专利名称：：异黄酮类化合物及其制备和应用的制作方法
技术领域：
：-本发明涉及天然药物化学，具体涉及从大红袍(AfyM7'朋4/Hc"加丄.)的茎中提取分离的异黄酮类化合物及其制备方法与在制备免疫抑制剂或治疗各种免疫性疾病药物方面的应用。
背景技术：
：-已知天然存在的植物异黄酮表现广泛的生物活性，包括抗氧化，对信号传导及酶活性的调节；对人癌细胞的有丝分裂的抑制和细胞毒性；增加毛细管的渗透性；增加细胞粘着；增加血管平滑肌对血管松弛剂的反应；兴奋雌激素受体等。这些生物活性产生了一定的治疗作用，包括治疗和预防子宫内膜异位、子宫纤维瘤、高脂血症、心血管疾病、月经前综合症、绝精症状如骨质疏松和老年痴呆、良性前列腺肥大和癌症如前列腺、乳腺和大肠癌等。但异黄酮类化合物还具有其它活性，需要进--歩深入研究。大红袍为紫金牛科铁仔属植物铁仔(Mjw/朋4/Hcfl朋丄.)的根与茎叶，《贵州民间药物》记载"祛风湿，活血。治痢疾。"《云南中草药》记载消炎，止痛，止痢。治牙痛，肠炎，痢疾。中华本草中记载其功能主治为祛风止痛，清热利湿，收敛止血。主治风湿痹痛，牙痛，泄泻，痢疾，血崩，便血，肺结核咯血。大红袍含有多种异黄酮类化合物，但对它的化学成分研究较少，尤其未见报道大红袍中的化学成分在制备免疫抑制剂或治疗免疫性疾病方面的研究。
发明内容本发明要解决的技术问题在于研究大红袍多种异黄酮类化合物及其制备和应用。11I所示式中，当编号2与3的碳原子之间为双键时,R1=H，R2=OHR3=OH,R4=H或Rl=OH，R2:R1=H，R2=R3=OH,R4=H，R3=OH,R4=OHR1=H，R2与R3形成如下六元环:或编号2与3的碳原子之间为单键时，Rl二OH，R2:OHR3=OH，R4=H或Rl=OH,R2=,R3=OH，R4=H或Rl=OH,R2=,R3=OH,R4=H具体的异黄酮类化合物如下表示化合物l(3'-香叶基-5，7，2',4'-四羟基异黄酮)，黄色油状物。UV入画(MeOH):262.0;HREIMS:m/z422.1743[M]+(Calc.422.1729forC25H2606);EIMS:m/z(rel.int.):353(10)，299(38)，128(38),86(100)，69(79),59(61),55(85);ESI-MS:m/z423[M+H]+;IRv隱cm"(KBr):3352,2924，2854，1649，1610，1500，1448,1364,1306,1259，1200，1167,1150,1094,1051,1038，820;'HNMR(CDCl3):7.93(H-2),6.36(H-6),6.43(H-8)，6.51(H-5，)，6.89(H-6，)，3.56(H層l"),5.31(H-1，)，2.08(H陽4"),2.10(H-5，，)，5.06(H-6，，)，1.59(H-8，，)，1.84(H-3,，Me),l,67(H-7，，Me);l3CNMR(CDCI3):155.5(C-2),123.9(C-3),182.3(C-4)，162.7(C-5),100.5(C-6)，163.5(C-7)，94.5(C-8)，158,2(C-9),105.7(C-10),112.7(C-1，)，154.5(C-2，)，117.4(C-3，)，157.5(C-4，)，109.5(C-5')，128.2(C-6，)，139.1(C-3，，),39.6(C-4，，)，26.0(C-5，，)，124.1(C-6"),15.4(C-3，，Me),23.1(C-7'，Me)26.6(C-1"),121.9(C-2"),132.3(C-7"),16.6(C-8")，HOOHO化合物l化合物2(5，7,4'-三羟基-3'-[7-羟基-3,7-二甲基-2(E)-辛烯]异黄酮)白色固体状物，mp:179.3-180.9UV入max(MeOH):262.0;HREIMS:m/z424.1890[M]+(Calc,424,1886forC25H2806);EIMSm/z(rel.int.):424(3.5),406(39),338(16),337(22),335(22),321(33)，284(100),283(73)，153(60);ESI-MS:m/z407[M-OH]+;13IRv隨cm-'(KBr):3362，2968，2935,1653,1616，1506,1446,1364,1263，11981047,825,669;'HNMR(CDCl3):8.12(H-2),6.27(H-6),6.40(H-8),7.35(H-2，)，6.89(H墨5，):7.27(H-6，)，3.38(H-1"),5.40(H-2"),2.05(H-4")，1.52(H-5")，1.41(H-6"),1.12(H-8，，)，1.73(H-3"Me),1.12(H-7"Me);13CNMR(CDCI3):153.5(C-2),123.7(C-3)，181.0(C-4),l63.3(C-5),99.2(C-6)，164.4(C-7),93.8(C-8),158.4(C-9),105.5(C-10),122.5(C-1，)，130.5(C-2，),128.1(C-3，)，155.3(C-4，)，114.9(C-5，)，127.9(C-6，)，28.3(C-1"),122.7(C-2"乂136.1(C-3，，)，40.34(C-4，，)，22.7(C-5，，)，43.7(C-6")，69.5(C-7"),29.0(C-8"),15.5(C-3"Me),29.0(C-7"Me)。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage14</formula>化合物3(5,7-二羟基-[6〃-甲基-6〃-(4-甲基-3-戊烯基)吡喃并(2〃，3〃:3'，4')]异黄酮)，黄色油状物UV入瞧(MeOH)nm:290.0;HREIMS:m/z404.1635[M]+(Calc.404.1624forC25H2405);EIMSm/z(rel.int.):404(5)，322(23),321(100);ESI-MS:m/z405[M+H]+;IRv隨cnf1(KBr):3339，2924,1652,1618,1578，1491,1448，1360,1306，1261,1180,1045,831;'HNMR(CDCI3):8.20(H-2)，6.29(H-6),6.42(H-8)，7.31(H-2，)，6.85(H-5，),7.33(H-6，)，6.49(H-4，，)，5.75(H-5")，l,71(H-7，，)，2.13(H-8"),5.13(H-9"),1,57(H-1")，1.40(H-6，，Me),1.64(H-10"Me);13CNMR(CDCI3):153.9(C-2)，123.1(C-3),181.0(C-4),163.2(C-5),99.2(C-6),164.4(C-7),93.9(C-8),158.9(C-9),105.4(C-10)，123.6(C-1,),127.4(C-2，),121.1(C-3')，153.6(C-4，)，115.9(C-5,)，130.3(C-6')，122.7(C-4"),130.0(C-5"),99.0(C-6，，)，41.4(C-7"),22.8(C-8"),124.3(C-9")，131.4(C-10，，)，17.0(C-11")26.3(C-6"Me),25.2(C-10"Me)。