作为组织蛋白酶K和S抑制剂的6-苯基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-4-甲腈衍生物的制作方法

专利名称：作为组织蛋白酶K和S抑制剂的6-苯基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-4-甲腈衍生物的制作方法
作为组织蛋白酶K和S抑制剂的6-苯基-lH-咪唑并[4， 5-c]
吡啶-4-甲腈衍生物
本发明涉及6-苯基-lH-咪唑并[4， 5-c]吡啶-4-曱腈衍生物，包含该 类化合物的药物组合物，以及这些衍生物在制备治疗组织蛋白酶S和/ 或组织蛋白酶K相关疾病例如骨质疏松症、动脉粥样硬化、炎症和免疫 疾病例如类风湿性关节炎，和慢性痛例如神经性疼痛的药物中的应用。
半胱氨酸蛋白酶代表一类特征在于酶的催化位点存在半胱氨酸残 基的肽酶，这些蛋白酶与蛋白质的正常降解和加工有关。许多病理学 障碍或疾病都是半胱氨酸蛋白酶的异常活动例如过度表达或激活增强 而导致的。半胱氨酸组织蛋白酶例如组织蛋白酶B、 K、 L、 S、 V、 F 是一类溶酶体酶类，它们涉及很多的疾病例如炎症、类风湿性关节炎、 骨关节炎、骨质疏松症、肿瘤、冠心病、动脉粥样硬化、自身免疫性 疾病和感染性疾病。
组织蛋白酶S主要在抗原呈递细胞中表达，通过与主要组织相容 性II类复合物有关的不变链的降解在抗原呈递中发挥主要作用。缺乏
组织蛋白酶S的小鼠对胶原-诱导的关节炎和自身免疫性重症肌无力
发生显示了显著的抵抗力(Nakagawa等人，ImmunUy， M， 207, 1999; Yang等人，！2i， 1729， 2005)。组织蛋白酶S已经显示出可以降解细
胞外基质的所有主要组分，与导致动脉粥样硬化、肺气肿和慢性阻塞 性肺疾患的病理学应答有关(Shi等人，I讓unity， i^， l97， I"9; Zheng等人，J Clin. Invest.,里，1081， 2000)。组织蛋白酶S也 会指示疼痛(W0 2003020278)。
组织蛋白酶K具有很强的溶胶原、弹性蛋白酶和明胶酶活性 (Brorame等人，J. Biol， Chem， m， 2126-2132， 1996)，主要在破 骨细胞中表达(Bromme和Okamoto， Biol. Chem. Hopp-Seyler， 376, 379-384， 1995)。它分裂关键骨基质蛋白，包括胶原I和II型
(Kaffienah等人，Biochem. J.巡，727-732， 1998)、明胶、骨桥 蛋白和骨连接素，并涉及正常骨生长和改造必需的细胞外基质代谢 (Bossard等人，J. Biol. Chem. 121， 12517-12524， 1996)。抑制组 织蛋白酶K应当会导致破骨细胞介导的骨吸收减弱。因此组织蛋白酶 K折制剂可以代表治疗人的疾病状态如骨质疏松症的新型治疗剂。
Sukhova等人(J. Clin. Invest.巡，576-583， 1998)已经证 明移动并蓄积在发展中的人粥样硬化斑块中的细胞(巨噬细胞)也会合 成有效的弹性酶一组织蛋白酶K和S。基质降解，特别是在这些斑块 中的纤维帽中的基质降解是粥样硬化病变去稳定化的一个决定性过
程。因此，使病变的纤维帽具有结构完整性的细胞外基质组分胶原和 弹力蛋白的代谢会决定性地影响动脉粥样硬化的临床表现，例如人粥 样硬化斑块破裂导致冠状动脉血栓形成。因此，在易于破裂的斑块位 点抑制组织蛋白酶K和/或S代表了预防这些事件的有效途径。
在国际专利申请WO 03/020278 (Novartis Pharma GMBH)中/^开了 作为组织蛋白酶K和/或S抑制剂的4-氨基-嘧咬-2-甲腈衍生物，而 近来在W004/000819(ASTRAZENECA AB)中公开了作为组织蛋白酶S抑 制剂的结构相关的4-氨基-嘧啶-2腈衍生。此外，在W0 03/020721 (Novartis Pharma GMBH)和W0 04/000843 (ASTRAZENECA AB) 中公开了作为组织蛋白酶K和/或S抑制剂的吡咯并-嗜咬。近来，在 国际专利申请WO 05/085210 (0no Pharmaceutical Co.)中公开了用于 治疗骨质疏松症的作为半胱氨酸蛋白酶抑制剂的腈取代的双环含氮芳 香系统。
仍然需要其他的组织蛋白酶抑制剂，特别是与组织蛋白酶K相比， 对组织蛋白酶S具有优先抑制活性的化合物。
为此，本发明提供具有通式I的6-苯基-lH-咪唑并[4，5-c]吡啶 -4-甲腈衍生物<formula>formula see original document page 9</formula>式I
其中
R是选自卣素和(Ch)烷氧基的任选的邻位或间位取代基； K是(CH)烷基、(Cw)烷氧基、卣素或CF3; Rs是H、 (d—4)烷基、(CH)烷氧基或卣素； R3是H或(CH丄-NR5R6;
R4是H或(d-6)烷基，任选被C00R7或NR8R9取代； Rs和IU虫立地是H、 (Cw)环烷基、奎宁环-3-基、(Cw)烯基或(C—6)-烷基，任选被卣素、CF3、 (C3—8)环烷基、(Ch。)芳基、5-或6-元杂芳基、 0H、 (Cw)烷氧基、(CH。)芳氧基、C00Id。、C0NRnR2 、H或NR13S02 烷基取代；或
Rs和1与和它们相连的氮一起形成4-8元饱和杂环，任选还包含 一个或多个选自0、 S、 S02和NI^的杂原子，该环任选被氧代、(Cw)烷 基、(Cw)环烷基、冊161117或C0NIURw取代;
R7是H或(Cw)烷基；
Rs和R,独立地是H、 (Ch)烷基(任选被二 (Cw)烷基氨基取代)或 (Cw)环烷基;或
Rs和R9与和它们相连的氮一起形成4-8元饱和杂环，任选还包含 一个选自0和S的杂原子； Rw是H或(CH)烷基； Rn和Ru独立地是H或((V4)烷基;或
Ru和Ru与和它们相连的氮一起形成4-8元饱和杂环，任选还包 含一个选自0和S的杂原子；
Ru和R"独立地是H或(Ch)貌基;或
Rn和R"与和它们相连的氮一起形成4-8元饱和杂环，任选还包 含一个选自0和S的杂原子；
HH、 (Cw)烷基(任选被0H、 (dn)烷氧基、二(Cw)烷基氨基或 C0NH取代)、苯基、p比咬基、隱2。或CONR21R22;
R"和Rn独立地是H或(CH)烷基;或
R"和Rw与和它们相连的氮一起形成4-8元饱和杂环，任选还包 含一个选自0和S的杂原子；
R18和R19独立地是H或(Ch)烷基；
R2。是H、 (d-4)烷基、(C3—8)环烷基、(Cw)烷氧基或呋喃基； Rn和R22独立地是H或(Cw)烷基;或
Rn和^与和它们相连的氮一起形成4-8元饱和杂环，任选还包 含一个选自0和S的杂原子；
n是0或l;或其药学可接受的盐。
该化合物是组织蛋白酶S和组织蛋白酶K的抑制剂，因此可以用 于制备治疗骨质疏松症、动脉粥样硬化、炎症和免疫疾病例如类风湿 性关节炎，和慢性痛例如神经性疼痛的药物。
在式I的定义中使用的术语(Ch)烷基是指具有1-6个碳原子的有 支链或无支链的烷基，例如己基、戊基、3-甲基-丁基、丁基、异丁基、 叔丁基、丙基、异丙基、乙基和甲基。
术语(Cw)烷基是指具有1-4个碳原子的有支链或无支链的烷基， 例如丁基、异丁基、叔丁基、丙基、异丙基、乙基和甲基。
在术语(d—6)烷氧基中，(C卜6)烷基具有上述给出的含义。
在式I的定义中使用的术语(C2-6)烯基是指具有1-6个碳原子的有 支链或无支链的烯基，例如2-己烯基、2-戊烯基、3-甲基-2-丁烯基、 2-丙烯基(烯丙基)、l-甲基乙烯基(P-烯丙基)或乙烯基。
术语(Cw)环烷基是指具有3-8个碳原子的环烷基，例如环辛基、 环庚基、环己基、环戊基、环丁基和环丙基。
术语奎宁环-3-基是指1-氮杂二环[2， 2, 2]辛-3-基。
术语(Cw。)芳基是指具有6-IO个碳原子的由芳基产生的基团，例
如苯基和萘基。
在R5和R6的定义中使用的术语5-或6-元杂芳基是指具有1-3个 选自氮、氧和硫的杂原子的5或6元芳环。这些杂芳基的例子是吡啶 基、咪唑基、吡唑基、嗜啶基、蓬唑基、异參喳基、噁唑基、异鳴唑 基、噻吩基、"恶二唑基等等。优选的杂芳基是2-吡啶基、3-吡啶基、 1，3-噻唑-2-基、1，2噁唑-3-基和5-甲基-异"恶唑-3-基。
在式I的定义中，Rs和Re可以与和它们连接的氮一起形成4-8元 饱和杂环，例如吖丁啶、吡咯烷、哌啶或1H-氮杂卓环。这些环可以 包含一个或多个选自0、 S、 S02或NR,s的其他杂原子，以形成环例如 吗啉、硫代吗啉、4-二氧代-4-硫代吗啉、六氢-1，4-氧氮杂革、哌"秦、 高哌溱、咪唑烷或四氢塞唑环。
在式I的定义中，Rs和R9可以与和它们相连的氮一起形成4-8元 饱和杂环，例如吖丁啶、吡咯烷、哌啶或lH-氮杂卓环。这些环还可 以包含一个选自0和S的杂原子以形成环例如吗啉、硫代吗啉、六氢 -1， 4-氧氮杂萆或四氢噻唑环。
在式I的定义中，Rn和R2可以与和它们相连的氮一起形成4-8 元饱和杂环，例如吖丁啶、吡咯烷、哌啶或lH-氮杂卓环。这些环还 可以包含一个选自0和S的杂原子以形成环例如吗啉、硫代吗啉、六 氬-1， 4-氧氮杂萆或四氢噻唑环。
在式I的定义中，Rn和Rn可以与和它们相连的氮一起形成4-8 元饱和杂环，例如吖丁啶、吡咯烷、哌啶或1H-氮杂卓环。这些环还 可以包含一个选自0和S的杂原子以形成环例如吗啉、硫代吗啉、六 氢-l， 4-氧氮杂萆或四氢噻唑环。
在式I的定义中，Ru和Rn可以与和它们相连的氮一起形成4-8 元饱和杂环，例如吖丁啶、吡咯烷、哌啶或lH-氮杂卓环。这些环还 可以包含一个选自0和S的杂原子以形成环例如吗啉、^琉代吗啉、六 氢-l， 4-氧氮杂萆或四氢噻唑环。
在式I的定义中，R"和Rn可以与和它们相连的氮一起形成4-8 元饱和杂环，例如吖丁啶、吡咯烷、哌啶或lH-氮杂卓环。这些环还
可以包含一个选自0和s的杂原子以形成环例如吗啉、石危代吗啉、六 氢-l， 4-氧氮杂萆或四氢噻唑环
术语卣素是指F、 Cl、 Br或I。当囟素是烷基的取代基时，优选 是F。优选的卣代烷基是三氟甲基。
在一个实施方案中，本发明提供一种根据式I的化合物，其中R 不存在；
&是(d—4)烷基、(Ch)烷氧基或CF3; R2是H、 (CH)烷基或(Cw)烷氧基； R3是H或(CH》n-NR5R6;
R4是H或(d-6)烷基，任选被C00R7或NR8R9取代；
Rs和R6独立地是H、 (Cw)环烷基、(Cw)烯基或(Cw)烷基，任选 被卣素、CF3、 (Cw)环烷基、(Cw。)芳基、5-或6-元杂芳基、0H、 (C卜6)-烷氧基、(Cw。)芳氧基、COOR10、 C0NRuRu或NH取代;或
Rs和R6与和它们相连的氮一起形成4-8元饱和杂环，任选还包含 一个或多个选自0、 S、 S02和NRu的杂原子，该环任选被氧代、(Ch) 烷基、冊161117或C0NH9取代；
R7是H或(Cw)烷基；
Rs和R9独立地是H、 (CH)烷基或(Cw)环烷基；或 Rs和IU与和它们相连的氮一起形成4-8元饱和杂环，任选还包含 一个选自0和S的杂原子； Rw是H或(d-4)烷基； Rn和Ru独立地是H或(CH)烷基；或
Ru和Ru与和它们相连的氮一起形成4-8元饱和杂环，任选还包 含一个选自0和S的杂原子；
Rn和Rw独立地是H或(d—4)烷基;或
Ru和Rn与和它们相连的氮一起形成4-8元饱和杂环，任选还包 含一个选自0和S的杂原子；
Ru是H、苯基、吡啶基、C0R2。或CONR21R22; Ri6和Rn独立地是H或(Cw)烷基;或
Ru和Rn与和它们相连的氮一起形成4-8元饱和杂环，任选还包 含一个选自0和S的杂原子；
Ru和W虫立地是H或(C卜4)烷基； Rm是H、 (Cw)烷基或呋喃基； Ru和R22独立地是H或(CH)烷基;或
Rn和Rn与和它们相连的氮一起形成4-8元饱和杂环，任选还包 含一个选自0和S的杂原子；和 n是0或1;
条件是R3和l中的一个是H; 或其药学可接受的盐。
在本发明中优选的是根据式I的其中^是CF3的那些化合物。特别
优选的是其中R2是(d-4)烷氧基的式I的化合物。
特别优选的是其中Id是CF3和IU是乙氧基的本发明的化合物。 特别优选的本发明的6-苯基-lH-咪唑并[4， 5-c]吡啶-4-甲腈衍
生物是
-6-(4-乙氧基-3-三氟甲基-苯基)-1^-咪唑并[4， 5-c]吡啶-4-曱
腈；
- [4-氰基-6- (4-乙氧基-3-三氟甲基-苯基)-咪唑并[4， 5-c]吡啶 -l-基]-乙酸；
- [4-氰基-6- (4-乙氧基-3-三氟曱基-苯基)-咪唑并[4， 5-c]吡啶 -l-基]-丁酸；
-6- (4-乙氧基-3-三氟甲基-苯基)-2- (3-氧代-哌嗪-l-基甲基) -1#-。米唑并[4， 5， c]吡咬-4-甲腈；
-2-(1， l-二氧代-噻唑烷-3-基甲基)-甲基]-6-(4-乙氧基-3-三氟 曱基-苯基)-IF咪唑并[4， 5-c]吡啶-4-甲腈；
-6- (4-乙氧基-3-三氟甲基-苯基)-1- (2-吗啉-4-基-乙基)-1 f咪 唑并[4， 5-c]吡啶-4-曱腈;
-6- (4-乙氧基-3-三氟甲基-苯基)-1- (2-哌啶-1-基-乙基)-IF咪 唑并[4， 5-c]吡啶-4-甲腈；
-l- (2-二甲基氨基-乙基)-6- (4-乙氧基-3-三氟甲基-苯基)-1 f 咪唑并[4， 5-c]吡咬-4-曱腈；
-6- (4-乙氧基-3-三氟曱基-苯基)-1- (3-吗啉-4-基-丙基)咪 唑并[4， 5-c]吡啶-4-甲腈;
-1- (3-二甲基氨基-丙基)-6- (4-乙氧基-3-三氟甲基-苯基)-IF 咪哇并[4， 5-c]p比咬+曱腈；
-6- (4-乙氧基-3-三氟甲基-苯基)-2- (4-甲基-哌嗪-1-基曱 基)-1^-咪唑并[4，5-c]吡啶-4-甲腈；和
-6- (4-乙氧基-3-三氟甲基-苯基)-2- [ (2-羟基-乙基氨基)-曱 基]-l^-咪唑并[4, 5-c]吡啶-4-甲腈；
-1-乙基-2-(吡啶-4-基氨基甲基)-6-(3-三氟甲基-苯基)-lH-咪 唑并[4， 5-c]，，比啶-4-甲腈;
-6- (4-乙氧基-3-三氟曱基-苯基)-2- [4- (2-羟基-乙基)-3-氧代-哌嗪-l-基甲基]-lf咪唑并[4， 5-c]吡啶-4-甲腈；
-6-(4-乙氧基-3-三氟甲基-苯基)-2-(4-氧代-咪唑烷-1-基甲 基)-1H-咪唑并[4， 5-c]吡啶-4-甲腈
或其药学可接受的盐。
本发明在一个进一步的方面提供了药物组合物，包含具有通式I 的6-苯基-1H-咪唑并[4， 5-c]吡啶-4-曱腈衍生物或其药学可接受的 盐，与药学可接受的助剂混合。
通式I的6-苯基-lH-咪唑并[4，5-c]吡啶-4-甲腈衍生物可以通 过方案1所示来制备，包括用氰化亚铜选择性氰化4-氨基-2，6-二氯 -3-硝基吡啶(11)，以产生4-氨基-6-氯-2-氰基-3-硝基吡啶(III)。 钯催化中间体(III)与芳基硼酸或芳基锡化合物的交叉偶合，其中芳基 被R、 Ri和R2取代，其中每个都具有上述定义的含义，得到产物式(IV) 的4-氨基-2-氰基-3-硝基-6-苯基吡啶衍生物。在酸性条件下通过Fe 粉末或SnCU或者钯催化的氢化作用还原中间体(IV)的硝基提供了产 物式(V)的2-氰基-3，4-二氨基-6-苯基吡啶衍生物。在路易斯酸催化 剂例如三氟甲磺酸镱存在下用原曱酸三乙酯处理化合物(V)，提供了式(VI)的6-苯基-1H-咪唑并[4， 5-c]吡啶-4-甲腈衍生物。
实现在式(VI)化合物的fT-位的进一步衍生化，包括在碱性条件 下用式R4X的化合物的直接烷基化，其中R4具有上述定义的含义，其 中X是离去基团，例如Br、 Cl、 0Ms或0Tf,或在Mitsunobu条件下 用式RJ的化合物烷基化，其中X相当于0H。
