甲基四氢呋喃并[3，4-d][1，3]间二氧杂环戊烯-4-基]-6-氯-3-氧代-3，4-二氢-2-吡嗪甲酰胺得到12mg黄色油产物，2，2-二甲基-硫代丙酸S-(2-{[(3aR，4R，6R，6aR)-6-(3-氨基甲酰基-5-氯-2-氧代-2H-吡嗪-1-基)-2，2-二甲基-四氢呋喃并[3，4-d][1，3]间二氧杂环戊烯-4-基甲氧基]-[2-(2，2-二甲基-丙酰基硫烷基)-乙氧基]-磷酰氧基}-乙基)酯。
IR(neat)cm-116871H-NMR(CDCl3)δ1.21(9H，s)，1.22(9H，s)，1.40(3H，s)，1.64(3H，s)，3.07(2H，dt，J＝7.0，1.SHz)，3.14(2H，t，J＝6.8Hz)，4.06-4.16(4H，m)，4.34-4.39(1H，m)，4.42-4.47(1H，m)，4.63-4.65(1H，m)，4.85(1H，dd，J＝6.4，2.2Hz)，4.89(1H，dd，J＝6.2，2.8Hz)，6.04(1H，d，J＝2.2Hz)，6.17(1H，brs)，7.98(1H，s)，9.07(1H，brs)实施例4
以与实施例2相同的方式，由12mg 2，2-二甲基-硫代丙酸S-(2-{[(3aR，4R，6R，6aR)-6-(3-氨基甲酰基-5-氯-2-氧代-2H-吡嗪-1-基)-2，2-二甲基-四氢呋喃并[3，4-d][1，3]间二氧杂环戊烯-4-基甲氧基]-[2-(2，2-二甲基-丙酰基硫烷基)-乙氧基]-磷酰氧基}-乙基)酯得到7mg黄色油产物，2，2-二甲基-硫代丙酸S-(2-{[(2R，3S，4R，5R)-5-(3-氨基甲酰基-5-氯-2-氧代-2H-吡嗪-1-基)-3，4-二甲基-四氢-呋喃-2-基甲氧基]-[2-(2，2-二甲基-丙酰基硫烷基)-乙氧基]-磷酰氧基}-乙基)酯。
IR(neat)cm-11686，16541H-NMR(CDCl3)δ1.21(9H，s)，1.23(9H，s)，3.00(1H，brs)，3.10-3.16(4H，m)，3.83(1H，brs)，4.05-4.20(4H，m)，4.25-4.55(5H，m)，6.02(1H，d，J＝2.4Hz)，6.40(1H，brs)，8.15(1H，s)，8.81(1H，brs)实施例5 将0.05g 4-[(3aR，4R，6S，6aR)-6-(碘甲基)-2，2-二甲基四氢呋喃并[3，4-d][1，3]间二氧杂环戊烯-4-基]-3-氧代-3，4-二氢-2-吡嗪甲酰胺悬浮在2mL甲苯。向其中加入70mg已通过Journal ofMedicinal Chemistry(J.Med.Chem.)第37卷，第3902-3909页(1994)所述的方法单独制备的双(2，2-二甲基-丙酰氧基甲基)磷酸酯的银盐，将混合物在60℃下搅拌2小时。以与以上相同的方式处理0.15g4-[(3aR，4R，6S，6aR)-6-(碘甲基)-2，2-二甲基四氢呋喃并[3，4-d][1.3]间二氧杂环戊烯-4-基]-3-氧代-3，4-二氢-2-吡嗪甲酰胺。以所得的反应混合物合并，并在减压下除去溶剂.用硅胶柱色谱法[洗脱剂；氯仿∶甲醇＝10∶1]纯化所得的残余物，得到0.12g黄色固体，2，2-二甲基-丙酸[(3aR，4R，6R，6aR)-6-(3-氨基甲酰基-2-氧代-2H-吡嗪-1-基)-2，2-二甲基-四氢呋喃并[3，4-d][1，3]间二氧杂环戊烯-4-基甲氧基]-(2，2-二甲基-丙酰氧基甲氧基)-磷酰氧基甲酯。
IR(KBr)cm-11750，1684，16541H-NMR(DMSO-d6)δ1.14(18H，s)，1.29(3H，s)，1.51(3H，s)，3.5-3.7(2H，m)，4.34(1H，dd，J＝4.0，7.2Hz)，4.75(1H，dd，J＝2.8，6.0Hz)，4.86(1H，dd，J＝2.0，6.0Hz)，5.23(1H，t，J＝4.8Hz)，5.31(2H，s)，5.34(2H，s)，5.97(1H，d，J＝2.0Hz)，7.56(1H，d，J＝4.4Hz)，7.83(1H，brs)，8.06(1H，d，J＝4.4Hz)，8.43(1H，brs)实施例6 将0.1g 2，2-二甲基-丙酸[(3aR，4R，6R，6aR)-6-(3-氨基甲酰基-2-氧代-2H-吡嗪-1-基)-2，2-二甲基-四氢呋喃并[3，4-d][1，3]间二氧杂环戊烯-4-基甲氧基]-(2，2-二甲基-丙酰氧基甲氧基)-磷酰氧基甲酯溶于1.5mL甲醇和1.5mL水的混合溶液，然后向其中加入5mLDowex 50WX4-200离子交换树脂(H+形式)，随后在室温下搅拌1.5小时。然后过滤除去树脂，接着用2.5mL乙腈和2.5mL水的混合溶液洗涤。将所得的洗涤液和滤液合并，并在减压下除去溶剂。将所得残余物冻干，得到0.07g浅黄色固体，2，2-二甲基-丙酸[(2R，3S，4R，5R)-5-(3-氨基甲酰基-2-氧代-2H-吡嗪-1-基)-3，4-二羟基-四氢-呋喃-2-基甲氧基]-(2，2-二甲基-丙酰氧基甲氧基)-磷酰氧基甲酯。
IR(KBr)cm-11751，16701H-NMR(DMSO-d6)δ1.16(18H，s)，3.64(1H，dd，J＝2.0，12.4Hz)，3.81(1H，dd，J＝2.0，12.4Hz)，3.9-4.0(3H，m)，5.46(2H，s)，5.49(2H，s)，5.92(1H，d，J＝2.4Hz)，7.54(1H，d，J＝4.4Hz)，7.75(1H，brs)，8.29(1H，d，J＝4.4Hz)，8.35(1H，brs)实施例7 将0.50g 4-[(3aR，4R，6R，6aR)-6-(羟基甲基)-2，2-二甲基四氢呋喃并[3，4-d][1，3]间二氧杂环戊烯-4-基]-3-氧代-3，4-二氢-2-吡嗪甲酰胺悬浮在50mL吡啶。然后连续地向此悬浮液加入含有2.2g已通过Antiviral Research，第43卷，第37-53页(1999)所述的方法单独制备的氯苯基磷酰基P→N-1-丙氨酸甲酯的43mL四氢呋喃溶液和1.3mL N-甲基咪唑，并将混合物于室温下搅拌3小时。在减压下从反应混合物中除去溶剂。用硅胶柱色谱法[洗脱剂；氯仿∶甲醇＝40∶1]纯化所得的残余物，得到0.43g浅黄色固体，(2S)-[[(3aR，4R，6R，6aR)-6-(3-氨基甲酰基-2-氧代-2H-吡嗪-1-基)-2，2-二甲基-四氢呋喃并[3，4-d][1，3]间二氧杂环戊烯-4-基甲氧基]-苯氧基-磷酰基氨基]-丙酸甲酯。
IR(KBr)cm-11749，16841H-NMR(DMSO-d6)δ1.22，1.23(3H，d，J＝7.1Hz)，1.28，1.30(3H，s)，1.50，1.51(3H，s)，3.58，3.60(3H，s)，3.80-3.88(1H，m)，4.1S-4.34(2H，m)，4.42-4.45，4.50-4.54(1H，m)，4.74，4.81(1H，dd，J＝2.0，6.3Hz)，4.67，4.93(1H，dd，J＝3.0，6.1Hz)，5.94-5.97(1H，m)，6.09-6.15(1H，m)，7.08-7.20(3H，m)，7.32-7.39(2H，m)，7.46，7.51(1H，d，J＝4.0Hz)，7.75-7.80(1H，brs)，7.84-7.87(1H，m)，8.26-8.32(1H，m)。
实施例8 以与实施例2相同的方式，由190mg(2S)-{[(3aR，4R，6R，6aR)-6-(3-氨基甲酰基-2-氧代-2H-吡嗪-1-基)-2，2-二甲基-四氢呋喃并[3，4-d][1，3]间二氧杂环戊烯-4-基甲氧基]-苯氧基-磷酰基氨基)-丙酸甲酯得到49mg白色固体，(2S)-{[(2R，3S，4R，5R)-5-(3-氨基甲酰基-2-氧代-2H-吡嗪-1-基)-3，4-二羟基-四氢-呋喃-2-基甲氧基]-苯氧基-磷酰基氨基]-丙酸甲酯。
