基于喹啉的激酶抑制剂的制作方法

文档序号：11887174阅读：430来源：国知局

本申请要求2014年1月31日提交的临时专利申请USSN 61/934,152的优先权，将其全部内容通过引用的方式并入本申请。

技术领域

本发明大体涉及可抑制连接蛋白相关激酶1(adaptor associated kinase 1,AAK1)的化合物、包含所述化合物的组合物和抑制AAK1的方法。

背景技术：

连接蛋白相关激酶1(AAK1)为丝氨酸/苏氨酸激酶的Ark1/Prk1家族的成员。AAK1mRNA以两种剪切形式存在，称为短形式和长形式。长形式占主导且在脑和心脏中高度表达(Henderson and Conner,Mol.Biol.Cell.2007,18,2698-2706)。AAK1富集在突触体制备物(synaptosomal preparation)中且在培养的细胞中与细胞内吞结构共定位。AAK1调节网格蛋白(clatherin)包覆的细胞内吞作用，其为突触小泡循环利用和受体介导的细胞内吞中重要的过程。AAK1与AP2复合物结合，该复合物为使受体运载物(cargo)与网格蛋白包覆物连接的异源四聚体。网格蛋白与AAK1的结合刺激AAK1激酶活性(Conner et.al.,Traffic 2003,4,885-890；Jackson et.al.,J.Cell.Biol.2003,163,231-236)。AAK1磷酸化AP-2的mu-2亚基，其促进mu-2与运载物受体上含酪氨酸的分选模序(sorting motif)结合(Ricotta et.al.,J.Cell Bio.2002,156,791-795；Conner and Schmid,J.Cell Bio.2002,156,921-929)。Mu2磷酸化对于受体摄入不是必需的，但磷酸化提高了内化的效率(Motely et.al.,Mol.Biol.Cell.2006,17,5298-5308)。

AAK1已被鉴定为PC12细胞中神经调节蛋白-1/ErbB4信号传导的抑制剂。经由RNA干扰介导的基因沉默或用激酶抑制剂K252a(其抑制AAK1激酶活性)处理使AAK1表达丧失导致神经调节蛋白-1诱导的神经突过度增生(outgrowth)的增强。这些处理导致ErbB4表达增加和ErbB4在质膜中或在质膜附近积累增加(Kuai et.al.,Chemistry and Biology 2011,18,891-906)。NRG1和ErbB4为推定的(putative)精神分裂症敏感基因(susceptibility gene)(Buonanno,Brain Res.Bull.2010,83,122-131)。两种基因中的SNP与多种精神分裂症内表型有关(Greenwood et.al.,Am.J.Psychiatry 2011,168,930-946)。神经调节蛋白1和ErbB4KO小鼠模型已显示精神分裂症相关的形态变化和行为表型(Jaaro-Peled et.al.,Schizophrenia Bulletin 2010,36,301-313；Wen et.al.,Proc.Natl.Acad.Sci.USA.2010,107,1211-1216)。此外，AAK1基因的内含子中单核苷酸多态性(polymorphism)与帕金森病的发作年龄有关(Latourelle et.al.,BMC Med.Genet.2009,10,98)。这些结果表明抑制AAK1活性在治疗精神分裂症(schizophrenia)、精神分裂症中的认知缺陷(cognitive deficit)、帕金森病(Parkinson’s disease)、神经病理性疼痛(neuropathic pain)、双相型精神障碍(bipolar disorder)和阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease)。

技术实现要素：

在第一方面，本发明提供了式(I)化合物或其药用盐

其中：

R¹选自咪唑并哒嗪基、异喹啉基、噁唑基、吡啶基、嘧啶基、吡咯并吡啶基和喹啉基，其中各环任选取代有C₁-C₃酰基氨基、C₁-C₃烷基、氨基、C₁-C₃烷氧基、C₃-C₆环烷基、C₃-C₆环烷基氨基、C₁-C₃二烷基氨基、-NHCO₂(C₁-C₃)烷基和任选取代有卤素或卤代烷基的苯基羰基氨基；

R²选自氢、C₁-C₃烷氧基和C₁-C₃烷基；

R³选自氢、C₁-C₃烷氧基、C₁-C₃烷基、氰基和卤素；

R⁴选自C₃-C₆烷基，其任选取代有选自以下的一个基团：氨基、卤代烷基氧基、羟基和氧代；和任选取代有氨基的C₃-C₆环烷基C₁-C₃烷基；

R⁵选自氢、C₁-C₆烷基、酰胺基团、氰基和卤素；

当为双键时，R⁶选自氢、C₁-C₆烷氧基、C₁-C₆烷基、酰胺基团、氰基、C₁-C₆二烷基氨基、卤素、羟基和五元杂芳环；且

当为单键时，R⁶为＝S。

在第一方面的第一个实施方案中，本发明提供了式(I)化合物，其中R³为卤素。

在第一方面的第二个实施方案中，本发明提供了式(I)化合物或其药用盐，其中R³为氢。在第三个实施方案中，R²为C₁-C₃烷氧基。

在第一方面的第四个实施方案中，本发明提供了式(I)化合物或其药用盐，其中R³为氢且R²为氢。在第五个实施方案中，R⁵选自C₁-C₆烷基、酰胺基团、氰基和卤素。

在第一方面的六个实施方案中，本发明提供了式(I)化合物或其药用盐，其中R³为氢，R²为氢且R⁵为氢。

在第二方面，本发明提供了组合物，其包含药用量的式(I)化合物或其药用盐，以及药用载体。

在第三方面，本发明提供了抑制连接蛋白相关激酶1(AAK1)活性的方法，其包括使AAK1与式(I)化合物或其药用盐接触。

在第四方面，本发明提供了治疗或处置由AAK1活性介导的疾病或病症的方法，所述方法包括对有此需要的患者给药治疗有效量的式(I)化合物或其药用盐。在第四方面的第一实施方案中，所述疾病或病症选自阿尔茨海默病、双相型精神障碍、疼痛、帕金森病和精神分裂症。在第四方面的第二实施方案中，所述疼痛为神经病理性疼痛。在第四方面的第三实施方案中，所述神经病理性疼痛为纤维肌痛(fibromyalgia)或外周神经病变(peripheral neuropathy)。

本发明的其它方面可包括本申请中所披露的实施方案的合适组合。

其它方面和实施方案可见于本申请所提供的描述中。

具体实施方式

本发明部分基于AAK1基因敲除小鼠对疼痛展现出高抗性的发现。该发现促成最终发现AAK1抑制剂、包含它们的组合物及其使用方法的研究。

在本申请中，本发明的描述应当理解为符合化学成键的规则和原理。在一些情况下，可能需要移除氢原子以在任何给定位置上容纳取代基。

应当理解的是，本发明所涵盖的化合物为适当地稳定而用作药物的化合物。

规定在分子中特定位置处的任何取代基或变量的定义与其在该分子中的其它位置处的定义无关。例如，当n为2时，两个R⁶基团各自可相同或不同。

本说明书中所用的下列术语具有所表明的含义：

将本说明书中所引用的所有专利、专利申请和参考文献全部引入本申请作为参考。在不一致的情况下，以本发明(包括定义)为准。

除非上下文另有明确规定，本申请所用的单数形式“一个”、“一种”和“所述”包括复数指代。

在一些情况下，在叙述基团之前示出任何特定基团中的碳原子数。例如，术语“C_1-6烷基”表示含一个至六个碳原子的烷基。若存在这些指定，则其代替本申请中所含所有其它定义。

本申请所用的术语“酰基氨基”是指–NHC(O)R，其中R为烷基。

本申请所用的术语“烷氧基”是指烷基经由其母体分子部分与氧原子连接。

本申请所用的术语“烷基”是指衍生自直链或支链饱和烃的基团。

本申请所用的术语“酰胺基团”是指–C(O)NH₂。

本申请所用的术语“氨基”是指-NH₂。

本申请所用的术语“羰基”是指-C(O)-。

本申请所用的术语“氰基”是指-CN。

本申请所用的术语“环烷基”是指具有0个杂原子的饱和单环烃环系统。环烷基的代表性实例包括但不限于环丙基、环戊基和环己基。

本申请所用的术语“环烷基烷基”是指经烷基连接于母体分子部分的环烷基。

本申请所用的术语“环烷基氨基”是指其中R为环烷基的-NHR。

本申请所用的术语“二烷基氨基”是指NR₂，其中各R为烷基。两个烷基是相同或不同的。

本申请所用的术语“五元杂芳环”是指含有五个成员的环，其中所述环含有至少一个杂原子。应当理解的是该术语仅涵盖稳定的且为本领域技术人员已知的那些环。

本申请所用的术语“卤素”是指Br、Cl、F和/或I。

本申请所用的术语“卤代烷氧基”是指卤代烷基经由其母体分子部分与氧原子连接。

本申请所用的术语“卤代烷基”是指被一个、两个、三个或四个卤素原子所取代的烷基。

本申请所用的术语“羟基”是指-OH。

本申请所用的术语“氧代”是指＝O。

本申请所用的术语“苯基羰基氨基”是指–NHC(O)-Ph，其中Ph为苯基。

本发明化合物中可存在不对称中心。应当理解的是，本发明涵盖具有抑制AAK1的能力的所有立体化学异构形式或它们的混合物。化合物的个别立体异构体可由含手性中心的市售原料以合成方式制备，或通过制备对映异构产物的混合物然后分离(例如转化为非对映异构体的混合物然后分离或重结晶、使用色谱技术或在手性色谱柱上直接分离对映异构体)来制备。特定立体化学的起始化合物为市售的或可通过本领域已知的技术来制备并拆分。

本发明的某些化合物还可以可分离的不同稳定构型形式存在。归因于不对称单键的限制性旋转的扭转不对称性(例如由于位阻或环张力)可允许分离不同构象异构体。本发明包括这些化合物的每种构型异构体或它们的混合物。

术语“本发明化合物”和等效表述意欲涵盖式(I)化合物及其药用对映异构体、非对映异构体和盐。类似地，若上下文允许，则提及中间体意欲涵盖它们的盐。

本发明意欲包括本发明化合物中存在的原子的所有同位素。同位素包括具有相同原子序数但具有不同质量数的那些原子。通过一般举例的方式且不加以限制，氢的同位素包括氘和氚。碳的同位素包括¹³C和¹⁴C。同位素标记的本发明化合物一般可通过本领域技术人员已知的常规技术或通过与本申请所述类似的方法，使用适合的同位素标记的试剂替代另外使用的未标记的试剂来制备。所述化合物可具有多种潜在的用途，例如在测定生物学活性中作为标准物和试剂。在稳定同位素的情况下，上述化合物可具有有利地改良生物学、药理学或药物动力学性质的潜能。

本发明化合物可以药用盐形式存在。本申请所用术语的“药用盐”表示可溶解或分散于水或油中的本发明化合物的盐或两性离子形式，其在合理的医学判断范围内适于与患者的组织接触而无过度毒性、刺激、过敏反应或其它问题或并发症，与合理的益处/风险比相符且对于其所期望的用途是有效的。所述盐可在最终分离和纯化化合物期间或分别通过使合适的氮原子与合适的酸反应来制备。代表性酸加成盐包括乙酸盐、己二酸盐、藻酸盐、枸橼酸盐、天冬氨酸盐、苯甲酸盐、苯磺酸盐、硫酸氢盐、丁酸盐、樟脑酸盐、樟脑磺酸盐；二葡糖酸盐、二氢溴酸盐、二盐酸盐、二氢碘酸盐、甘油磷酸盐、半硫酸盐、庚酸盐、己酸盐、甲酸盐、富马酸盐、盐酸盐、氢溴酸盐、氢碘酸盐、2-羟基乙磺酸盐、乳酸盐、马来酸盐、均三甲苯磺酸盐、甲磺酸盐、萘磺酸盐、烟酸盐、2-萘磺酸盐、草酸盐、双羟萘酸盐、果胶酸盐、过硫酸盐、3-苯基丙酸盐、苦味酸盐、特戊酸盐、丙酸盐、琥珀酸盐、酒石酸盐、三氯乙酸盐、三氟乙酸盐、磷酸盐、谷氨酸盐、碳酸氢盐、对甲苯磺酸盐和十一烷酸盐。可用于形成药用加成盐的酸的实例包括无机酸例如盐酸、氢溴酸、硫酸和磷酸及有机酸例如草酸、马来酸、琥珀酸和枸橼酸。

碱加成盐可在最终分离和化合物纯化期间通过使羧基与合适的碱或与氨或有机伯胺、仲胺或叔胺反应来制备，所述碱为例如金属阳离子的氢氧化物、碳酸盐或碳酸氢盐。药用盐的阳离子包括锂、钠、钾、钙、镁和铝阳离子以及无毒的季铵阳离子例如铵、四甲基铵、四乙基铵、甲胺、二甲胺、三甲胺、三乙胺、二乙胺、乙胺、三丁胺、吡啶、N,N-二甲基苯胺、N-甲基哌啶、N-甲基吗啉、二环己胺、普鲁卡因、二苄胺、N,N-二苄基苯乙胺和N,N’-二苄基乙二胺。适用于形成碱加成盐的其它代表性有机胺包括乙二胺、乙醇胺、二乙醇胺、哌啶和哌嗪。

本发明的一个实施方案涵盖体外和体内抑制连接蛋白相关激酶1(AAK1)的方法，其包括使AAK1与式I化合物或其药用盐接触。

当治疗有效量的式(I)化合物以及它们的药用盐可以化学原料形式给药用于治疗时，可以药物组合物形式提供活性成分。因此，本发明还提供了药物组合物，其包含治疗有效量的式(I)化合物或其药用盐和一种或多种药用载体、稀释剂或赋形剂。

除非另有说明，否则化合物的“治疗有效量”为在治疗或处置疾病或病状中足以提供治疗益处或延缓或最小化一种或多种与所述疾病或病状有关的症状的量。术语“治疗有效量”可涵盖改善总体治疗、减少或避免疾病或病状的症状或原因或增强另一种治疗剂的治疗功效的量。

本申请所用术语的“治疗有效量”是指在治疗或处置疾病或病状中足以提供治疗益处或延缓或最小化一种或多种与所述疾病或病状有关的症状的一种或多种化合物的量。化合物的“治疗有效量”意指单独或与其它疗法组合在治疗或处置所述疾病或病状中提供治疗益处的治疗剂的量。术语“治疗有效量”可涵盖改善总体治疗、减少或避免疾病或病状的症状或原因或增强另一种治疗剂的治疗功效的量。当应用于单独给药的个别活性成分时，所述术语仅指该成分。当应用于组合时，无论是组合、连续或同时给药，所述术语是指产生治疗效果的活性成分的组合量。式(I)化合物及其药用盐如上所述。在与制剂的其它成分相容且对其接受者无害的意义上讲，一种或多种载体、稀释剂或赋形剂必须是可接受的。根据本发明的另一个方面，还提供了药物制剂的制备方法，其包括将式(I)化合物或其药用盐与一种或多种药用载体、稀释剂或赋形剂混合。本申请所用的术语“药用”是指所述化合物、物质、组合物和/或剂型在合理的医学判断范围内适于与患者的组织接触而无过度毒性、刺激、过敏反应或其它问题或并发症，与合理的益处/风险比相符且对于其所期望的用途是有效的。

药物制剂可以每单位剂量含预设量活性成分的单位剂型来提供。剂量水平为约0.01至约250毫克/千克("mg/kg")体重/天，优选为约0.05至约100mg/kg体重/天的本发明化合物是预防和治疗疾病的单一疗法中的典型剂量。通常，本发明的药物组合物将每天给药约1至约5次，或以连续输注方式给药。所述给药可用作长期或短期疗法。可与载体物质组合以产生单一剂型的活性成分的量将取决于所治疗的病状、病状的严重度、给药时间、给药途径、所用化合物的排泄率、治疗持续时间及患者的年龄、性别、体重和健康状况而变化。优选的单位剂量制剂为含上述日剂量或亚剂量或它们的适当部分活性成分的制剂。可用基本上小于化合物最佳剂量的小剂量开始治疗。此后，以小增量增加剂量直至达到该情况下的最佳效果。通常，化合物最适宜以一般提供有效结果而不引起任何不利或有害副作用的浓度水平来给药。

当本发明组合物包含本发明化合物与一种或多种其它治疗性或预防性药剂的组合时，在单一疗法方案中，所述化合物与所述其它药剂通常都以通常所给药剂量的约10％至150％且优选约10％至80％的剂量水平来提供。

本发明化合物可与一种或多种其它治疗性或预防性药剂组合给药。例如，当用于治疗疼痛时，可能的其它药剂包括免疫抑制剂、抗炎剂和/或用于治疗疼痛的其它药物。

适用于本发明的方法和组合物的免疫抑制剂包括本领域中已知的免疫抑制剂。实例包括氨基蝶呤(aminopterin)、硫唑嘌呤(azathioprine)、环孢素(cyclosporin A)、D-青霉胺(D-penicillamine)、金盐(gold salts)、羟氯喹(hydroxychloroquine)、来氟米特(leflunomide)、甲氨蝶呤(methotrexate)、米诺环素(minocycline)、雷帕霉素(rapamycin)、柳氮磺吡啶(sulfasalazine)、他克莫司(tacrolimus)(FK506)和它们的药用盐。具体的免疫抑制剂为甲氨蝶呤。

免疫抑制剂的其它实例包括抗-TNF抗体，例如阿达木单抗(adalimumab)、赛妥珠单抗(certolizumab pegol)、依那西普(etanercept)和英利昔单抗(infliximab)。其它免疫抑制剂包括白介素-1阻断剂，例如阿那白滞素(anakinra)。其它免疫抑制剂包括抗-B细胞(CD20)抗体，例如利妥昔单抗(rituximab)。其它免疫抑制剂包括T细胞活化阻断剂，例如阿巴西普(abatacept)。

其它免疫抑制剂包括肌苷单磷酸脱氢酶抑制剂，例如吗替麦考酚酯(mycophenolate mofetil)()和霉酚酸(mycophenolic acid)()。

适用于本发明的方法和组合物的抗炎性药物包括本领域中已知的抗炎性药物。实例包括糖皮质激素(glucocorticoid)和NSAID。糖皮质激素的实例包括醛固酮(aldosterone)、倍氯米松(beclometasone)、倍他米松(betamethasone)、皮质酮(cortisone)、脱氧皮质酮(deoxycorticosterone)、地塞米松(dexamethasone)、氟氢可的松(fludrocortisones)、氢化可的松(hydrocortisone)、甲基泼尼松龙(methylprednisolone)、泼尼松龙(prednisolone)、泼尼松(prednisone)、曲安西龙(triamcinolone)和它们的药用盐。

NSAID的实例包括水杨酸盐类(例如，阿司匹林(aspirin)、阿莫西林(amoxiprin)、贝诺酯(benorilate)、水杨酸胆碱镁(choline magnesium salicylate)、二氟尼柳(diflunisal)、法斯拉胺(faislamine)、水杨酸甲酯(methyl salicylate)、水杨酸镁(magnesium salicylate)、双水杨酸酯(salicyl salicylate)和它们的药用盐)、芳基烷酸类(例如，双氯芬酸(diclofenac)、醋氯芬酸(aceclofenac)、阿西美辛(acemetacin)、溴芬酸(bromfenac)、依托度酸(etodolac)、吲哚美辛(indometacin)、萘丁美酮(nabumetone)、舒林酸(sulindac)、托美丁(tolmetin)和它们的药用盐)、芳基丙酸类(例如，布洛芬(ibuprofen)、卡洛芬(carprofen)、芬布芬(fenbufen)、非诺洛芬(fenoprofen)、氟比洛芬(flurbiprofen)、酮洛芬(ketoprofen)、酮洛酸(ketorolac)、洛索洛芬(loxoprofen)、萘普生(naproxen)、奥沙普嗪(oxaprozin)、噻洛芬酸(tiaprofenic acid)、舒洛芬(suprofen)和它们的药用盐)、芳基邻氨基苯甲酸类(例如，甲氯芬那酸(meclofenamic acid)、甲芬那酸(mefenamic acid)和它们的药用盐)、吡唑烷衍生物类(例如，阿扎丙宗(azapropazone)、安乃近(metamizole)、羟布宗(oxyphenbutazone)、苯基丁氮酮(phenylbutazone)、磺吡酮(sulfinprazone)和它们的药用盐)、昔康类(oxicam)(例如氯诺昔康(lornoxicam)、美洛昔康(meloxicam)、吡罗昔康(piroxicam)、替诺昔康(tenoxicam)和它们的药用盐)、COX-2抑制剂类(例如，塞来昔布(celecoxib)、依托考昔(etoricoxib)、鲁米考昔(lumiracoxib)、帕瑞考昔(parecoxib)、罗非昔布(rofecoxib)、伐地考昔(valdecoxib)和它们的药用盐)和磺苯胺类(sulphonanilides)(例如，尼美舒利(nimesulide)及其药用盐)。

用于治疗疼痛(包括但不限于神经病理性疼痛和炎性疼痛)的其它药剂包括但不限于以下药剂，例如普瑞巴林(pregabalin)、利多卡因(lidocaine)、度洛西汀(duloxetine)、加巴喷丁(gabapentin)、卡马西平(carbamazepine)、辣椒碱(capsaicin)和其它5-羟色胺(serotonin)/去甲肾上腺素(norepinephrine)/多巴胺(dopamine)重吸收抑制剂和阿片剂(opiate)(例如奥施康定(oxycontin)、吗啡(morphine)和可待因(codeine))。

在治疗由已知疾病或病状(例如糖尿病、感染(例如带状疱疹或HIV感染)或癌症)引起的疼痛中，本发明化合物可与一种或多种针对潜在疾病或病况的其它治疗性或预防性药剂组合。例如，当用于治疗糖尿病性神经病变(diabetic neuropathy)时，本发明化合物可与一种或多种抗糖尿病剂、抗高血糖剂、降血脂剂/降脂剂、减肥药、抗高血压剂和食欲抑制剂组合给药。抗糖尿病剂的实例包括双胍类(例如，二甲双胍(metformin)、苯乙双胍(phenformin))、葡萄糖苷酶抑制类(例如，阿卡波糖(acarbose)、米格列醇(miglitol))、胰岛素类(包括胰岛素促泌素类似物和胰岛素增敏剂)、氯茴苯酸类(meglitinides)(例如，瑞格列奈(repaglinide))、磺酰脲类(例如，格列美脲(glimepiride)、格列本脲(glyburide)、格列齐特(gliclazide)、氯磺丙脲(chlorpropamide)和格列吡嗪(glipizide))、双胍/格列本脲组合(例如，格鲁瓦斯(Glucovance))、噻唑烷二酮类(例如，曲格列酮(troglitazone)、罗格列酮(rosiglitazone)和吡格列酮(pioglitazone))、PPAR-α激动剂、PPAR-γ激动剂、PPARα/γ双重激动剂、糖原磷酸化酶抑制剂、脂肪酸结合蛋白(aP2)抑制剂、高血糖素样肽-1(GLP-1)或GLP-1受体的其它激动剂、二肽基肽酶IV(DPP4)抑制剂和钠-葡萄糖协同转运蛋白(co-transporter)2(SGLT2)抑制剂(例如，达格列净(dapagliflozin)、卡格列净(canagliflozin)和LX-4211)。

药物制剂可适于通过任何适当途径给药，例如通过口服(包括含服或舌下)、经直肠、经鼻、局部(包括含服、舌下或经皮)、经阴道或肠胃外(包括皮下、皮内、肌内、关节内、滑膜内、胸骨内、鞘内、病灶内、静脉内或皮内注射或输注)途径给药。上述制剂可通过药学领域已知的任何方法(例如使活性成分与一种或多种载体或赋形剂组合)来制备。优选口服给药或通过注射给药。

适于口服给药的药物制剂可呈离散单元形式，例如胶囊剂或片剂；粉末剂或颗粒剂；水性或非水性液体中的溶液剂或混悬剂；可食用泡沫(foam)或泡沫剂(whip)；或水包油型液体乳剂或油包水型乳剂。

例如，为了以片剂或胶囊剂形式口服给药，所述活性药物组分可与口服、无毒的药用惰性载体(例如乙醇、甘油、水等)组合。粉末是通过将化合物粉碎至合适细度并与类似地粉碎的药物载体(例如可食用碳水化合物，例如淀粉或甘露醇)混合来制备。还可包含调味剂、防腐剂、分散剂和着色剂。

胶囊剂通过如上所述制备粉末混合物并填充成型的明胶外壳来制备。在填充操作之前，可将助流剂和润滑剂例如胶体二氧化硅、滑石、硬脂酸镁、硬脂酸钙或固体聚乙二醇添加至粉末混合物中。还可添加崩解剂或增溶剂例如琼脂-琼脂、碳酸钙或碳酸钠以改善摄取胶囊剂时药物的利用度。

此外，需要时或必要时，还可将合适的粘合剂、润滑剂、崩解剂和着色剂掺入混合物中。合适的粘合剂包括淀粉、明胶、天然糖(例如葡萄糖或β-乳糖)、玉米增甜剂、天然胶和合成胶(例如阿拉伯胶、黄蓍胶或藻酸钠)、羧甲基纤维素、聚乙二醇等。用于这些剂型中的润滑剂包括油酸钠、氯化钠等。崩解剂包括但不限于淀粉、甲基纤维素、琼脂、膨润土、黄原胶等。通过以下方法配制片剂：例如制备粉末混合物、成粒或击压、加入润滑剂和崩解剂并压制成片剂。通过以下方法制备粉末混合物：将适当粉碎的混合物与上述稀释剂或基质(base)混合并任选地与粘合剂(例如羧甲基纤维素、藻酸盐、明胶或聚乙烯基吡咯烷酮)、溶解延缓剂(例如石蜡)、再吸收加速剂(例如季铵盐)和/或吸收剂(例如膨润土、高岭土或磷酸二钙)。通过以下方法使粉末混合物成粒：用粘合剂(例如糖浆、淀粉糊、阿卡迪亚胶浆或纤维素或聚合物质的溶液)润湿并迫使其穿过筛网。作为成粒的替代方法，可使粉末穿过压片机且结果是裂解为颗粒的不完全成形的击压物。可借助于添加硬脂酸、硬脂酸盐、滑石或矿物油来润滑颗粒的以防止粘附与片剂成型模具。然后将经润滑的混合物压制成片剂。还可将本发明化合物与自由流动的惰性载体组合且不经成粒或击压步骤直接压制成片剂。可提供由虫胶的密封涂层、糖或聚合物质的涂层和蜡的抛光涂层组成的透明或不透明保护涂层。可向所述涂层中加入染料以区分不同的单位剂量。

可以单位剂型制备口服液(例如溶液剂、糖浆剂和酏剂)，从而使得给定量含有预定量的化合物。糖浆剂可通过将化合物溶于适当矫味的水溶液中来制备，而酏剂则通过使用无毒媒介物来制备。还可加入增溶剂和乳化剂(例如乙氧基化异硬脂醇和聚氧乙烯山梨醇醚)、防腐剂、矫味添加剂(例如薄荷油或天然增甜剂或糖精或其它人工增甜剂)等。

适当时，可将用于口服给药的剂量单位制剂微囊化。所述制剂还可例如通过将微粒物质涂布或包埋在聚合物、蜡等中来制备，以延长或持续释放。

式(I)化合物及其药用盐还可以脂质体递送系统例如小单室脂质体、大单室脂质体和多室脂质体的形式给药。脂质体可由多种磷脂例如胆固醇、硬脂胺或磷脂酰胆碱形成。

式(I)化合物及其药用盐还可通过使用单克隆抗体作为与化合物分子偶联的个别载体来递送。所述化合物还可与作为可靶向药物载体的可溶性聚合物偶联。上述聚合物可包括聚乙烯基吡咯烷酮、吡喃共聚物、聚羟基丙基甲基丙烯酰胺酚、聚羟基乙基天冬酰胺酚或取代有棕榈酰基残基的聚氧化乙烯聚赖氨酸。此外，所述化合物可与一类适用于实现药物控制释放的可生物降解聚合物偶联，所述聚合物例如聚乳酸、聚ε己内酯、聚羟基丁酸、聚原酸酯、聚缩醛、聚二氢吡喃、聚氰基丙烯酸酯和水凝胶的交联或两亲性嵌段共聚物。

适于经皮给药的药物制剂可作为意欲与接受者的表皮保持紧密接触较长时间的离散贴剂来提供。例如，活性成分可通过如Pharmaceutical Research 1986,3(6),318中大体描述的离子电渗疗法由贴剂递送。

适于局部给药的药物制剂可配制为软膏剂、乳膏剂、混悬剂、洗剂、粉末剂、溶液剂、糊剂、凝胶剂、喷雾剂、气雾剂或油剂。

适于经直肠给药的药物制剂可作为栓剂或灌肠剂来提供。

适于经鼻给药的药物制剂(其中载体为固体)包括粒径为例如20至500微米的粗粉末，其以采用从鼻吸入的方式给药，即由贴近鼻的容纳粉末的容器经由鼻道快速吸入来给药。用于以经鼻喷雾剂或滴鼻剂给药的合适制剂(其中载体为液体)包括活性成分的水溶液或油溶液。