HO、乂O、化合物3化合物4(5,7,4",5"四羟基-[6〃-甲基-6〃-(4-甲基-3-戊烯基)口比喃并(2〃,3'3',4')]异黄酮)，黄色油状物UV入max(MeOH)nm:290.0;HREIMS:m/z442.1989[M]+(Cal.442.1992forC25H30O7);EIMSm/zrel.int.:442(5),424(49),300(42)，299(45),153(100);ESI-MSm/z:425[M-OH]+;IRv麵cnT1(KBr):3367,2966,2931,1699,1684,1635,1452，1379,1269,1184,1465，835,800;)HNMR(CDCl3):8.08(H-2),6.22(H-6)，6.34(H-8),7.61(H-2，)，6.81(H-5，)，7.34(H陽6'),4.58(H-4"),3.65(H-5，，)，1.85(H-7,，)，2.17(H-8'，)，5.16(H-9")，1.65(H-1"),U9(H-6"Me)，1.69(H-10"Me);l3CNMR(CDCI3):153.8(C-2)，123.2(C-3)，181.0(C-4)，162.7(C-5),99.0(C-6)，164.9(C-7)，93.7(C-8),158.5(09)，105.1(C-10),123.5(C-1，)，128.7(C-2，)，124.6(C-3，)，152.9(C-4，)，U6.5(C-5，)，129.7(C-6，)，69.1(C-4")，73.2(C-5，，)，80.3(C-6，，)，38.7(C-7")，21.1(C隱8")，124.3(C陽9"),131.2(C-10，，)，16.5(C-11，，)，17.1(C-6"Me),24.7(C-10，，Me)。化合物4IRv隨cm-1(KBr):3367,2966,2931,1699，1684,1635,1452，1379,1269,1184,1465,835，800;HREIMSm/z442.1989[M+](Cal.442.1992forC25H3()07);EIMSm/z(rel.int.):442(5),424(49)，300(42),299(45)，153(100);ESI-MSm/z425[M陽OH]+;'HNMR(CDCl3):4.60(H-2a)，4.70(H-2P),4.17(H陽3),5.97(H-6)，5.97(H-8)，6.43(H-5，)，6.93(H-6，)，3.43(H-1"),5.25(H-2，，)，1.93(H-4，，)，1,46(H陽5"),1.36(H-6")l,13(H-8"),1.77(H-3，，Me)，1.13(H-7"Me);13CNMR(CDCI3):70.4(C-2)，46.1(C-3),197.9(C-4),164.9(C-5),96.2(C-6)，167,0(C-7),95.1(C-8),163.8(C-9),102.2(C-10)，114.6(C-1,),154.1(C-2')，116.3(C隱3'),155.8(C-4,)，107.7(C-5，)，126,5(C-6,)，22.7(C-1"),122.8(C-2'，),135.3(C-3，，)，40.4(C-4")，22.5(C-5")，43.7(C-6"),69.4(C-7，，)，29.0(C-8"),15.6(C-3"Me)，29.0(C-7，，Me)。化合物5化合物6(3'-香叶基-5，7,2'，4'-四羟基二氢异黄酮.)，黄色油状物UVX隨(MeOH)匿290.0，230.0;IRvmaxcm"(KBr):3304,2926，1639，1614,1450，1379，1263,1614，1450，13791263,1182，1163，薩，835;HREIMSm/z424.1882[M+](Calc.424.1886forC25H2806);EIMSm/z(rel.int.):424(12),301(46),201(26),187(36),179(31)，153(100),123(60)，91(35),69(80);ESI-MSm/z425[M+H]+;'HNMR(CDCl3):4.66(H-2a),4.76(H-2e),4.00(H-3),5.95(H-6),5.95(H-8),6.39(H-5，)，7.12(H-6，)，3.45(H-1"),5.24(H-2"),2.08(H-4，，)，2.09(H-5"),5,03(H-6，，)1.57(H-8，，)，1.80(H-3，，Me),1.65(H-7"Me);13CNMR(CDCI3):70.0(C-2)，45.6(C-3)，197.5(C-4)，165,l(C-5)，97.2(C-6)，166.6(C-7)，95.8(C-8),163.4(C-9)，102.0(C-10)，115.1(C-r),154.2(C陽2'),115.8(C-3，)，155.5(C-4，)，108.9(C-5')，126.1(C-6，)，23.0(C-1"),121.7(C陽2"),139.4(C-3")，39.9(C-4"),26.6(C-5，，)，124.0(C-6"),132.3(C-7，，)，18.0(C-8，，)，16,5(C-3"Me)，26.0(C-7"Me)。化合物6化合物7(3'-香叶基-4'-甲氧基-5,7，2'-三羟基二氢异黄酮)，黄色油状物UVA丽(MeOH)匿288,226;IRvmaxcm"(KBr):3342,2966,2925，1643,1634，1495，1454，1385,1315，1275,1227,1182，1163，1094,835,756;HREIMSm/z438.2057[M+](Calc.438.2042forC26H30O6);EIMSm/z(rel.int.):438(28),353(25),327(15)，316(29)，315(100),286(14)，215(22)，204(11),203(31),201(26),189(30),153(48);ESI-MSm/z439[M+H]+;'HNMR(CDCI3):4.66(H-2a),4.76(H-2P),4.00(H-3),5.95(H-6),5.95(H-8)，6.39(H-5，)，7.12(H-6，)，3.45(H-1"),5.24(H-2，，)，2.08(H-4，,)，2.09(H-5")，5.03(H-6，，)1.57(H-8，，)，1.80(H-3，，Me),1.65(H-7，，Me);13CNMR(CDCI3):70.2(C-2)，46.1(C-3),197.8(C-4)，164.9(C-5)，97.1(C-6),166.5(C-7)，95.8(C-8),163.6(C-9),102.5(C-10),115.3(C-1，)，154.2(C-2，),117.2(C-3，)，158.1(C-4，)，103.9(C-5，)，126.8(C-6，)，22.8(C陽l"),122.0(C-2")，138.3(C-3，，)，40.0(C-4，，)，26.7(C-5，，)，124.2(C-6，，)，132.0(C-7，，)，17.9(C-8")，16.4(C-3，，Me)，25.9(C國7，，Me),56.0(C-4，OMe)。17化合物7化合物8(3'-香叶基-5,7，4',5'-四羟基二氢异黄酮)，黄色油状物；UV入隨(MeOH)匿262.0;IRv隨cm"(KBr):3371,2964,2922,2854，1650，1614,1574,1514,1441,1367:1306,1283，1177,1051,839,822，793;HREIMSm/z422.1719网+(Calc.422.1729forC25H2606);EIMSm/z(rel.int,):422(16)，353(27),337(14),300(67),153(93),123(49),69(100);ESI-MSm/z423[M+l]+;'HNMR(CDCl3):7.96(H-2),6.20(H-6)，6.32(H-8),6.32(H-2，)，6.86(H-6，),3.34(H-1"),5.32(H陽2"),2.08(H-4"),2.10(H-5")，5.06(H陽6"),1.55(H-8，，)，1.71(H-3，，Me),1.58(H-7，，Me);13CNMR(CDCI3):153.5(C-2)，124.0(C-3),181.1(C-4),162.7(C-5),98.9(C-6),165.0(C-7)，93.6(C-8),158.5(C-9)，105.2(C-10),12L7(C-1，)，121.0(C-2，),128.5(C-3，)，143.5(C-4，)，144.6(C-5，)，113.6(C-6')，28,3(C-1"),122.8(C-2"),135.6(C-3")，39.7(C-4"),27.9(C-5"),124.2(C陽6"),131.0(C-7，，)，16.6(C-8，，)，15.0(C-3，，Me)，24.7(C-7，，Me)。