Fgf受体(fgfr)激动剂二聚化合物、其制备方法和其治疗用途【专利摘要】本发明涉及新的杂环化合物、其制备方法和其治疗用途，所述杂环化合物是吡唑并吡啶衍生物，其诱导成纤维细胞生长因子受体(FGFR)二聚化，且具有通式M1-L-M2，其中可以相同或不同的M1和M2各自相互独立地表示单体单元M，且L表示共价连接M1和M2的连接基，所述单体单元如下。【专利说明】FGF受体(FGFR)激动剂二聚化合物、其制备方法和其治疗用途[0001]本发明目标是新的杂环化合物、其制备方法和其治疗用途，所述杂环化合物是诱导成纤维细胞生长因子受体(FGFR)二聚化的吡唑并吡啶衍生物。本发明目标尤其是具有二聚结构的作为FGFR激动剂的新化合物。[0002]FGF是在胚胎发育期间由大量细胞合成的及在各种病理条件下由成年组织的细胞合成的多肽家族。[0003]FGF2(或b-FGF)是这些生长因子中第一个并且鉴定最好的生长因子。FGF2是18kDalton(kDa)蛋白，其诱导许多细胞的增殖、转移和蛋白酶产生，尤其是内皮细胞、纤维母细胞、平滑肌细胞或者骨细胞。借助于两种类型的受体-高亲和性受体酪氨酸激酶(FGFR)和低亲合性乙酰肝素硫酸粘蛋白(HSPG)类型受体(位于细胞表面和胞外基质中)，FGF2与细胞相互作用。由此，FGF2和它的受体表示非常相关的治疗靶向，这种治疗针对血管生成的活化过程及平滑肌细胞、骨细胞和毛囊细胞的再生。[0004]此外，已知的是，细胞表面受体酪氨酸激酶通过质膜传递信息，尤其是通过这些受体的胞外域的二聚机理。[0005]能够激活这些二聚化机理的已知的配体通常是天然化合物，例如FGF、PDGF(血小板生长因子)、VEGF(血管内皮生长因子)、ΕΡ0(红细胞生成素)、G-CSF(粒细胞-克隆刺激因子)、TPO(促血小板生成素)、某些细胞素或胰岛素。[0006]B.Seed(ChemistryandB1logy,November,1994,I,125-129)提出了可以通过拮抗剂的二聚化来构成这些受体的激动剂的一般原理。然而，它并没有描述按照该原理构成的合成分子的实例。例如，SA.Qureshi(PNAS,1999，vol96,no21，12156-12161)、BE.Welm(TheJournalofcellb1logy,2002,vol157,4,703-714)>K.Koide(J.Am.Chem.Soc.，2001，123，398-408)的文章描述了非肽化合物或二聚化的化学诱导剂(CID)，这些化合物作用于嵌合性受体，并且不作用于天然受体。他们没有给出任何能够表明CID可以激活天然受体的信号途径的结果。[0007]在脊椎动物中，在分子量为1734kDa的FGF家族中存在22个成员，并且它们共享13%和71%之间的同源性。这些FGF在基因水平和氨基酸序列水平方面是高度保守的(DOrnitz.&N.1toh,Fibroblastgrowthfactors.GenomeB1logy,30005.1-3005.12,2001)。借助于高亲和性受体酪氨酸激酶(FGF-Rp-R2,-R3>-R4)，FGF与细胞相互作用。FGF的表达说明，它们在发育的过程中具有重要的作用。在FGF家族当中，FGF-2是被最普遍描述的FGF。它是18kDa蛋白，在各种细胞类型上诱导增殖、转移和蛋白酶产生，例如内皮细胞、平滑肌细胞、纤维母细胞、外膜细胞、成骨细胞或毛囊细胞。由此，与FGF2有关的主要治疗领域包括神经元和心血管生理机能、神经再生、伤害感受、组织修复、体内平衡和骨修复。[0008]由此，FGF2和它的受体表示非常相关的治疗靶向，这种治疗以诱导血管生成和动脉生成过程为目标(Khurana,R.&Simons,M.1nsightsfromang1genesistrialsusingfibroblastgrowthfactorforadvancedarter1scleroticdisease.TrendsCard1vascMed13，116-22，2003)。当血管阻塞时，观察到局部缺血现象，其引起器官中的动脉循环降低，由此导致受损组织中的氧浓度降低。体外和体内已经表明，一些生长因子刺激血管生成和动脉生成过程。在药理模型中，绑扎血管之后，FGF2还引起体内新血管化，及并行管的发育。