专利名称：稠合的三杂环化合物的制作方法
相关的申请本申请要求于2001年5月31日登记的美国临时申请号60/295,086的优先权，在此通过参考文献引入该申请的内容。
背景肿瘤的治疗可以通过几种治疗模式达到，包括手术、放射、化学治疗和这些治疗方法的综合。其中，对于不能进行手术的或者转移型癌症来说，化学治疗必不可少的。考虑到肿瘤在细胞类型、形态、生长速率和其它细胞特征方面的多样性，美国国家癌症研究所(NCI)开发了一种“疾病定向的”方法来筛选抗肿瘤活性.Boyd，M.R.(1989)in Principle of Practice of OncologyDevita，J.T.，Hellman，S.，and Rosenberg，S.A.(Eds.)Vol.3，PPO Update，No.10。这个体外筛选体系是基于由大约60个主要的人类肿瘤肿瘤(例如白血病、肺癌、结肠癌、CNS癌、黑素瘤、卵巢癌、肾癌、前列腺癌和乳腺癌)的细胞线组成的人类肿瘤细胞线组而进行的，并且作为鉴定具有抗肿瘤活性的化合物的工具。在这些化合物中，改性的核苷碱(nucleobase)是特别引起人们兴趣。
概述本发明是基于发现了鸟苷—一种核苷碱的某些稠合的三环类似物可用于治疗肿瘤而完成的。
本发明的一个方面涉及下式的稠合的三杂环化合物
R1是H或烷基；R2是H、烷基、链烯基、芳基、杂芳基、环基(cyclyl)或杂环基；R3和R4独立地为H、烷基、链烯基、芳基、杂芳基、环基、杂环基或(CRaRb)mX(CRcRd)nY；其中X是一条键、O、S或NRe；Y是烷氧基、芳氧基、杂芳氧基、OC(O)Re、C(O)Re、N(ReRe’)、NReC(O)Re’、S(O)2Re或SRe；m和n中的每一个独立地为1、2、3、4或5；Ra、Rb、Rc、Rd、Re和Re’中的每一个独立地为H、烷基、芳基、杂芳基、环基或杂环基；而R5是H或卤素。注意到，在上述的任何取代基中所列的左边的原子与三杂环最靠近。刚才所述的一小组化合物的特征在于R4是(CRaRb)mX(CRcRd)nY；R1是H；R2是烷基或芳基；R3是烷基、链烯基或芳基；而R5是H。另一小组化合物的特征在于R4是烷基、链烯基或芳基；R1是H；R2是烷基或芳基；R3是烷基、链烯基或芳基；而R5是H。优选地，Ra、Rb、Rc和Rd中的每一个是H；X是O；而Y是OC(O)Re。
本发明的另一个方面涉及上式所代表的稠合的三杂环化合物，其中R1是H或烷基；R2是H、烷基、链烯基、杂芳基、环基或杂环基；R3是H、烷基、链烯基、芳基、杂芳基、环基、杂环基或(CRaRb)mX(CRcRd)nY；R4是(CRaRb)mX(CRcRd)nY，其中X是一条键、O、S或NRe；Y是OH；m和n中的每一个独立地为1、2、3、4或5；Ra、Rb、Rc和Rd中的每一个独立地为H、烷基、芳基、杂芳基、环基或杂环基；而R5是H或卤素。一小组化合物的特征在于R1是H；R2是烷基；其中R3是烷基、链烯基或芳基；而R5是H。优选地，Ra、Rb、Rc和Rd中的每一个是H；而X是O。
在本发明的保护范围内，还有上式所代表的稠合的三杂环化合物，其中R1是H或烷基；R2是H、烷基、链烯基、芳基、杂芳基、环基或杂环基；R3是H、链烯基、芳基、杂芳基、环基、杂环基或(CRaRb)mX(CRcRd)nY；R4是(CRaRb)mX(CRcRd)nY，其中X是一条键、O、S或NRe；Y是OH；m和n中的每一个独立地为1、2、3、4或5；Ra、Rb、Rc、Rd、Re和Re’中的每一个独立地为H、烷基、芳基、杂芳基、环基或杂环基；而R5是H或卤素。一小组化合物的特征在于R1是H；R2是烷基或芳基；R3是链烯基或芳基；而R5是H；Ra、Rb、Rc和Rd中的每一个是H；而X是O。