适于通过吸入给药的药物制剂包括细粒粉剂或雾状物，其可借助于各种类型的计量剂量的加压气雾剂、雾化器或吹入器而产生。

适于经阴道给药的药物制剂可作为子宫托、棉塞、乳膏剂、凝胶剂、糊剂、泡沫或喷雾剂来提供。

适于肠胃外给药的药物制剂包括可含抗氧化剂、缓冲剂、抑菌剂和使得制剂与预定接受者的血液等张的溶质的水性或非水性无菌注射溶液；和可包括助悬剂和增稠剂的水性和非水性无菌混悬液。制剂可以单位剂量或多剂量容器(例如密封的安瓿和小瓶)形式来提供且可储存在冷冻干燥(冻干)条件下，仅需要在临使用前加入无菌液体载体例如注射用水。临时注射溶液和混悬液可由无菌粉末剂、颗粒剂和片剂制备。

应当理解的是，除了上述具体提及的成分之外，考虑到所述制剂的类型，所述制剂还可包括本领域中常见的其它药剂，例如适用于口服给药的制剂可包括矫味剂。

术语“患者”包括人类和其它哺乳动物。

除非另有说明，术语“处置”、“处理”和“控制”涵盖预防已患有疾病或病症的患者中所述具体疾病或病症的复发和/或延长已患有疾病或病症的患者保持缓解的时间。所述术语涵盖调节疾病或病症的阈值、发展和/或持续时间，或改变患者对疾病或病症作出响应的方式。

术语“治疗”是指：(i)在可易患某种疾病、病症和/或病状但尚未被诊断为患有所述疾病、病症和/或病状的患者中防止所述疾病、病症和/或病况的出现；(ii)抑制疾病、病症和/或病状，即，使其发展停滞；和(iii)缓解疾病、病症和/或病状，即，使所述疾病、病症和/或病状消退。

本发明意欲涵盖通过合成方法或通过代谢过程(包括在人类或动物体内(体内)进行的代谢过程或体外进行的代谢过程)制备时具有式(I)的化合物。

本申请中所用的缩写，具体地包括以下说明性方案和实施例中的缩写，是本领域技术人员公知的。一些缩写使用如下：Ph为苯基；OAc为乙酸酯；DME为1,2-二甲氧基乙烷；DMF为N,N-二甲基甲酰胺；n-BuLi为正丁基锂；AcOH为乙酸；THF为四氢呋喃；Me为甲基；DMAc或DMAC为二甲基乙酰胺；AIBN为偶氮二异丁腈；TosMIC为甲苯磺酰基甲基异氰化物；MeOH为甲醇；EtOH为乙醇；LDA为二异丙基氨基锂；TBTU为O-苯并三唑-1-基-1,1,3,3-四甲基脲鎓四氟硼酸盐；DIAD为偶氮二羧酸二异丙酯；MeCN或CAN为乙腈；Et为乙基；NBS为N-溴琥珀酰亚胺；PPA为聚磷酸；TEA或Et₃N为三乙胺；DCM为二氯甲烷；DCE为1,2-二氯乙烷；DIEA为二异丙基乙基胺；EtOAc为乙酸乙酯；MeOD为CD₃OD；TFA为三氟乙酸；h为小时；DEA为二乙基胺；R.T.或RT为室温或保留时间(上下文决定)；DPPF为1,1'-二(二苯基膦基)二茂铁；EDC为1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐；HOBT为羟基苯并三唑；且DMAP为N,N-二甲基氨基吡啶。

实施例

现将结合某些实施方案描述本发明，所述实施方案并非意欲限制本发明的范围。相反，本发明涵盖可包括在权利要求范围之内的所有替代方案、修改和等效形式。因此，包括具体实施方案的下列实施例将说明本发明的一种实践，应当理解的是，所述实施例是用于说明某些实施方案并以提供相信为其程序和概念性方面最有用且容易理解的描述来呈现。

本发明化合物可使用该部分中所述的反应和技术及本领域普通技术人员已知的其它合成方法来制备。所述反应在适合于所用试剂和材料且适于进行转化的溶剂中进行。此外，在下述合成方法的描述中，应当理解的是，选择提出的所有反应条件(包括所选溶剂、反应温度、实验持续时间和后处理程序)作为该反应的标准条件，这应当易于为本领域技术人员所认可。本领域技术人员应当理解的是，分子各部分上存在的官能基必须与提出的试剂和反应相容。对于反应条件相容的取代基的所述限制对本领域技术人员而言将是显而易见的且因此必须使用替代方法。

式8化合物(其中R¹、R²和R³如在式(I)中定义)可如在方案1中所述制备。在极性非质子溶剂(诸如THF)中用氢化钠和正丁基锂处理乙酰乙酸乙酯，随后加入1-碘-2-甲基丙烷(3)得到6-甲基-3-氧代庚酸甲酯(4)。本领域技术人员应当认识到除了1-碘-2-甲基丙烷之外的各种烷基卤可与2反应得到其中各种烷基替代4中的3-甲基丁基取代基的化合物。在酸(诸如乙酸)和分子筛的存在下在溶剂(诸如甲苯)中在范围为60℃至120℃的温度将化合物4用式5的苯胺缩合，得到式6化合物。式6化合物在250℃在苯基醚中加热，导致环化形成式7化合物。在钯催化剂(诸如Pd(PPh₃)₄或Pd(OAc)₂)和碱(诸如碳酸钠、碳酸铯、碳酸钾或磷酸钾)的存在下在存在或不存在配体(诸如SPhos或XPhos)的情况下且在溶剂(诸如DME、DMF、甲苯、THF、二噁烷、甲醇、乙醇、丁醇或水或其组合)中在范围为20至150℃的温度，使式7化合物与芳基和杂芳基硼酸偶联得到式8化合物。偶联反应通过使用标准实验室方法加热反应混合物或在微波中加热反应混合物进行。

方案1

使用在方案2中所述的方法，式9化合物(其中R¹、R²和R³如在式(I)中定义)可由式8化合物通过用碱(诸如氢化钠、碳酸钾、氢氧化钾或氢氧化钠)在溶剂(诸如DMF或THF)中处理式8化合物制备。随后加入甲基化剂(诸如碘甲烷或硫酸二甲酯)并在范围为0至100℃的温度搅拌反应混合物得到式9化合物。式10化合物(其中R¹、R²和R³如在式(I)中定义)可由式8化合物通过在三溴化磷的存在下在溶剂(诸如DMF)中搅拌式8化合物制备。可选择地，该反应可通过在三溴氧化磷和催化DMF的存在下在溶剂(诸如二氯乙烷)中在范围为50至100℃的温度加热式8化合物进行得到式10化合物。

方案2

使用在方案3中所述的方法，式11化合物(其中R¹、R²和R³如在式(I)中定义)可由式10化合物通过在溶剂(诸如甲醇或乙醇)中用钯/炭处理式10化合物并在氢气气氛下搅拌所得混合物制备。式12化合物(其中R¹、R²和R³如在式(I)中定义)可由式10化合物通过在钯催化剂和适当配体的存在下连同(如果需要)氰化锌在溶剂(诸如DMF、DME或DMAC)中在存在或不存在水的情况下搅拌式10化合物制备。反应在范围为70至150℃的温度进行得到式12化合物。偶联反应通过使用标准实验室方法加热反应混合物或在微波中加热反应混合物进行。

方案3

式15化合物(其中R¹、R²和R³如在式(I)中定义)可如在方案4中所述由式12化合物制备。用溴化剂(诸如N-溴琥珀酰亚胺和AIBN)在四氯化碳中在加热下处理式12化合物得到式13化合物。用叠氮化钠在有机溶剂(诸如丙酮、乙腈、DMF或吡啶)中置换所述溴化物得到式14化合物。将所述叠氮化物还原为胺可通过用三苯基膦在THF和水的混合物中处理式14化合物进行，得到式15化合物。可选择地，在钯/炭的存在下在溶剂(诸如甲醇或乙醇)中可将式14化合物置于氢气气氛下得到式15化合物。

方案4

本领域技术人员应当认识到可以改变引入某些取代基的顺序。例如，式(I)化合物中的R¹和R²取代基(其中R¹＝噁唑-5-基且R²＝甲氧基)可如在方案5中所示引入。用TosMIC在碱(诸如碳酸钾)的存在下在溶剂(诸如甲醇)中处理式16化合物(其在R²含有甲氧基)得到式17化合物。还原17中的硝基使用标准条件完成得到式18化合物，所述条件诸如但不限于H₂和Pd/C、锌/氯化铵或氯化锡，在适当溶剂中(诸如甲醇或乙醇)，在范围为0℃至100℃的温度。式18化合物可使用在方案1-4中所述的适当操作进一步加工得到式19化合物，其中R⁴＝3-甲基丁基或1-氨基-3-甲基丁基；R⁵＝H；且R⁶＝H、Br、OMe或CN。

方案5

式23化合物(其中R¹、R²和R³如在式(I)中定义)可如在方案6中所述制备。将式20和21化合物混合并与磷酰氯加热得到式22化合物。使式22化合物与芳基和杂芳基硼酸在钯催化剂(诸如Pd(PPh₃)₄或Pd(OAc)₂)和碱(诸如碳酸钠、碳酸铯、碳酸钾或磷酸钾)的存在下在存在或不存在配体(诸如SPhos或XPhos)的情况下并在溶剂(诸如DME、DMF、甲苯、THF、二噁烷、甲醇、乙醇、丁醇或水或其组合)中在范围为20至150℃的温度偶联，得到式23化合物。偶联反应通过使用标准实验室方法加热反应混合物或在微波中加热反应混合物进行。

方案6

式29化合物(其中R¹、R²和R³如在式(I)中定义)可如在方案7中所述制备。用碱(诸如LDA)在极性非质子溶剂(诸如THF)中处理24，随后加入甲酸乙酯(25)得到26。化合物26可用式5的苯胺在酸(诸如乙酸)和分子筛的存在下在溶剂(诸如甲苯)中在范围为60℃至120℃的温度缩合，得到式27化合物。将式27化合物在250℃在苯基醚中加热，导致环化形成式28化合物。使式28化合物与芳基和杂芳基硼酸在钯催化剂(诸如Pd(PPh₃)₄或Pd(OAc)₂)和碱(诸如碳酸钠、碳酸铯、碳酸钾或磷酸钾)的存在下在存在或不存在配体(诸如SPhos或XPhos)的情况下并在溶剂(诸如DME、DMF、甲苯、THF、二噁烷、甲醇、乙醇、丁醇或水或其组合)中在范围为20至150℃的温度偶联，得到式29化合物。偶联反应通过使用标准实验室方法加热反应混合物或在微波中加热反应混合物进行。

方案7

式31化合物(其中R¹、R²、R³和R⁴如在式(I)中定义)可如在方案8中所述制备。式30化合物可如在方案1中所示制备。用溴在乙酸中处理30得到式31化合物。

方案8

式35化合物(其中R¹、R²和R³如在式(I)中定义)可由式6化合物(如在方案1中所示制备)如在方案9中所述制备。将式6化合物在DMF和POCl₃的存在下加热得到式32化合物。用试剂(诸如氢氧化锂、氢氧化钠或氢氧化钾)水解32中的酯得到式33化合物。用草酰氯和催化DMF处理式33化合物得到相应的酰氯，其继而用氢氧化铵处理得到式34化合物。使式34化合物与芳基和杂芳基硼酸在钯催化剂(诸如Pd(PPh₃)₄或Pd(OAc)₂)和碱(诸如碳酸钠、碳酸铯、碳酸钾或磷酸钾)的存在下在存在或不存在配体(诸如SPhos或XPhos)的情况下并在溶剂(诸如DME、DMF、甲苯、THF、二噁烷、甲醇、乙醇、丁醇或水或其组合)中在范围为20至150℃的温度偶联，得到式35化合物。偶联反应通过使用标准实验室方法加热反应混合物或在微波中加热反应混合物进行。

方案9

式37化合物(其中R¹、R²和R³如在式(I)中定义)可由式34化合物(如在方案9中所示制备)如在方案10中所述制备。用三氟乙酸酐在碱(诸如三乙胺或N,N-二异丙基乙基胺)的存在下处理式34化合物导致形成式36化合物。使式36化合物与芳基和杂芳基硼酸在钯催化剂(诸如Pd(PPh₃)₄或Pd(OAc)₂)和碱(诸如碳酸钠、碳酸铯、碳酸钾或磷酸钾)的存在下在存在或不存在配体(诸如SPhos或XPhos)的情况下并在溶剂(诸如DME、DMF、甲苯、THF、二噁烷、甲醇、乙醇、丁醇或水或其组合)中在范围为20至150℃的温度偶联，得到式37化合物。偶联反应通过使用标准实验室方法加热反应混合物或在微波中加热反应混合物进行。

方案10

式41化合物(其中R⁴＝4-甲基戊-2-酮)可由式38化合物如在方案11中所示制备。用N,O-二甲基羟基胺在偶联剂(诸如TBTU)和碱(诸如三乙胺或N,N-二异丙基乙基胺)的存在下处理式38化合物导致形成式39化合物。用Grignard试剂在溶剂(诸如THF或乙醚)中处理式39化合物导致形成式40化合物。使式40化合物与芳基和杂芳基硼酸在钯催化剂(诸如Pd(PPh₃)₄或Pd(OAc)₂)和碱(诸如碳酸钠、碳酸铯、碳酸钾或磷酸钾)的存在下在存在或不存在配体(诸如SPhos或XPhos)的情况下并在溶剂(诸如DME、DMF、甲苯、THF、二噁烷、甲醇、乙醇、丁醇或水或其组合)中在范围为20至150℃的温度偶联，得到式41化合物，其中R⁴＝4-甲基戊-2-酮。偶联反应通过使用标准实验室方法加热反应混合物或在微波中加热反应混合物进行。

方案11

式45化合物(其中R⁴＝1-氨基-3-甲基丁基)可由式40化合物(如在方案11中制备)如在方案12中所示制备。用还原剂(诸如氰基硼氢化钠)处理式40化合物导致形成式42化合物。使用标准条件(诸如DIAD、三苯基膦)在溶剂(诸如THF)中使式42化合物与胺源(诸如邻苯二甲酰亚胺)进行Mitsunobu反应导致形成式43化合物。使式43化合物与芳基和杂芳基硼酸在钯催化剂(诸如Pd(PPh₃)₄或Pd(OAc)₂)和碱(诸如碳酸钠、碳酸铯、碳酸钾或磷酸钾)的存在下在存在或不存在配体(诸如SPhos或XPhos)的情况下且在溶剂(诸如DME、DMF、甲苯、THF、二噁烷、甲醇、乙醇、丁醇或水或其组合)中在范围为20至150℃的温度偶联，得到式44化合物。偶联反应通过使用标准实验室方法加热反应混合物或在微波中加热反应混合物进行。用试剂(诸如肼)脱保护式44化合物的酞酸酯得到式45化合物，其中R⁴＝1-氨基-3-甲基丁基。

方案12

式52化合物(其中R⁴＝1-氨基-3-甲基丁基)可由式46化合物如在方案13中所示制备。用氧化剂(诸如二氧化硒)处理式46化合物导致形成式47化合物。用外消旋或光学纯的叔丁基亚磺酰胺在脱水剂(诸如四乙氧基钛)的存在下形成亚磺酰胺得到式48化合物，其为非对映异构体的混合物。用Grignard试剂在溶剂(诸如THF或乙醚)中处理式48化合物导致形成式49化合物。经钯介导的偶联用六甲基二锡在钯催化剂(诸如Pd(PPh₃)₄、PdCl₂(PPh₃)₂或Pd(OAc)₂)的存在下在溶剂(诸如MeCN、甲苯、THF或二噁烷)中在范围为40至150℃的温度转化式49化合物，得到式50化合物。使式50化合物与芳基和杂芳基卤化物在钯催化剂(诸如Pd(PPh₃)₄、PdCl₂(PPh₃)₂或Pd(OAc)₂)和碱(诸如碳酸钠、碳酸铯、碳酸钾或磷酸钾)的存在下在存在或不存在添加剂(诸如四甲基溴化铵或四甲基氟化铵)的情况下在溶剂(诸如DME、DMF、甲苯、THF或二噁烷)中在范围为20至150℃的温度进行Stille偶联，式51得到化合物。偶联反应通过使用标准实验室方法加热反应混合物或在微波中加热反应混合物进行。用试剂(诸如HCl)脱保护式51化合物的亚磺酰胺得到式52化合物，其中R⁴＝1-氨基-3-甲基丁基。

方案13

式57化合物可由式46化合物如在方案14中所示制备。使式46化合物与芳基和杂芳基硼酸在钯催化剂(诸如Pd(PPh₃)₄或Pd(OAc)₂)和碱(诸如碳酸钠、碳酸铯、碳酸钾或磷酸钾)的存在下在存在或不存在配体(诸如SPhos或XPhos)的情况下且在溶剂(诸如DME、DMF、甲苯、THF、二噁烷、甲醇、乙醇、丁醇或水或其组合)中在范围为20至150℃的温度偶联，得到式53化合物。偶联反应通过使用标准实验室方法加热反应混合物或在微波中加热反应混合物进行。用氧化剂(诸如二氧化硒)处理式53化合物导致形成式54化合物。用外消旋或光学纯的叔丁基亚磺酰胺在脱水剂(诸如四乙氧基钛)的存在下形成亚磺酰胺得到式55化合物。用Grignard试剂在溶剂(诸如THF或乙醚)中处理式55化合物导致形成式56化合物，其为非对映异构体的混合物。非对映异构体可作为混合物继续使用，或经硅胶色谱或HPLC分离。用试剂(诸如HCl)脱保护式56化合物的亚磺酰胺得到式57化合物。需要时，式57的外消旋化合物可经手性HPLC分离为两个对映异构体。

方案14

使用在方案15中所述的方法，式64化合物可由式10化合物(如在方案2中所述制备)制备。用NBS在AIBN的存在下在溶剂(诸如四氯化碳)中处理式10化合物可得到式58化合物。用叠氮化钠在溶剂(诸如丙酮)中在升高的温度处理式58化合物可得到式59化合物。用三苯基膦在溶剂(诸如THF)中还原式59化合物中的叠氮化物可得到式60化合物。用基团(诸如BOC)保护胺，随后与Zn(CN)₂在偶联剂(诸如三二亚苄基丙酮)和配体(诸如DPPF)的存在下在溶剂系统(诸如DMF和水)中在范围为80至150℃的温度进行Negishi偶联，得到式62化合物。将式62化合物中的腈转化为四唑可在叠氮化钠和氯化铵的存在下在溶剂(诸如DMF)中在范围为80至120℃的温度进行，得到式63化合物。用试剂(诸如HCl)脱保护式63化合物得到式64化合物。需要时，式64的外消旋化合物可经手性HPLC分离为两个对映异构体。

方案15

式74化合物可由式65化合物如在方案16中所示制备。用3-氧代丁酸乙酯在酸(诸如PPA)的存在下缩合65可得到式66化合物。使式66化合物与芳基和杂芳基硼酸在钯催化剂(诸如Pd(PPh₃)₄或Pd(OAc)₂)和碱(诸如碳酸钠、碳酸铯、碳酸钾或磷酸钾)的存在下在存在或不存在配体(诸如SPhos或XPhos)的情况下且在溶剂(诸如DME、DMF、甲苯、THF、二噁烷、甲醇、乙醇、丁醇或水或其组合)中在范围为20至150℃的温度偶联，得到式67化合物。偶联反应通过使用标准实验室方法加热反应混合物或在微波中加热反应混合物进行。用试剂(诸如PBr₃)处理式67化合物导致形成式68化合物。用氧化剂(诸如二氧化硒)处理式68化合物导致形成式69化合物。用外消旋或光学纯的叔丁基亚磺酰胺在脱水剂(诸如四乙氧基钛)的存在下形成亚磺酰胺得到式70化合物。用Grignard试剂在溶剂(诸如THF或乙醚)中处理式70化合物导致形成式71化合物，其为非对映异构体的混合物。非对映异构体可作为混合物继续使用，或经硅胶色谱或HPLC分离。使式71化合物与三丁基乙烯基甲锡烷在钯催化剂(诸如Pd(PPh₃)₄、PdCl₂(PPh₃)₂或Pd(OAc)₂)和碱(诸如碳酸钠、碳酸铯、碳酸钾或磷酸钾)的存在下在存在或不存在添加剂(诸如四甲基溴化铵或四甲基氟化铵)的情况下在溶剂(诸如DME、DMF、甲苯、THF或二噁烷)中在范围为20至150℃的温度进行Stille偶联，得到式72化合物。偶联反应通过使用标准实验室方法加热反应混合物或在微波中加热反应混合物进行。式72化合物可在钯/炭的存在下在溶剂(诸如甲醇或乙醇)中氢化得到式73化合物。用试剂(诸如HCl)脱保护式73化合物的亚磺酰胺得到式74化合物。需要时，式74的外消旋化合物可经手性HPLC分离为两个对映异构体。

方案16

式75中间体如在方案17中阐述制备。2-氨基-4-溴吡啶可用酰氯在碱(诸如TEA或DIEA)的存在下在溶剂(诸如DMF或DCM)中酰化得到式75中间体。

方案17

式76中间体如在方案18中阐述制备。4-溴-2-氟吡啶可用烷基胺在碱(诸如碳酸铯)的存在下在溶剂(诸如DMF)中处理得到式76中间体。

方案18

中间体79可如在方案19中阐述制备。苯胺可用4-甲基苯亚磺酸在260℃处理，随后用2-氰基乙酸乙酯在260℃处理得到77。中间体77可在三溴氧磷和三溴化磷的存在下在150℃溴化得到溴化物78。中间体78可用乙酰氯在DCM中酰化得到中间体79。

方案19

使用方案1-16合成的各种类似物列于表1.AAK1中。

表1

(I)

具体实施方案的描述

在下列实施例中，在Bruker 400或500MHz NMR光谱仪上记录质子NMR谱。以相对于四甲基甲硅烷的δ值报道化学位移。液相色谱(LC)/质谱在与Waters Micromass ZQ偶联的Shimadzu LC上使用至少一种以下方法进行。使用至少一种下列方法获得HPLC保留时间。

LC-MS方法:

LC/MS方法A＝柱:PUROSPHER@star RP-18(4X55mm),3μm；缓冲剂:20mM NH₄OAc/水；流动相A:缓冲剂+ACN(90+10)；流动相B:缓冲剂+MeCN(10+90)；流速:2.5mL/min)

LC/MS方法B＝柱:ZORBAX SB C18(4.6X50mm),5μm；正模式流动相A:10％MeOH–90％H₂O–0.1％TFA；流动相B:90％MeOH–10％H₂O–0.1％TFA；流速:5mL/min)

LC/MS方法C＝柱–Ascentis Express C8(5x2.1mm),2.7μm；流动相A:2％MeCN–98％H₂O–10mM NH₄COOH；流动相B:98％ACN–2％H₂O–10mM NH₄COOH；流速:1/min)

LC/MS方法D＝柱–ACQUITY UPLC BEH C18(2.1X 50mm),1.7μm；流动相A:0.1％TFA/水；流动相B:ACN；流速:1mL/min)

LC/MS方法E＝柱–Ascentis Express C18(5X2.1mm),2.7μm；流动相A:2％MeCN–98％H₂O–10mM NH₄COOH；流动相B:98％ACN–2％H₂O–10mM NH₄COOH；流速:1mL/min)

手性HPLC方法:

方法A1:CHIRALCEL OJH(250x4.6)mm 5微米

流动相:0.2％DEA/正己烷:乙醇(80:20)

方法A2:CHIRALCEL OJH(250x4.6)mm 5微米

流动相:0.2％DEA/正己烷:乙醇(70:30)

方法B1:CHIRALCEL AD-H(250x4.6)mm 5微米

流动相:0.2％DEA/正己烷:乙醇(70:30)

方法B2:CHIRALCEL AD-H(250x4.6)mm 5微米

流动相:正己烷:乙醇(50:50)

方法C1:CHIRALCEL-ASH(250x4.6)mm 5微米

流动相:0.2％DEA/正己烷:乙醇(70:30)

方法D1:CHIRALCEL IC(250x4.6)mm 5微米

流动相:0.2％DEA/己烷:乙醇(70:30)

手性SFC方法:

方法A1:柱:CHIRALCEL OD H；共溶剂:0.5％DEA/甲醇；共溶剂％:30；总体流速:3g/min；柱温:34.8；反压:100巴；仪器:THAR SFC

方法A2:柱:CHIRALCEL OD H；共溶剂:0.5％DEA/甲醇；共溶剂％:25；总体流速:3g/min；反压:100巴；仪器:THAR SFC

方法B1:柱:LUX-C4；共溶剂:0.5％DEA/甲醇；共溶剂％:40；总体流速:3g/min；反压:103巴；仪器:THAR SFC

分析性HPLC方法:

方法A:Waters分析性C18sunfire柱(4.6x 150mm,3.5μm)；流动相:缓冲剂:0.05％TFA/H₂O pH＝2.5，用氨调节

A＝缓冲剂和乙腈(95:5),B＝乙腈和缓冲剂(95:5)；0–15min,0％B→50％B；15–18min,50％B→100％B；18–23min,100％B；流速＝1mL/min；λ＝254nm和220nm；运行时间＝28min.

方法B:Waters分析性Phenyl Xbridge柱(4.6x 150mm,3.5μm),流动相:缓冲剂:0.05％TFA/H₂O pH＝2.5，用氨调节

A＝缓冲剂和乙腈(95:5),B＝乙腈和缓冲剂(95:5)；0–15min,0％B→50％B；15–18min,50％B→100％B；18–23min,100％B；流速＝1mL/min；λ＝254nm和220nm；运行时间＝28min.

方法C:Waters分析性C18sunfire柱(4.6x 150mm,3.5μm)；流动相:缓冲剂:0.05％TFA/H₂O pH＝2.5，用氨调节

A＝缓冲剂和乙腈(95:5),B＝乙腈和缓冲剂(95:5)；0–12min,10％B→100％B；12–15min,100％B；流速＝1mL/min；λ＝254nm和220nm；运行时间＝17min.

方法D:Waters分析性Phenyl Xbridge柱(4.6x 150mm,3.5μm),流动相:缓冲剂:0.05％TFA/H₂O pH＝2.5，用氨调节

A＝缓冲剂和乙腈(95:5),B＝乙腈和缓冲剂(95:5)；0–12min,10％B→100％B；12–15min,B→100％B；流速＝1mL/min；λ＝254nm和220nm；运行时间＝17min.

方法E:ECLIPSE XDB C18(4.6x 150mm,3.5μm)；流动相

A＝20mM NH₄OAc/H₂O,B＝乙腈；0–12min,10％B→100％B；12–15min,100％B；流速＝1mL/min；λ＝254nm和220nm；运行时间＝18min.

方法F:Waters分析性Phenyl Xbridge C18柱(4.6x 150mm,3.5μm),流动相:A＝20mM NH₄OAc/H₂O,B＝乙腈；0–12min,10％B→100％B；12–15min,B→100％B；流速＝1mL/min；λ＝254nm和220nm；运行时间＝20min.

实施例1

2-异戊基-6-(吡啶-4-基)喹啉-4-醇

部分A.6-甲基-3-氧代庚酸甲酯

在0℃经套管向氢化钠(3.37g,84mmol)在THF(220mL)中的混悬液中加入3-氧代丁酸甲酯(8.9g,77mmol)在THF(50mL)中的溶液。将反应混合物在0℃搅拌15min。然后历时15min在0℃经注射器逐滴加入n-BuLi(50.3mL,80mmol)。在0℃继续搅拌15min。然后经套管逐滴加入1-碘-2-甲基丙烷(14.81g,80mmol)溶于THF(50mL)中的溶液。移去冷却浴并将反应混合物温热至室温并搅拌4h。将反应混合物通过加入3M HCl溶液(aq.)(60mL)淬灭。将混合物转移至分液漏斗并将水层用乙醚(1x 300mL，随后2x 150mL)萃取。将合并的有机层用水洗涤直到呈中性(5x 150mL)，然后用盐水(150mL)洗涤，经硫酸镁干燥，过滤并浓缩。将残留物经硅胶柱色谱纯化(15％→30％乙酸乙酯/己烷)得到6-甲基-3-氧代庚酸甲酯(4.65g,35％收率)，其为淡黄色油状物:¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ3.76(s,3H),3.48(s,2H),2.52-2.59(m,2H),1.47-1.62(m,3H),0.91(d,J＝6.5Hz,6H).