[0009]一些证据表明，FGF2还涉及成血管细胞分化为内皮祖细胞，并由此参与堵塞之后的再血管化(Burger,P.E.等人，Fibroblastgrowthfactorreceptor-lisexpressedbyendothelialprogenitorcells.Blood100，3527-35，2002)。由此，对于局部缺血后的策略，尤其是心脏或冠状动脉的再血管化，以提高血管树的细胞的响应为目标的策略是合适的策略(Freedman，S.B.&Isner，J.M.Therapeuticang1genesisforischemiccard1vasculardisease.JMolCellCard1l33，379-93，2001;Freedman，S.B.&IsnerjJ.M.Therapeuticang1genesisforcoronaryarterydisease.AnnInternMed136，54-71，2002)。[0010]在治疗心脏缺血方面，最有前途的一个临床试验是在肝素的存在下FGF2在藻酸盐微球中螯合的实验(Laham，R.J.等人，Localperivasculardeliveryofbasicfibroblastgrowthfactorinpatientsundergoingcoronarybypasssurgery:resultsofaphaseIrandomized,double-blind,placebo-controlledtrial.Circulat1n100，1865-71，1999)。90天之后，用FGF2治疗的所有患者没有显示出心脏的局部缺血症状。相比较而言，在对照组中，7个患者中的3个患者在90天时具有持久性症状，2个患者依靠血管手术来治疗。有趣的是，跟踪3年之后，仍然保持治疗效果。此外，在治疗冠状动脉狭窄过程中，还进行了将FGF2注射到冠状动脉中的三个临床试验(Laham，R.J.等人，Intracoronarybasicfibroblastgrowthfactor(FGF-2)inpatientswithsevereischemicheartdisease:resultsofaphaseIopen—labeldoseescalat1nstudy.JAmCollCard1l36，2132-9，2000;Simons，M.等人，Pharmacologicaltreatmentofcoronaryarterydiseasewithrecombinantfibroblastgrowthfactor—2:double—blind，randomized,controlledclinicaltrial.Circulat1n105，788-93，2002；Unger,E.F.等人，Effectsofasingleintracoronaryinject1nofbasicfibroblastgrowthfactorinstableanginapectoris.AmJCard1l85，1414-9，2000)。这三个实验的结果表明，冠状动脉内输入FGF2具有更好的耐受性，并且显著地改善了患者的临床病症。[0011]在另一个I期临床试验中，引起跋彳丁的周围动脉疾病的患者接受了FGF2注射剂(Lazarous,D.F.等人，basicfibroblastgrowthfactorinpatientswithintermittentclaudicat1n:resultsofaphaseItrial.JAmCollCard1l36，1239-44，2000)?此时，FGF2在这些患者中具有很好的耐受性，并且临床资料表明了FGF2的有益效果，尤其是改善了周围性疾病患者的行走状况，例如血栓性闭塞性脉管炎或血栓闭塞性脉管炎，这种疾病影响远端血管结构，并且其特点在于腿的远端动脉炎，伴有疼痛和溃疡。