这里所说的烷基、链烯基、芳基、杂芳基、环基和杂环基包括取代的和未取代的基团。术语“取代的”是指有一个或多个取代基(可以相同或不同)，每一个取代一个H原子。取代基的例子包括但是不限于卤素、羟基、氨基、氰基、硝基、C1-C6烷基、C1-C6链烯基、C1-C6烷氧基、芳基、杂芳基或杂环基，其中烷基、链烯基、烷氧基、芳基、杂芳基和杂环基选择性地被C1-C6烷基、芳基、杂芳基、卤素、羟基、氨基、烷基氨基、芳基氨基、二烷基氨基、二芳基氨基、氰基或硝基取代。注意，本发明所包含的取代基的组合及其变化仅仅是能形成稳定的化合物的那些。这里所用的术语“稳定的”是指其稳定性足以允许生产的那些化合物以及能保持化合物的完整达足够长的时间从而可用于这里所详细描述的目的(例如治疗或预防性地给主体服药或者防腐、伤口包扎、灭菌或防感染用途)的那些化合物。
术语“烷基”是指含有1-6个碳原子的直链的和带支链的烷基。术语“环基”是指含有4-8个碳原子的烃环。术语“杂环基”是指含有4-8个环原子其中至少有一个杂原子(例如S、N或O)作为环的组成部分的一种环。术语“芳基”是指含有至少一个芳香环的烃环体系。芳基的例子包括但是不限于苯基、萘基和芘基(pyrenyl)。术语“杂芳基”是指含有至少一个包含至少一个杂原子例如O、N或S的芳香环的烃环体系。杂芳基的例子包括但是不限于呋喃基、芴基、吡咯基、噻吩基、噁唑基、咪唑基、噻唑基、吡啶基(pyridinyl)、嘧啶基、喹唑啉基和吲哚基。
上述稠合的三杂环化合物包括它们自身及其可以使用的盐和药物前体。这样的盐例如可以在稠合的三杂环化合物的带正电荷的取代基(例如氨基)与一种阴离子之间形成。合适地阴离子包括但是不限于氯离子、溴离子、碘离子、硫酸根离子、硝酸根离子、磷酸根离子、柠檬酸根离子、甲磺酸根离子、三氟乙酸根离子和乙酸根离子。同样地，在稠合的三杂环化合物的带负电荷的取代基(例如羧酸根)可以与一种阳离子形成形成盐。合适的阳离子包括但是不限于钠离子、钾离子、镁离子、钙离子和铵阳离子例如四甲基铵离子。药物前体的离子包括酯和其它药学上可接受的衍生物，这种药物前体在服药给主体后能提供前面所述的稠合的三杂环化合物。
本发明还涉及一种治疗肿瘤(例如白血病、肺癌、结肠癌、CNS癌、黑素瘤(melanoma)、卵巢癌(ovarian cancer)、肾癌、前列腺癌或乳腺癌)的方法，该方法包括需要治疗的主体服用有效量的上式的化合物，其中R1是H或烷基；R2是H、烷基、链烯基、芳基、杂芳基、环基或杂环基；R3和R4独立地为H、烷基、链烯基、芳基、杂芳基、环基、杂环基或(CRaRb)mX(CRcRd)nY；其中X是一条键、O、S或NRe；Y是ORe、OC(O)Re、C(O)Re、N(ReRe’)、ReC(O)Re’、S(O)2Re或SRe；而m和n中的每一个独立地为1、2、3、4或5；Ra、Rb、Rc、Rd、Re和Re’中的每一个独立地为H、烷基、芳基、杂芳基、环基或杂环基；而R5是H或卤素。就上式来说，一小组化合物的特征在于R4是(CRaRb)mX(CRcRd)nY；R1是H；R5是H；Ra、Rb、Rc和Rd中的每一个是H；X是O；而Y是ORe或OC(O)Re。另一小组化合物的特征在于R4是烷基、链烯基或芳基；R1是H；R5是H；而R3是烷基、链烯基或芳基。