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage18</formula>化合物8本发明的另一目的是提供了异黄酮类化合物式I的制备方法，该方法包括下<formula>formulaseeoriginaldocumentpage18</formula>列步骤(1)大红袍药材粉碎，用药材5—10倍量W/V60%-90%乙醇溶剂在50-90。C下进行加热提取l-3次，每次O.5—2h，得到提取液；(2)提取液在压力98Kpa，温度50-90'C下减压浓縮，把浓缩液分散在相同重量的水中制成混悬液；(3)用与混悬液等体积的氯仿萃取三次，合并萃取液，氯仿萃取液在压力98Kpa,30-5(TC温度下减压浓缩后得氯仿萃取物；(4)分离化合物i氯仿萃取物用等量得硅胶拌样，用硅胶柱层析进行分离，依次用石油醚:乙酸乙酯5:l—2:1V/V梯度洗脱，得到馏分l，馏分2，馏分3，馏分4，馏分5;馏分1用反相C18柱分离，甲醇水8:2V/V洗脱，得化合物3;用甲醇水7:3V/V洗脱得化合物7;馏分2用葡聚糖凝胶LH-20分离，用甲醇洗脱得化合物l;馏分3用反相C18柱分离，甲醇:水7:3V/V，得化合物2;馏分4用反相C18柱分离，甲醇水6:4V/V得化合物5;馏分5用反相C18柱分离，甲醇水6:4—7:3V/V洗脱，得化合物8;ii氯仿萃取物用等量硅胶拌样，用硅胶柱层析进行分离，依次用石油醚丙酮4:l一2:1V/V梯度洗脱，得到馏分1与馏分2，馏分1再用葡聚糖凝胶LH-20分离得到化合物6;馏分2用反相C18柱分离，甲醇水6:4V/V得化合物4。本发明所述大红袍采集于云南省的紫金牛科铁仔属植物铁仔(MyrsineAfricanaL.)的茎。本发明制备方法简便。本发明的另一目的是提供了异黄酮类化合物式I在制备免疫抑制剂或治疗免疫性疾病的药物。本发明免疫抑制活性实验本发明人对上述八种新黄酮类化合物的免疫抑制活性进行了研究，测试了其对LPS诱导的B淋巴细胞增殖功能的影响及ConA诱导的T淋巴细胞增殖功能的影响。并同时对其细胞毒性进行了测试。发现该类化合物对B淋巴细胞与T淋巴细胞的增殖具有显著的抑制作用，可用于制备免疫抑制剂或治疗各种免疫性疾病的药物，如类风湿关节炎，红斑狼疮等，及用于制备B细胞型慢性淋巴细胞白血病药物。19实施例l:化合物l的制备首先用大红袍药材2kg，加16L(首次多加2L)80。/。乙醇在80。C加热提取3次，每次1小时。然后提取液在减压(压力98Kpa),温度在50。C浓縮后，把浓缩液分散在2L水中制成混悬液。加氯仿萃取三次，每次2L，得氯仿萃取液，氯仿萃取液在4CTC下减压浓缩(压力98Kpa)，得氯仿萃取物91.3g。取氯仿萃取物15g用等量硅胶拌样，用硅胶柱色谱(300—400目)分离，石油醚乙酸乙酯(3:1)洗脱，用TLC进行检视，合并洗脱液，浓缩，洗脱物上葡聚糖凝胶LH-20(甲醇等度洗脱)，根据TLC检视收集洗脱液，洗脱浓縮得化化合物l化合物1的理化性质与波谱特征化合物l(3'-香叶基-5,7，2'，4'-四羟基异黄酮)，黄色油状物。UV入，(MeOH):262.0;HREIMS:m/z422.1743网+(Calc.422.1729forC25H2606);EIMS:m/z(rel.int.):353(10)，299(38),128(38)，86(100),69(79)，59(61),55(85);ESI-MS:m/z423[M+H]+;IRv隨cm-1(KBr):3352,2924,2854,1649,1610，1500,1448,1364,1306,1259,1200,1167，1150,1094，1051,1038，820;'HNMR(CDCI3):7.93(H-2),6.36(H-6),6.43(H-8),6.51(H-5，)，6.89(H-6，)，3.56(H-1")，5.31(H-1，)，2.08(H-4，，)，2.10(H-5，，)，5.06(H-6，，)，1.59(H-8，，)，1.84(H-3，，Me),1.67(H-7"Me);13CNMR(CDCI3):155.5(C-2)，123.9(C-3)，182.3(C-4),162.7(C-5)，100.5(C-6)，163.5(C-7),94.5(C-8),158,2(C-9)，105.7(C-10),112.7(C-1')，154.5(C-2，),117.4(C-3，)，157.5(C-4，)，109.5(C-5，)，128.2(C誦6'),26.6(C-1"),121.9(C-2")，139.1(C-3")，39.6(C-4"),26.0(C-5"),124.1(C-6")，132.3(C-7"),16.6(C-8"),15.4(C-3"Me),23.1(C-7"Me)。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage21</formula>化合物l实施例2:化合物2的制备首先用大红袍药材2kg，力n12L(首次多加2L)70%乙醇在9(TC加热提取2次，每次1小时，然后提取液在减压(压力98Kpa),温度在50'C浓縮后，把浓縮液分散在2L水中制成混悬液。加氯仿萃取三次，每次2L，得氯仿萃取液，氯仿萃取液在4(TC下减压浓縮(压力98Kpa)，得氯仿萃取物82.5g。取氯仿萃取物20g,用等量硅胶拌样，用硅胶柱色谱(300—400目)分离，石油醚:乙酸乙酯(2:1)洗脱，用TLC进行检视，合并洗脱液，浓縮，洗脱物再用反相C18柱分离，甲醇:水(7:3)洗脱，根据TLC检视收集洗脱液，洗脱液浓縮得化合物2。化合物2的理化性质与波谱特征化合物2(5,7,4'-三羟基-3'-[7-羟基-3,7-二甲基-2(E)-辛烯]异黄酮)白色固体状物，mp:179.3-180.9;UV入,(MeOH):262.0;HREIMS:m/z424.1890[M]十(Calc.424.1886forC25H2806);EIMSm/z(rel.int.):424(3.5),406(39),338(16),337(22)，335(22),321(33),284(100),283(73),153(60);ESI-MS:m/z407[M-OH〗+;IRv匪cm"(KBr):3362,2968，2935，1653,1616，1506,1446,1364,1263,1198，1047,825，669;'HNMR(CDCl3):8.12(H-2)，6.27(H-6),6.40(H-8),7.35(H-2，)，6.89(H-5，),7.27(H-6，)，3.38(H-1")，5.40(H-2，，)，2.05(H-4，，)，1.52(H-5")，1.41(H-6"),U2(H-8"),1.73(H-3，，Me),U2(H-7，，Me);13CNMR(CDCI3):153.5(C-2),123.7(C-3)，181.0(C-4),163.3(C-5),99.2(C-6),164.4(C-7),93.8(C-8),158.4(C-9),105.5(C-10)，122,5(C-1，)，130.5(C隱2')，128.1(C-3，)，155.3(C-4，)，114.9(C-5,)，127.9(C-6')，28.3(C陽1"),122.7(C-2"),136.1(C-3'，)，40.34(C-4")，22.7(C-5"),43.7(C-6"),69.5(C-7，，)，29.0(C-g"):15.5(C-3，，Me)，29.0(C-7"Me)。