iO2纳米粒子作为漆酶介体对靛胭脂去除效果和重复使用变化图。
【具体实施方式】
[0014] 以下通过实施例对本发明的上述内容做进一步详细说明，但不应该将此理解为本 发明上述主题的范围仅限于以下的实施例，凡基于本发明上述内容实现的技术均属于本发 明的范围。
[0015] 实施例1漆酶介体ABTS-Si02m米粒子的制备 (1) 称取0. 548g ABTS溶于IOmL无水甲醇中，再加入0. 224g叔丁醇钾，超声分散处理 至分散均匀，搅拌反应2h，过滤后用无水甲醇洗涤3次，然后在45°C烘箱中干燥除去甲醇， 得到灰白色的2, 2-联氮-二（3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸）二钾盐； (2) 称取0. 524g三苯基磷溶于20mL无水乙腈中，在冰浴的条件下小心滴加约104μL溴 至溶液保持浅黄色，再加入少量的三苯基磷，使溶液变成无色，得到二溴三苯基膦； (3) 在步骤（2)制得的二漠二苯基勝中加入步骤（1)制得的2, 2_联氣-二（3_乙基-苯 并噻唑-6-磺酸）二钾盐，搅拌反应2h，得到2, 2-联氮-二（3-乙基-苯并噻唑-6-磺酰 漠）； (4) 在步骤（3)的反应液中加入400mg表面氨基化的Si02m米粒子(购买于南京先丰 纳米材料科技有限公司）和1.0 mL三乙胺，继续搅拌反应24-48h，离心收集沉淀，所得沉淀 分别用甲醇和水洗涤5次，洗涤后的沉淀物分散在蒸馏水中于4°C低温保存备用。
[0016] 图1是本实施例制得的漆酶介体ABTS-SiO^米粒子的扫描电镜图，由图可知，所 得到的纳米粒子粒径在30-50纳米左右。
[0017] 图2是本实施例制得的漆酶介体ABTS-SiO^米粒子的红外光谱图，由图可知，纳 米粒子修饰前后红外光谱明显发生变化，表明纳米粒子表面基团发生改变。
[0018] 实施例2 ABTS-SiO2纳米粒子作为漆酶介体的再生使用 (1) 取漆酶介体ABTS-Si02m米粒子40mg加入到2mL的pH=4. 5的醋酸缓冲溶液中，再 加入2. OU的漆酶，振荡反应至完全，至漆酶介体ABTS-Si02m米粒子变绿； (2) 在步骤（1)的酶催化反应完全后的混合液中，加入摩尔浓度为0. 2mol/L抗坏血酸 30uL，搅拌反应至漆酶介体ABTS-SiO2纳米粒子从绿色变成浅黄色，然后将反应混合液离 心，倒掉上清液，随后蒸馏水洗涤沉淀物5次，回收得到的漆酶介体ABTS-SiO2纳米粒子进 一步重复使用。
[0019] 实施例3 ABTS-SiO2纳米粒子作为漆酶介体对染料的去除应用 (1) 取漆酶介体ABTS-Si02m米粒子40mg，加入到2mL的pH=4. 5的醋酸缓冲液中，再 加入0. 5U的漆酶，然后加入0. 04mg染料靛胭脂，振荡反应至完全，蓝色溶液变成无色； (2) 在步骤（1)的酶催化反应完全后的混合液中加入摩尔浓度为0. 2mol/L的抗坏血酸 30uL，搅拌反应lmin，将反应混合液离心，倒掉上清液，随后蒸馏水洗涤沉淀物5次，回收得 到的漆酶介体ABTS-SiO2纳米粒子重复上述循环使用。其对靛胭脂去除效果和重复使用变 化图见图3,由图可知循环使用4次后，仍然保持对AB有较高的去除作用效果。
