一种黄酮类化合物TA31a及其制备方法与用图
【技术领域】
[0001]本发明属于医药领域，具体涉及一种黄酮类化合物TA31a及其制备方法与用途。
【背景技术】
[0002] 薪蓂子是藏药中常用的一种药物，隶属于十字花科（Brassicaceae)、薪蓂属 (Thlaspi arvense L.)植物菥蓂的干燥种子。据传统医药典籍《神农本草经》以及《中华本 草》记载，菥蓂子性辛、微温。主明目，目痛泪出，益精光，补五脏，除痹，祛风湿，主治目赤肿 痛，迎风流泪，风湿痹痛等。藏药典籍《晶珠本草》记载菥蓂子具有清肾热、肺热，治疗各种肾 病之功效，在藏药中被广泛应用，具有非常重要的作用。目前菥蓂子的研究不是很多，仅少 量文献报道其具有抗肿瘤、抗抑郁以及保肝的作用，国内外尚无其他生物学活性的研究报 道。
[0003] 同时国内外对菥蓂子的化学成分的研究报道较少，主要为菥蓂子油方面的研究。 国内外有少量关于菥蓂子种子油提取工艺、种子油组分分析的报道。如：
[0004] 涂杰等人(涂杰，张新申，李翔等.GC-MS分析菥蓂籽炒香前后挥发油的化学成分及 其变化[J].华西药学杂志，2007，（01): 1-4.;涂杰，张新申，罗霞等.菥蓂籽挥发油的GC/MS 分析[J].化学研究与应用，2006，（ 11): 1340-1342.)利用GC/MS对菥蓂子的挥发油成分进行 了分析，显示菥蓂子挥发油中含有大量的不饱和脂肪酸，且主要的化学成分为4-异硫氰酸 基-1-丁烯和烯丙基异硫氰酸酯。
[0005] Roque L.Evangelista(R.L.Evangelista,T.A.Isbell,S.C.Cermak.Extraction of pennycress(Thlaspi arvense L.)seed oil by full pressing[J]. Industrial Crops and Products,2012,37(1) :76-81.)探讨了种子水分和炒制对薪蓂子压榨性质的影 响，通过固形物含量、游离脂肪酸、颜色、〇&、？、1%、5等含量对其种子油品质进行评价，表明 水分含量低以及炒制过的菥蓂子比水分含量高的具有更高的种子油回收率，且固形物含量 更高，游离氨基酸含量略高，颜色略好，磷脂的含量升高。而硫的含量差别较大，主要取决于 种子的水分和炒制的程度。
[0006] Bryan R.Moser(B.R.Moser,S.N.Shah,J.K.ffinkler-Moser,et al.Composition and physical properties of cress(Lepidium sativum L.)and field pennycress (Thlaspi arvense L.)oiIs[J]. Industrial Crops and Products ,2009,30(2):199-205.)研究了菥蓂子油中脂肪酸谱，维生素 E和植物留醇含量，还测定油的物理性质，其中包 括氧化稳定性，运动粘度，粘度指数，低温流动性，比重，酸值，润滑性和碘值。结果显示，菥 蓂子油含量为29.0%。菥蓂子中的脂肪酸主要由芥酸（32.8%)和亚油酸（22.4%)组成；生 育酚含量为851ppm，并且主要为α-生育酚(714ppm)。菥蓂子中的植物留醇含量为8.55mg/g， 主要为谷留醇和菜油甾醇。
[0007] 黑芥子苷是菥蓂子的标志性成分之一，陈玉等（陈玉，周旻，伍丽萍等.HPLC测定菥 蓂子中的黑芥子苷[J].华西药学杂志，2012,（01) :94-95.)建立了一种简便、重复性好的测 定菥蓂子黑芥子苷的HPLC方法。色谱条件为，以C18为色谱柱，乙腈-20mmol四丁基硫酸氢铵 水溶液=20:80为流动相，检测波长227nm，流速lmL/min。
[0008] 王磊磊等（王磊磊，陈聪，周旻等.近红外漫反射光谱法测定川藏道地药材菥蓂子 中黑芥子苷含量[J].光谱学与光谱分析，2009，（10): 2673-2676.)建立了近红外光谱检测 菥蓂子黑芥子苷的方法。作者首先采用傅里叶变换近红外光谱仪确定菥蓂子的吸收波段， 然后通过软件筛选出最优的检测条件，此方法能在样本量足够大的情况下准备测定出黑芥 子苷的含量。
[0009] 有文献报道称，菥蓂主要是以异牧荆苷为主的黄酮类化合物。成日青等(成日青， 钱宇，郭慧卿等.菥蓂子总黄酮含量的测定[J].中国中医药科技，2012,（05) :430-431.)利 用比色法对菥蓂子中的总黄酮进行测定。70%乙醇进行提取，通过测定方法的选择，考察方 法的线性关系、精密度、稳定性和重复性，建立了以芦丁为对照品，503nm为测定波长， NaN02-A1(N03)3-NaOH的显色法，用于菥蓂子总黄酮含量的测定。
