一种黄酮类化合物TA34a及其制备方法与用图
【技术领域】
[0001] 本发明属于医药领域，具体设及一种黄酬类化合物TA34a及其制备方法与用途。
【背景技术】
[0002] 新貴子是藏药中常用的一种药物，隶属于十字花科（Brassicaceae)、新貴属 (Thlaspi arvense L.)植物新貴的干燥种子。据传统医药典籍《神农本草经》W及《中华本 草》记载，新貴子性辛、微溫。主明目，目痛泪出，益精光，补五脏，除搏，桂风湿，主治目赤肿 痛，迎风流泪，风湿搏痛等。藏药典籍《晶珠本草》记载新貴子具有清肾热、肺热，治疗各种肾 病之功效，在藏药中被广泛应用，具有非常重要的作用。目前新貴子的研究不是很多，仅少 量文献报道其具有抗肿瘤、抗抑郁W及保肝的作用，国内外尚无其他生物学活性的研究报 道。
[0003] 同时国内外对新貴子的化学成分的研究报道较少，主要为新貴子油方面的研究。 国内外有少量关于新貴子种子油提取工艺、种子油组分分析的报道。
[0004] 如：
[0005] 涂杰等人(涂杰，张新申，李翔等.GC-MS分析新貴巧炒香前后挥发油的化学成分及 其变化[J].华西药学杂志，2007,（01) :1-4.;涂杰，张新申，罗霞等.新貴巧挥发油的GC/MS 分析[J].化学研究与应用，2006，（ 11): 1340-1342.)利用GC/MS对新貴子的挥发油成分进行 了分析，显示新貴子挥发油中含有大量的不饱和脂肪酸，且主要的化学成分为4-异硫氯酸 基-1-下締和締丙基异硫氯酸醋。
[0006] Roque L.Evangelista(R丄.Evangelista,T.A.Isbell,S.C.Cermak.Extraction of pennycress(Thl曰spi 曰rvense L.)seed oil by full pressing!! J]. Industrial Crops and Products，2012，37( 1): 76-81.)探讨了种子水分和炒制对新貴子压棒性质的影 响，通过固形物含量、游离脂肪酸、颜色、Ca、P、Mg、S等含量对其种子油品质进行评价，表明 水分含量低W及炒制过的新貴子比水分含量高的具有更高的种子油回收率，且固形物含量 更高，游离氨基酸含量略高，颜色略好，憐脂的含量升高。而硫的含量差别较大，主要取决于 种子的水分和炒制的程度。
[0007] 化yan R.Mose;r(B.R.Moser,S.N.Shah,J.K.Winkler-Moser,et al.Composition and physical properties of cress(Lepidium sativum L.)and field pennycress (Thlaspi arvense L. )oiIs[J]. Industrial Crops and Products ,2009,30(2): 199- 205.)研究了新貴子油中脂肪酸谱，维生素 E和植物酱醇含量，还测定油的物理性质，其中包 括氧化稳定性，运动粘度，粘度指数，低溫流动性，比重，酸值，润滑性和舰值。结果显示，新 貴子油含量为29.0%。新貴子中的脂肪酸主要由芥酸(32.8%)和亚油酸(22.4%)组成;生 育酪含量为851ppm，并且主要为α-生育酪(714ppm)。新貴子中的植物酱醇含量为8.55mg/g， 主要为谷酱醇和菜油酱醇。
[000引黑芥子巧是新貴子的标志性成分之一，陈玉等（陈玉，周晏，伍丽萍等.HPLC测定新 貴子中的黑芥子巧[J].华西药学杂志，2012,（01) :94-95.)建立了一种简便、重复性好的测 定新貴子黑芥子巧的HPLC方法。色谱条件为，WC18为色谱柱，乙腊-20mmol四下基硫酸氨锭 水溶液=20:80为流动相，检测波长227nm，流速ImL/min。
[0009] 王磊磊等（王磊磊，陈聪，周晏等.近红外漫反射光谱法测定川藏道地药材新貴子 中黑芥子巧含量[J].光谱学与光谱分析，2009，（ 10): 2673-2676.)建立了近红外光谱检测 新貴子黑芥子巧的方法。作者首先采用傅里叶变换近红外光谱仪确定新貴子的吸收波段， 然后通过软件筛选出最优的检测条件，此方法能在样本量足够大的情况下准备测定出黑芥 子巧的含量。
[0010] 有文献报道称，新貴主要是W异牧荆巧为主的黄酬类化合物。成日青等(成日青， 钱宇，郭慧卿等.新貴子总黄酬含量的测定[J].中国中医药科技，2012,（05) :430-431.)利 用比色法对新貴子中的总黄酬进行测定。70%乙醇进行提取，通过测定方法的选择，考察方 法的线性关系、精密度、稳定性和重复性，建立了 W芦下为对照品，503nm为测定波长， NaN02-Al(N03)3-Na0H的显色法，用于新貴子总黄酬含量的测定。
