>[00巧](2)酶解溫度25-35°C，P册.3-8. 7,条件溫和，利于操作。
[0026] (3)酶固定化后酶活稳定，转化时间短，转化率高，可达99%，且可连续使用，节约成 本。
[0027] (4)终产品总收率达85%，且纯度高，杂质少，外标含量可达98. 5%W上，具体数据 见下表。
【附图说明】
[0028] 下面结合附图和【具体实施方式】对本发明作进一步详细的说明； 图1是本发明的工艺流程简图； 图2是鸟氨酸与精氨酸对照品高效液相图谱； 图3是实施例1步骤（2)酶解反应中k精氨酸转化率达99%时的高效液相图谱。
【具体实施方式】
[0029] 本发明的实施例仅用来说明实现本发明的技术方案，运些实施方式并不对本发明构 成进一步限定。本领域技术人员根据现有知识对本发明等同替换或相应的逻辑改进，均 属于本发明的范围。W下实施例中，采用的高效液相色谱条件：色谱柱为氨基柱，5ym 4. 6X250mm;流动相：乙腊-0.Imol/L憐酸二氨钟缓冲液（60 : 40);流速：1.Oml/min;进样 体积为20y1 ;检测波长：205nm;柱溫：室溫。
[0030] 实施例1 (1)固定化酶的制备：超大孔聚苯乙締微球，加去离子水洗涂后过滤作为载体；取k精 氨酸酶0. 08g，加去离子水溶解至40ml，加入胞2册04-胞&口04缓冲溶液20ml，揽拌升溫至 36°C±TC，加入5.Og载体，揽拌18小时，过滤并用去离子水洗涂，即得固定化酶，4°C~ 8°C冷藏保存；超大孔聚苯乙締微球平均粒径为100微米，孔隙率60%，比表面积34m2/g，交 联度12% ;胞2册04-胞&口04缓冲溶液的浓度为0.lmol/1，抑9. 0。
[0031] (2)配料、酶解反应： 配料：将k精氨酸20g、硫酸儘40mg加入到60ml去离子水中，揽拌溶解，加6M盐酸调 节抑值至8. 5,补加去离子水使溶液体积为100ml，然后加入固定化酶4邑。
[0032] 酶解反应：控制酶解反应溫度在30°C，及一定的揽拌，开始酶解反应，将k精氨 酸水溶液转化成k鸟氨酸和尿素，化取样检测，此后每Ih取样检测k精氨酸的残留，至 k精氨酸转化率大于99%时停止反应。转化率的检测按上述的高效液相色谱法进行，图2 为鸟氨酸与精氨酸对照品高效液相图谱，图2中3. 794min为鸟氨酸的峰，5. 545min为精氨 酸的峰山-精氨酸转化率达99%时的高效液相图谱见图3所示，图3中3. 818min为鸟氨酸 的峰，5. 519min为精氨酸的峰。反应结束后，过滤去除固定化酶（回收的固定化酶用去离子 水洗涂过滤后可直接投入下一个批次的酶解反应中使用，或在4°C~8°C冷藏保存、备用）， 得到转化液。
[0033] (3)纯化：转化液分别通过732型强酸性阳离子交换树脂、717型强碱性阴离子交 换树脂吸附、洗脱，去除杂离子和尿素，得到游离k鸟氨酸溶液。
[0034] (4)成盐反应：游离心鸟氨酸溶液中加入15gk天口冬氨酸加热至40°C反应化， 真空浓缩至浓缩液中k天口冬氨酸-k鸟氨酸含量300mg/ml时，加入767型活性炭2g在 45°C下脱色30min，过滤后滤液保持40°C滴加甲醇进行结晶，析晶完全后冷至室溫，过滤并 回收母液得湿品，在60°C干燥5-化得产品。
[00对 实施例2 (1)固定化酶的制备：超大孔聚苯乙締微球，加去离子水洗涂后过滤作为载体；取k精 氨酸酶0. 05g，加去离子水溶解至40ml，加入胞2册04-胞&口04缓冲溶液20ml，揽拌升溫至 36°C±TC,加入5.Og载体，揽拌20小时，过滤并用去离子水洗涂，即得固定化酶，4°C~ 8°C冷藏保存；超大孔聚苯乙締微球平均粒径为200微米，孔隙率50%，比表面积40m2/g，交 联度15% ;化2册04-胞&口04缓冲溶液的浓度为0. 05mol/l，抑8. 5。
[0036] (2)配料、酶解反应： 配料：将k精氨酸15g、硫酸儘22. 5mg加入到60ml去离子水中，揽拌溶解，加6M盐酸 调节抑值至8. 5,补加去离子水使溶液体积为100ml，然后加入固定化酶4邑。