IR(KBr)cm-11735，1676，16611H-NMR(DMSO-d6)δ1.21，1，23(3H，d，J＝7.2Hz)，3.57，3.58(3H，s)，3.81-3.98(2H，m)，4.02-4.04(1H，m)，104.12-4.41(3H，m)，5.60(2H，brs)，5.91-5.94(1H，m)，6.10-6.20(1H，m)，7.15-7.24(3H，m)，7.34-7.45(3H，m)，7.73(1H，brs)，7.81，7.86(1H，d，J＝4.2Hz)，8.29(1H，brs)实施例9
将0.20g 4-[(2R，3R，4R，5R)-3，4-双(苯甲酰氧基)-5-[2-(二乙氧基磷酰基)乙基]四氢-2-呋喃基]-3-氧代-3，4-二氢-2-吡嗪甲酸甲酯溶于2.0mL乙腈，然后在冰冷却下向其中加入0.33mL溴三甲基甲硅烷，随后在0℃下搅拌30分钟，接着在室温下搅拌1小时。在减压下从反应混合物中除去溶剂。将2.0mL甲醇加到所得的固体并溶解，随后在冰冷却下向其中吹入氨气体至饱和，然后在室温下搅拌3小时。在减压下从反应混合物中除去溶剂，加入10mL水，并用氯仿洗涤混合物。过滤不溶产物，然后在减压下除去溶剂。通过反相硅胶柱色谱法[洗脱剂；水]纯化所得的产物，得到28mg浅黄色固体，2-[(2R，3S，4R，5R)-5-[3-(氨基羰基)-2-氧代-1(2H)-吡嗪基]-3，4-二羟基四氢-2-呋喃基]乙基磷酸。
IR(KBr)cm-116761H-NMR(D2O)δ1.7-1.95(2H，m)，2.0-2.2(2H，m)，3.95-4.0(1H，m)，4.2-4.25(1H，m)，4.33(1H，d，J＝4.6Hz)，6.06(1H，s)，7.79(1H，d，J＝4.0Hz)，8.03(1H，d，J＝4.0HZ)实施例10
以与参考实施例6相同的方式，由0.43g 3-羟基-6-甲基-2-吡嗪甲酰胺制备1.2g黄色油产物，[(2R，3R，4R，5R)-5-[3-(氨基羰基)-5-甲基-2-氧代-1(2H)-吡嗪基]-3，4-双(苯甲酰氧基)四氢-2-呋喃基]甲基苯甲酸酯。
IR(KBr)cm-11727，1686，16541H-NMR(CDCl3)δ2.15(3H，s)，4.67(1H，dd，J＝3.4，12.7Hz)，4.85-4.88(1H，m)，4.99(1H，dd，J＝2.4，12.7Hz)，5.88-5.95(2H，m)，6.03(1H，d，J＝3.2Hz)，6.47(1H，d，J＝3.9Hz)，7.36-7.65(10H，m)，7.93-8.00(4H，m)，8.10-8.13(2H，m)，9.12(1H，d，J＝3.9Hz)实施例11 以与参考实施例7相同的方式，由1.05g[(2R，3R，4R，5R)-5-[3-(氨基羰基)-5-甲基-2-氧代-1(2H)-吡嗪基]-3，4-双(苯甲酰氧基)四氢-2-呋喃基]甲基苯甲酸酯得到0.4g浅黄色固体，4-[(2R，3R，4S，5R)-3，4-二羟基-5-(羟基甲基)四氢-2-呋喃基]-6-甲基-3-氧代-3，4-二氢-2-吡嗪甲酰胺。
IR(KBr)cm-11698，16541H-NMR(DMSO-d6)δ2.24(3H，s)，3.62-3.67(1H，m)，3.80-3.85(1H，m)，3.94-4.01(3H，m)，5.10(1H，d，J＝5.1Hz)，5.32(1H，t，J＝4.8Hz)，5.62(1H，d，J＝3.2Hz)，5.92(1H，d，J＝1.7Hz)，7.76(1H，brs)，8.16(1H，s)，8.48(1H，brs)实施例12
以与参考实施例6相同的方式，由0.35g 3-羟基-6-苯基-2-吡嗪甲酰胺得到0.5g黄色油产物，[(2R，3R，4R，5R)-5-[3-(氨基羰基)-2-氧代-5-苯基-1(2H)-吡嗪基]-3，4-双(苯甲酰氧基)四氢-2-呋喃基]甲基苯甲酸酯。
IR(KBr)cm-11720，1717，1684，16541H-NMR(CDCl3)δ4.77(1H，dd，J＝3.6，12.4Hz)，4.90-104.97(2H，m)，5.93-5.99(2H，m)，6.03(1H，d，J＝3.7Hz)，6.58(1H，d，J＝4.2Hz)，7.32-7.68(14H，m)，7.95-8.05(6H，m)，8.11(1H，s)，8.93(1H，d，J＝3.4Hz)实施例13 以与参考实施例7相同的方式，由0.48g[(2R，3R，4R，5R)-5-[3-(氨基羰基)-2-氧代-5-苯基-1(2H)-吡嗪基]-3，4-双(苯甲酰氧基)四氢-2-呋喃基]甲基苯甲酸酯得到0.12g黄色固体，4-[(2R，3R，4S，5R)-3，4-二羟基-5-(羟基甲基)四氢-2-呋喃基]-3-氧代-6-苯基-3，4-二氢-2-吡嗪甲酰胺。
IR(KBr)cm-11685，1670，1654
1H-NMR(DMSO-d6)δ3.71-3.75(1H，m)，3.93-3.97(1H，m)，4.02-4.15(3H，m)，5.10(1H，d，J＝6.6Hz)，5.67(1H，t，J＝4.0Hz)，5.73(1H，d，J＝4.6Hz)，S.96(1H，s)，7.32-7.46(3H，m)，7.82(1H，brs)，7.88(2H，d，J＝7.8Hz)，8.43(1H，brs)，9.07(1H，s)实施例14 将0.24g 3-羟基-2-吡嗪甲酰胺悬浮在5mL 1，1，1-3，3，3-六甲基二硅氮烷，并将悬浮液加热回流2小时。冷却后，在减压下除去溶剂。加入5mL二甲苯，并在减压下除去溶剂。往所得的残余物连续地加入12.5mL乙腈、0.50g[(2S，4R)-4，5-双(乙酰氧基)四氢-2-呋喃基]甲基苯甲酸酯和0.29mL氯化锡(IV)，然后将混合物于室温下搅拌30分钟。将水加到反应溶液，并在减压下除去有机溶剂。然后将饱和的碳酸氢钠水溶液和乙酸乙酯加到残余物，并通过过滤除去不溶产物。分离有机层，并用乙酸乙酯萃取水层。所得的有机层用无水硫酸镁干燥并在减压下除去溶剂。用硅胶色谱法[洗脱剂；氯仿∶甲醇＝16∶1]纯化所得的残余物，得到0.61g浅黄色固体，{(2S，4R，5R)-4-(乙酰氧基)-5-[3-(氨基羰基)-2-氧代-1(2H)-吡嗪基]四氢-2-呋喃基}甲基苯甲酸酯。
IR(KBr)cm-11743，1706，16671H-NMR(CDCl3)δ2.13-2.23(5H，m)，4.67(1H，dd，J＝4.0，12.8Hz)，4.78-4.85(2H，m)，5.48(1H，d，J＝4.0Hz)，6.05(1H，s)，6.61(1H，brs)，7.47-7.51(2H，m)，7.58(1H，d，J＝4.0Hz)，7.62-7.66(1H，m)，7.96(1H，d，J＝4.0Hz)，8.02-8.04(2H，m)，9.06(1H，brs)实施例15 将1.21g{(2S，4R，5R)-4-(乙酰氧基)-5-[3-(氨基羰基)-2-氧代-1(2H)-吡嗪基]四氢-2-呋喃基}甲基苯甲酸酯溶于36mL甲醇，然后在冰冷却下向其中加入1.28g 28％甲醇钠甲醇溶液，随后在相同的温度下搅拌1小时。通过加入1mol/L盐酸而将反应溶液调节至pH5，并在减压下除去溶剂。用硅胶色谱法[洗脱剂；正己烷∶乙酸乙酯＝4∶1]纯化所得的残余物，并向其中加入2-丙醇和乙酸乙酯的混合溶剂。过滤收集沉淀，得到0.47g白色固体，4-[(2R，3R，5S)-3-羟基-5-(羟基甲基)四氢-2-呋喃基]-3-氧代-3，4-二氢-2-吡嗪甲酰胺。
IR(KBr)cm-11682，16541H-NMR(DMSO-d6)δ1.72(1H，dd-J＝5.2，13.2Hz)，1.86-1.93(1H，m)，3.61-3.66(1H，m)，3.88-3.93(1H，m)，4.25(1H，t，J＝4.0Hz)，4.43-4.48(1H，m)，5.28(1H，t，J＝5.0Hz)，5.77(1H，d，J＝4.0Hz)，5.82(1H，s)，7.56(1H，d，J＝4.4Hz)，7.76(1H，brs)，8.37(1H，d，J＝4.4Hz)，8.42(1H，brs)实施例16
