到介孔二氧化娃包覆金纳米棒纳米材料；
[0053]将20mg的介孔二氧化硅材料溶于30ml无水乙醇，再加入160μ1的3-氨丙基三乙基硅烷，在氩气保护下搅拌混匀，升温至100°C，加热回流24h，甲苯离心洗涤三次，60°C下真空干燥箱干燥24h，得氨基化的介孔二氧化硅包覆金纳米棒。
[0054]4)GNRs@mSi02-MEL 的制备
[0055]向20ml，lmg/ml氨基化的GNRs@mSi02甲醇溶液中，加入20ml的100yg/ml美法仑的二氯亚砜溶液，40°C搅拌48h，用去离子水离心洗涤二次，S卩得GNRsOmS12-MEL13
[0056]5)GNRs@mSi02-HA-RGD-MEL 的制备
[0057]取50mg透明质酸溶于5ml的水中，加入15mg的EDC，5mg的NHS，调节pH6，活化1.5h后加入80mg的RGD，40 °C下搅拌反应48h，透析三天，冷冻干燥即得白色絮状物HA-RGD。
[0058]向50mgHA_RGD水溶液中加入50mg氨基化后的GNRs@mSi02-MEL的二氯亚砜溶液，然后依次加入15mgEDC和5mgNHS，调节pH至6，在40 °C下搅拌48h，透析三天，冷冻干燥即得GNRsimS12-HA-RGD-MEL。
[0059]实施例3
[0060]I)金纳米粒种子溶液的制备
[0061 ]将5ml，0.1M的十六烷基溴化铵溶液和8ml，0.005M氯金酸溶液混合，快速搅拌一次性加到0.71111，0.0101的硼氢化钠溶液中，剧烈搅拌21^11，25°(:下静置311，即得金纳米粒子种子溶液。
[0062]2)金纳米棒的制备
[0063]在5ml，0.2M的十六烷基溴化铵溶液中依次加0.25ml，0.0040M硝酸银溶液混合后，85μ1，0.1M抗坏血酸溶液，随后加入20μ1种子溶液后，在25 °C下静置20h，离心二次，即得金纳米棒；
[0064]2)介孔二氧化硅包覆金纳棒的制备
[0065]取1ml金纳米棒溶液，加入150μ1，0.1M的氢氧化钠溶液，混合均匀后，然后每半小时加入30μ1的20%的TEOS/甲醇溶液(共四次)，缓慢搅拌36h，然后用去离子水和甲醇离心洗数次，得到介孔二氧化娃包覆金纳米棒纳米材料；
[ΟΟ??]将20mg的介孔二氧化娃纳米材料溶于30ml无水甲苯中，然后加入200μ1的3_氨丙基三乙基硅烷，在氮气保护下搅拌混匀，在80 0C下回流36h，然后用甲苯离心洗涤，60 °C下真空干燥箱干燥24h，得氨基化的介孔二氧化硅包覆金纳米棒。
[0067]3)GNRsimSi02-MEL
[0068]向20ml，lmg/ml氨基化的GNRs@mSi02甲醇溶液中，加入20ml的120yg/ml美法仑的二氯亚砜溶液，30°C搅拌36h，用去离子水离心洗涤二次，即得GNRsOmS12-MEL。
[0069 ] 4) GNRsimS i O2-HA-RGD-MEL 的制备
[°07°] 取50mg透明质酸溶于5ml的水中，加入1mg的EDC，5mg的NHS，调节pH5，活化1.5h后加入50mg的RGD，30 °C下搅拌反应36h，透析三天，冷冻干燥即得白色絮状物HA-RGD。
[0071 ] 向50mgHA_RGD水溶液中加入50mg氨基化后的GNRs@mSi02_MEL的二氯亚砜溶液，然后依次加入1011^0(]和51]1〖順3，调节卩!1至5，在30<€下搅拌3611，透析三天，冷冻干燥即得GNRsimS12-HA-RGD-MEL。
[0072]实施例4
[0073]I)金纳米种子的制备
[0074]将5ml，0.2M的十六烷基溴化铵溶液和8ml，0.005M氯金酸溶液混合，快速搅拌一次性加到0.6ml,0.0lOM的硼氢化钠溶液中，剧烈搅拌2min，28 °C下静置2.5h得到金纳米粒子种子溶液。
[0075]2)金纳米棒的制备
[0076]在5ml，0.2M的十六烷基溴化铵溶液中依次加0.15ml，0.0040M硝酸银溶液，90μ1，