方案1<formula>formula see original document page 15</formula>
可以从式VIII的相应溴衍生物(方案2)开始有利地制备通式I 的6-苯基-lH-咪唑并[4，5-c]吡啶-4-曱腈衍生物，其中R4代表被NR^ 取代的(Cw)烷基，其中R， R,和R2具有上述定义的含义，其中m是l-5。 适当温度下，在适当的溶剂例如二甲亚砜、二甲基甲酰胺、甲醇或四 氢呋喃中用伯或仲胺可以直接置换化合物(VIII)中的溴，得到产物通 式(IX)的化合物。
方案2
<formula>formula see original document page 15</formula>
可以从相应的酯衍生物开始有利地制备其中R4代表被羧酸官能团 取代的(d—6)烷基的通式I的6-苯基-lH-咪唑并[4，5-c]吡啶-4-甲腈 衍生物，包括如方案3所示用氢氧化锂或氢氧化钠水解。 方案3<formula>formula see original document page 16</formula>在向1H-咪唑并[4， 5-c]吡啶部分的2-位引入氨基的可替代的方 法中，可以通过方案4所示的途径来合成具有式(XII)的化合物。通过 在酸性条件下Fe或SnCL或钯催化氢化还原4-氨基-6-氯-2-氰基-3-硝基吡啶(III)的硝基，提供了产物6-氯-2-氰基-3，4-二氨基吡啶 (X)。在回流温度下在氯仿/乙腈中用其中Rs和R6具有上述定义的含义 的二氯亚甲基-N，N， -R5R广取代的氯化铵处理化合物(X)，得到式(XI) 的2-氨基-6-氯-4-氰基-lH-咪唑并[4,5-c]吡啶衍生物。钯或其他过 渡金属催化具有芳基硼酸或芳基锡的式(XI)的化合物的交叉偶合，其 中芳基被具有上述定义的含义的R、 l和R2取代，得到所需的产物式 (XII)的2-氨基-6-苯基-lH-咪唑并[4， 5-c]吡啶-4-曱腈衍生物。
方案4
在另一个方法中，为了在1H-咪唑并[4， 5-c]吡啶部分的2-位中引 入R3基，可以合成具有式(XIII)的化合物，包括如方案5所示，在不 同条件下用适当的酸、酰基氯、原甲酸酯或醛缩合式(V)的2-氰基 -3，4-二氨基-6-苯基吡啶衍生物，其中R、 ^和IU具有上述定义的含 义。
方案5<formula>formula see original document page 17</formula>(v) (xiii)
可以如方案6所示，可以从式XIII相应的氯取代的烷基衍生物开 始有利地制备通式I的6-苯基-lH-咪唑并[4， 5-c]吡啶-4-甲腈衍生 物，其中R3代表被NRsR6取代的(Cw)烷基。用各种伯或仲胺置换化合 物(XIII)的氯提供了需要的产物(XIV)。
方案6
<formula>formula see original document page 17</formula>(XIII) R (xiv)
在另一种方法中，可以通过方案7所示的方法，从其中n=l的化 合物XIII有利地制备其中n=3的通式结构XIV的化合物。在适当的 溶剂例如乙腈中用三苯基膦与XIII反应，提供了 Wittig试剂XV。在 作为碱的1，8-二氮杂二环[5.4. O]十一-7-烯(DBU)存在下用氯乙醛与 XV进行WiUig反应，得到产物取代的烯丙基氯XVI。置换氯得到了 化合物XVII，用在炭载钯作为催化剂氩化XVII得到其中n-3的化合 物XIV。 方案7
可以根据方案8制备通式I的6-苯基-lH-咪唑并[4,5-c]吡啶-4-曱腈衍生物， 其中R3和l都不是氢。在适当的溶剂，例如乙腈或DMF 中用烷基碘或溴和作为碱的碳酸钾将化合物III烷基化，得到产物化 合物XIX。使用钯衍生物作为催化剂，用芳基硼酸进行XIX的Suzuki 偶合，得到产物化合物XX 。使用如方案1中所述的方法将化合物XX的 硝基还原成冊2,得到化合物XXI。使用如方案5所述的方法环化得到 产物XXII，通过如方案6所示的方法，用胺置换氯，提供了所需的化 合物XXIII。 方案8<formula>formula see original document page 18</formula>
在另一个方法中，可以通过方案9所示的合成途径制备通式I的 具有不同R、R:和R2的化合物。用如方案l所述的方法还原化合物XIX， 得到化合物XXIV。通过方案5的方法形成咪唑环，提供了化合物XXV。 用不同的芳基硼酸进行XXV的Suzuki偶合得到如通式I所述的所需的 产物。
方案9
<formula>formula see original document page 18</formula>
在其中R3或R4包含碱性氨基氮原子(为NRsR6或NR7R8的形式)的通 式I的6-苯基-lH-咪唑并[4， 5-c]吡啶-4-曱腈衍生物的制备中，该氮 原子暂时受到保护，例如通过酸敏感的叔丁氧基羰基(Boc)保护基。在 合成期间暂时保护官能团的其他适当的保护基是本领域已知的，例如 参见Wuts， P. G. M.和Greene, T. W.: 户rotec^2'ye Crow/^ ^rga/ /c 加Me"'s， Third Edition, Wiley， New York, 1999。
可以是游离碱形式的本发明的6-苯基-lH-咪唑并[4， 5-c]吡啶 -4-曱腈衍生物可以以药学可接受的盐的形式从反应混合物中分离出 来。可以通过用有机或无机酸处理式I的游离碱来进一步获得药学可 接受的盐，例如酸加成盐，其中机或无机酸例如但不限于盐酸、氢溴 酸、氩碘酸、硫酸、磷酸、乙酸、三氟乙酸、丙酸、羟乙酸、马来酸、 丙二酸、甲磺酸、延胡索酸、琥珀酸、酒石酸、柠檬酸、苯曱酸和抗 坏血酸。
其中存在羧基的式I的6-苯基-lH-咪唑并[4， 5-c]吡啶-4-甲腈 衍生物的适当的盐可以是碱金属盐，例如钠、钾或锂盐，或者可以是 从与有机碱例如三曱胺、三乙胺等等的組合中分离的盐。
本发明的化合物可以以溶剂化以及非溶剂化的形式存在，包括水 合的形式。 一般地，溶剂化形式相当于非溶剂化形式，这些都意欲包 括在本发明的范围内。
本发明的化合物可以以无定型的形式存在，但是也可能是多晶形 的形式。 一般地，所有的物理形式对于本发明所关注的应用都是等同 的，都意欲包括在本发明的范围内。
本发明的6-苯基-lH-咪唑并[4， 5-c]吡啶-4-甲腈衍生物和它们 的盐可以在一个或多个侧链R。 R2、 R4-R14、 R2。-R22中包含一个手性中 心，因此，可以以纯对映体或对映体的混合物，或包含非对映体的混 合物的形式获得。如何获得纯净的立体异构体的不对称合成的方法是 本领域公知的，例如用手性诱导或从手性中间体开始合成，对映选择 性酶转换，在手性介质上用色语分离立体异构体或对映体。这些方法 例如在 CA/_ra_//0^ /力 //7ffi/"/"7(edited by A. N. Collins, G.N. Sheldrake和J. Crosby, 1992; John Wiley)中进行了描述。
发现本发明的化合物是人组织蛋白酶S和组织蛋白酶K的抑制剂， 因此在本发明的一个进一步的方面可以在治疗中使用，特别是用于制 备治疗自身免疫性疾病、慢性阻塞性肺疾患、疼痛、骨质疏松症、动 脉粥样硬化和相关的组织蛋白酶S和K依赖性障碍例如哞喘和IBD的 药物。
本发明的化合物可以肠内或胃肠外施用，对于人每日剂量是
0. 001-100 mg/kg体重，优选0. 01-10 mg /kg体重。如标准参考Gennaro 等人 ， Remington's Pharmaceutical Sciences, (20th ed.， Lippincott Williams & Wilkins， 2000， 特别地参见Part 5: Pharmaceutical Manufacturing)所述，当与药学上适当的辅料混合 时，该化合物可以压制成固体剂量单元，例如丸剂、片剂，或制造成 胶嚢或栓剂。通过药学上适当的液体的方式，该化合物也可以以溶液、 混悬液、乳剂的形式使用，例如用作注射制剂或作为喷雾剂，例如用 作鼻喷雾剂。
对于制备剂量单元例如片剂，关注的是使用常规的添加剂例如填 充剂、着色剂、聚合性粘合剂等等。 一般地，可以使用不会干扰活性 化合物功能的任何药学可接受的添加剂。
可以与组合物一起施用的适当的载体包括以适当量使用的乳糖、 淀粉、纤维素衍生物等等或其混合物。
通过下面的实施例进一步解释本发明。
方法
一般化学方法
所有试剂都是从常规商业来源购得的，或者使用商业来源的物质 根据文献的方法合成。在Bruker DPX 400光谱仪上获得质子NMR NMR)，并参考内标TMS。在ShimadzuLC-8A(HPLC) PE Sciex API 150EX LCMS上记录质i普。在流速为4ml/分钟的梯度条件(90。/。水/ Q. 1%曱酸 到90%乙腈/ 0. 1%曱酸)下，在LUNA C18柱(5 jam; 30 x 4. 6 mm) 上进行分析反相LCMS分析。
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二曱基甲酰胺(DMF)， N-曱基吡咯烷酮(NMP), 二氯甲烷(DCM)， 二曱亚 砜(DMSO)，四氢呋喃(THF)， 1,2-二甲氧基乙烷(DME)，高压液相色谱(HPLC)， 二异丙基乙胺(DIPEA),三乙胺(TEA),宽峰(br)，单峰(s)， 双峰(d)，三峰(t),三氟乙酸(TFA)，叔丁氧基羰基(Boc)，甲磺酸盐 (Ms0)，三氟曱磺酸盐(TfO)。
实施例i.
6- (4-乙氧基-3-三氟曱基-苯基)-1 F咪唑并[4， 5-c]吡啶-4-曱腈
1500C
A: 4-溴-1-乙氧基-3-三氟曱基-苯
将4-溴-3-三氟曱基-苯酚(117. 6g， 0. 49mol)、碘乙烷(77. 6g， 0. 49mol)和碳酸钾(lQ1. 2g， 0. 73mol)的乙腈(600ml)搅拌混悬液在 回流下加热2. 5小时。减压浓缩混合物，然后在二氯甲烷(l升)和水 (l升)之间分配。收集有机相，在硫酸镁上干燥，然后减压浓缩，得 到4-溴-i-乙氧基-3-三氟甲基-苯(126. 97g)。屮NMR(CDC1》5 7. 66(s， 1H) 7. 56(d， 1H) 6.86(s， 1H) 4. 09 (q， 2H) 1.44(t， 3H)。 B:4-乙氧基-3-三氟甲基苯基硼酸
用氮气清洗4-溴-1-乙氧基-3-三氟甲基-苯(21. 25 g, 90. 8mmo1)
的干燥四氢呋喃(120ml)溶液，冷却至-78'C，并将温度维持在_70匸下 滴加BuLi(2. 5M的己烷溶液，39. 96ml， 99. 9mmo1)。将混合物搅拌5 分钟，然后加入一份的硼酸三异丙酯(17. 9g, 95. 36咖o1)。在-78。C下 继续搅拌30分钟，然后恢复至室温。加入溶解于150ml水中的10ml 乙酸来停止反应，减压浓缩除去四氢呋喃。过滤收集沉淀，溶解于乙 酸乙酯，并在硫酸镁上干燥。通过在乙酸乙酯/己烷混合物中重结晶来 实现纯化，得到4-乙氧基-3-三氟甲基苯基硼酸(10g) 。 ^ NMR (DMS(U : 5 8. 08(s， 1H) 8. Ol(d， 1H) 7. 2 (d， 1H) 4. 18(q， 2H) 1.34(t， 3H)。 g: 4-氨基-6-氯-3-硝基-吡啶-2-曱腈
将4-氨基-1，6-二氯-3-硝基-吡啶(17. 5g， 84.1 mmol)和氰化亚 铜(i) ( 15. lg， 168. 3mmo1 )的170ml l-曱基-2-吡咯烷酮的搅拌溶液 置入预热至180°(:的油浴中并继续搅拌30分钟。将混合物冷却，并用 乙酸乙酯(？00rnl)和水(7G0inl)稀释，过滤所得到的混悬液。分离有机 层，再用水(S00ml)和0. lNHCl(500ml)洗涤。然后在硫酸镁上干燥有 机层，过滤，减压浓缩，得到棕色固体，用二乙醚和二氯甲烷洗涤， 得到4-氨基-6-氯-3-硝基-吡啶-2-甲腈(8g)。
^ NMR(DMSO): 5 8. 8 - 7. 7 (bs， 2H) ， 7. 18(s， 1H)。 D: 4-氨基-6- (4-乙氧基-3-三氟甲基-苯基)-3-硝基-吡啶-2-曱腈 在氮气流下将4-氨基-6-氯-3-硝基-吡啶-2-甲腈(lg， 5.04 mmol)， 4-乙氧基-3-三氟曱基苯基硼酸(1. 33g， 6. 04mmo1)，四(三苯 基膦)钯(0) ( ~ 500mg ， 10mol%)，碳酸钾(2.09g， 15. 12mmo1)和 THF(10ml)的搅拌混合物除气，然后在"Smith" 微波中在150°C下 加热10分钟。减压浓缩粗混合物以除去THF，然后在乙酸乙酯和水之 间分配。分离有机层，在疏酸钠上干燥，减压浓缩，得到暗棕色的油。 用二乙醚研碎，得到淡棕色的固体，将其过滤，在气流下干燥，得到 4-氨基-6-(4-乙氧基-3-三氟曱基-苯基)-3-硝基-吡啶-2-曱腈 (900mg)。'HNMR(DMS0): 5 8. 25-8. 1 (m， 3H) ， 7. 63(s， 1H)， 7. 44 (d， 2H)， 4. 27(q， 2H), 1. 38 (t， 3H)。
E: 3，4-二氨基-6-(4-乙氣基-3-三氟甲基-苯基)-吡啶-2-曱腈
在氮气下向包含4-氨基-6- (4-乙氧基-3-三氟甲基-苯基)-3-硝 基-吡啶-2-甲腈(5g， 14. 2mmol)和10°/。Pd-C(wet) (5g)的烧瓶中加入乙 酸乙酯(500ml)。反应容器用氢气吹扫和在室温下搅拌1. 5小时，然后 通过硅藻土过滤，减压浓缩，得到3，4-二氨基-6-(4-乙氧基-3-三氟 曱基-苯基)-吡咬-2-甲腈(2. 5g)。力證(DMSO): 5 8. 02 (ra， 2H)， 7. 31(d， 1H)， 7. 14(s， 1H), 6. 1 (bs， 2H) ， 5. 69 (bs， 2H) ， 4. 25 (q， 2H)， 1.35(t， 3H)。
MS / 々323. 3 (M+1)。
6- (4-乙氧基-3-三氟曱基-苯基)-IF咪唑并[4, 5-c]吡啶-4-
曱腈
将3， 4-二氨基-6- (4-乙氧基-3-三氟甲基-苯基)-吡啶-2-曱腈 (4.化，13. 7mmol),三氟曱磺酸镱(173mg ， 2mol%)，原曱酸三乙酯 (6. 08g， 41. lmmol)和乙腈(50ml)的搅拌混悬液在回流下加热30分钟。 过滤收集固体沉淀物，用乙腈简单洗涤，得到6-(4-乙氧基-3-三氟甲 基-苯基)-1F咪唑并[4，5-c]吡啶-4-曱腈(2. 6g)。 ^NMR(DMSO): 5 8.67(s， 1H)， 8. 47(s， 1H), 8.36(m， 2H) ， 7，49(d， 1H)， 4. 26 (q， 2H)， 1. 38(t， 3H)。
MS迈々333. 3 (M+l)。
实施例2吡啶 -1-基]-乙酸曱基酯
30mins /
向6- (4-乙氧基-3-三氟甲基-苯基)-IF咪唑并[4， 5-c]吡啶-4-曱腈(实施例l; 200mg， 0. 6mmo1)和溴乙酸曱酯(276. 2mg， 1. 81mmo1) 的二曱基曱酰胺(4ml)溶液中加入碳酸铯(325. 5mg， 1.81mmo1),将混 合物在室温下搅拌30分钟。减压浓缩混合物除去二甲基甲酰胺，然后
在乙酸乙酯(200ml)和水(200ml)之间分配。收集有机层，在硫酸钠上 干燥，然后在10g的二氧化硅柱上纯化，用二乙醚洗脱。然后用二乙 醚简单洗涤产物，在气流下干燥，得到[4-氰基-6-(4-乙氧基-3-三氟 曱基-苯基)-咪唑并[4， 5-c]吡啶-l-基]-乙酸甲基酯(11 Omg)。