将0.5g 4-[(3aR，4R，6R，6aR)-6-(羟基甲基)-2，2-二甲基四氢呋喃并[3，4-d][1，3]间二氧杂环戊烯-4-基]-3-氧代-3，4-二氢-2-吡嗪甲酰胺溶于5mL N，N-二甲基甲酰胺，然后向其中加入0.29g 1，1’-羰基二咪唑，随后在室温下搅拌1小时。然后向其中加入0.21mL 1，4-丁二醇，并将混合物于室温下搅拌1小时，然后在60℃下搅拌1小时。再向其中加入0.29mL 1，4-丁二醇，并将混合物于60℃下搅拌3小时。在减压下浓缩反应溶液，然后将30 mL乙酸乙酯、30mL水和5mL饱和盐水溶液加到浓缩物。分离有机层，然后用20mL乙酸乙酯萃取水层。合并有机层，然后用无水硫酸镁干燥，并在减压下除去溶剂。用硅胶色谱法[洗脱剂；乙酸乙酯∶甲醇＝10∶1]纯化所得的残余物，得到0.31g浅黄色油产物，{(3aR，4R，6R，6aR)-6-[3-(氨基羰基)-2-氧代-1(2H)-吡嗪基]-2，2-二甲基四氢呋喃并[3，4-d][1，3]间二氧杂环戊烯-4-基}甲基4-羟基丁基碳酸酯。
IR(KBr)cm-11750，1684，16541H-NMR(CDCl3)δ1.41(3H，s)，1.47-1.54(2H，m)，1.62-1.68(5H，m)，3.60-3.66(2H，m)，4.04-4.16(2H，m)，4.32(1H，dd，J＝3.2，12.4Hz)，4.48(1H，dd，J＝2.2，12.2Hz)，4.73-4.76(1H，m)，4.79(1H，dd，J＝2.4，6.0Hz)，4.92(1H，dd，J＝1.8，6.2Hz)，5.98(1H，d，J＝2.0Hz)，6.31(1H，d，J＝23.6Hz)，7.77(1H，s)，7.75(1H，s)，8.78(1H，br)，9.25(1H，brs)实施例17 将1.2g{(3aR，4R，6R，6aR)-6-[3-(氨基羰基)-2-氧代-1(2H)-吡嗪基]-2，2-二甲基-四氢呋喃并[3，4-d][1，3]间二氧杂环戊烯-4-基}甲基4-羟基丁基碳酸酯溶于8mL甲醇和60mL水的混合溶剂，然后向其中加入19g Dowex 50WX4-200离子交换树脂(H+形式)，然后在室温下搅拌3小时。接着过滤除去树脂，并用甲醇洗涤，然后用水洗涤。合并所得的滤液和洗涤液，并在减压下除去溶剂。将残余物溶于水，并将溶液冻干。用乙腈洗涤所得的固体，然后用氯仿洗涤，得到0.16g无色固体，(2R，3S，4R，5R)-5-[3-(氨基羰基)-2-氧代-1(2H)-吡嗪基]-3，4-二羟基四氢-2-呋喃基}甲基4-羟基丁基碳酸酯。
IR(KBr)cm-11745，16641H-NMR(DMSO-d6)δ1.45-1.51(2H，m)，1.64-1.67(2H，m)，3.40-3.42(2H，m)，3.90(1H，d，J＝4.8Hz)，4.08-4.15(4H，m)，4.36-4.47(3H，m)，5.38(1H，d，J＝5.2Hz)，5.74(1H，brs)，5.92(1H，s)，7.50(1H，d，J＝3.6Hz)，7.75(1H，brs)，7.81(1H，d，J＝3.6Hz)，8.30(1H，brs)实施例18 将200mg(2R，3R，4R，5R)-4-(乙酰氧基)-2-[(乙酰氧基)甲基]-5-[3-(氨基羰基)-2-氧代-1(2H)-吡嗪基]四氢-3-呋喃基乙酸酯溶于2mL吡啶，然后向其中加入0.1mL肼一水合物，随后在室温下搅拌1小时。然后向其中加入丙酮，接着在减压下除去溶剂。用硅胶色谱法[洗脱剂；乙酸乙酯∶甲醇＝10∶1]纯化所得的残余物，得到42mg白色固体，{(2R，3S，4R，5R)-5-[3-(氨基羰基)-2-氧代-1(2H)-吡嗪基]-3，4-二羟基四氢-2-呋喃基}甲基乙酸酯。
1H-NMR(DMSO-d6)δ3.20(3H，s)，3.90(1H，dd，J＝6.8，11.5)，4.06-4.09(1H，m)，4.12-4.17(1H，m)，4.31(1H，dd，J＝5.6，12.7)，4.35(1H，dd，J＝3.4，12.7)，5.33(1H，d，J＝6.6)，5.73，(1H，d，J＝5.1)，5.90(1H，d，J＝2.0)，7.57(1H，d，J＝4.4)，7.75(1H，brs)，7.85(1H，d，J＝4.4)，8.31(1H，brs)实施例19 将5g 4-[(2R，3R，4S，5R)-3，4-二羟基-5-(羟基甲基)四氢-2-呋喃基]-3-氧代-3，4-二氢-2-吡嗪甲酰胺悬浮在25mL乙酸酐和12.5mL吡啶，并将悬浮液在50℃下搅拌1小时，然后在70℃下搅拌1小时。将悬浮液冷却至室温后，过滤除去不溶产物。在减压下浓缩残余物，并通过硅胶柱色谱法[洗脱剂；乙酸乙酯]纯化浓缩物，得到1.26g浅黄色固体，(2R，3R，4R，5R)-2-[3-[(乙酰基氨基)羰基]-2-氧代-1(2H)-吡嗪基]-4-(乙酰氧基)-5-[(乙酰氧基)甲基]四氢-3-呋喃基乙酸酯。
IR(KBr)cm-11750，17091H-NMR(DMSO-d6)δ2.06(6H，s)，2.09(3H，s)，2.17(3H，s)，4.26-4.42(3H，m)，5.35(1H，t，J＝6.1Hz)，5.50(1H，dd，J＝3.7，6.1Hz)，6.06(1H，d，J＝3.4Hz)，7.50(1H，d，J＝4.4Hz)，7.83(1H，d，J＝4.4Hz)，11.44(1H，s)实施例20
将0.2g 4-[(3aR，4R，6R，6aR)-6-(羟基甲基)-2，2-二甲基四氢呋喃并[3，4-d][1，3]间二氧杂环戊烯-4-基]-3-氧代-3，4-二氢-2-吡嗪甲酰胺悬浮在1mL乙酸酐和4mL吡啶，并将悬浮液在室温下搅拌1小时。在减压下浓缩反应溶液，将5mL的水加到残余物，并用5mL乙酸乙酯萃取混合物10次。合并有机层，向其中加入1mL水，并用2mol/L盐酸调节所得的溶液至pH3。分离有机层，用饱和氯化钠水溶液洗涤，然后用无水硫酸镁干燥。然后在减压下除去溶剂。用硅胶柱色谱法[洗脱剂；氯仿∶甲醇＝10∶1]纯化所得的残余物，得到0.15g浅黄色油产物，{(3aR，4R，6R，6aR)-6-[3-(氨基羰基)-2-氧代-1(2H)-吡嗪基]-2，2-二甲基四氢呋喃并[3，4-d][1，3]间二氧杂环戊烯-4-基}甲基乙酸酯。
IR(KBr)cm-11743，16851H-NMR(CDCl3)δ1.41(3H，s)，1.65(3H，s)，1.94(3H，s)，4.32(1H，dd，J＝4.4，12.5Hz)，4.40(1H，dd，J＝2.9，12.5Hz)，154.68-4.71(1H，m)，4.76(1H，dd，J＝2.9，6.1Hz)，4.87(1H，dd，J＝2.1，6.2Hz)，5.95(1H，d，J＝2.0Hz)，6.17(1H，brs)，7.70(1H，d，J＝4.2Hz)，7.80(1H，d，J＝4.2Hz)，9.13(1H，brs)实施例21
将0.5g 4-[(3aR，4R，6R，6aR)-6-(羟基甲基)-2-苯基四氢呋喃并[3，4-d][1，3]间二氧杂环戊烯-4-基]-3-氧代-3，4-二氢-2-吡嗪甲酸甲酯悬浮在含有大约5 mol/L无水氨的5mL甲醇溶液，并将悬浮液于室温下搅拌3小时。过滤收集沉淀，然后用甲醇洗涤，得到0.34g无色固体，4-[(3aR，4R，6R，6aR)-6-(羟基甲基)-2-苯基四氢呋喃并[3，4-d][1，3]间二氧杂环戊烯-4-基]-3-氧代-3，4-二氢-2-吡嗪甲酰胺。