化合物2实施例3:化合物3的制备首先用大红袍药材2kg，加16L(首次多加2L)80%乙醇在80。C加热提取3次，每次1小时。然后提取液在减压(压力98Kpa),温度在5(TC浓缩后，把浓缩液分散在2L水中制成混悬液。加氯仿萃取三次，每次2L，得氯仿萃取液，氯仿萃取液在4(TC下减压浓縮(压力98Kpa)，得氯仿萃取物91.3g。取氯仿萃取物15g,用等量硅胶拌样，用硅胶柱(200—300目)色谱分离，石油醚:乙酸乙酯(5:1)洗脱，用TLC进行检视，合并洗脱液，浓缩，洗脱物再用反相C18柱分离，甲醇:水(8:2)洗脱，根据TLC检视收集洗脱液，洗脱液浓縮得化合物3。化合物3的理化性质与波谱特征化合物3(5,7-二羟基-[6〃-甲基-6〃-(4-甲基-3-戊烯基)吡喃并(2〃,3〃:3'，4')]异黄酮),黄色油状物；UV入max(MeOH)歸:290.0;HREIMS:m/z404.1635[M+](Calc.404.1624forC25H2405);EIMSm/z(rel.int.):404(5)，322(23),321(100);IRv隨cm-1(KBr):3339,2924，1652,1618，1578，1491,1448，1360，1306,1261,1180,1045,831;'丽MR(CDCb):8.20(H-2)，6.29(H-6)，6.42(H-8),7.31(H-2，)，6.85(H-5，),7.33(H-6'),6.49(H-4，，)，5,75(H-5，，)，1.71(H-7，，)，2.13(H-8，，)，5.13(H-9"),1.57(H-1")，1.40(H-6，，Me),1.64(H-10，，Me);13CNMR(CDCI3):153,9(C-2)，123.1(C-3),181.0(C-4),163.2(C墨5),99.2(C-6)，164.4(C-7),93.9(C-8),158.9(C-9),105.4(C-10),123.6(C-1，)，127.4(C-2，),12U(C-3，)，153.6(C-4，)，115.9(C-5，)，130.3(C-6')，122.7(C-4，，)，130.0(C陽5"),2299.0(C-6")，41.4(C-7"),22.8(C-8，，)，124.3(C-9"),131.4(C-10"),17.0(C-11"):26.3(C-6，，Me)，25.2(C-10，，Me)。化合物3实施例4:化合物4的制备首先用大红袍药材2kg，力f]12L(首次多加2L)70X乙醇在90'C加热提取2次，每次1小时，然后提取液在减压(压力98Kpa),温度在50'C浓缩后，把浓缩液分散在2L水中制成混悬液。加氯仿萃取三次，每次2L，得氯仿萃取液，氯仿萃取液在40'C下减压浓縮(压力98Kpa)，得氯仿萃取物82.5g。取氯仿萃取物20g用硅胶拌样，用硅胶柱色谱分离，石油醚:丙酮(2:1)洗脱，用TLC进行检视，合并洗脱液，浓縮，洗脱物再用反相C18柱分离，甲醇水(6:4)，根据TLC检视收集洗脱液，洗脱液浓縮得化合物4。化合物4的理化性质与波谱特征化合物4(4,5,7,4〃,5〃四羟基-[6〃-甲基-6〃-(4-甲基-3-戊烯基)吡喃并(2〃,3〃:3',4')]异黄酮),黄色油状物；UV入max(MeOH)nm:290.0;HREIMS:m/z442.1989[M〗+(Cal.442.1992forC25H30O7);EIMSm/zrel.int.:442(5),424(49),300(42),299(45)，153(100);ESI-MSm/z:425[M-OH]+;IRv隨cm-'(KBr):3367,2966,2931,1699,1684,1635,1452,1379，1269,1184,1465，835,800;'丽MR(CDCl3):8.08(H-2),6.22(H-6),6.34(H-8),7.61(H-2')，6.81(H陽5'),7.34(H-6，)，4.58(H-4"),3.65(H國5"),1.85(H-7")，2.17(H-8，，)，5.16(H-9，，)，1.65(H-1"),1.19(H-6，，Me),l,69(H-10，，Me);13CNMR(CDCI3):153.8(C-2),123.2(C-3),181.0(C匿4)，162.7(C-5)，99.0(C-6)，164.9(C-7),93.7(C-8),158.5(C-9)，105.1(C-10),123.5(C-1，)，128.7(C-2')，124.6(C-3，)，152.9(C-4'),116.5(C-5，)，129.7(C-6，)，69.1(C-4，，)，73.2(C-5，，):80.3(C-6")，38.7(C-7，，)，21.1(C-8，，)，124.3(C-9"),131.2(C-10，，)，16.5(C-11"):17.1(C-6"Me)，24.7(C-10"Me)。化合物4实施例5:化合物5的制备首先用大红袍药材2kg，加16L(首次多加2L)80X乙醇在80。C加热提取3次，每次1小时。然后提取液在减压(压力98Kpa),温度在50。C浓縮后，把浓缩液分散在2L水中制成混悬液。加氯仿萃取三次，每次2L，得氯仿萃取液，氯仿萃取液在40。C下减压浓縮(压力98Kpa)，得氯仿萃取物91.3g。取氯仿萃取物20g用等量硅胶拌样，用硅胶柱色谱分离，石油醚:乙酸乙酯(2:1)洗脱，用TLC进行检视，合并洗脱液，浓縮，洗脱物再用反相C18柱分离，甲醇:水(6:4)洗脱，根据TLC检视收集洗脱液，洗脱液浓縮得化合物5。化合物5的理化性质与波谱特征化合物5(5，7,2',4'-四羟基-3'-[7-羟基-3,7-二甲基-2(E)-辛烯]二氢异黄酮)黄色油状物UV入max(MeOH)nm:290.0;IRv隱cm-1(KBr):3367,2966,2931,1699,1684,1635,1452，1379，1269，1184，1465，835，800;HREIMSm/z442.1989[M]+(Cal.442.1992forC25H30O7);EIMSm/z(rel.int.):442(5),424(49)，300(42),299(45),153(100);ESI-MSm/z425[M-OH]+;^MR(CDCl3):4.60(H-2a),4.70(H-2"，4.17(H-3),5.97(H-6),5.97(H-8),6.43(H-5，)，6.93(H-6，)，3.43(H-1")，5.25(H-2，，)，1.93(H-4，，)，1.46(H-5，，)，l,36(H-6").1.13(H-8")，1.77(H-3"Me),1.13(H-7"Me);13CNMR(CDCI3):70.4(C-2)，46.1(C-3),197.9(C-4),164.9(C-5),96.2(C-6),167.0(C-7)，95.1(C-8)，163.8(C-9),102.2(C-10),114.6(C-1，)，154.1(C-2，)，116.3(C-3，)，155.8(C-4，)，107.7(C-5，)，126.5(C-6，)，22.7(C-1，，)，122.8(C-2")135.3(C-3"),40.4(C-4"),22.5(C-5，，)，43.7(C-6，，)，69.4(C-7"),29.0(C-8"):15.6(C-3"Me),29,0(C-7"Me);化合物5实施例6:化合物6的分离制备首先用大红袍药材2kg，加16L(首次多加2L)80%乙醇在80°C加热提取3次，每次1小时。然后提取液在减压(压力98Kpa),温度在5(TC浓縮后，把浓縮液分散在2L水中制成混悬液。