制备用于治疗心血管疾病的药物及其中使用的中间体的方法

制备用于治疗心血管疾病的药物及其中使用的中间体的方法
【专利说明】制备用于治疗心血管疾病的药物及其中使用的中间体的方法
[0001] 本发明设及制备可用于合成多己胺-β-径化酶的周围选择性抑制剂的中间体的改 进方法。本发明还设及在该方法中使用的新化合物。
[0002] (R)-5-(2-氨乙基)-1-(6,8-二氣色满-3-基)-1,3-二氨咪挫-2-硫酬盐酸盐(下面 式1化合物）是DW1的有效的、非毒性的和周围选择性抑制剂，其可用于治疗某些屯、血管疾 病。W02004/033447公开了化合物1及其制备方法。
[0003]
[0004] W02004/033447中公开的方法设及(R) -6，8-二氣色满-3-基胺盐酸盐（（R) -6，8-二 氣色满-3-基胺的结构如下面化合物QA所示）、[4-(叔下基二甲基娃烷基氧基）-3-氧代下 基]氨基甲酸叔下基醋和硫氯酸钟的反应。
[0005]
[0006] (R)-6,8-二氣色满-3-基胺(化合物QA)是合成化合物1的关键中间体。附接胺的碳 原子处的立体化学引起化合物1的立体化学，所W有利的是化合物QA尽可能W纯对映体的 形式存在。换言之，化合物QA的(R)-对映体应是主要的，很少或不存在(S)-对映体。因此，用 于制备化合物QA的方法将有利地生产尽可能高对映体过量值(enantiomeric excess,ee) 的化合物QA。
[0007] 现在已经发现制备例如式QA化合物的有利方法。在一方面，运些方法设及生物转 化步骤。在另一方面，运些方法设及化学转化。运些方法也可用在可用于多己胺-β-径化酶 的其它周围选择性抑制剂的生产中的相似前体的制备中。
[000引 W02008/136695公开了式ΥΑ化合物、其（R)-对映体或（S)-对映体、（R)-对映体和 (S)-对映体的混合物或其药学上可接受的盐。
[0009]
[0010] 已经发现式ΥΑ化合物的(R)-对映体是高效能且显著降低大脑进入的有效多己胺- β-径化酶抑制剂。
[0011] 如在W02008/136695中公开，式YA化合物可在还原性烷基化条件下通过式1化合物 和苯甲醒反应来制备。具体地，（R)-5-(2-氨乙基）-1-(6,8-二氣色满-3-基)-1,3-二氨咪 挫-2-硫酬和苯甲醒可在溶剂或溶剂的混合物和还原剂例如氯基棚氨化钢或Ξ乙酷氧基棚 氨化钢的存在下进行反应。

【发明内容】

[0012] 根据本发明的一个方面，提供了式N化合物的（R)-对映体或（S)-对映体或者(R)- 对映体和(S)-对映体的混合物，
[0013]
[0014] 其中：X是C出、氧或硫;Ri、R2和R3相同或不同并且表示氨、面素、烷基、烷氧基、径 基、硝基、烷基幾基氨基、烷基氨基或二烷基氨基，其中：术语烷基是指含有一个至六个碳原 子的直链或支链的控链，可选地被芳基、烷氧基、面素、烧氧幾基或径基幾基取代;术语芳基 是指苯基或糞基，可选地被烷氧基、面素或硝基取代;术语面素是指氣、氯、漠或舰。
[0015] X可W是氧。可选地，Ri、R2和R3中的一个为氨，其它是面素；适合地为氣、氯、漠或 舰。优选地，在芳香环的5-位和7-位的部分均为氨并且在6-位和8-位的基团均为面素;适合 地均为氣、氯、漠或舰。优选地，面素是氣或漠；最优选地是氣（其是本文公开的式NA化合 物）。优选地，化合物的形式是(R)-对映体。
[0016]优选地:X是0;在芳香环的5-位和7-位的部分为氨并且在6-位和8-位的基团均为 氣、氯、漠或舰;化合物的形式是(R)-对映体。
[0017]优选地，式N化合物的形式是(R)-对映体且具有式R-NA:
[001 引
[0019] 式N化合物可由相应的式Μ化合物制备：
[0020]
[0021 ]其中，X、Ri、化和R3具有如上给出的相同含义。
[0022] X可W是氧。可选地，Ri、R2和R3中的一个为氨，其它是面素；适合地为氣、氯、漠或 舰。优选地，在芳香环的5-位和7-位的部分均为氨并且在6-位和8-位的基团均为面素;适合 地为氣、氯、漠或舰。优选地，面素是氣或漠;最优选地是氣(其是本文公开的式MA化合物）。