IR(KBr)cm-116841H-NMR(DMSO-d6)δ3.61-3.75(2H，m)，4.52-4.54(1H，m)，4.87(1H，dd，J＝2.4，6.3Hz)，5.00(1H，dd，J＝2.2，6.6Hz)，5.25(1H，t，J＝4.9HZ)，5.96(1H，s)，6.10(1H，d，J＝2.0Hz)，7.45-7.48(3H，m)，7.54-7.57(3H，m)，7.76(1H，brs)，8.06(1H，d，J＝4.4Hz)，8.34(1H，brs)实施例22 将1.39g 3-羟基-2-吡嗪甲酰胺悬浮在10mL 1，1，1，3，3，3-六甲基二硅氮烷，并将悬浮液加热回流10小时。冷却后，在减压下除去溶剂。然后加入5mL甲苯并在减压下除去溶剂。往所得的残余物中连续地加入15mL乙腈、4.14g β-D-呋喃核糖1，2，3，5-四乙酸酯和1.99mL三甲基甲硅烷基三氟甲烷磺酸酯，并将所得的混合物于室温下搅拌2小时。然后向其中加入0.95g β-D-呋喃核糖1，2，3，5-四乙酸酯，并将混合物于室温下再搅拌1小时。在减压下除去溶剂，并加入氯仿和水。分离有机层，并用饱和碳酸氢钠水溶液洗涤，然后用无水硫酸镁干燥。在减压下除去溶剂。将乙酸乙酯加到残余物，并过滤收集沉淀，得到1.73g(2R，3R，4R，5R)-4-(乙酰氧基)-2-[(乙酰氧基)甲基]-5-[3-(氨基羰基)-2-氧代-1(2H)-吡嗪基]四氢-3-呋喃基乙酸酯。
1H-NMR(CDCl3)δ2.10(3H，s)，2.16(3H，s)，2.17(3H，s)，4.40-4.52(3H，m)，S.29(1H，t，J＝6.2Hz)，5.48(1H，dd，J＝3.2，S.1Hz)，6.05(1H，brs)，6.16(1H，d，J＝3.2Hz)，7.79(1H，d，J＝4.2Hz)，7.81(1H，d，J＝4.2Hz)，8.98(1H，brs)，实施例23 将0.40g(2R，3R，4R，5R)-4-(乙酰氧基)-2-[(乙酰氧基)甲基]-5-[3-(氨基羰基)-2-氧代-1(2H)-吡嗪基]四氢-3-呋喃基乙酸酯悬浮在四氢呋喃，然后在冰冷却下将0.06g氢化钠(60％矿物油悬浮液)和0.14mL新戊酰氯连续地加到悬浮液。将混合物于室温下搅拌2小时。然后再向其中加入0.06g氢化钠(60％矿物油悬浮液)和0.14mL新戊酰氯，并将混合物于室温下搅拌1小时。进一步向其中加入0.06g氢化钠(60％矿物油悬浮液)和0.14mL新戊酰氯，并将混合物于室温下搅拌1小时。将乙酸乙酯和水加到反应溶液。分离有机层，用水洗涤，并用无水硫酸镁干燥。在减压下除去溶剂，并通过硅胶色谱法[洗脱剂；正己烷∶乙酸乙酯＝3∶1]纯化所得的残余物，得到0.14g黄色固体，(2R，3R，4R，5R)-4-(乙酰氧基)-2-(乙酰氧基)甲基]-5-[3-{[(2，2-二甲基丙酰基)氨基]羰基}-2-氧代-1(2H)-吡嗪基]四氢-3-呋喃基乙酸酯。
1H-NMR(CDCl3)δ1.30(9H，s)，2.13(3H，s)，2.16(6H，s)，4.39-4.49(2H，m)，4.52-4.55(1H，m)，5.29(1H，t，J＝5.9Hz)，5.48(1H，dd，J＝3.7，5.6Hz)，6.22(1H，d，J＝3.4Hz)，7.84(1H，d，J＝4.2Hz)，7.86(1H，d，J＝4.2Hz)，11.82(1H，brs)实施例24 将0.16g(2S)-2-{[(3-羟基-2-吡嗪基)羰基]氨基}丁二酸二乙酯悬浮在2mL 1，1，1，3，3，3-六甲基二硅氮烷，并将悬浮液加热回流1小时。冷却后，在减压下除去溶剂。加入1mL甲苯，并在减压下除去溶剂。将2mL乙腈、0.24g β-D-呋喃核糖1，2，3，5-四乙酸酯和0.11mL三甲基甲硅烷基三氟甲烷磺酸酯连续地加到所得的残余物，并将所得的混合物于室温下搅拌1小时。向其中加入氯仿和水，并分离有机层。用饱和碳酸氢钠水溶液洗涤所得的有机层，然后用无水硫酸镁干燥。在减压下除去溶剂。用硅胶色谱法[洗脱剂；氯仿∶甲醇＝40∶1]纯化所得的残余物，得到0.25g浅黄色固体，(2S)-2-{[(4-{(2R，3R，4R，5R)-3，4-双(乙酰氧基)-5-[(乙酰氧基)甲基]四氢-2-呋喃基}-3-氧代-3，4-二氢-2-吡嗪基)羰基]氨基}丁二酸二乙酯。
1H-NMR(CDCl3)δ1.25(3H，t，J＝7.2Hz)，1.28(3H，t，J＝7.2Hz)，2.10(3H，s)，2.15(3H，s)，2.17(3H，s)，2.98(1H，dd，J＝4.8，17.2Hz)，3.11(1H，dd，J＝4.8Hz，17.2Hz)，4.13-4.18(2H，m)，4.21-4.28(2H，m)，4.40-4.47(2H，m)，4.49-4.51(1H，m)，5.09-S.12(1H，m)，5.26-5.28(1H，m)，5.43-5.44(1H，m)，6.27(1H，d，J＝3.3Hz)，7.77(1H，d，J＝4.0Hz)，7.79(1H，d，J＝4.0Hz)，10.13(1H，d，J＝8.1Hz)
实施例25 将0.21g(2S)-2-{[(4-{(2R，3R，4R，5R)-3，4-双(乙酰氧基)-5-[(乙酰氧基)甲基]四氢-2-呋喃基}-3-氧代-3，4-二氢-2-吡嗪基)羰基]氨基}丁二酸二乙酯溶于乙醇，然后在冰冷却下向其中加入75mg乙醇钠，接着在室温下搅拌1小时。随后终止搅拌，并将反应混合物在室温下静置过夜。向其中连续加入0.13mL乙酸和1mL水并在减压下除去溶剂。用硅胶色谱法[洗脱剂；氯仿∶甲醇＝40∶1]纯化所得的残余物。将乙酸乙酯和正己烷加到所得的残余物，并过滤收集沉淀，得到39mg黄色固体，(2S)-2-{[(4-{(2R，3R，4S，5R)-5-[(乙酰氧基)甲基]-3，4-二氢-2-呋喃基}-3-氧代-3，4-二氢-2-吡嗪基)羰基]氨基}丁二酸二乙酯。
IR(KBr)cm-11739，16701H-NMR(DMSO-d6)δ1.18(6H，t，J＝6.8Hz)，2.10(3H，s)，2.89(2H，brs)，3.90(1H，brs)，4.07-4.15(6H，m)，4.30-4.38(2H，m)，4.87-4.92(1H，m)，5.30-5.34(1H，m)，5.77-5.79(1H，m)，5.91(1H，s)，7.70(1H，d，J＝3.4Hz)，7.96(1H，d，J＝3.4Hz)，9.83(1H，d，J＝7.6Hz)实施例26
将0.31g 4-[(3aR，4R，6R，6aR)-6-(羟基甲基)-2，2-二甲基四氢呋喃并[3，4-d][1，3]间二氧杂环戊烯-4-基]-3-氧代-3，4-二氢-2-吡嗪甲酰胺溶于2mL N，N-二甲基甲酰胺，然后向其中连续地加入0.33gN-(叔丁氧基羰基)-1-缬氨酸、12mg 4-二甲基氨基吡啶和0.41g 1，3-二环己基碳化二亚胺，接着在室温下搅拌2小时。将0.5mL乙酸加到混合物，并将其在室温下搅拌30分钟。然后向其中加入乙酸乙酯和水，并过滤除去不溶产物。分离有机层，用1mol/L盐酸洗涤，并用无水硫酸镁干燥。然后在减压下除去溶剂。通过硅胶色谱法[洗脱剂；乙酸乙酯]纯化所得的残余物，得到0.40g黄色固体，{(3aR，4R，6R，6aR)-6-[3-(氨基羰基)-2-氧代-1(2H)-吡嗪基]-2，2-二甲基四氢呋喃并[3，4-d][1，3]间二氧杂环戊烯-4-基}甲基(2S)-2-[(叔丁氧基羰基)氨基]-3-甲基丁酸酯。
1H-NMR(DMSO-d6)δ0.83-0.86(6H，m)，1.30(3H，s)，1.38(9H，s)，1.52(3H，s)，1.86-1.95(1H，m)，3.79(1H，t，J＝7.2Hz)，4.27-4.34(2H，m)，4.46(1H，brs)，4.78-4.80(1H，m)，5.03(1H，d，J＝6.1Hz)，6.00(1H，s)，7.24(1H，d，J＝7.2Hz)，7.54(1H，d，J＝4.3Hz)，7.77(1H，brs)，7.86(1H，d，J＝4.3Hz)，8.28(1H，brs)实施例27