部分B.(E)-3-((4-溴苯基)氨基)-6-甲基庚-2-烯酸甲酯

向4-溴苯胺(5.09g,29.6mmol)和6-甲基-3-氧代庚酸甲酯(5.10g,29.6mmol)在甲苯(30mL)中的溶液中加入乙酸(0.848mL,14.8mmol)和分子筛(5.0g)。将混合物在85℃加热24h。将混合物冷却至室温并浓缩。将残留物经硅胶柱色谱纯化(10％→50％乙酸乙酯/己烷)得到(E)-3-((4-溴苯基)氨基)-6-甲基庚-2-烯酸甲酯(4.51g,47％收率)，其为淡黄色固体:¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ9.33(br s,1H),7.43-7.51(m,4H),7.23-7.28(m,2H),6.57-6.63(m,2H),5.32(s,1H),3.59(s,3H),3.51(s,3H),2.56-2.64(m,2H),1.49-1.64(m,3H),0.93(d,J＝6.5Hz,6H)

部分C.6-溴-2-异戊基喹啉-4(1H)-酮

在100mL圆底烧瓶中将苯基乙醚(40mL)和3-(4-溴苯基氨基)-6-甲基庚-2-烯酸甲酯(2.25g,6.90mmol)的混合物在250℃加热1h。将混合物冷却下来并转移至含有己烷(200mL)的在分开的油浴中预先加热至40℃的大烧瓶中。将固体收集于布氏漏斗中并用己烷洗涤得到6-溴-2-异戊基喹啉-4(1H)-酮(1.62g,80％收率)，其为棕色固体:¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ11.66(s,1H),8.12(d,J＝2.3Hz,1H),7.77(dd,J＝8.9,2.4Hz,1H),7.52(d,J＝8.8Hz,1H),5.99(d,J＝1.5Hz,1H),2.57-2.64(m,2H),1.52-1.65(m,3H),0.94(d,J＝6.3Hz,6H)；LCMS(ESI)m/e 294.0[(M+H)⁺,C₁₄H₁₇BrNO的计算值294.0].

部分D.2-异戊基-6-(吡啶-4-基)喹啉-4(1H)-酮

向6-溴-2-异戊基喹啉-4(1H)-酮(1.50g,5.10mmol)在甲苯(32mL)和乙醇(8mL)中的溶液中加入吡啶-4-基硼酸(0.940g,7.65mmol)和1M碳酸钠水溶液(6.12mL,6.12mmol)。将混合物经超声脱气若干分钟。然后加入Pd(PPh₃)₄(0.589g,0.510mmol)并将混合物在95℃加热3h。将反应混合物用5％MeOH/CH₂Cl₂稀释并转移至含有饱和碳酸氢钠水溶液(25mL)的分液漏斗中。将水层用5％MeOH/CH₂Cl₂(3x 50mL)萃取。首次萃取后，将存在的固体收集于布氏漏斗中。将滤液倒入分液漏斗并再萃取两次。将合并的有机层用盐水(25mL)洗涤，经硫酸镁干燥，过滤并浓缩得到棕色固体。将固体收集于布氏漏斗并将来自滤液浓缩物的固体经硅胶柱色谱分开纯化(4％→10％甲醇/二氯甲烷)分别得到820mg和270mg的预期产物。合并产物得到2-异戊基-6-(吡啶-4-基)喹啉-4-醇(1.15g,77％收率)，其为淡黄色固体:¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ11.67(s,1H),8.66(dd,J＝4.5,1.5Hz,1H),8.43(d,J＝2.0Hz,1H),8.09(dd,J＝8.8,2.3Hz,1H),7.78(dd,J＝4.6,1.6Hz,2H),7.68(d,J＝8.5Hz,1H),6.02(s,1H),3.18(d,J＝5.3Hz,1H),2.61-2.66(m,2H),1.56-1.65(m,3H),0.96(d,J＝6.3Hz,6H)；LCMS(ESI)m/e 293.1[(M+H)⁺,C₁₉H₂₁N₂O的计算值293.2].

实施例2

2-异戊基-4-甲氧基-6-(吡啶-4-基)喹啉

在室温向如实施例1所述制备的2-异戊基-6-(吡啶-4-基)喹啉-4-醇(40mg,0.137mmol)在DMF(1mL)中的溶液中加入氢化钠(10.9mg,0.274mmol)。搅拌15min后，经注射器加入碘甲烷(0.026mL,0.410mmol)。将反应混合物在室温搅拌45min。将反应混合物用饱和碳酸氢钠水溶液(1mL)淬灭并转移至含有饱和碳酸氢钠水溶液(5mL)的分液漏斗。将水层用5％MeOH/CH₂Cl₂(5x 10mL)萃取。将合并的有机层用盐水(10mL)洗涤，经硫酸镁干燥，过滤并浓缩。将残留物经硅胶柱色谱纯化(2％→7％甲醇/CH₂Cl₂)得到2-异戊基-4-甲氧基-6-(吡啶-4-基)喹啉(18.6mg,44％收率)，其为黄色油状物:¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.69-8.74(m,2H),8.46(d,J＝2.0Hz,1H),8.14(d,J＝8.8Hz,1H),7.97(dd,J＝8.8,2.3Hz,1H),7.65-7.70(m,2H),6.72(s,1H),4.12(s,3H),2.94-3.00(m,2H),1.70-1.78(m,3H),1.02(d,J＝6.3Hz,6H)；LCMS(ESI)m/e 307.2[(M+H)⁺,C₂₀H₂₃N₂O的计算值307.2].

实施例3

4-溴-2-异戊基-6-(吡啶-4-基)喹啉

在室温向如实施例1所述制备的2-异戊基-6-(吡啶-4-基)喹啉-4-醇(250mg,0.855mmol)在DMF(2.5mL)中的混悬液中经注射器加入三溴化磷(0.097mL,1.026mmol)。反应放热。将反应混合物在室温搅拌20min。加入冰水(10mL)并将混合物在室温搅拌30min。通过加入1N NaOH(aq.)将混合物的pH调节为pH＝8。将混合物转移至含有饱和碳酸氢钠水溶液(10mL)的分液漏斗中并将水层用10％甲醇/二氯甲烷(4x 15mL)萃取。将合并的有机层用盐水(10mL)洗涤，经硫酸镁干燥，过滤并浓缩。将残留物经硅胶柱色谱纯化(2％→7％甲醇/CH₂Cl₂)得到4-溴-2-异戊基-6-(吡啶-4-基)喹啉(181mg,60％收率)，其为橙色油状物，其静置后固化:¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.77(br.s.,2H),8.43(d,J＝1.8Hz,1H),8.19(d,J＝8.8Hz,1H),8.02(dd,J＝8.7,2.1Hz,1H),7.72(d,J＝6.0Hz,2H),7.71(s,1H),2.97-3.03(m,2H),1.68-1.78(m,3H),1.02(d,J＝6.5Hz,6H)；LCMS(ESI)m/e 355.0[(M+H)⁺,C₁₉H₂₀BrN₂的计算值355.1].

实施例4

2-异戊基-6-(吡啶-4-基)喹啉

将如实施例3所述制备的4-溴-2-异戊基-6-(吡啶-4-基)喹啉(25mg,0.070mmol)溶于乙醇(1mL)并用钯/炭(10％,Degussa型)(30.0mg,0.014mmol)处理。将混合物置于1atm氢气气氛下2h。将混合物在用甲醇淋洗的同时经硅藻土填料()过滤并将滤液浓缩。将残留物经硅胶柱色谱纯化(2％→4％甲醇/CH₂Cl₂)得到2-异戊基-6-(吡啶-4-基)喹啉(5mg,24％收率)，其为淡黄色油状物:¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.74(d,J＝5.5Hz,2H),8.17-8.23(m,2H),8.08(d,J＝2.0Hz,1H),7.99(dd,J＝8.8,2.0Hz,1H),7.66(dd,J＝4.5,1.8Hz,2H),7.41(d,J＝8.3Hz,1H),3.05(d,J＝7.5Hz,2H),1.70-1.78(m,3H),1.02(d,J＝6.3Hz,6H)；LCMS(ESI)m/e 277.1[(M+H)⁺,C₁₉H₂₁N₂的计算值277.2].

实施例5

2-异戊基-N,N-二甲基-6-(吡啶-4-基)喹啉-4-胺

向如实施例3所述制备的4-溴-2-异戊基-6-(吡啶-4-基)喹啉(45mg,0.127mmol)在N-甲基-2-吡咯烷酮(1mL)中的溶液中加入二甲基胺(2M在THF中)(0.317mL,0.633mmol)并将混合物在100℃加热14h。将反应混合物转移至含有乙醚(20mL)的分液漏斗。将有机层用水(3x 5mL)洗涤。将合并的有机层用盐水(5mL)洗涤，经硫酸镁干燥，过滤并浓缩。将残留物经硅胶柱色谱纯化(4％→8％甲醇/CH₂Cl₂)得到2-异戊基-N,N-二甲基-6-(吡啶-4-基)喹啉-4-胺(5mg,12％收率)，其为无色油状物。将产物经反相HPLC纯化(5％MeCN:95％水→95％MeCN:5％水，含有0.1％TFA)。将有机溶剂减压除去并将含水混合物冷冻并置于冷冻干燥器得到2-异戊基-N,N-二甲基-6-(吡啶-4-基)喹啉-4-胺(5mg,12％收率)，其为淡黄色固体:¹H NMR(400MHz,CD₃OD)δ8.89(d,J＝6.5Hz,2H),8.82(d,J＝1.8Hz,1H),8.41(dd,J＝9.0,2.0Hz,1H),8.33(d,J＝6.5Hz,2H),8.05(d,J＝8.8Hz,1H),6.97(s,1H),3.63(s,6H),2.99(dd,J＝9.0,7.0Hz,2H),1.72-1.80(m,3H),1.06(d,J＝6.5Hz,6H)；LCMS(ESI)m/e 320.1[(M+H)⁺,C₂₁H₂₆N₃的计算值320.2].

实施例6

2-异戊基-6-(吡啶-4-基)喹啉-4-甲腈

将如实施例3所述制备的4-溴-2-异戊基-6-(吡啶-4-基)喹啉(180mg,0.507mmol)溶于DMF(5mL)和水(0.25mL)。将混合物经超声脱气若干分钟。加入氰化锌(33.8mL,0.532mmol)、Pd₂(dba)₃(23.20mg,0.025mmol)和dppf(28.1mg,0.051mmol)并将反应混合物在120℃在氮气下加热1.25h。将混合物冷却至室温并转移至含有乙醚(100mL)的分液漏斗并将有机层用水(5x 15mL)洗涤，除去任何残留的DMF。将合并的有机层用盐水(15mL)洗涤，经硫酸镁干燥，过滤并浓缩。将残留物经硅胶柱色谱纯化(1％→5％甲醇/二氯甲烷)得到2-异戊基-6-(吡啶-4-基)喹啉-4-甲腈(138mg,90％收率)，其为红色固体:¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.80(d,J＝5.5Hz,2H),8.40(d,J＝1.8Hz,1H),8.28(d,J＝8.8Hz,1H),8.12(dd,J＝8.8,2.0Hz,1H),7.72-7.76(m,3H),3.05-3.11(m,2H),1.68-1.80(m,3H),1.03(d,J＝6.3Hz,6H)；LCMS(ESI)m/e 302.1[(M+H)⁺,C₂₀H₂₀N₃的计算值302.2].

实施例7

(-)-(R)-2-(1-氨基-3-甲基丁基)-6-(吡啶-4-基)喹啉-4-甲腈

部分A.2-(1-溴-3-甲基丁基)-6-(吡啶-4-基)喹啉-4-甲腈

向2-异戊基-6-(吡啶-4-基)喹啉-4-甲腈(500mg,1.66mmol)和AIBN(136mg,0.830mmol)在四氯化碳中(6mL)中的溶液中加入NBS(325mg,1.83mmol)。然后将反应混合物在75℃加热3.5h。加入额外的NBS(110mg)和AIBN(60mg)并继续搅拌额外的2.5h。将混合物冷却至室温并转移至含有饱和碳酸氢钠水溶液(10mL)的分液漏斗。将水层用二氯甲烷(3x 20mL)萃取。将合并的有机层用盐水(10mL)洗涤，经硫酸镁干燥，过滤并浓缩。将残留物经硅胶柱色谱纯化(2％→7％甲醇/CH₂Cl₂)得到2-(1-溴-3-甲基丁基)-6-(吡啶-4-基)喹啉-4-甲腈(510mg,81％收率)，其为棕色固体:¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.81(d,J＝5.8Hz,2H),8.42(d,J＝1.8Hz,1H),8.31(d,J＝8.5Hz,1H),8.15(dd,J＝8.8,2.0Hz,1H),8.03(s,1H),7.73(dd,J＝4.5,1.5Hz,2H),5.28-5.34(m,J＝8.8,6.8Hz,1H),2.32-2.40(m,1H),2.15(dt,J＝14.3,7.2Hz,1H),1.79-1.88(m,1H),1.05(d,J＝6.5Hz,3H),1.01(d,J＝6.5Hz,3H)；LCMS(ESI)m/e 380.0[(M+H)⁺,C₂₀H₁₉BrN₃的计算值380.1]；LCMS(ESI)m/e 380.0[(M+H)⁺,C₂₀H₁₉BrN₃的计算值380.1].

部分B.2-(1-叠氮基-3-甲基丁基)-6-(吡啶-4-基)喹啉-4-甲腈

在锥形瓶中将2-(1-溴-3-甲基丁基)-6-(吡啶-4-基)喹啉-4-甲腈(700mg,1.841mmol)在丙酮(1mL)中的溶液用叠氮化钠(1.20g,18.41mmol)处理。将混合物在70℃加热3h。将反应混合物转移至含有水(20mL)的分液漏斗。将水层用二氯甲烷(3x 20mL)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经硫酸镁干燥，过滤并浓缩。将残留物经硅胶柱色谱纯化(1％→3％甲醇/CH₂Cl₂)得到2-(1-叠氮基-3-甲基丁基)-6-(吡啶-4-基)喹啉-4-甲腈(480mg,76％收率)，其为棕色油状物:¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.80(dd,J＝4.5,1.5Hz,2H),8.43(d,J＝1.8Hz,1H),8.33(d,J＝9.3Hz,1H),8.16(dd,J＝8.8,2.0Hz,1H),7.89(s,1H),7.70(dd,J＝4.5,1.8Hz,2H),4.82(dd,J＝9.0,5.5Hz,1H),1.91-2.00(m,1H),1.75-1.85(m,2H),1.06(d,J＝2.5Hz,3H),1.04(d,J＝2.5Hz,3H)；LCMS(ESI)m/e 343.1[(M+H)⁺,C₂₀H₁₉N₆的计算值343.2].

将对映异构体经手性色谱分离(ChiralCel AD-H柱,30×250mm,5μm,15％甲醇与0.1％二乙基胺/85％CO₂,150巴,35℃,70mL/min,λ＝260nm):

峰1:

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.80(dd,J＝4.5,1.5Hz,2H),8.43(d,J＝1.8Hz,1H),8.33(d,J＝9.3Hz,1H),8.16(dd,J＝8.8,2.0Hz,1H),7.89(s,1H),7.70(dd,J＝4.5,1.8Hz,2H),4.82(dd,J＝9.0,5.5Hz,1H),1.91-2.00(m,1H),1.75-1.85(m,2H),1.06(d,J＝2.5Hz,3H),1.04(d,J＝2.5Hz,3H)；

峰2:

部分C.2-(1-氨基-3-甲基丁基)-6-(吡啶-4-基)喹啉-4-甲腈

将2-(1-叠氮基-3-甲基丁基)-6-(吡啶-4-基)喹啉-4-甲腈(来自部分B的峰1)(90mg,0.263mmol)在THF(4mL)中的溶液用三苯基膦(138mg,0.526mmol)处理。将混合物在室温搅拌3h。加入水(0.2mL)并将混合物在50℃加热24h。将反应混合物浓缩并将产物经反相HPLC纯化(5％MeCN:95％水→95％MeCN:5％水，含有0.1％TFA)。将有机溶剂减压除去并将含水混合物冷冻并置于冷冻干燥器得到(-)-(R)-2-(1-氨基-3-甲基丁基)-6-(吡啶-4-基)喹啉-4-甲腈(75mg,52％收率)，其为TFA盐:[α]²²_D–3.81(c 0.105,MeOH)；¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ8.84-8.87(m,2H),8.59(br s,3H),8.46-8.50(m,2H),8.45(s,1H),8.37(d,J＝8.8Hz,1H),8.08-8.12(m,2H),4.72-4.79(m,1H),1.78-1.95(m,2H),1.62(dt,J＝13.2,6.6Hz,1H),0.95(dd,J＝6.4,4.4Hz,6H)；LCMS(ESI)m/e 317.2[(M+H)⁺,C₂₀H₂₁N₄的计算值317.2]。经X射线结晶学确定绝对立体化学。

实施例8

(+)-(S)-2-(1-氨基-3-甲基丁基)-6-(吡啶-4-基)喹啉-4-甲腈

将2-(1-叠氮基-3-甲基丁基)-6-(吡啶-4-基)喹啉-4-甲腈(来自实施例7部分B的峰2)(80mg,0.234mmol)在THF(4mL)中的溶液用三苯基膦(123mg,0.467mmol)处理。将混合物在室温搅拌3h。加入水(0.2mL)并将混合物在50℃加热24h。将反应混合物浓缩并将产物经反相HPLC纯化(5％MeCN:95％水→95％MeCN:5％水，含有0.1％TFA)。将有机溶剂减压除去并将含水混合物冷冻并置于冷冻干燥器得到(+)-(S)-2-(1-氨基-3-甲基丁基)-6-(吡啶-4-基)喹啉-4-甲腈(61mg,48％收率)，其为TFA盐:[α]²²_D 3.64(c0.055,MeOH)；¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ8.84-8.87(m,2H),8.59(br s,3H),8.46-8.50(m,2H),8.45(s,1H),8.37(d,J＝8.8Hz,1H),8.08-8.12(m,2H),4.72-4.79(m,1H),1.78-1.95(m,2H),1.62(dt,J＝13.2,6.6Hz,1H),0.95(dd,J＝6.4,4.4Hz,6H)；LCMS(ESI)m/e 317.2[(M+H)⁺,C₂₀H₂₁N₄的计算值317.2].经X射线结晶学确定绝对立体化学。

实施例9

2-异戊基-7-甲氧基-6-(噁唑-5-基)喹啉-4-醇

部分A.5-(2-甲氧基-4-硝基苯基)噁唑

向2-甲氧基-4-硝基苯甲醛(700mg,3.86mmol)和TosMIC(754mg,3.86mmol)在MeOH(7mL)中的溶液中加入碳酸钾(561mg,4.06mmol)。将反应混合物回流加热3h。将反应混合物冷却至室温并转移至含有饱和碳酸氢钠水溶液(25mL)的分液漏斗。将水层用乙酸乙酯(3×50mL)萃取。将合并的有机层用盐水(25mL)洗涤，经硫酸镁干燥，过滤并浓缩。将残留物经硅胶柱色谱纯化(30％→40％乙酸乙酯/己烷)得到5-(2-甲氧基-4-硝基苯基)噁唑(732mg,86％收率)，其为黄色固体:¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ7.98(s,1H),7.93(d,J＝1.8Hz,1H),7.92(s,1H),7.84(d,J＝1.8Hz,1H),7.75(s,1H),4.08(s,3H)；LC/MS(ESI)m/e 221.3[(M+H)⁺,C₁₀H₉N₂O₄的计算值221.1].

部分B.3-甲氧基-4-(噁唑-5-基)苯胺

在帕尔瓶中将5-(2-甲氧基-4-硝基苯基)噁唑(700mg,3.18mmol)溶于EtOH(30mL)和CHCl₃(15mL)。加入10％钯/炭(677mg,0.318mmol,Degussa型)并将混合物在40psi的H₂下置于帕尔振荡器上1.5h。将催化剂通过硅藻土填料()过滤除去并将滤液浓缩。将产物由乙酸乙酯/乙醇结晶得到3-甲氧基-4-(噁唑-5-基)苯胺(496mg,82％收率)，其为灰色固体:¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆)δ8.34(s,1H),7.55(d,J＝8.3Hz,1H),7.37(s,1H),6.70(s,1H),6.63(d,J＝8.1Hz,1H),3.89(s,3H)；LC/MS(ESI)m/e 191.3[(M+H)⁺,C₁₀H₁₁N₂O₂的计算值191.1].

部分C.(E)-3-(3-甲氧基-4-(噁唑-5-基)苯基氨基)-6-甲基庚-2-烯酸甲酯

向3-甲氧基-4-(噁唑-5-基)苯胺(2.65g,13.94mmol)和6-甲基-3-氧代庚酸甲酯(2.40g,13.94mmol)在甲苯(15mL)中的溶液中加入乙酸(0.798mL,13.94mmol)和分子筛(3.5g)。将混合物在85℃加热24h。(加热2h后，由于起始物质在甲苯中的差的溶解性，加入乙醇(3.0mL)。)将混合物冷却至室温，经硅藻土填料()过滤，并将滤液浓缩。将残留物经硅胶柱色谱纯化(20％→80％乙酸乙酯/己烷)得到(E)-3-(3-甲氧基-4-(噁唑-5-基)苯基氨基)-6-甲基庚-2-烯酸甲酯(1.57g,33％收率)，其为淡黄色油状物:¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ10.45(br s,1H),7.92(s,1H),7.71-7.75(m,1H),7.54(s,1H),6.81(dd,J＝8.3,2.0Hz,1H),6.70(d,J＝2.0Hz,1H),4.80(br s,1H),3.97(s,3H),3.72(s,3H),2.37-2.45(m,2H),1.54(dt,J＝13.3,6.7Hz,1H),1.35-1.43(m,2H),0.84(d,J＝6.8Hz,6H).

部分D.2-异戊基-7-甲氧基-6-(噁唑-5-基)喹啉-4-醇

在25mL圆底烧瓶中将苯基乙醚(25mL)和(E)-3-(3-甲氧基-4-(噁唑-5-基)苯基氨基)-6-甲基庚-2-烯酸甲酯(1.34g,3.89mmol)的混合物在250℃加热45min。将反应混合物经LCMS监测。将混合物在分开的油浴中冷却下来至40℃并在40℃转移至含有己烷(110mL)的烧瓶。将固体收集于布氏漏斗并用己烷洗涤得到2-异戊基-7-甲氧基-6-(噁唑-5-基)喹啉-4-醇(1.01g,79％收率)，其为棕色固体:¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ11.49(s,1H),8.48(s,1H),8.35(s,1H),7.58(s,1H),7.10(s,1H),5.90(d,J＝1.5Hz,1H),4.04(s,3H),2.55-2.63(m,2H),1.53-1.64(m,3H),0.95(d,J＝6.3Hz,6H)；LCMS(ESI)m/e 313.1[(M+H)⁺,C₁₈H₂₁N₂O₃的计算值313.2].

实施例10

5-(4-溴-2-异戊基-7-甲氧基喹啉-6-基)噁唑

在室温向如实施例9所述制备的2-异戊基-7-甲氧基-6-(噁唑-5-基)喹啉-4-醇(2.14g,2.60mmol)在二氯乙烷(25mL)中的混悬液中加入三溴氧磷(7.46g,26.0mmol)，随后加热DMF(0.202mL,2.60mmol)。将混合物在65℃加热23h。将混合物冷却至室温并转移至含有饱和碳酸氢钠水溶液(50mL)的分液漏斗。将水层用5％甲醇/二氯甲烷(4x 100mL)萃取。将合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，经硫酸镁干燥，过滤并浓缩。将残留物经硅胶柱色谱纯化(2％→7％甲醇/二氯甲烷)得到5-(4-溴-2-异戊基-7-甲氧基喹啉-6-基)噁唑(414mg,42％收率)，其为褐色固体:¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.52(s,1H),8.04(s,1H),7.74(s,1H),7.54(s,1H),7.50(br.s.,1H),4.14(s,3H),2.95(br.s.,2H),1.63-1.77(m,3H),1.01(d,J＝6.3Hz,6H)；LCMS(ESI)m/e375.0[(M+H)⁺,C₁₈H₂₀BrN₂O₂的计算值375.1].

实施例11

2-异戊基-7-甲氧基-6-(噁唑-5-基)喹啉-4-甲腈

将如实施例10所述制备的5-(4-溴-2-异戊基-7-甲氧基喹啉-6-基)噁唑(425mg,1.133mmol)溶于DMF(10mL)和水(0.5mL)。将混合物经超声脱气若干分钟。加入氰化锌(140mg,1.189mmol)、Pd₂(dba)₃(51.9mg,0.057mmol)和dppf(62.8mg,0.113mmol)并将反应混合物在120℃在氮气下加热45min。将混合物冷却至室温并转移至含有乙醚(250mL)的分液漏斗并将有机层用水(5x 25mL)洗涤，除去任何残留的DMF。将合并的有机层用盐水(25mL)洗涤，经硫酸镁干燥，过滤并浓缩。将残留物经硅胶柱色谱纯化(1％→4％甲醇/二氯甲烷)得到2-异戊基-7-甲氧基-6-(噁唑-5-基)喹啉-4-甲腈(340mg,92％收率)，其为褐色固体:¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.51(s,1H),8.06(s,1H),7.79(s,1H),7.59(br s,1H),7.56(s,1H),4.16(s,3H),3.00-3.06(m,2H),1.68-1.77(m,3H),1.02(d,J＝6.3Hz,6H)；LCMS(ESI)m/e 322.1[(M+H)⁺,C₁₉H₂₀N₃O₂的计算值322.2].

实施例12和实施例13

(-)-2-(1-氨基-3-甲基丁基)-7-甲氧基-6-(噁唑-5-基)喹啉-4-甲腈(实施例12)

(+)-2-(1-氨基-3-甲基丁基)-7-甲氧基-6-(噁唑-5-基)喹啉-4-甲腈(实施例13)

部分A.2-(1-溴-3-甲基丁基)-7-甲氧基-6-(噁唑-5-基)喹啉-4-甲腈

向如实施例11所述制备的2-异戊基-7-甲氧基-6-(噁唑-5-基)喹啉-4-甲腈(268mg,0.834mmol)在四氯化碳中(8mL)中的溶液中加入N-溴琥珀酰亚胺(163mg,0.917mmol)和AIBN(27.4mg,0.167mmol)。然后将反应混合物在75℃加热1.5h。将混合物冷却至室温并转移至含有饱和碳酸氢钠水溶液(10mL)的分液漏斗。将水层用二氯甲烷(3x 20mL)萃取。将合并的有机层用盐水(10mL)洗涤，经硫酸镁干燥，过滤并浓缩。将残留物经硅胶柱色谱纯化(1％→3％甲醇/二氯甲烷)得到2-(1-溴-3-甲基丁基)-7-甲氧基-6-(噁唑-5-基)喹啉-4-甲腈(318mg,86％收率)，其为黄色固体:¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.54(s,1H),8.08(s,1H),7.83(s,1H),7.82(s,1H),7.60(s,1H),5.26(dd,J＝9.0,6.8Hz,1H),4.18(s,3H),2.30-2.39(m,1H),2.06-2.17(m,1H),1.79-1.88(m,1H),1.04(d,J＝6.5Hz,3H),1.01(d,J＝6.5Hz,3H)；LCMS(ESI)m/e 400.0[(M+H)⁺,C₁₉H₁₉BrN₃O₂的计算值400.1].

部分B.2-(1-叠氮基-3-甲基丁基)-7-甲氧基-6-(噁唑-5-基)喹啉-4-甲腈

将2-(1-溴-3-甲基丁基)-7-甲氧基-6-(噁唑-5-基)喹啉-4-甲腈(282mg,0.705mmol)在丙酮(7mL)中的溶液用叠氮化钠(458mg,7.05mmol)处理。将混合物在70℃加热2h。将反应混合物转移至含有水(25mL)的分液漏斗。将水层用二氯甲烷(3x 50mL)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经硫酸镁干燥，过滤并浓缩。将残留物经硅胶柱色谱纯化(1％→3％甲醇/二氯甲烷)得到2-(1-叠氮基-3-甲基丁基)-7-甲氧基-6-(噁唑-5-基)喹啉-4-甲腈(189mg,71％收率)，其为黄色固体:¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.55(s,1H),8.08(s,1H),7.82(s,1H),7.69(s,1H),7.61(s,1H),4.75(dd,J＝9.2,5.4Hz,1H),4.19(s,3H),1.89-1.99(m,1H),1.75-1.87(m,2H),1.05(d,J＝2.8Hz,3H),1.03(d,J＝2.8Hz,3H)；LCMS(ESI)m/e 363.1[(M+H)⁺,C₁₉H₁₉N₆O₂的计算值363.2].