在本发明的保护范围内，还有一种含有前面所述的一种或多种稠合的三杂环化合物并且用于治疗治疗肿瘤的组合物，以及这样的组合物在生产用于治疗肿瘤的药物中的用途。
根据下面对几个实施例的详细描述以及后面所附的权利要求书，本发明的其它特征或优点将变得很明显。
详细描述本发明的稠合的三杂环化合物的七个实例是3-(2-羟基-乙氧基甲基-6-(2-甲基丙烷基)-3，5-二氢-1，3，4，5，7a-五氮杂-s-引达省-8-酮(化合物1)(indacen-8-one)、3-(2-羟基-乙氧基甲基-6-(5-氯-噻吩-2-基)-3，5-二氢-1，3，4，5，7a-对称引达省-8-酮(化合物2)、3-(2-乙酰氧基-乙氧基甲基-6-(4-氯-苯基)-3，5-二氢-1，3，4，5，7a-五氮杂-对称引达省-8-酮(化合物3)、5-(4-甲氧基苯基甲基)-3-(2-羟基-乙氧基甲基)-6-(4-溴苯基)-3，5-二氢-1，3，4，5，7a-五氮杂-对称引达省-8-酮(化合物4)、5-(2-乙腈基(ethanitrilyl))-3-(2-乙酰氧基-乙氧基甲基)-6-苯基-3，5-二氢-1，3，4，5，7a-五氮杂-对称引达省-8-酮(化合物5)、5-(3，4-二氯苯基甲基)-3-(2-乙酰氧基-乙氧基甲基)-6-(4-氯苯基)-3，5-二氢-1，3，4，5，7a-对称引达省-8-酮(化合物6)和3，5-二苄基-6-(4-氯苯基)-3，5-二氢-1，3，4，5，7a-五氮杂-对称引达省-8-酮(化合物7)。
上述的稠合的三杂环化合物可以通过本领域中熟知的方法以及这里所公开的合成路线制备。例如，可以使9-[(2-羟基乙氧基)甲基]胍(无环毒素(acyclovir))与一种卤代的酮化合物反应而制得本发明的化合物例如化合物1和2。所得的化合物可以与一种烷基卤化物反应而制得所要的化合物4。另外，所得的化合物可以与一种酸酐例如乙酸酐反应而制得本发明的另一种化合物例如化合物3，然后用一种烷基卤化物在不同的条件下处理而制得本发明的另外一种化合物例如化合物5、6和7。
下列是用来描述合成七个稠合的三杂环化合物的一个方案。 在下列实施例1-7中分别详细描述了化合物1-7的合成。
上述合成路线中所用的化学试剂可以包括例如溶剂、试剂、催化剂、保护基团和脱保护基试剂。上述方法还可以在这里所具体描述的步骤之前或之后包含其它步骤以加上或除去合适的保护基团以便最终合成三杂环化合物。另外，可以以不同的顺序或次序来进行各个合成步骤而得到所要的化合物。用于合成实用的三杂环化合物的合成化学转变和保护基团方法学(保护和脱保护)是本领域中已知的，并且包括例如R.Larock，ComprehensiveOrganic Transformations，VCH Publishers(1989)；T.W.Greene and P.G.M.Wuts，Protective Groups in Organic Synthesis，2nd Ed.，John Wiley and Sons(1991)；L.Fieser and M.Fieser，Fieser and Fieser’s Reagents for Organic Synthesis，JohnWiley and Sons(1994)；和L.Paquette，ed.，Encyclopedia of Reagents forOrganic Synthesis，John Wiley and Sons(19915)及其后续的版本中所描述的那些。
可以使用一种方法例如柱色谱、高压液相色谱或重结晶把这样合成的三杂环化合物进一步纯化。