将0.26g{(3aR，4R，6R，6aR)-6-[3-(氨基羰基)-2-氧代-1(2H)-吡嗪基]-2，2-二甲基四氢呋喃并[3，4-d][1，3]间二氧杂环戊烯-4-基}甲基(2S)-2-[(叔丁氧基羰基)氨基]-3-甲基丁酸酯溶于3mL甲醇和3mL水的混合溶剂，然后向其中加入2.6g a Dowex 50WX4-200离子交换树脂(H+形式)，接着在室温下搅拌3小时。然后过滤除去树脂，随后用甲醇洗涤，接着用水洗涤。合并所得的滤液和洗涤液，并在减压下除去溶剂。加入2mL甲苯并在减压下除去溶剂，得到70mg浅黄色固体，{(2R，3S，4R，5R)-5-[3-(氨基羰基)-2-氧代-1(2H)-吡嗪基]-3，4-二羟基四氢-2-呋喃基}甲基(2S)-2-[(叔丁氧基羰基)氨基]-3-甲基丁酸酯。
1H-NMR(DMSO-d6)δ0.87-0.91(6H，m)，1.38(9H，s)，1.97-2.05(1H，m)，3.53(2H，br)，3.85-3.93(2H，m)，4.07(1H，brs)，4.19(1H，brs)，4.31-4.35(1H，m)，4.39-4.42(1H，m)，5.92(1H，s)，7.32(1H，d，J＝7.6Hz)，7.60(1H，d，J＝4.1Hz)，7.76(1H，brs)，7.87(1H，d，＝4.1Hz)，8.32(1H，brs)实施例28 将14.1g 3-羟基-2-吡嗪甲酰胺悬浮在150mL甲苯，然后将悬浮液在回流下搅拌1小时，接着进行共沸脱氢。在冷却至室温后，在减压下除去溶剂。将42.3mL 1，1，1，3，3，3-六甲基二硅氮烷加到残余物，并将所得的混合物加热回流2小时。在减压下浓缩反应混合物，向其中加入45mL甲苯并在减压下除去溶剂。使用45mL甲苯，重复相同的以上操作二次。将残余物溶于40mL乙腈，然后将其加到含有48.4gβ-D-呋喃核糖1-乙酸酯2，3，5-三苯甲酸酯的100mL乙腈溶液。在室温下将25g氯化锡(IV)滴到混合物。将所得的溶液于50℃下搅拌4.5小时。冷却至室温后，将其加到由100g碳酸氢钠、500mL水和280mL二氯甲烷组成的混合溶液。过滤不溶产物，并分离有机层。用50ml水洗涤所得的有机层，然后用50mL饱和氯化钠水溶液洗涤，并在减压下除去溶剂。将280mL乙酸乙酯和30mL水加到所得的残余物，并将混合物加热至50℃，然后冷却至5℃。过滤收集沉淀，得到40.9g浅灰色-白色固体，[(2R，3R，4R，5R)-5-[3-(氨基羰基)-2-氧代-1(2H)-吡嗪基]-3，4-双(苯甲酰氧基)四氢-2-呋喃基]甲基苯甲酸酯。
IR(KBr)cm-11729，16831H-NMR(DMSO-d6)δ4.69-4.78(2H，m)，4.88-4.92(1H，m)，S.97-6.0S(2H，m)，6.34(1H，d，J＝2.4Hz)，7.40-7.54(7H，m)，7.62-7.71(3H，m)，7.80(1H，brs)，7.84-7.86(2H，m)，7.95-258.03(5H，m)，8.22(1H，m)实施例29 室温下将含有2.2g氢氧化钠的17.5mL水加到含有35g(2R，3R，4R，5R)-5-[3-(氨基羰基)-2-氧代-1(2H)-吡嗪基]-3，4-双(苯甲酰氧基)四氢-2-呋喃基]甲基苯甲酸酯的330mL甲醇悬浮液。将混合物于相同的温度下搅拌2小时，然后冷却至5℃。过滤收集所得的沉淀，得到12.5g浅黄色固体，4-[(2R，3R，45，5R)-3，4-二羟基-5-(羟基甲基)四氢-2-呋喃基]-3-氧代-3，4-二氢-2-吡嗪甲酰胺(水含量0.4％)。
IR(KBr)cm-13406，16541H-NMR(DMSO-d6)δ3.65(1H，ddd，J＝2.6，5.1，12.5Hz)，3.81(1H，ddd，J＝2.2，4.8，12.1Hz)，3.96-4.00(2H，m)，4.01-4.03(1H，m)，5.10(1H，d，J＝5.9Hz)，5.28(1H，t，J＝4.9Hz)，5.64(1H，d，J＝4.8Hz)，5.93(1H，d，J＝2.6HZ)，7.54(1H，d，J＝4.0Hz)，7.74(1H，s)，8.29(1H，d，J＝4.0HZ)，8.36(1H，s)实施例29(2)将11g在实施例29中所得的4-[(2R，3R，4S，5R)-3，4-二羟基-5-(羟基甲基)四氢-2-呋喃基]-3-氧代-3，4-二氢-2-吡嗪甲酰胺溶于300mL水(45℃)，然后向其中加入活性炭，接着搅拌10分钟。过滤活性碳，并用20mL水洗涤二次。合并滤液和洗涤液，并向其中加入1.1g活性碳，然后搅拌10分钟。过滤活性碳，用20mL水洗涤二次，并在减压下浓缩。将90mL水加到浓缩物，然后过滤混合物，得到9.35g无色结晶，4-[(2R，3R，4S，5R)-3，4-二羟基-5-(羟基甲基)四氢-2-呋喃基]-3-氧代-3，4-二氢-2-吡嗪甲酰胺一水合物(水含量6.8％)。
IR(KBr)cm-13578，3399，3091，2929，16741H-NMR(DMSO-d6)δ3.65(1H，ddd，J＝2.6，5.1，12.5Hz)，3.81(1H，ddd，J＝2.2，4.8，12.1Hz)，3.96-4.00(2H，m)，4.01-4.03(1H，m)，5.10(1H，d，J＝5.9Hz)，5.28(1H，t，J＝4.9Hz)，5.64(1H，d，J＝4.8Hz)，5.93(1H，d，J＝2.6Hz)，7.54(1H，d，J＝4.0Hz)，7.74(1H，s)，8.29(1H，d，J＝4.0Hz)，8.36(1H，s)实施例30
以与参考实施例6相同的方式，由0.23g 6-氟-3-羟基-2-吡嗪甲酰胺得到0.47g浅黄色固体，[(2R，3R，4R，5R)-5-[3-(氨基羰基)-5-氟-2-氧代-1(2H)-吡嗪基]-3，4-双(苯甲酰氧基)四氢-2-呋喃基]甲基苯甲酸酯。
IR(KBr)cm-11726，16901H-NMR(DMSO-d6)δ4.6-5.0(3H，m)，5.9-6.1(2H，m)，6.33(1H，s)，7.3-8.2(17H，m)，8.53(1H，brs)实施例31 以与参考实施例6相同的方式，由4.0g 6-氟-3-羟基-2-吡嗪甲酰胺，得到7.37g浅黄色固体，(2R，3R，4R，5R)-4-(乙酰氧基)-2-[(乙酰氧基)甲基]-5-[3-(氨基羰基)-5-氟-2-氧代-1(2H)-吡嗪基]四氢-3-呋喃基乙酸酯。
IR(KBr)cm-11748，1715，16621H-NMR(CDCl3)δ2.04(3H，s)，2.08(3H，s)，2.18(3H，s)4.47-4.58(3H，m)，5.20-5.34(1H，m)，5.51(1H，dd，J＝2.3，5.0Hz)，6.16(1H，d，J＝2.2Hz)，6.41(1H，brs)，7.95(1H，d，J＝5.6Hz)，8.94(1H，brs)实施例32
将0.15g[(2R，3R，4R，5R)-5-[3-(氨基羰基)-5-氟-2-氧代-1(2H)-吡嗪基]-3，4-双(苯甲酰氧基)四氢-2-呋喃基]甲基苯甲酸酯溶于2.0mL甲醇，然后在冰冷却条件下向其中加入0.14g 28％甲醇钠甲醇溶液。将所得的混合物于相同的温度下搅拌20分钟，然后在室温下搅拌30分钟。将0.75mL 1mol/L盐酸加到反应混合物，并在减压下除去溶剂。用柱色谱法[洗脱剂；氯仿∶甲醇＝5∶1]纯化所得的残余物，然后向其中加入异丙醇和二乙基醚。然后过滤混合物，得到40mg4-[(2R，3R，4S，5R)-3，4-二羟基-5-(羟基甲基)四氢-2-呋喃基]-6-氟-3-氧代-3，4-二氢-2-吡嗪甲酰胺。
