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【主权项】
1. 一种寡核苷酸，其包含与miR-145的种子区互补的序列，其中所述种子区是 5'-1]〇^6而1]-3'（3￡〇10勵 :7)，且其中所述序列包含至少三个锁定核酸（1熟)，且其中所 述寡核苷酸包含至少一个非锁定核苷酸，并且与第二寡核苷酸相比具有升高的体内效力， 所述第二寡核苷酸包含相同的序列和LNA组成和不同的LNA基序。2. 权利要求1的寡核苷酸，其中与所述第二寡核苷酸相比，所述寡核苷酸具有升高的 肺效力。3. 权利要求1的寡核苷酸，其中所述寡核苷酸包含在5'端的LNA。4. 权利要求1-3中任一项的寡核苷酸，其中所述寡核苷酸包含在3'端的LNA。5. 权利要求1-4中任一项的寡核苷酸，其中所述寡核苷酸包含不超过3个连续的LNA。6. 权利要求1-5中任一项的寡核苷酸，其中所述序列包含至少4个锁定核酸（LNA)。7. 权利要求1-6中任一项的寡核苷酸，其中所述序列包含至少5个锁定核酸（LNA)。8. 权利要求1-7中任一项的寡核苷酸，其中所述序列包含至少6个锁定核酸（LNA)。9. 权利要求1-8中任一项的寡核苷酸，其中所述寡核苷酸包含16聚体，其中所述16聚 体由16个核苷酸组成，并且所述16聚体包含与所述miR-145的种子区互补的序列。10. 权利要求9的寡核苷酸，其中所述16聚体包含至少9个LNA。11. 权利要求10的寡核苷酸，其中从所述16聚体的5'端至3'端，所述16聚体的1、 5、6、9、10、11、13、15、和16位是1熟。12. 权利要求10的寡核苷酸，其中从所述16聚体的5'端至3'端，所述16聚体的1、 2、 6、8、10、11、13、15、和16位是1熟。13. 权利要求10的寡核苷酸，其中从所述16聚体的5'端至3'端，所述16聚体的1、 5、6、8、10、11、13、14、和16位是1熟。14. 权利要求10的寡核苷酸，其中从所述16聚体的5'端至3'端，所述16聚体的1、 3、 4、5、6、8、10、13、和16位是1熟。15. 权利要求10的寡核苷酸，其中从所述16聚体的5'端至3'端，所述16聚体的1、 3、4、7、8、10、12、14、和16位是1熟。16. 权利要求10的寡核苷酸，其中从所述16聚体的5'端至3'端，所述16聚体的1、 2、 6、7、10、11、12、14、和16位是1熟。17. 权利要求10的寡核苷酸，其中从所述16聚体的5'端至3'端，所述16聚体的1、 3、 5、7、9、11、13、15、和16位是1熟。18. 权利要求10的寡核苷酸，其中从所述16聚体的5'端至3'端，所述16聚体的1、 4、 5、7、9、10、12、14、和16位是1熟。19. 权利要求10的寡核苷酸，其中从所述16聚体的5'端至3'端，所述16聚体的1、 5、 6、8、10、11、13、15、和16位是1熟。20. 权利要求1-19中任一项的寡核苷酸，其中至少一个所述非锁定核苷酸是2'脱氧 基。21. 权利要求20的寡核苷酸，其中所有所述非锁定核苷酸是2'脱氧基。22. 权利要求1-19中任一项的寡核苷酸，其中至少一个非锁定核苷酸是2'O-烷基或 2'卤素。23. 权利要求1-22中任一项的寡核苷酸，其中至少一个LNA具有2'至4'亚甲基桥。24. 权利要求1-23中任一项的寡核苷酸，其中所述寡核苷酸具有5'帽结构、3'帽结构、 或5'和3'帽结构。25. 权利要求1-24中任一项的寡核苷酸，其中所述寡核苷酸包含一个或多个硫代磷酸 酯连接。26. 权利要求25的寡核苷酸，其中所述寡核苷酸是完全硫代磷酸酯连接的。27. 权利要求1-25中任一项的寡核苷酸，其中所述寡核苷酸具有1至3个磷酸酯连接。28. 权利要求1-27中任一项的寡核苷酸，其进一步包含悬垂的亲脂基团。29. 权利要求1-28中任一项的寡核苷酸，其中所述寡核苷酸的长度是约15至50个核 苷酸。30. 权利要求1-29中任一项的寡核苷酸，其中所述寡核苷酸是miRNA抑制剂。31. 权利要求9-30中任一项的寡核苷酸，其中所述16聚体与miR-145的核苷酸序列基 本上互补。32. 权利要求31的寡核苷酸，其中所述16聚体与miR-145完全互补。33. 权利要求1-32中任一项的寡核苷酸，其中所述寡核苷酸包含至少一个非锁定核苷 酸，且其中所述寡核苷酸相对于盐水对照提高细胞中的miR-145靶基因的表达，并且表达 的升高具有的P-值〈0.05。34. 权利要求1-33中任一项的寡核苷酸，其中相对于盐水对照，用所述寡核苷酸处 理的细胞具有miR-145靶基因表达的大于I. 0倍数变化，并且所述倍数变化具有的P-值 〈0.05。35. 权利要求33-34中任一项的寡核苷酸，其中所述表达的倍数变化是至少1. 1、1. 2、 I. 3、1. 4、或 1. 5 倍。36. 权利要求33-35中任一项的寡核苷酸，其中所述miR-145靶基因是Klf4、Klf5、 Lrrc71、Nedd41、Igflr、Sec1412、Megf6、Fmod、Ankrdl2、Golgal、GpbpI、Hist3h2a、Rapgef2、 或Snedl〇37. -种药物组合物，其包含有效量的权利要求1-36中任一项的寡核苷酸或其药学可 接受盐，以及药学可接受载体或稀释剂。