[0012]在另一个需要改善血管生成的背景下，在糖尿病大鼠中，恰好清楚地表明，当用携带FGF2的微球浸溃胰腺时，人工胰腺中的血管形成非常明显(SakuraiiTomonOTi；Satake，Akira,SumijShoichirojInouejKazutomojNagatajNatsukijTabatajYasuhik0.TheEfficientPrevascularizat1nInducedbyFibroblastGrowthFactor2WithaCollagen-CoatedDeviceImprovestheCellSurvivalofaB1artificialPancreas.Pancreas.28(3):e70-e79,April2004)。由此，这种再血管化提高了植入的生物人工胰腺的存活率，并因此提高了移植物的存活率。由此，在糖尿病患者中，FGF似乎有助于提高生物人造胰腺移植物的存活率，通常，似乎更有助于提高移植物的再血管化，并且似乎涉及移植物的存活率。[0013]FGF2除了具有引起血管生成的效果之外，FGF2还保护内皮细胞，抵御细胞程序死亡的诱导剂。现在可清楚地表明，FGF2是内皮细胞存活因子(RoleofRafinVascularProtect1nfromDistinctApoptoticStimul1:AAlavi,J.D.Hood,R.Frausto,D.G.Stupack,D.A.Cheresh:Science4July2003:Vol.301.n0.5629，pp.94-96)。急性呼吸窘迫综合征(ARDS)的特征在于心血管和神经精神病学问题。在心血管问题的背景下，患者表现出相当大的血管损伤，尤其是高水平地诱导内皮细胞的细胞程序死亡。近来，Hamacher等人，已经证明，患有ARDS的患者的支气管肺泡的灌洗液体显示出了针对肺微血管内皮细胞的促凋亡活性(Tumornecrosisfactor-alphaandang1statinaremediatorsofendothelialcytotoxicityinbronchoalveolarlavagesofpatientswithacuterespiratorydistresssyndrome.AmJRespirCritCareMed.2002Sepl；166(5):651-6:HamacherJ，LucasR，LijnenHR,BuschkeS，DunantYjWendelA，GrauGE，SuterPM，RicouB.)。[0014]先兆子痫是与血管形成的缺失有关的胎盘的病理性病症(Sherer，D.M.&Abulafia,0.Ang1genesisduringimplantat1n,andplacentalandearlyembryonicdevelopment.Placenta22，1_13，2001)。人们认为，血管形成的这种缺失是由于血管生成的缺失，并且引起胎盘破碎，这会导致胎儿死亡。[0015]治愈是在大多数情况下不需要治疗的组织再生过程。然而，可能出现并发症，例如感染，或出现瘢痕瘤性疤痕，其是病理性的疤痕，特征在于纤维的一致性出现皱褶，或皮肤收缩，导致皮肤的弹性消失。治愈期分5个阶段进行:第一阶段是炎性期，其是组织修复的起点。这种炎性反应导致血管舒张，并且提高病变的渗透性。第二个阶段是血管生成期，能够为细胞提供必需的营养素和氧。第三个阶段是转移阶段:使更新(并因此形成肉芽)的组织处于原位，这时开始产生疤痕。所有的结缔组织细胞迁移至病变的中心，尤其是纤维母细胞和角化细胞。第四个阶段是增殖阶段，该阶段包括结缔组织细胞及与血管形成相关的纤维的大量增殖。最后的阶段是成熟阶段，该阶段是时间最长的阶段，持续18至24天。然后，随着血管数量的减少，纤维母细胞的数量也减少，治愈结束。在糖尿病患者的情况下，治愈是缓慢和艰难的过程，使他们处于极难治愈的长期伤口状态下，经常由于感染现象而变得复杂，这种感染现象可能导致截肢。由于FGF的多种活性，FGF参与组织修复，尤其是通过激活角化细胞和纤维母细胞及通过参与血管生成现象来参与组织修复。由此，从迅速治愈和疤痕性质两种观点看，FGF似乎在提高健康或糖尿病患者的治愈率方面起到一定作用。还清楚地描述了涉及治愈现象的生长因子(尤其是FGF)的水平随着年龄而极大地降低。由此，在老年患者中，治愈缺陷和延迟与皮肤中的FGF缺乏有关。[0016]谷氨酸是背部神经节神经元的假定传感器，缓激肽是在可以激活和敏化感受伤害纤维的炎症期间产生的分子。因此，即使已经体内证明FGF2对感受伤害的纤维没有调控效果，FGF2也可以调节炎性疼痛。