^NMR(DMSO): 5 8. 76 (s， 1H) 8. 64 (s， 1H) 8. 39 (d， 1H) 8. 36 (s， 1H) 7.44(s， 1H) 5.44(s， 2H) 4. 27(q， 2H) 3. 75(s， 3H) 1.38(t， 3H)。 MS /Z7々405. 7 (M+1)。
实施例2吡啶 -l-基]-乙酸
向[4-氰基-6-(4-乙氧基-3-三氟甲基-苯基)-咪唑并[4，5-c]吡啶 -l-基]-乙酸甲基酯(110mg, 0. 27mmo1)的二甲基甲酰胺(2ml)和水 (2ml) 1: 1混合物的溶液中加入溶解于20(VL水中的氢氧化锂(19mg， 0. 81mmo1)。再加入2ml的二曱基曱酰胺以帮助溶解。将混合物在室温 下搅拌30分钟，然后用2N HC1溶液酸化至pH 1，并过滤。用乙醚洗 涤所得到的固体，然后溶解于丙酮，減压浓缩除去残留的有机溶剂， 得到[4-氰基-6-(4-乙氧基-3-三氟甲基-苯基)-咪唑并[4, 5-c]吡咬 -l-基]-乙酸(100mg)。力NMR(DMS0): 5 8.76(s， 1H) 8.64(s， 1H) 8.37(m， 3H) 7. 43(d， 1H) 5. 31 (s， 2H) 4.27(q， 2H) 1.38(t， 3H); MS /z /z 391. 7(M+l)。
实施例4吡啶 -l-基]-丁酸
该化合物是从6-(4-乙氧基-3-三氟甲基-苯基)-l^咪唑并 [4,5-c]吡啶-4-曱腈(实施例l)开始，用4-溴丁酸曱酯替代溴乙酸甲 酯，使用实施例2和3所述的方法来制备。
力腿(DMS0): 5 8. 69(m, 2H) 8.43-8.38 (m， 2H) 7. 42 (d， 1H)
4.44(t， 2H) 4. 27(q， 2H) 2. 29(t， 2H) 2. ll(m， 2H) 1.38(t, 3H)。 MS /Z7々419. 5(M+1)。
实施例&
6- (4-乙氧基-3-三氟曱基-苯基)-2-(异丁基氨基-曱基)-1^咪唑 并[4，5，c]吡啶-4-曱腈
A:2-氯曱基-6-(4-乙氧基-3-三氟甲基-苯基)-l^-咪唑并[4，5，c] 吡啶-4-曱腈
向3， 4-二氨基-6- (4-乙氧基-3-三氟曱基-苯基)-吡啶-2-甲腈 (1.86g， 5. 78mmol)和2-氯-l， 1， l-三乙氧基乙烷(3. 41g， 17. 3mmo1) 的乙腈(40ml)溶液中加入三氟甲磺酸镱(180mg， 5mol%),将混合物 在回流下加热过夜。减压浓缩混合物，然后在乙酸乙酯和水之间分配。 将有机层在硫酸钠上干燥，浓缩，然后加入二乙醚。过滤沉淀物，在 气流下干燥，得到6-(4-乙氧基-3-三氟甲基-苯基)-2-(氯曱基)-l^ 咪唑并[4，5，c]吡啶-4-曱腈(1.2g)。屮NMR(DMSO): 5 8.42(s， 1H) 8. 38(d， 1H) 8.34(s， 1H) 7. 40(d， 1H) 5.05(s， 2H) 4.26(q， 2H) 1. 38(t, 3H)。 MS迈々381. 1 (M+l)
B: 6- (4-乙氧基-3-三氟曱基-苯基)-2-(异丁基氨基-曱基)-1 #-咪唑并[4， 5， c]吡啶-4-曱腈
将2-氯甲基-6-(4-乙氧基-3-三氟曱基-苯基)-l^咪唑并[4，5，c] 吡啶-4-甲腈(20mg， 0. 06mmol)和异丁胺(21mg， 0. 3mmo1)的二曱亚砜 (500juL)溶液在Creator ;微波下在120°C下加热5分钟。过滤混合物， 通过制备型HPLC纯化，得到6-(4-乙氧基-3-三氟曱基-苯基)-2-(异 丁基氨基-曱基)-l^咪唑并[4，5，c]吡啶-4-甲腈(11.6mg) 。 ^
NMR(MeOD) 5 8. 31 (s， 1H) 8. 28-8. 26 (m， 2H) 7. 28(d， 1H) 4. 45 (s, 2H) 4. 23(q， 2H) 3. 13(d， 2H) 2. 16(m， 1H) 1.45(t， 3H) l.ll(d， 6H)。 MS /z /z 418. 6(M+l)。
使用适当的胺衍生物，进一步使用实施例H所述的方法，来制备 下列化合物
5b: 6- (4-乙氧基-3-三氟曱基-苯基)-2- [ (2-苯氧基- 乙基氨基-曱基)-IF咪峻并[4， 5， c]吡咬-4-曱腈
H舰(MeOD) 5 8. 3-8. 25 (m， 3H) 7. 32-7. 26 (m， 3H) 7. 03-6. 96 (m， 3H) 4. 78(s， 2H) 4. 39(t， 2H) 4. 23(q， 2H) 3. 76(t， 2H) 1.45(t， 3H)。 MS /z A 482.4 (M+l)。
5 c: 2- (3-乙酰胺基-吡咯烷-1-基曱基)-6- (4-乙氧基-3-三氟曱基 -苯基)咪唑并[4， 5， c]吡啶-4-曱腈
腿(MeOD) 5 8.29-8.24 (m， 3H) 7.27(d， 2H) 4. 92 (s， 2H) 4.51(m， 1H) 4. 23(q， 2H) 3. 96-3. 85 (m， 2H) 3. 75-3.61(m， 2H) 2.54(m， 1H) 2. 19(m， 1H) 1.99(s， 3H) ， 1.46(t， 3H) 。 MS迈々 473. 3 (M+l)。
5d:6-(4-乙氧基-3-三氟曱基-苯基)-2-(3-氧代-哌嗪-l-基甲基) -l"-咪唑并[4, 5， c]吡啶-4-曱腈
腿(DMS0) 5 8.36—8.31(m， 3H) 7.81(s， NH) 7.39(d， 1H) 4. 26(q， 2H) 3.98(s， 2H) 3. 21-3.15(m， 4H) 2.73(m， 2H) 1. 38 (t， 3H)。 MS忠々445. 5 (M+l)。
5e: 6- (4-乙氧基-3-三氟曱基-苯基)-2- {[2- (2-氧代-咪唑烷-l 基)乙基氨基]-甲基} -1^咪唑并[4, 5， c]吡啶-4-曱腈
力纖(MeOD) 5 8.29-8.24 (m， 3H) 7.27(d， 1H) 4. 73(s， 2H) 4.22(q， 2H) 3.64-3.47 (m， 8H) 1. 45 (t， 3H) 。 MS /ff/z 474. 3 (M+l)。
5f: 6- (4-乙氧基-3-三氟甲基-苯基)-2- [ (N， N-二甲基氨曱酰基甲 基氨基)曱基]-1 f咪唑并[4， 5-c]吡啶-4-曱腈
NMR(MeOD) 5 8. 31-8. 26(m， 3H) 7. 28(d， 1H) 4. 72(s， 2H)
4.35(s， 2H) 4. 26(q， 2H) 3. 05 (s， 3H) 3. 03(s， 3H) 1.46(t， 3H)。 MS历々447. 3 (M+l)。
5g: 2-(1, l-二氧代-漆唑烷-3-基曱基)-甲基]-6-(4-乙氧基-3-三氟曱基-苯基)-1沪咪唑并[4， 5-c]吡啶-4-曱腈
H NMR(MeOD) 5 8. 30-8. 22 (m， 3H) 7. 28(d， 1H) 4. 54(s， 2H) 4. 23(q， 2H) 4. 22 (m， 1H) 4. 13(m， 1H) 3. 56(m， 1H) 3. 40(m， 1H) 3. 24(m ， 2H) 2.17(m， 1H) 2. 33(m， 1H) 1.45(t， 3H) 。
MS迈々 480. 0 (M+1)。
5h: 6- (4-乙氧基-3-三氟甲基-苯基)-2- [ (4-N， N-二曱基氨曱酰基 -哌嗪-l-基)曱基]-1F咪唑并[4， 5-c]吡啶-4-曱腈
丄H腿(MeOD) 5 8. 29-8.26 (m， 3H) 7.26(d， 1H) 4. 72(s， 2H) 4,23(q， 2H) 3. 56-3.48 (m， 8H) 2.90(s， 6H) 1.46(t， 3H) 。 MS历/z 502. 3。
5 i: 2 - (3-二甲基氨基-吖丁啶-l-基曱基)-6- (4-乙氧基-3-三氟曱 基-苯基)-li^咪唑并[4，5-c]吡啶-4-曱腈
NMR(MeOD) 5 8. 38-8. 34 (m， 3H) 7. 331 (d， 1H) 5. 16(m， 1H) 5.08(s， 1H) 4. 81(s， 2H)， 4. 77(m， 1H) 4. 49(m， 1H) 4. 25(q， 2H)， 3.47(s, 3H) 3.42(s， 1H) 3. 31 (s， 3H) 1.46(q， 3H) 。
MS迈々 445. 5 (M+l)。
5 j: 6- (4-乙氣基-3-三氟甲基-苯基)-2- {[ (5-曱基-异喁唑-3-基 甲基)-氨基] -甲基} -IF咪唑并[4， 5， c]吡淀-4-甲腈
'H NMR(MeOD) 5 8. 30-8. 24 (m， 3H) ， 7.25(d， 1H) 6. 33(s， 1H) 4.74(s， 2H) 4.56(s, 2H) 4. 22 (q， 2H) 2.46(s， 3H) ， 1.45(t， 3H)。 MS顶々457. 8 (M+l)。
5k: 2-氨基曱基-6- (4-乙氧基-3-三氟曱基-苯基)咪唑并 [4，5，c]吡咬-4-曱腈
^醒R(MeOD) 5 8. 31-8. 26 (m， 3H) 7.29(d， 1H) 4.54(s， 2H) 4.23(q， 2H) 1. 45 (t， 3H) 。 MS历々362. 6 (M+l)。
51:6-(4-乙氧基-3-三氟曱基-苯基)-2-曱基氨基曱基-li7一咪唑并[4，5，c]吡啶-4-甲腈
力NMR(MeOD) 5 8.31-8. 26 (m， 3H) 7.26 (d， 1H(， 4.64(s， 2H) 4. 23(q, 2H) 2.95(s， 3H) 1. 45 (t， 3H) 。 MS / 々376. 6 (M+l)。
5m: 2-二曱基氨基曱基-6- (4-乙氧基-3-三氟甲基-苯基)-1 V^米唑 并[4，5，c]吡啶-4-曱腈
^ NMR(MeOD) 5 8. 31-8. 25 (m， 3H) 7.28(d， 2H) 4.23(q， 2H) 3.14(s， 6H) 1.46(t， 3H)。 MS / 々390. 6 (M+l)。
5n: (4-乙氧基-3-三氟甲基-苯基)-2- [ (4-氨曱酰基哌啶-l-基) 曱基]-lf咪唑并[4， 5-c]吡啶-4-曱腈
H NMR(MeOD) 5 8. 29-8.24 (m， 3H) 7. 25(d， 1H) 4. 76(s， 2H) 4. 22(q, 2H) 3. 84-3. 81 (m， 2H) 3. 35-3. 30 (m， 2H) 2.64(m， 1H) 2. 16-2. 07(m， 4H) 1.45(t， 3H) 。 MS顶/z 473. 3 (M+l)。
5o: 2- [ (N-烯丙基-N-甲基-氨基)-甲基]-6- (4-乙氧基-3-三氟曱 基-苯基)-1^4米唑并[4， 5-c]吡啶-4-曱腈
NMR(MeOD) 5 8. 30—8. 25 (m， 3H) 7.27(d， 2H) 6. 08 (m， 1H) 5.69(m， 2H) 4. 79(s， 2H) 4. 23(q， 2H) 4. 05 (d， 2H) 3. 09(s， 3H) 1.46(q， 3H)。 MS顶々416. 8 (M+l)。
、5p: 2- (4-乙酰基-哌嗪-1-基曱基)-6- (4-乙氧基-3-三氟曱基-苯 基)-1#一米唑并[4， 5-c]吡啶-4-曱腈
^ NMR(MeOD) 5 8.28-8. 23 (m， 3H) 7.26(s， 1H) 4.65(s, 2H) 4. 23(q， 2H) 3. 88 (m， 4H) 3. 44-3. 30 (m， 4H) 2. 16(s， 3H) 1.46(t， 3H)。 MS /z 々473. 3 (M+l)。
5q: 6- (4-乙氧基-3-三氟曱基)-苯基)-2- [ (4-乙氧基羰基哌嗪-l-基)曱基]-1F咪唑并[4， 5-c]吡啶-4-曱腈
腿(MeOD) 5 8. 26-8. 20 (m 3H) 7.25(d， 1H) 4. 52 (s， 2H) 4. 24-4. 13(m， 4H) 3. 75 (m， 4H) 3. 23(m， 4H) L45(t， 3H) 1.26(t， 3H)。 MS迈々503. 0 (M+1)。
5r: 6- (4-乙氧基-3-三氟甲基-苯基)-2- {[3- (2-氧代-吡咯烷-l-基)-丙基氨基]-曱基)l)^米唑并[4，5-c]吡啶-4-曱腈
^ NMR(MeOD) 5 8. 31-8. 25(m， 3H) 7.27(d， 1H) 4. 67(s， 2H) 4. 23(q， 2H) 3. 53(t， 2H) 3.46(t， 2H) 3. 29(m, 2H) 2. 42(t， 2H) 2.13-2. 03(m， 4H) 1. 45 (t， 3H) 。 MS边々487. 5 (M+l)。
5s: 6- (4-乙氧基-3-三氟曱基-苯基)-2- (4-吡咯烷-l-基-哌啶-1 -基)-l^咪唑并[4， 5-c]吡啶-4-曱腈
^ NMR(MeOD) 5 8.31-8.23(m, 3H) 7.29(d， 1H) 4.35(s， 2H) 4.24(q， 2H) 3.68-3. 45 (m， 6H) 3. 21-3.10(m， 2H) 2. 86-2. 81(m， 2H) 2. 39—1. 90 (m， 7H) 1.45(t， 3H) 。 MS边/z 499. 4 (M+l)。
51: 6- (4-乙氧基-3-三氟曱基-苯基)-2- [4-(呋喃-2-基羰基) -哌 嗪-1-基曱基]-1^咪唑并[4， 5-c]吡啶-4-甲腈
力腿(MeOD) 5 8. 26(s, 1H) 8.23(d， 1H)， 8. 18(s， 1H) 7. 68 (s: 1H) 7.24(d， 1H) 7. 09(m， 1H) 6.59(m， 1H) 4.4(s， 2H) 4.21(q， 2H) 4. 04(m， 4H) 3.18(m, 4H) 1.45(t， 3H) 。 MS范々525. 7 (M+l)。
5u: 6- (4-乙氧基-3-三氟曱基-苯基)-2- [ (2-甲氧基-乙基氨基)-曱基]-1^咪唑并[4， 5-c]吡啶-4-曱腈
'H腿(MeOD) 5 8. 32-8. 26 (m， 3H) 7.29(d， 1H) 4. 69(s， 2H) 4. 24(q， 2H) 3. 77(m， 2H) 3.53(m， 2H) 3.46(s， 3H) 1.46(t， 3H)。 MS / 々420. 3 (M+1)。
5v: 2-(2，6-二曱基-哌啶-1基曱基)-6-(4-乙氧基-3-三氟甲基-苯基)]-1F咪唑并[4， 5-c]吡啶-4-甲腈
力證(MeOD) 5 8. 31-8. 26(m， 3H) 7. 28 (d， 1H) 4. 9-4.6(m， 2H) 4. 23(q， 2H) 3. 89-3. 71(m， 2H) 2. 07-1.63 (m， 6H) 1.61-1. 32 (m， 9H)。 MS /zz々459. 0 (M+1. 5)。
5w: 6- (4-乙氧基-3-三氟曱基-苯基)-2- {[(呋喃-2-基曱基) -氨 基]-甲基} -1F咪唑并[4， 5-c]吡啶-4-曱腈
^腿(MeOD) 5 8. 30-8. 25 (m， 3H) 7.66(s， 1H) 7.27(d， 1H) 6，7(m， 1H) 6. 52(m， 1H) 4. 62(s， 2H) 4. 56(s， 2H) 4.23(q， 2H) 1.45(t， 3H)。 MS / 々442. 5 (M+1)。
