表没食子儿茶素没食子酸酯烷基化衍生物及其抗肿瘤应用的制作方法
【专利摘要】本发明公开了一种表没食子儿茶素没食子酸酯烷基化衍生物及其抗肿瘤应用，本发明的表没食子儿茶素没食子酸酯烷基化衍生物具有抑制肝癌的作用，能增强蒽环类抗癌药疗效，并降低其毒性。
【专利说明】表没食子儿茶素没食子酸酯烷基化衍生物及其抗肿瘤应用
【技术领域】
[0001]本发明属于制药领域，具体而言，涉及一种表没食子儿茶素没食子酸酯烷基化衍生物制备及其抗肿瘤应用。
【背景技术】
[0002]肝癌是广西的区域性高发肿瘤，在我国广西、广东等肝癌高发区肝癌死亡率超过总癌症死亡率50%以上，严重危害劳动人民的健康与生命安全，因此如何提高肝癌的治疗疗效迫在眉睫。蒽环类药物是最有效的抗肿瘤药物之一，包括柔红霉素(DNR)和阿霉素(D0X)，被广泛应用于肿瘤的临床治疗。但在人类肝脏中广泛存在的羰基还原酶I(carbonylreductasel, CBRl)能将柔红霉素(DNR)转化成一种新的醇代谢物柔红霉素醇(DNR0L)。该代谢物不仅抗肿瘤活性降低，还可产生心脏毒性。这一代谢特点大大限制了它的临床应用。寻找羰基还原酶I的抑制剂对于此类抗生素的增效减毒很有必要。
[0003]缺氧诱导因子(HIFs)所介导的信号转导通路与肿瘤发生、发展和耐药密切相关。缺氧条件下，细胞通过高表达HIF-1 α，促进下游靶基因的转录，这些下游靶基因转录的蛋白在缺氧反应中起关键作用，如血管生成、细胞增殖、糖代谢和细胞存活等。HIF-1 α介导肿瘤新生血管形成和多药耐药原因主要有:(1)缺氧情况下，过表达的HIF-Ια调控其下游多种与血管生成有关的因子及其受体，如血管内皮生长因子(VEGF)，使VEGF高表达，促进肿瘤组织中新生血管的形成。(2) HIF-Ια激活CBRl的表达，增加肝癌细胞对顺钼及阿霉素等蒽环类药物的耐受性。(3)HIF-la通过诱导多药耐药基因I (MDRl)的表达，使糖蛋白(P-gp)表达增高从而实 现七对肿瘤耐药的调控。因此，HIF-1 α可作为潜在的抗肿瘤药物筛选的靶点。
[0004]表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)药理作用广泛，具有抗氧化、降血脂、抗紫外线辐射、抑菌等作用，也具有明显的抗肿瘤作用。EGCG通过抑制HIF-1 α蛋白的增加和VEGF/VEGFR的活性而抑制肝癌细胞的生长和肝癌新生血管的生成。还可通过抑制CBRl活性，增强DNR的抗肿瘤效果，降低其心脏毒性。但由于EGCG结构中含有大量酚羟基，性质不稳定，易氧化变性，脂溶性差，生物利用度低、体内代谢快，维持时间短，作用强度有待提高。因此，对EGCG开展结构修饰优化研究是本领域的一个重要课题。
[0005]到目前为止，还没有EGCG烷基化衍生物增强蒽环类抗癌药疗效，并降低其毒性的报道。
【发明内容】
[0006]本发明的目的是提供一种表没食子儿茶素没食子酸酯烷基化衍生物及其抗肿瘤应用，为了实现本发明的目的，拟采用如下技术方案:
[0007]本发明一方面涉及一种表没食子儿茶素没食子酸酯烷基化衍生物，所述的表没食子儿茶素没食子酸酯烷基化衍生物选自:
[0008]①5，7，3' ,4' ,5' ，3"，4"，5"-八 _0_ 乙基—EGCG、[0009]②5，7，3' ,4' ，3"，4"，5"-七 _0_ 乙基—EGCG、
[0010]③5，7，4' ,5'，3"，4"，5"-七 _0_ 乙基-EGCG、
[0011]④5，7，3' ,4'，3"，4"-六 _0_ 乙基-EGCG、
[0012]⑤5，3' ,4' ,5'，3"，4"，5"-七 _0_ 乙基-EGCG、