加氯仿萃取三次，每次2L，得氯仿萃取液，氯仿萃取液在40'C下减压浓缩(压力98Kpa)，得氯仿萃取物91.3g。取氯仿萃取物20g用等量硅胶拌样，用硅胶柱色谱分离，石油醚:丙酮(4:1一2:1梯度洗脱)，用TLC进行检视，合并洗脱液，浓縮，洗脱物再用葡聚糖凝胶LH-20(甲醇洗脱)，根据TLC检视收集洗脱液，洗脱液浓缩得化合物6。化合物6的理化性质与波谱特征化合物6(3'-香叶基-5，7,2'，4'-四羟基二氢异黄酮)，黄色油状物UV入max(MeOH)nm:290.0，230.0;IRv臓cm-1(KBr):3304，2926,1639，1614，1450,1379,1263，1614，1450,1379,1263,1182,1163,1091,835;HREIMSm/z424,1882岡+(Calc.424.1886forC25H2806);EIMSm/z(rel.int):424(12),301(46),201(26)，187(36),179(31),153(100),123(60),91(35)，69(80);ESI-MSm/z425[M+H]+;'丽MR(CDCl3):4.66(H-2a)，4.76(H-2P)，4.00(H-3)，5.95(H-6),5.95(H-8)，6.39(H-5')，7.12(H-6，)，3.45(H-1"),5.24(H-2")，2.08(H-4"),2.09(H-5"),5.03(H-6").1.57(H-8，，)，L80(H-3"Me),1.65(H-7"Me);13CNMR(CDCI3):70.0(C-2),45.6(C-3),197.5(C-4),165.I(C-5),97.2(C-6)，166.6(C-7)，95.8(C-8)，163.4(C-9)，102.0(C-10),115.1(C-1，)，154.2(C-2，),115.8(C-3，)，155.5(C-4，)，雨.9(C-5,),126.1(C-6，)，23,0(C-1"),121.7(C-2"),139.4(C-3"),39.9(C-4"),26.6(C-5"),124.0(C-6")，132.3(C-7"),18.0(C-8，，)16.5(C-3"Me)，26.0(C-7"Me)。化合物6实施例7:化合物7的制备首先用大红袍药材2kg,加16L(首次多加2L)80%乙醇在80。C加热提取3次，每次1小时。然后提取液在减压(压力98Kpa)，温度在5(TC浓縮后，把浓缩液分散在2L水中制成混悬液。加氯仿萃取三次，每次2L，得氯仿萃取液，氯仿萃取液在4(TC下减压浓缩(压力98Kpa)，得氯仿萃取物91.3g。取氯仿萃取物15g用等量硅胶拌样，用硅胶柱色谱分离，石油醚:乙酸乙酯(4:1)洗脱，用TLC进行检视，合并洗脱液，浓缩，洗脱物再用反相C18柱分离，甲醇:水(7:3)洗脱，根据TLC检视收集洗脱液，洗脱液浓缩得化合物7。化合物7的理化性质与波谱特征化合物7(3'-香叶基-4'-甲氧基-5,7，2'-三羟基二氢异黄酮)，黄色油状物UV入max(MeOH)nm:288.0，226.0;IRv隨cm-1(KBr):3342,2966,2925，1643，1634,1495，1454,1385，1315,1275,1227,1182,1163，1094,835,756;HREIMSm/z438.2057[M]+(Calc.438.2042forC26H30O6);EIMSm/z(rel.int.):438(28),353(25)，327(15)，316(29),315(100)，286(14)，215(22),204(11)，203(31)，201(26)，189(30)，153(48);ESI-MSm/z439[M+H]十；'HNMR(CDCl3):4.66(H-2a)，4.76(H-2P)，4.00(H-3)，5.95(H-6)，5.95(H-8),6.39(H-5，)，7.12(H-6，)，3.45(H隱l"),5.24(H-2")，2.08(H-4")，2.09(H-5"),5.03(H-6"),1.57(H-8")，l,80(H-3"Me),1.65(H-7"Me);J3CNMR(CDCI3):70.2(C-2),46.1(C-3),197.8(C-4),164.9(C-5),97.KC-6)，166.5(C-7),95.8(C-8)，163.6(C-9)，102.5(C-10),115.3(C-1，)，154.2(C-2'),117.2(C-3，)，158.1(C-4，)，103.9(C-5，)，126.8(C-6，)，22.8(01")，122.0(C-2，，):138.3(C-3"),40,0(C-4，，)，26.7(C-5，，)，24.2(C-6，，)，132.0(C-7"),17.9(C-8").16.4(C-3"Me),25.9(C-7"Me)，56.0(C-4，OMe)。化合物7实施例8:化合物8的制备首先用大红袍药材2kg，力B12L(首次多加2L)70X乙醇在90。C加热提取2次，每次1小时，然后提取液在减压(压力98Kpa),温度在50'C浓缩后，把浓缩液分散在2L水中制成混悬液。加氯仿萃取三次，每次2L，得氯仿萃取液，氯仿萃取液在4(TC下减压浓縮(压力98Kpa)，得氯仿萃取物82.5g。取氯仿萃取物20g用等量硅胶拌样，用硅胶柱色谱分离，石油醚:乙酸乙酯(2:1—1:1)梯度洗脱，用TLC进行检视，合并洗脱液，浓縮，洗脱物再用反相C18柱分离，甲醇:水(6:4—7:3)，根据TLC检视收集洗脱液，洗脱液浓缩得化合物8。化合物8的理化性质与波谱特征化合物8(3'-香叶基-5，7，4',5'-四羟基二氢异黄酮)，黄色油状物；UV入max(MeOH)nm:262.0;IRv隨咖-1(KBr):3371,2964,2922,2854,1650,1614，1574，1514，1441,1367,1306,1283,1177,1051，839,822,793;HRE脇m/z422.1719[M]十(Calc.422.1729forC25H2606);EIMSm/z(rel.int.):422(16)，353(27),337(14),300(67),153(93),123(49),69(100);ESI-MSm/z423[M+1]+;'HNMR(CDCI3):7.%(H-2),6.20(H-6)，6.32(H-8),6.32(H々，)，6.86(H-6,)，3.34(H-1")，5.32(H-2"),2.08(H-4"),2.10(H-5"),5.06(H隱6"),1.55(H-8，，)，1.71(H-3"Me)，1.58(H-7"Me);13CNMR(CDCI3):153.5(C-2)，124.0(C-3)，181.1(C-4),162.7(C-5),98.9(C-6):165.0(C-7),93.6(C-8)，158.5(C-9),105.2(C-10),121.7(C-1，)，121,0(C-2'):128.5(C-3，)，143.5(C-4，)，144.6(C-5，)，113.6(C-6'),28.3(C-1")，122.8(C-2")135.6(C-3，，)，39.7(C-4"),27.9(C-5"),124.2(C-6")，131.0(C-7"),16.6(C-8"):15.0(C-3"Me),24.7(C-7"Me)。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage28</formula>实施例9:免疫抑制活性试验(l)试验方法①试验动物BALB/c纯系小鼠，雌性，18-20克，购自中国科学院上海实验动物中心，动物生产许可证号SYXK(沪)2002-0033号。②小鼠脾脏淋巴细胞的制备小鼠脱脊椎处死，无菌取其脾脏制备单个细胞悬液，红细胞裂解液去除红细胞，用含2%FBS洗3此后，用含10%FBS的RPMI-1640培养液洗1此并将细胞浓度调至4Xl()6/ml。