IR(KBr)cm-11686实施例33 将0.20g 3-氧代-3，4-二氢-2-吡嗪亚甲酰胺和10mg硫酸铵悬浮在2.0mL 1，1，1，3，3，3-六甲基二硅氮烷，并将悬浮液在氮气流下加热回流10分钟。向其中加入9.0mg硫酸铵，并再次将混合物加热回流2小时。将反应混合物冷却，然后在减压下除去溶剂。将所得的残余物溶于4.0mL乙腈，然后向其中连续地加入0.46g β-D-呋喃核糖-1，2，3，5-四乙酸酯和0.34mL氯化锡(IV)，随后在室温下搅拌3小时。将10μL三氟乙酸和1.0mL水加到反应混合物，然后在减压下除去溶剂。使用0.05g 3-氧代-3，4-二氢-2-吡嗪亚甲酰胺，重复相同的以上反应得到反应混合物。合并所得的反应混合物，然后用反相硅胶柱色谱法[洗脱剂；乙腈∶水＝1∶4]纯化，得到0.34g浅黄色固体，(2R，3R，4R，5R)-4-(乙酰氧基)-2-[(乙酰氧基)甲基]-5-[3-[氨基(亚氨基)甲基]-2-氧代-1(2H)-吡嗪基]四氢-3-呋喃基乙酸酯。
IR(KBr)cm-13392，1750，16851H-NMR(CDCl3)δ2.11(3H，s)，2.16(6H，s)，4.4-4.7(3H，m)，5.31(1H，t，J＝5.4Hz)，5.5-5.6(1H，m)，6.22(1H，d，J＝3.0Hz)，7.8-8.0(1H，m)，8.1-8.3(1H，m)，8.67(1H，brs)，10.45(2H，brs)实施例34 在冰冷却下将0.10g(2R，3R，4R，5R)-4-(乙酰氧基)-2-[(乙酰氧基)甲基]-5-[3-[氨基(亚氨基)甲基]-2-氧代-1(2H)-吡嗪基]四氢-3-呋喃基乙酸酯加到5.0mL 25％氨水，并将混合物在相同的温度下搅拌2小时。将4.9mL乙酸加到反应混合物，并在减压下除去溶剂。使用20mg(2R，3R，4R，5R)-4-(乙酰氧基)-2-[(乙酰氧基)甲基]-5-[3-[氨基(亚氨基)甲基]-2-氧代-1(2H)-吡嗪基]四氢3-呋喃基乙酸酯，完成相同的以上的反应。合并所得的反应混合物，然后通过反相硅胶柱色谱法[洗脱剂；水]纯化。将5.0mL 1mol/L盐酸加到所得的固体，并在减压下除去溶剂。而且，还向其中加入5.0mL 1mol/L盐酸，并在减压下除去溶剂。将乙醇加到所得的残余物，并过滤收集固体，得到30mg 4-[(2R，3R，45，SR)-3，4-二羟基-5-(羟基甲基)四氢-2-呋喃基]-3-氧代-3，4-二氢-2-吡嗪甲酰胺的盐酸盐，一种浅黄色固体。
IR(KBr)cm-13374，3281，16901H-NMR(DMSO-d6)δ3.7-3.9(2H，m)，3.9-4.2(3H，m)，5.1-5.3(1H，m)，5.3-5.6(1H，m)，5.6-5.8(1H，m)，5.90(1H，s)，7.86(1H，d，J＝4.0Hz)，8.76(1H，d，J＝4.0Hz)，9.44(4H，brs)实施例35 以与实施例18相同的方式，由200mg{(2R，3R，4R，5R)-5-[3-(氨基羰基)-2-氧代-1(2H)-吡嗪基]-3，4-双(苯甲酰氧基)四氢-2-呋喃基}甲基苯甲酸酯得到37mg{(2R，3S，4R，5R)-5-[3-(氨基羰基)-2-氧代-1(2H)-吡嗪基]-3，4-二羟基四氢-2-呋喃基}甲基苯甲酸酯。
1H-NMR(DMSO-d6)δ4.06(1H，dd，J＝6.6，12.7)，4.12-4.15(1H，m)，4.28-4.32(1H，m)，4.59(1H，dd，J＝S.1，12.2)，4.67(1H，dd，J＝2.7，12.5)，5.40(1H，d，J＝6.3)，5.76(1H，d，J＝4.9)，5.91(1H，d，J＝2.0)，7.37(1H，d，J＝4.4)，7.57(2H，t，J＝7.8)，7.71(1H，dd，J＝7.1，7.6)，7.75(1H，brs)，7.85(1H，d，J＝4.2)，8.01(2H，dd，J＝1.0，7.4)，8.30(1H，brs)实施例36
将100mg{(2R，35，4R，5R)-5-[3-(氨基羰基)-2-氧代-1(2H)-吡嗪基]-3，4-二羟基四氢-2-呋喃基}甲基(2S)-2-[(叔丁氧基羰基)氨基]-3-甲基丁酸酯溶于1mL三氟乙酸和0.1mL水的混合溶剂，并将混合物于室温下搅拌1小时。在减压下除去三氟乙酸，并加入水。用饱和碳酸氢钠水溶液将混合物调节至pH 8，然后用反相硅胶色谱法[洗脱剂；10％乙腈水溶液]纯化，接着与乙醇进行共沸，得到59mg白色固体，{(2R，3S，4R，5R)-5-[3-(氨基羰基)-2-氧代-1(2H)-吡嗪基]-3，4-二羟基四氢-2-呋喃基甲基(2S)-2-氨基-3-甲基丁酸酯。
IR(KBr)cm-11724，1670，16531H-NMR(DMSO-d6，D2O)δ0.84(3H，d，J＝6.6Hz)，0.89(3H，d，J＝6.6Hz)，1.82-1.90(1H，m)，3.22(1H，d，J＝5.2Hz)，3.88-3.94(1H，m)，4.09(1H，s)，4.17-4.20(1H，m)，4.36-4.38(2H，m)，5.91(1H，s)，7.58(1H，d，J＝4.0Hz)，7.90(1H，d，J＝4.0)实施例37 将58mg 4-[(2R，3R，4S，5R)]-3，4-二羟基-5-(羟基甲基)四氢-2-呋喃基]-6-氟-3-氧代-3，4-二氢-2-吡嗪甲酰胺悬浮在1mL磷酸三甲酯，然后在冰冷却下连续地向其加入37μL吡啶和49μL氧氯化磷，接着在相同的温度下搅拌1小时。向其中加入3mL 1mol/L三乙基碳酸氢铵水溶液，并将混合物搅拌15分钟。在减压下除去溶剂，并用离子交换柱色谱法[洗脱剂；0.1mol/L三乙基碳酸氢铵水溶液]纯化残余物。接着，用反相硅胶柱色谱法[洗脱剂；水]纯化，得到39mg三乙基铵盐固体，[(2R，3S，4R，5R)-5-[3-(氨基羰基)-5-氟-2-氧代-1(2H)-吡啶]-3，4-二羟基四氢-2-呋喃基]甲基磷酸酯。
在室温下将含有0.14g高氯酸钠的3mL丙酮溶液加到含有36mg以上得到的-磷酸三乙基铵盐的0.5mL甲醇悬浮液，并将混合物搅拌30分钟。过滤收集沉淀，并用丙酮洗涤，得到27mg[(2R，3S，4R，5R)-5-[3-(氨基羰基)-5-氟-2-氧代-1(2H)-吡嗪基]-3，4-二羟基四氢-2-呋喃基]甲基磷酸酯的钠盐，浅黄色固体。
1H-NMR(D2O)δ4.13-4.18(1H，m)，4.29-4.40(4H，m)，6.10(1H，s)，8.46(1H，d，J＝4.9Hz)工业实用性根据以上的试验实施例，发现吡嗪核苷酸三磷酸酯类似物在病毒聚合酶抑制试验中具有特异性抑制病毒聚合酶的活性，用本发明提供的取代基修饰的吡嗪甲酰胺核苷酸移动到细胞内，并在其中具有抗病毒活性，虽然已知核苷酸不可能通过细胞膜移动到细胞内，而且吡嗪核苷在施用吡嗪核苷的动物体内转化为吡嗪核苷酸三磷酸酯类似物。因此，以使用通过激酶如核苷酸激酶的作用产生的吡嗪核苷酸或吡嗪核苷类似物或其盐为特征的本发明的病毒生长抑制和/或杀病毒方法可用作治疗病毒感染的方法。而且，本发明的新的吡嗪核苷酸或吡嗪核苷类似物或其盐可用作预防和/或治疗病毒感染的试剂。
权利要求
1.一种病毒生长抑制和/或杀病毒方法，其特征在于使用以下通式[1]代表的吡嗪核苷酸类似物或其盐 其中R1代表氢原子或吡嗪环取代基；R2代表氢原子、酰基或可以被取代的氨基甲酰基烷基或羧基烷基；R3、R4、R5和R6中的每一个可以相同或不同，代表氢原子或可以被取代或保护的羟基；A代表氧原子或亚甲基；Y代表氧原子或亚氨基；而n代表0-3的整数。
2.根据权利要求1的方法，其特征在于使用通式[1]代表的吡嗪核苷酸类似物或其盐，其中Y为氧原子。
3.根据权利要求1或2的方法，其特征在于使用通式[1]代表的吡嗪核苷酸类似物或其盐，其中n为1-3的整数。