0.1M抗坏血酸溶液，混合均匀后加入25μ1种子溶液后，在28°C下静置18h，离心二次，即得金纳米棒；
[0077]2)介孔二氧化硅包覆金纳棒的制备
[0078]向1ml金纳米棒溶液，加入氢氧化钠溶液调节pH至10，然后每半小时加入25μ1体积分数为20%的TEOS/甲醇溶液(共四次)，在25°C下搅拌20h，然后用去离子水和甲醇离心洗涤，即得到介孔二氧化娃包覆金纳米棒纳米材料；
[0079]将20mg的介孔二氧化硅纳米材料溶于40ml异丙醇中，然后加入150μ1的3_氨丙基三乙基硅烷，在氮气保护下搅拌混匀，在90 0C下回流30h，然后用异丙醇离心洗涤，60 °C下真空干燥箱干燥24h，得氨基化的介孔二氧化硅包覆金纳米棒。
[0080] 4)GNRsimSi02-MEL
[0081 ] 向20ml，lmg/ml氨基化的GNRs@mSi02甲醇溶液中，加入1ml的120yg/ml美法仑的二氯亚砜溶液，30°C搅拌30h，用去离子水离心洗涤二次，即得GNRsOmS12-MEL。
[0082 ] 4) GNRsimS i O2-HA-RGD-MEL 的制备
[0083]取50mg透明质酸溶于5ml的水中，加入1mg的EDC，1mg的NHS，调节pH4.5，活化2h后加入40mg的RGD，25 °C下搅拌反应30h，透析三天，冷冻干燥即得白色絮状物HA-RGD。
[0084]向50mgHA_RGD水溶液中加入50mg氨基化后的GNRs@mSi02-MEL的二氯亚砜溶液，然后依次加入1mgEDC和1mgNHS，调节pH至4.5，在30 °C下搅拌30h，透析三天，冷冻干燥，即得GNRsimS12-HA-RGD-MEL。
[0085]实施例5
[0086]I)金纳米粒种子的制备
[0087]将5ml，0.2M的十六烷基溴化铵溶液和6ml，0.0005M氯金酸溶液混合，快速搅拌一次性加到0.71111，0.0101的硼氢化钠溶液中，剧烈搅拌21^11，25°(:下静置211得到金纳米粒子种子溶液。
[0088]2)金纳米棒的制备
[0089]向5ml，0.2M的十六烷基溴化铵溶液中依次加入5.0ml，0.00IM的氯金酸溶液、
0.20ml，0.0040M硝酸银溶液混合后，加入950μ1，0.1M抗坏血酸溶液，随后加入12μ1种子溶液后，在27 °C下静置20h即获得金纳米棒；
[0090]2)介孔二氧化硅包覆金纳棒的制备
[0091]取1ml金纳米棒水溶液中，用氢氧化钠溶液调节pH至11，然后每半小时加入15μ1的20 %的TEOS/甲醇溶液(共五次)，在35°C下搅拌30h，然后用去离子水和甲醇离心洗涤，即得到介孔二氧化娃包覆金纳米棒纳米材料；
[0092]将20mg的介孔二氧化硅纳米材料溶于20ml的无水甲苯中，然后加入150μ1的3-氨丙基三乙基硅烷，在氮气保护下搅拌混匀，在70°C下回流24h，然后用甲苯离心洗涤，60°C下真空干燥箱干燥24h，得氨基化的介孔二氧化硅包覆金纳米棒。
[0093]3)GNRsimSi02-MEL
[0094]向20ml，lmg/ml氨基化的GNRs@mSi02甲醇溶液中，加入1ml的120yg/ml美法仑的二氯亚砜溶液，35°C搅拌24h，用去离子水离心洗涤二次，即得GNRsOmS12-MEL。
[0095 ] 4) GNRsimS i O2-HA-RGD-MEL 的制备
[0096]取50mg透明质酸溶于5ml的水中，加入1mg的EDC，1mg的NHS，调节pH5.5，活化2h后加入60mg的RGD，25 °C下搅拌反应24h，透析三天，冷冻干燥，即得白色絮状物HA-RGD。
[0097]向50mgHA_RGD水溶液中加入50mg氨基化后的GNRs@mSi02_MEL的二氯亚砜溶液，然后依次加入1mgEDC和1mgNHS，调节pH至5.5，在35 °C下搅拌24h，透析三天，冷冻干燥，即得GNRsimS12-HA-RGD-MEL。