部分C.2-(1-氨基-3-甲基丁基)-7-甲氧基-6-(噁唑-5-基)喹啉-4-甲腈

将2-(1-叠氮基-3-甲基丁基)-7-甲氧基-6-(噁唑-5-基)喹啉-4-甲腈(114mg,0.315mmol)在THF(5.0mL)中的溶液用三苯基膦(165mg,0.629mmol)处理。将混合物在室温搅拌3h。加入水(0.25mL)并将混合物在50℃加热24h。将反应混合物冷却至室温并浓缩。将产物经反相HPLC纯化(5％MeCN:95％水→95％MeCN:5％水，含有0.1％TFA)。将有机溶剂减压除去并将含水混合物冷冻并置于冷冻干燥器得到2-(1-氨基-3-甲基丁基)-7-甲氧基-6-(噁唑-5-基)喹啉-4-甲腈(96mg,68％收率)，其为TFA盐:¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ8.67(s,1H),8.51(br s,3H),8.39(s,1H),8.22(s,1H),7.93(s,1H),7.67(s,1H),4.64-4.70(m,1H),4.19(s,3H),1.85-1.93(m,1H),1.77-1.84(m,1H),1.54-1.63(m,1H),0.96(d,J＝6.1Hz,3H),0.93(d,J＝6.4Hz,3H)；LCMS(ESI)m/e 337.1[(M+H)⁺,C₁₉H₂₁N₄O₂的计算值337.2].

对映异构体经手性色谱分离(ChiralCel OJ-H柱,30×250mm,5μm,10％甲醇与0.1％二乙基胺/90％CO₂,120巴,35℃,70mL/min,λ＝270nm):

实施例12(峰1):

[α]²²_D–0.54(c 1.63,MeOH)；¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.52(s,1H),8.06(s,1H),7.79(s,1H),7.73(s,1H),7.59(s,1H),4.27(t,J＝7.2Hz,1H),4.17(s,3H),1.78-1.70(m,1H),1.70-1.64(m,2H),1.02(d,J＝4.3Hz,3H),1.00(d,J＝4.0Hz,3H)；LCMS(ESI)m/e 337.1[(M+H)⁺,C₁₉H₂₁N₄O₂的计算值337.2].

实施例13(峰2):

[α]²²_D 1.19(c 1.63,MeOH)；¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.52(s,1H),8.06(s,1H),7.80(s,1H),7.73(s,1H),7.59(s,1H),4.27(t,J＝7.2Hz,1H),4.17(s,3H),1.79-1.70(m,1H),1.69-1.64(m,2H),1.02(d,J＝4.0Hz,3H),1.00(d,J＝4.0Hz,3H)；LCMS(ESI)m/e 337.1[(M+H)⁺,C₁₉H₂₁N₄O₂的计算值337.2].

实施例14

3-异丁基-2-甲基-6-(吡啶-4-基)喹啉-4-醇

部分A.6-溴-3-异丁基-2-甲基喹啉-4(1H)-酮

将2-氨基-5-溴苯甲酸(4.00g,18.52mmol)和5-甲基己-2-酮(3.17g,27.8mmol)在磷酰氯(15.0mL,161mmol)中的混合物在100℃加热2h。将混合物冷却至室温并浓缩。将残留物转移至烧杯并用冰和固体NaHCO₃处理直到pH＝7-8。将混合物用水(100mL)稀释并转移至分液漏斗。将水层用乙酸乙酯(3x 100mL)萃取。将合并的有机层用盐水(100mL)洗涤，经硫酸镁干燥，过滤并浓缩。将残留物经硅胶柱色谱纯化(2％→4％→6％MeOH/CH₂Cl₂)得到6-溴-2-异戊基喹啉-4(1H)-酮(1.015g)，其为黄色固体。在来自萃取液的水层的顶部处为絮状混合物。在除去大部分水层后，将絮状混合物倒入分离烧瓶并收集黄色固体，用水洗涤，随后用最少的乙酸乙酯洗涤，并真空干燥得到黄色固体(45mg)。¹H NMR和LCMS表明由柱色谱和过滤分离的产物是相同的。所得的6-溴-2-异戊基喹啉-4(1H)-酮的总量为(1.06g,19％收率):¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ11.53(s,1H),8.13(d,J＝2.5Hz,1H),7.72(dd,J＝8.9,2.4Hz,1H),7.46(d,J＝8.8Hz,1H),2.40(s,3H),2.40(d,J＝5.3Hz,2H),1.87(dt,J＝13.6,6.9Hz,1H),0.87(d,J＝6.8Hz,6H)；LCMS(ESI)m/e 294.0[(M+H)⁺,C₁₄H₁₇BrNO的计算值294.0].

部分B.3-异丁基-2-甲基-6-(吡啶-4-基)喹啉-4-醇

向6-溴-3-异丁基-2-甲基喹啉-4(1H)-酮(200mg,0.680mmol)在甲苯(4mL)和乙醇(1mL)中的溶液中加入吡啶-4-基硼酸(84mg,0.680mmol)和1M碳酸钠水溶液(0.816mL,0.816mmol)。将溶液用氮气脱气若干分钟。然后加入Pd(PPh₃)₄(79mg,0.068mmol)并将混合物在95℃加热12h。将反应混合物用CH₂Cl₂连同一些甲醇(以溶解固体)稀释并转移至含有饱和碳酸氢钠水溶液(15mL)的分液漏斗。将水层用CH₂Cl₂(3x 20mL)萃取。将合并的有机层用盐水(15mL)洗涤，经硫酸镁干燥，过滤并浓缩。将残留物经硅胶柱色谱纯化(3％→8％甲醇/CH₂Cl₂)得到3-异丁基-2-甲基-6-(吡啶-4-基)喹啉-4-醇(55mg,26％收率)，其为无色固体:¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ8.66(d,J＝6.0Hz,2H),8.44(d,J＝2.0Hz,1H),8.05(dd,J＝8.7,2.1Hz,1H),7.75-7.83(m,2H),7.62(d,J＝8.8Hz,1H),3.33(s,2H),2.42(s,3H),1.85-1.96(m,1H),0.89(d,J＝6.5Hz,7H)；LCMS(ESI)m/e 293.0[(M+H)⁺,C₁₉H₂₁N₂O的计算值293.2].

实施例15

3-异丁基-6-(吡啶-4-基)喹啉-4-醇

部分A.2-甲酰基-4-甲基戊酸甲酯

在-78℃向二异丙基胺(2.85mL,19.97mmol)在THF(65mL)中的溶液中经注射器加入正丁基锂(12.48mL,19.97mmol)。将反应混合物温热至0℃且保持15min。然后将反应混合物冷却至-78℃并经套管加入4-甲基戊酸甲酯(2.00g,15.36mmol)溶于THF(15mL)中的溶液。将反应混合物在-78℃搅拌30min。然后经套管加入甲酸乙酯(1.479g,19.97mmol)溶于THF(5mL)中的溶液。将反应混合物搅拌额外的4h，同时使混合物温热至室温。将反应混合物通过加入水(50mL)淬灭。将反应混合物转移至含有水(50mL)的分液漏斗。将水层用己烷(2x 125mL)洗涤以除去杂质。将水层用10％HCl(15mL)酸化。将水层用CH₂Cl₂(3x 100mL)萃取。将合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，经硫酸镁干燥，过滤并浓缩。将残留物经硅胶柱色谱纯化(5％→20％乙酸乙酯/己烷)得到2-甲酰基-4-甲基戊酸甲酯(1.24g,51％收率)，其为无色油状物:LCMS(ESI)m/e 159.0[(M+H)⁺,C₈H₁₅O₃的计算值159.1].

部分B.(E)-2-(((4-溴苯基)氨基)亚甲基)-4-甲基戊酸甲酯

将4-溴苯胺(544mg,3.16mmol)和2-甲酰基-4-甲基戊酸甲酯(500mg,3.16mmol)在乙醇(9mL)中的混合物在75℃加热14h。将混合物冷却至室温并浓缩。将残留物经硅胶柱色谱纯化(10％→20％乙酸乙酯/己烷)得到(E)-2-((4-溴苯基氨基)亚甲基)-4-甲基戊酸甲酯(763mg,77％收率)，其为无色油状物:¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ7.91(d,J＝13.6Hz,1H),7.41(d,J＝8.8Hz,2H),6.85(d,J＝8.8Hz,2H),6.16(d,J＝13.3Hz,1H),3.75(s,3H),2.18(d,J＝7.3Hz,2H),1.86(dt,J＝13.4,6.8Hz,1H),0.96(d,J＝6.5Hz,6H)；LCMS(ESI)m/e312.0[(M+H)⁺,C₁₄H₁₉BrNO₂的计算值312.1].

部分C.6-溴-3-异丁基喹啉-4(1H)-酮

将二苯基乙醚(4mL)和(E)-2-((4-溴苯基氨基)亚甲基)-4-甲基戊酸甲酯(250mg,0.801mmol)的混合物在240℃加热1h。将混合物在分开的油浴中冷却至40℃并加入己烷(20mL)。将固体收集于布氏漏斗并用温的己烷洗涤得到6-溴-3-异丁基喹啉-4(1H)-酮(120mg,54％收率)，其为灰白色固体:¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆)δ11.81(br.s.,1H),8.19(d,J＝2.3Hz,1H),7.86(s,1H),7.75(dd,J＝8.9,2.4Hz,1H),7.51(d,J＝9.0Hz,1H),2.31(d,J＝7.0Hz,2H),1.92(dt,J＝13.6,6.8Hz,1H),0.86(d,J＝6.5Hz,6H)；LCMS(ESI)m/e 280.0[(M+H)⁺,C₁₃H₁₅BrNO的计算值280.0].

部分D.3-异丁基-6-(吡啶-4-基)喹啉-4-醇

向6-溴-3-异丁基喹啉-4(1H)-酮(115mg,0.410mmol)在甲苯(2mL)和乙醇(0.5mL)中的溶液中加入吡啶-4-基硼酸(50.5mg,0.410mmol)和1M碳酸钠水溶液(0.493mL,0.493mmol)。将溶液用氮气脱气若干分钟。然后加入Pd(PPh₃)₄(47.4mg,0.041mmol)并将混合物在95℃加热14h。将反应混合物用5％MeOH/CH₂Cl₂稀释并转移至含有饱和碳酸氢钠水溶液(15mL)的分液漏斗。将水层用5％MeOH/CH₂Cl₂(3x 15mL)萃取。将合并的有机层用盐水(15mL)洗涤，经硫酸镁干燥，过滤并浓缩。将形成于来自上述萃取液的水层中的固体收集于布氏漏斗并混悬于温的甲醇和CH₂Cl₂的混合物中。将混悬液过滤并将滤液与来自有机层的粗产物合并。将残留物经硅胶柱色谱纯化(4％→8％甲醇/CH₂Cl₂)得到3-异丁基-6-(吡啶-4-基)喹啉-4-醇(38mg,32％收率)，其为无色固体:¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ8.66(dd,J＝4.5,1.5Hz,2H),8.49(d,J＝2.0Hz,1H),8.07(dd,J＝8.8,2.3Hz,1H),7.86(s,1H),7.76-7.80(m,2H),7.66(d,J＝8.8Hz,1H),5.77(s,1H),2.34(d,J＝7.0Hz,2H),1.96(dt,J＝13.6,6.8Hz,1H),0.88(d,J＝6.5Hz,6H)；LCMS(ESI)m/e279.2[(M+H)⁺,C₁₈H₁₉N₂O的计算值279.1].

实施例16

3-溴-2-异戊基-6-(吡啶-4-基)喹啉-4-醇

向如实施例1所述制备的2-异戊基-6-(吡啶-4-基)喹啉-4(1H)-酮(175mg,0.599mmol)在乙酸(4mL)中的溶液中在室温加入溴(0.034mL,0.658mmol)。将反应混合物在室温搅拌1h。将混合物用水(12mL)稀释并将固体收集于布氏漏斗，随后用水洗涤，然后用乙醚洗涤。将固体置于真空得到3-溴-2-异戊基-6-(吡啶-4-基)喹啉-4-醇(222mg,84％收率)，其为黄色固体:¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ12.40(s,1H),8.94(d,J＝6.8Hz,2H),8.68(d,J＝2.0Hz,1H),8.41(d,J＝6.5Hz,2H),8.32(dd,J＝8.8,2.3Hz,1H),7.81(d,J＝8.8Hz,1H),2.89-2.95(m,2H),1.67-1.75(m,1H),1.58-1.65(m,2H),1.00(d,J＝6.5Hz,6H)；LCMS(ESI)m/e 371.1[(M+H)⁺,C₁₉H₂₀BrN₂O的计算值371.1].

实施例17

2-异戊基-6-(吡啶-4-基)喹啉-3-甲酰胺

部分A.6-溴-2-异戊基喹啉-3-羧酸甲酯

在0℃向DMF(0.339mL,4.38mmol)在DCE(10mL)中的溶液中经注射器逐滴加入磷酰氯(0.429mL,4.60mmol)。移去冷却浴并将反应混合物在室温搅拌30min。将如实施例1部分A-B所述制备的(E)-3-(4-溴苯基氨基)-6-甲基庚-2-烯酸甲酯(1.43g,4.38mmol)在DCE(8mL)中的溶液经套管加入并将反应混合物回流加热3.5h。将反应混合物冷却至室温并转移至含有饱和碳酸氢钠水溶液(25mL)的分液漏斗。将水层用二氯甲烷(3x 25mL)萃取。将合并的有机层用盐水(25mL)洗涤，经硫酸镁干燥，过滤并浓缩。将残留物经硅胶柱色谱纯化(5％→20％乙酸乙酯/己烷)得到6-溴-2-异戊基喹啉-3-羧酸甲酯(701mg,48％收率)，其为无色固体:¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.61(s,1H),8.02(d,J＝2.3Hz,1H),7.92-7.98(m,J＝9.0Hz,1H),7.83-7.87(m,J＝9.0,2.3Hz,1H),4.01(s,3H),3.28-3.35(m,2H),1.75(ddd,J＝13.2,6.5,6.4Hz,1H),1.62-1.69(m,2H),1.01(d,J＝6.3Hz,6H)；LCMS(ESI)m/e 336.1[(M+H)⁺,C₁₆H₁₉BrNO₂的计算值336.1].

部分B.6-溴-2-异戊基喹啉-3-羧酸

向6-溴-2-异戊基喹啉-3-羧酸甲酯(740mg,2.201mmol)在乙醇(8mL)中的混悬液中加入氢氧化钠(10％水溶液)(2.7mL,2.201mmol)。将反应混合物回流加热30min。将混合物冷却至室温并减压除去乙醇。将所得的溶液冷却至0℃并用2M HCl(4mL)酸化至pH＝2，导致形成固体。加入过程中将溶液用额外的水稀释。将固体收集于布氏漏斗并真空干燥得到6-溴-2-异戊基喹啉-3-羧酸(672mg,95％收率)，其为无色固体，其直接用于下一步:¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ13.53(br.s.,1H),8.80(s,1H),8.40(s,1H),7.91-7.97(m,2H),3.19-3.28(m,2H),1.56-1.67(m,3H),0.94(d,J＝6.3Hz,6H)；LCMS(ESI)m/e 322.0[(M+H)⁺,C₁₅H₁₇BrNO₂的计算值322.0].

部分C.6-溴-2-异戊基喹啉-3-甲酰胺

向6-溴-2-异戊基喹啉-3-羧酸(605mg,1.878mmol)在CH₂Cl₂(15mL)中的混悬液中加入草酰氯(0.362mL,4.13mmol)和催化量的DMF(0.029mL,0.376mmol)。将反应混合物在室温搅拌1h。将混合物浓缩并将残留物吸收于CH₂Cl₂(10mL)。将混合物用30％氢氧化铵溶液(3.6mL)处理并将反应混合物搅拌30min。将混合物冷却至0℃并将固体收集于布氏漏斗并用水洗涤。将产物溶于10％MeOH/CH₂Cl₂(100mL)并转移至分液漏斗并用50％饱和碳酸氢钠水溶液/50％水(50mL)洗涤。将水层用10％MeOH/CH₂Cl₂(2x50mL)萃取。将合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，经硫酸镁干燥，过滤并浓缩。将产物真空干燥得到6-溴-2-异戊基喹啉-3-甲酰胺(505mg,1.572mmol,84％收率)，其为无色固体，其直接用于下一步:¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ8.28-8.32(m,2H),8.12(s,1H),7.90-7.94(m,J＝8.8Hz,1H),7.86-7.90(m,J＝9.0,2.3Hz,1H),7.74(s,1H),3.02-3.09(m,2H),1.55-1.67(m,3H),0.93(d,J＝6.5Hz,6H)；LCMS(ESI)m/e 321.1[(M+H)⁺,C₁₅H₁₈BrN₂O的计算值321.1].

部分D.2-异戊基-6-(吡啶-4-基)喹啉-3-甲酰胺

向6-溴-2-异戊基喹啉-3-甲酰胺(65mg,0.202mmol)在二噁烷(1.5mL)和水(0.25mL)中的溶液中加入吡啶-4-基硼酸(37.3mg,0.304mmol)和碳酸铯(132mg,0.405mmol)。将溶液在氮气下经超声脱气5min。然后加入Pd(PPh₃)₄(23.38mg,0.020mmol)并将混合物在95℃加热2.5h。将反应混合物冷却至室温并用CH₂Cl₂稀释并转移至含有饱和碳酸氢钠水溶液(20mL)的分液漏斗。将水层用CH₂Cl₂(3x 25mL)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经硫酸镁干燥，过滤并浓缩。将残留物经硅胶柱色谱纯化(4％→10％甲醇/CH₂Cl₂)得到2-异戊基-6-(吡啶-4-基)喹啉-3-甲酰胺(42.4mg,63％收率)，其为无色固体:¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ8.72(dd,J＝4.6,1.6Hz,2H),8.51(d,J＝2.0Hz,1H),8.41(s,1H),8.22(dd,J＝8.8,2.3Hz,1H),8.15(s,1H),8.10(d,J＝8.8Hz,1H),7.88(dd,J＝4.5,1.8Hz,2H),7.73(s,1H),3.07-3.14(m,2H),1.58-1.71(m,3H),0.95(d,J＝6.3Hz,6H)；LCMS(ESI)m/e320.1[(M+H)⁺,C₂₀H₂₂N₃O的计算值320.2].

实施例18

2-异戊基-6-(吡啶-4-基)喹啉-3-甲腈

部分A.6-溴-2-异戊基喹啉-3-甲腈

在0℃向如实施例17部分A-C所述制备的6-溴-2-异戊基喹啉-3-甲酰胺(403mg,1.255mmol)在CH₂Cl₂(10mL)中的混悬液中加入三乙胺(0.525mL,3.76mmol)，随后加入三氟乙酸酐(0.222mL,1.568mmol)。将混合物在0℃搅拌30min。将混合物转移至含有饱和碳酸氢钠水溶液(25mL)的分液漏斗。将水层用二氯甲烷(3x 50mL)萃取。将合并的有机层用盐水(25mL)洗涤，经硫酸镁干燥，过滤并浓缩。将残留物经硅胶柱色谱纯化(CH₂Cl₂)得到6-溴-2-异戊基喹啉-3-甲腈(336mg,88％收率)，其为无色固体:¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.41(s,1H),8.02(d,J＝2.0Hz,1H),7.96-7.99(m,J＝9.0Hz,1H),7.90-7.94(m,J＝9.0,2.0Hz,1H),3.16-3.23(m,2H),1.70-1.81(m,3H),1.04(d,J＝6.3Hz,6H)；LCMS(ESI)m/e 303.0[(M+H)⁺,C₁₅H₁₆BrN₂的计算值303.0].

部分B.2-异戊基-6-(吡啶-4-基)喹啉-3-甲腈

向6-溴-2-异戊基喹啉-3-甲腈(324mg,1.069mmol)在二噁烷(8mL)和水(1mL)中的溶液中加入吡啶-4-基硼酸(197mg,1.603mmol)和碳酸铯(696mg,2.137mmol)。将溶液在氮气下经超声脱气5min。然后加入Pd(PPh₃)₄(123mg,0.107mmol)并将混合物在95℃加热2.5h。将反应混合物冷却至室温并用CH₂Cl₂稀释并转移至含有饱和碳酸氢钠水溶液(20mL)的分液漏斗。将水层用CH₂Cl₂(3x 25mL)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经硫酸镁干燥，过滤并浓缩。将残留物经硅胶柱色谱纯化(2％→5％甲醇/CH₂Cl₂)得到2-异戊基-6-(吡啶-4-基)喹啉-3-甲腈(246mg,76％收率)，其为无色固体:¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.74-8.81(m,2H),8.58(s,1H),8.20-8.25(m,J＝8.5Hz,1H),8.09-8.15(m,2H),7.65(dd,J＝4.5,1.8Hz,2H),3.20-3.28(m,2H),1.75-1.85(m,3H),1.05(d,J＝6.3Hz,6H)；LCMS(ESI)m/e 302.1[(M+H)⁺,C₂₀H₂₀N₃的计算值302.2].

实施例19

3-甲基-1-(6-(吡啶-4-基)喹啉-2-基)丁-1-酮

部分A.6-溴-N-甲氧基-N-甲基喹啉-2-甲酰胺

将6-溴喹啉-2-羧酸(308mg,1.222mmol)、N,O-二甲基羟基胺盐酸盐(143mg,1.466mmol)、2-(1H-苯并[d][1,2,3]三唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基脲鎓六氟磷酸盐(V)(602mg,1.588mmol)和DIEA(512μL,2.93mmol)在DMF(体积:2.44mL)中的溶液在室温搅拌3h。将反应混合物用饱和碳酸氢钠水溶液淬灭并用乙酸乙酯(3x10mL)萃取。将合并的有机物用盐水(1x10mL)洗涤，干燥(MgSO4)，过滤并减压浓缩。将残留物经硅胶色谱纯化(15％-20％EtOAc/己烷)得到6-溴-N-甲氧基-N-甲基喹啉-2-甲酰胺(347mg,1.15mmol,94％收率)，其为淡黄色油状物:¹H NMR(400MHz,氯仿-d)δ8.18(d,J＝8.5Hz,1H),8.05(d,J＝2.3Hz,1H),8.02(d,J＝9.0Hz,1H),7.84(dd,J＝9.0,2.3Hz,1H),7.72(br.s.,1H),3.79(br.s.,3H),3.47(br.s.,3H)；LCMS(ESI)m/e 295.0,297.0Br谱图[(M+H)⁺,C₁₂H₁₂BrN₂O₂的计算值295.0].

部分B.1-(6-溴喹啉-2-基)-3-甲基丁-1-酮

向冷却至0℃的6-溴-N-甲氧基-N-甲基喹啉-2-甲酰胺(163mg,0.552mmol)在THF(体积:3.81mL)中的溶液中逐滴加入异丁基氯化镁(2M在THF中)(318μL,0.635mmol)。将溶液在0℃搅拌2h。将反应混合物用氯化铵水溶液淬灭并用EtOAc(3x10mL)萃取。将合并的有机物用盐水(1x10mL)洗涤，干燥(MgSO₄)，过滤并减压浓缩。将残留物经硅胶色谱纯化(15％-25％EtOAc/己烷)得到1-(6-溴喹啉-2-基)-3-甲基丁-1-酮(20mg,0.065mmol,12％收率)，其为无色固体:LCMS(ESI)m/e 292.1,294.1Br谱图[(M+H)⁺,C₁₄H₁₅BrNO的计算值292.0].

部分C.3-甲基-1-(6-(吡啶-4-基)喹啉-2-基)丁-1-酮

向小瓶中加入4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)吡啶(126mg,0.616mmol)、碳酸钾(213mg,1.540mmol)和四(三苯基膦)钯(0)(29.7mg,0.026mmol)。密封小瓶并用氮气净化5min。加入1-(6-溴喹啉-2-基)-3-甲基丁-1-酮(150mg,0.513mmol)在二噁烷(2580μL)和水(430μL)中的溶液并将小瓶脱气并用氮气净化5min。然后将反应混合物加热至100℃过夜。将反应混合物冷却至室温并减压浓缩。将残留物经硅胶色谱纯化(10％-60％EtOAc/己烷)得到3-甲基-1-(6-(吡啶-4-基)喹啉-2-基)丁-1-酮(100mg,0.327mmol,64％收率)，其为淡黄色固体:¹H NMR(400MHz,MeOD)δppm 8.92(d,J＝6.8Hz,2H),8.63(d,J＝1.8Hz,1H),8.60(d,J＝8.5Hz,1H),8.47(d,J＝6.8Hz,2H),8.39(d,J＝9.0Hz,1H),8.34(dd,J＝8.8,2.0Hz,1H),8.18(d,J＝8.5Hz,1H),3.27(d,J＝6.8Hz,2H),2.26-2.46(sept,J＝6.8Hz,1H),1.05(d,J＝6.8Hz,6H)；LCMS(ESI)m/e 291.1[(M+H)⁺,C₁₉H₁₉N₂O的计算值291.2].

实施例20and实施例21

(-)-3-甲基-1-(6-(吡啶-4-基)喹啉-2-基)丁-1-胺(实施例20)

(+)-3-甲基-1-(6-(吡啶-4-基)喹啉-2-基)丁-1-胺(实施例21)

部分A.1-(6-溴喹啉-2-基)-3-甲基丁-1-醇

将1-(6-溴喹啉-2-基)-3-甲基丁-1-酮(120mg,0.411mmol)和硼氢化钠(10.88mg,0.288mmol)在甲醇(1.11mL)中的溶液在室温搅拌12h。将反应混合物减压浓缩并将残留物经反相HPLC纯化(20％-100％MeOH/H₂O/0.1％TFA)。将浓缩的馏分通过用饱和碳酸氢钠水溶液淬灭和用乙酸乙酯(3x5mL)萃取制成游离碱。将合并的有机物用饱和碳酸氢钠水溶液(2x5mL)和盐水(1x5mL)洗涤，干燥(MgSO₄)，过滤，并减压浓缩。得到1-(6-溴喹啉-2-基)-3-甲基丁-1-醇(65mg,0.217mmol,53％收率)，其为黄色油状物。LCMS(ESI)m/e 294.1,296.1Br谱图[(M+H)⁺,C₁₄H₁₇BrNO的计算值294.1].

部分B.2-(1-(6-溴喹啉-2-基)-3-甲基丁基)异吲哚啉-1,3-二酮

在0℃向1-(6-溴喹啉-2-基)-3-甲基丁-1-醇(130mg,0.442mmol)在无水四氢呋喃(3.84mL)中的溶液中加入邻苯二甲酰亚胺(195mg,1.326mmol)、三苯基膦(174mg,0.663mmol)和DIAD(129μl,0.663mmol)。将反应混合物在室温搅拌1h。将混合物用饱和碳酸氢钠水溶液淬灭并用乙酸乙酯(3x5mL)萃取。将合并的有机物用盐水(1x5mL)洗涤，干燥(MgSO₄)，过滤，并减压浓缩。将残留物经硅胶色谱纯化(10％-100％EtOAc/己烷)得到2-(1-(6-溴喹啉-2-基)-3-甲基丁基)异吲哚啉-1,3-二酮(185mg,0.415mmol,94％收率)，其为淡黄色无定形固体。LCMS(ESI)m/e 423.0,425.0Br谱图[(M+H)⁺,C₂₂H₂₀BrN₂O₂的计算值423.1].

部分C.2-(3-甲基-1-(6-(吡啶-4-基)喹啉-2-基)丁基)异吲哚啉-1,3-二酮

向微波小瓶中加入2-(1-(6-溴喹啉-2-基)-3-甲基丁基)异吲哚啉-1,3-二酮(176mg,0.415mmol)、4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)吡啶(102mg,0.498mmol)、碳酸钾(172mg,1.245mmol)和四(三苯基膦)钯(0)(23.98mg,0.021mmol)。密封小瓶并用氮气净化5min。加入二噁烷(2.58mL)和水(0.43mL)并将混合物用氮气净化5min。然后将混合物在微波中加热至100℃且保持16h。将残留物经硅胶色谱纯化(10％-60％EtOAc/己烷)得到2-(3-甲基-1-(6-(吡啶-4-基)喹啉-2-基)丁基)异吲哚啉-1,3-二酮(111mg,0.250mmol,60％收率)，其为黄色油状物。LCMS(ESI)m/e 422.2[(M+H)⁺,C₂₇H₂₄N₃O₂的计算值422.2].