4.根据权利要求1-3之任一项的方法，其特征在于使用通式[1]代表的吡嗪核苷酸类似物或其盐，其中所述的吡嗪环取代基是一个或多个选自以下的基团卤原子；可以被羟基、烷氧基、烷硫基、芳基、氨基或烷基氨基取代的烷基；可以被卤原子取代的烷基或链烯基；环烷基；羟基；烷氧基；环烷氧基；烷氧基羰基；巯基；可以被芳基取代的烷硫基；芳基；芳氧基；芳硫基；芳基氨基；氰基；硝基；可以被酰基取代的氨基；烷基氨基；环烷基氨基；酰基；羧基；氨基甲酰基；硫代氨基甲酰基；烷基氨基甲酰基；和杂环基。
5.根据权利要求1-4之任一项的方法，其特征在于使用通式[1]代表的吡嗪核苷酸类似物或其盐，其中n为3。
6.根据权利要求1-5之任一项的方法，其特征在于使用由激酶产生的通式[1]代表的吡嗪核苷酸类似物或其盐。
7.根据权利要求1-5之任一项的方法，其特征在于使用由核苷酸激酶产生的通式[1]代表的吡嗪核苷酸类似物或其盐。
8.根据权利要求1-7之任一项的方法，其中通式[1]代表的吡嗪核苷酸类似物或其盐由以下通式[2]代表的吡嗪核苷酸类似物或其盐衍生 其中R1代表氢原子或吡嗪环取代基；R2代表氢原子、酰基或可以被取代的氨基甲酰基烷基或羧基烷基；R3、R4、R5和R6中的每一个可以相同或不同，代表氢原子或可以被取代或保护的羟基；在磷酸或膦酸上的R7和R8各自独立地代表在生理条件下将分解的保护或未保护的、取代或未取代的的羟基；A代表氧原子或亚甲基；并且Y代表氧原子或亚氨基。
9.根据权利要求1-8之任一项的方法，其中通式[1]代表的吡嗪核苷酸类似物或其盐由以下通式[3]代表的吡嗪核苷酸类似物或其盐衍生 其中R1代表氢原子或吡嗪环取代基；R2代表氢原子、酰基或可以被取代的氨基甲酰基烷基或羧基烷基；R3、R4、R5和R6中的每一个可以相同或不同，代表氢原子或可以被取代或保护的羟基；磷酸或膦酸中的R7和R8各自独立地代表在生理条件下将分解的保护或未保护的、取代或未取代的羟基；并且A代表氧原子或亚甲基。
10.一种病毒生长抑制和/或杀病毒方法，其特征在于使用以下通式[3z]代表的吡嗪核苷类似物或其盐 其中R1代表氢原子或吡嗪环取代基；R2代表氢原子、酰基或可以被取代的氨基甲酰基烷基或羧基烷基；R3、R4z、R5和R6z中的每一个可以相同或不同，代表氢原子或可以被取代或保护的羟基，或者R4z和R6z一起代表可以被取代的表示为-O-亚烷基-O-的基团；Rz代表在生理条件下将分解的保护或未保护的、取代或未取代的羟基；并且Y代表氧原子或亚氨基。
11.根据权利要求10的方法，其中在通式[3z]代表的吡嗪核苷酸类似物或其盐中，Y为亚氨基。
12.根据权利要求1-11之任一项的方法，其特征在于利用一种聚合酶抑制作用。
13.根据权利要求1-12之任一项的方法，其中所述病毒为流感病毒、RS病毒、AIDS病毒、乳头瘤病毒、腺病毒、甲型肝炎病毒、乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒、戊型肝炎病毒、脊髓灰质炎病毒、艾柯病毒、柯萨奇病毒、肠病毒、鼻病毒、轮状病毒、新城病病毒、流行性腮腺炎病毒、水疱性口炎病毒、狂犬病病毒、拉萨热病毒、麻疹病毒、丝状病毒、日本脑炎病毒、黄热病病毒、登革热病毒或西尼罗河病毒。
14.根据权利要求1-12之任一项的方法，其中所述的病毒是流感病毒或丙型肝炎病毒。
15.以下通式[1z]代表的吡嗪核苷酸类似物或其盐 其中R1代表氢原子或吡嗪环取代基；R2代表氢原子、酰基或可以被取代的氨基甲酰基烷基或羧基烷基；R3、R4、R5和R6中每一个可以相同或不同，代表氢原子或可以被取代或保护的羟基；R代表羟基，所述基团可以被在生理条件下分解的基团保护或取代；A代表氧原子或亚甲基；而n代表1-3的整数。
16.以下通式[1z]代表的吡嗪核苷酸类似物或其盐 其中R1代表氢原子或吡嗪环取代基；R2代表氢原子、酰基或可以被取代的氨基甲酰基烷基或羧基烷基；R3、R4、R5和R6中每一个可以相同或不同，代表氢原子或可以被取代或保护的羟基；R代表可以被在生理条件下分解的基团保护或取代的羟基；A代表氧原子或亚甲基；而n代表1-3的整数；附带条件是排除如下的情况R为羟基，A为氧原子，并且R1为氢原子或卤原子。
17.以下通式[2]代表吡嗪核苷酸类似物代表或其盐 其中R1代表氢原子或吡嗪环取代基；R2代表氢原子、酰基或可以被取代的氨基甲酰基烷基或羧基烷基；R3、R4、R5和R6中每一个可以相同或不同，代表氢原子或可以被取代或保护的羟基；磷酸或膦酸中的R7和R8各自独立地代表在生理条件下将分解的保护或未保护的、取代或未取代的羟基；A代表氧原子或亚甲基；并且Y代表氧原子或亚氨基。
18.根据权利要求17的吡嗪核苷酸类似物或其盐，其中Y为氧原子。
19.以下通式[3z]代表的吡嗪核苷类似物或其盐 其中R1代表氢原子或吡嗪环取代基；R2代表氢原子、酰基或可以被取代的氨基甲酰基烷基或羧基烷基；R3、R4z、R5和R6z中的每一个可以相同或不同，代表氢原子或可以被取代或保护的羟基，或者R4z和R6z一起代表可以被取代的表示为-O-亚烷基-O-的基团；Rz代表在生理条件下将分解的保护或未保护的、取代或未取代的羟基；并且Y代表氧原子或亚氨基。
20.根据权利要求19的吡嗪核苷类似物或其盐，其中在通式[3z]代表的吡嗪核苷酸类似物或其盐中，Y为亚氨基。
21.根据权利要求19的通式[3z]代表的吡嗪核苷类似物或其盐，所述化合物由通式[3z’]表示 其中Ra代表氢或卤原子；Rb和Rc各自可以相同或不同，代表氢原子或羟基保护基，或者Rb和Rc一起代表可以被取代的亚烷基。
22.一种具有通式[1x]代表的吡嗪核苷酸类似物结构的RNA聚合酶抑制剂前体 其中R1代表氢原子或吡嗪环取代基；R2代表氢原子、酰基或可以被取代的氨基甲酰基烷基或羧基烷基；R3、R4、R5和R6中每一个可以相同或不同，代表氢原子或可以被取代或保护的羟基；A代表氧原子或亚甲基；Y代表氧原子或亚氨基；而m代表0-2的整数；该RNA聚合酶抑制剂前体在体内转化为通式[1y]代表的吡嗪三磷酸酯核苷酸类似物 其中R1代表氢原子或吡嗪环取代基；Z10、Z11、Z12和Z13各自可以相同或不同，代表氢原子或羟基，因而表现出RNA聚合酶抑制作用。
23.根据权利要求22的RNA聚合酶抑制剂前体，其中在通式[1x]代表的吡嗪核苷酸类似物结构中，Y为氧原子。
24.根据权利要求22或23的RNA聚合酶抑制剂前体，其中在通式[1x]代表的吡嗪核苷酸类似物结构中，吡嗪环取代基是一个或多个选自以下的基团卤原子；可以被羟基、烷氧基、烷硫基、芳基、氨基或烷基氨基取代的烷基；可以被卤原子取代的烷基或链烯基；环烷基；羟基；烷氧基；环烷氧基；烷氧基羰基；巯基；可以被芳基取代的烷硫基；芳基；芳氧基；芳硫基；芳基氨基；氰基；硝基；可以被酰基取代的氨基；烷基氨基；环烷基氨基；酰基；羧基；氨基甲酰基；硫代氨基甲酰基；烷基氨基甲酰基；和杂环基。
25.根据权利要求22-24之任一项的RNA聚合酶抑制剂前体，其中在通式[1x]代表的吡嗪核苷酸类似物结构中，R1、R3和R5中的每一个代表氢原子；而R4和R6各自代表羟基，所述吡嗪核苷酸类似物结构在体内转化为通式[1y]代表的吡嗪三磷酸酯核苷酸类似物，其中R1、Z10和Z12中的每一个代表氢原子；而Z11和Z13各自代表羟基。
26.根据权利要求22-25之任一项的RNA聚合酶抑制剂前体，其中通式[1y]代表的吡嗪三磷酸酯核苷酸类似物是通过激酶产生的。
27.根据权利要求22-26之任一项的RNA聚合酶抑制剂前体，其中通式[1y]代表的吡嗪三磷酸酯核苷酸类似物是通过核苷酸激酶产生的。
28.根据权利要求22-27之任一项的RNA聚合酶抑制剂前体，其特征在于它抑制来源于病毒的RNA聚合酶，且其选择性比来源于宿主的RNA聚合酶的选择性高出200倍或更多。
29.根据权利要求22-27之任一项的RNA聚合酶抑制剂前体，它是通式[1w]代表的吡嗪核苷或吡嗪一核苷酸类似物结构 其中R1代表氢原子或吡嗪环取代基；R2代表氢原子、酰基或可以被取代的氨基甲酰基烷基或羧基烷基；R3、R4、R5和R6中每一个，可以相同或不同，代表氢原子或可以被取代或保护的羟基；Y代表氧原子或亚氨基；而p代表0或1；其特征在于RNA聚合酶抑制剂前体对来源于病毒的RNA聚合酶的抑制作用与RNA聚合酶抑制剂前体对来源于宿主细胞的肌苷一磷酸脱氢酶的抑制作用的比率为900∶1或更大。
