的纯化方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及药物的分离纯化领域，尤其涉及一种维生素D2的纯化方法。
【背景技术】
[0002]维生素D2 (简称VD2),亦称骨化醇、麦角钙化醇，化学名称为9，10-开环麦角甾-5，7，10 (19 )，22-四烯-3 β -醇，分子式C28H44O,分子量396.66。VD2为无色针状结晶或白色结晶性粉末，不易溶于水，易溶于乙醇、丙酮和乙醚，极易溶于氯仿。无臭，无味，性质稳定，密闭贮藏不易变质，暴露空气或阳光照射易变质，遇光、热及氧气十分敏感，可生成多种化学性质相近的异构体。
[0003]VD2与VD3结构相似、功能相同。它们主要功能是调节钙、磷代谢，促进小肠对钙、磷的吸收与利用。近几年的研究又发现了维生紊D的非钙作用，即抗炎、抑制癌细胞增殖、调节血压、调节免疫系统等。由于维生素D3，有毒性，在治疗过程中易引起高钙血、高钙尿，使用中受到了限制。VD2相对较安全、在治疗中毒副作用小。VD2可广泛添加于食品、饮料、动物饲料和药品中。
[0004]对维生素D2的粗品纯化一般采用常规柱层析、重结晶等方法进行精制，但是通过传统分离方法获得，收率低，步骤多，操作繁琐，效益低，可重复性差。
【发明内容】
[0005]本发明的目的是提供一种维生素D2的高效液相色谱系统纯化方法。
[0006]本发明为实现上述发明目的采用的技术方案如下:一种维生素D2的纯化方法，其特征在于以正相Si为固定相，用正己烷、正戊醇为流动相，用半制备型高效液相色谱分离纯化系统制备出维生素D2，包括以下步骤:
(1)将维生素D2粗品溶于流动相中，浓度为:1(T500mg/ml ；
(2)用半制备型高效液相色谱分离纯化系统制备维生素D2；
本发明具有以下技术效果:本发明采用半制备型高效液相色谱系统，制备出高纯度的维生素D2，工艺简单，产品质量稳定，可回收利用，实现高效生产。
[0007]【具体实施方式】:
实施例1
样品用流动相溶解，浓度为100 mg/ml，采用半制备型高效液相色谱分离纯化系统进行制备，色谱柱尺寸为Φ 10 X 250 mm，正相Si填料，粒径为10 um，上样量200 mg，流动相正己烷和正戊醇，等度洗脱，流动相中两种成分的比例，正己烷/正戊醇=99.5/0.5。采用的紫外光度检测器的检测波长为254nm，收集维生素D2,经HPLC分析纯度彡98.0%。
[0008]实施例2
样品用流动相溶解，浓度为100 mg/ml，采用半制备型高效液相色谱分离纯化系统进行制备，色谱柱尺寸为Φ 10 X 250 mm，正相Si填料，粒径为10 um，上样量150 mg，流动相正己烷和正戊醇，等度洗脱，流动相中两种成分的比例，正己烷/正戊醇=99.5/0.5。采用的紫外光度检测器的检测波长为254nm，收集维生素D2,经HPLC分析纯度彡99.0%。
[0009]实施例3
样品用流动相溶解，浓度为100 mg/ml，采用半制备型高效液相色谱分离纯化系统进行制备，色谱柱尺寸为Φ10Χ250 mm，正相Si填料，粒径为9 um，上样量200 mg，流动相正己烷和正戊醇，等度洗脱，流动相中两种成分的比例，正己烷/正戊醇=99.5/0.5。采用的紫外光度检测器的检测波长为254nm，收集维生素D2,经HPLC分析纯度彡99.0%。
【主权项】
1.一种维生素D2的纯化方法，包括以下步骤: (1)将维生素D2粗品溶于流动相中，浓度为:1(T500mg/ml ； (2)用半制备型高效液相色谱分离纯化系统制备维生素D2。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的步骤(2)中的用半制备型高效液相色谱分离纯化系统制备维生素D2,具体方法为:以正己烧、正戊醇为流动相,色谱柱填料为正相Si填料，填料粒度5?100 um，系统温度为O?40°C。
3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述的洗脱为等度洗脱。
【专利摘要】本发明公开了一种纯化维生素D2的方法。本发明采用半制备型高效液相色谱分离纯化系统，以正相Si为填料，以正己烷、正戊醇为流动相。采用本发明制备维生素D2，操作简单，实验步骤少，成本低，周期短，纯度可达98.0%以上。
【IPC分类】C07C401-00
【公开号】CN104672120
【申请号】CN201310619421
【发明人】金新亮, 陈锐, 初新
【申请人】江苏汉邦科技有限公司
【公开日】2015年6月3日
【申请日】2013年11月29日