部分D.2-(3-甲基-1-(6-(吡啶-4-基)喹啉-2-基)丁基)异吲哚啉-1,3-二酮

在室温向2-(3-甲基-1-(6-(吡啶-4-基)喹啉-2-基)丁基)异吲哚啉-1,3-二酮(0.111g,0.263mmol)在EtOH(2mL)中的溶液中加入肼(0.012mL,0.395mmol)。将反应混合物在室温搅拌14h。将反应混合物减压浓缩并将残留物经反相制备性HPLC纯化(水/甲醇/0.1％TFA)。得到3-甲基-1-(6-(吡啶-4-基)喹啉-2-基)丁-1-胺(0.0549g,0.185mmol,70％收率)，其为外消旋混合物。将混合物经手性SCF分离(柱:ChiralCel AD-H(4.6x 250mm,5μm)；流动相:15％MeOH(w/0.1％DEA)/85％CO₂；150巴,35℃,25mL/min,λ＝254nm)。得到两个峰，未确定各异构体的绝对立体化学。

实施例20(峰1):

[α]²²_D–1.90(c 17.85,MeOH)；¹H NMR(400MHz,甲醇-d₄)δ8.99-8.93(m,2H),8.70(d,J＝1.3Hz,1H),8.63-8.54(m,3H),8.39-8.33(m,2H),7.70(d,J＝8.5Hz,1H)、4.77(t,J＝7.3Hz,1H),2.05-1.85(m,2H),1.70(dquin,J＝13.5,6.7Hz,1H),1.06(d,J＝6.5Hz,3H),1.03(d,J＝6.5Hz,3H)；LCMS(ESI)m/e292.2[(M+H)⁺,C₁₉H₂₂N₃的计算值292.2].

实施例21(峰2):

[α]²²_D+4.05(c 4.65,MeOH)；¹H NMR(400MHz,甲醇-d₄)δ8.99-8.93(m,2H),8.70(d,J＝1.3Hz,1H),8.63-8.54(m,3H),8.39-8.33(m,2H),7.70(d,J＝8.5Hz,1H)、4.77(t,J＝7.3Hz,1H),2.05-1.85(m,2H),1.70(dquin,J＝13.5,6.7Hz,1H),1.06(d,J＝6.5Hz,3H),1.03(d,J＝6.5Hz,3H)；LCMS(ESI)m/e292.2[(M+H)⁺,C₁₉H₂₂N₃的计算值292.2].

实施例22和实施例23

(+)-1-(6-(3-甲氧基吡啶-4-基)喹啉-2-基)-3-甲基丁-1-胺(实施例22)

(-)-1-(6-(3-甲氧基吡啶-4-基)喹啉-2-基)-3-甲基丁-1-胺(实施例23)

部分A.2-(1-(6-(3-甲氧基吡啶-4-基)喹啉-2-基)-3-甲基丁基)异吲哚啉-1,3-二酮

向微波小瓶中加入3-甲氧基吡啶-4-基硼酸(82mg,0.539mmol)、2-(1-(6-溴喹啉-2-基)-3-甲基丁基)异吲哚啉-1,3-二酮(190mg,0.449mmol)(如在实施例20和21,部分B中制备)、四(三苯基膦)钯(0)(25.9mg,0.022mmol)和碳酸钾(186mg,1.347mmol)。密封小瓶并用氮气净化5min。加入二噁烷(3.85mL)和水(641μL)并将小瓶脱气并用氮气净化5min。然后将混合物加热至100℃过夜。将残留物经硅胶色谱纯化(10％-100％EtOAc/己烷)。得到2-(1-(6-(3-甲氧基吡啶-4-基)喹啉-2-基)-3-甲基丁基)异吲哚啉-1,3-二酮(85mg,0.179mmol,40％收率)，其为淡黄色无定形固体。LCMS(ESI)m/e 452.2[(M+H)⁺,C₂₈H₂₆N₃O₃的计算值452.2].

部分B.2-(1-(6-(3-甲氧基吡啶-4-基)喹啉-2-基)-3-甲基丁基)异吲哚啉-1,3-二酮

将2-(1-(6-(3-甲氧基吡啶-4-基)喹啉-2-基)-3-甲基丁基)异吲哚啉-1,3-二酮(85mg,0.188mmol)和肼(68.9μL,2.194mmol)在乙醇(1.88mL)中的溶液加热至40℃且保持2h。将残留物经硅胶色谱纯化(10％-60％EtOAc/己烷)得到1-(6-(3-甲氧基吡啶-4-基)喹啉-2-基)-3-甲基丁-1-胺(14mg,0.043mmol,23％收率)，其为外消旋混合物，其为棕色油状物。将混合物经手性SCF分离(柱:ChiralCel AD-H(30x 250mm,5μm)；流动相:15％EtOH(w/0.1％DEA)/85％CO₂；150巴,35℃,70mL/min,λ＝254nm)。得到两个峰，未确定各异构体的绝对立体化学:

实施例22(峰1):

[α]²²_D+1.90(c 2.95,MeOH)；¹H NMR(400MHz,氯仿-d)δppm 8.43(s,1H),8.37(d,J＝4.8Hz,1H),8.16(d,J＝8.5Hz,1H),8.12(d,J＝8.8Hz,1H),7.99(d,J＝2.0Hz,1H),7.90(dd,J＝8.7,1.9Hz,1H),7.47(d,J＝8.5Hz,1H),7.34(d,J＝4.8Hz,1H)、4.39(t,J＝7.0Hz,1H)、4.21(br.s.,2H),3.95(s,3H),1.62-1.85(m,3H),0.99(d,J＝6.0Hz,3H),0.97(d,J＝6.3Hz,3H)；LCMS(ESI)m/e 322.2[(M+H)⁺,C₂₀H₂₄N₃O的计算值322.2].

实施例23(峰2):

[α]²²_D-0.94(c 2.55,MeOH)；¹H NMR(400MHz,氯仿-d)δppm 8.43(s,1H),8.37(d,J＝4.8Hz,1H),8.16(d,J＝8.5Hz,1H),8.12(d,J＝8.8Hz,1H),7.99(d,J＝2.0Hz,1H),7.90(dd,J＝8.7,1.9Hz,1H),7.47(d,J＝8.5Hz,1H),7.34(d,J＝4.8Hz,1H)、4.39(t,J＝7.0Hz,1H)、4.21(br.s.,2H),3.95(s,3H),1.62-1.85(m,3H),0.99(d,J＝6.0Hz,3H),0.97(d,J＝6.3Hz,3H)；LCMS(ESI)m/e 322.2[(M+H)⁺,C₂₀H₂₄N₃O的计算值322.2].

实施例24

1-(6-(3-甲氧基吡啶-4-基)喹啉-2-基)-3-甲基丁-1-胺

标题化合物如实施例20和21所述使用部分C的2-甲氧基吡啶-4-基硼酸(21.68mg,0.142mmol)制备。得到1-(6-(2-甲氧基吡啶-4-基)喹啉-2-基)-3-甲基丁-1-胺(10mg,0.030mmol,38％收率，针对最终步骤)，其为棕色无定形固体。¹H NMR(400MHz,氯仿-d)δppm 8.28(1H,d,J＝6.0Hz),8.19(1H,d,J＝8.5Hz),8.15(1H,d,J＝8.8Hz),8.05(1H,d,J＝2.0Hz),7.95(1H,dd,J＝8.7,2.1Hz),7.48(1H,d,J＝8.5Hz),7.24(1H,dd,J＝5.4,1.6Hz),7.09(1H,s)、4.27(1H,br.s.)、4.02(3H,s),2.09-2.30(2H,m),1.62-1.81(3H,m),0.99(6H,t,J＝5.8Hz)；LCMS(ESI)m/e 322.1[(M+H)⁺,C₂₀H₂₄N₃O的计算值322.2].

实施例25

1-(6-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)喹啉-2-基)-3-甲基丁-1-胺

部分A.6-溴喹啉-2-甲醛

在室温在氮气下向6-溴-2-甲基喹啉(10g,45.0mmol)在1,4-二噁烷(100mL)中的溶液中加入二氧化硒(6.00g,54.0mmol)。将反应混合物加热至75℃且保持5h。将反应混合物经硅藻土()过滤并用乙酸乙酯洗涤。将滤液浓缩并将残留物用己烷研磨以析出产物。将固体经真空过滤收集，在高真空干燥过夜得到6-溴喹啉-2-甲醛(8.86g,37.5mmol,83％收率)，其为灰白色固体。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ10.11(d,J＝1.0Hz,1H),8.56(d,J＝8.5Hz,1H),8.43(d,J＝2.3Hz,1H),8.14(d,J＝9.0Hz,1H),8.05-8.02(m,1H),8.02-8.00(m,1H)；LCMS(ESI)m/e 235.9,237.9Br谱图[(M+H)⁺,C₁₀H₇BrNO的计算值236.0].

部分B.N-((6-溴喹啉-2-基)亚甲基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺

在室温在氮气下向6-溴喹啉-2-甲醛(8.86g,37.5mmol)在THF(175ml)中的溶液中加入原钛酸乙酯(7.73ml,37.5mmol)。将反应混合物在室温搅拌10min，然后加入2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(4.55g,37.5mmol)。将反应混合物加热至回流3h。将反应混合物冷却至室温并用盐水淬灭。将反应混合物经硅藻土()过滤并将滤液用乙酸乙酯(4x200mL)萃取。将合并的有机层用水(1x200mL)、盐水(1x200mL)洗涤，干燥(MgSO4)，过滤并减压浓缩得到N-((6-溴喹啉-2-基)亚甲基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(11.98g,35.3mmol,94％收率)，其为黄色固体。产物无需进一步纯化即可如原样使用。¹H NMR(400MHz,氯仿-d)δ8.83(s,1H),8.15(s,2H),8.08-7.99(m,2H),7.82(dd,J＝9.0,2.3Hz,1H),1.30(s,9H)；LCMS(ESI)m/e 339.0,341.0Br谱图[(M+H)⁺,C₁₄H₁₆BrN₂OS的计算值339.0].

部分C.N-(1-(6-溴喹啉-2-基)-3-甲基丁基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺

在-45℃在氮气下向N-((6-溴喹啉-2-基)亚甲基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(11.98g,35.3mmol)在THF(240ml)中的搅拌溶液中逐滴加入异丁基氯化镁(17.66ml,35.3mmol)。将反应混合物在-45℃搅拌3h。在-45℃将反应混合物通过加入饱和氯化铵淬灭，用乙酸乙酯(4x200mL)萃取。将合并的有机层用水(1x200mL)、盐水(1x200mL)洗涤，干燥(MgSO4)，过滤并减压浓缩得到N-(1-(6-溴喹啉-2-基)-3-甲基丁基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(8.5g,21.39mmol,61％收率)，其为粘稠的油状物。¹H NMR(400MHz,氯仿-d)δ7.98(d,J＝8.5Hz,1H),7.92-7.85(m,2H),7.71(dd,J＝8.9,2.1Hz,1H),7.35(d,J＝8.5Hz,1H),5.32(d,J＝5.0Hz,1H)、4.61(ddd,J＝9.2,7.3,4.9Hz,1H),1.90-1.67(m,2H),1.65-1.54(m,1H),1.30(s,9H),0.99(d,J＝6.3Hz,3H),0.92(d,J＝6.8Hz,3H)；LCMS(ESI)m/e 397.0,399.0Br谱图[(M+H)⁺,C₁₈H₂₆BrN₂OS的计算值397.1].

部分D.2-甲基-N-(3-甲基-1-(6-(三甲基甲锡烷基)喹啉-2-基)丁基)丙烷-2-亚磺酰胺

在室温在氮气下向N-(1-(6-溴喹啉-2-基)-3-甲基丁基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(8.5g,21.39mmol)在二噁烷(250ml)中的搅拌溶液中加入六甲基二锡(6.65ml,32.1mmol)、二(三苯基膦)二氯化钯(II)(1.501g,2.139mmol)。将反应混合物脱气5分钟，然后加热至100℃且保持14h。将反应混合物用乙酸乙酯(500mL)和水(300mL)稀释。分离各层并将水层用乙酸乙酯(3x400mL)萃取。将合并的有机层用水(1x300mL)、盐水(1x300mL)洗涤，干燥(MgSO4)，过滤并减压浓缩。将残留物经硅胶色谱纯化(EtOAc/己烷)得到2-甲基-N-(3-甲基-1-(6-(三甲基甲锡烷基)喹啉-2-基)丁基)丙烷-2-亚磺酰胺(4.3g,8.93mmol,42％收率)，其为油状物。¹H NMR(400MHz,氯仿-d)δ8.08(d,J＝8.5Hz,1H),7.99(d,J＝8.3Hz,1H),7.90(s,1H),7.79(dd,J＝8.2,1.1Hz,1H),7.34(d,J＝8.5Hz,1H),5.47(d,J＝6.8Hz,1H)、4.63(ddd,J＝8.9,6.9,5.0Hz,1H),1.90-1.71(m,2H),1.68-1.57(m,1H),1.30(s,9H),1.00(d,J＝6.5Hz,3H),0.92(d,J＝6.5Hz,3H),0.36(s,9H)；LCMS(ESI)m/e 483.0[(M+H)⁺,C₂₁H₃₅N₂OSSn的计算值483.2].

部分E.N-(1-(6-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)喹啉-2-基)-3-甲基丁基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺

在压力管中向2-甲基-N-(3-甲基-1-(6-(三甲基甲锡烷基)喹啉-2-基)丁基)丙烷-2-亚磺酰胺(0.05g,0.104mmol)在DMF(2mL)中的溶液中加入4-溴-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(0.020g,0.104mmol)、二-三苯基膦二氯钯(7.29mg,10.39μmol)、碳酸钾(0.043g,0.312mmol)和四丁基溴化铵(0.067g,0.208mmol)。将反应混合物用氮气净化5min并封盖。将反应混合物在95℃加热16h。将反应混合物冷却至环境温度并用水(15mL)淬灭。将溶液用乙酸乙酯(2x10mL)萃取。将合并的有机层用水(1x10mL)、盐水(1x10mL)洗涤，干燥(硫酸钠)，过滤并减压浓缩。将残留物经反相制备性HPLC纯化(水/甲醇/0.1％TFA)得到N-(1-(6-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)喹啉-2-基)-3-甲基丁基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(0.031g,0.071mmol,69％收率)。LCMS(ESI)m/e 435.1[(M+H)⁺,C₂₅H₃₁N₄OS的计算值435.2].

部分F.1-(6-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)喹啉-2-基)-3-甲基丁-1-胺

在室温在氮气下向N-(1-(6-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)喹啉-2-基)-3-甲基丁基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(0.031g,0.071mmol)在甲醇(10mL)中的溶液中加入HCl(1.25M在甲醇中)(0.571mL,0.713mmol)。将反应混合物在室温搅拌14h。将反应混合物浓缩并经反相制备性HPLC纯化(水/甲醇/0.1％TFA)得到1-(6-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)喹啉-2-基)-3-甲基丁-1-胺,2TFA(0.0162g,0.028mmol,39％收率)，其为无色薄膜状物。¹H NMR(400MHz,甲醇-d₄)δ8.59(d,J＝8.5Hz,1H),8.55-8.46(m,2H),8.38-8.32(m,1H),8.32-8.25(m,1H),7.79-7.71(m,2H),7.68(d,J＝8.5Hz,1H),7.04(d,J＝3.8Hz,1H)、4.76(t,J＝7.3Hz,1H),2.06-1.85(m,2H),1.71(dquin,J＝13.4,6.6Hz,1H),1.05(dd,J＝11.0,6.5Hz,6H)；LCMS(ESI)m/e 331.0[(M+H)⁺,C₂₁H₂₃N₄的计算值331.2].

实施例26

1-([4,6'-联喹啉]-2'-基)-3-甲基丁-1-胺

标题化合物如实施例25所述使用部分E的4-溴喹啉(0.022g,0.104mmol)制备，得到1-([4,6'-联喹啉]-2'-基)-3-甲基丁-1-胺,2TFA(0.0182g,0.031mmol,30％收率，针对两步)，其为无色薄膜状物。¹H NMR(400MHz,甲醇-d₄)δ9.27(d,J＝5.5Hz,1H),8.59(d,J＝8.3Hz,1H),8.44-8.34(m,3H),8.27(d,J＝8.5Hz,1H),8.21(ddd,J＝8.6,7.1,1.1Hz,1H),8.15-8.06(m,2H),7.96(ddd,J＝8.4,7.2,1.0Hz,1H),7.73(d,J＝8.5Hz,1H)、4.79(t,J＝7.3Hz,1H),2.06-1.87(m,2H),1.72(dquin,J＝13.5,6.7Hz,1H),1.10-1.00(m,6H)；LCMS(ESI)m/e 342.0[(M+H)⁺,C₂₃H₂₄N₃的计算值342.2].

实施例27

1-(6-(异喹啉-6-基)喹啉-2-基)-3-甲基丁-1-胺

标题化合物如实施例25所述使用部分E的6-溴异喹啉(0.022g,0.104mmol)制备，得到1-(6-(异喹啉-6-基)喹啉-2-基)-3-甲基丁-1-胺,2TFA(0.0256g,0.044mmol,42％收率，针对两步)，其为淡黄色薄膜状物。¹H NMR(400MHz,甲醇-d₄)δ9.81(s,1H),8.75(d,J＝0.5Hz,1H),8.68-8.61(m,2H),8.61-8.53(m,4H),8.41-8.36(m,1H),8.35-8.30(m,1H),7.67(d,J＝8.5Hz,1H)、4.76(t,J＝7.3Hz,1H),2.04-1.86(m,2H),1.71(dquin,J＝13.5,6.7Hz,1H),1.06(dd,J＝11.8,6.5Hz,6H)；LCMS(ESI)m/e 342.0[(M+H)⁺,C₂₃H₂₄N₃的计算值342.2].

实施例28

4-(2-(1-氨基-3-甲基丁基)喹啉-6-基)-N,N-二甲基嘧啶-2-胺

标题化合物如实施例25所述使用部分E的4-溴-N,N-二甲基嘧啶-2-胺(0.021g,0.104mmol)制备，得到4-(2-(1-氨基-3-甲基丁基)喹啉-6-基)-N,N-二甲基嘧啶-2-胺,2TFA(0.016g,0.028mmol,28％收率，针对两步)，其为黄色油状物。¹H NMR(400MHz,甲醇-d₄)δ8.91(d,J＝2.0Hz,1H),8.65(dd,J＝9.0,2.0Hz,1H),8.59(d,J＝8.3Hz,1H),8.42(d,J＝6.0Hz,1H),8.27(d,J＝8.8Hz,1H),7.67(d,J＝8.5Hz,1H),7.61(d,J＝6.3Hz,1H)、4.75(t,J＝7.3Hz,1H),3.42(s,6H),2.03-1.84(m,2H),1.70(dquin,J＝13.5,6.7Hz,1H),1.05(dd,J＝10.2,6.7Hz,6H)；LCMS(ESI)m/e 336.0[(M+H)⁺,C₂₀H₂₆N₅的计算值336.2].

实施例29

4-(2-(1-氨基-3-甲基丁基)喹啉-6-基)吡啶-2-胺

部分A.N-(1-(6-(2-氨基吡啶-4-基)喹啉-2-基)-3-甲基丁基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺

在压力管中向2-甲基-N-(3-甲基-1-(6-(三甲基甲锡烷基)喹啉-2-基)丁基)丙烷-2-亚磺酰胺(0.05g,0.104mmol)在DMF(2mL)中的溶液中加入4-溴吡啶-2-胺(0.018g,0.104mmol)、二-三苯基膦二氯钯(7.29mg,10.39μmol)、碳酸钾(0.043g,0.312mmol)和四丁基溴化铵(0.067g,0.208mmol)。将反应混合物用氮气净化5min并螺旋封盖。将反应混合物在95℃加热16h。将反应混合物冷却至环境温度并用水(15mL)淬灭。将混合物用乙酸乙酯(2x10mL)萃取。将合并的有机层用水(1x10mL)、盐水(1x10mL)洗涤，干燥(硫酸钠)，过滤并减压浓缩。将残留物经反相制备性HPLC纯化(水/甲醇/0.1％TFA)得到N-(1-(6-(2-氨基吡啶-4-基)喹啉-2-基)-3-甲基丁基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(0.031g,0.076mmol,73％收率)。LCMS(ESI)m/e 411.1[(M+H)⁺,C₂₃H₃₁N₄OS的计算值411.2].

部分B.4-(2-(1-氨基-3-甲基丁基)喹啉-6-基)吡啶-2-胺,2TFA(0.0224g,0.041mmol,54％收率)

在室温在氮气下向N-(1-(6-(2-氨基吡啶-4-基)喹啉-2-基)-3-甲基丁基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(0.031g,0.076mmol)在甲醇(10mL)中的溶液中加入HCl(甲醇)(0.604mL,0.755mmol)(1.25M)。将反应混合物在室温搅拌过夜。将反应混合物浓缩并将残留物经反相制备性HPLC纯化(水/甲醇/0.1％TFA)得到4-(2-(1-氨基-3-甲基丁基)喹啉-6-基)吡啶-2-胺,2TFA(0.0224g,0.041mmol,54％收率)，其为淡黄色固体。¹H NMR(400MHz,甲醇-d₄)δ8.55(d,J＝8.3Hz,1H),8.46(d,J＝2.0Hz,1H),8.29(d,J＝9.0Hz,1H),8.18(dd,J＝8.9,2.1Hz,1H),7.97(dd,J＝6.8,0.8Hz,1H),7.67(d,J＝8.5Hz,1H),7.42-7.35(m,2H)、4.75(t,J＝7.3Hz,1H),2.02-1.84(m,2H),1.69(dquin,J＝13.5,6.7Hz,1H),1.04(dd,J＝10.5,6.5Hz,6H)；LCMS(ESI)m/e 307.0[(M+H)⁺,C₁₉H₂₃N₄的计算值307.2].

实施例30

N-(4-(2-(3-甲基丁酰基)喹啉-6-基)吡啶-2-基)乙酰胺

在室温在氮气下向N-(1-(6-(2-氨基吡啶-4-基)喹啉-2-基)-3-甲基丁基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(0.059g,0.144mmol)(如在实施例29,部分A中制备)在CH₂Cl₂(10mL)中的溶液中加入乙酰氯(10.22μL,0.144mmol)和DIEA(0.063mL,0.359mmol)。将反应混合物在室温搅拌过夜。将反应混合物浓缩并经反相制备性HPLC纯化(水/甲醇/0.1％TFA)得到N-(4-(2-(3-甲基丁酰基)喹啉-6-基)吡啶-2-基)乙酰胺(0.017g,0.048mmol,33％收率)，其为棕色薄膜状物。¹H NMR(400MHz,甲醇-d₄)δ8.55(d,J＝8.3Hz,1H),8.47-8.40(m,2H),8.33(d,J＝8.8Hz,1H),8.23-8.12(m,2H),8.07(d,J＝1.3Hz,1H),7.86(dd,J＝6.0,1.8Hz,1H),3.26(d,J＝6.8Hz,2H),2.42-2.26(m,4H),1.05(d,J＝6.8Hz,6H)；LCMS(ESI)m/e 348.0[(M+H)⁺,C₂₁H₂₂N₃O₂的计算值348.2].

实施例31

2-异戊基-6-(吡啶-4-基)喹啉-4(1H)-硫酮

部分A.6-甲基-3-氧代庚酸乙酯

将氢化钠(5.4g,225mmol)在无水THF(500mL)中的溶液用氮气缓慢冲洗，然后在冰浴中冷却。逐滴加入3-氧代丁酸乙酯(13g,100mmol)并将无色溶液在0℃搅拌10min。逐滴加入n-BuLi,1.6M在己烷中的溶液(65.6mL,105mmol)并将橙色溶液在0℃搅拌10min。向反应混合物中加入异丁基碘(12.73mL,110mmol)在无水THF(20mL)中的溶液并将反应混合物在室温搅拌15min。在加入异丁基碘后二价阴离子的颜色立即褪去。将反应混合物用浓HCl(20mL)、水(50mL)淬灭并用乙醚(150mL)稀释。将有机相用水洗涤直到含水萃取物显示中性pH。将有机层经硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩。将粗产物经硅胶柱色谱纯化(15-30％乙酸乙酯/己烷)得到6-甲基-3-氧代庚酸乙酯(13.2g,0.035mmol,35％收率)，其为淡黄色油状物。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δppm 4.04–4.16(m,2H),3.58(s,2H),2.51–2.55(m,2H),1.35–1.54(m,3H),1.15–1.25(m,3H),0.8–0.98(m,6H).

部分B.(E)-3-(4-溴苯基氨基)-6-甲基庚-2-烯酸乙酯

向4-溴苯胺(9.8g,57.0mmol)和6-甲基-3-氧代庚酸乙酯(10.61g,57.0mmol)在甲苯(60mL)中的溶液中加入乙酸(1.631mL,28.5mmol)和分子筛(2g)。将混合物在85℃加热24h。然后将混合物冷却至室温并减压浓缩。将粗产物经硅胶柱色谱纯化(10％-50％乙酸乙酯/己烷)得到(E)-3-((4-溴苯基)氨基)-6-甲基庚-2-烯酸乙酯(7g,18.93mmol,28％收率)，其为淡黄色固体。LCMS(ESI)m/e 340.0[(M+H)⁺,C₁₆H₂₃BrNO₂的计算值340.08]；LC/MS保留时间(方法A):t_R＝2.73min.

部分C.6-溴-2-异戊基喹啉-4(1H)-酮

在100mL圆底烧瓶中将二苯基乙醚(100mL,629mmol)和(E)-3-((4-溴苯基)氨基)-6-甲基庚-2-烯酸乙酯(5.00g,14.69mmol)的混合物在250℃加热1h。将混合物冷却至室温并转移至含有己烷(200mL)的预先加热至40℃的大烧瓶中。将得到的固体过滤并用己烷(200mL)洗涤得到6-溴-2-异戊基喹啉-4(1H)-酮(3.48g,11.61mmol,79％收率)，其为棕色固体。¹H NMR(400MHz,CD₃OD)δppm 8.34(d,J＝6.4Hz,1H),7.81(dd,J＝8.8,6.4Hz,1H),7.54(d,J＝8.8Hz,1H),6.25(s,1H),2.72-2.76(m,2H),1.63–1.71(m,3H),1.01(d,J＝6.4Hz,6H).

部分D.2-异戊基-6-(吡啶-4-基)喹啉-4(1H)-酮

向6-溴-2-异戊基喹啉-4(1H)-酮(3.8g,12.92mmol)在甲苯(81.6mL)和乙醇(21mL)中的溶液中加入吡啶-4-硼酸(2.38g,19.38mmol)，随后加入1M碳酸钠水溶液(15.5mL,15.5mmol)。氮气鼓泡通过搅拌的混悬液5min。加入Pd(PPh₃)₄(1.49g,1.29mmol)并使氮气再次鼓泡通过搅拌的混悬液5min。然后将反应混合物在95℃加热3h。将反应混合物冷却至室温并用碳酸氢钠水溶液(50mL)稀释。将水溶液用乙酸乙酯(2x 50mL)萃取。将合并的有机层用盐水(10mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩得到2-异戊基-6-(吡啶-4-基)喹啉-4(1H)-酮(2.78g,0.17 9.49mmol,73％收率)，其为淡棕色固体。LCMS(ESI)m/e 293.2[(M+H)⁺,C₁₉H₂₁N₂O的计算值293.16]；LC/MS保留时间(方法A):t_R＝1.44min.

部分E.2-异戊基-6-(吡啶-4-基)喹啉-4(1H)-硫酮

向2-异戊基-6-(吡啶-4-基)喹啉-4(1H)-酮(51mg,0.17mmol)在吡啶(0.5mL)中的溶液中加入五硫化磷(51mg,0.23mmol)并将所得的混合物回流1h。将反应混合物冷却至室温并加入水(0.05mL)。然后将混合物在室温搅拌2h。将溶剂减压除去，并加入饱和氯化铵(2mL)。将水层用乙酸乙酯(3x 10mL)萃取。将合并的有机层用盐水(10mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩。将粗产物经制备性HPLC纯化(0.1％TFA/水和乙腈)得到2-异戊基-6-(吡啶-4-基)喹啉-4(1H)-硫酮,TFA(17mg,0.055mmol,32％收率)将其分离，其为淡棕色固体。¹H NMR(400MHz,CD₃OD)δppm 9.36(s,1H),8.84(d,J＝6.4Hz,2H),8.34(d,J＝6.0Hz,2H),8.28(dd,J＝8.8,2.0Hz,1H),7.86(d,J＝8.8Hz,1H),7.52(s,1H),2.76-2.81(m,2H),1.69–1.72(m,3H),1.04(d,J＝6.0Hz,6H)；LCMS(ESI)m/e 309.2[(M+H)⁺,C₁₉H₂₁N₂S的计算值309.1]；LC/MS保留时间(方法B):t_R＝1.51min；HPLC保留时间(方法E):t_R＝8.78min.

实施例32

2-(3-甲基-1-(2,2,2-三氟乙氧基)丁基)-6-(吡啶-4-基)喹啉

部分A.6-溴-2-甲基喹啉

向4-溴苯胺(1.5g,8.72mmol)在甲苯(15mL)中的溶液中加入浓HCl(15mL)。将溶液加热至100℃，然后逐滴加入丁烯醛(1.44mL,17.44mmol)并将混合物在100℃搅拌3h。然后将反应混合物冷却至室温并用饱和NaOH水溶液碱化直到pH为中性。将水层用乙酸乙酯(3x 50mL)萃取。将合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩。将粗产物经柱色谱纯化(使用石油醚:乙酸乙酯的梯度)得到6-溴-2-甲基喹啉(1.0g,4.5mmol,51％收率)，其为淡棕色固体。¹H NMR(400MHz,CD₃OD)δppm 8.18(d,J＝8.4Hz,1H),8.09(d,J＝2.0Hz,1H),7.80–7.87(m,2H),7.46(d,J＝8.4Hz,1H),2.72(s,3H).