[0010]有作者通过HPLC检测十三味菥蓂胶囊和十三味菥蓂丸中大叶茜草素的含量。张宁 等(张宁，杨晓宏，马晓帆.HPLC法测定十三味菥蓂胶囊中大叶茜草素的含量[J].药物分析 杂志，2007，（09): 1475-1477.)建立了一种以C18为色谱柱，甲醇:0.2%磷酸溶液=85:15为 流动相，250nm为检测波长的检测方法。作者[12]通过全波长扫描，找到最佳的检测波长 270nm，并比较不同方法，最终找到最适的流动相为甲醇:水= 84:16,此方法重复性好、专属 性强。
[0011]涂杰等（涂杰，张新申，罗霞等.菥蓂籽微量元素化学形态研究[J].分析仪器， 2006,（04) :28-33.)采用了原子吸收分光光度法分析了菥蓂子中13种微量元素的含量。菥 蓂子中微量元素的含量特征为:K>Ca>P>Mg>Fe>Na>Zn>Mn>Cu>As>Cd>Pb>C。且菥蓂子中Ca、 1%、1(、？、？6、211等微量元素含量都比较丰富，其中？6与何首乌铁含量相当。
[0012] Hojilia-Evangelista(M.P.Hojilia-Evangelista,R.L.Evangelista, T.A.Isbell,et al.Effects of cold-pressing and seed cooking on functional properties of protein in pennycress(Thlaspi arvense L.)seed and press cakes [J].Industrial Crops and Products,2013,45(0):223-229.)和Selling(G.W.Selling, M.P.Hojilla-Evangelista,R.L.Evangelista,et al.Extraction of proteins from pennycress seeds and press cake[J]. Industrial Crops and Products,2013,41(0): 113-119.)等研究报道了菥蓂子蛋白的提取，冷压和蒸煮对菥蓂子中蛋白功能的影响。通过 不同提取条件的对比，发现提取温度77°C时，菥蓂子蛋白提取率最高35%，而菥蓂子一般蛋 白含量为25 %左右，其他大部分成分都为碳水化合物和油。分析发现，菥蓂子蛋白的氨基酸 组成是典型的植物蛋白，包括甘氨酸、谷氨酸和丙氨酸。另外，比较了不同压榨工艺对菥蓂 子蛋白的影响，以确定其膳食的潜在用途。采取冷压和加热至82°C压榨的提取方法，比较蛋 白的组成和功能性质(溶解性、起泡、乳化以及持水能力）。菥蓂子蛋白主要由白蛋白和球蛋 白组成，少量谷蛋白，无醇溶谷蛋白。蒸煮能使白蛋白和球蛋白含量显著降低。在PH4时，蛋 白溶解度最低为10 %，随着pH值升高也只能达到中等溶解度35-45%。菥蓂子蛋白具有良好 的发泡性和乳化性能，持水能力一般。实验表明，蒸煮会对菥蓂子蛋白产生不利影响，但是 其仍具有有用的功能特性。另外此」；11134￥31^6118丨3[16]还报道了通过盐水萃取或酸沉 淀从菥蓂种子分离蛋白质，评价蛋白质的乳化性、稳定性和发泡性的功能，发现两种方法提 取的蛋白功能性具有差异。
[0013] 本申请的发明人从菥蓂子中分离出一种呈黄色粉末状的黄酮类化合物(6，8，f-三羟基黄酮-7-C-吡喃葡萄糖基-f-O-H"'-吡喃葡萄糖基)吡喃葡萄糖苷），并发现了其医 药用途。
【发明内容】
[0014] 本发明所解决的第一个技术问题是提供一种黄酮类化合物。所述化合物是从菥蓂 子中分离得到，其结构式如式1，命名为6，8，4 ~三羟基黄酮-7-C-吡喃葡萄糖基-4 ~0_ (4~-吡喃葡萄糖基)吡喃葡萄糖苷。本发明化合物呈黄色粉末状，ESI-MSm/z显示其分子量 756，综合 1H-NMR和13C-NMR数据，其分子式为C33H4〇〇2()如下，简称TA31a。
[0016]本发明所解决的第二个技术问题是提供该黄酮类化合物(6,8,4^三羟基黄酮ΙΟ-吡喃葡萄糖基-4 '-0_( 4〃 吡喃葡萄糖基) 吡喃葡萄糖苷 ） 的 制备方法:该黄酮类化合物 的制备方法是以菥蓂子为原料，经浸膏提取、有机溶剂萃取、反相硅胶柱层析、高效液相色 谱分离步骤制备所得，具体为：
[0017] Α、浸膏提取：取薪蓂子，粉碎至20~40目，用90%~100%乙醇回流提取2~5次，每 次40~80min，合并提取液、过滤，减压浓缩至浸膏；
[0018] B、有机溶剂萃取:A步骤浸膏用蒸馏水混悬，加入等体积石油醚(60°C_90°C)萃取5 ~8次，收集水相溶液，加入等体积乙酸乙酯萃取5~8次，收集水相溶液，加入等体积正丁醇 萃取5~8次，收集正丁醇相溶液，减压浓缩至浸膏；
[0019] C、反相硅胶柱层析:B步骤浸膏用乙醇溶解，进行反相硅胶柱层析；以体积配比为 1:9~6:4的乙醇-水溶液进行梯度洗脱，合并相同的部分，收集各部分洗脱液并浓缩；
[0020] D、高效液相色谱分离:C步骤洗脱液的1:9部分进一步用高效液相色谱分离纯化， 即得所述的黄酮类化合物。
[0021 ]上述技术方案中，优选步骤A中的乙醇浓度为90%~100%。
[0022]上述技术方案中，优选步骤B中浸膏用蒸馏水混悬后，分别用石油醚(60°C