③MTT法检测化合物对小鼠脾脏淋巴细胞活性的影响小鼠脾脏淋巴细胞悬液100"1(4XIO"孔裙种于96孔板，同时加入不同浓度的化合物，另设相应的溶媒对照及培养液本底对照，总体积为200ul。37°C，5%0)2培养箱中培养上清，再加入150tUDMSO溶解细胞，用酶标仪于570nm处测定OD值。④^-TdR掺入法检测化合物对小鼠脾脏淋巴细胞增殖功能的影响小鼠脾脏淋巴细胞悬液100pl(4xl05/L)接种于96孔板，加入50plConA(终浓度'5吗/ml)，或加入50plLPS(终浓度10吗/ml)，不同浓度化合物50pl，总体积为200pl。每个浓度三复孔，并设相应的无ConA或无LPS对照孔以及无药物对照孔。37°C，5。/。C02培养箱中培养4Sh。培养结束前8小时，每孔加入25^311-胸腺嘧啶核苷酸(10nCi/ml)。继续培养至实验结束。将细胞用细胞收集仪收集至玻璃纤维膜上，加入闪烁液后于Beta记数仪(MicroBetaTrilux,PerkinElmer)读取掺入细胞DNA的4-TdR量，以cpm值代表细胞增殖的情况。(2)试验用样品化合物l,化合物2，化合物3，化合物4，化合物5，化合物6，化合物7，化合物8(3)试验结果Tablel化合物1一8对小鼠脾脏淋巴细胞活性的影响化合物浓度(yg/ml)细胞死亡(％)CC50(yg/ml)35.9410085.271015.66化合物11-9.190.1-2.1810088.691056.53化合物212.360.1-1.6110065.691016.06化合物31-17.070.1-2.3810086.921028.85化合物413.960.11.5810076.86化合物51011.7015.1914,5049.0519.4240.27<table>tableseeoriginaldocumentpage30</column></row><table>10099.78化合物41090.90126.560.114.6210099.92化合物51044.38120.920.19.7710099.19化合物61086.56133.770.113.3010098.77化合物71077.151-2.310.1-17.8010097.18化合物81021.47111.580.1-2.231.2016,21.6324.71.116.1315.033.3124.861.27Table3化合物l一8对ConA诱导的T淋巴细胞增殖功能的影响浓度(yg/ml)T细胞抑制IC50SI(%)(yg/ml)(IC50/CC50)98.91化合物1化合物21001010.11001058.5926.5321.9499.9699.033.4410.50.7020.7143.930.110.3410099.97化合物31095.55115.730.111.3910099.78化合物41090.90126.560.114.6210099.22化合物51040.63115.000,13,7210099.29化合物61086.71148.540.124.8510099.60化合物71082.7419.620.12.0810098.53化合物81039.99110.310,1-12.521.2240.22.179.0;5511,30.6310.83.8313.06.744.71(4)试验结论试验结果表明，该类黄酮类化合物能显著的抑制T细胞与B细胞的增殖，表明该类化合物能够用于制备免疫抑制剂，并对自身免疫性疾病(如类风湿关节炎，红斑狼疮)具有治疗作用，同时由于该类化合物SI值(IC50/CC50)均较高因此，其毒副作用较小，具有较宽的的治疗区间。权利要求1、一种通式I的异黄酮类化合物式中，当编号2与3的碳原子之间为双键时，R1＝H，id="icf0002"file="A2008100417530002C2.tif"wi="65"he="8"top="101"left="44"img-content="drawing"img-format="tif"orientation="portrait"inline="yes"/>R3＝OH，R4＝H或R1＝OH，id="icf0003"file="A2008100417530002C3.tif"wi="59"he="8"top="116"left="47"img-content="drawing"img-format="tif"orientation="portrait"inline="yes"/>R3＝OH，R4＝H或R1＝H，id="icf0004"file="A2008100417530002C4.tif"wi="63"he="10"top="130"left="42"img-content="drawing"img-format="tif"orientation="portrait"inline="yes"/>R3＝OH，R4＝OH或R1＝H，R2与R3形成如下六元环当编号2与3的碳原子之间为单键时，R1＝OH，id="icf0006"file="A2008100417530002C6.tif"wi="59"he="8"top="197"left="47"img-content="drawing"img-format="tif"orientation="portrait"inline="yes"/>R3＝OH或R1＝OH，id="icf0007"file="A2008100417530002C7.tif"wi="59"he="12"top="208"left="47"img-content="drawing"img-format="tif"orientation="portrait"inline="yes"/>R3＝OH或R1＝OH，id="icf0008"file="A2008100417530002C8.tif"wi="59"he="8"top="229"left="48"img-content="drawing"img-format="tif"orientation="portrait"inline="yes"/>R3＝OH。2、一种异黄酮类化合物13'-香叶基-5,7,2',4'-四羟基异黄酮，其特征在于它具有下列结构式和理化性质:化合物l<formula>formulaseeoriginaldocumentpage3</formula>黄色油状物；UV入隱(MeOH):262.0;HREIMS:m/z422.1743[M]+(Calc.422.1729forC25H2606);EIMS:m/z(rel.int.):353(10),299(38),128(38),86(100),69(79),59(61),55(85);ESI-MS:m/z423[M+H]+;IRv隨cm-1(KBr):3352,2924,2854,1649,1610，1500,1448,1364,1306,1259,1200，1167，1150，1094，1051，1038,820;'HNMR(CDCI3):7.93(H-2),6.36(H-6),6.43(H-8)，6.51(H-5,)，6.89(H-6，)，3.56(H-1")，5,31(H-1，)，2.08(H-4"),2.10(H-5"),5.06(H-6"),1.59(H-8"),1.84(H-3"Me),1.67(H-7，，Me);13CNMR(CDCI3):155.5(C-2),123.9(C-3),182.3(C-4),162.7(C-5)，100.5(C-6),163.5(C-7),94.5(C-8),158.2(C-9),105,7(C-10),112.7(C-1，)，154.5(C-2')，117.4(C-3，)，157.5(C-4，)，109.5(C-5，)，128.2(C-6，)，26,6(C-1，，)，121.9(C-2，，),139.1(C-3，，)，39.6(C-4，，)，26.0(C-5，，)，124.1(C-6，，)，132.3(C-7，，)，16.6(C-8，，),15.4(C-3，，Me),23.1(C-7，，Me)。