然而，已经证明的是，FGF2完全阻断缓激肽刺激的体外谷氨酸释放(Rydh-Rinder等人，(2001)RegulPept102:69-79)。由此,FGF可以在伤害感受和长期疼痛方面起到一定作用。[0017]外周神经病是对运动和/或感觉周围神经的轴突或脱髓鞘损伤，导致远端肢体的灵敏度降低。神经损伤的后果之一是穿孔性溃疡，当对深度反应造成相当大的破坏时尤其可怕，这是由于，在这种情况下，体重出现始终由相同支持点支撑的倾向。糖尿病的主要继发性并发症之一是慢性形成外周神经病。在这方面，已经证明FGF2诱导轴突再生，其可以是治疗周围神经损伤时的治疗选择，并因此可用于治疗外周神经病(Basicfibroblastgrowthfactorisoformspromoteaxonalelongat1nandbranchingofadultsensoryneuronsinvitr0.KlimaschewskiL，NindlWjFeurleJ，KavakebiP，KostronH.Neuroscience.2004；126(2):347-53)。[0018]人们已经提出，FGF系统是肌肉再生及成肌细胞存活和增殖的主要系统(NeuhausjP.等人，Reducedmobilityoffibroblastgrowthfactor(FGF)-deficientmyoblastsmightcontributetodystrophicchangesinthemusculatureofFGF2/FGF6/mdxtriple-mutantmice.MolCellB1l23，6037-48，2003)。为了促进肌肉再生，可以利用FGF2，尤其是在肌肉减少、括约肌中的平滑肌功能丧失的情况下，并且可以用于移植的成肌细胞的存活和发展，尤其是在假肥大型肌营养不良的情况下。生长因子，例如VEGF或FGF2，在局部缺血之后，也似乎会改善心肌灌注(HendeI，R.C.等人，Effectofintracoronaryrecombinanthumanvascularendothelialgrowthfactoronmyocardialperfus1n:evidenceforadose-dependenteffect.Circulat1n101，118-21，2000)。此外，血管网对组织形成和保护也很必要。通过促进营养素、氧和细胞的输送，血管帮助保持组织的功能和结构完整性。在这方面，血管生成和血管发生可以在局部缺血之后保护和灌注组织。由此，生成血管的生长因子，例如FGF2，能够促进组织再生的再血管化。由此，通过直接作用于骨骼肌细胞和血管生成，FGF2对营养不良或正常的肌肉的再生产生影响(Fibbi,G.，D，Aless1jS.，Pucci,M.，CerlettijM.&DelRosso,M.Growthfactor-dependentproliferat1nandinvas1nofmusclesatellitecellsrequirethecell-associatedfibrinolyticsystem.B1lChem383，127-36，2002)。[0019]在主要的生长因子当中，现在清楚确定的是，系统性给予FGF2，能够在骨折之后促进骨修复(Accelerat1noffracturehealinginnonhumanprimatesbyfibroblastgrowthfactor-2.KawaguchiH，NakamuraK，TabataY，IkadaY，AoyamaI，AnzaiJjNakamuraTjHiyamaYjTamuraM.JClinEndocrinolMetab.2001Feb;86(2)，875-880)。在灵长类中，局部使用FGF2(在凝胶基质中)，能够促进骨修复，这表明了FGF2在治疗骨折中的临床用途。[0020]在病理性病例中，或在用细胞毒素试剂治疗之后，内原性过调节FGF7(或KGF)和FGF18，似乎是促进毛囊的增殖、转移和保护的重要机制(ComprehensiveAnalysisofFGFandFGFRExpress1ninSkin:FGF18IsHighlyExpressedinHairFolliclesandCapableofInducingAnagenfromTelogenStageHairFollicles.MitsukoKawanojAkikoKomi—Kuramochi，MasahiroAsadajMasashiSuzuki,JunkoOkijJuJiangandToruImamura)。