-2.13 (m, 1H), 1.75-1.66 (m, 1H), 1.48-1.44 (m, 6H), 1.14-1.07 (m， 3H); 13C-NMR ( CDCI3， 100 MHz) δ: 182.9， 161.7， 161.6， 159.9， 152.2， 133.7, 133.4, 133.4, 131.8, 130.9, 130.7, 130.6, 128.8, 127.6, 127.5, 127.1, 122.9, 122.6, 121.2, 120.9, 114.7, 104.9, 101.0, 100.2, 78.2, 77.3, 77.0, 76.8, 38.6, 37.9, 30.6, 29.7, 28.4, 28.2, 13.7; HRMS (ESI-TOF) m/z: Calcd. for C24H23BrNa〇5 [M+Na]+: 493.0626; Found: 493.0628. 本发明的式（l)Morusin衍生物具有重要的抗肿瘤活性，体外对人肺癌细胞（A549), 人白血病细胞(K562)，人前列腺(PC-3)共三株肿瘤细胞的细胞毒性试验表明：此类式（1) 所示的结构的Morusin衍生物对肿瘤细胞生长具有抑制作用，有可能发展成为新的防治肿 瘤药物或防治肿瘤药物先导化合物。必须说明，本发明的药理实施例是用于说明本发明而 不是对本发明的限制。根据本发明的实质对本发明进行的简单改进都属于本发明要求保护 否认范围。
[0011] 药理实施例l:Morusin衍生物5a, 5c, 5e, 6c_l, 6c_2, 6e_l, 6e_2, 6e_3, 7c 或7e对A549细胞的细胞毒性 A549(人非小细胞肺癌肺癌）用DMEM培养基培养，培养基中含10%的胎牛血清，100 U/mL 的青霉素和100 U/mL链霉素。细胞以每孔4000个细胞的浓度加入到96孔中，在37°C含5% C02潮湿空气的培养箱中培养24小时。
[0012] 细胞存活率的测定用改良MTT法。细胞经过24小时的孵育后，分别将新配的化合物 Morusin衍生物5a, 5c, 5e, 6c_l, 6c_2, 6e_l, 6e_2, 6e_3, 7c或7e的二甲基亚讽溶液 以浓度梯度加入到各孔中，使孔中化合物最终浓度分别为5 μ mol/L，10 μ mol/L，20 μ mol/L, 40 μ mol/L 和80 μηιο1/Ι^48小时后，每孔加入 10 yL MTT (5 mg/mL)的磷酸盐缓 冲液，再继续在37 °C培养4小时后，离心5分钟除去未转化的MTT，每孔中加入150 yL二甲 基亚砜。以溶解还原的MTT晶体甲臜(formazan)，用酶标仪在490 nm波长测定0D值。其中 Morusin衍生物5a, 5c, 5e, 6c-l, 6c-2, 6e-l, 6e-2, 6e-3, 7c或7e对A549细胞半抑制 浓度IC5Q由spss软件（19版本)分析得到。化合物5a对A549肿瘤细胞的IC 5Q为28.3 ymol/L; 化合物5(^私549肿瘤细胞的1(：5()为19.4以111〇1/1;化合物56对4549肿瘤细胞的1(： 5()为28.7以 mol/L;化合物6c-l对A549肿瘤细胞的IC5Q为8.9 ymol/L;化合物6c-2对A549肿瘤细胞的 IC5〇为3.5 ymol/L;化合物6e-l对A549肿瘤细胞的IC5〇为7.8 ymol/L;化合物6e-2对A549肿 瘤细胞的IC5Q为8.7 ymol/L;化合物6e-3对A549肿瘤细胞的IC5Q为2.7 ymol/L;化合物7c对 A549肿瘤细胞的IC5Q为12.3 ymol/L;化合物7e对A549肿瘤细胞的IC5Q为15.6 ymol/L;而阳 性对照顺铂对A549肿瘤细胞的IC5〇为25.7 ymol/L。
[0013] 实验结论:A549细胞是测试化合物对肿瘤细胞的细胞毒性的有效工具和评价指 标。本实验表明此类式（1)所示的Morusin衍生物对A549细胞具有较强的细胞毒性，和肿瘤 治疗一线用药顺铂同一数量级或活性比顺铂更好，有可能发展成新的具有抗肿瘤作用的药 物或药物先导化合物。
[0014] 药理实施例2:Morusin衍生物5a, 5c, 5e, 6c_l, 6c_2, 6e_l, 6e_2, 6e_3, 7c 或7e对K562细胞的细胞毒性 K562(人慢性髓系白血病细胞）用RPMI-1640培养基培养，培养基中含10%的胎牛血清， 100 U/mL的青霉素和100 U/mL链霉素。细胞以每孔5000个细胞的浓度加入到96孔中，在37 °C含5% C02潮湿空气的培养箱中培养24小时。