在本发明的保护范围之内的还有一种包含有效量的一种或多种上述稠合的三杂环化合物和一种药学上可接受的载体的药物组合物。另外，本发明还包括一种给需要进行肿瘤治疗的主体服用有效量的这种化合物的方法。术语“治疗”被定义为给患有肿瘤、肿瘤症状、因肿瘤而产生的次级疾病或发生肿瘤的前兆的主体使用或服用一种包含三杂环化合物的组合物，其目的是为了治愈、减轻、医治或改善肿瘤、肿瘤的症状、因肿瘤而产生的次级疾病或发生肿瘤的前兆。“有效量”是指要在治疗的主体上达到治疗效果所需要的化合物的数量。在Freireich等人的(1996)Cancer Chemother Rep 50219中描述了动物和人的剂量相关性(基于mg/m2的体表面)。体表面积可以根据病人的身高和体重而大致地进行确定，参见例如Scientific Tables，GeigyPharmaceuticals，Ardley，N.Y.，1970，537。稠合的三杂环化合物的有效量可以在大约5mg/Kg-600mg/Kg的范围。如本领域技术人员所知，有效剂量也会随被治疗的肿瘤的类型、给药方式、所用的赋形剂和有可能一起使用其它治疗手段例如使用其它抗肿瘤剂或辐射治疗而发生变化。
为了实施本发明的方法，可以以口服方式、非肠胃给药方式、吸入喷剂(inhalation spray)、表面给药、直肠给药、鼻腔给药、面颊给药(bucally)、阴道给药或通过植入药库方式服用作为药物组合物的组份的稠合的三杂环化合物。这里所用的术语“非肠胃的”包括皮下的、内皮的、静脉内的、肌肉内的、关节内的、动脉内的、滑液内的、胸骨内的、鞘内的、受害部位内的和头盖内的注射或灌注技术。
可以按照本领域中的已知技术，使用合适的分散剂或增湿剂(例如吐温80)和悬浮剂来配制无菌的注射用组合物例如无菌的注射用水悬浮液或油悬浮液。无菌的注射用制剂可以是在无毒的非肠胃方式可以接受的稀释剂或溶剂中的无菌的注射溶液或悬浮液，例如是1，3-丁二醇的溶液。可以使用的可以接受的载体和溶剂有甘露醇、水、林格(Ringer)溶液和等渗的氯化钠溶液。另外，无菌的固定油常用作溶剂或悬浮介质(例如合成的单或双酸甘油酯)。脂肪酸例如油酸及其甘油酯衍生物可用于制备注射液，因为它们是天然的药学上可接受的植物油，例如橄榄油或蓖麻油，特别是它们的聚氧乙基化形式。这些油溶液或悬浮液也可以包含一种长链的醇稀释剂或分散剂或羧甲基纤维素或类似的分散剂。其它常用的表面活性剂例如吐温或斯班(Span)或其它类似的乳化剂或常用于生产药学上可接受的固体、液体或其它剂型的可促进生物利用的试剂也可以用于制剂的目的。
口服用的组合物可以是任何可以接受的口服剂型，包括但是不限于胶囊、片剂、乳液和水性悬浮液、分散液和溶液。就口服用的片剂来说，常用的载体包括乳糖和玉米淀粉。典型地还加入润滑剂例如硬脂酸镁。以胶囊形式口服时，可以使用的稀释剂包括乳糖和干燥的玉米淀粉。当口服水性悬浮液或乳液时，可以把活性组份悬浮或溶于掺有乳化剂或悬浮剂的油相中。可以按照制药领域中熟知的技术来制备鼻腔用气溶胶或吸入组合物，并且可以使用苯甲醇或其它合适的防腐剂、用来促进生物可利用度的吸收促进剂、氟代烃和/或本领域中已知的其它助溶剂或分散剂把它们配制成盐水溶液。也可以以直肠给药用的栓剂形式给药稠合的三杂环化合物。
药物组合物中所用的载体在与配方中活性组份的相容性(优选能够稳定活性组份)方面必须是“可以接受的”，并且不会对被治疗的主体产生危害。例如，可以把助溶剂例如能与稠合的三杂环化合物形成特异性的溶解度更大的配合物的环糊精或一种或多种助溶剂用作输送稠合的三杂环化合物的制药用的赋形剂。其它载体的例子包括胶体二氧化硅、硬脂酸镁、纤维素、月桂基硫酸钠和D&C Yellow#10。