5x: 2-[(环丙基曱基-氨基)-曱基]-6- (4-乙氧基-3-三氟曱基-苯
基)-IF咪唑并[4， 5-c]吡啶-4-曱腈
^醒R(MeOD) 5 8. 31-8. 26 (m， 3H) 7.28(d， 1H) 4.68(s, 2H)
3.17(d， 2H) 1.45(t， 3H) 1. 21 (m， 1H) 0. 77(m， 2H) 0. 48 (m， 2H)。 MS /z7々416. 5(M+1)。
实施例^
2-[ (l-氮杂-二环[2. 2. 2]辛-3-基氨基)-甲基]-6- (4-乙氧基-3-三氟曱基-苯基)-1F咪唑并[4， 5-c]吡啶-4-曱腈
将2-氯曱基-6-(4-乙氧基-3-三氟甲基-苯基)-1F咪唑并 [4，5-c]吡啶-4-曱腈(20mg, 0. 06mmo1) ， 二盐酸3-氨基奎宁环 (22.9mg， 0. 12mmol)和三乙胺(18. 2mg, 0. 18mmo1)的二甲亚砜(500 ju L)溶液在Creator微波中在120°C下加热5分钟。过滤混合物，并通 过制备型HPLC纯化，得到2-[(1-氮杂-二环[2. 2.2]辛-3-基氨基)-甲 基]-6-(4-乙氧基-3-三氟曱基-苯基)-1^咪唑并[4，5-c]吡啶-4-曱腈 (14. 8mg)。 'H腿(Me0D) 5 8. 34-8. 27 (m， 3H) 7.29(d， 2H) 4. 95 (s， 2H) 4.29-4. 21 (m， 3H) 4. OO(m， 1H) 3. 86-3. 69 (m 5H) 2.46(m, 1H) 2.27-2.10(m， 4H) 1.45(t, 3H) 。 MS迈/"71. 8 (M+l)。
使用适当的胺衍生物，进一步使用实施例6所述的方法，来制备 下列化合物
6b: 6- (4-乙氧基-3-三氟曱基-苯基)-2- {[(噻唑-2-基曱基) -氨 基]-曱基} -1^咪唑并[4， 5-c]吡啶-4-甲腈
力腿(MeOD) 5 8.31-8.27(m， 3H) 7. 92 (d， 1H) 7.75(d， 1H) 7.28(d, 1H) 4. 89(s， 2H) 4.23(q, 2H) 1.46(t, 3H) 。
MS迈々 459.6 (M+l)。
6c: 6- (4-乙氧基-3-三氟曱基-苯基)-2-(氨曱酰基曱基氨基曱
基)-1^咪唑并[4， 5-c]吡啶-4-曱腈
力蘭(MeOD) 5 8. 31-8. 25(m， 3H) 7. 28(d， 1H) 4. 18(bs， 2H) 4. 23(q， 2H) 4. 07(bs， 2H) 1.45(t， 3H) 。 MS巡々419. 4 (M+l)。
6d : 6-(4-乙氧基-3-三氟曱基-苯基)-2-(吡啶-4-基氨基曱 基)-li7-咪唑并[4， 5-c]吡啶-4-曱腈
'H腿(MeOD) 5 8.28-8.22 (m， 5H) 7.27(d, 1H) 6.93(m， 2H) 5.75(s， 2H) 4. 23(q， 2H) 1.45(t， 3H) 。 MS迈々439. 5 (M+l)。
实施例7
CN
A: 6-氯-2-二甲基氨基-l^咪唑并[4,5-c]吡啶-4-曱腈 在20分钟内将铁粉末(8. 5g)分成小份加入到4-氨基-6-氯-2-氰 基-3-硝基吡啶在MeOH(90ml)和浓盐酸(30ml)的溶液中。再将混合物 回流30分钟。在冷却后，用浓氨水碱化反应混合物至pH 10。用乙酸 乙酯(200ml x 5)萃取混合物，用盐水洗涤合并的有机层，在硫酸钠上 干燥，减压除去溶剂，得到粗产物(4g),它可以用于下一步骤而无 需进一步纯化。将上述粗产物(0. 33g)加入到氯仿(5ml)和乙腈(20ml) 中，然后加入二氯亚曱基二甲基氯化铵(O. 33g)。将混合物回流4小时。 在冷却后，过滤收集固体产物6-氯-2-二曱基氨基-l^咪唑并[4，5-c] 吡咬-4-甲腈。丄H腿(MeOD) 5 7. 61(s， 1H)， 3. 37(s， 3H) ， 3. 30(s， 3H)。
B: 2-二甲基氨基-6- (4-乙氧基-3-三氟曱基-苯基)-IF咪唑并 [4， 5-c]吡啶-4-曱腈
将6-氯-2-二甲基氨基-1^咪唑并[4， 5-c]吡啶-4-甲腈(100mg，4: 4-氨基-6- (4-甲氣基-3-三氟曱基-苯基)-3-硝基-吡啶-2-曱腈
将4-氨基-6-氯-3-硝基-吡啶-2-曱腈(152mg， 0. 76mmo1)， 4-甲 氧基-3-三氟甲基苯基硼酸(33hg， l.5lmmol)，四(三苯基膦)4巴 (0) (115mg， 10molW，碳酸钾(418mg， 3. 03mmo1)和THF (5ml)的搅拌 混合物在氮气流下除气，然后在Smith Creator微波中在150°C下加 热10分钟。减压浓缩粗混合物以除去THF，然后在乙酸乙酯(20ml)和 水(20ml)之间分配。分离有机层，在硫酸钠上千燥，减压浓缩，得到 暗棕色的油。混合物在二氧化珪(10g Combiflash卫柱(cartridge)， 7: 3庚烷/乙酸乙酯到1: 1庚烷/乙酸乙酯)上进行快速色谱处理，
0.45mmo1), 4-乙氧基-3-三氟甲基-苯基硼酸(198mg， 0. 88mmo1)，四 (三苯基膦)钯(O) (50mg， ~ 10mol。/。)和碳酸钾(193. Omg, 1.39mmol)的 THF(3ml)混悬液在"Smith"孩"皮中在130。C下加热6分钟。减压浓缩 粗混合物以除去THF，然后在乙酸乙酯和水之间分配。分离有机层， 在硫酸钠上千燥，减压浓缩。然后将该物质溶解于DMSO,并通过制备 型HPLC等份纯化。收集所需的部分，浓缩得到白色固体，用乙醚洗涤 该固体，得到2-二甲基氨基-6-(4-乙氧基-3-三氟曱基-苯基)-1F咪 唑并[4，5-c]吡夂-4-甲腈(5. Omg)。 'H NMR (DMSO) 5 8.24(m， 2H) 7.84(s， 1H) 7. 35(d， 1H) 4. 24 (q， 2H) 3. 19(s， 6H) ， 1.37(t， 3H)。 MS迈々376. 7 (M+l)。
实施例8
<formula>formula see original document page 32</formula>
得到呈橙色固状的68mg 4-氨基-6-(4-甲氧基-3-三氟甲基-苯基)-3-硝基-吡啶-2-曱腈。NMR(DMS0) 5 8. 25 (d， 1H)， 8.18(m， 2H)，
7. 62(s， 2H)， 7.46(d， 1H)， 3. 99(s， 3H) 。 MS /z /z 339. 3 (M+l)。
B: 3，4-二氨基-6-(4-曱氧基-3-三氟曱基-苯基)-吡啶-2-曱腈 将4-氨基-6- (4-甲氧基-3-三氟曱基-苯基)-3-硝基-吡啶-2-曱 腈(65mg， 0. 19mmol)悬浮于甲醇(1.5ml)中，并滴加浓HCl(O. 5ml)(放 热)。搅拌该混悬液，同时分份加入铁粉末(37mg， 0. 67mmo1)(放热)， 混合物在回流下加热1小时。将混合物倒入水(20ml)中，用乙酸乙酯 (20ml)萃取。干燥有机层并蒸发，然后在二氧化硅(4gCombiflash卫 柱，7: 3庚烷/乙酸乙酯)上进行快速色谱处理，得到呈淡棕色固状的 29rag 3，4-二氨基-6-(4-曱氧基-3-三氟甲基-苯基)-吡啶-2-甲腈。^ NMR(DMS0) 5 8. 08-8. 01 (m， 2H) 7.05-7. 00 (m， 2H) ， 3. 94(s， 3H)。 MS /z /z 309. 7 (M+l)。
C:6-(4-甲氧基-3-三氟曱基-苯基)-l^咪唑并[4， 5-c]吡啶-4-
曱腈
将3， 4-二氨基-6- (4-甲氧基-3-三氟曱基-苯基)-吡啶-2-甲腈 (20mg， 0. 065mmo1)悬浮于甲苯(lml)中，以一份加入原甲酸三乙酯 (12mg， 0. 078mmo1),混合物在回流下加热过夜。将混合物进行 prep-LCMS纯化，得到呈白色固状的7mg 6-(4-曱氧基-3-三氟曱基-苯基)-l^-咪唑并[4，5-c]吡咬-4-曱腈。力NMR(DMS0) 5 8. 68(s， 1H),
8. 45-8. 35 (m， 2H) ， 8. 31 (s， 1H)， 7. 40(d， 1H)， 3. 98(s， 3H) 。 MS边/z 319. 1(M+l)。
实施例^
6- (4-乙氧基-3-三氟曱基-苯基)-1- (2-吗啉-4-基-乙基)-IF咪 唑并[4， 5-c]吡啶-4-甲腈
A: l- (2-溴-乙基)-6- (4-乙氣基-3-三氟曱基-苯基)-IF咪唑并 [4，5-c]吡啶-4-甲腈
将6- (4-乙氧基-3-三氟甲基-苯基)-1 F咪唑并[4， 5-c]吡啶-4-曱腈(300mg, 0.90腿ol)溶解于THF(10ml)中，加入2-溴乙醇(225mg， 1.80mmo1)，然后加入甜菜碱(738mg， 1. 80mmo1)，将混合物在室温下 搅拌3小时。再加入0. 5当量的甜菜碱(O. 45mmo1， 162mg)，将混合 物在室温下再搅拌1小时。将混合物在乙酸乙酯(20ml)和水(20ml)之 间分配。干燥有机层并蒸发，然后在二氧化硅(10g Combiflash卫柱， DCM到U甲醇的DCM溶液)上进行快速色谱处理，得到白色固体，它 是N-l和N-3烷基化产物的混合物。将混合物在二氧化硅(10g Combiflash卫柱，甲苯到20%乙酸乙酯的甲苯溶液)上进行快速色镨 处理，得到呈白色固状的130mg的1-(2-溴-乙基)-6-(4-乙氧基-3-三氟甲基-苯基)-lH-咪唑并[4， 5-c]吡啶-4-甲腈。^ NMR(DMS0) 5 8. 80(s， 1H)， 8. 74(s， 1H)， 8. 48-8. 39 (m， 2H), 7.44(d， 1H)， 4. 88 (t 2H)， 4. 29(q, 2H) ， 4. 05 (t， 2H)， 1.40(t， 3H)。
B: 6- (4-乙氧基-3-三氟曱基-苯基)-1- (2-吗啉-4-基-乙基)-1F 咪唑并[4, 5-c]吡啶-4-甲腈
将1- (2-溴-乙基)-6- (4-乙氧基-3-三氟曱基-苯基)-lH-咪唑并 [4， 5-c]吡啶-4-甲腈(92mg， 0. 21mmo1)溶解于DMF (2ml)中并加入吗 啉(91mg， 1.05mmo1)。将混合物在Smith微波中，在120。C下加热5 分钟。用曱醇(5ml)稀释混合物，并使其通过5g SCX卫柱，然后用2M 氨的曱醇溶液稀释，得到呈澄清油状的62mg的6-(4-乙氧基-3-三氟 曱基-苯基)-1- (2-吗啉-4-基-乙基)-IF咪唑并[4， 5-c]吡啶-4-甲 腈。)H腿(CDCls) 5 8.26-8.15(m， 3H) ， 7. 87(s， 1H)， 7. 08 (d， 1H)， 4.35(t， 2H)， 4.20(q， 2H) ， 3. 69(m， 4H) ， 2.82(t, 2H) ， 2. 52 (m， 4H)，
1.48(t， 3H)。 MS迈々446.4 (M+1)。
使用适当的胺衍生物，进一步使用实施例1所述的方法，来制备 下列化合物
,1- [2-(环丙基曱基-氨基)-乙基]-6- (4-乙氧基-3-三氟曱基-苯基)-1H-咪唑并[4， 5-c]吡啶-4-曱腈
^ NMR(CDCU 5 8.23(m， 2H)， 8.18(s， 1H)， 7.92(s， 1H)， 7.11(d， 1H)， 4. 35(t， 2H)， 4. 20(q， 2H) ， 3.14(t， 2H) ， 2. 50(d， 2H)， 1.48(t， 3H)， 0.88(m， 1H) ， 0.48(m， 2H) ， 0. 08 (m， 2H) 。 MSm/z 430. 5 (M+l)。
6- (4-乙氧基-3-三氟曱基-苯基)-1-(2-乙基氨基-乙基)-IH-咪唑并[4， 5-c]吡啶-4-曱腈
^NMR(CDCU 5 8.29-8.18(m， 3H) ， 7.92(s， 1H)， 7. 12(d， 1H) 4. 35(t， 2H)， 4. 20(q， 2H) ， 3. 12(t， 2H) ， 2. 67 (q， 2H)， 1.49(t， 3H)， 1.08(t， 3H)。 MS m/z 404.7 (M+l)。
9d: 6- (4-乙氧基-3-三氟甲基-苯基)-1- (2-哌啶-l-基-乙基)-1H-咪唑并[4， 5-c]吡啶-4-曱腈
'H靈(CDCU 5 8.28-8. 22 (m， 2H)， 8.19(s， 1H)， 7.92(s, 1H): 7. 12(d， 1H)， 4.32(t， 2H) ， 4. 22(q， 2H) ， 2.74(t， 2H) ， 2. 45 (m， 4H)， 1.59-1. 43 (m， 9H)。 MS m/z 444. 5 (M+l)。
6-(4-乙氧基-3-三氟曱基-苯基)-1-(2-吡咯烷-l-基-乙 基)-1H-咪唑并[4， 5-c]吡啶-4-甲腈，三氟-乙酸盐
^ NMR(MeOH) 5 8.57(s， 1H)， 8.51(s， 1H)， 8. 39(m， 2H)， 7.30(d， 1H)， 4. 88(m， 2H) ， 4. 24(q， 2H) ， 3.86(t， 2H) ， 3. 79-3. 58 (m 2H)， 3. 24(m， 2H) ， 2.35-1. 95 (m， 4H) ， 1.46(t， 3H) 。
MS m/z 430. 5 (M+l)。
9f : l-(2-二曱基氨基-乙基)-6-(4-乙氧基-3-三氟甲基-苯 基)-1H-咪唑并[4， 5-c]吡啶-4-甲腈
H腿(CDCU 5 8.26-8.23 (ra， 2H) ， 8.18(s， 1H)， 7.88(s， 1H)， 7. ll(d， 1H)， 4. 31(t， 2H)， 4. 21 (q， 2H) ， 2.75(t， 2H) ， 2. 31 (s， 6H)， 1.49(t， 3H)。 MS m/z 404. 7 (M+l)。
9g: 1- [2- (2-二曱基氨基-乙基氨基)-乙基]-6- (4-乙氧基-3-三氟 曱基-苯基)-lH-咪唑并[4， 5-c]吡啶-4-甲腈
丄H NMR(MeOH) 5 8. 97(m， 1H)， 8.78(m， 1H)， 8.43(m, 2H)， 7.29(d， 1H)， 4.99(m, 2H) ， 4.23(q， 2H) ， 3. 79 (m， 2H) ， 3. 60(m， 4H)， 2.96(s， 6H)， 1.45(t， 3H) 。 MS m/z 447. 4 (M+l)。
实施例10a
6- (4-乙氧基-3-三氟曱基-苯基)-1- (3-吗啉-4-基-丙基)-lH-咪 唑并[4， 5-c]吡咬-4-曱腈
A: l-(3-溴-丙基)-6-(4-乙氧基-3-三氟甲基-苯基)-lH-咪唑并 [4， 5-c]吡啶-4-曱腈
将6- (4-乙氧基-3-三氟曱基-苯基)-IH-咪唑并[4， 5-c]吡啶-4-曱腈(500mg, 1.51mmo1)溶解于THF (20ml)中，加入3-溴丙醇(396mg， 3. Ommol)，然后加入甜菜碱(1. 23g， 2. Ommol),将混合物在室温下 搅拌2小时。再加入0. 5当量的甜菜碱(O. 45mmo1， 162mg),将混合物 在室温下再搅拌16小时。将混合物在乙酸乙酯(100ml)和水(100ml) 之间分配。干燥有机层并蒸发，然后在二氧化硅(40g Combiflash卫 柱，曱苯到40%乙酸乙酯的甲苯溶液)上进行快速色语处理，得到 520mg的白色固体。用乙醚研磨混合物，然后用乙醚(20ml)洗涤所得 到的固体，得到呈白色固状的310mg的l-(3-溴-丙基)-6-(4-乙氧基 -3-三氟甲基-苯基)-lH-咪唑并[4，5-c]吡啶-4-甲腈。!H画R(DMSO) 5 8. 30-8. 22 (m， 2H) ， 8. 18(s， 1H)， 7.98(s， 1H)， 7. 13(d， 1H)，
