专利名称：一类以萘为母体的双光子荧光探针、其制备方法及应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及一类以萘为母体的双光子荧光探针、其制备方法，以及利用该类荧光探针化合物在肿瘤细胞或组织标记中的应用。
背景技术：
当前，癌症发病率正处于“井喷”前期。世界卫生组织国际癌症研究中心公布的《世界癌症报告》中说明，根据目前癌症的发病趋势，到2020年全世界癌症发病率将比现在增加50%，全球每年新增癌症患者人数将达到1500万人。所以建立一种简便的、快速的、有效的、灵敏的癌症标记技术是一项重要的工作。现有的标记成像的方法主要有X线检测技术、超声波检测技术、CT检测技术、磁磁共振(MRI)检测技术、红外热像图检测技术、近红外线扫描检测技术、PET-CT检测技术等。但上述方法在实际成像应用中存在以下缺陷缺乏成像专一性，具有大的放射性损伤，无法独立标记诊断肿瘤，无法对肿瘤进行深度成像等等。荧光标记的光学分子成像的出现为现存的问题提供了一种很好的解决方法。目前，菲啶类(EB、PI)、吖啶类(AO)、咪唑类(Hoechst、DAPI)和花菁家族类(Cy、Τ0Τ0、SYT0)等商品化荧光染料在基因组学技术、核酸定量检测、血细胞分析等领域中都起到了重要的作用。然而，用于肿瘤细胞及组织标记的荧光染料与探针还相对较少，且标记性能较差。随着双光子技术的发展，双光子荧光显微镜在生命科学的研究中已经成为最重要的成像工具。与传统的单光子荧光共聚焦显微镜相比，双光子荧光显微镜具有显著优势，包括近红外激发、暗场成像、避免荧光漂白和光致毒、定靶激发、高横向分辨率与纵向分辨率、降低生物组织吸光系数及降低组织自发突光干扰等(Helmchen F, Svoboda K, Denk W etal. Nature，1999，2 :989-996. Maiti S，Shear J B, Williams R M et al. Science，1997，275 530.Ventelon L，Charier S，Moreaux L et al. Angewandte Chemie InternationalEdition, 2001,40 :2098.)，因此双光子显微成像技术为生物成像提供了一个崭新的平台。而对肿瘤标记成像、其活体内分布成像以及肿瘤深度成像的专一性双光子荧光探针还相对较少，开发专一性好的标记肿瘤的双光子荧光探针是实现双光子肿瘤成像的关键
发明内容
本发明提供一类以萘为母体的双光子荧光探针，所述荧光探针具有通式I的结构(附图I)
权利要求
1.一类以萘为母体的双光子荧光探针，所述荧光探针具有通式I的结构
2.权利要求I所述的以萘为母体的双光子荧光探针，其特征在于所述的R1和R2各自独立地选自-OCH3或卤素。
3.权利要求I所述的以萘为母体的双光子荧光探针，其特征在于所述的R3为-(CH2) 5-或-(CH2) 6_。
4.权利要求I所述的以萘为母体的双光子荧光探针，其特征在于所述的R4选自CV4烧基。
5.权利要求I所述的以萘为母体的双光子荧光探针，其特征在于所述的R5选自-H、-CN、-COOH 或-NO2。
6.权利要求I所述的以萘为母体的双光子荧光探针，选自化合物A1-A6
7.权利要求I所述的以萘为母体的双光子荧光探针的制备方法，包括如下步骤 1)4-溴-I，8-萘酐与R4-NH3按摩尔比I: 1-1 5反应，制备化合物V:
8.根据权利要求6所述的方法，其特征在于所述步骤4)中的水与二甲基亚砜或四氢呋喃的摩尔比分别为I : 1-1 1.25。
9.权利要求1-5中任一权利要求所述的以萘为母体的双光子荧光探针在生物样品标记中的应用。
10.权利要求9所述的以萘为母体的双光子荧光探针在生物样品标记中的应用，其特征在于所述的生物样品是肿瘤组织或肿瘤细胞。
全文摘要
一类以萘为母体的双光子荧光探针，所述荧光探针具有通式I的结构(附
图1)，式I中X选自X1、X2、X3和X4；该类双光子荧光染料在非肿瘤细胞和组织内具有较低的荧光背景，在肿瘤细胞和组织内具有较强的荧光信号，且对肿瘤细胞和组织具有很强的专一性标记。这类化合物具有一定水平的水溶性，同时具有良好的细胞膜通透性。并且还具有较大的有效的双光子吸收截面。本发明的这类化合物同时还具有较低的生物毒性、光毒性、光漂白性。其光谱范围与生物样品的光谱范围有足够大的差异。
文档编号C12Q1/02GK102617554SQ201210055528
公开日2012年8月1日 申请日期2012年3月5日 优先权日2012年3月5日
发明者仉华, 孙世国, 宋锋玲, 彭孝军, 樊江莉, 王静云 申请人:大连理工大学, 大连科荣生物技术有限公司