[0020] 使用漆酶介体ABTS-SiO2纳米粒子和漆酶混合物来去除有机染料靛胭脂溶液的测 试结果表明，漆酶介体ABTS-SiO2纳米粒子可以有效地作为漆酶介体使用，能完成对有机染 料靛胭脂的催化降解作用，同时使用后的漆酶介体ABTS-SiO2纳米粒子能再生重复使用。
[0021] 以上实施例描述了本发明的基本原理、主要特征及优点，本行业的技术人员应该 了解，本发明不受上述实施例的限制，上述实施例和说明书中描述的只是说明本发明的原 理，在不脱离本发明原理的范围下，本发明还会有各种变化和改进，这些变化和改进均落入 本发明保护的范围内。
【主权项】
1. 一种漆酶介体ABTS-SiO2纳米粒子的制备方法，其特征在于包括W下步骤；（1)将 ABTS溶于无水甲醇中，再加入叔了醇钟，超声分散均匀后揽拌反应1-化，过滤后用无水甲 醇洗漆多次，然后干燥除去甲醇，得到灰白色的2, 2-联氮-二（3-己基-苯并唾挫-6-横 酸）二钟盐；（2)将=苯基磯溶于无水己膳中并在冰浴条件下滴加漠至溶液呈浅黄色，再加 入=苯基磯使溶液变成无色，得到二漠=苯基麟；（3)在步骤（2)制得的二漠=苯基麟中加 入步骤（1)制得的2, 2-联氮-二（3-己基-苯并唾挫-6-横酸）二钟盐，揽拌反应1-化， 得到2, 2-联氮-二（3-己基-苯并唾挫-6-横酷漠）；（4)在步骤（3)的反应液中加入表 面氨基化的Si化纳米粒子和=己胺，继续揽拌反应完全后，离屯、收集沉淀，所得沉淀分别用 甲醇和水多次洗漆后得到漆酶介体ABTS-Si化纳米粒子。2. -种权利要求1所述的漆酶介体ABTS-Si〇2纳米粒子的制备方法制得的在Si〇2纳 米粒子表面共价接枝ABTS的漆酶介体ABTS-Si化纳米粒子，其具有如下结构；3. 权利要求2所述的漆酶介体ABTS-Si化纳米粒子在去除水体中污染物的应用，其 特征在于具体方法为；（0取制得的漆酶介体ABTS-Si〇2纳米粒子加入到抑=4.5的醋酸 缓冲溶液中，再加入漆酶，然后加入含有污染物的水体，振荡反应至完全；（2)在步骤（1) 的酶催化反应完全后，加入抗坏血酸，揽拌反应至ABTS-Si〇2纳米粒子从绿色变成浅黄色， 然后将反应混合液离屯、，倒掉上清液，随后用蒸馈水洗漆沉淀物多次，回收得到的漆酶介体 ABTS-Si化纳米粒子进一步重复使用。4. 根据权利要求3所述的漆酶介体ABTS-Si化纳米粒子在去除水体中污染物的应用， 其特征在于；所述的污染物为染料、立氯苯酪或苯酪。
【专利摘要】本发明公开了一种漆酶介体ABTS-SiO2纳米粒子及其制备方法和应用，属于生物技术、纳米材料和环境治理技术领域。本发明的技术方案要点为：将ABTS修饰到SiO2纳米粒子上制得漆酶介体ABTS-SiO2纳米粒子，制得的ABTS-SiO2纳米粒子作为漆酶介体在酶催化反应完成后，用还原性物质与氧化的ABTS发生还原反应使其还原，然后通过离心回收漆酶介体ABTS-SiO2纳米粒子，从而实现漆酶介体ABTS-SiO2纳米粒子重复循环使用。本发明制备方法简单、成本低廉、重复性好，也能够很好地满足大量生产的要求，在环境污染控制、化学合成、造纸、漂白和能源等领域具有广泛的应用前景。
【IPC分类】C12N11/14, C02F3/34, C02F101/34
【公开号】CN104928276
【申请号】CN201510288414
【发明人】黄娟, 刘友勋, 周鑫平, 付云, 李翠萍, 闫明阳, 李长正
【申请人】新乡医学院
【公开日】2015年9月23日
【申请日】2015年6月1日