30.根据权利要求29的RNA聚合酶抑制剂前体，其中在通式[1w]代表的吡嗪核苷或吡嗪一核苷酸类似物中，Y为氧原子。
31.根据权利要求29或30的RNA聚合酶抑制剂前体，其中在通式[1w]代表的吡嗪核苷或吡嗪一核苷酸类似物结构中，吡嗪环取代基是一个或多个选自以下的基团卤原子；可以被羟基、烷氧基、烷硫基、芳基、氨基或烷基氨基取代的烷基；可以被卤原子取代的烷基或链烯基；环烷基；羟基；烷氧基；环烷氧基；烷氧基羰基；巯基；可以被芳基取代的烷硫基；芳基；芳氧基；芳硫基；芳基氨基；氰基；硝基；可以被酰基取代的氨基；烷基氨基；环烷基氨基；酰基；羧基；氨基甲酰基；硫代氨基甲酰基；烷基氨基甲酰基；和杂环基。
32.根据权利要求29-31之任一项的RNA聚合酶抑制剂前体，所述前体是通式[1w]代表的吡嗪核苷或吡嗪一核苷酸类似物，其中R1、R3和R5各自代表氢原子；并且R4和R6各自代表羟基。
33.根据权利要求29-32之任一项的RNA聚合酶抑制剂前体，其中来源于病毒的RNA聚合酶来源于流感病毒、RS病毒、甲型肝炎病毒、丙型肝炎病毒、戊型肝炎病毒、脊髓灰质炎病毒、艾柯病毒、柯萨奇病毒、肠病毒、鼻病毒、轮状病毒、新城病病毒、流行性腮腺炎病毒、水疱性口炎病毒、狂犬病病毒、拉萨热病毒、麻疹病毒、丝状病毒、日本脑炎病毒、黄热病病毒、登革热病毒或西尼罗河病毒。
34.根据权利要求33的RNA聚合酶抑制剂前体，其中来源于病毒的RNA聚合酶来源于流感病毒或丙型肝炎病毒。
35.根据权利要求22-34之任一项的RNA聚合酶抑制剂前体，其中在通式[1w]代表的吡嗪核苷或吡嗪一核苷酸类似物中，m为0。
36.一种RNA聚合酶抑制剂，所述抑制剂表现出RNA聚合酶抑制作用并具有通式[1y]代表的吡嗪三磷酸酯核苷酸类似物结构 其中R1代表氢原子或吡嗪环取代基；而Z10、Z11、Z12和Z13中的每一个可以相同或不同，代表氢原子或羟基。
37.根据权利要求36的具有吡嗪三磷酸酯核苷酸类似物结构的RNA聚合酶抑制剂，其特征在于它对来源于病毒的RNA聚合酶的抑制作用的选择性是对来源于宿主的RNA聚合酶的抑制作用的选择性的200倍或更大。
38.根据权利要求37的具有吡嗪三磷酸酯核苷酸类似物结构的RNA聚合酶抑制剂，其中所述来源于病毒的RNA聚合酶来源于流感病毒、RS病毒、甲型肝炎病毒、丙型肝炎病毒、戊型肝炎病毒、脊髓灰质炎病毒、艾柯病毒、柯萨奇病毒、肠病毒、鼻病毒、轮状病毒、新城病病毒、流行性腮腺炎病毒、水疱性口炎病毒、狂犬病病毒、拉萨热病毒、麻疹病毒、丝状病毒、日本脑炎病毒、黄热病病毒、登革热病毒或西尼罗河病毒。
39.根据权利要求38的具有吡嗪三磷酸酯核苷酸类似物结构的RNA聚合酶抑制剂，其中所述来源于病毒的RNA聚合酶是来源于流感病毒的RNA聚合酶或来源于丙型肝炎病毒的RNA聚合酶。
40.一种治疗感染病毒的患者的方法，所述方法包括给感染病毒的患者施用以下通式[3z]代表的吡嗪核苷类似物或其盐的步骤 其中R1代表氢原子或吡嗪环取代基；R2代表氢原子、酰基或可以被取代的氨基甲酰基烷基或羧基烷基；R3、R4z、R5和R6z中的每一个可以相同或不同，代表氢原子或可以被取代或保护的羟基，或者R4z和R6z一起代表可以被取代的表示为-O-亚烷基-O-的基团；Rz代表在生理条件下将分解的保护或未保护的、取代或未取代的羟基；并且Y代表氧原子或亚氨基。
41.根据权利要求40的方法，所述方法还包括在感染病毒的患者的体内将通式[3z]转化成通式[1y]代表的吡嗪三磷酸酯核苷酸类似物的步骤 其中R1代表氢原子或吡嗪环取代基；而Z10、Z11、Z12和Z13中的每一个可以相同或不同，代表氢原子或羟基。
42.根据权利要求41的方法，其特征在于在感染病毒的患者的体内，通式[3z]至通式[1y]代表的吡嗪三磷酸酯核苷酸类似物的转化经过通式[1v]代表的吡嗪核苷酸类似物 其中R1代表氢原子或吡嗪环取代基；而Z10、Z11、Z12和Z13中每一个可以相同或不同，代表氢原子或羟基。
43.根据权利要求42的方法，其特征在于通式[1v]代表的吡嗪核苷酸类似物基本上不抑制来源于宿主细胞的肌苷一磷酸脱氢酶。
44.根据权利要求41-43之任一项的方法，其特征在于通式[1y]代表的吡嗪三磷酸酯核苷酸类似物抑制来源于病毒的RNA聚合酶的选择性大于抑制来源于宿主的RNA聚合酶的选择性。
45.根据权利要求44的方法，其中所述的来源于病毒的RNA聚合酶来源于流感病毒、RS病毒、甲型肝炎病毒、丙型肝炎病毒、戊型肝炎病毒、脊髓灰质炎病毒、艾柯病毒、柯萨奇病毒、肠病毒、鼻病毒、轮状病毒、新城病病毒、流行性腮腺炎病毒、水疱性口炎病毒、狂犬病病毒、拉萨热病毒、麻疹病毒、丝状病毒、日本脑炎病毒、黄热病病毒、登革热病毒或西尼罗河病毒。
46.根据权利要求40的治疗感染病毒的患者的方法，其中R1代表氢原子，R2代表氢原子，R3和R5各自代表氢原子，R4z、R6z和Rz各自代表羟基，并且Y代表氧原子。
47.通式[1]代表的吡嗪核苷酸类似物或其盐用于制备抗病毒剂的用途 其中R1代表氢原子或吡嗪环取代基；R2代表氢原子、酰基或可以被取代的氨基甲酰基烷基或羧基烷基；R3、R4、R5和R6中的每一个可以相同或不同，代表氢原子或可以被取代或保护的羟基；A代表氧原子或亚甲基；Y代表氧原子或亚氨基；并且n代表0-3的整数。
48.根据权利要求47的用途，其中R1代表氢原子，R2代表氢原子，R3和R5各自代表氢原子，R4和R6各自代表羟基，A代表氧原子，Y代表氧原子，并且n为0。
49.通式[3z]代表的吡嗪核苷类似物或其盐用于制备抗病毒剂的用途 其中R1代表氢原子或吡嗪环取代基；R2代表氢原子、酰基或可以被取代的氨基甲酰基烷基或羧基烷基；R3、R4z、R5和R6z中的每一个可以相同或不同，代表氢原子或可以被取代或保护的羟基，或者R4z和R6z一起代表可以被取代的表示为-O-亚烷基-O-的基团；Rz代表在生理条件下将分解的保护或未保护的、取代或未取代的羟基；并且Y代表氧原子或亚氨基。
50.根据权利要求47-49之任一项的用途，其中在感染病毒的患者的体内将通式[3z]转化成通式[1y]代表的吡嗪三磷酸酯核苷酸类似物 其中R1代表氢原子或吡嗪环取代基；而Z10、Z11、Z12和Z13中的每一个可以相同或不同，代表氢原子或羟基。
51.根据权利要求49的用途，其特征在于在感染病毒的患者的体内，通式[3z]至通式[1y]代表的吡嗪三磷酸酯核苷酸类似物的转化经过通式[1v]代表的吡嗪核苷酸类似物 其中R1代表氢原子或吡嗪环取代基；而Z10、Z11、Z12和Z13中的每一个可以相同或不同，代表氢原子或羟基。
52.根据权利要求51的用途，其特征在于通式[1v]代表的吡嗪核苷酸类似物基本上不抑制来源于宿主细胞的肌苷一磷酸脱氢酶。
53.根据权利要求50-52之任一项的用途，其特征在于通式[1y]代表的吡嗪三磷酸酯核苷酸类似物抑制来源于病毒的RNA聚合酶的选择性大于抑制来源于宿主的RNA聚合酶的选择性。
54.根据权利要求50-53之任一项的用途，其中所述的来源于病毒的RNA聚合酶来源于流感病毒、RS病毒、甲型肝炎病毒、丙型肝炎病毒、戊型肝炎病毒、脊髓灰质炎病毒、艾柯病毒、柯萨奇病毒、肠病毒、鼻病毒、轮状病毒、新城病病毒、流行性腮腺炎病毒、水疱性口炎病毒、狂犬病病毒拉萨热病毒、麻疹病毒、丝状病毒、日本脑炎病毒、黄热病病毒、登革热病毒或西尼罗河病毒。
全文摘要
在右式中，R
文档编号C07H19/20GK1551777SQ02817259
公开日2004年12月1日 申请日期2002年8月13日 优先权日2001年8月14日
发明者古田要介, 江川裕之, 高桥和美, 筒井康裕, 上原小百合, 村上诚, 之, 百合, 美, 裕 申请人:富山化学工业株式会社