[0021]本申请人:现在已经发现了能够诱导FGF受体二聚化的新的合成分子，其可以在FGFR所涉及的许多机理中使用，例如血管生成、或平滑肌、骨或毛囊细胞再生。[0022]本发明目标是提供具有二聚结构的新的FGF受体激动剂化合物。[0023]这些化合物引起FGF受体的二聚化，导致它们的活化，最终导致细胞活化。[0024]本发明一个目标是具有下式的FGF受体激动剂化合物:[0025]M1-L-M2[0026]其中可以相同或不同的M1和M2各自相互独立地表示单体单元M，且L表示共价连接札和仏的连接基。[0027]本发明具有式M1-L-M2的激动剂包括两个被称为M1和M2的具有式M的单体单元，它们可以相同或不同，且被选择成各自具有FGFR拮抗剂活性。[0028]本发明一个目标是具有上述式M1-L-M2的FGF受体激动剂化合物，其特征在于所述单体单元M1和M2具有下式:[0029]【权利要求】1.呈碱形式或与酸或碱的加成盐形式的FGF受体激动剂化合物，其具有以下通式:M1-L-M2其中可以相同或不同的M1和M2各自相互独立地表示单体单元M，且L表示共价连接M1和仏的连接基，其特征在于所述单体单元具有以下通式M:其中星号*表示所述单体和所述连接基L之间的连接点，每个单体单元M1和M2的所述连接点位于取代基R或R2中的一个上，R表示氢原子(在该情况下L与M的连接点位于R2上)或基团-CONH*，R1表示氢原子或直链(C1-C3)烷基，R2表示基团-CONH2(在该情况下L与M的连接点位于R上)或-C0NH*，R3表示基团-CO2R4，其中R4表示氢原子或直链(C「C4)烷基，X是选自氟、氯和溴原子的卤素原子。2.权利要求1的呈碱形式或与酸或碱的加成盐形式的FGF受体激动剂化合物，其特征在于R1表不氢原子。3.前述权利要求中任一项的呈碱形式或与酸或碱的加成盐形式的FGF受体激动剂化合物，其特征在于R3表不基团-CO2R4,其中R4表不氢原子。4.前述权利要求中任一项的呈碱形式或与酸或碱的加成盐形式的FGF受体激动剂化合物，其特征在于X表示氟原子。5.权利要求1至4中任一项的呈碱形式或与酸或碱的加成盐形式的FGF受体激动剂化合物，其特征在于:R表示基团-CONH*,其中星号*首先表示L与单体单元M1的连接点,然后表示L与单体单元M2的连接点，R1表不氢原子或直链(C1-C3)烷基,且优选为氢原子。6.权利要求1至5中任一项的呈碱形式或与酸或碱的加成盐形式的FGF受体激动剂化合物，其特征在于R位于间位或对位。7.权利要求1至4中任一项的呈碱形式或与酸或碱的加成盐形式的FGF受体激动剂化合物，其特征在于:R表不氢原子，R2表示基团-CONH*,其中星号*首先表示L与单体单元M1的连接点,然后表示L与单体单元M2的连接点。8.权利要求1至7中任一项的呈碱形式或与酸或碱的加成盐形式的FGF受体激动剂化合物，其特征在于连接基L可以更尤其选自下列PEG基团:其中星号*表示取代基R*或R2*上L与单体单元M连接的原子；η表示2至6的整数。9.权利要求1至8中任一项的呈碱形式或与酸或碱的加成盐形式的FGF受体激动剂化合物，其特征在于η是整数3或4。10.前述权利要求中任一项的化合物，其特征在于其选自下列化合物:化合物编号1:3，3’-{乙-1,2-二基二[氧基丙-3，1-二基氛甲酸基(3_苯基-1H-批唑并[3，4-b]吡啶-4，6-二基)]}二(6-氟苯甲酸)；化合物编号2:5_[4-({15-[6-(3-羧基-4-氟苯基)-3-苯基-1H-吡唑并[3，4_b]吡啶-4-基]-15-氧代-4，7，10-三氧杂-14-氮杂十五烷_1_基}氨甲酰基)_3_苯基-1H-吡唑并[3,4-b]吡啶-6-基]-2-氟苯甲酸；化合物编号3:5-[4-({16-[6-(3_羧基-4-氟苯基)-3-苯基-1H-吡唑并[3，4_b]吡啶-4-基]-16_氧代-3，6，9，12-四氧杂-15-氮杂十六烷-1-基}氨甲酰基)_3_苯基