可以通过体外试验，基于NCI筛选体系，使用大约60种主要的人类肿瘤的细胞线，针对稠合的三杂环化合物在治疗肿瘤方面的效率进行初步筛选。参见Monks等人(1991)JNCI，J.Natl.Cancer Inst.83757-766；Alley等人(1988)Cancer Res.48589-601；Shoemaker等人，(1988)Prog.Clin.Biol.Res.276265-286；和Stinson等人，(1989)Proc.Am.Assoc.Cancer Res.30613。简单来说，把按照特定细胞类型和预定达到的细胞密度(5,000-40,000个细胞/孔，基于细胞的生长特性)稀释后的细胞悬浮液加入(100μL)一个96-孔的微量滴定板上，在37℃下预培养24小时。在0时，以每份100μL的量向微量滴定板的每个孔中加入相当于最终浓度两倍的稀释液。通常，以5份10-倍稀释液对试验化合物进行评估。在一个常规试验中，试验化合物的最高浓度是10-4M。在5％CO2的大气和100％的湿度下培养48小时。使用Rubinstein等人(1990，JNCI，J.Natl.Cancer Inst.821113-1118)和Skehan等人(1990，JNCI，J.Natl.Cancer Inst.821107-1112)中描述的磺基罗丹明B(sulforhodamine B)试验法对细胞进行试验。使用板式读数计读取光密度，用微机把光密度加工成特种浓度参数。NCI已经重新命名了IC50值—能引起50％的生长抑制的浓度，GI50值强调对0时计数的细胞进行校正，因此，GI50值测定试验化合物的生长抑制能力。参见Boyd等人(1992)，Cytotoxic Anticancer DrugModels andConcepys for Drug Discovery and Development；Vleriote，F.A.；Corbett，T.H.；Baker，L.H.(Eds.)；Kluwer AcademicHingham，MA，pp11-34。
不必进一步精心描述，相信上述描述已经充分地保证了本发明实施。因此，下列的具体实施例只是解释为用于详细说明，而不应以任何方式把它们解释为对说明书其它部分的限定，在此通过参考文献把这里所引用的所有文献全部引入。
实施例13-(2-羟基-乙氧基甲基-6-(2-甲基丙烷基)-3，5-二氢-1，3，4，5，7a-五氮杂-对称引达省-8-酮(化合物1)的合成在室温下，把676g 9-[(2-羟基乙氧基)甲基]胍(无环毒素)、18ml N，N-二甲基甲酰胺(DMF)和200mg氢化钠(80％)的溶液搅拌15分钟，然后滴加0.7ml4-甲基-1-溴戊烷-2-酮。溶液变为暗棕色后，在室温下搅拌3小时，加入15ml氨，连续搅拌过夜。除去溶剂，得到一种残留物，通过柱色谱(硅胶)纯化残留物，用氯仿/甲醇(6/1)洗脱，得到一种油，使油重结晶，得到化合物1。
1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ8.01(1H，s，NCH＝N)；δ7.73(1H，s，N＝CH-C)；δ5.60(2H，s，NCH2O)；δ4.65(1H，broad，OH)；δ3.42～3.49(4H，m，CH2CH2)；δ2.40～2.52(2H，m，CH2)；δ1.80～1.84(1H，m，CH)；and δ0.92(6H，m，2CH3).