【主权项】
1.金纳米复合靶向给药系统的制备方法，其特征在于包括以下步骤: 1)金纳米粒种子溶液的制备:将十六烷基溴化铵溶液和氯金酸溶液加入硼氢化钠水溶液，在20-30 V下混合均匀，静置2-3h，得到金纳米粒种子溶液； 2)金纳米棒的制备:向十六烷基溴化铵溶液中依次加入氯金酸溶液、硝酸银溶液混合均匀，再依次加入抗坏血酸溶液、上述金纳米粒种子溶液，20-30 °C下混合均匀，静置12-24h，离心得金纳米棒； 3)介孔二氧化硅包覆金纳棒:在20-40°C下向金纳米棒水溶液中加入体积分数20 %的正硅酸乙酯的甲醇溶液，隔30min加入一次，3-5次加完，调节pH10_l I，搅拌12_48h，离心洗涤，得到介孔二氧化硅包覆金纳棒GNRsOmS12 ； 将上述GNRsOmS12分散于有机溶剂中，加入3-氨丙基三乙基硅烷，在惰性气体保护下升温至60-100 0C加热回流12-24h，洗涤，干燥得氨基化的GNRsOmS12 ； 4)GNRs@mSi02—MEL的制备:将所述氨基化的GNRsOmS12溶于乙醇，然后加入美法仑的二氯亚砜溶液，在10-40°C下搅拌24-48h，离心洗涤，干燥得氨基化的GNRsOmS12-MEL ； 5)GNRs@mSi02-HA-RGD-MEL的制备:向HA水溶液中，加入RGD，然后依次加入N-羟基琥珀酰亚胺和1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺进行活化，调节溶液的pH4-6，在10-40°C下，反应24-48h，透析并冷冻干燥即得白色絮状物HA-RGD; 向上述HA-R⑶的水溶液中加入所述氨基化的GNRsOmS12--MEL混合均匀，然后依次加入N-羟基琥珀酰亚胺和1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺进行活化，调节溶液的pH4-6，在 10-40 °C 下反应24-48h，透析、冷冻干燥、得到GNRsOmS i02-HA-RGD-MEL。2.如权利要求1所述金纳米复合靶向给药系统的制备方法，其特征在于步骤I)中十六烷基溴化铵溶液:氯金酸溶液:硼氢化钠溶液的摩尔比为I:(0.0025-0.005):(0.006-0.1)。3.如权利要求1所述金纳米复合靶向给药系统的制备方法，其特征在于步骤2)中氯金酸溶液:硝酸银溶液:抗坏血酸溶液的摩尔比为I:(0.04-0.2):(1.6-2)o4.如权利要求1所述金纳米复合靶向给药系统的制备方法，其特征在于步骤3)中有机溶剂为甲苯、乙醇或异丙醇。5.如权利要求1所述金纳米复合靶向给药系统的制备方法，其特征在于步骤5)两次活化时，N-羟基琥珀酰亚胺和1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺的摩尔比均为1: (1-3)。
【专利摘要】本发明公开了一种金纳米复合靶向给药系统制备方法。向十六烷基溴化铵溶液中依次加入氯金酸溶液、硝酸银溶液混合均匀，再依次加入抗坏血酸溶液、上述金纳米粒种子溶液，离心得金纳米棒；加入正硅酸乙酯得到介孔二氧化硅纳米材料；加入3-氨丙基三乙基硅烷，得氨基化的GNRsmSiO2；加入美法仑的二氯亚砜溶液，得氨基化的GNRsmSiO2--MEL；加入HA-RGD得到GNRsmSiO2-HA-RGD-MEL。本发明将具有光热治疗作用的金纳米粒与抗癌药物美法仑有效结合，实现了肿瘤热疗-化疗联合治疗，提高治疗效果；利用介孔二氧化硅孔道高效负载药物，可以提高载药量。
【IPC分类】A61P35/00, A61K41/00, A61K47/48, A61K31/196
【公开号】CN105617392
【申请号】CN201610027271
【发明人】许沛虎, 周汇敏, 徐海星, 黄志军, 张凌溪, 郭玉凤, 李依萍, 吴峰政, 杨夏雯
【申请人】武汉理工大学
【公开日】2016年6月1日
【申请日】2016年1月15日