[0011] 有作者通过HPLC检测十Ξ味新貴胶囊和十Ξ味新貴丸中大叶茜草素的含量。张宁 等(张宁，杨晓宏，马晓帆.HPLC法测定十Ξ味新貴胶囊中大叶茜草素的含量[J].药物分析 杂志，2007，（09): 1475-1477.)建立了一种WC18为色谱柱，甲醇:0.2%憐酸溶液=85:15为 流动相，250nm为检测波长的检测方法。作者[12]通过全波长扫描，找到最佳的检测波长 27化m，并比较不同方法，最终找到最适的流动相为甲醇:水= 84:16,此方法重复性好、专属 性强。
[0012] 涂杰等（涂杰，张新申，罗霞等.新貴巧微量元素化学形态研究[J].分析仪器， 2006,（04) :28-33.)采用了原子吸收分光光度法分析了新貴子中13种微量元素的含量。新 貴子中微量元素的含量特征为：1(乂曰沖〉]\%光6〉化〉211〉]\111乂11〉43乂(1〉饥乂。且新貴子中(：曰、 Mg、K、P、Fe、化等微量元素含量都比较丰富，其中化与何首乌铁含量相当。
[0013] Hojilla-Evangelista(M.P.Hoji1la-Evange1i sta,R.L. Evangelista , T.A.Isbell,et al.Effects of cold-pressing and seed cooking on functional properties of protein in pennycress(Thl曰spi 曰rvense L.)seed 曰nd press c曰kes [J].Industrial Crops and Products,2013,45(0):223-229.)和Selling(G.W.Selling, M.P.Hojilla-Evangelista,R.L.Evangelista,et al.Extraction of proteins from pennycress seeds and press c曰ke[J]. Industrial Crops and Products,2013,41(0): 113-119.)等研究报道了新貴子蛋白的提取，冷压和蒸煮对新貴子中蛋白功能的影响。通过 不同提取条件的对比，发现提取溫度77°C时，新貴子蛋白提取率最高35%，而新貴子一般蛋 白含量为25 %左右，其他大部分成分都为碳水化合物和油。分析发现，新貴子蛋白的氨基酸 组成是典型的植物蛋白，包括甘氨酸、谷氨酸和丙氨酸。另外，比较了不同压棒工艺对新貴 子蛋白的影响，W确定其膳食的潜在用途。采取冷压和加热至82Γ压棒的提取方法，比较蛋 白的组成和功能性质(溶解性、起泡、乳化W及持水能力）。新貴子蛋白主要由白蛋白和球蛋 白组成，少量谷蛋白，无醇溶谷蛋白。蒸煮能使白蛋白和球蛋白含量显著降低。在抑4时，蛋 白溶解度最低为10 %，随着pH值升高也只能达到中等溶解度35-45%。新貴子蛋白具有良好 的发泡性和乳化性能，持水能力一般。实验表明，蒸煮会对新貴子蛋白产生不利影响，但是 其仍具有有用的功能特性。另外化jilla-Evangelista[16]还报道了通过盐水萃取或酸沉 淀从新貴种子分离蛋白质，评价蛋白质的乳化性、稳定性和发泡性的功能，发现两种方法提 取的蛋白功能性具有差异。
[0014] 本申请的发明人从新貴子中分离出一种呈黄色粉末状的黄酬类化合物(6,8,4>- Ξ径基黄酬7C-(2"-E-芥子酷基）化喃葡萄糖基-4>-0-(4"f-化喃葡萄糖基）化喃葡萄糖 巧），并发现了其医药用途。
【发明内容】
[0015] 本发明所解决的第一个技术问题是提供一种黄酬类化合物。所述化合物是从新貴 子中分离得到，其结构式如式1，命名为6,8,4>-Ξ径基黄酬7C-(2"-E-芥子酷基)化喃葡萄 糖基-4>-〇-(4"f-化喃葡萄糖基)化喃葡萄糖巧。本发明化合物呈亮黄色粉末状，ESI-MSm/z 显示其分子量960，综合iH-NMR和UC-NMR数据，其化学式为C44也〇〇24，结构式如下：
[0016]
[0017]本发明所解决的第二个技术问题是提供该黄酬类化合物(6,8,4>-Ξ径基黄酬7C- (2"-Ε-芥子酷基)邮喃葡萄糖基-4>-0-(4"f-化喃葡萄糖基)邮喃葡萄糖巧)的制备方法。该 黄酬类化合物的制备方法是W新貴子为原料，经浸膏提取、有机溶剂萃取、反相硅胶柱层 析、高效液相色谱分离步骤制备所得，具体为：
[001引 A、浸膏提取:取新貴子，粉碎至20~40目，用90%~100%乙醇回流提取2~5次，每 次40~80min，合并提取液、过滤，减压浓缩至浸膏；
[0019] B、有机溶剂萃取:A步骤浸膏用蒸馈水混悬，加入等体积石油酸(60°C -90°C)萃取5 ~8次，收集水相溶液，加入等体积乙酸乙醋萃取5~8次，收集水相溶液，加入等体积正下醇 萃取5~8次，收集正下醇相溶液，减压浓缩至浸膏；
[0020] C、反相硅胶柱层析:B步骤浸膏用乙醇溶解，进行反相硅胶柱层析；W体积配比为 1:9~6:4的乙醇-水溶液进行梯度洗脱，合并相同的部分，收集各部分洗脱液并浓缩；
[0021] D、高效液相色谱分离:C步骤洗脱液的4:6部分进一步用高效液相色谱分离纯化， 即得所述的黄酬类化合物。
[0022] 上述技术方案中，优选步骤A中的乙醇浓度为90%~100%。
[0023] 上述技术方案中，优选步骤B中浸膏用蒸馈水混悬后，分