[0013]⑥5，3' ,4'，3"，4"，5"-六 _0_ 乙基-EGCG、
[0014]⑦5，7，3' ,4' ,5'，3"，4"，5"-八 _0_ 丙基-EGCG、
[0015]⑧5，7，4' ,5'，3"，4"，5"-七 _0_ 丙基-EGCG ;
[0016]优选的，所述的表没食子儿茶素没食子酸酯烷基化衍生物为5,7,3' ,4'，3"，4"-六-0-乙基46〇6(74)或5，3/ ,4'，3"，4"，5"-六-O-乙基-EGCG (y6)
[0017]在本发明的另一方面，本发明还涉及含有上述表没食子儿茶素没食子酸酯烷基化衍生物的药物组合物。
[0018]在本发明的一个优选实施方式中，所述的药物组合物中还包括药学上可接受的辅料和/或赋形剂。
[0019]在本发明的另 一个优选实施方式中，所述的药物组合物中包括有效量的蒽环类抗肿瘤药物，优选的，表没食子儿茶素没食子酸酯烷基化衍生物与蒽环类抗肿瘤药物的重量比是 100:1-10:1。
[0020]在本发明的一个优选实施方式中，所述的蒽环类抗肿瘤药物为柔红霉素(DNR)和/或阿霉素(D0X)。
[0021 ] 本发明另一方面涉及上述表没食子儿茶素没食子酸酯烷基化衍生物或药物组合物在制备治疗肝癌的药物中的应用。
[0022]在本发明中，如果无特殊说明，在化学名与结构式发生冲突时，以结构式为准， 申请人:保留基于结构式修改化学名的权利。
[0023]本发明的表没食子儿茶素没食子酸酯烷基化衍生物具有抑制肝癌的作用，能增强蒽环类抗癌药疗效，并降低其毒性。
【专利附图】
【附图说明】
[0024]图1.EGCG和其三种衍生物对班马鱼心脏搏出量(strokevolume)的影响
[0025]其中:AcEGCG为表没食子儿茶素没食子酸酯全乙酰化衍生物，EGCG为表没食子儿茶素没食子酸酯；Y3为5，7，4'，5'，3"，4"，5"-七-O-乙基-EGCG ;Y6为5，3'，4'，3"，4"，5"-六-O-乙基-EGCG。□为空白对照组；.为阿霉素组；其余条图纹为阿霉素加受试药组。
【具体实施方式】:
[0026]一、表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)烷基化衍生物合成
[0027]1.EGCG烷基化衍生物合成
[0028]1.1乙基化EGCG合成反应
[0029]秤取5gEGCG为反应底物，加入200-800ml丙酮做反应介质，加入2_8gK2C03做催化剂，水浴50-85°C搅拌回流，用恒压滴液漏斗滴加20-80ml (CH3CH2O) 2S02做乙基供体，水浴搅拌回流反应12-36h，薄层层析检测反应的进程。反应液用冰醋酸调节pH=4-7，转移到烧瓶内，减压蒸馏除去溶剂得到残留物，加入乙酸乙酯溶解残留物，转移到分液漏斗内，并用纯化水洗涤，直到下层流出液为中性为止。取乙酸乙酯层，减压蒸馏除去溶剂，得到乙基化反应的混合产物，有待于进行分离纯化。
[0030]1.2丙基化EGCG合成反应
[0031]秤取5gEGCG为反应底物，加入200_800ml丙酮做反应介质，加入2_8ggK2C03做催化剂，水浴50-85°C搅拌回流，用恒压滴液漏斗滴加20-80mlCH3CH2CH2I做丙基供体，水浴搅拌回流反应12-36h，薄层层析检测反应的进程。反应液用冰醋酸调节pH=4-7，转移到烧瓶内，减压蒸馏除去溶剂得到残留物，加入乙酸乙酯溶解残留物，转移到分液漏斗内，并用纯化水洗涤，直到下层流出液为中性为止。取乙酸乙酯层，减压蒸馏除去溶剂，得到丙基化反应的混合产物，有待于进行分离纯化。