部分B.2-甲基-6-(吡啶-4-基)喹啉

向6-溴-2-甲基喹啉(1g,4.50mmol)在二噁烷(2mL)和水(2mL)中的溶液中加入吡啶-4-硼酸(0.83g,6.75mmol)，随后加入Cs₂CO₃(5.85g,18.01mmol)。氮气鼓泡通过搅拌的混悬液5min，然后加入Pd(PPh₃)₄(0.260g,0.22mmol)。使氮气再次鼓泡通过搅拌的混悬液5min并将反应混合物在95℃加热6h。然后将反应混合物冷却至室温并用水(30mL)稀释。将水层用乙酸乙酯(3x 100mL)萃取。将合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩。将粗产物经柱色谱纯化(使用石油醚:乙酸乙酯作为流动相)得到2-甲基-6-(吡啶-4-基)喹啉(500mg,2.26mmol,50％收率)，其为棕色固体。LCMS(ESI)m/e 221.2[(M+H)⁺,C₁₅H₁₃N₂的计算值221.10]；LC/MS保留时间(方法A):t_R＝1.46min.

部分C.6-(吡啶-4-基)喹啉-2-甲醛

向2-甲基-6-(吡啶-4-基)喹啉(1g,4.50mmol)在二噁烷(20mL)中的溶液中加入二氧化硒(0.59g,6.75mmol)并将反应混合物在70℃加热过夜。然后将反应混合物冷却至室温，减压浓缩并用石油醚(20mL)研磨得到6-(吡啶-4-基)喹啉-2-甲醛(800mg,3.41mmol,76％收率)，且棕色胶状物。LCMS(ESI)m/e 235.2[(M+H)⁺,C₁₅H₁₁N₂O的计算值235.1]；LC/MS保留时间(方法A):t_R＝1.55min.

部分D.3-甲基-1-(6-(吡啶-4-基)喹啉-2-基)丁-1-醇

在-78℃向6-(吡啶-4-基)喹啉-2-甲醛(1.4g,5.98mmol)在THF(20mL)中的溶液中加入异丁基溴化镁2M在THF中的溶液(5.98mL,11.96mmol)并将反应混合物在-78℃搅拌3h。然后将反应混合物用NH₄Cl水溶液(20mL)淬灭。将混合物用乙酸乙酯(3x 50mL)萃取。将合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩。将粗产物经柱色谱纯化(用石油醚:乙酸乙酯洗脱)得到3-甲基-1-(6-(吡啶-4-基)喹啉-2-基)丁-1-醇(1.0g,3.42mmol,57％收率)。LCMS(ESI)m/e 293.2[(M+H)⁺,C₁₉H₂₁N₂O的计算值293.2]；LC/MS保留时间(方法A):t_R＝1.74min.

部分E.2-(3-甲基-1-(2,2,2-三氟乙氧基)丁基)-6-(吡啶-4-基)喹啉

向冷却至0℃的3-甲基-1-(6-(吡啶-4-基)喹啉-2-基)丁-1-醇(50mg,0.17mmol)在THF(2mL)中的搅拌溶液中加入NaH(26mg,0.68mmol)，随后加入三氟甲磺酸2,2,2-三氟乙酯(78.9mg,0.34mmol)。将反应混合物温热至室温并在室温搅拌过夜。将反应混合物用冰淬灭。将混合物用乙酸乙酯(3x 20mL)萃取。将合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩。将粗产物经制备性HPLC纯化(0.1％TFA/水和乙腈)得到2-(3-甲基-1-(2,2,2-三氟乙氧基)丁基)-6-(吡啶-4-基)喹啉,TFA(12mg,0.032mmol,19％收率)，其为黄色固体。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δppm 8.90(s,2H),8.36(d,J＝8.4Hz,1H),8.29(d,J＝8.8Hz,1H),8.22(s,1H),8.05(d,J＝8.4Hz,3H),7.71(d,J＝8.4Hz,1H)、4.84–4.86(m,1H),3.76–3.84(m,2H),1.89-1.95(m,2H),1.61–1.65(m,1H),1.00–1.03(m,6H)；LCMS(ESI)m/e 375.0[(M+H)⁺,C₂₁H₂₂F₃N₂O的计算值375.2]；LC/MS保留时间(方法C):t_R＝2.14min；HPLC保留时间(方法D):t_R＝8.90min；HPLC保留时间(方法C):t_R＝8.02min.

实施例33

N-(4-(2-(1-氨基-3-甲基丁基)喹啉-6-基)吡啶-2-基)乙酰胺

部分A.N-(4-溴吡啶-2-基)乙酰胺

历时10min向冷却至0℃的4-溴吡啶-2-胺(4g,23.12mmol)在DCM(40mL)中的溶液中逐滴加入吡啶(2.80mL,34.7mmol)。将反应混合物在0℃搅拌10min，然后缓慢加入乙酰氯(2.137mL,30.1mmol)。将反应混合物在0℃搅拌1h并达到室温。在室温搅拌4h后，将反应混合物用水(20mL)稀释并用DCM(2x 20mL)萃取。将合并的有机层减压浓缩得到N-(4-溴吡啶-2-基)乙酰胺(3.6g,16.74mmol,72.4％收率)，其为浅棕色固体。LCMS(ESI)m/e 215.0,217.0Br谱图[(M+H)⁺,C₇H₈BrN₂O的计算值215.0]；LC/MS保留时间(方法E):t_R＝1.55min.

部分B.N-(4-(2-甲基喹啉-6-基)吡啶-2-基)乙酰胺

向2-甲基-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)喹啉(2.5g,9.29mmol)在1,4-二噁烷(25mL)和水(14mL)的溶剂混合物中的溶液中加入Cs₂CO₃(9.08g,27.9mmol)，随后加入N-(4-溴吡啶-2-基)乙酰胺(2.54g,11.15mmol)。氮气鼓泡通过搅拌的混悬液10min并加入Pd(PPh₃)₄(0.859g,0.743mmol)且再次氮气鼓泡通过搅拌的混悬液另外的10min。然后将反应混合物在100℃加热12h。将反应混合物冷却至室温并用水(15mL)稀释。将混合物用乙酸乙酯(3x 150mL)萃取。将合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩。将粗产物经快速柱色谱纯化(流动相:乙酸乙酯/石油醚)得到N-(4-(2-甲基喹啉-6-基)吡啶-2-基)乙酰胺(1.7g,6.13mmol,66％收率)。LCMS(ESI)m/e 278.2[(M+H)⁺,C₁₇H₁₆N₃O的计算值278.1]；LC/MS保留时间(方法E):t_R＝1.68min.

部分C.N-(4-(2-甲酰基喹啉-6-基)吡啶-2-基)乙酰胺

向N-(4-(2-甲基喹啉-6-基)吡啶-2-基)乙酰胺(1.8g,6.49mmol)在1,4-二噁烷(36mL)中的溶液中加入二氧化硒(0.864g,7.79mmol)并将反应混合物在75℃加热4h。然后将反应混合物冷却至室温并经硅藻土()过滤。将填料用乙酸乙酯洗涤。将合并的有机层减压浓缩得到固体，将其用己烷(15mL)洗涤得到N-(4-(2-甲酰基喹啉-6-基)吡啶-2-基)乙酰胺(1.2g,4.12mmol,64％收率)。LCMS(ESI)m/e 292.2[(M+H)⁺,C₁₇H₁₄N₃O₂的计算值292.10]；LC/MS保留时间(方法E):t_R＝1.67min.

部分D.(E)-N-(4-(2-((叔丁基亚磺酰基亚氨基)甲基)喹啉-6-基)吡啶-2-基)乙酰胺

向N-(4-(2-甲酰基喹啉-6-基)吡啶-2-基)乙酰胺(1.2g,4.12mmol)在四氢呋喃(24mL)中的溶液中加入原钛酸乙酯(2.55mL,12.36mmol)。在室温搅拌10min后，将反应混合物用(R)-(+)叔丁亚磺酰胺(0.599g,4.94mmol)处理并在75℃加热4h。然后将反应混合物冷却至室温并用盐水(20mL)稀释。将所得的混合物通过硅藻土()填料(用乙酸乙酯洗脱)。分离有机层，用硫酸钠干燥并减压浓缩。将粗产物经快速柱色谱纯化(使用乙酸乙酯/己烷的梯度)得到(E)-N-(4-(2-(((叔丁基亚磺酰基)亚氨基)甲基)喹啉-6-基)吡啶-2-基)乙酰胺(950mg,2.408mmol,59％收率)。LCMS(ESI)m/e 395.2[(M+H)⁺,C₂₁H₂₃N₄O₂S的计算值395.2]；LC/MS保留时间(方法E):t_R＝1.79min.

部分E.N-(4-(2-(1-(1,1-二甲基乙基亚磺酰氨基)-3-甲基丁基)喹啉-6-基)吡啶-2-基)乙酰胺

将(E)-N-(4-(2-(((叔丁基亚磺酰基)亚氨基)甲基)喹啉-6-基)吡啶-2-基)乙酰胺(660mg,1.673mmol)吸收于四氢呋喃(13mL)，冷却至-78℃并搅拌10min。然后逐滴加入异丁基溴化镁(2M在乙醚中,1.673mL,3.35mmol)。将反应混合物在-78℃搅拌2h，然后将混合物温热至室温并搅拌2h。将反应混合物用饱和NH₄Cl(15mL)淬灭并用乙酸乙酯(2x 10mL)萃取。将合并的有机层用硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩得到粗的标题化合物(560mg,1.24mmol,74％收率)，其为非对映异构体混合物。LCMS(ESI)m/e 453.2[(M+H)⁺,C₂₅H₃₃N₄O₂S的计算值453.22]；LC/MS保留时间(方法E):t_R＝1.78min和1.91min。非对映异构体经制备性HPLC分离(10mM乙酸铵/水和乙腈)得到两个非对映异构体:异构体1:N-(4-(2-(1-(1,1-二甲基乙基亚磺酰氨基)-3-甲基丁基)喹啉-6-基)吡啶-2-基)乙酰胺(异构体-1)(10mg,0.022mmol)和异构体2:N-(4-(2-(1-(1,1-二甲基乙基亚磺酰氨基)-3-甲基丁基)喹啉-6-基)吡啶-2-基)乙酰胺(异构体-2)(20mg,0.044mmol).

部分F.N-(4-(2-(1-氨基-3-甲基丁基)喹啉-6-基)吡啶-2-基)乙酰胺

将N-(4-(2-(1-(1,1-二甲基乙基亚磺酰氨基)-3-甲基丁基)喹啉-6-基)吡啶-2-基)乙酰胺(异构体-1)(10mg,0.022mmol)吸收于DCM(1mL)并冷却至0℃，然后搅拌10min。向溶液中缓慢加入盐酸(2M在乙醚中,10uL,0.022mmol)并将反应混合物在0℃搅拌10min。移去冰浴并使反应混合物达到室温并搅拌2h。将混合物减压浓缩并将残留物经制备性HPLC纯化(0.1％TFA/水和乙腈)得到N-(4-(2-(1-氨基-3-甲基丁基)喹啉-6-基)吡啶-2-基)乙酰胺,TFA(6mg,0.017mmol,78％收率)，其为棕色固体。¹H NMR(400MHz,CD₃OD)δppm 8.57(d,J＝8.4Hz,1H),8.44–8.48(m,2H),8.30(d,J＝8.8Hz,1H),8.21–8.25(m,2H),7.8(d,J＝6.0Hz,1H),7.67(d,J＝8.4Hz,1H)、4.75(t,J＝7.2Hz,1H),2.32(s,3H),1.89–2.01(m,2H),1.70–1.74(m,1H),1.04–1.09(m,6H)；LCMS(ESI)m/e 349.2[(M+H)⁺,C₂₁H₂₅N₄O的计算值349.2]；LC/MS保留时间(方法A):t_R＝1.39min；HPLC保留时间(方法B):t_R＝10.42min；HPLC保留时间(方法A):t_R＝9.76min；手性SFC(方法A1):t_R＝4.21min.

实施例34

N-(4-(2-(1-氨基-3-甲基丁基)喹啉-6-基)吡啶-2-基)乙酰胺

以与实施例33,部分F中所述的相似方式制备，使用N-(4-(2-(1-(1,1-二甲基乙基亚磺酰氨基)-3-甲基丁基)喹啉-6-基)吡啶-2-基)乙酰胺(异构体-2)(20mg,0.044mmol)得到N-(4-(2-(1-氨基-3-甲基丁基)喹啉-6-基)吡啶-2-基)乙酰胺,HCl(6mg,0.017mmol,39％收率)，其为灰白色固体。¹H NMR(400MHz,CD₃OD)δppm 8.63(s,2H)8.47(d,J＝5.2Hz,1H),8.27–8.36(m,2H),8.09(d,J＝5.2Hz,1H),7.88(s,1H),7.72(d,J＝8.0Hz,1H)、4.76–4.79(m,1H),2.41(s,3H),1.90–2.02(m,2H),1.68–1.75(m,1H),1.05–1.07(m,6H)；LCMS(ESI)m/e 349.2[(M+H)⁺,C₂₁H₂₅N₄O的计算值349.2]；LC/MS保留时间(方法A):t_R＝1.28min；HPLC保留时间(方法A):t_R＝9.57min；HPLC保留时间(方法B):t_R＝10.14min；手性SFC(方法A2):t_R＝3.84min.

实施例35

N-(4-(2-(1-氨基-3-甲基丁基)喹啉-6-基)吡啶-2-基)-3-氟苯甲酰胺

部分A.N-(4-溴吡啶-2-基)-3-氟苯甲酰胺

将3-氟苯甲酸(100mg,0.714mmol)在二氯亚砜(255mg,2.141mmol)中的溶液在65℃加热1h，然后在氮气气氛下减压浓缩得到3-氟苯甲酰氯，其为油状物，将其保持在氮气下直到需要时。在分开的单颈圆底烧瓶中将4-溴吡啶-2-胺(149mg,0.864mmol)吸收于DCM(4mL)。在室温向该搅拌的溶液中加入DIEA(0.125mL,0.714mmol)。然后将溶液冷却至0℃并逐滴加入3-氟苯甲酰氯在DCM(1mL)中的溶液。然后将反应混合物在室温搅拌7h。将反应混合物用冰水(10mL)淬灭并用乙酸乙酯(3x 3mL)萃取。将合并的有机层用水(10mL)洗涤，经硫酸钠干燥并减压蒸发得到N-(3-溴苯基)-3-氟苯甲酰胺(30mg,0.078mmol,11％收率)。粗产物无需纯化即可用于下一步。LCMS(ESI)m/e 295.0[(M+H)⁺,C₁₂H₉BrFN₂O的计算值294.98]；LC/MS保留时间(方法E):t_R＝1.94min.

部分B.N-(4-(2-(1-(1,1-二甲基乙基亚磺酰氨基)-3-甲基丁基)喹啉-6-基)吡啶-2-基)-3-氟苯甲酰胺

以与在实施例25,部分E中所述相似的方式制备，使用2-甲基-N-(3-甲基-1-(6-(三甲基甲锡烷基)喹啉-2-基)丁基)丙烷-2-亚磺酰胺(在实施例25,部分D中所述制备)(100mg,0.208mmol)和N-(4-溴吡啶-2-基)-3-氟苯甲酰胺(73.6mg,0.249mmol)得到N-(4-(2-(1-(1,1-二甲基乙基亚磺酰氨基)-3-甲基丁基)喹啉-6-基)吡啶-2-基)-3-氟苯甲酰胺(120mg,0.034mmol,16％收率)。粗产物无需纯化即可用于下一步。LCMS(ESI)m/e 533.2[(M+H)⁺,C₃₀H₃₄FN₄O₂S的计算值533.23]；LC/MS保留时间(方法E):t_R＝2.25min.

部分C.N-(4-(2-(1-氨基-3-甲基丁基)喹啉-6-基)吡啶-2-基)-3-氟苯甲酰胺

以与在实施例25,部分E中所述相似的方式制备，使用N-(4-(2-(1-(1,1-二甲基乙基亚磺酰氨基)-3-甲基丁基)喹啉-6-基)吡啶-2-基)-3-氟苯甲酰胺(120mg,0.225mmol)。将粗产物经制备性HPLC纯化(0.1％TFA/水和乙腈)得到N-(4-(2-(1-氨基-3-甲基丁基)喹啉-6-基)吡啶-2-基)-3-氟苯甲酰胺,TFA(10mg,0.022mmol,10％收率)。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δppm 7.89(s,1H),7.70–7.76(m,2H),7.64(s,1H),7.42–7.50(m,2H),7.08(d,J＝7.2Hz,1H),6.98–7.00(m,1H),6.79–6.88(m,3H),6.58–6.61(m,1H),3.92–3.96(m,1H),1.09–1.23(m,2H),0.89–1.93(m,1H),0.23–0.28(m,6H)；LCMS(ESI)m/e 429.2[(M+H)⁺,C₂₆H₂₆FN₄O的计算值429.20]；LC/MS保留时间(方法C):t_R＝1.85min；HPLC保留时间(方法D):t_R＝8.04min；HPLC保留时间(方法C):t_R＝6.68min.

实施例36

4-(2-(氨基(环己基)甲基)喹啉-6-基)-N-(丙-1-烯-2-基)吡啶-2-胺

部分A.N-(4-(2-(环己基(1,1-二甲基乙基亚磺酰氨基)甲基)喹啉-6-基)吡啶-2-基)-N-甲基乙酰胺

如实施例33,部分E给我F所述制备得到4-(2-(氨基(环己基)甲基)喹啉-6-基)-N-(丙-1-烯-2-基)吡啶-2-胺,TFA(160mg,0.334mmol,5％收率，历时两步)，其为浅黄色固体。¹H NMR(400MHz,CD₃OD)δppm 8.44–8.54(m,3H)8.27–8.31(m,2H)8.22(dd,J＝8.8,2.0Hz,1H)7.79(d,J＝4.4Hz,1H)7.63(d,J＝8.4Hz,1H)4.51(d,J＝6.4Hz,1H)2.32(s,3H)2.07–2.11(m,1H)1.63–1.87(m,5H)1.13–1.41(m,5H)；LCMS(ESI)m/e 375.2[(M+H)⁺,C₂₃H₂₇N₄O的计算值375.2]；LC/MS保留时间(方法B):t_R＝1.59min；HPLC保留时间(方法B):t_R＝11.70min；HPLC保留时间(方法A):t_R＝10.83min.

实施例37

3-甲基-1-(6-(吡啶-4-基)-4-(1H-四唑-5-基)喹啉-2-基)丁-1-胺

部分A.4-溴-2-异戊基-6-(吡啶-4-基)喹啉

在室温向2-异戊基-6-(吡啶-4-基)喹啉-4(1H)-酮(2.2g,7.52mmol)(如实施例31,部分D所述制备)在DMF(40mL)中的混悬液中以保持反应混合物不发泡的速率小心地逐滴加入PBr₃(0.710mL,7.52mmol)。加入完成后，将反应混合物在室温搅拌20min，然后用冰水淬灭。将所得的混合物在室温搅拌30min。通过加入1N NaOH将混合物的pH调节为pH＝8。将混合物转移至含有饱和NaHCO₃水溶液(45mL)的分液漏斗并将水层用含有10％MeOH的CH₂Cl₂(2x 50mL)萃取。将合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，经硫酸镁干燥，过滤，并减压浓缩。将残留物经硅胶柱色谱纯化(2％→7％甲醇/CH₂Cl₂)得到4-溴-2-异戊基-6-(吡啶-4-基)喹啉(1.87g,4.48mmol,60％收率)，其为橙色油状物，其静置后固化。LCMS(ESI)m/e 355.0[(M+H)⁺,C₁₉H₂₀BrN₂的计算值355.07]；LC/MS保留时间(方法E):t_R＝2.34min.

部分B.4-溴-2-(1-溴-3-甲基丁基)-6-(吡啶-4-基)喹啉

向4-溴-2-异戊基-6-(吡啶-4-基)喹啉(0.567g,1.596mmol)和AIBN(0.052g,0.318mmol)在CCl₄(15mL)中的溶液中加入NBS(0.312g,1.754mmol)。然后将反应混合物在75℃加热3.5h。加入额外的NBS(340mg)和AIBN(99mg)并继续搅拌额外的2.5h。然后将混合物冷却至室温并转移至含有饱和碳酸氢钠水溶液的分液漏斗。将水层用DCM(15mL)萃取。将合并的有机层用盐水(10mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤，并减压浓缩。将残留物经硅胶柱色谱纯化(2％→7％甲醇/CH₂Cl₂；12g柱)得到4-溴-2-(1-溴-3-甲基丁基)-6-(吡啶-4-基)喹啉(0.277g,0.268mmol,17％收率)，其为棕色固体。LCMS(ESI)m/e 433.0,435.0di-溴pattern[(M+H)⁺,C₁₉H₁₉Br₂N₂的计算值433.0]；LC/MS保留时间(方法E):t_R＝2.44min.

部分C.2-(1-叠氮基-3-甲基丁基)-4-溴-6-(吡啶-4-基)喹啉

将4-溴-2-(1-溴-3-甲基丁基)-6-(吡啶-4-基)喹啉(0.277g,0.638mmol)在丙酮(2.5mL)中的溶液用叠氮化钠(0.166g,2.55mmol)处理，将混合物在70℃加热2.75h。将反应混合物冷却至室温并转移至含有水的分液漏斗。将水层用CH₂Cl₂(2x 10mL)萃取并将合并的有机萃取物用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤，并减压浓缩得到2-(1-叠氮基-3-甲基丁基)-4-溴-6-(吡啶-4-基)喹啉(0.130g,0.233mmol,37％收率)，其为油状物。该粗物质无需进一步纯化即可继续使用。LCMS(ESI)m/e 396.0,398.0Br谱图[(M+H)⁺,C₁₉H₁₉BrN₅的计算值396.1]；LC/MS保留时间(方法E):t_R＝2.39min.

部分D.1-(4-溴-6-(吡啶-4-基)喹啉-2-基)-3-甲基丁-1-胺

向2-(1-叠氮基-3-甲基丁基)-4-溴-6-(吡啶-4-基)喹啉(0.130g,0.328mmol)在THF(2mL)中的溶液中加入三苯基膦(0.172g,0.656mmol)。将混合物在室温搅拌3h。加入水(0.1mL,5.55mmol)并将混合物在50℃加热24h。然后将反应混合物冷却至室温并减压浓缩得到1-(4-溴-6-(吡啶-4-基)喹啉-2-基)-3-甲基丁-1-胺(0.15g,0.158mmol,48％收率)。粗产物无需纯化即可用于下一步。LCMS(ESI)m/e 370.0,372.0Br谱图[(M+H)⁺,C₁₉H₂₁BrN₃的计算值370.1]；LC/MS保留时间(方法E):t_R＝1.78min.

部分E.1-(4-溴-6-(吡啶-4-基)喹啉-2-基)-3-甲基丁基氨基甲酸叔丁酯

将1-(4-溴-6-(吡啶-4-基)喹啉-2-基)-3-甲基丁-1-胺(0.150g,0.405mmol)在四氢呋喃(5mL)中的溶液冷却至0℃并用DIEA(0.354mL,2.025mmol)处理。将反应混合物搅拌10min，然后用(BOC)₂O(0.103mL,0.446mmol)处理。将所得的溶液在室温在氮气下搅拌14h。然后将反应混合物用水稀释并用二氯甲烷(2x 10mL)萃取。将合并的有机层用水、盐水洗涤，经硫酸钠干燥并减压浓缩得到(1-(4-溴-6-(吡啶-4-基)喹啉-2-基)-3-甲基丁基)氨基甲酸叔丁酯(0.171g,0.364mmol,90％收率)。粗产物无需纯化即可用于下一步。LCMS(ESI)m/e 470.2,472.2Br谱图[(M+H)⁺,C₂₄H₂₉BrN₃O₂的计算值470.1]；LC/MS保留时间(方法E):t_R＝2.25min.

部分F.1-(4-氰基-6-(吡啶-4-基)喹啉-2-基)-3-甲基丁基氨基甲酸叔丁酯

将(1-(4-溴-6-(吡啶-4-基)喹啉-2-基)-3-甲基丁基)氨基甲酸叔丁酯(0.15g,0.319mmol)溶于DMF(5mL)和水(0.25mL,13.88mmol)。将混合物经超声脱气5min。将所得的溶液先后用氰化锌(0.039g,0.332mmol)、三二亚苄基丙酮(0.330g,0.319mmol)和DPPF(0.177g,0.319mmol)处理并将反应混合物在120℃在氮气下加热1.25h。将混合物冷却至室温并转移至含有乙醚(10mL)的分液漏斗。分离有机层并用水(10mL)洗涤。将合并的有机层用盐水(10mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤，并减压浓缩。将残留物经硅胶制备性TLC纯化(使用5％甲醇/CH₂Cl₂作为流动相)得到(1-(4-氰基-6-(吡啶-4-基)喹啉-2-基)-3-甲基丁基)氨基甲酸酯叔丁(0.080g,0.192mmol,60％收率)。LCMS(ESI)m/e 417.2[(M+H)⁺,C₂₅H₂₉N₄O₂的计算值417.2]；LC/MS保留时间(方法E):t_R＝2.10min.

部分G.3-甲基-1-(6-(吡啶-4-基)-4-(2H-四唑-5-基)喹啉-2-基)丁基氨基甲酸叔丁酯

向(1-(4-氰基-6-(吡啶-4-基)喹啉-2-基)-3-甲基丁基)氨基甲酸叔丁酯(0.080g,0.192mmol)在DMF(1mL)中的溶液中加入氯化铵(0.062g,1.152mmol)和叠氮化钠(0.075g,1.152mmol)。将反应混合物在100℃加热2h。将反应混合物冷却至室温并用水(10mL)稀释。将水层用乙酸乙酯(2x 10mL)洗涤，然后将水层减压浓缩得到固体。将固体溶于甲醇，经硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩得到(3-甲基-1-(6-(吡啶-4-基)-4-(2H-四唑-5-基)喹啉-2-基)丁基)氨基甲酸叔丁酯(0.045g,0.098mmol,51％收率)。粗产物无需进一步纯化即可用于下一步。LCMS(ESI)m/e 460.2[(M+H)⁺,C₂₅H₃₀N₇O₂的计算值460.2]；LC/MS保留时间(方法E):t_R＝1.65min.

部分H.3-甲基-1-(6-(吡啶-4-基)-4-(1H-四唑-5-基)喹啉-2-基)丁-1-胺

将(3-甲基-1-(6-(吡啶-4-基)-4-(2H-四唑-5-基)喹啉-2-基)丁基)氨基甲酸叔丁酯(0.04g,0.087mmol)在甲醇(1mL)中的溶液在氮气下冷却至0℃并搅拌10min。然后逐滴加入氯化氢,2M在乙醚中的溶液(5ml,0.00mmol)。将溶液温热至室温并搅拌2h。将反应混合物减压浓缩。将水(10mL)加入至残留物并将所得的溶液用乙醚(5mL)、乙酸乙酯(5mL)洗涤。将水层减压浓缩并将残留物经制备性HPLC纯化(0.1％TFA/水/AcCN)得到3-甲基-1-(6-(吡啶-4-基)-4-(2H-四唑-5-基)喹啉-2-基)丁-1-胺,TFA(0.006g,0.017mmol,19％收率)，且红色固体。¹H NMR(400MHz,CD₃OD)δppm 9.57(d,J＝1.6Hz,1H),8.85(d,J＝6.4Hz,2H),8.36–8.44(m,2H),8.31(d,J＝6.0Hz,2H),8.22(s,1H)、4.80–4.82(m,1H),1.92–2.10(m,2H),1.73–1.80(m,1H),1.07–1.11(m,6H)；LCMS(ESI)m/e 360.2[(M+H)⁺,C₂₂H₂₂N₇的计算值360.19]；LC/MS保留时间(方法E):t_R＝1.46min；HPLC保留时间(方法B):t_R＝8.11min；HPLC保留时间(方法A):t_R＝7.90min.

实施例38

4-(2-(1-氨基-3-甲基丁基)喹啉-6-基)-N-环丙基吡啶-2-胺

部分A.4-溴-N-环丙基吡啶-2-胺

向4-溴-2-氟吡啶(100mg,0.568mmol)在DMF(2mL)中的溶液中加入碳酸铯(185mg,0.568mmol)，随后加入环丙胺(97mg,1.705mmol)。将反应混合物在100℃加热8h。将反应混合物冷却至室温，用水(5mL)淬灭，并用乙酸乙酯(3x 5mL)萃取。将合并的有机层用水(10mL)、然后盐水(10mL)洗涤，经硫酸钠干燥并减压蒸发得到4-溴-N-环丙基吡啶-2-胺(10mg,10.33μmol,2％收率)。LCMS(ESI)m/e 213.0,215.0溴谱图[(M+H)⁺,C₈H₁₀BrN₂的计算值213.0]；LC/MS保留时间(方法B):t_R＝0.84min.