3、一种异黄酮类化合物25,7,4'-三羟基-3'-[7-羟基-3.7-二甲基-2(:E)-辛烯]异黄酮，其特征在于它具有下列结构式和理化性质<formula>formulaseeoriginaldocumentpage3</formula>化合物2白色固体状物，,179.3-180.9;UV入max(MeOH):262.0;HREIMS:m/z424.1890[M]+(Calc.424.1886forC25H2806);EIMSm/z(rel.int.):424(3.5),406(39),338(16),337(22),335(22),321(33)，284(100),283(73),153(60);ESI陽MS:m/z407[M+H]+;IRvmaxcm—1(KBr):3362，2968，2935,1653，1616，1506,1446,1364，1263，1198,1047,825,669;'丽MR(CDCl3):8.12(H-2),6.27(H-6),6.40(H-8)，7.35(H陽2'),6.89(H-5，),7.27(H-6，)，3.38(H-1"),5.40(H-2，，)，2.05(H-4"),1.52(H-5"),1.41(H-6"),1.12(H-8，，)，1.73(H-3，，Me),1.12(H-7"Me);13CNMR(CDCI3):153,5(C-2)，123.7(C-3),181.0(C-4),163,3(C-5)，99.2(C-6),164.4(C-7)，93.8(C-8),158.4(C-9)，105.5(C-10)，122.5(C-1，)，130.5(C-2，)，128.1(C-3，)，155.3(C-4'),I14.9(C-5，)，127.9(C-6，)，28.3(C-1，，)，122.7(C-2")，136.1(C-3"),40.34(C-4，，)，22.7(C-5"),43.7(C-6，，)，69.5(C-7"),29.0(C-8")，15.5(C-3"Me)，29.0(C-7"Me)。4、一种异黄酮类化合物3(5，7二羟基-[6〃-甲基-6〃-(4-甲基-3-戊烯基)吡喃并(2〃，3〃:3',4')]异黄酮)，其特征在于具有下列结构式和理化性质化合物3黄色油状物；UV入隨(MeOH)nm:290.0;HREIMS:m/z404.1635[M]+(Calc.404.1624forC25H2405);EIMSm/z(rel.int.):404(5),322(23),321(100);ESI-MS:m/z405[M+H]+;IRv隨cm"(KBr):3339，2924，1652,1618，1578,1491,1448，1360,1306，1261,1180，1045,831;'HNMR(CDCl3):8.20(H-2)，6.29(H-6),6.42(H-8),7.31(H-2，)，6.85(H-5，),7.33(H-6，)，6.49(H-4"),5.75(H-5")，1.71(H-7"),2.13(H陽8"),5.13(H-9，，),1.57(H-1"),1.40(H-6"Me),1.64(H-10，，Me);13CNMR(CDCI3):153.9(C-2)，123.1(C-3)，181.0(C-4)，163.2(C-5),99.2(C-6)，164.4(C-7)，93.9(C-8),158.9(C-9)，105.4(C-10),123.6(C-1，)，127.4(C-2，),12U(C-3，)，153.6(C-4，)，115.9(C-5，)，130.3(C-6，)，122.7(C-4"),130.0(C陽5"),99.0(C-6"),41.4(C-7"),22.8(C-8，，)，124.3(C-9").131.4(C-10，，)，17.0(C-1"),26,3(C-6"Me)，25.2(C-10"Me)。5、一种异黄酮类化合物44,5,7,4〃,5〃四羟基-[6〃-甲基-6〃-(4-甲基-3-戊烯基)吡喃并(2〃,3〃:3',4')]异黄酮，其特征在于它具有下列结构式和理化性质<formula>formulaseeoriginaldocumentpage5</formula>化合物4黄色油状物UVX隨(MeOH)匿290.0;1HREIMS:m/z442.1989[M]+(Cal.442.1992forC25H30O7);EMSm/zrel.int.:442(5),424(49)，300(42)，299(45)，153(100);ESI-MSm/z:425[M-OH]+;IRv,cm"(KBr):3367,2966,2931,1699,1684，1635,1452，1379,1269,1184,1465，835，800;!HNMR(CDCl3):8.08(H-2)，6.22(H-6)，6.34(H-8)，7.61(H-2，)，6.81(H-5，),7.34(H-6，)，4.58(H-4，，)，3.65(H-5"),1.85(H-7"),2.17(H-8")，5.16(H-9'，)，1.65(H-1")，1.19(H-6"Me),1.69(H-10"Me);13CNMR(CDCI3):153.8(C-2)，123.2(C-3),181.0(C-4)，162.7(C-5),99.0(C-6)，164,9(C-7)，93.7(C-8),158.5(C-9)，105.1(C-10),123.5(C-1')，128.7(C-2，),，124.6(C-3，)，152.9(C-4')，116.5(C-5，)，I29.7(C-6')，69.1(C-4，，)，73.2(C-5"),80,3(C陽6"),38.7(C-7")，2〗.l(C-8"),124.3(C陽9"),13.2(C-10"),16.5(C陽l"),17.1(C-6，，Me)，24.7(C-10，，Me)。6、一种异黄酮类化合物55,7，2',4'-四羟基-3'-[7-羟基-3,7-二甲基-2(E)-辛烯]二氢异黄酮，其特征在于它具有下列结构式和理化性质化合物5黄色油状物；UV入max(MeOH)nm:290.0;IRvmaxCm-'(KBr):3367,2966，2931,1699，1684,1635，1452，1379,1269,1184,1465,835,800;HREIMSm/z442,1989[M+](Cal.442.1992forC25H30O7);EMSm/z(rel.int.):442(5)，424(49),300(42),299(45)，153(100);ESI-MSm/z425[M-OH]十；'HNMR(CDCI3):4.60(H-2a)，4.70(H-2P)，4.17(H-3),5.97(H-6),5.97(H-8),6.43(H-5，)，6.93(H-6，)，3.43(H-1")，，，5.25(H-2"),1.93(H-4"),1.46(H-5，，)，1.36(H-6"),U3(H-8"),1.77(H-3，，Me)，1.13(H-7"Me);13CNMR(CDCI3):70.4(C-2),46.1(C-3)，197.9(C陽4),164.9(C-5)，96.2(C-6),167.0(C-7)，95.1(C-8),163.8(C-9)，102.2(C-10),114.6(C-1，)，154.1(C-2，)，116.3(C-3，)，155.8(C-4，)，107.7(C-5，)，126.5(C墨6'),22.7(C-1"),122.8(C-2"),135.3(C-，，3，，)，40.4(C-4，，)，22.5(C-5,，)，43,7(C-6，，)，69.4(C-7"),29,0(C陽8")，15.6(C-3"Me)，29.0(C-7，，Me)。