[0015] 细胞存活率的测定用改良MTT法。具体方法如药理实施例1。化合物5a对K562肿瘤 细胞的IC 5Q为26.8 ymol/L;化合物5c对K562肿瘤细胞的IC5Q为13.4 ymol/L;化合物5e对 K562肿瘤细胞的IC5Q为23.1 ymol/L;化合物6c-l对K562肿瘤细胞的IC5Q为5.8 ymol/L;化 合物6〇-2对1(562肿瘤细胞的1(：5()为9.1以111〇1/1;化合物66-1对1(562肿瘤细胞的1(： 5()为8.5以 mol/L;化合物6e-2对K562肿瘤细胞的IC5Q为7.2 ymol/L;化合物6e-3对K562肿瘤细胞的 IC5〇为2.3 ymol/L;化合物7c对K562肿瘤细胞的IC5〇为42.3 ymol/L;化合物7e对K562肿瘤 细胞的IC5Q为32.5 ymol/L;而阳性对照顺铂对K562肿瘤细胞的IC5Q为24.6 ymol/L。
[0016] 实验结论:K562细胞是测试化合物对肿瘤细胞的细胞毒性的有效工具和评价指 标。本实验表明此类式（1)所示的Morusin衍生物对K562细胞具有较强的细胞毒性，和肿瘤 治疗一线用药顺铂同一数量级或活性比顺铂更好，有可能发展成新的具有抗肿瘤作用的药 物或药物先导化合物。
[0017] 药理实施例3:Morusin衍生物5a, 5c, 5e, 6c_l, 6c_2, 6e_l, 6e_2, 6e_3, 7c 或7e对PC-3细胞的细胞毒性 PC_3(人前列腺癌)细胞用RPMI-1640培养基培养，培养基中含10%的胎牛血清，100 U/ mL青霉素及100 U/mL的链霉素。细胞以每孔5000个细胞的浓度加入到96孔中，在37 °C含 5% C02潮湿空气的培养箱中培养24小时。
[0018] 细胞存活率的测定用改良MTT法。具体方法如药理实施例1。化合物5a对PC-3肿瘤 细胞的IC50为47·54 ymol/L;化合物5c对PC-3肿瘤细胞的IC5〇为25·32 ymol/L;化合物5e对 PC-3肿瘤细胞的IC5Q为28.19 ymol/L;化合物6c-l对PC-3肿瘤细胞的IC5Q为10.64 ymol/L; 化合物6c-2对PC-3肿瘤细胞的IC5Q为11.80 ymol/L;化合物6e-l对PC-3肿瘤细胞的1(：50为 19.54ymol/L;化合物6e-2对PC-3肿瘤细胞的IC 5Q为8.97 ymol/L;化合物6e-3对PC-3肿瘤细 胞的IC5Q为9.05ymol/L;化合物7c对PC-3肿瘤细胞的IC 5Q为32.61ymol/L;化合物7e对PC-3 肿瘤细胞的IC5Q为34.67ymol/L;而阳性对照顺铂对PC-3肿瘤细胞的IC 5Q为26.2 ymol/L。
[0019] 实验结论:PC-3细胞是测试化合物对肿瘤细胞的细胞毒性的有效工具和评价指 标。本实验表明此类式（1)所示的Morusin衍生物对PC-3细胞具有较强的细胞毒性，和肿瘤 治疗一线用药顺铂同一数量级或活性比顺铂更好，有可能发展成新的具有抗肿瘤作用的药 物或药物先导化合物。
[0020] 从以上药理实施例中我们可以看出这些Morusin衍生物对这三株肿瘤细胞都显示 有一定的细胞毒性。可见这些化合物具有开发成为抗肿瘤药物或药物先导化合物的潜力， 值得继续深入研究下去。
【主权项】
1. 一种桑白皮活性成分Morusin衍生物，其特征在于：该化合物具有如通式（I)所示的 结构：〇 瓣拳/巧識嫁瀑識鍵幾甲:誦喊满;蘇卷鷄議瓣雜議:；2. -种根据权利要求1所述的桑白皮活性成分Morusin衍生物在制备防治肿瘤疾病药 物的应用。3. -种如权利要求1所述的Morusin衍生物的制备方法，其特征在于：由相应取代的苯 甲酯氯1与丙二酸单乙醋钟盐先发生酷化脱簇反应，生成中间体2,然后中间体2再与下締酬 发生Michael加成反应，得到了中间体3,然后中间体3与间苯Ξ酪发生成环反应，生成中间 体4，中间体4再与异戊締醒发生成环反应，生成Morusin衍生物5，Mo;rusin衍生物5通过与各 种取代的格氏试剂发生Aldol加成反应生成Morusin衍生物6;或Morusin衍生物5通过棚氨 化钢还原幾基得到Morusin衍生物7; Morusin衍生物合成路线如下：
【专利摘要】本发明公开了一种Morusin衍生物及其应用与制备方法，本发明通过采用Morusin全合成路线实现结构修饰方案，在Morusin全合成的过程中，通过更换反应底物的取代基对Morusin衍生物进行结构修饰，合成了一系列Morusin衍生物。它是一类重要的抗肿瘤活性先导化合物，它们的合成可以为抗肿瘤活性筛选提供化合物源，对寻找新型的抗肿瘤活性先导化合物具有重要的意义。本发明操作简单易行，原料合成便宜易得，可以在各种有机溶剂中进行，也具有较好的空气稳定性，适用性广，对于各种取代基都有很好的兼容性。这些衍生物发现具有一定的抑制肿瘤细胞生长活性，可作为抗肿瘤药物或抗肿瘤药物先导化合物用途。
【IPC分类】A61P35/00, C07D493/04
【公开号】CN105566340
【申请号】CN201610035823
【发明人】周英, 黄俊飞, 陆毅, 刘雄利, 周根, 巩艺, 林冰, 俸婷婷, 张敏
【申请人】贵州大学
【公开日】2016年5月11日
【申请日】2016年1月20日