[0037]酶解反应：控制酶解反应溫度在30°C，及一定的揽拌，开始酶解反应，将k精氨酸 水溶液转化成k鸟氨酸和尿素，化取样检测，此后每Ih取样检测k精氨酸的残留，至k精 氨酸转化率大于99%时停止反应。转化率的检测按上述的高效液相色谱法进行。反应结束 后，过滤去除固定化酶，得到转化液。
[0038] (3)纯化：转化液分别通过732型强酸性阳离子交换树脂、717型强碱性阴离子交 换树脂吸附、洗脱，去除杂离子和尿素，得到游离k鸟氨酸溶液。
[0039] (4)成盐反应：游离k鸟氨酸溶液中加入11. 5gk天口冬氨酸加热至40°C反应 池，真空浓缩至浓缩液中k天口冬氨酸-k鸟氨酸含量300mg/ml时，加入767型活性炭2g 在35°C下脱色30min，过滤后滤液保持40°C滴加甲醇进行结晶，析晶完全后冷至室溫，过滤 并回收母液得湿品，在60°C干燥5-化得产品。
[0040] 实施例3 (1)固定化酶的制备：超大孔聚苯乙締微球，加去离子水洗涂后过滤作为载体；取k精 氨酸酶0. 06g，加去离子水溶解至40ml，加入胞2册04-胞&口04缓冲溶液20ml，揽拌升溫至 36°C±TC,加入5.Og载体，揽拌22小时，过滤并用去离子水洗涂，即得固定化酶，4°C~ 8°C冷藏保存；超大孔聚苯乙締微球平均粒径为100微米，孔隙率60%，比表面积34m2/g，交 联度12% ;胞2册04-胞&?04缓冲溶液的浓度为0. 2mol/L，P册.8。
[0041] (2 )配料、酶解反应： 配料：将k精氨酸lOg、硫酸儘30mg加入到60ml去离子水中，揽拌溶解，加6M盐酸调 节抑值至8. 5,补加去离子水使溶液体积为100ml，然后加入固定化酶4邑。
[0042] 酶解反应：控制酶解反应溫度在30°C，及一定的揽拌，开始酶解反应，将k精氨酸 水溶液转化成k鸟氨酸和尿素，化取样检测，此后每Ih取样检测k精氨酸的残留，至k精 氨酸转化率大于99%时停止反应。转化率的检测按上述的高效液相色谱法进行。反应结束 后，过滤去除固定化酶，得到转化液。
[0043] (3)纯化：转化液分别通过732型强酸性阳离子交换树脂、717型强碱性阴离子交 换树脂吸附、洗脱，去除杂离子和尿素，得到游离k鸟氨酸溶液。
[0044] (4)成盐反应：游离心鸟氨酸溶液中加入7.6gk天口冬氨酸加热至40°C反应 3h，真空浓缩至浓缩液中k天口冬氨酸-k鸟氨酸含量300mg/ml时，加入767型活性炭2g 在40°C下脱色30min，过滤后滤液保持40°C滴加甲醇进行结晶，析晶完全后冷至室溫，过滤 并回收母液得湿品，在60°C干燥5-化得产品。
[004引实施例4 (1)固定化酶的制备：超大孔聚苯乙締微球，加去离子水洗涂后过滤作为载体；取k精 氨酸酶0. 07g，加去离子水溶解至40ml，加入胞2册04-胞&口04缓冲溶液20ml，揽拌升溫至 36°C±TC，加入5.Og载体，揽拌19小时，过滤并用去离子水洗涂，即得固定化酶，4°C~ 8°C冷藏保存；超大孔聚苯乙締微球平均粒径为100微米，孔隙率60%，比表面积34m2/g，交 联度12% ;胞2册04-化H2PO4缓冲溶液的浓度为0. 15mol/L，抑9. 0。
[0046] (2 )配料、酶解反应： 配料：将k精氨酸20g、醋酸儘60mg加入到60ml去离子水中，揽拌溶解，加2M硫酸调 节抑值至8. 3,补加去离子水使溶液体积为100ml，然后加入固定化酶4邑。
[0047]酶解反应：控制酶解反应溫度在35°C，及一定的揽拌，开始酶解反应，将k精氨酸 水溶液转化成k鸟氨酸和尿素，化取样检测，此后每Ih取样检测k精氨酸的残留，至k精 氨酸转化率大于99%时停止反应。转化率的检测按上述的高效液相色谱法进行。反应结束 后，过滤去除固定化酶，得到转化液。
[0048] (3)纯化：转化液分别通过001X7型强酸性阳离子交换树脂、201X7型强碱性阴 离子交换树脂吸附、洗脱，去除杂离子和尿素，得到游离k鸟氨酸溶液。
[0049] (4)成盐反应：游离心鸟氨酸溶液中加入15gk天口冬氨酸