7、一种异黄酮类化合物63'-香叶基-5,7，2',4'-四羟基异黄酮醇，其特征在于它具有下列结构式和理化性质化合物6黄色油状物UVX隨(MeOH)nm:290.0，230,0;IRv匪cm"(KBr):3304,2926,1639，1614,1450，1379,1263,1614，1450,13791263,1182,1163,1091,835;HREIMSm/z424.1882[M]+(Calc.424.1886forC25H2806);EIMSm/z(rel.int):424(12),301(46),201(26),187(36),179(31)，153(100)，123(60),91(35)，69(80);ESI-MSm/z425[M+H]+;'HNMR(CDCI3):4.66(H-2a),4.76(H-2P)，4.00(H-3),5.95(H-6),5.95(H-8)，6.39(H-5，)，7.12(H-6，)，3.45(H-1，，)，5,24(H-2，，)，2.08(H-4，，)，2.09(H-5")，5.03(H-6").1.57(H-8")，1.80(H-3，，Me),1.65(H-7"Me);13CNMR(CDCI3):70.0(C-2),45.6(C-3),197.5(C-4),165.1(C-5)，97.2(C-6),166.6(C-7),95.8(C-8),163.4(C-9)，102.0(C-10),115.1(C-1，)，154.2(C-2，),U5.8(C國3，)，155,5(C-4，)，108.9(C陽5')，126.1(C-6，)，23,0(C-1，，)，121.7(C-2，，),139.4(C-3"),39.9(C-4")，26.6(C-5"),124.0(C-6"),132.3(C-7，，)，18,0(C-8"),16.5(C-3，，Me),26.0(C-7"Me)。8、一种异黄酮类化合物73'-香叶基-4'-甲氧基-5,7,2'-三羟基二氢异黄酮，其特征在于它具有下列结构式和理化性质化合物7黄色袖状物UV入隱(MeOH)匿288.0,226.0;IRvmaxcm—1(KBr):3342,2966，2925，1643,1634,1495，1454,1385,1315,1275,1227,1182，1163，1094，835,756;HREIMSm/z438.2057[M]+(Calc.438.2042forC26H30O6);EIMSm/z(rel.int):438(28),353(25),327(15)，316(29)，315(100),286(14)，215(22),204(11),203(31)，201(26),189(30),153(48);ESI-MSm/z439[M+H]+;'HNMR(CDCI3):4.66(H-2a),4.76(H-20)，4.00(H-3),5.95(H-6),5.95(H-8),6.39(H-5，)，7.12(H-6，)，3.45(H-1"),5.24(H-2")，2.08(H-4"),2.09(H-5，，)，5.03(H-6"):1.57(H-8"),1.80(H-3"Me)，1.65(H墨7"Me);13CNMR(CDCI3):70.2(C-2),46.1(C-3)，197.8(C陽4)'164.9(C-5),97.1(C-6),166.5(C-7),95.8(C-8),163.6(C-9),102.5(010)，115.3(C-1，)，154.2(C-2，),117.2(C-3，)，158.1(C-4，)，103.9(C-5，)，126.8(C-6，)，22.8(C-1，，)，122.0(C-2")，138.3(C-3")，40.0(C-4，，)，26.7(C-5，，)，124.2(C陽6"),132.0(C陽7"),17.9(C-8"),16.4(C-3，，Me),25.9(C-7"Me),56.0(C-4，OMe)。9、一种异黄酮类化合物83'-香叶基-5,7，4'，5'-四羟基二氢异黄酮,其特征在于它具有下列结构式和理化性质OH化合物8黄色油状物UV入匪(MeOH)匿262.0;IRv匪cm-1(KBr):3371,2964，2922,2854,1650,1614,1574，1514,1441,13671306,1283，1177,1051,839,822,793;HREIMSm/z422.1719[M]十(Calc.422.1729forC25H2606);EIMSm/z(rel.int.):422(16),353(27),337(14)，300(67),153(93)，123(49),69(100);ESI-MSm/z423[M+l]+;tHNMR(CDCl3):7.96(H-2),6.20(H-6)，6.32(H-8),6.32(H-2,)，6,86(H-6，),3.34(H-1"),5.32(H-2"),2.08(H-4"),2.10(H-5，，)，5.06(H墨6"),1.55(H陽8"),1.71(H-3"Me),1.58(H-7"Me);l3CNMR(CDCI3):153.5(C-2),124.0(C-3),181.1(C-4),162.7(C-5),98.9(C-6),165.0(C-7)，93.6(C-8),158.5(C-9),105.2(C-10),121.7(C-1，)，121.0(C-2，),128.5(C-3，)，143.5(C-4，)，144.6(C-5，)，113.6(C-6，)，28.3(C-1"),122.8(C陽2"),135.6(C-3，，)，39.7(C-4，，)，27.9(C-5"),124.2(C-6，，)，131.0(C-7")，I6.6(C-8")，15.0(C-3"Me),24.7(C-7"Me)。10.如权利要求l-9任一项所述的异黄酮类化合物的制备方法，其特征在于该方法包括下列步骤(1)大红袍药材粉碎，用药材5—10倍量W/V60%-90%乙醇溶剂在50-90t:下进行加热提取1-3次，每次0.5—2h，得到提取液；(2)提取液在压力98Kpa，温度50-90'C下减压浓縮，把浓縮液分散在相同重量的水中制成混悬液；(3)用与混悬液等体积的氯仿萃取三次，合并萃取液，氯仿萃取液在压力98Kpa，30-5(TC温度下减压浓縮后得氯仿萃取物；(4)分离化合物i氯仿萃取物用等量得硅胶拌样，用硅胶柱层析进行分离，依次用石油醚:乙酸乙酯5:l—2:1V/V梯度洗脱，得到馏分l，馏分2，馏分3，馏分4，馏分5;馏分1用反相C18柱分离，甲醇:水8:2V/V洗脱，得化合物3;用甲醇:水7:3V/V洗脱得化合物7;馏分2用葡聚糖凝胶LH-20分离，用甲醇洗脱得化合物l;馏分3用反相C18柱分离，甲醇:水7:3V/V，得化合物2;馏分4用反相C18柱分离，甲醇:水6:4V/V得化合物5;馏分5用反相C18柱分离，甲醇:水6:4—7:3V/V洗脱，得化合物8;ii氯仿萃取物用等量硅胶拌样，用硅胶柱层析进行分离，依次用石油醚:丙酮4:l一2:1V/V梯度洗脱，得到馏分1与馏分2，馏分1再用葡聚糖凝胶LH-20分离得到化合物6;馏分2用反相C18柱分离，甲醇:水6:4V/V得化合物4。11、如权利要求l-9任一项所述的异黄酮类化合物在制备免疫抑制剂或治疗免疫性疾病药物中的应用。12、如权利要求1-9任一项所述的异黄酮类化合物在制备B细胞型慢性淋巴细胞白血病药物中的应用。全文摘要本发明公开了式I所示的异黄酮类新化合物。经动物试验结果表明，该类化合物能显著抑制T细胞与B细胞的增殖，可用于制备免疫抑制剂或治疗免疫性疾病的药物。由于该类化合物SI值(IC50/CC50)均较高，因此，其毒副作用较小，具有较宽的治疗区间。本发明化合物从大红袍中提取分离得到，制备方法简便。文档编号C07D311/00GK101648937SQ20081004175公开日2010年2月17日申请日期2008年8月15日优先权日2008年8月15日发明者寿清耀,沈征武申请人:巴塞利亚药业(中国)有限公司