[0032]2.采用中压制备液相色谱法分离纯化反应产物。对纯化得到的化合物，通过1H-NMR, 13C-NMR, 2DNMR、质谱等方法进行结构鉴定。
[0033]结果:共分离得到8个烷基化程度较高的EGCG衍生物，结构鉴定分别为:
[0034]①5,7,3' ,4' ,5' ，3"，4"，5"-八 _0_ 乙基—EGCG (yl)、
[0035]②5,7,3' ,4'，3"，4"，5"-七 _0_ 乙基-EGCG (y2)、
[0036]③5,7,4' ,5'，3"，4"，5"-七 _0_ 乙基-EGCG (y3)、
[0037]④5,7,3' ,4'，3"，4"-六 _0_ 乙基-EGCG (y4)、
[0038]⑤5，3' ,4' ,5'，3"，4"，5"-七 _0_ 乙基-EGCG (y5)、
[0039]⑥5,3' ,4'，3"，4"，5"-六 _0_ 乙基-EGCG (y6)、
[0040]⑦5，7，3' ,4' ,5' ，3"，4"，5"-八 _0_ 丙基-EGCG (bl)、
[0041](8)5, TA'，5'，3"，4"，5"-七 _0_ 丙基-EGCG (b2)
[0042]3.乙基化EGCG产物(yl, y2, y3, y4, y5, y6共6个化合物)结构解析
[0043]3.1 化合物 yl 命名为:5，7，3' ,4' ,5'，3"，4"，5"-八 _0_ 乙基-EGCG，分子式为C38H5tlO11,结构式如下:
[0044]
【权利要求】
1.一种表没食子儿茶素没食子酸酯烷基化衍生物及其抗肿瘤应用，所述的表没食子儿茶素没食子酸酯烷基化衍生物及其抗肿瘤应用，所述的衍生物选自: ①5，7，3' ,4' ,5' ，3"，4"，5"-八-O-乙基-EGCG、 ②5，7，3' ,4'，3"，4"，5"-七-O-乙基-EGCG、 ③5，7，4' ,5'，3"，4"，5"-七-O-乙基-EGCG、 ④5，7，3' ,4'，3"，4"-六-O-乙基-EGCG、 ⑤5，3' ,4' ,5'，3"，4"，5"-七-O-乙基-EGCG、 ⑥5，3' ,4'，3"，4"，5"-六-O-乙基-EGCG、 ⑦5，7，3' ,4' ,5' ，3"，4"，5"-八-O-丙基-EGCG、 ⑧5，7，4' ,5'，3"，4"，5"-七-O-丙基-EGCG ; 优选的，所述的表没食子儿茶素没食子酸酯烷基化衍生物及其抗肿瘤应用为5,7,3' ，4 ' ，3 "，4 "-六-O-乙基-EGCG 或 5，3 ' ，4 ' ，3 "，4 "，5 "-六-O-乙基-EGCG。
2.含有权利要求1所述的表没食子儿茶素没食子酸酯烷基化衍生物的药物组合物。
3.根据权利要求2所 述的药物组合物，所述的药物组合物中还包括药学上可接受的辅料和/或赋形剂。
4.根据权利要求2所述的药物组合物，所述的药物组合物中包括有效量的蒽环类抗肿瘤药物，优选的，表没食子儿茶素没食子酸酯烷基化衍生物与蒽环类抗肿瘤药物的重量比是 100:1-10:1 ;优选是 40:1-60:1。
5.根据权利要求4所述的药物组合物，所述的蒽环类抗肿瘤药物为柔红霉素(DNR)和/或阿霉素(DOX)。
6.权利要求1所述的表没食子儿茶素没食子酸酯烷基化衍生物制备及其抗肿瘤作用在制备治疗肝癌的药物中的应用。
7.权利要求2-5任意一项所述的组合物在制备治疗肝癌的药物中的应用。
【文档编号】C07D311/62GK103833719SQ201410087455
【公开日】2014年6月4日 申请日期:2014年3月11日 优先权日:2014年3月11日
【发明者】梁钢, 李丽, 刘布鸣, 李铭源 申请人:广西医科大学