4. 56(t， 2H)， 4. 23(q， 2H) ， 3. 48(t, 2H) ， 2.48(m， 2H) ， 1.50(t， 3H)。
B: 6-(4-乙氧基-3-三氟甲基-苯基)-1-(3-吗啉-4-基-丙基)-lH-咪唑并 [4， 5-c]吡啶-4-甲腈
将1- (3-溴-丙基)-6- (4-乙氧基-3-三氟曱基-苯基)-1H-咪唑并 [4，5-c]吡啶-4-甲腈溶解于DMF(0.5ml)中并加入吗啉(19mg , 0. 22mmo1)。将混合物在Smith Creator微波中，在120。C下加热。用 甲醇稀释混合物，并使其通过SCX筒，然后用2M曱醇氨溶液稀释，然 后用制备型HPLC纯化该混合物，减压除去乙腈。用碳酸氢钠碱化所得 到的水溶液，萃取到DCM(5ml)中，干燥有机层并蒸发，得到呈白色固 状的6-(4-乙氧基-3-三氟曱基-苯基)-1-(3-吗啉-4-基-丙基)-1H-咪 唑并[4， 5-c]吡啶-4-甲腈(8mg) 。 ^NMR(CDCh) 5 8.25(d， 1H)， 8. 18(s， 1H)， 8.14(s， 1H)， 7.89(s， 1H)， 7. ll(d， 1H) ， 4. 42(t， 2H)， 4. 21(q， 2H)， 3. 71(m， 4H) ， 2. 37 (m， 4H) ， 2. 26(t， 2H) ， 2. 08 (m， 2H)， 1.49(t， 3H)。 MS m/z 460. 6 (M+l)。
使用适当的胺衍生物，进一步使用实施例ii所述的方法，来制备 下列化合物
10b: 6- (4-乙氧基-3-三氟甲基-苯基)-1- (3-乙基氨基-丙基)-IH-咪唑并[4， 5-c]吡啶-4-曱腈
4丽(CDC1》5 8.27(d， 1H), 8.20(s， 1H)， 8.14(s, 1H)， 7.97(s, 1H)， 7. 12(d， 1H)， 4. 45 (t， 2H) ， 4. 21(q， 2H) ， 2. 61 (m， 4H)， 2. 06(m， 2H)， 1.50(t， 3H) ， 1.10(t， 3H) 。 MS m/z 404. 7 (M+l)。
10 c: 1 - [ 3-(环丙基曱基-氨基)-丙基]-6-(4-乙氧基-3-三氟曱基-苯基)-1H-咪唑并[4， 5-c]吡啶-4-曱腈
^ NMR(CDCh) 5 8. 27(d， 1H)， 8.20(s， 1H)， 8. 15(s， 1H)， 7.97(s， 1H)， 7. 13(d, 1H)， 4.46(t， 2H) ， 4. 21 (q， 2H) ， 2. 61 (t， 2H)， 2.42(d， 2H)， 2. 07(m， 2H) ， 1.49(t， 3H) ， 0. 91 (m， 1H) ， 0. 48 (m， 2H)， 0. 10(m， 2H)。 MS m/z 444. 8 (M+l)。10d: 6-(4-乙氧基-3-三氟甲基-苯基)-1-(3-哌啶-1-基-丙 基)-lH-咪唑并[4， 5-c]吡啶-4-曱腈
4醒(CDCh) 5 8.26(d， 1H)， 8.20(s， 1H), 8. 15(s， 1H)， 7.92(s， 1H)， 7. 12(d， 1H)， 4. 40(t， 2H) ， 4. 21 (q， 2H) ， 2. 37-2. 25 (m 4H)， 2.20(t， 2H)， 2.05(m， 2H) ， 1.67-1.40 (m， 9H) 。
MS m/z 459. 0 (M+1)。
10e: 6-(4-乙氧基-3-三氟甲基-苯基)-1-(3-吡咯烷-1-基-丙 基)-lH-咪唑并[4， 5-c]吡啶-4-曱腈
^醒(CDC1》 5 8.36 (d， 1H)， 8.20(s， 1H)， 8.13(s， 1H)， 7.97(s， 1H)， 7.12(d， 1H)， 4.43(t， 2H) ， 4. 21(q, 2H), 2. 45 (m， 4H)， 2. 38(t， 2H)， 2. 08(m， 2H) ， 1.80(m， 4H) ， 1.49(t， 3H) 。 MSm/z 444. 8 (M+l)。
10f: 1-(3-二曱基氨基-丙基)-6-(4-乙氧基-3-三氟甲基-苯 基)-lH-咪唑并[4, 5-c]吡啶-4-曱腈
^ NMR(CDC13) 5 8. 29 (d， 1H) ， 8. 21 (s， 1H)， 8.14(s， 1H)， 7. 97(s， 1H)， 7. 12(d, 1H)， 4. 41 (t， 2H) ， 4. 32 (q， 2H) ， 2. 26-2. 16 (m 8H)， 2. 05(m， 2H) ， 1.49(t， 3H) 。 MS m/z 418. 6 (M+l)。
10g: l-(3-叔丁基氨基-丙基)-6-(4-乙氧基-3-三氟曱基-苯 基)-1H-咪唑并[4， 5-c]吡啶-4-甲腈；化合物为三氟-乙酸盐
!H NMR(MeOH) 5 8. 53(s， 1H)， 8.43(s， 1H)， 8, 36 (m 2H)， 7.30(d， 1H)， 4.57(t， 2H) ， 4.26(q， 2H) ， 3. ll(m， 2H) ， 2.30(m， 2H)， 1.48(t， 3H), 1.37(s， 9H)。 MS m/z 446. 4 (M+l)。
实施例lla
6-(4-乙氣基-3-三氟甲基-苯基)-2-(4-曱基-哌嗪-l-基曱 基)-lH-咪唑并[4， 5-c]吡啶-4-曱腈
<formula>formula see original document page 38</formula>
A:2-氯曱基-6-(4-乙氧基-3-三氟曱基-苯基)-lH-咪唑并[4，5-c〗 吡啶-4-曱腈
将3， 4-二氨基-6- (4-乙氧基-3-三氟甲基-苯基)-吡啶-2-甲腈 (lg， 3. lmmol)溶解于乙腈(20ml)中，加入三氟甲磺酸镱(38mg， 0. 062 mmol)和卜氯-l， 1， l-三乙氧基乙烷(l. 83g， 9.3mmo1)。将混合物在回 流下加热过夜。减压蒸发混合物，并在乙酸乙酯(100ml)和水(100ml) 之间分配，干燥有机层，然后减压蒸发，得到暗棕色油。用DCM(50ml) 研磨，得到呈淡棕色固状的495mg的2-氯甲基-6- (4-乙氧基-3-三氟甲 基-苯基)-lH-咪唑并[4，5-c]吡啶-4-甲腈。4醒R(DMS0) 5 8.47-8. 33 (m， 3H) ， 7. 41 (d， 1H), 5.05(s， 2H) ， 4. 26(q， 2H) ， 1. 38 (t， 3H) 。 MS m/z 381. 1 (M+l)。
B: 6- (4-乙氧基-3-三氟曱基-苯基)-2- (4-曱基-哌嗪-1-基曱 基)-lH-咪唑并[4， 5-c]吡啶-4-曱腈
将2-氯甲基-6- (4-乙氧基-3-三氟甲基-苯基)-lH-咪唑并[4， 5-c] 吡咬-4-甲腈(20mg， 0.053mmo1)溶解于DMF中并加入N-甲基哌嗪 (26mg， Q.26mmo1)。将混合物在Smith Creator微波中，在120。C下加 热5分钟。用曱醇(4ml)稀释混合物，并负载到SCX筒上。用甲醇(5ml) 将筒洗涤3次，然后用2M甲醇氨溶液稀释。减压蒸发除去甲醇氨溶液， 然后用制备型HPLC纯化该混合物，得到呈白色固状的8mg的6-(4-乙氧 基-3-三氟甲基-苯基)-2-(4-甲基-哌*-1-基甲基)-1H-咪唑并[4， 5_c] 吡咬-4-甲腈。!H NMR(MeOH) 5 8.28-8.20 (m， 2H) ， 8.13(s， 1H)， 7.26(d， 1H)， 4. 22(q， 2H) ， 3. 92(s， 2H) ， 2. 67 (m， 8H) ， 2. 38(s， 3H)， 1.45(t, 3H)。 MS m/z 445. 5 (M+l)。
使用适当的胺衍生物，进一步使用实施例ll所述的方法，来制备 下列化合物
lib: 2-环己基氨基曱基-6-(4-乙氧基-3-三氟曱基-苯基)-IH-咪 唑并-[4，5-c]吡啶-4-曱腈
力NMR(MeOH) 5 8. 31—8. 26(m， 3H) ， 7.28(d， 1H) ， 4. 66(s， 2H)， 4.23(q， 2H)， 3. 35 (m， 1H)， 2. 25-2. 22 (m， 2H) ， 1.95-1. 92 (m， 2H)， 1.75(m， 1H)， 1.53-1. 26 (m， 8H) 。 MS m/z 444. 5 (M+l)。
llc: 6- (4-乙氧基-3-三氟曱基-苯基)-2- [ (2， 2， 2-三氟-乙基氨 基)-曱基]-lH-咪唑并[4， 5-c]吡啶-4-曱腈
'HNMR(MeOH) 5 8. 27-8. 22 (m， 2H) ， 8. 15(s， 1H)， 7. 26(d, 1H)， 4. 30(s， 2H)， 4. 22(q， 2H)， 3. 47(q， 2H) ， 1.45(t， 3H) 。 MS m/z 444. 4 (M+l)。
里6- (4-乙氧基-3-三氟曱基-苯基)-2- [ (3-苯基-丙基氨基)-曱基]-lH-咪唑并[4， 5-c]吡啶-4-甲腈
力NMR(MeOH) 5 8. 31-8.26(m， 3H) ， 7. 32-7.14 (m， 6H) ， 4. 64(s， 2H)， 4. 23(q， 2H) ， 3.26(m， 2H), 2. 78(t， 2H) ， 2. 14(m， 2H) ， 1.45(t， 3H)。 MS m/z 480. 3 (M+l)。
lie: 6-(4-乙氧基-3-三氟曱基-苯基)-2-[1，4]氧氮杂环戊烷-4-基甲基-1H-咪唑并[4， 5-c]吡啶-4-曱腈
力靈(MeOH) 5 8. 31-8. 24(m， 3H) ， 7. 27(d， 1H)， 4. 88(s， 2H), 4.23(q， 2H)， 3. 99 (m， 2H) ， 3. 87 (m, 2H) ， 3. 77-3.69 (m， 4H) ， 2. 26(m， 2H)， 1.45(t， 3H)。 MS m/z 446. 4 (M+l)。
里2- (苄基氨基-甲基)-6- (4-乙氧基-3-三氟曱基-苯基)-1H-咪唑并[4， 5-c]吡咬-4-甲腈
力讓(MeOH) 5 8.31-8.25(m， 3H) ， 7. 59-7. 49(m， 5H)， 7. 28(d, 1H)， 4. 64(s， 2H)， 4.49(s, 2H) ， 4.23(q， 2H) ， 1.45(t， 3H) 。 MS m/z 452.1 (M+l)。
11 g: 6- (4-乙氧基-3-三氟甲基-苯基)-2-(苯乙基氨基-曱基)-1H-咪唑并[4， 5-c]吡啶-4-曱腈
力醒(MeOH) 5 8. 33-8. 25 (m， 3H) ， 7. 40-7. 26 (m， 6H) ， 4. 69(s， 2H)， 4. 23(q， 2H)， 3. 54(t， 2H)， 3.14(t， 2H) ， 1.45(t， 3H) 。 MS m/z 466. 3 (M+l)。
llh: 6- (4-乙氧基-3-三氟曱基-苯基)-2- [ (2-羟基-乙基氨基)-
甲基]-lH-咪唑并[4， 5-c]吡啶-4-甲腈
^NMR(MeOH) 5 8. 32-8. 27 (m， 3H) ， 7.29(d, 1H)， 4. 70(s， 2H)， 4. 23(q， 2H)， 3. 92 (m， 2H) ， 3. 41 (m， 2H)， 1.45(t， 3H) 。 MSm/z 406. 5 (M+l)。
11 i: 6- (4-乙氧基-3-三氟曱基-苯基)-2- (2-氨基-1 ， 1 -二曱基-2-氧代-乙基氨基-曱基)-lH-咪唑并[4， 5-c]吡啶-4-曱腈
^NMR(MeOH) 5 8. 32—8. 28 (m， 3H) ， 7.29(d， 1H)， 4.63(s， 2H)， 4.23(q， 2H)， 1.75(s， 6H), 1.45(t， 3H) 。 MS m/z 447. 3 (M+l)。
10j: 2-环丙基氨基曱基-6- (4-乙氧基-3-三氟曱基-苯基)-1 H-咪 哇并-[4， 5-c]p比咬-4-曱腈
'H讓(MeOH) 5 8. 30-8. 25 (m， 3H) ， 7. 27(d， 1H)， 4. 73(s， 2H)， 4.23(q， 2H), 3.00(m， 1H) ， 1.45(t， 3H) ， 0. 98 (m， 4H) 。 MSm/z 術.4(M+1)。
11k:2-(叔丁基氨基-曱基)-6-(4-乙氧基-3-三氟曱基-苯基)-lH-咪唑并-[4， 5-c]吡^-4-曱腈
^NMR(MeOH) 5 8.28-8.20 (m， 2H) ， 8. 13(s， 1H)， 7. 27(d， 1H)， 4.22(m， 4H)， 1.45(t， 3H) ， 1.30(s， 9H) 。 MS m/z 418. 4 (M+l)。
111:6- (4-乙氧基-3-三氟甲基-苯基)-2-吗啉-4-基甲基-1H-咪唑 并[4， 5-c]吡咬-4-甲腈
建(CDCU 5 8.20(m, 2H) ， 8.00(bs， 1H), 7.10(d， 1H)， 4. 21(q， 2H)， 3. 99(s， 2H) ， 3. 81(m， 4H) ， 2. 68 (m， 4H) ， 1.48(t， 3H)。 MS m/z 432.4 (M+l)。
Hi: 6- (4-乙氧基-3-三氟甲基-苯基)-2- (4-苯基-哌嗪-l-基甲 基)-1H-咪唑并[4， 5-c]吡啶-4-甲腈
力NMR(MeOH) 5 8. 31-8. 24 (m， 3H) ， 7. 33-7.26 (m， 3H) ， 7. 08 (d， 2H)， 6. 97(m， 1H)， 4.80(s， 2H) ， 4. 23(q, 2H) ， 3. 67 (m， 4H) ， 3. 55(m， 4H)， 1.45(t， 3H)。 MS m/z 507. 3 (M+l)。
，6- (4-乙氧基-3-三氟甲基-苯基)-2- {[(吡啶-2-基曱基)-氨 基]-曱基} -lH-咪唑并[4， 5-c]吡啶-4-甲腈
!H腿(MeOH) 5 8.68(d, 1H)， 8.31-8. 24 (m， 3H) ， 7. 92(t， 1H)， 7. 53(dd， 1H)， 7. 46(m， 1H)， 7. 28(d， 1H)， 4. 76(s， 2H)， 4. 65 (s， 2H)， 4. 23(m, 2H)， 1.45(t, 3H) 。 MS m/z 453. 3 (M+l)。
，2- [ (2-二曱基氨基-乙基氨基)-曱基]-6- (4-乙氧基-3-三氟 甲基-苯基)-lH-咪唑并[4，5-c]吡啶-4-曱腈
iH腿(MeOH) 5 8.33-8.25 (m， 2H) ， 8.22(s， 1H)， 7.28(d， 1H)， 4. 38(s， 2H)， 4. 23(q， 2H) ， 3. 37 (m， 2H) ， 3. 31 (m， 2H) ， 3. 02(s， 6H)， 1.45(t， 3H)。 MS m/z 433. 5 (M+l)。
llp: 6-(4-乙氧基-3-三氟甲基-苯基)-2-(4-吡啶-4-基-哌嗪-l-基甲基)-lH-咪唑并[4， 5-c]吡啶-4-曱腈
^靈(MeOH) 5 8. 32-8. 24 (m， 2H)， 8.20(s. 1H)， 8. 16(d， 2H)， 7. 28(d， 1H)， 7.20(d， 2H)， 4. 27-4.20 (m， 4H) ， 3. 92-3. 86 (m， 4H)， 3.02(m， 4H), 1.45(t， 3H) 。 MS ra/z 508. 4 (M+l)。
