一种井冈霉素原粉的制备方法
【专利摘要】本发明公开了一种井冈霉素的制备方法：将井冈霉素发酵液高速离心去除菌丝体，离心液先用孔径为1-10μm的陶瓷微滤膜过滤，然后向滤液中按重量加入纳米二氧化硅，纳米氧化铝，热塑性丙烯酸树脂、HLB值为15-20的表面活性剂，搅拌10-30分钟，并将滤液调节pH至7.5-8.5，用截留分子量为10000-20000道尔顿的中空纤维超滤膜过滤，收集滤液，活性炭脱色后，浓缩、干燥即得。本发明能制得井冈霉素A和井冈霉素B含量高的井冈霉素原粉，同时超滤效率高，超滤膜使用寿命长，另外还具有步骤简单，生产周期短、效率高等特点。
【专利说明】一种井冈霉素原粉的制备方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种井R霉素原粉的制备方法。
【背景技术】
[0002]井网霉素是一种高效、安全的农用抗生素，主要用于预防水稻和小麦纹枯病，它是由吸水链霉菌井R变种发酵制备而成。井R霉素由A、B、C、D、E、F等组分组成，其中A组分活性最强，A、B同时存在有增效作用，而C、D、E、F等组分几无作用。
[0003]目前国内生产的井R霉素原粉一般没有经过分离提纯，只是将发酵液进行简单过滤处理，这种方法生产的井R霉素杂质含量高，颜色深，有效成分含量低，井R霉素A的含量一般低于30%，只能制备低端农用产品。CN101497636A的中国专利公开了一种井冈霉素A原粉的制备方法，该方法包括过滤、离子交换、树脂吸附等步骤，最后得到75%以上含量的井R霉素A。该方法步骤多，生产周期长，成本大，难以推广。
[0004]膜分离技术是一项新兴的高效分离技术，超滤技术是其中的一种，其基本原理是利用膜孔选择性筛分性能，以分离、提纯和浓缩物质。在超滤过程中，由于被截留的杂质如氨基酸、蛋白、多糖及大分子无机物在膜表面上不断积累，会产生浓差极化现象，当膜面杂质浓度达 到某一极限时即生成凝胶层，使膜的通透性急剧下降，这使得超滤的应用受到极大程度地限制。
【发明内容】
[0005]本发明的目的是针对上述缺陷，提供一种步骤少、效率高、操作简单且井网霉素A含量高的井R霉素原粉制备方法。
[0006]上述目的是通过以下技术方案实现的:
[0007]一种井R霉素原粉的制备方法，该方法是:将井R霉素发酵液高速离心去除菌丝体，离心液先用孔径为1-10 μ m的陶瓷微滤膜过滤，然后向滤液中按重量加入0.1-0.5%的纳米二氧化硅，0.3-0.8%的纳米氧化铝，0.5-1%的热塑性丙烯酸树脂、0.1-0.5%的HLB值为15-20的表面活性剂，搅拌10-30分钟，并将滤液调节pH至7.5-8.5，用截留分子量为10000-20000道尔顿的中空纤维超滤膜过滤，收集滤液，活性炭脱色后，浓缩、干燥即得。
[0008]优选的，所述HLB值为15-20的表面活性剂为吐温20。
[0009]进一步优选的，所述高速离心的转速为10000-12000转/分。
[0010]再进一步优选的，所述中空纤维超滤膜过滤的进液口压力为0.3-0.5MPa，出液口压力为 0.1-0.3MPa，流速为 0.5-0.8m/s。
[0011]本发明中所使用的纳米二氧化硅颗粒粒径在7-40纳米之间，具有极其蓬松的结构，分子之间具有巨大的空隙，其比表面积在70-400m/g之间，具有极强的抗流变性与触变性功能，在本发明中用于吸附杂质和防沉淀。
[0012]纳米氧化铝具有比表面较大、孔隙率高、粒度分布均匀、分散效果好等特点，在本发明中用于吸附杂质和防沉淀。[0013]热塑性丙烯酸树脂属于凝胶树脂，其在水中分散后，形成在水中溶胀，但实质上不溶于水的凝胶溶液。它不仅能用于吸附溶液中的杂质，还能改变溶液的流变性，使溶液更容易通过超滤膜。
[0014]HLB值为15-20的表面活性剂用于改善溶液的流变性，使其更容易通过超滤膜。
[0015]本发明的有益效果是:
[0016]I)本发明通过大量试验选择出10000-20000道尔顿的中空纤维超滤膜，通过该孔径的超滤膜正好能最大限度地除去井R霉素发酵液中的氨基酸、蛋白、多糖及大分子无机物等杂质，获得井R霉素A含量大于60%的井R霉素原粉。
[0017]2)本发明获得的井冈霉素原粉中井冈霉素B的含量大于15%，明显高于CN101497636A的专利方法，该效果是意料不到的。由于该效果，导致产品的增效作用更强。