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-6-基]-2-氟苯甲酸；化合物编号4:5_[4-({19-[6-(3-羧基-4-氟苯基)-3-苯基-1H-吡唑并[3，4_b]吡啶-4-基]-19-氧代-3，6，9，12，15-五氧杂-18-氮杂十九烷-1-基}氨甲酰基)_3_苯基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-6-基]-2-氟苯甲酸；化合物编号5:5-[4-({21-[6-(3-羧基-4-氟苯基)-3-苯基-1H-吡唑并[3，4_b]吡啶-4-基]-21-氧代-4，7，10，13，16-五氧杂-20-氮杂二十一烷_1_基}氨甲酰基)_3_苯基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-6-基]-2-氟苯甲酸；化合物编号6:5_(4-氨甲酰基-3-{3-[(15-{3-[4-氨甲酰基-6-(3-羧基_4_氟苯基)-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-3-基]苯基}-15-氧代-4，7，10_三氧杂_14_氮杂十五烷-1-基)氨甲酰基]苯基}-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-6-基)-2-氟苯甲酸；化合物编号7:3，3’-{乙-1，2-二基二[氧基乙-2，1-二基氨甲酰基苯_3，1-二基(4-氨甲酰基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-3，6-二基)]}二(6-氟苯甲酸)；化合物编号8:5-(4-氨甲酰基-3-{4-[(15-{4-[4-氨甲酰基-6-(3-羧基-4-氟苯基)-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-3-基]苯基}-15-氧代-4，7，10-三氧杂-14-氮杂十五烷-1-基)氨甲酰基]苯基}-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-6-基)-2-氟苯甲酸；化合物编号9:3，3’-{乙-1,2-二基二[氧基乙_2，1-二基氛甲酸基苯-4，1-二基(4-氨甲酰基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-3，6-二基)]}二(6-氟苯甲酸)。11.制备权利要求1至10中任一项的FGF受体激动剂化合物的方法，所述方法包括使至少一种含有至少一个羧基的单体与活化后的具有式H2N-L-NH2的反应物反应。12.一种药物，其特征在于其含有权利要求1至10中任一项的FGF受体激动剂化合物或该化合物与药用酸或碱的加成盐。13.权利要求1至10中任一项的FGF受体激动剂化合物，其作为药物。14.一种药物组合物，其特征在于其含有权利要求1至10中任一项的化合物或该化合物的药用盐及至少一种药用赋形剂。15.权利要求1至10中任一项的FGF受体激动剂化合物在制备用于治疗需要FGF受体活化的疾病的药物中的用途。16.权利要求1至10中任一项的FGF受体激动剂化合物，其用于治疗心脏缺血、治疗与动脉狭窄或阻塞相关的疾病或动脉炎、治疗心绞痛、治疗血栓闭塞性脉管炎、治疗动脉粥样硬化、对血管成形术后或颈动脉内膜剥脱术后的再狭窄进行抑制的治疗、愈合治疗、肌肉再生治疗、成肌细胞存活治疗、治疗肌肉减少症、使括约肌中的平滑肌丧失功能、治疗伤害感受和治疗慢性疼痛、治疗外周神经病、在糖尿病患者中提高生物人造胰腺移植物存活的治疗、使与减轻肥胖症相关的胆固醇得以降低的治疗、提高移植物再血管化和移植物存活的治疗、治疗视网膜变性、治疗色素性视网膜炎、治疗骨关节炎、治疗先兆子痫、治疗血管病变和急性呼吸窘迫综合征、骨保护治疗或毛囊保护治疗。【文档编号】C07D519/00GK104136434SQ201280070640【公开日】2014年11月5日申请日期:2012年12月26日优先权日:2011年12月28日【发明者】M-L·克拉里-切卡托,N·吉洛申请人:赛诺菲