llq: 6-(4-乙氧基-3-三氟曱基-苯基)-2-[ (2-吡啶-2-基-乙基氨 基) -甲基]-lH-咪唑并[4， 5-c]吡啶-4-曱腈
^NMR(Me0H) 5 8.84(m, 2H) ， 8. 31-8.25(m， 3H) ， 8.12(m， 2H)， 7.28(d， 1H)， 4. 77(s， 2H) ， 4. 24 (q， 2H)， 3.80(t， 2H) ， 3. 50(t， 2H)， 1.45(t， 3H)。 MS m/z 467. 4 (M+l)。
实施例12<formula>formula see original document page 42</formula>A: 4-氨基-3-硝基-6- (3-(三氟甲基)苯基)-吡啶-2-曱腈 用氮气将4-氨基-6-氯-3-硝基-吡啶-2-甲腈(1. 0g， 5. 04mmo1)， 3-(三氟甲基)苯基硼酸(lining ， 6. (Mmmo1)和碳酸钾(2. 08g:
15.1mmol)的THF(16ml)搅拌混悬液脱气，然后加入四(三苯基膦) 钯(582mg， 0. 50mmo1)。使用'Creator'微波将所得到的混悬液加热 至1S0'C 5分钟。将反应混合物过滤通过硅藻土，真空浓缩。在硅胶 上将残留的棕色油过柱，使用二氯甲烷作为洗脱液，得到黄色固状的 标题化合物(300mg)。
1H腿(MeOD): 5 8.32(s， 1H)， 8. 27 (d， 1H) ， 7. 81 (d， 1H)， 7.72(t， 1H)， 7.63(s， 1H)。
B: 3， 4-二氨基-6- (3-(三氟曱基)苯基)-吡啶-2-曱腈 向4-氨基-3-硝基-6- (3-三氟甲基-苯基) -吡啶-2-曱腈(300mg， 0. 97mmo1)的乙酸乙酯(80ml)的搅拌混悬液中加入在碳(湿)的10% 钯(300mg， 2.82mmo1)。用氢气(气球)吹扫试管，并在室温下搅拌l. 5 小时。将反应混合物过滤通过硅藻土，真空蒸发，得到暗橙色固状的 标题化合物(240fflg， 89%)。力腿(Me0D): 5 8.15(s， 1H)， 8. 04 (d， 1H)， 7. 58-7. 65 (m， 2H) ， 7.18(s， 1H) 。 MS m/z 279.3 (M+l)。
C: 6-(3-三氟甲基-苯基)-lH-咪唑并[4， 5-c]吡啶-4-甲腈 将3，4-二氨基-6-(3-三氟曱基-苯基)-吡啶-2-曱腈(UOmg, 0. 43mmmol)悬浮于乙腈(5ml)中，用氮气吹扫试管。加入三氟曱磺酸镱 (5mg, 0. 009mmol)和原曱酸三乙酯(214ia 1， 1. 29 mmol)，将所得到 的橙色混悬液在回流下加热l小时。真空蒸发反应混合物，得到黄色固 状的标题化合物(116mg)。卞NMR(Me0D) : 5 8.55(s， 1H)， 8.35-8.41(m， 3H) ， 7.71—7. 76 (m， 2H) 。 MS m/z 288. 9 (M+l)。
D: 1-乙基-6- (3-三氟曱基-苯基)-lH-咪唑并[4， 5-c]吡啶-4-曱
腈
向6-(3-三氟甲基-苯基)-lH-咪唑并[4，S-c]吡啶-4-甲腈(S0mg， 0. 17mmo1)的乙腈(lml)的搅拌溶液中加入碳酸铯(62mg， 0. 19mmo1)和 碘乙烷(15jjl， 0. 19mmo1)。向所得到的混悬液在室温下搅拌过夜。用 二氯曱烷(5ml)和水(5ml)稀释反应混合物并过滤通过疏水性釉料，真 空浓缩。用醚(5ml)研磨残留的橙色油，过滤所得到的沉淀，千燥，得
到淡黄色固状的标题化合物(4mg)。 1HNMR(Me0D): 5 8.56(s， 1H)， 8. 52(s， 1H), 8. 46(s， 1H)， 8.41 (d， 1H)， 7. 71-7. 74 (m， 2H)， 4.46-4. 51(q， 2H) ， 1.57-1.61(t， 3H) 。 MS m/z 317.0(M+l)。
实施例13a
6- (4-乙氧基-3-三氟甲基-苯基)-2-(吡啶-3-基氨基甲基)-lH-咪 唑并[4, 5-c]吡啶-4-曱腈
在Creator微波中将2-氯甲基-6-(4-乙氧基-3-三氟甲基-苯 基)-lH-咪唑并[4，5，c]吡啶-4-甲腈(20mg， 0.052mmo1)， 二异丙基乙 胺(28.4 jLiL， 0. 16mmol)和3-氨基吡咬(9. 8mg, 0. lmmol)的二甲亚砜 (500 yL)溶液在120X:下加热5分钟。过滤混合物，并通过制备型HPLC 纯化，得到标题化合物。NMR(MeOH) 5 8. 3-8.2(m， 5H)， 7. 76-7. 74 (m， 2H) ， 7. 27(d， 1H)， 6. 07(s， 2H) 4. 23(q, 2H) 1.45(t， 3H) MS m/z 439. 1 (m+l)。
使用适当的胺衍生物，进一步使用上述的方法，来制备下列化合
物
13b: 6-(4-乙氧基-3-三氟曱基-苯基)-2-(吡啶-2-基氨基曱 基)-lH-咪唑并[4， 5-c]吡啶-4-曱腈
^ NMR(MeOH) 5 8. 33-8.23 (m， 3H) 8. 08 (d， 1H)， 8. OO(t， 1H) 7.30(d, 1H), 7.22(d， 1H) 7. 01 (t， 1H) 5.83(s， 2H) ， 4.24(q， 2H) 1. 46(t， 3H) MS m/z 439. 1 (m+l)
13c: N- (2- {[4-氰基-6- (4-乙氧基-3-三氟甲基-苯基)-1 H-咪唑并 [4, 5-c]吡啶-2-基甲基]-氨基}-乙基)-曱磺酰胺
^ NMR(MeOH) 5 8.32-8. 28 (m, 3H) 7.30(d， 2H) 4.72(s， 2H) 4. 25(q， 2H) 3. 56-2. 96 (m， 4H) 3. 04(s， 3H) 1.46(q， 3H) MS m/z
483. 5 (m+l)
13d: 6- (4-乙氧基-3-三氟甲基-苯基)-2- (4-氧代-咪唑烷-l-基曱 基)-lH-咪唑并[4, 5-c]吡啶-4-甲腈
NMR(DMS0) 5 8.37-8.26 (m， 3H) 8.21(s， 1H) 7.40(d, 1H) 4. 27(q, 2H)， 4. 20(s， 2H) ， 4. 15(s, 2H) 1. 38(t， 3H) MS m/z 431. 9(m+l)
13e: 2- [4- (2-二甲基氨基-乙基)-3-氧代-哌嗪-1-基曱基]-6- (4-乙氧基-3-三氟曱基-苯基)-1 H-咪唑并[4， 5-c]吡啶-4-曱腈
腿(MeOH) 5 8.31-8.25(m， 2H) 8.20(s， 1H) 7.28 (d， 1H) 4. 23(q， 2H)， 4. 07(s， 2H) 3. 78 (t， 2H) 3. 52 (t， 2H) 3. 42-3. 35 (m， 4H) 2, 98(m， 8H) 1.46(t， 3H) MS m/z 516. 3 (m+l)
13f: 6- (4-乙氧基-3-三氟甲基-苯基)-2- [4- (2-羟基-乙基)-3-氧代-哌嗪-l-基甲基]-lH-咪唑并[4, 5-c]吡啶-4-曱腈
^ NMR(MeOH) 5 8. 31-8. 24 (m， 2H) 8.18(s， 1H) 7.28(d， 1H) 4. 23(q， 2H) 4. 16(s， 2H) 3. 74(t， 2H)3. 61(t， 2H) 3.54(t， 2H) 3.47(s， 2H) 3. 06(t， 2H) 1.46(tm 3H) MS m/z 489.4 (m+l)
13g: 6- (4-乙氧基-3-三氟曱基-笨基)-2- (3, 3， 4-三曱基-哌"秦-l-基甲基)-lH -咪唑并[4，5-c]吡啶-4-曱腈
力醒歸H) 5 8.27(s， 1H)， 8.25(d， lh) 8.16(s， 1H) 7. 24 (d lh) 4. 23(q， 2H) 3.99(s， 2H) 3. 41-3. 35 (bm， 2H) 3. 19-3. 10 (bm， 1H)
2. 98-2. O(bm， 1H) 2. 82(s， 3H) 2. 69-2. 59 (bm, 1H) 2. 57-2. 48 (bm， lh) 1. 50-1. 40 (m， 9H) MS m/z 473. 5 (m+l)
13h: 2-{[(5-二曱基氨基曱基-呋喃-2-基曱基)-氨基]-曱 基}-6-(4-乙氧基-3-三氟曱基-苯基)-lH-咪唑并[4,5-c]吡啶-4-曱腈
^ NMR(MeOH) 5 8. 36-8.28 (m， 3H) 7. 29 (d， 2H) ， 7. 05 (d， 1H) 6. 73(d，1H)5. OO(s，2H)4.98(s，2H)4. 27-4.22 (m， 4H)
3. 34-3. 30 (m， 6H) 1.46(t， 3H) MS m/z 499. 6 (m+l)。
13 i: 6- (4-乙氧基-3-三氟曱基-苯基)-2- [4- (2-曱氧基-乙基)-哌溱-l-基-曱基]-lH-咪唑并[4， 5-c]吡啶-4-曱腈
力腿(MeOH) 5 8.28(s， 1H) 8.25(d， 1H) 8. 16(s， 1H) 7，27(d， 1H) 4.24(q， 2H) 4. 04(s， 2H) 3. 74(t， 2H) 3. 65-3.2(bm， 8H) 3. 15-2. 6(bm， 4H) 1.46(t， 3H) MS m/z 489. 5 (m+l)
13 j: 6- (4-乙氧基-3-三氟曱基-苯基)-2- [4- (3-羟基-丙基)-哌唤 -l-基甲基]-lH-咪唑并[4， 5-c]吡啶-4-曱腈
'H舰(MeOH) 5 8.28(s， 1H) 8. 25(d， 1H) 8.16(s， 1H) 7，27(d， 1H) 4. 24(q， 2H) 4. 05 (s， 2H) 3. 7(t， 2H) 3. 7-3.4(bm， 2H) 3. 4-2. 55(bm， 6H) 1.96(m， 2H) 1.46(t， 3H) MS m/z 489. 5 (m+l)
13k: 2- {4- [4-氰基-6- (4-乙氧基-3-三氟曱基-苯基)-lH-咪唑并 [4, 5-c]吡啶-2-基曱基]-哌。秦-1-基} -N-异丙基-乙酰胺
^固R(MeOH) 5 8.28(s， 1H) 8.27(d， 1H)， 8. 17(s， 1H)， 7.27(d， 1H) 4.23(q， 2H) 4. 08 (s， 2H) 4. 02 (m， 1H) 3.89(s， 2H) 3.44(bs， 4H) 3. 29(bs， 4H) 1.46(t, 3H) 1，18(d， 6H) MS m/z 530. 3 (m+l)
131:6- (4-乙氧基-3-三氟曱基-苯基)-2- [4- (2-羟基-乙基)-哌嗪 -l-基-曱基]-lH-咪唑并[4, 5-c]吡啶-4-甲腈
^ NMR(MeOH) 5 8. 28 (s， 1H) 8.26(d， 1H)， 8. 16(s， 1H)， 7. 24(d， 1H) 4.23(q， 2H) 4. 05(s， 2H) 3. 90(t， 2H) 3. 65-2. 65 (bm， 10H) 1.46(t， 3H) MS m/z 475. 5 (m+l)
13m: 2- U (2-二曱基氨基-乙基)-曱基-氨基]-曱基} -6- (4-乙氧基 -3-三氟甲基-苯基)-lH-咪唑并[4, 5-c]吡啶-4-曱腈
^NMR(MeOH) 5 8. 30(s， 1H) 8.25(d， 1H) 8.22(1， 1H) 7. 29(d， 1H) 4.24(q， 2H) 4. ll(s， 2H) 3. 38(t， 2H) 3. 03(m， 8H) 2. 50(s， 3H) 1.46(t， 3H) MS m/z 447. 5 (m+l)
13n: 6- (4-乙氧基-3-三氟甲基-苯基)-2- (4-异丙基-哌嗪-l-基曱 基)-1H-咪唑并[4， 5-c]吡啶-4-甲腈
'HNMR(MeOH) 5 8. 26(s， 1H) 8.21(d， 1H) 8. 14(s， 1H) 7. 25(d， 1H) 4. 22(q， 2H) 4. 04(s， 3H) 3.59-3. 39 (m， 3H) 3. 31-3. 12 (bm， 4H) 2. 81-2. 64(bm， 2H) 1.46(t， 3H) 1.39(d， 6H) MS m/z 473. 5 (m+l)
13o:6-(4-乙氧基-3-三氟曱基-苯基)-2-(4-曱基-[l,4]二氮杂环 庚烷-l-基曱基)-lH-咪唑并[4， 5-c]吡啶-4-甲腈
^NMR(MeOH) 5 8.29(s， 1H) 8.25(d， 1H) 8.19(s， 1H) 7. 28 (d， 1H) 4. 26-4. 21(m， 4H) 3. 5 3—3. 46 (bm， 4H) 3. 19(t， 2H) 3.00(t， 2H) 2. 97(s， 3H) 2. 13(m， 2H) 1.46(t， 3H) MS m/z 459.6 (m+l)
13p: 6-(4-乙氧基-3-三氟甲基-苯基)-2-(1-氧代-1入4-硫代吗啉 -4-基甲基)-lH-咪唑并[4， 5-c]吡啶-4-曱腈
'H NMR(MeOH) 5 8.28-8.24 (m， 2H)， 8.17(s， 1H) 7.28(d， 2H) 4.23(q， 3H) 3.48-3. 36 (m， 2H) 3. 20-3. OO(m， 6H) 1.46(t， 3H) MS m/z 464. 3 (m+l)
13q: 2-(1，1-二氧代-1入6-硫代吗啉-4-基曱基)-6-(4-乙氧基-3-三氟曱基-苯基)-lH-咪唑并[4， 5-c]吡啶-4-曱腈
^ NMR(DMSO) 5 8.39-8.25 (m， 3H) 7.40(d， 1H) 4.26(q， 2H) 4. ll(s， 2H) 3. 18(m， 4H) 3. 08 (m， 4H) 1.36(q， 3H) MS m/z 480. 3 (m+l)
实施例ii
6- (4-乙氣基-3-三氟甲基-苯基)-2- (3-吗啉-4-基-丙基)-IH-咪 唑并[4， 5-c]吡咬-4-曱腈<formula>formula see original document page 48</formula>
吡咬-2-基曱基]-三苯基-磷错的氯化物
将2-氯曱基-6-(4-乙氧基-3-三氟甲基-苯基)-lH-咪唑并 [4， 5， c]吡啶-4-甲腈(100mg, 0. 26mmo1)和三苯基膦在乙腈中加热至 60 。C，搅拌过夜。浓缩反应混合物，并用乙醚研磨，得到淡黄色的 固体。MS m/z 607.5 (m)。
B:2-(3-氯-丙烯基)-6-(4-乙氧基-3-三氟甲基-苯基)-1H-咪唑并吡啶-4-曱腈
将[4-氰基-6- (4-乙氧基-3-三氟曱基-苯基)-1H-咪唑并[4， 5-c] 吡啶-2-基甲基]-三苯基-磷银的氯化物(167.2mg， 0.26鹏o1)，乙醛氯 (50%的水溶液)(32. 6mg， 0.41mmol)和1， 8-二氮杂二环[5. 4. 0]十一 -7-烯(62.4mg， 0.41mmol)的溶液在室温下溶解于THF:乙醇Gml)的 1: 1混合物过夜。浓缩混合物，并在制备型HPLC上纯化，得到标题 化合物。MS m/z 407. 5 (m+l)。
C: 6-(4-乙氧基-3-三氟曱基-苯基)-2-(3-吗啉-4-基-丙烯
基)-lH-咪唑并[4， 5-c]吡啶-4-曱腈