[0018]3)本发明克服了现 有技术中超滤膜易堵塞导致超滤效率低，超滤膜使用寿命短等技术障碍，本发明中的超滤膜每小时可过滤150~200L料液，可连续过滤10小时以上。
[0019]4)本发明步骤简单，生产周期短，效率高。
【具体实施方式】
[0020]下面结合实施例对本发明进行详细说明。
[0021]实施例1
[0022]一种井R霉素原粉的制备方法，该方法是:将井R霉素发酵液用12000转/分的转速高速离心去除菌丝体，离心液先用孔径为5 μ m的陶瓷微滤膜过滤，然后向滤液中按重量加入0.2%的纳米二氧化硅，0.5%的纳米氧化铝，0.8%的热塑性丙烯酸树脂、0.2%的吐温20，搅拌30分钟，并将滤液调节pH至8，用截留分子量为15000道尔顿的中空纤维超滤膜过滤，进液口压力为0.4MPa，出液口压力为0.2MPa，流速为0.6m/s，收集滤液，活性炭脱色后，减压浓缩、真空干燥，即得。
[0023]按CN103175906A的方法检测，本实施例得到的井冈霉素原粉中井冈霉素A含量为63.5%，井冈霉素B含量为15.7%，而CN101497636A中的井冈霉素A含量为76.7%，井冈霉素B含量仅为3.3%。从发酵液开始制备IKg井冈霉素原粉，本实施例总共需要25小时，而CN101497636A总共需要3天。
[0024]另外，与用孔径为5μπι的陶瓷微滤膜过滤后，滤液不进行处理就直接用截留分子量为15000道尔顿的中空纤维超滤膜过滤相比，本发明中的超滤膜可连续过滤15小时，而滤液未经处理的超滤膜仅能连续过滤2小时，且每小时仅能过滤45L。
[0025]实施例2
[0026]一种井R霉素的制备方法，该方法是:将井R霉素发酵液用10000转/分的转速高速离心去除菌丝体，离心液先用孔径为I μ m的陶瓷微滤膜过滤，然后向滤液中按重量加入
0.1 %的纳米二氧化硅，0.8%的纳米氧化铝，0.5%的热塑性丙烯酸树脂、0.1%的吐温20，搅拌10分钟，并将滤液调节PH至8.5，用截留分子量为20000道尔顿的中空纤维超滤膜过滤，进液口压力为0.3MPa，出液口压力为0.1MPa，流速为0.5m/s，收集滤液，活性炭脱色后，减压浓缩、真空干燥，即得。
[0027]按CN103175906A的方法检测，本实施例得到的井冈霉素原粉中井冈霉素A含量为60.8%，井冈霉素B含量为15.1%。[0028]实施例3
[0029]一种井R霉素的制备方法，该方法是:将井R霉素发酵液用12000转/分的转速高速离心去除菌丝体，离心液先用孔径为10 μ m的陶瓷微滤膜过滤，然后向滤液中按重量加入0.5%的纳米二氧化硅，0.3%的纳米氧化铝，I %的热塑性丙烯酸树脂、0.5%的吐温20，搅拌15分钟，并将滤液调节pH至7.5，用截留分子量为10000道尔顿的中空纤维超滤膜过滤，进液口压力为0.5MPa，出液口压力为0.3MPa，流速为0.8m/s，收集滤液，活性炭脱色后，减压浓缩、真空干燥，即得。
[0030]按CN103175906A的方法检测，本实施例得到的井冈霉素原粉中井冈霉素A含量为58.4%，井冈霉素B 含量为16.2%。
【权利要求】
1.一种井网霉素原粉的制备方法，其特征在于:将井网霉素发酵液高速离心去除菌丝体，离心液先用孔径为1-10 μ m的陶瓷微滤膜过滤，然后向滤液中按重量加入0.1-0.5%的纳米二氧化硅，0.3-0.8%的纳米氧化铝，0.5-1%的热塑性丙烯酸树脂、0.1-0.5%的HLB值为15-20的表面活性剂，搅拌10-30分钟，并将滤液调节pH至7.5-8.5，用截留分子量为10000-20000道尔顿的中空纤维超滤膜过滤，收集滤液，活性炭脱色后，浓缩、干燥即得。
2.根据权利要求1所述的井冈霉素原粉的制备方法，其特征在于:所述HLB值为15-20的表面活性剂为吐温20。
3.根据权利要求1所述的井网霉素原粉的制备方法，其特征在于:所述高速离心的转速为 10000-12000 转 / 分。
4.根据权利要求1所述的井网霉素原粉的制备方法，其特征在于:所述中空纤维超滤膜过滤的进液口压 力为0.3-0.5MPa，出液口压力为0.1-0.3MPa，流速为0.5-0.8m/s。
【文档编号】C07H1/06GK104017037SQ201410200276
【公开日】2014年9月3日 申请日期:2014年5月13日 优先权日:2014年5月13日
【发明者】李青, 刘华梅, 杨克华, 刘荷梅, 程治国, 周莉, 邹维 申请人:武汉科诺生物科技股份有限公司