部分B.N-(1-(6-(2-(环丙基氨基)吡啶-4-基)喹啉-2-基)-3-甲基丁基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺

以与在实施例25,部分E中所述相似的方式制备，使用2-甲基-N-(3-甲基-1-(6-(三甲基甲锡烷基)喹啉-2-基)丁基)丙烷-2-亚磺酰胺(90mg,0.19mmol)和4-溴-N-环丙基吡啶-2-胺(47.8mg,0.22mmol)得到N-(1-(6-(2-(环丙基氨基)吡啶-4-基)喹啉-2-基)-3-甲基丁基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(15mg,0.019mmol,10％收率)。LCMS(ESI)m/e 451.2[(M+H)⁺,C₂₆H₃₅N₄OS的计算值451.2]；LC/MS保留时间(方法C):t_R＝2.06min.

部分C.4-(2-(1-氨基-3-甲基丁基)喹啉-6-基)-N-环丙基吡啶-2-胺

以与在实施例25,部分F中所述相似的方式制备，使用N-(1-(6-(2-(环丙基氨基)吡啶-4-基)喹啉-2-基)-3-甲基丁基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(75mg,0.166mmol)。将粗产物经制备性HPLC纯化(0.1％TFA/水和乙腈)得到4-(2-(1-氨基-3-甲基丁基)喹啉-6-基)-N-环丙基吡啶-2-胺,TFA(13mg,0.036mmol,22％收率)，其为淡黄色油状物。¹H NMR(400MHz,CD₃OD)δppm 8.55-8.60(m,1H),8.47(d,J＝2.0Hz,1H),8.30(d,J＝8.8Hz,1H),8.19(dd,J＝8.8,2.4Hz,1H),8.05(dd,J＝6.8.0.4Hz,1H),7.68(d,J＝8.8Hz,1H),7.42-7.46(m,2H)、4.75(t,J＝7.2Hz,1H),2.78-2.80(m,1H),1.90-1.98(m,2H),1.70-1.72(m,1H),1.03-1.10(m,8H),0.79-0.82(m,2H)；LCMS(ESI)m/e 347.2[(M+H)⁺,C₂₂H₂₇N₄的计算值347.2]；LC/MS保留时间(方法B):t_R＝1.40min；HPLC保留时间(方法A):t_R＝9.11min；HPLC保留时间(方法B):t_R＝10.31min；手性HPLC(方法B1):t_R＝10.93min.

实施例39

2-(氨基(环己基)甲基)-6-(吡啶-4-基)喹啉-4-甲酰胺

部分A.6-溴-2-甲基喹啉-4-羧酸

在圆底烧瓶中向5-溴吲哚啉-2,3-二酮(800mg,3.54mmol)中加入KOH(1589mg,28.3mmol)在水(3.2mL)中的溶液并将所得的溶液搅拌10min。向该溶液中加入丙酮(5.98mL,81mmol)并将反应混合物在75℃加热5h。然后将反应混合物冷却至室温，使用10％HCl中和为pH 5-6。将形成的析出物经过滤收集并真空干燥得到6-溴-2-甲基喹啉-4-羧酸(500mg,1.879mmol,53％收率)。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δppm 14.04(s,1H)8.93(s,1H)7.95(d,J＝8.8Hz,3H)2.72(s,3H).

部分B.6-溴-2-甲基喹啉-4-甲酰胺

在0℃向6-溴-2-甲基喹啉-4-羧酸(9.7g,36.5mmol)在DMF(2mL)中的溶液中加入EDC(10.48g,54.7mmol)、HOBT(11.16g,72.9mmol)和氯化铵(4.87g,91mmol)并将混合物搅拌10min。然后加入DIEA(19.10mL,109mmol)并将溶液在室温搅拌12h。将反应混合物用冰淬灭并将固体经过滤收集得到6-溴-2-甲基喹啉-4-甲酰胺(8.1g,30.6mmol,84％收率)，其为固体。LCMS(ESI)m/e 265.0,267.0Br谱图[(M+H)⁺,C₁₁H₁₀BrN₂O的计算值265.0]；LC/MS保留时间(方法A):t_R＝1.21min.

部分C.2-甲基-6-(吡啶-4-基)喹啉-4-甲酰胺

向6-溴-2-甲基喹啉-4-甲酰胺(2g,7.54mmol)在1,4-二噁烷(20mL)和水(10mL)中的溶液中加入4-吡啶基硼酸(1.855g,15.09mmol)和碳酸铯(7.37g,22.63mmol)。氮气鼓泡通过搅拌的混悬液10min。加入Pd(PPh₃)₄(0.697g,0.604mmol)并再次氮气鼓泡通过搅拌的混悬液10min。然后将反应混合物在95℃加热12h。将反应混合物用冰淬灭并搅拌10min。将得到的固体经过滤收集并用石油醚(20mL)和乙酸乙酯(20mL)洗涤，然后真空干燥得到2-甲基-6-(吡啶-4-基)喹啉-4-甲酰胺(1.6g,6.08mmol,81％收率)。LCMS(ESI)m/e 262.0[(M-H)^-,C₁₆H₁₂N₃O的计算值262.1]；LC/MS保留时间(方法A):t_R＝1.03min.

部分D.2-甲酰基-6-(吡啶-4-基)喹啉-4-甲酰胺

向2-甲基-6-(吡啶-4-基)喹啉-4-甲酰胺(1.6g,6.08mmol)在1,4-二噁烷(32mL)中的溶液中加入二氧化硒(0.809g,7.29mmol)并将混合物加热至75℃并搅拌12h。将反应混合物经硅藻土()填料过滤，用DCM(30mL)和甲醇(20mL)洗涤填料。将合并的有机层减压浓缩得到2-甲酰基-6-(吡啶-4-基)喹啉-4-甲酰胺(1.4g,5.05mmol,83％收率)。LCMS(ESI)m/e 276.0[(M-H)^-,C₁₆H₁₀N₃O₂的计算值276.09]；LC/MS保留时间(方法A):t_R＝1.12min.

部分E.(E)-2-((叔丁基亚磺酰基亚氨基)甲基)-6-(吡啶-4-基)喹啉-4-甲酰胺

以与在实施例33,部分D中所述相似的方式制备，使用2-甲酰基-6-(吡啶-4-基)喹啉-4-甲酰胺(1.4g,5.05mmol)得到(E)-2-((叔丁基亚磺酰基亚氨基)甲基)-6-(吡啶-4-基)喹啉-4-甲酰胺(1.5g,3.94mmol,78％收率)。粗产物无需纯化即可用于下一步。LCMS(ESI)m/e 381.0[(M+H)⁺,C₂₀H₂₁N₄O₂S的计算值381.1]；LC/MS保留时间(方法A):t_R＝1.32min.

部分F.2-(环己基(1,1-二甲基乙基亚磺酰氨基)甲基)-6-(吡啶-4-基)喹啉-4-甲酰胺

以与在实施例36,部分A中所述相似的方式制备，使用(E)-2-(((叔丁基亚磺酰基)亚氨基)甲基)-6-(吡啶-4-基)喹啉-4-甲酰胺(1g,2.63mmol)。LCMS(ESI)m/e 465.0[(M+H)⁺,C₂₆H₃₃N₄O₂S的计算值465.22]；LC/MS保留时间(方法A):t_R＝1.48min,1.75min(两个非对映异构体)。非对映异构体经制备性HPLC分离(10mM乙酸铵/水和乙腈)得到异构体1:2-(环己基(1,1-二甲基乙基亚磺酰氨基)甲基)-6-(吡啶-4-基)喹啉-4-甲酰胺(30mg,0.065mmol,2％收率)和异构体2:2-(环己基(1,1-二甲基乙基亚磺酰氨基)甲基)-6-(吡啶-4-基)喹啉-4-甲酰胺(300mg,0.646mmol,25％收率)。

部分G.2-(氨基(环己基)甲基)-6-(吡啶-4-基)喹啉-4-甲酰胺

以与在实施例33,部分F中所述相似的方式制备，使用2-(环己基(1,1-二甲基乙基亚磺酰氨基)甲基)-6-(吡啶-4-基)喹啉-4-甲酰胺(异构体-1)(30mg,0.065mmol)。将粗产物经制备性HPLC纯化(0.1％TFA/水和乙腈)得到光学纯的2-(氨基(环己基)甲基)-6-(吡啶-4-基)喹啉-4-甲酰胺,TFA(12mg,0.033mmol,51.6％收率)，其为黄色固体。¹H NMR(400MHz,CD₃OD)δppm 8.95(d,J＝6.8Hz,2H),8.88(d,J＝1.2Hz,1H),8.49(d,J＝6.8,Hz,2H),8.38–8.43(m,2H),7.79(s,1H)、4.59(d,J＝6.4Hz,1H),2.14–2.17(m,1H),1.70–1.88(m,5H),1.19–1.37(m,5H)；LCMS(ESI)m/e 361.0[(M+H)⁺,C₂₂H₂₅N₄O的计算值361.2]；LC/MS保留时间(方法A):t_R＝1.18min；HPLC保留时间(方法A):t_R＝7.27min；HPLC保留时间(方法B):t_R＝8.11min；手性SFC(方法B1):t_R＝6.59min。未确定异构体的绝对立体化学。

实施例40

2-(氨基(环己基)甲基)-6-(吡啶-4-基)喹啉-4-甲酰胺

以与在实施例33,部分F中所述相似的方式制备，使用2-(环己基(1,1-二甲基乙基亚磺酰氨基)甲基)-6-(吡啶-4-基)喹啉-4-甲酰胺(异构体-2,如实施例39.部分F所述制备)(30mg,0.065mmol)得到光学纯的2-(氨基(环己基)甲基)-6-(吡啶-4-基)喹啉-4-甲酰胺,TFA(12mg,0.033mmol,52％收率)，其为黄色固体。¹H NMR(400MHz,CD₃OD)δppm 8.96(d,J＝6.8Hz,2H),8.90(s,1H),8.53(d,J＝6.8,Hz,2H),8.41(d,J＝2.0Hz,2H),7.80(s,1H)、4.60(d,J＝6.4Hz,1H),2.15–2.19(m,1H),1.80–1.87(m,3H),1.70–1.72(m,2H),1.19–1.36(m,5H)；LCMS(ESI)m/e 361.2[(M+H)⁺,C₂₂H₂₅N₄O的计算值361.2]；LC/MS保留时间(方法B):t_R＝1.09min；HPLC保留时间(方法A):t_R＝7.14min；HPLC保留时间(方法B):t_R＝8.04min；手性SFC(方法B1):t_R＝4.83min.未确定异构体的绝对立体化学。

实施例41

2-(氨基(环己基)甲基)-6-(吡啶-4-基)喹啉-4-甲腈

部分A.2-(氨基(环己基)甲基)-6-(吡啶-4-基)喹啉-4-甲腈

将2-(环己基(1,1-二甲基乙基亚磺酰氨基)甲基)-6-(吡啶-4-基)喹啉-4-甲酰胺(20mg,0.043mmol)(如在实施例39,部分F中所述以外消旋形式制备)吸收于二氯甲烷(1mL)并冷却至0℃。向其中加入2M HCl在乙醚中的溶液(0.1mL,0.2mmol)并将反应混合物在该温度搅拌10min。将反应混合物温热至室温并继续搅拌2h。将混合物减压浓缩并将残留物经制备性HPLC纯化(0.1％TFA/水和乙腈)得到2-(氨基(环己基)甲基)-6-(吡啶-4-基)喹啉-4-甲腈,TFA(8mg,0.023mmol,54％收率)，其为淡黄色固体。¹H NMR(400MHz,CD₃OD)δppm 8.91(d,J＝6.4Hz,2H),8.67(d,J＝1.6Hz,1H),8.55–8.58(m,2H),8.35–8.50(m,1H),8.34(d,J＝6.4Hz,2H)、4.10–4.15(m,1H),2.02–2.04(m,2H),1.90–1.93(m,2H),1.81–1.84(m,1H),1.48–1.62(m,4H),1.30–1.40(m,2H)；LCMS(ESI)m/e 341.2[(M-H)^-,C₂₂H₂₁N₄的计算值341.2]；LC/MS保留时间(方法E):t_R＝2.25min；HPLC保留时间(方法C):t_R＝9.99min；HPLC保留时间(方法D):t_R＝9.70min.

实施例42

N-(4-(2-(1-氨基-3-甲基丁基)喹啉-6-基)吡啶-2-基)-4-(三氟甲基)苯甲酰胺

部分A.N-(4-溴吡啶-2-基)-4-(三氟甲基)苯甲酰胺

向4-(三氟甲基)苯甲酰氯(214mg,1.028mmol)在DCM(4mL)中的搅拌溶液中加入DIEA(0.748mL,4.29mmol)和DMAP(20.94mg,0.171mmol)。将反应混合物冷却至0℃并用4-溴吡啶-2-胺(150mg,0.87mmol)处理。将反应混合物搅拌12h并用水(3mL)淬灭。分离有机层，用10％NaHCO₃溶液(5mL)、水(3x 5mL)和盐水(5mL)洗涤。将有机层经硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩。将残留物经制备性硅胶TLC纯化(40％乙酸乙酯/己烷)得到N-(4-溴吡啶-2-基)-4-(三氟甲基)苯甲酰胺(70mg,0.187mmol,22％收率)。LCMS(ESI)m/e 345.0[(M+H)⁺,C₁₃H₉BrF₃N₂O的计算值345.0]；LC/MS保留时间(方法E):t_R＝2.04min.

部分B.N-(4-(2-(1-(1,1-二甲基乙基亚磺酰氨基)-3-甲基丁基)喹啉-6-基)吡啶-2-基)-4-(三氟甲基)苯甲酰胺

在10mL压力管中将2-甲基-N-(3-甲基-1-(6-(三甲基甲锡烷基)喹啉-2-基)丁基)丙烷-2-亚磺酰胺(100mg,0.208mmol)在DMF(3mL)中的溶液用N-(4-溴吡啶-2-基)-4-(三氟甲基)苯甲酰胺(86mg,0.249mmol)、四丁基溴化铵(100mg,0.312mmol)和K₂CO₃(86mg,0.623mmol)处理。氮气鼓泡通过搅拌的混悬液10min并加入二(三苯基膦)二氯化钯(II)(146mg,0.208mmol)。再次使氮气鼓泡通过搅拌的混悬液10min并将反应混合物在95℃加热并搅拌12h。将反应混合物冷却至室温，用水(10mL)稀释，然后用EtOAc(3x 5mL)萃取。将合并的有机层用水(10mL)、然后盐水(10mL)洗涤。将有机层经硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩。将残留物经硅胶柱色谱纯化(使用0-18％乙酸乙酯/己烷)得到N-(4-(2-(1-(1,1-二甲基乙基亚磺酰氨基)-3-甲基丁基)喹啉-6-基)吡啶-2-基)-4-(三氟甲基)苯甲酰胺(70mg,0.077mmol,37％收率)。LCMS(ESI)m/e 583.2[(M+H)⁺,C₃₁H₃₄F₃N₄O₂S的计算值583.23]；LC/MS保留时间(方法E):t_R＝2.40min.

部分C.N-(4-(2-(1-氨基-3-甲基丁基)喹啉-6-基)吡啶-2-基)-4-(三氟甲基)苯甲酰胺

在0℃向N-(4-(2-(1-(1,1-二甲基乙基亚磺酰氨基)-3-甲基丁基)喹啉-6-基)吡啶-2-基)-4-(三氟甲基)苯甲酰胺(70mg,0.120mmol)在乙醚(3mL)中的溶液中逐滴加入2M氯化氢在乙醚中的溶液(60uL,0.120mmol)。移去冷却浴并将反应混合物温热至室温并搅拌2h。将挥发物减压蒸发。将残留物用水(15mL)稀释并用乙酸乙酯(10mL)洗涤。将水层用10％NaHCO₃溶液(20mL)碱化并用乙酸乙酯(3x 10mL)萃取。将合并的有机层经硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩。将残留物经制备性HPLC纯化(0.1％TFA/水和乙腈)得到N-(4-(2-(1-氨基-3-甲基丁基)喹啉-6-基)吡啶-2-基)-4(三氟甲基)苯甲酰胺,TFA(12mg,0.025mmol,20％收率)，其为白色固体。¹H NMR(400MHz,CD₃OD)δppm 8.72(s,1H)8.52–8.58(m,2H)8.45(d,J＝1.6Hz,1H)8.21–8.31(m,4H)7.90(d,J＝8.0Hz,2H)7.64–7.69(m,2H)4.75(t,J＝7.2Hz,1H)1.88–2.03(m,2H)1.69–1.76(m,1H)1.05–1.09(m,6H)；LCMS(ESI)m/e479.2[(M+H)⁺,C₂₇H₂₆F₃N₄O的计算值479.2]；LC/MS保留时间(方法A):t_R＝1.87min；HPLC保留时间(方法D):t_R＝8.89min；HPLC保留时间(方法C):t_R＝7.85min；手性HPLC(方法A2):t_R＝6.97min.

实施例43

1-(4-乙基-6-(吡啶-4-基)喹啉-2-基)-3-甲基丁-1-胺

部分A.6-溴-2-甲基喹啉-4-醇

在氮气气氛下将4-溴苯胺(10g,58.1mmol)、PPA(14.30mL,58.1mmol)和3-氧代丁酸乙酯(15.13g,116mmol)加热至170℃且保持12h。将反应混合物冷却至室温并用20％NaOH溶液淬灭以使得pH＝7。将析出的固体经过滤收集，用水(100mL)洗涤并真空干燥。将固体转移至烧瓶并吸收于乙酸乙酯(100mL)。将所得的混合物搅拌30min以溶解痕量的4-溴苯胺。将固体再次经过滤收集，用水(100mL)洗涤并真空干燥过夜得到6-溴-2-甲基喹啉-4-醇(8.1g,32.1mmol,55％收率)。LCMS(ESI)m/e 238.0[(M+H)⁺,C₁₀H₉BrNO的计算值238.0]；LC/MS保留时间(方法B):t_R＝1.37min.

部分B.2-甲基-6-(吡啶-4-基)喹啉-4-醇

将6-溴-2-甲基喹啉-4-醇(2g,8.40mmol)、吡啶-4-基硼酸(1.239g,10.08mmol)和碳酸钠(1.157g,10.92mmol)吸收于甲苯(50mL)和EtOH(15mL)的溶剂混合物中。将所得的混合物用氮气净化5min并加入Pd(PPh₃)₄(0.971g,0.840mmol)。然后将反应混合物在95℃加热14h。然后将反应混合物冷却至室温并减压浓缩。将残留物用水处理并将析出的固体经过滤收集，用水洗涤并真空干燥得到2-甲基-6-(吡啶-4-基)喹啉-4-醇(0.91g,3.27mmol,39％收率)。LCMS(ESI)m/e 237.0[(M+H)⁺,C₁₅H₁₃N₂O的计算值237.1]；LC/MS保留时间(方法B):t_R＝0.81min.

部分C.4-溴-2-甲基-6-(吡啶-4-基)喹啉

向中的搅拌溶液中2-甲基-6-(吡啶-4-基)喹啉-4-醇(0.8g,3.39mmol)在DMF(15mL)经注射器逐滴加入PBr₃(0.383mL,4.06mmol)并将反应混合物在室温搅拌45min。加入冰水并将混合物在室温搅拌30min。通过加入10％NaOH溶液将反应混合物的pH调节为8。将混合物转移至含有饱和碳酸氢钠(20mL)的分液漏斗并用二氯甲烷(2x 25mL)萃取。将有机层用盐水(20mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩。将残留物经硅胶柱色谱纯化(3％MeOH/DCM)得到4-溴-2-甲基-6-(吡啶-4-基)喹啉(0.85g,1.954mmol,58％收率)。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δppm 8.73(d,J＝6.0Hz,2H),8.39(d,J＝2.0Hz,1H),8.23(dd,J＝8.8,2.0Hz,1H),8.12(d,J＝8.8Hz,1H),7.96(m,1H),7.88(dd,J＝4.4,1.6Hz,2H),2.69(s,3H).

部分D.4-溴-6-(吡啶-4-基)喹啉-2-甲醛

以与在实施例33,部分C中所述相似的方式制备，使用4-溴-2-甲基-6-(吡啶-4-基)喹啉(0.8g,2.67mmol)得到4-溴-6-(吡啶-4-基)喹啉-2-甲醛(0.65g,1.827mmol,68％收率)。LCMS(ESI)m/e 313.0[(M+H)⁺,C₁₅H₁₀BrN₂O的计算值313.0]；LC/MS保留时间(方法B):t_R＝1.18min.¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δppm 10.12(s,1H),8.78(m,2H),8.53(m,1H),8.43(s,2H),8.34(s,1H),7.95(m,2H).

部分E.N-((4-溴-6-(吡啶-4-基)喹啉-2-基)亚甲基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺

以与在实施例33,部分D中所述相似的方式制备，使用4-溴-6-(吡啶-4-基)喹啉-2-甲醛(0.65g,2.076mmol)和2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(0.252g,2.076mmol)得到N-((4-溴-6-(吡啶-4-基)喹啉-2-基)亚甲基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(0.45g,0.928mmol,45％收率)。粗产物无需纯化即可用于下一步。LCMS(ESI)m/e 416.0[(M+H)⁺,C₁₉H₁₉BrN₃OS的计算值416.0]；LC/MS保留时间(方法A):t_R＝2.21min.

部分F.N-(1-(4-溴-6-(吡啶-4-基)喹啉-2-基)-3-甲基丁基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺

在-45℃向N-((4-溴-6-(吡啶-4-基)喹啉-2-基)亚甲基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(0.3g,0.721mmol)在无水甲苯(25mL)中的搅拌溶液中逐滴加入异丁基溴化镁,2M在乙醚中的溶液(4.0mL,2.88mmol)并将反应混合物在该温度搅拌1h。将反应混合物温热至室温并小心地用饱和氯化铵(10mL)淬灭。将溶液用乙酸乙酯(2x 20mL)萃取。将有机层用水(10mL)洗涤，经硫酸钠干燥并减压浓缩。将粗产物经硅胶柱色谱纯化(15％MeOH/DCM作为洗脱剂)得到N-(1-(4-溴-6-(吡啶-4-基)喹啉-2-基)-3-甲基丁基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(0.35g,0.634mmol,88％收率)。LCMS(ESI)m/e 474.2[(M+H)⁺,C₂₃H₂₉BrN₃OS的计算值474.1]；LC/MS保留时间(方法A):t_R＝2.12min,2.23min(非对映异构体混合物).

部分G.2-甲基-N-(3-甲基-1-(6-(吡啶-4-基)-4-vinyl喹啉-2-基)丁基)丙烷-2-亚磺酰胺

向N-(1-(4-溴-6-(吡啶-4-基)喹啉-2-基)-3-甲基丁基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(0.2g,0.422mmol)和三丁基乙烯基甲锡烷(0.148mL,0.506mmol)在甲苯(15mL)中的搅拌溶液中加入Pd(PPh₃)₄(0.024g,0.021mmol)并将反应混合物用氮气净化5min。然后将反应混合物在110℃加热20h。将反应混合物冷却至室温并用EtOAc(20mL)和水(20mL)稀释。分离有机层，用盐水(20mL)洗涤，经硫酸钠干燥并减压浓缩得到2-甲基-N-(3-甲基-1-(6-(吡啶-4-基)-4-乙烯基喹啉-2-基)丁基)丙烷-2-亚磺酰胺(90mg,0.160mmol,38％收率)。LCMS(ESI)m/e 422.2[(M+H)⁺,C₂₅H₃₂N₃OS的计算值422.2]；LC/MS保留时间(方法A):t_R＝1.94min,2.13min(非对映异构体混合物).

部分H.N-(1-(4-乙基-6-(吡啶-4-基)喹啉-2-基)-3-甲基丁基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺

向2-甲基-N-(3-甲基-1-(6-(吡啶-4-基)-4-乙烯基喹啉-2-基)丁基)丙烷-2-亚磺酰胺(65mg,0.154mmol)在MeOH(10mL)中的搅拌溶液中加入钯/炭(12mg,0.113mmol)并将反应混合物在1atm氢气压力下搅拌48h。将反应混合物经硅藻土()填料过滤并将填料用MeOH洗涤。将溶液浓缩得到N-(1-(4-乙基-6-(吡啶-4-基)喹啉-2-基)-3-甲基丁基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(65mg,0.112mmol,73％收率)。其无需进一步纯化即可用于下一步。LCMS(ESI)m/e 424.2[(M+H)⁺,C₂₅H₃₄N₃OS的计算值424.2]；LC/MS保留时间(方法A):t_R＝1.94min,2.13min(非对映异构体混合物).

部分I.1-(4-乙基-6-(吡啶-4-基)喹啉-2-基)-3-甲基丁-1-胺

在室温向N-(1-(4-乙基-6-(吡啶-4-基)喹啉-2-基)-3-甲基丁基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(0.07g,0.165mmol)在MeOH(5mL)中的搅拌溶液中加入HCl在乙醚中的溶液(2M)(5mL)并搅拌4h。蒸发溶剂并将残留物经制备性HPLC纯化(0.1％HCl/水和乙腈)得到外消旋1-(4-乙基-6-(吡啶-4-基)喹啉-2-基)-3-甲基丁-1-胺盐酸盐(11mg,0.030mmol,18％收率)，其为黄色固体。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δppm 8.67(s,1H),8.29–8.50(m,5H),8.20(d,J＝8.8Hz,1H),7.62(s,1H)、4.64(d,J＝6.4Hz,1H),3.28–3.34(m,2H),1.81–1.85(m,2H),1.59(t,J＝6.8Hz,1H),1.39(t,J＝7.6Hz,3H),0.91–0.96(m,6H)；LCMS(ESI)m/e 320.2[(M+H)⁺,C₂₁H₂₆N₃的计算值320.2]；LC/MS保留时间(方法B):t_R＝1.35min；HPLC保留时间(方法A):t_R＝8.85min；HPLC保留时间(方法B):t_R＝9.79min.

实施例44

2-(1-氨基-3-甲基丁基)-8-氟-6-(吡啶-4-基)喹啉-4-甲腈

部分A.3-(4-溴-2-氟苯基氨基)-6-甲基庚-2-烯酸乙酯

向4-溴-2-氟苯胺(9.22g,48.5mmol)和6-甲基-3-氧代庚酸乙酯(9.037g,48.5mmol)在甲苯(200mL)中的溶液中加入乙酸(1.389mL,24.26mmol)和分子筛(9g)。将混合物在85℃加热24h。将混合物冷却至室温并浓缩。将粗产物经硅胶柱色谱纯化(10％-50％乙酸乙酯/己烷)得到3-((4-溴-2-氟苯基)氨基)-6-甲基庚-2-烯酸乙酯(9g,25.1mmol,52％收率)，其为淡黄色油状物。LCMS(ESI)m/e 358.00[(M+H)⁺,C₁₆H₂₂BrFNO₂的计算值358.07]；LC/MS保留时间(方法A):t_R＝2.34min,2.63min(E&Z异构体)。

部分B.6-溴-8-氟-2-异戊基喹啉-4(1H)-酮

在500mL圆底烧瓶中将苯基乙醚(40mL)和3-((4-溴-2-氟苯基)氨基)-6-甲基庚-2-烯酸乙酯(9g,25.1mmol)的混合物在250℃加热1h。将混合物冷却至室温并转移至含有己烷(200mL)的预先加热至40℃的大烧瓶中。将混合物搅拌30min，然后过滤。将滤液减压浓缩得到残留物，将其经硅胶柱色谱纯化(0-30％乙酸乙酯/石油醚)得到6-溴-8-氟-2-异戊基喹啉-4(1H)-酮(9.99g,20.47mmol,81％收率)，其为油状物。LCMS(ESI)m/e 312.0[(M+H)⁺,C₁₄H₁₆BrFNO的计算值312.0]；LC/MS保留时间(方法A):t_R＝1.69min.

部分C.8-氟-2-异戊基-6-(吡啶-4-基)喹啉-4(1H)-酮

以与在实施例31,部分D中所述相似的方式制备，使用6-溴-8-氟-2-异戊基喹啉-4(1H)-酮(0.660g,2.114mmol)和4-吡啶基硼酸(0.390g,3.17mmol)得到8-氟-2-异戊基-6-(吡啶-4-基)喹啉-4(1H)-酮(0.370g,1.192mmol,56％收率)，其为固体。LCMS(ESI)m/e 311.0[(M+H)⁺,C₁₉H₂₀FN₂O的计算值311.2]；LC/MS保留时间(方法A):t_R＝1.51min.