将2- (3-氯-丙烯基)-6- (4-乙氧基-3-三氟甲基-苯基)-lH-咪唑
并[4， 5-c]吡啶-4-甲腈(23mg， 0. 05mmo1)，吗啉(16. lmg， 0. 15 mmol) 的DMSO(500iuL)溶液在120°C下加热5分钟。用离子交换色傳纯化混 合物，得到标题化合物。 MS m/z 458. 9 (m+l)
D: 6- (4-乙氧基-3-三氟曱基-苯基)-2- (3-吗啉-4-基-丙基)-1H-咪唑并[4， 5-c]吡啶-4-曱腈
向包含6- (4-乙氧基-3-三氟曱基-苯基)-2- (3-吗啉-4-基-丙烯 基)-IH-咪唑并[4， 5-c]吡啶-4-甲腈(16mg)的乙醇溶液的烧瓶中加入 5% Pd/C(5mg)，用氢气吹扫试管。搅拌混合物l小时，然后过滤并通 过制备型HPLC纯化，得到标题化合物？HNMR(MeOH) 5 8. 32-8. 25 (m， 2H) 8.17(s， 1H) 7. 30(d， 1H) 4.24(q， 2H) 4.20-3.84 (bm， 4H) 3. 65-3. 60 (bm， 2H) 3. 40(t， 2H) 3. 22 (m， 4H) 2. 40(m， 2H) 1.45(t， 3H) MS m/z 460.7 (m+l)
实施例15a
2-((4-(吡啶-4-基)哌嗪-l-基)曱基)-6-(3-(三氟曱基)苯 基)-lH-咪唑并[4， 5-c]吡啶-4-甲腈2， 2， 2-三氟乙酸
A: 2-(氯甲基)-6- (3-(三氟甲基)苯基)-lH-咪唑并[4， 5-c]吡啶 -4-甲腈
向3，4-二氨基-6-(3-三氟甲基-苯基)-吡啶-2-甲腈(1.6g)和2-氯-1， 1， l-三乙氧基乙烷(3. 41g)的乙腈(40ml)溶液中加入三氟甲磺酸 镱(180mg， 5molW，将混合物在回流下加热过夜。减压浓缩混合物， 然后在乙酸乙酯(100ffll)和水a00ml)之间分配。在硫酸钠上干燥有机 层，浓缩，然后加入二乙醚(20ml)。过滤沉淀，在空气流下干燥，得 到标题化合物。NMR(MeOD) 5 8.40(s， 1H) 8. 32-8. 38 (m， 2H) 8.13-8.15(d， 2H) 7.68-7.78 (m， 2H) 4.96(s， 2H) 。 MS m/z 337.5， 339. 1 (M+l)。
B: 2-((4-(吡啶-4-基)哌嗪-l-基)曱基)-6-(3-(三氟曱基)苯
基)-lH-咪唑并[4, 5-c]吡啶-4-甲腈2， 2， 2-三氟乙酸
在Creator微波中将2-(氯甲基)-6-(3-(三氟甲基)苯基)-IH-咪 唑并[4，5-c]吡啶-4-甲腈(15mg, 0. 045mmol)和1-(4-吡咬基) (36mg, 0. 223mmol)的二甲亚砜(500 ML)溶液在120'C下加热5分钟。 过滤混合物，并通过制备型HPLC纯化，得到标题化合物。^ NMR(MeOD) 5 8. 40(s， 1H) 8.32-8. 34 (m， 2H) 8. 13-8.15(d， 2H) 7. 68-7. 78 (m， 2H) 7.18-7. 2 (d， 2H) 4. ll(s， 2H) 3. 82-3.88 (m， 4H) 2. 85-2. 91 (m， 4H)。 MS m/z 464. 1 (M+l)
使用适当的胺衍生物，进一步使用上述的方法，来制备下列化合
物
15b: 2- ((2-羟基乙基氨基)曱基)-6- (3-(三氟曱基)苯基)-1H-咪 唑并[4， 5-c]吡啶-4-甲腈2,2，2-三氟乙酸
'H建(Me0D) 5 8.41(s， 2H) 8.35-8.37 (d， 1H) 7. 70-7.77 (m， 2H) 4. 73(s， 2H) 3. 92-3. 94 (t， 2H) 3. 42-3. 45 (t， 2H) 。 MS m/s 362. 8 (M+l)
15c: 2-((吡啶-4-基氨基)甲基)-6-(3-(三氟甲基)苯基)-lH-咪唑 并[4，5-c]吡啶-4-甲腈2，2，2-三氟乙酸
腿歸D) 5 8.40(s， 1H) 8.37(s， 1H) 8. 34-8. 36 (d， 1H) 8.22-8.24 (m， 2H) 7.71-7.76(m， 2H) 6.92-6.94 (m， 2H) 5.77(s， 2H)。 MS m/z 395.1 (M+l)
实施例16a
1-乙基-2- (4-甲基-哌嗪-l-基甲基)-6- (3-三氟甲基-苯基)-1H-咪唑并[4， 5-c]吡啶-4-曱腈二-三氟乙酸
<formula>formula see original document page 50</formula>A: 6-氯-4-乙基氨基-3-硝基-吡啶-2-甲腈
在室温下，将碳酸钾(3. 06g)分份加入到4-氨基-6-氯-3-硝基-吡 啶-2-甲腈(4. 0 g)的DMF(60 mL)溶液中。向该混合物中滴加乙基碘 (3. 46g)的DMF(20mL)溶液，然后在室温下搅拌24小时，并减压浓缩。 将残留物在水(50ml)和乙酸乙酯(100ml)之间分配。用乙酸乙酯 (2x50ml)萃取水层，用盐水(3x50ml)洗涤合并的有机层，然后减压浓 缩。在硅胶(洗脱液二氯甲烷)上将残留物进行色谱处理，得到呈黄 色晶体的标题化合物(2. 94 g) (mp = 120° C)。力NMR(DMSO-cU S : 8. 67(br. s， 1H); 7. 46(s， 1H); 3. 51 (q， J-8 Hz， 2H); 1.21(t， J=8 Hz， 3H)。 MS m/z : 227/229 (M+l)。
B: 4-乙基氨基-3-硝基-6-(3-三氟甲基-苯基)-吡啶-2-甲腈 在氮气大气下将四(三苯基膦)把(2. 78 g)加入到在脱气二喁烷 (500ml)中的6-氯-4-乙基氨基-3-硝基-吡啶-2-甲腈(10. 9 g) 、 4-三氟曱基-苯基硼酸(IO. 0 g)和碳酸钾(60mL)的2M水溶液中。将混合 物回流4小时，然后减压浓缩。将残留物在乙酸乙酯(300 mL)和水(300 mL)之间分配。用乙酸乙酯(2x300 mL)萃取水层。用盐水洗涤合并的有 机层，在硫酸钠上干燥，过滤并减压浓缩。将残留物在硅胶(洗脱液 DCM，然后DCM /丙酮95/5)上进行色谱处理，得到标题化合物(10. 4 g， 64%)。 ^腿(DMSO-(U S : 8. 59 (br. s， 1H); 8.50-8. 40 (m， 2H); 7.91(d， J=8 Hz， 1H); 7. 79(t， J-7 Hz， 1H); 7.74(s， 1H); 3.65(q， J= 7 Hz， 2H); 1.24(t, J=7 Hz， 3H) 。 MS m/z : 337 (M+l)。 C: 3-氨基-4-乙基氨基-6- (3-三氟曱基-苯基)-吡啶-2-曱腈 在OX:下，向4-乙基氨基-3-硝基-6-(3-三氟甲基-苯基)-吡啶-2-曱腈(5. 0 g)的DMF(IOO mL)溶液中2小时用滴加氯化锡二水合物 (30. 2g)的浓盐酸(150mL)水溶液。将混合物在5° C下再搅拌1小时， 然后倾倒到水(900g)和氢氧化钾(440 g)的混合物中，用乙酸乙酯(h 1.4L)萃取。用盐水(700 mL)洗涤合并的有机层，在硫酸钠上干燥，过 滤并减压浓缩，得到固状的标题化合物(4. 56g)。 'H醒R(DMS0-d6) S : 8. 30-8. 20 (m， 2H); 7.75-7. 60 (m， 2H); 7.08(s， 1H); 6. ll(t， J-6 Hz， 1H); 5. 95(br. s， 2H); 3. 4-3. 3 (m， 2H); 1.27(t， J=7 Hz， 3H)。
D: 2-氯甲基-l-乙基-6-(3-三氟曱基-苯基)-lH-咪唑并[4，5-c〗 吡啶-4-曱腈
将三氟曱磺酸镱(1.16 g， 1.8 mmol)和2-氯-l， 1， 1-三曱氧基乙 烷(7. 56mL， 56.0mmol)加入到3-氨基-4-乙基氨基-6-(3-三氟曱基苯 基)-吡啶-2-甲腈(5. 73 g， 18.7 mmol)的乙腈(150 mL)溶液中。将混 合物回流48小时，然后减压浓缩。将残留物在乙酸乙酯和水之间分配。 在硫酸钠上干燥有机层，过滤并减压浓缩。用二乙醚研磨残留物，滤 除，得到固状的标题化合物(5. 92 g， 87%) 。 ^ NMR(DMSO-d6) S : 8. 85 (s 1H); 8， 50-8. OO(m， 2H); 7. 90-7. 70 (m， 2H);5.26(s， 2H); 4. 55-4. 45 (m 2H); 1.48(t， J=7 Hz, 3H) 。 MS m/z : 365 (M+l)。
E: 1 -乙基-2- (4-甲基-哌嗪-1 -基甲基)-6- (3-三氟曱基-苯 基)-1H-咪唑并[4， 5-c]吡啶-4-甲腈二-三氟乙酸
将1-甲基哌溱(30 rag)加入到三乙胺(76 pL)和2-氯甲基-l-乙基 -6-(3-三氟甲基-苯基)-1H-咪唑并[4， 5-c]，，比啶-4-甲腈(0. 100g)的 乙腈(4 mL)溶液中。将混合物在室温下搅拌16小时，然后减压浓缩。 残留物通过制备型HPLC(洗脱液:H20 + 0. 05% TFA / CH3CN + 0. 05% TFA) 进行色语处理，得到标题化合物(156mg)。 ^NMR(MeODj S : 8.53(s, 1H); 8.48(s， 1H); 8.42(d， J-8 Hz， 1H); 7. 80-7. 70 (m， 2H); 4. 58(q， J= 7 Hz， 2H); 4.10(s， 2H); 3. 6-3. 4 (m， 2H) ; 3. 3-3. 1 (m， 4H); 2.94(s， 3H); 2. 8-2. 6 (m， 2H); 1.57(t， J=7 Hz， 3H) 。 MS m/z : 429 (M+l)。
使用相同的试验方法，制备下列化合物
渔l-乙基-2- (4-吡啶-4-基-哌嗪-l-基曱基)-6- (3-三氟曱基-苯基)-lH-咪唑并[4，5-c]吡啶-4-甲腈二-三氟乙酸
卞NMR(MeOD4) S : 8. 58(s， 1H); 8.52(s， 1H); 8.45(d， J=8 Hz， 1H); 8.19(d， J=8Hz， 2H); 7. 80-7. 65 (m， 2H); 7. 23(d， J=8 Hz, 2H); 4. 64 (q， J= 7 Hz， 2H); 4. 17 (s， 2H); 3. 75-3. 65 (m， 4H); 2. 80-2. 65 (m， 4H); 1.61(t， J=7 Hz， 3H)。
16c: 2-[(环丙基曱基-氨基)-曱基]-1-乙基-6- (3-三氟曱基-苯 基)-lH-咪唑并[4， 5-c]吡啶-4-曱腈三氟乙酸
力NMR(Me0D4) 5 : 8. 63(s， 1H); 8. 53(s， 1H); 8. 48 (d， J=8 Hz， 1H); 7.70—7. 60 (m， 2H); 4.84(s， 2H); 4. 52(q， J= 7 Hz， 2H); 3. 24 (d， J=8 Hz， 2H); 1.55(t， J=7 Hz， 3H); 1.35-1. 20 (m， 1H); 0. 85-0. 75 (m， 2H); 0.55-0. 50 (m， 2H) 。 MS m/z : 400 (M+l)。
16d: 1-乙基-2-(吡啶-4-基氨基甲基)-6- (3-三氟曱基-苯基)-1H-咪峻并[4， 5-c]吡啶-4-曱腈
将4-氨基吡啶(26 mg， 0. 27 mmol)加入到二异丙基乙胺(0. 24 mL， 1.37 mmol)和2-氯曱基-l-乙基-6-(3-三氟曱基-苯基)-1H-咪唑并 [4， 5-c]吡咬-4-甲腈(0. 100g， 0. 27 mmol)的DMF(3 mL)溶液中。将混 合物在80° C下加热2小时，然后过滤。用水洗涤沉淀物，然后用异 丙基醚洗涤，干燥，得到呈固状的标题化合物(55 mg， 47%)(mp=340 ° C)。 ^ NMR (DMSO-d6) 5 : 8.84(s， 1H); 8. 6-8.5(m， 2H); 8. 31 (d， J=8 Hz， 2H); 7. 9-7. 7 (m， 2H); 6. 97 (d， J=8 Hz， 2H); 5.98(s， 2H); 4. 51(q， J= 7 Hz， 2H); 1. 45 (t， J-7 Hz， 3H) 。 MS m/z : 423 (M+l)。
16e: 2- (2 (R， S)-环己基-吡咯烷-l-基曱基)-1-乙基-6- (3-三氟甲 基-苯基)-lH-咪唑并[4， 5-c]吡啶-4-曱腈
^NMR(CDCU 5 : 8. 3-8. 2 (m， 2H); 7. 88(s， 1H); 7. 69 (d， J=8 Hz， 1H); 7. 64(t, J=8 Hz， 1H); 4. 7-4. 4 (m， 2H); 4.22(d， J=14 Hz， 1H); 3. 82(d， J=14 Hz， 1H); 2. 7-2. 6 (m， 1H); 2. 5-2. 3(m， 2H); 1.9-1.4(m， 13H); L2-0，9(m， 5H) 。 MS m/z : 482 (M+l)。
16f: 2-(4-环丙羰基-[l，4]二氮杂环庚烷-l-基甲基)-l-乙基 -6-(3-三氟曱基-苯基)-lH-咪唑并[4，5-c]吡啶-4-曱腈
'H腿(CDCh) 5 : 8. 3-8. 2(m， 2H); 7.89(s， 1H); 7. 69 (d， J=8 Hz， 1H); 7. 63(t， J-8 Hz， 1H); 4.55-4.45 (m， 2H); 4.1-4.0(m， 2H); 3, 8-3. 6 (m， 4H); 2. 95-2. 75 (m， 4H); 1. 95-1. 85 (m， 2H); 1. 75-1. 65 (m， 1H); 1.54(t， J=7Hz， 3H); 1.05-0. 95 (m， 2H); 0. 8-0. 7 (m， 2H)。 MS m/z : 497 (M+l)。
l-乙基-6-(3，4-二氯苯基)-lH-咪唑并[4， 5-c]吡啶-4-甲腈 4: 3-氨基-6-氯-4-乙基氨基-吡啶-2-曱腈
在0° C下，在40分钟里将氯化锡二水合物(25. 9g)的浓HC1 (76 mL) 水溶液滴加到6-氯-4-乙基氨基-3-硝基-吡啶-2-曱腈(2. 9 g)的 DMF(70 mL)溶液中。将混合物搅拌2.5小时，然后倾倒到冰(400g)和 50。/。氢氧化钾(400 mL)的混合物中，用乙酸乙酯(3xl00ml)萃取。用2N 氢氧化钠(700 mL)洗涤合并的有机层，然后用盐水(3 x 100mL)洗涤， 在硫酸钠上干燥，过滤并减压浓缩。将残留物在硅胶(洗脱液二氯甲 烷/乙酸乙酯9/1)上进行色谱处理，得到呈白色晶体的标题化合物 (2. Og) (mp = 150。 C)。力NMR (DMSO-d6) 5 : 6. 46 (s， 1H); 6. 42(br.s， 1H); 6. 02(br.s， 2H); 3. 20(q， J= 8 Hz, 2H); 1.26(t， J=8 Hz， 3H)。 MS m/z : 197/199 (M+l)。