[0023] 优选地:X是0;在芳香环的5-位和7-位的部分为氨并且在6-位和8-位的基团均为 氣、漠或舰;最优选地在6-位和8-位的基团均为氣(运是本文公开的化合物M)。
[0024] 在上述方法中使用的式Μ的优选化合物是式MA化合物，其构成本发明的另一个方 面：
[0025]
[0026] 有利地，化合物Μ和Ν是可在各种方法中用作起始材料或中间体的通用产品。
[0027] 根据本发明的一个方面，提供了如上所述的化合物Μ在制备式Q化合物、化合物Q的 单独的（R)-对映体或单独的（S)-对映体或者化合物Q的（R)-对映体和（S)-对映体的混合 物、或其盐的方法中的用途。
[002引
[0029] 其中，X、Ri、R2和R3如上定义。X可W是氧。可选地，Ri、R2和R3中的一个为氨，其它是 面素;适合地为氣、氯、漠或舰。优选地，在芳香环的5-位和7-位的部分均为氨并且在6-位和 8-位的基团均为面素;适合地均为氣、氯、漠或舰。优选地，面素是氣或漠;最优选地是氣。
[0030] 优选地，化合物Μ可用于制备化合物Q的（R)-对映体。优选地，化合物MA可用于制备 化合物QA或其盐：
[0031]
[0032] 式Q化合物可用于使用本文公开的任何方法或现有技术中已知的任何方法例如使 用W02004/033447或W02008/136695中公开的方法来制备式1和式ΥΑ化合物。
[0033] 化合物Q的适合的盐包括レ酒石酸盐、盐酸盐、甲横酸盐、甲苯横酸盐、Ξ氣乙酸 盐、巧樣酸盐、乙醇酸盐、草酸盐和乙酸盐。优选的盐是心酒石酸盐。适合地，化合物QA可W W游离碱形式或作为其心酒石酸盐来制备。优选地，化合物QA作为其心酒石酸盐制备。
[0034] 根据本发明的一个方面，提供了制备化合物MB的方法，该方法包括将式R化合物与 2-硝基乙醇或硝基乙締反应W获得化合物MB。
[0035]
[0036] 化合物MB是其中X为氧的式Μ化合物。Ri、R2和化如上所定义。可选地，Ri、R2和化中的 一个为氨，其它是面素;适合地为氣、氯、漠或舰。优选地，在芳香环的5-位和7-位的部分均 为氨并且在6-位和8-位的基团均为面素;适合地均为氣、氯、漠或舰。优选地，面素是氣或 漠;最优选地是氣。
[0037] 适合地在溶剂、碱和邻苯二甲酸酢的存在下实施所述方法。适合的碱为二下胺，适 合的溶剂为甲苯。
[003引式R化合物可通过任何已知的方法来制备。运些方法公开于W02009/064210和 Beliaev et al，0巧.Process Res.Dev.(有机工艺研究开发），2012，16(4)，第704-709页。 例如，化合物R可通过将式IV化合物和甲酯化剂例如六亚甲基四胺和酸例如乙酸反应来制 备。
[0039]
[0040] 优选地，化合物RA(3，5-二氣-2-径基苯甲醒)是通过将2，4-二氣苯酪和六亚甲基 四胺及Ξ氣乙酸反应来制备。
[0041] 如本文描述的并且通过本文描述的方法制备的式Μ和式N化合物可用于下述方法 中的任何一种中，所有的方法均构成本发明的方面。
[0042]
[0043] 其中，X、Ri、化和R3如上所定义。
[0044] 根据本发明的一个方面，提供了制备式W的前手性酬色满酬化合物的方法，该方法 包括将式Μ化合物转化成式W化合物。
[0045]
[0046] 其中，X、Ri、R2和R3如上定义。适合地，转化包括将化合物Μ与铁和乙酸反应。优选 地，式WA化合物适合地在铁和乙酸的存在下通过式ΜΑ化合物的反应来制备。
[0047]
[0048] 本发明也提供了使用生物转化方法来获得式Q化合物的(R)-对映体或(S)-对映体 或其盐。适合的盐如上所述。
[0049] 因此，根据本发明的一个方面，提供了制备式Q化合物的（R)-对映体(R-Q)或(S)- 对映体(S-Q)的方法，该方法包括使用转氨酶和胺基供体通过转氨作用对式W化合物进行生 物转化。
[0050]
[0051] 酶是转氨酶，其也可被称为氨基转移酶。适合的酶是具有转氨酶活性的多肤。适合 地，所述酶是工程酶。
[0052] 胺基供体可选自异丙胺、丙氨酸、3-氨基下酸和甲基节胺。优选地，胺基供体是异 丙胺。胺基供体适合地W其盐的形式提供。优选地，氨基供体W异丙胺盐酸盐提供。