部分D.4-溴-8-氟-2-异戊基-6-(吡啶-4-基)喹啉

以与在实施例37,部分A中所述相似的方式制备，使用8-氟-2-异戊基-6-(吡啶-4-基)喹啉-4(1H)-酮(1.162g,3.74mmol)。将残留物经硅胶制备性TLC纯化(2％甲醇/CH₂Cl₂流动相)得到4-溴-8-氟-2-异戊基-6-(吡啶-4-基)喹啉(0.441g,1.181mmol,32％收率)，其为橙色油状物。LCMS(ESI)m/e373.0[(M+H)⁺,C₁₉H₁₉BrFN₂的计算值373.1]；LC/MS保留时间(方法E):t_R＝2.32min.

部分E.8-氟-2-异戊基-6-(吡啶-4-基)喹啉-4-甲腈

以与在实施例37,部分F中所述相似的方式制备，使用4-溴-8-氟-2-异戊基-6-(吡啶-4-基)喹啉(0.441g,1.181mmol)。将粗产物经硅胶制备性TLC纯化(3％甲醇/CH₂Cl₂)得到8-氟-2-异戊基-6-(吡啶-4-基)喹啉-4-甲腈(0.179g,0.560mmol,47％收率)，其为固体。LCMS(ESI)m/e 320.2[(M+H)⁺,C₂₀H₁₉FN₃的计算值320.2]；LC/MS保留时间(方法E):t_R＝2.12min.

部分F.2-(1-溴-3-甲基丁基)-8-氟-6-(吡啶-4-基)喹啉-4-甲腈

以与在中实施例37,部分B所述相似的方式制备，使用8-氟-2-异戊基-6-(吡啶-4-基)喹啉-4-甲腈(0.179g,0.560mmol)。将粗产物经制备性TLC纯化(2％甲醇/CH₂Cl₂流动相)得到2-(1-溴-3-甲基丁基)-8-氟-6-(吡啶-4-基)喹啉-4-甲腈(0.082g,0.206mmol,37％收率)，其为油状物。LCMS(ESI)m/e398.2[(M+H)⁺,C₂₀H₁₈BrFN₃的计算值398.1]；LC/MS保留时间(方法E):t_R＝2.20min.

部分G.2-(1-叠氮基-3-甲基丁基)-8-氟-6-(吡啶-4-基)喹啉-4-甲腈

以与在实施例37,部分C中所述相似的方式制备，使用2-(1-溴-3-甲基丁基)-8-氟-6-(吡啶-4-基)喹啉-4-甲腈(0.082g,0.206mmol)得到2-(1-叠氮基-3-甲基丁基)-8-氟-6-(吡啶-4-基)喹啉-4-甲腈(0.093g,0.145mmol,70％收率)。粗产物无需纯化即可用于下一步。LCMS(ESI)m/e 361.5[(M+H)⁺,C₂₀H₁₈FN₆的计算值361.2]；LC/MS保留时间(方法D):t_R＝0.88min.

部分H.2-(1-氨基-3-甲基丁基)-8-氟-6-(吡啶-4-基)喹啉-4-甲腈

以与在实施例37,部分D中所述相似的方式制备，使用2-(1-叠氮基-3-甲基丁基)-8-氟-6-(吡啶-4-基)喹啉-4-甲腈(0.093g,0.258mmol)。将粗产物经制备性HPLC纯化(10mM乙酸铵/水和乙腈)得到2-(1-氨基-3-甲基丁基)-8-氟-6-(吡啶-4-基)喹啉-4-甲腈(6mg,0.018mmol,7％收率)，其为淡棕色固体。¹H NMR(400MHz,CD₃OD)δppm 8.73–8.74(m,2H)8.32–8.33(m,1H)8.23(s,1H)8.13–8.16(m,1H)7.93–7.94(m,2H)4.45–4.49(m,1H)1.67–1.84(m,3H)1.01–1.05(m,6H)；LCMS(ESI)m/e 335.2[(M+H)⁺,C₂₀H₂₀FN₄的计算值335.2]；LC/MS保留时间(方法A):t_R＝1.58min；HPLC保留时间(方法E):t_R＝8.71min；HPLC保留时间(方法F):t_R＝9.24min.

实施例45

N-(4-(2-(1-羟基-3-甲基丁基)喹啉-6-基)吡啶-2-基)乙酰胺

部分A.1-(6-溴喹啉-2-基)-3-甲基丁-1-醇

在-40℃向6-溴喹啉-2-甲醛(如实施例25,部分A所述制备)(1g,4.24mmol)在无水甲苯(20mL)中的搅拌溶液中逐滴加入异丁基溴化镁,2M在乙醚中的溶液(4.23mL,8.47mmol)。然后将混合物在-40℃搅拌3h。将反应混合物用氯化铵水溶液(10mL)淬灭并用乙酸乙酯(2x 25mL)萃取。将合并的有机层经硫酸钠干燥并减压蒸发。将粗产物经柱色谱纯化得到1-(6-溴喹啉-2-基)-3-甲基丁-1-醇(300mg,1.04mmol,24％收率)。LCMS(ESI)m/e 294.0[(M+H)⁺,C₁₄H₁₇BrNO的计算值294.1]；LC/MS保留时间(方法A):t_R＝2.08min.

部分B.3-甲基-1-(6-(三甲基甲锡烷基)喹啉-2-基)丁-1-醇

如在实施例25,部分D中所述制备，使用1-(6-溴萘-2-基)-3-甲基丁-1-醇(0.2g,0.682mmol)得到3-甲基-1-(6-(三甲基甲锡烷基)喹啉-2-基)丁-1-醇(160mg,0.424mmol,62％收率)。LCMS(ESI)m/e 380.2[(M+H)⁺,C₁₇H₂₆NOSn的计算值380.1]；LC/MS保留时间(方法A):t_R＝2.49min.

部分C.N-(4-(2-(1-羟基-3-甲基丁基)喹啉-6-基)吡啶-2-基)乙酰胺

向3-甲基-1-(6-(三甲基甲锡烷基)萘-2-基)丁-1-醇(0.080g,0.212mmol)和(4-溴吡啶-2-基)乙酰胺(0.046g,0.212mmol)在无水DMF(2mL)中的搅拌溶液中加入四丁基溴化铵(0.103g,0.318mmol)、二(三苯基膦)二氯化钯(II)(0.019g,0.021mmol)、K₂CO₃(0.088g,0.636mmol)并将混合物用氮气净化5min，然后在95℃加热14h。将反应混合物用水稀释并用乙酸乙酯萃取。将合并的有机层经硫酸钠干燥并减压蒸发。将残留物经制备性HPLC纯化(0.1％TFA/水和乙腈)得到N-(4-(2-(1-羟基-3-甲基丁基)喹啉-6-基)吡啶-2-基)乙酰胺,TFA(9mg,0.026mmol,12％收率)。¹H NMR(400MHz,CD₃OD)δppm 8.98(d,J＝8.8Hz,1H)8.65(d,J＝1.6Hz,1H)8.40–8.49(m,3H)8.30(s,1H)8.04(d,J＝8.8Hz,1H)7.77–7.79(m,1H)5.21–5.24(m,1H)2.31(s,3H)2.01–2.04(m,1H)1.80–1.87(m,1H)1.69–1.75(m,1H)1.00–1.12(m,6H)；LCMS(ESI)m/e 350.2[(M+H)⁺,C₂₁H₂₄N₃O₂的计算值350.2]；LC/MS保留时间(方法A):t_R＝1.62min；HPLC保留时间(方法A):t_R＝11.25min.

实施例46

N-(2'-(1-氨基-3-甲基丁基)-4,6'-联喹啉-2-基)乙酰胺

部分A.2-氨基喹啉-4-醇

在室温向苯胺(1g,10.74mmol)在乙酸乙酯(20mL)中的搅拌溶液中加入4-甲基苯亚磺酸(1.677g,10.74mmol)。将混合物搅拌10min，在此期间形成白色固体。将固体经过滤收集并在高真空干燥以除去挥发物。然后将固体在260℃加热5min并在相同温度用2-氰基乙酸乙酯(0.607g,5.37mmol)逐滴处理。继续在260℃加热另外的90min，在此期间反应混合物变为橙色。然后将反应混合物冷却至室温并用CHCl₃(20mL)处理。将所得的混合物在50℃回流12h以溶解任何残留物。先后加入水(30mL)、乙醇(10mL)、饱和Na₂CO₃(30mL)溶液并将反应混合物剧烈搅拌1h。将得到的固体经过滤收集并减压干燥得到2-氨基喹啉-4-醇(1g,5.49mmol,51％收率)。LCMS(ESI)m/e 159.2[(M-H)^-,C₉H₇N₂O的计算值159.1]；LC/MS保留时间(方法E):t_R＝0.89min.

部分B.4-溴喹啉-2-胺

将2-氨基喹啉-4-醇(0.7g,4.37mmol)吸收于压力管并用三溴氧磷(2.51g,8.74mmol)和三溴化磷(3mL,31.8mmol)处理。将管在氮气下封盖并在150℃加热19h。然后将反应混合物冷却至室温并使用aq.NaOH(2M,10mL)碱化，并用乙酸乙酯(3x 25mL)萃取。将合并的有机层用水(20mL)洗涤，经硫酸钠干燥并减压蒸发。将得到的固体用己烷(20mL)洗涤以除去任何非极性杂质并减压干燥得到深棕色残留物，将其经硅胶柱色谱纯化(使用甲醇和氯仿的梯度)得到4-溴喹啉-2-胺(160mg,0.71mmol,16％收率)。LCMS(ESI)m/e 223.0(观察的溴谱图)[(M+H)⁺,C₉H₈BrN₂的计算值223.0]；LC/MS保留时间(方法B):t_R＝1.14min.

部分C.N-(4-溴喹啉-2-基)乙酰胺

向冷却至0℃的4-溴喹啉-2-胺(400mg,1.793mmol)在DCM(4mL)中的溶液中逐滴加入乙酰氯(211mg,2.69mmol)，然后将反应混合物在室温搅拌1h。将反应混合物用水(10mL)淬灭并用乙酸乙酯(5x 3mL)萃取。将合并的有机层用10％NaHCO₃(10mL)、随后盐水(10mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩得到N-(4-溴喹啉-2-基)乙酰胺(550mg,1.556mmol,87％收率)，其为油状物。LCMS(ESI)m/e 265.0[(M+H)⁺,C₁₁H₁₀BrN₂O的计算值265.0]；LC/MS保留时间(方法A):t_R＝1.70min。

部分D.N-(2'-(1-(1,1-二甲基乙基亚磺酰氨基)-3-甲基丁基)-4,6'-联喹啉-2-基)乙酰胺

非对映异构体混合物经中性氧化铝柱色谱拆分(使用作为流动相的乙酸乙酯和石油醚的梯度(乙酸乙酯和石油醚8:92至10:90的比例))。将拆分的非对映异构体进一步经制备性HPLC富集(10mM乙酸铵/水和乙腈)得到两个非对映异构体:异构体1:2-甲基-N-(3-甲基-1-(6-(三甲基甲锡烷基)喹啉-2-基)丁基)丙烷-2-亚磺酰胺和异构体2:2-甲基-N-(3-甲基-1-(6-(三甲基甲锡烷基)喹啉-2-基)丁基)丙烷-2-亚磺酰胺。未确定异构体的绝对立体化学。

部分E.N-(2'-(1-(1,1-二甲基乙基亚磺酰氨基)-3-甲基丁基)-4,6'-联喹啉-2-基)乙酰胺

向2-甲基-N-(3-甲基-1-(6-(三甲基甲锡烷基)喹啉-2-基)丁基)丙烷-2-亚磺酰胺(异构体-1)(100mg,0.208mmol)在DMF(4mL)中的搅拌溶液中加入K₂CO₃(86mg,0.623mmol)、四丁基溴化铵(100mg,0.312mmol)和N-(4-溴喹啉-2-基)乙酰胺(66.1mg,0.249mmol)。使氮气鼓泡经过混悬液5min。加入二(三苯基膦)二氯化钯(II)(14.58mg,0.021mmol)并使氮气鼓泡经过溶液另外的10min。然后将反应混合物在95℃加热并搅拌12h。将反应混合物冷却至室温并用水(3mL)稀释，然后用乙酸乙酯(3x 4mL)萃取。分离有机层并用水(10mL)、随后盐水(5mL)洗涤，经硫酸钠干燥并减压浓缩得到光学纯的N-(2'-(1-(1,1-二甲基乙基亚磺酰氨基)-3-甲基丁基)-[4,6'-联喹啉]-2-基)乙酰胺(95mg,0.068mmol,33％收率)，其为油状物。粗产物无需纯化即可用于下一步。LCMS(ESI)m/e 503.2[(M+H)⁺,C₂₉H₃₅N₄O₂S的计算值503.24]；LC/MS保留时间(方法E):t_R＝2.08min。未确定绝对立体化学。

部分F.N-(2'-(1-氨基-3-甲基丁基)-4,6'-联喹啉-2-基)乙酰胺

如实施例25,部分F所述由光学纯的N-(2'-(1-(1,1-二甲基乙基亚磺酰氨基)-3-甲基丁基)-[4,6'-联喹啉]-2-基)乙酰胺(70mg,0.139mmol)制备。将粗产物经制备性HPLC纯化(0.1％TFA/水和乙腈)得到N-(2'-(1-氨基-3-甲基丁基)-[4,6'-联喹啉]-2-基)乙酰胺,TFA(15mg,0.034mmol,24％收率)，其为黄色固体。¹H NMR(400MHz,CD₃OD)δppm 8.50–8.55(m,1H),8.30–8.33(m,2H),8.20(d,J＝1.6Hz,1H),8.00(dd,J＝8.4,1.6Hz,2H),7.85(d,J＝8.4Hz,1H),7.76–7.80(m,1H),7.67(d,J＝8.4Hz,1H),7.49–7.53(m,1H)、4.74–4.78(m,1H),2.29(s,3H),1.93–2.04(m,2H),1.72–1.75(m,1H),1.06–1.10(m,6H)；LCMS(ESI)m/e 399.2[(M+H)⁺,C₂₅H₂₇N₄O的计算值399.2]；LC/MS保留时间(方法E):t_R＝1.70min；HPLC保留时间(方法D):t_R＝6.60min；HPLC保留时间(方法C):t_R＝5.80min；手性HPLC(方法C1):t_R＝8.34min。未确定绝对立体化学。

实施例47

N-(2'-(1-氨基-3-甲基丁基)-4,6'-联喹啉-2-基)乙酰胺

以与在实施例46,部分D-F中所述相似的方式制备，使用2-甲基-N-(3-甲基-1-(6-(三甲基甲锡烷基)喹啉-2-基)丁基)丙烷-2-亚磺酰胺(异构体-2)(100mg,0.208mmol)。将粗产物经制备性HPLC纯化(0.1％TFA/水和乙腈)得到光学纯的N-(2'-(1-氨基-3-甲基丁基)-[4,6'-联喹啉]-2-基)乙酰胺,TFA(12mg,0.028mmol,9％收率，针对两步)，其为黄色固体。¹H NMR(400MHz,CD₃OD)δppm 8.50–8.60(m,1H),8.30–8.35(m,1H),8.21–8.26(m,2H),8.00–8.04(m,2H),7.87(d,J＝8.4Hz,1H),7.78–7.83(m,1H),7.68(d,J＝8.8Hz,1H),7.51–7.55(m,1H)、4.76–4.79(m,1H),2.31(s,3H),1.92–2.04(m,2H),1.72–1.76(m,1H),1.06–1.10(m,6H)；LCMS(ESI)m/e 399.2[(M+H)⁺,C₂₅H₂₇N₄O的计算值399.2]；LC/MS保留时间(方法E):t_R＝1.69min；HPLC保留时间(方法D):t_R＝6.66min；HPLC保留时间(方法C):t_R＝5.60min；手性HPLC(方法B2):t_R＝6.71min。未确定绝对立体化学。

实施例48

2'-(1-氨基-3-甲基丁基)-4,6'-联喹啉-2-胺

以与在实施例46中所述相似的方式使用来自步骤C的第一个洗脱的异构体制备，得到光学纯的2'-(1-氨基-3-甲基丁基)-[4,6'-联喹啉]-2-胺,TFA(15mg,0.042mmol,29％收率，针对最终步骤)，其为无色固体。¹H NMR(400MHz,CD₃OD)δppm 8.54–8.57(m,1H),8.35(d,J＝8.8Hz,1H),8.24(d,J＝1.6Hz,1H),7.98(dd,J＝8.4,2.0Hz,1H),7.80–7.89(m,1H),7.75–7.78(m,2H),7.69–7.72(m,1H),7.50–7.54(m,1H),7.13(s,1H)、4.78(t,J＝7.2Hz,1H),1.91–2.01(m,2H),1.70–1.74(m,1H),1.05–1.09(m,6H)；LCMS(ESI)m/e357.2[(M+H)⁺,C₂₃H₂₅N₄的计算值357.20]；LC/MS保留时间(方法E):t_R＝1.66min；HPLC保留时间(方法D):t_R＝5.79min；HPLC保留时间(方法A):t_R＝9.91min；手性HPLC(方法D1):t_R＝10.85min。未确定绝对立体化学。

实施例49

2'-(1-氨基-3-甲基丁基)-4,6'-联喹啉-2-胺

以与在实施例46中所述相似的方式使用来自步骤C的第二个洗脱的异构体制备，得到光学纯的2'-(1-氨基-3-甲基丁基)-[4,6'-联喹啉]-2-胺,TFA(15mg,0.040mmol,15％收率，针对最终步骤)，其为无色固体。¹H NMR(400MHz,CD₃OD)δppm 8.55–8.60(m,1H)8.36(d,J＝8.8Hz,1H)8.25(d,J＝2.0Hz,1H)7.99(dd,J＝8.4,2.0Hz,1H)7.85–7.90(m,1H)7.70–7.80(m,3H)7.51–7.55(m,1H)7.13(s,1H)4.77–4.81(m,1H)1.90–2.03(m,2H)1.69–1.76(m,1H)1.05–1.10(m,6H)；LCMS(ESI)m/e 357.2[(M+H)⁺,C₂₃H₂₅N₄的计算值357.20]；LC/MS保留时间(方法H):t_R＝1.64min；HPLC保留时间(方法A):t_R＝9.61min；HPLC保留时间(方法B):t_R＝11.28min；手性HPLC(方法B1):t_R＝8.26min.

实施例50

1-(6-(2-环丙基吡啶-4-基)喹啉-2-基)-3-甲基丁-1-胺

部分A.4-溴-2-环丙基吡啶

向2,4-二溴吡啶(0.500g,2.111mmol)在四氢呋喃(5mL)中的溶液中加入四(三苯基膦)钯(0)(0.073g,0.063mmol)。将反应混合物冷却至0℃，然后历时10分钟逐滴加入环丙基溴化锌,0.5M在THF中的溶液(12.66mL,6.33mmol)。将反应混合物在20℃搅拌16h。将反应混合物用10％NaHCO₃溶液(50mL)淬灭并用乙酸乙酯(3x 50mL)萃取。将合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩得到粗产物，将其经柱色谱纯化(流动相-乙酸乙酯:石油醚)得到4-溴-2-环丙基吡啶(100mg,0.51mmol,24％收率)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δppm 8.17(d,J＝5.2Hz,1H),7.15(d,J＝1.6Hz,1H),6.89(dd,J＝5.2,1.6Hz,1H),1.81–1.85(m,1H),1.10–1.15(m,2H),0.75–0.85(m,2H).

部分B.N-(1-(6-(2-环丙基吡啶-4-基)喹啉-2-基)-3-甲基丁基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺

向4-溴-2-环丙基吡啶(100mg,0.505mmol)在DMF(4mL)中的溶液中加入2-甲基-N-(3-甲基-1-(6-(三甲基甲锡烷基)喹啉-2-基)丁基)丙烷-2-亚磺酰胺(219mg,0.454mmol)。加入四丁基溴化铵(244mg,0.757mmol)和碳酸钾(209mg,1.515mmol)并使氮气鼓泡通过溶液5min。加入二(三苯基膦)二氯化钯(II)(35.4mg,0.050mmol)并使氮气鼓泡通过溶液5min。然后将反应混合物在95℃加热16h。将反应混合物冷却至室温并用水稀释。将水层用乙酸乙酯(3x 50mL)萃取。将合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩得到N-(1-(6-(2-环丙基吡啶-4-基)喹啉-2-基)-3-甲基丁基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(80mg,0.18mmol,40％收率)。粗产物无需纯化即可用于下一步。LCMS(ESI)m/e 436.2[(M+H)⁺,C₂₆H₃₄N₃OS的计算值436.23]；LC/MS保留时间(方法A):t_R＝2.23min.

部分C.1-(6-(2-环丙基吡啶-4-基)喹啉-2-基)-3-甲基丁-1-胺

向冷却至0℃的N-(1-(6-(2-环丙基吡啶-4-基)喹啉-2-基)-3-甲基丁基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(80mg,0.184mmol)在二氯甲烷(2mL)中的溶液中逐滴加入4M HCl在二噁烷中的溶液(2mL,8.00mmol)。将反应混合物在0℃搅拌5min，然后温热至室温并搅拌2h。将反应混合物减压浓缩。向残留物中加入水(5mL)。将水层用乙酸乙酯(3x 15mL)洗涤。将水层减压浓缩。将粗产物经制备性HPLC纯化(0.1％TFA/水和乙腈)得到1-(6-(2-环丙基吡啶-4-基)喹啉-2-基)-3-甲基丁-1-胺,TFA(10mg,0.029mmol,16％收率)，其为灰白色固体。¹H NMR(400MHz,CD₃OD)δppm 8.56–8.59(m,3H),8.33–8.34(m,2H),8.03(d,J＝1.2Hz,1H),7.69(d,J＝8.8Hz,1H),7.49(d,J＝6.0,1.6Hz,1H)、4.76(t,J＝7.6Hz,1H),2.27–2.32(m,1H),1.89–2.00(m,2H),1.69–1.73(m,1H),1.40–1.45(m,2H),1.16–1.21(m,2H),0.04–0.08(m,6H)；LCMS(ESI)m/e 332.2[(M+H)⁺,C₂₂H₂₆N₃的计算值332.20]；LC/MS保留时间(方法A):t_R＝1.64min；HPLC保留时间(方法C):t_R＝4.74min；HPLC保留时间(方法D):t_R＝5.84min.

方法

AAK1激酶测定

在U型底384孔板中进行测定。最终测定体积为30μl，其如下制备：在测定缓冲液(10mM Tris-HCL pH 7.4、10mM MgCl₂、0.01％Tween-20和1.0mM DTT)中加入15μl酶和底物(荧光化肽(5-FAM)-Aha-KEEQSQITSQVTGQIGWR-NH₂和ATP)和测试化合物。通过组合在细菌中表达的GST-Xa-hAAK1与底物和测试化合物来引发反应。将反应混合物在室温温育3小时并通过向各样品中加入60μ1 35mM EDTA缓冲液来终止反应。在Caliper LabChip 3000(Caliper,Hopkinton,MA)上通过电泳分离荧光底物与磷酸化产物来分析反应混合物。通过与经EDTA淬灭的对照反应(100％抑制)和仅含媒介物的反应(0％抑制)比较来计算抑制数据。测定中试剂的终浓度为：ATP 22μM；(5-FAM)-Aha-KEEQSQITSQVTGQIGWR-NH₂ 1.5μM；GST-Xa-hAAKl 3.5nM；及DMSO 1.6％。得到剂量响应曲线以确定抑制50％激酶活性所需的浓度(IC₅₀)。将化合物以10mM溶于二甲基亚砜(DMSO)中并在11个浓度进行评价。通过非线性回归分析得出IC₅₀值。

基于HEK281细胞的测定

将HEK293F细胞在含DMEM(Gibco,目录号11965)、10％FBS(SAFC Biosciences,目录号12103C)和1×GPS(谷氨酸、青霉素和链霉素)的培养基中培养。在第一天，将细胞涂布于10cm培养皿上以使其在转染时为～80％融合。在转染时在10cm培养皿中有约1200万个细胞。在第二天，用48μg DNA和144μl Lipofectamine 2000(Invitrogen,目录号11668-019)转染各培养皿。DNA由含有3μg AAK1/HA/pIRES(全长人类,NCBI保存号NP_055726.2)、45μg Flag/AP2MI/pcDNA(全长人类)和1.5ml OPTI-MEM的混合物组成(每10cm培养皿)。Lipofectamine 2000由含144μl Lipofectamine 2000和1.5ml OPTI-MEM的混合物构成(每10cm培养皿)。将各混合物转移至单独的15ml管中并在室温温育5分钟，然后合并两种混合物并在室温温育20分钟。然后从各10cm培养板中吸出生长培养基并替换为10ml DMEM+10％FBS(无GPS)。最后，向各10cm培养皿中加入3ml DNA/Lipofectamine混合物并轻柔地混合，接着将培养板在37℃和5％CO₂温育过夜。

在第三天，用100％DMSO以1000×终浓度稀释化合物，然后进行3倍连续稀释以获得总共5个测试浓度。每10cm培养皿测试四种化合物。然后将1μl各化合物稀释液吸移至深孔96孔板中，接着向各孔中加入500μ1DMEM+0.5％FBS以获得2×终浓度的各化合物。通过简单吸取(此时HEK293细胞易于脱离培养板)将细胞重新悬浮于10cm培养皿中，然后转移至50ml锥形管中并通过在1000rpm离心5分钟来沉降。然后将细胞团块重新悬浮于2.75ml DMEM+0.5％FBS中(每10cm培养皿)且将100μl细胞悬浮液转移至96孔TC板的各孔中。最后将100μl用DMEM+0.5％FBS稀释的2×化合物添加至含细胞悬浮液的孔中以获得1×终浓度。然后将培养板在37℃和5％CO₂温育3小时，接着将细胞悬浮液自各孔转移至12管PCR条中。将PCR条在吸头置放架中以1000rpm旋转5分钟以使细胞结块，然后通过吸取但不扰动细胞团块来移除培养基。

为了准备免疫印迹分析(Western Blot analysis)，将细胞团块重新悬浮于40μl 1×LDS-PAGE样品缓冲液(Invitrogen,目录号NP0008)+2×Halt磷酸酶和蛋白酶抑制剂混合物(Thermo Scientific,目录号1861284)中，接着分别用设定在第5档的微量管超声波仪(microtip sonicator)进行超声处理8-10秒。向各样品中加入5μ1 10×NuPage样品还原剂(含50mM DTT)，接着在PCR仪上在70℃热变性10分钟。每种样品总共取10μl加载于4-20％Tris-甘氨酸Criterion 26孔凝胶(Biorad,目录号345-0034)的各泳道中以获得磷酸化mu2印迹且在4-12％Bis-Tris(+MES缓冲液)NuPAGE 26孔凝胶(Invitrogen,目录号WG1403BX10)的每泳道中加载10μl以获得mu2印迹。为了进行对照，将2ng磷酸化mu2或20ng mu2/Flag蛋白加载于各凝胶的最末孔中。SDS-PAGE后，使用iBlot将各凝胶上的样品转移至PVDF膜上并将膜在TBST+5％牛奶中阻断1小时，接着用TBST洗涤3次历时5-10分钟。用含兔抗磷酸化mu2(1:5000；由New England Peptide制造且在Lexicon上进行亲和性纯化的兔多克隆抗体)的TBST+5％BSA探测Criterion凝胶，而用含小鼠抗Flag(1:500；Sigma,目录号F1804)的TBST+5％牛奶探测NuPAGE凝胶并在4℃在振荡器上将这些初级抗体温育过夜。

在第四天，用TBST洗涤免疫印迹3次历时5-10分钟，在室温用含抗兔-HRP(1:2000；BioRad,目录号170-6515)或抗小鼠-HRP(1:2000；Biorad,目录号170-6516)的TBST+5％牛奶探测1小时，用TBST洗涤3次历时10分钟并用ECL试剂(GE Healthcare,目录号RPN2132)在Versadoc上显影。最后，安设照相机以每30秒进行拍照持续10分钟且保存各印迹的无饱和信号的最佳影像(当信号饱和时，条带将为高亮红色)。对各条带进行体积分析以获得密度值。各样品的抑制百分比如下计算：首先以总Mu2表达水平进行归一化，然后与0％和100％对照比较。然后使用Excel拟合软件计算IC₅₀值。所选的化合物的功能性效能以IC₅₀范围列于表2，其中a-＝1-10nM；b＝11-100nM；且c＝101-2500nM.

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该技术已申请专利。仅供学习研究，如用于商业用途，请联系技术所有人。
技术研发人员：R·A·哈茨;V·T·阿乌杰;J·E·玛科;J·J·布朗森;B·达斯古普塔;C·D·迪齐尔巴;S·J·纳拉;M·S·卡拉索鲁武;
技术所有人：百时美施贵宝公司;
我是此专利的发明人

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