B: 6-氯-l-乙基-lH-咪唑并[4， 5-c]吡啶-4-曱腈 将三氟曱磺酸镱(75 mg)加入到3-氨基-6-氯-4-乙基氨基-吡啶 -2-曱腈(1.41 g)的原甲酸三乙酯(50 mL)溶液中。搅拌下将混合物在 120。 C下加热2.5小时，然后减压浓缩。将残留物进行色谱处理(洗 脱液二氯曱烷/乙酸乙酯9/1)，得到固体，用二乙醚研磨该固体， 并滤出，得到呈白色晶体的标题化合物(0.973 g， 66%)(即=138° C)。 ^NMR(CDC1》5 : 8.17(s， 1H); 7. 62(s， 1H); 4. 31 (q， J= 8 Hz， 2H); 1.62(t， J-8Hz， 3H) 。 13C NMR (CDC13) 5 : 147.5， 143.8， 142.9， 141.7， 124.0， 114.1， 109.2， 40.9， 15.2。
^ l-乙基-6-(3，4-二氯苯基)-lH-咪唑并[4， 5-c]吡啶-4-曱腈 在氮气大气下，将四(三苯基膦)钯(15mg)加入到在DME(2mL)和 曱醇(l mL)中的6-氯-1-乙基-lH-咪唑并[4，5-c]吡啶-4-甲腈(42 mg)， 3，4-二氯-苯基硼酸(152 mg)和氟化铯(100 mg)的混合物中。将该混 合物在80。 C下加热24小时，然后过滤。加盐浓缩滤液。使用制备型 LC/MS(洗脱液A: NH4HC03 10 mM / B: CH3CN)纯化残留物，得到呈白
色固状的标题化合物(30 mg)。 'HNMR(CDCU 5 : 8. 20-8. 15(m， 2H);
7.94(d， J=8 Hz， 1H); 7.91(s， 1H); 7.58(d， J=8Hz， 1H); 4. 37 (q，
J= 7 Hz， 2H); 1.65(t， J=7 Hz， 3H) 。 MS m/z : 317 / 319(M+l)。 使用适当的硼酸衍生物，使用上述方法合成下列衍生物。 17b:l-乙基-6-(4-氯-3-三氟曱基-苯基)-lH-咪唑并[4，5-c]吡啶
-4-曱腈
^固R(CDC1》S : 8. 36(s, 1H); 8.23(d， >8 Hz， 1H); 8.19(s， 1H); 7. 95(s， 1H); 7. 65(d， J-8 Hz， 1H); 4.39(q， J= 7 Hz， 2H); 1.66(t， J=7 Hz， 3H)。 MS m/z : 351/353 (M+l)。
17c: 1-乙基-6- (3， 5-二氯-苯基)-lH-咪唑并[4， 5-c]吡啶-4-曱
渡
力NMR(MeOD4) S : 8.59(s， 1H); 8.55(s， 1H); 8.17(s， 2H); 7. 52(s， 1H); 4.47(q， J-7 Hz， 2H); 1.58(t， J=7 Hz， 3H) 。 MS m/z : 317 / 319(M+l)。
实施例11
6-(2-乙氧基-5-三氟曱基-苯基)-lH-咪唑并[4，5-c]吡啶-4-曱腈
4: 6-氯-lH-咪唑并[4， 5-c]吡啶-4_甲腈
用与化合物il^的步骤B相同的方法，从6-氯-3， 4-二氨基-吡啶 -2-甲腈开始合成该化合物。'H醒R(DMSO) 5: 8.72(s，lH)， 8. 06(s， 1H)。
B: 6-氯-2-四氢吡喃基-lH-咪唑并[4， 5-c]吡啶-4-曱腈
将6-氯-lH-咪唑并[4，5-c]吡啶-4-甲腈(lg)溶解于乙酸乙酯 (20ml)。向上述溶液中加入3， 4-二氢-2H-吡喃(lml)和对甲苯磺酸水 合物(50mg)。将混合物在60°C下加热10小时，然后用碳酸氢钠(5%, lOmL)洗涤。在硫酸钠上干燥有机层，除去溶剂，得到标题化合物。^ NMR(DMSO) 8,92(s, 1H)， 8.30(s， 1H)， 5. 81 (d， 1H)， 4. OO(m， 1H)， 3. 78(m， 1H)， 2. 18(m， 1H)， 2. 07 (m， 1H) ， 1.67(m， 4H)。
C:6-(2-乙氧基-5-三氟曱基-苯基)-l-(四氢吡喃-2-基)-1H-咪唑 并[4，5-c]吡啶-4-甲腈
密封包含6-氯-1-(四氢吡喃-2-基)-lH-咪唑并[4， 5-c]吡啶-4-甲腈(60mg)， (2-乙氧基-5-三氟曱基苯基)硼酸(59.2mg)，三(二亚苄 基丙酮)二钯(O) (10. 5mg)，三环己基膦(7. 7mg)的烧瓶，用氮气吹扫， 然后加入二噶烷(615jliL)。通过在整个混合物中用鼓入氮气气泡来给 混合物除气，然后加入磷酸钾(83. 0mg)的水(305nL)溶液。将该混合 物加热到IOO"C，剧烈搅拌过夜。通过二氧化硅过滤粗混合物，然后 加入乙酸乙酯(30ml)和水(50ml)。 浓缩乙酸乙酯层，然后在10g硅 柱上纯化，用40°/。乙酸乙酯/庚烷洗脱，得到标题化合物。MS m/z 417. 5(m+l)
D: 6- (2-乙氧基-5-三氟甲基-苯基)-lH-咪唑并[4， 5-c]吡啶-4-
甲腈
将6- (2-乙氧基-5-三氟曱基-苯基)-1-(四氢吡喃-2-基)-IH-咪 唑并[4， 5-c]吡啶-4-甲腈(67mg)和对甲苯磺酸水合物(1 Omg)加入到甲 醇(5ml)和DCM(5ml)中。将混合物在室温下搅拌过夜，然后浓缩并在 制备型HPLC上纯化，得到6-(2-乙氧基-5-三氟甲基-苯基)-lH-咪唑 并[4，5-c]吡啶-4-甲腈。力醒R(MeOH) 5 8.55(s， 1H) 8.48(s， 1H) 8. 15(s， 1H) 7.70(d， 1H) 7.29(d， 1H) 4. 26(q， 2H) 1.46(t， 3H) MS m/z 333. 1 (m+l)
实施例19
组织蛋白酶S分析方法通过如下测定重组人组织蛋白酶s的抑制，体外证明本发明的化
合物的抑制活性
向384孔微量滴定板中加入10 pi含10%二曱亚砜(DMS0)的100|iM 受试化合物的分析緩沖液(100mM乙酸钠pH5.5， 5mMEDTA， 5mM 二疏 苏糖醇)溶液，再加入20pl 250|^1底物Z-Val-Va卜A^g-AMC(三肽N-苄氧羰基-Val-Val-A^g-OH 的7-氨基-香豆素衍生物)的分析緩冲液溶 液和45ki1的分析緩冲液。然后将25pl的2mg/1激活的人重组组织蛋 白酶S的分析緩冲液溶液加入到该孔中，得到最终的抑制剂浓度为 10,
通过使用390nM的激发，在20分钟在440nM处测定释放出的氨基 甲基香豆素的荧光来确定酶活性。通过与不包含抑制剂的溶液的活性 相比来计算酶活性的百分比。随后将化合物进行剂量应答曲线分析， 以确定活性化合物的ICs。值(其中ICs。是导致抑制50%酶活性时的受 试化合物的浓度)。本发明的化合物抑制人组织蛋白酶S的典型的pIC5。 (ICs。浓度的负对数)值大于6。本发明的大多数化合物的pICs。大于
7，例如如实施例i， 2， L M， ll， h， M， M ， lii，巡，ilA， llh， 13d， 131的化合物所例证。
实施例20
组织蛋白酶K分析方法
通过如下测定重组人组织蛋白酶K的抑制，体外证明本发明的化
合物的抑制活性
向384孔微量滴定板中加入5 pl含10。/。二甲亚砜(DMS0)的100^M 受试化合物的分析緩冲液(100mM乙酸钠pH5. 5， 5mMEDTA， 5mM 二硫 苏糖醇)溶液，再加入10 |il 100|iM底物Z-Phe-Arg-AMC(二肽N-苄 氧羰基-Phe-Arg-OH的7-氨基-香豆素衍生物)的分析緩沖液溶液和 25jxl的分析緩冲液。然后将10^1的lmg/1激活的人重组组织蛋白酶 K的分析緩冲液溶液加入到该孔中，得到最终的抑制剂浓度为10|iM。
通过使用390nM的激光，在10分钟在440nM处测定释放出的氨基曱 基香豆素的荧光来确定酶活性。通过与不包含抑制剂的溶液的活性相 比来计算酶活性的百分比。随后将化合物进行剂量应答曲线分析，以 确定活性化合物的ICs。值(其中1(:5。是导致抑制50%酶活性时的受试 化合物的浓度)。本发明的化合物抑制人组织蛋白酶S的典型的pICs。 (ICs。浓度的负对数)值在5到7之间。
权利要求
1.6-苯基-1H-咪唑并[4，5-c]吡啶-4-甲腈衍生物，具有通式I式I其中R是选自卤素和(C1-4)烷氧基的任选邻位或间位的取代基；R1是(C1-4)烷基、(C1-4)烷氧基、卤素或CF3；R2是H、(C1-4)烷基、(C1-4)烷氧基或卤素；R3是H或(CH2)n-NR5R6；R4是H或(C1-6)烷基，任选被COOR7或NR8R9取代；R5和R6独立地是H、(C3-8)环烷基、奎宁环-3-基、(C2-6)烯基或(C1-6)-烷基，任选被卤素、CF3、(C3-8)环烷基、(C6-10)芳基、5-或6-元杂芳基、OH、(C1-6)烷氧基、(C6-10)芳氧基、COOR10、CONR11R12、NR13R14或NR13SO2(C1-4)烷基取代；或R5和R6与相连它们的氮一起形成4-8元饱和杂环，任选还包含一个或多个选自O、S、SO2和NR15的杂原子，该环任选被氧代、(C1-4)烷基、(C3-8)环烷基、NR16R17或CONR18R19取代；R7是H或(C1-4)烷基；R8和R9独立地是H、(C1-4)烷基(任选被二(C1-4)烷基氨基取代)或(C3-8)环烷基；或R8和R9与相连它们的氮一起形成4-8元饱和杂环，任选还包含一个选自O和S的杂原子；R10是H或(C1-4)烷基；R11和R12独立地是H或(C1-4)烷基；或R11和R12与相连它们的氮一起形成4-8元饱和杂环，任选还包含一个选自O和S的杂原子；R13和R14独立地是H或(C1-4)烷基；或R13和R14与相连它们的氮一起形成4-8元饱和杂环，任选还包含一个选自O和S的杂原子；R15是H、(C1-4)烷基(任选被OH、(C1-4)烷氧基、二(C1-4)烷基氨基或CONR21R22取代)、苯基、吡啶基、COR20或CONR21R22；R16和R17独立地是H或(C1-4)烷基；或R16和R17与相连它们的氮一起形成4-8元饱和杂环，任选还包含一个选自O和S的杂原子；R18和R19独立地是H或(C1-4)烷基；R20是H、(C1-4)烷基、(C3-8)环烷基、(C1-4)烷氧基或呋喃基；R21和R22独立地是H或(C1-4)烷基；或R21和R22与和它们相连的氮一起形成4-8元饱和杂环，任选还包含一个选自O和S的杂原子；和n是0或1；或其药学可接受的盐。
2.根据权利要求1的式I的6-苯基-lH-咪唑并[4， 5-c]吡啶-4-曱腈衍生物，其中R不存在；l是(CH)烷基、(Cw)烷氧基或CF3; R2是H、 (CH)烷基或(Cw)烷氧基；R3是H或(CH2) n-歸6;R4是H或(Ch)烷基，任选被C00R7或NR8R9取代；Rs和Re独立地是H、 (Cw)环烷基、(Cw)烯基或(Cw)烷基，任选被 卤素、CF" (Cw)环烷基、(C"。)芳基、5-或6-元杂芳基、0H、 (d—6)烷 氧基、(Cw。)芳氧基、COOR10、 C0NRuRu或NW"取代；或Rs和R6与相连它们的氮一起形成4-8元饱和杂环，任选还包含一个 或多个选自0、 S、 S02和NR^的杂原子，该环任选被氧代、(Cw)烷基、 H或C0NR!Jl9取代； R7是H或(Ch)烷基；Rs和R,独立地是H、 (CH)烷基或(Cw)环烷基；或 Rs和R9与相连它们的氮一起形成4-8元饱和杂环，任选还包舍一个 选自0和S的杂原子； R，o是H或(Ch)烷基； Ru和Ru独立地是H或(CH)烷基;或Ru和Ru与相连它们的氮一起形成4-8元饱和杂环，任选还包含一 个选自0和S的杂原子；Ru和R"独立地是H或(CH)烷基;或Rn和Rn与相连它们的氮一起形成4-8元饱和杂环，任选还包含一 个选自0和S的杂原子；R"是H、苯基、吡啶基、CORm或CONR21R22; R"和Rn独立地是H或(d—4)烷基；或iU和Rn与相连它们的氮一起形成4-8元饱和杂环，任选还包含一 个选自O和S的杂原子；R"和R^独立地是H或(Ch)烷基； R2。是H、 (Cw)烷基或呋喃基； Ru和Rn独立地是H或(CH)烷基;或Rn和R"与相连它们的氮一起形成4-8元饱和杂环，任选还包含一 个选自0和S的杂原子； n是0或1;条件是R3和艮中的一个是H; 或其药学可接受的盐。
3. 权利要求1或2的6-苯基-lH-咪唑并[4， 5-c]吡啶-4-曱腈衍生物，其中^是CF"
4. 权利要求1-3的6-苯基-lH-咪唑并[4， 5-c]吡啶-4-曱腈衍生物，其中R2是(Cw)烷氧基。
5. 权利要求4的6-苯基-lH-咪唑并[4， 5-c]吡啶-4-曱腈衍生物，其中l是乙氧基。
6.权利要求1的式I的6-苯基-lH-咪唑并[4，5-c]吡啶-4-甲腈衍 生物，选自-6-(4_乙氧基-3-三氟甲基-苯基)-1&咪唑并[4，5-(;]吡啶-4-甲腈；-[4-氰基-6- (4-乙氧基-3-三氟曱基-苯基)-咪唑并[4， 5-c]吡啶 -l-基]-乙酸;- [4-氰基-6- (4-乙氧基-3-三氟甲基-苯基)-咪唑并[4， 5-c]吡啶 -l-基]-丁酸；-6- (4-乙氧基-3-三氟甲基-苯基)-2- (3-氧代-哌嗪-l-基曱基) 咪唑并[4， 5， c]吡啶-4-甲腈；-2-(1， l-二氧代-噻唑烷-3-基甲基)-甲基]-6-(4-乙氧基-3-三氟 曱基-苯基)-1#-咪唑并[4， 5-c]吡啶-4-曱腈；-6- (4-乙氧基-3-三氟甲基-苯基)-1- (2-吗啉-4-基-乙基)-IF咪 唑并-[4， 5-c]吡咬-4-甲腈；-6- (4-乙氧基-3-三氟甲基-苯基)-1- (2-哌啶-1-基-乙基)咪 唑并-[4， 5-c]吡咬-4-甲腈；-l- (2-二甲基氨基-乙基)-6- (4-乙氧基-3-三氟甲基-苯基)-1 F咪 唑并[4, 5-c]吡啶-4-甲腈；-6- (4-乙氧基-3-三氟甲基-苯基)-1- (3-吗啉-4-基-丙基)-1 F咪 唑并[4， 5-c]吡啶-4-曱腈；-l- (3-二曱基氨基-丙基)-6- (4-乙氧基-3-三氟甲基-苯基)咪 唑并[4， 5-c]吡啶-4-曱腈；-6-(4-乙氧基-3-三氟甲基-苯基)-2-(4-曱基-哌嗪-1-基甲 基)-l^-咪唑并[4， 5-c]吡啶-4-甲腈；和-6-(4-乙氧基-3-三氟甲基-苯基)-2-[(2-羟基-乙基氨基)-甲 基]-l"-咪唑并[4， 5-c]吡吱-4-甲腈；-l-乙基-2- (吡啶-4-基氨基甲基)-6- (3-三氟甲基-苯基)-lH-咪唑 并[4， 5-c]吡啶-4-甲腈；-6- (4-乙氧基-3-三氟甲基-苯基)-2- [4_ (2-羟基-乙基)-3-氧代- 哌嗪-1-基甲基]-1^咪唑并[4， 5-c]吡啶-4-甲腈；-6-(4-乙氧基-3-三氟甲基-苯基)-2-(4-氧代-咪唑烷-1-基曱 基)-lH-咪唑并[4， 5-c]吡啶-4-甲腈；或其药学可接受的盐.
7. 权利要求l-6任一项的6-苯基-lH-咪唑并[4，5-c]吡啶-4-甲腈 衍生物，用于治疗。
8. 权利要求l-7任一项的6-苯基-lH-咪唑并[4，5-c]吡啶-4-甲腈 衍生物在制备治疗骨质疏;f^症、动脉粥样硬化、炎症和免疫疾病例如类 风湿性关节炎，和慢性痛例如神经性疼痛的药物中的应用。
9. 一种药物组合物，包含权利要求l-6任一项的6-苯基-lH-咪唑并 [4，5-c]吡啶-4-甲腈衍生物或其药学可接受的盐，与药学可接受的助剂 混合。
全文摘要
本发明涉及具有通式I的6-苯基-1H-咪唑并[4，5-c]吡啶-4-甲腈衍生物，包含这些化合物的药物组合物以及这些衍生物在制备治疗组织蛋白酶S和/或组织蛋白酶K相关疾病例如骨质疏松症、动脉粥样硬化、炎症和免疫疾病例如类风湿性关节炎，和慢性痛例如神经性疼痛的药物中的应用。
文档编号C07D519/00GK101374838SQ200780003159
公开日2009年2月25日 申请日期2007年1月15日 优先权日2006年1月16日
发明者D·J·贝奈特, I·卡明, J·吉尔斯派, P·S·琼斯, Z·兰科维奇, 蔡家强 申请人:欧加农股份有限公司