[0053] 优选地，转氨作用是对映体选择性的，一种对映体相对于其它对映体W对映体过 量值提供。对映体过量值按照[主要对映体-次要对映体]/[主要对映体+次要对映体]来计 算，W百分比表示。优选地，一种对映体W至少50%的对映体过量值生产。更优选地，对映体 W至少70 %的对映体过量值生产。更优选地，对映体W至少80 %的对映体过量值生产。最优 选地，对映体W至少90 %的对映体过量值生产。优选的转氨酶是引起至少50 %的对映体过 量值的转氨酶。更优选的转氨酶是引起化合物Q的R-对映体至少50%的对映体过量值的转 氨酶。
[0054] 优选地，反应在适于生产与次要对映体相比对映体过量值的所需对映体（即主要 对映体)的条件下进行。
[005引酶可选自US 8,293,507中公开的酶中的任何一种。
[0056] 下列酶可用作上述方法中的转氨酶：
[0057] 供应商：Johnson Matthey(庄信万丰）
[005引试剂盒名称:X-zyme
[0059] 供应商代码:未提供
[0060] 试剂盒内容物:36种转氨酶和辅因子PLP
[0061] 供应商 Jrozomix
[0062] 试剂盒名称:转氨酶面板(200种酶的试剂盒）
[0063] 供应商代码:PR0-TRANSP
[0064] 试剂盒内容物:200种酶 [00巧]供应商：Codexis
[0066] 试剂盒名称::c〇dex?ATA筛选试剂盒
[0067] 供应商代码:ATASK-200250
[0068] 试剂盒内容物:24种转氨酶和辅因子PLP
[0069 ]酵代码:4了4-007^了4-013^了4-025^了4-113^了4-117^了4-200、4了4-217、八了八- 234、ATA-237、ATA-238、ATA-251、ATA 254、ATA-256、ATA-260、ATA-301、ATA-303、ATA-412、 ATA-415、ATA-P1-B04、ATA-P1-F03、ATA-P1-G05、ATA-P2-A01、ATA-P2-A07和ATA-P2-B01。
[0070] ATA-025和ATA-P2-A07生成对映体过量值的化合物QA的（s)-对映体。ATA-251生成 对映体过量值的化合物QA的(R)-对映体。
[0071] 转氨作用适合地在酶的辅因子的存在下进行。辅因子优选化唉醒-5'-憐酸(PLP)。
[0072] 转氨作用反应可在选自二甲亚讽(DMS0)、乙腊、庚烧、四氨巧喃（THF)、乙酸乙醋、 2-丙醇和甲基叔下基酸(mtBE)的溶剂中进行。
[0073] 已经发现，当转氨酶是ATA-251并且底物是式WA化合物时使用DMS0是特别有利的。 转氨作用反应产生式QA化合物的R-对映体并且R-对映体的对映体过量值为90%。
[0074] 转氨作用反应可在缓冲液中进行。缓冲液可W是Ξ乙醇胺盐酸盐水溶液。Ξ乙醇 胺盐酸盐在缓冲液中的浓度为约200mM。可用盐酸将溶液的pH值范围从约7调节至约8,优选 约 7.5。
[0075] 转氨酶反应的抑值通常保持在约7 W上，优选约7和约9之间，更优选约7和约8.5之 间。
[0076] 转氨作用反应的溫度范围可为约25°C至约50°C。优选地，溫度范围为约25°C至约 40°C。通常地，溫度为约30°C。
[OOW]优选的转氨作用反应可表示为：
[007 引
[0079] 上述WA的转氨作用的优选试剂/条件是：
[0080] ?酶:ATA-251
[0081 ] ?辅因子:PLP
[0082] ?氨基供体:异丙胺盐酸盐
[008引 ?缓冲液:Ξ乙醇胺盐酸盐水溶液
[0084] ?溶剂:DMS0
[0085] 通常地，转氨作用方法通常包括W下步骤：
[0086] (a)制备缓冲液(溶液1)
[0087] (b)制备胺基供体溶液(溶液2)
[0088] (C)制备辅因子/缓冲液(溶液3)
[0089] (d)将溶液巧日入至酶(溶液4)
[0090] (e)将溶液巧日入至溶液4 (溶液5)
[0091] (f)将底物加入至溶液5(溶液6)
[0092 ] (g)将溶液1加入至溶液6 (溶液7)
[0093] 化)将溶剂加入至溶液7
[0094] (i)当反应完成时，加入有机溶剂例如乙酸乙醋 [009引（j)分离产物。
[0096] 可使用如本文公开的方法由硝基色締化合物Μ制