38. 权利要求37的药物组合物，其中所述药学可接受载体包含胶体分散系统、大分子 复合物、纳米胶囊、纳米颗粒、微球、珠、水包油乳剂、胶束、混合胶束或脂质体。39. 权利要求37的药物组合物，其中所述药学可接受载体或稀释剂基本上由盐水组 成。40. -种降低或抑制细胞中的miR-145的活性的方法，其包括使所述细胞与权利要求 1-36中任一项的寡核苷酸接触。41. 权利要求40的方法，其中所述细胞是哺乳动物细胞。42. 权利要求40或41的方法，其中所述细胞是平滑肌细胞。43. 权利要求40-42中任一项的方法，其中所述细胞是肺或心脏细胞。44. 权利要求40-43中任一项的方法，其中所述细胞是体内或离体的。45. -种抑制平滑肌细胞增殖的方法，其包括使平滑肌细胞与权利要求1-36中任一项 的寡核苷酸接触。46. 权利要求45的方法，其中所述细胞是哺乳动物细胞。47. 权利要求45或46的方法，其中所述细胞是肺或心脏细胞。48. 权利要求45-47中任一项的方法，其中所述细胞是体内或离体的。49. 一种预防或治疗受试者中的肺动脉高血压（PAH)的方法，其包括对所述受试者施 用包含权利要求1-36中任一项的寡核苷酸的药物组合物。50. 权利要求49的方法，其中所述肺高血压是特发性肺动脉高血压（PAH)、遗传性或家 族性PAH、或继发性肺高血压。51. 权利要求50的方法，其中所述继发性肺高血压来自肺栓子、肺气肿、肺纤维化、或 先天性心脏病。52. 权利要求49-51中任一项的方法，其中所述受试者是哺乳动物。53. 权利要求52的方法，其中所述哺乳动物是人。54. 权利要求53的方法，其中所述人具有编码骨形态发生蛋白2型受体的基因中的突 变。55. 权利要求49-54中任一项的方法，其中通过胃肠外施用或者通过对肺组织直接注 射施用所述药物组合物。56. 权利要求49-54中任一项的方法，其中通过施用的吸入路径对所述受试者施用所 述药物组合物。57. 权利要求56的方法，其中将所述药物组合物配制为干粉末。58. 权利要求56的方法，其中将所述药物组合物配制为液体气溶胶。59. -种抑制或治疗受试者中的再狭窄或新血管内膜形成的方法，其包括对所述受试 者施用包含权利要求1-36中任一项的寡核苷酸的药物组合物。60. 权利要求59的方法，其中所述受试者是哺乳动物。61. 权利要求60的方法，其中所述哺乳动物是人。62. 权利要求59-61中任一项的方法，其中通过胃肠外施用或者通过对心脏组织直接 注射施用所述药物组合物。63. 权利要求55或62的方法，其中所述胃肠外施用是静脉内、皮下、腹膜内、或肌肉内。64. 权利要求49-54或59-61中任一项的方法，其中通过口服、经皮、持续释放、受控释 放、延迟释放、栓剂、导管、或舌下施用来施用所述药物组合物。65. 权利要求49-64中任一项的方法，其中以25mg/kg或更少的剂量投递所述寡核苷 酸。66. 权利要求63的方法，其中将所述寡核苷酸在盐水中配制，并且皮下施用。67. -种治疗或预防受试者中的高血压的方法，其包括对所述受试者施用包含权利要 求1-36中任一项的寡核苷酸的药物组合物。68. 权利要求67的方法，其中所述受试者是哺乳动物。69. 权利要求68的方法，其中所述哺乳动物是人。70. 权利要求67-69中任一项的方法，其中通过胃肠外施用来施用所述药物组合物。71. 权利要求70的方法，其中所述胃肠外施用是静脉内、皮下、腹膜内、或肌肉内。72. 权利要求67-71中任一项的方法，其中通过口服、经皮、持续释放、受控释放、延迟 释放、栓剂、导管、或舌下施用来施用所述药物组合物。73. 权利要求67-72中任一项的方法，其中以25mg/kg或更少的剂量投递所述寡核苷 酸。74. 权利要求67的方法，其中将所述寡核苷酸在盐水中配制，并且皮下施用。75. -种用于治疗或预防肺动脉高血压的试剂盒，其包含权利要求1-36中任一项的寡 核苷酸和施用装置。76. 权利要求75的试剂盒，其中所述寡核苷酸配制为所述施用装置内含有的粉末。77. 权利要求75的试剂盒，其中所述寡核苷酸配制为所述施用装置内含有的液体气溶 胶。78. 权利要求75-77中任一项的试剂盒，其中所述施用装置是吸入器。
【专利摘要】本发明提供了具有作为miR-145抑制剂的化学基序的寡核苷酸。可以使用寡核苷酸来治疗和预防状况，其通过抑制有此需要的受试者的细胞中的miR-145的表达或活性进行。提供的方法包括在有此需要的受试者中治疗或预防肺动脉高血压、新血管内膜形成、再狭窄或高血压，其通过对受试者施用miR-145表达或活性抑制剂进行。还公开了包含miR-145抑制剂的药物组合物和试剂盒。
【IPC分类】A61K31/712
【公开号】CN105188715
【申请号】CN201480015816
【发明人】A.G.塞托, E.V.罗伊, K.H.鲁宾逊, C.M.多尔比, T.G.赫林格, R.蒙哥马利
【申请人】米拉根医疗股份有限公司
【公开日】2015年12月23日
【申请日】2014年3月13日
【公告号】CA2902623A1, EP2968396A1, US20160010091, WO2014151835A1