实施例23-(2-羟基-乙氧基甲基-6-(5-氯-噻吩-2-基)-3，5-二氢-1，3，4，5，7a-五氮杂-对称引达省-8-酮(化合物2)的合成在室温下，把720mg无环毒素、20ml DMF和300mg氢化钠(80％)的溶液搅拌30分钟，然后加入2.63g(11mmol)2’-溴-乙酰基(5-氯苯硫酮)5-chloro-(thiophenone)。在室温下搅拌3.5小时，加入50ml氨，连续搅拌过夜。除去溶剂，得到一种残留物，用10ml水洗涤，再次用水洗涤得到的残留物，溶于乙醚中。把乙醚溶液干燥，通过柱色谱(硅胶)纯化残留物，用氯仿/甲醇(4/1)洗脱，得到400mg产物。合并后的固体化合物2为1.4g(产率38.5％，熔点226-228℃)。
1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ8.03(1H，S，N-CH＝N)；δ8.01(1H，S，N-CH＝C)；δ7.45(1H，d，J＝4.0Hz，thiophene ring)；δ7.20(1H，d，J＝4.0Hz，thiophene ring)；δ5.48(2H，S，N-CH2-O)；and δ3.54～3.34(4H，m，-O-CH2-CH2-O-).
HRMS C14H12ClN5O3S计算值365.03464，测定值365.034922。
实施例33-(2-乙酰氧基-乙氧基甲基-6-(4-氯-苯基)-3，5-二氢-1，3，4，5，7a-对称引达省-8-酮(化合物3)的合成在室温下，把1.4g无环毒素(6.22mmol)、30ml DMF和400mg氢化钠(80％)的溶液搅拌30分钟，然后滴加0.7mL 2-溴-4’-氯乙酰苯。溶液变为橙色，向溶液中加入17ml氨，连续搅拌5小时。除去溶剂，得到一种残留物，用水洗涤，得到重量为1.62g(白色固体，产率72％)的产物3-(2-乙酰氧基-乙氧基甲基-6-(4-氯-苯基)-3，5-二氢-1，3，4，5，7a-五氮杂-对称引达省-8-酮。
在室温下搅拌1.25g(3.49mmol)这样得到的化合物、3.5ml乙酸酐和17.5mL吡啶的溶液过夜，然后浓缩。加入26.5mL吡啶/水/甲醇(1/1/1)的混合物，在室温下搅拌4小时。除去溶剂后，加入60mL甲苯，浓缩。加入氯仿，浓缩，得到一种残留物。残留物在乙酸乙酯/乙醇(2/1)中重结晶，得到一种白色产物—化合物3，1.36g(产率97.4％)。
实施例45-(4-甲氧基苯基甲基)-3-(2-羟基-乙氧基甲基)-6-(4-溴苯基)-3，5-二氢-1，3，4，5，7a-五氮杂-对称引达省-8-酮(化合物4)的合成在室温下，把2.7g无环毒素、70ml DMF和800mg氢化钠(80％)的溶液搅拌15分钟，然后加入4g 2’，4’-二溴-乙酰苯。在室温下搅拌溶液3小时，加入15ml氨，连续搅拌过夜。除去溶剂，得到一种残留物，用50ml水和丙酮洗涤，得到一种产物3-(2-羟基-乙氧基甲基)-6-(4-溴苯基)-3，5-二氢-1，3，4，5，7a-五氮杂-对称引达省-8-酮，2.55g(黄色，产率53％)。
在100℃下，把800mg这样得到的化合物、400mg碳酸钾、50mL DMF和0.35mL 4-甲氧基苄基氯的溶液搅拌18小时。浓缩溶液，得到一种残留物，把残留物溶于甲醇中，通过柱色谱(硅胶)纯化，用氯仿/甲醇(20/1)洗脱，得到50mg化合物4(产率9.6％)。
元素分析计算值(％)C53.15；H4.46；N12.91测定值(％)C53.19；H3.99；N12.85实施例55-(2-乙腈基)-3-(2-乙酰氧基-乙氧基甲基)-6-苯基-3，5-二氢-1，3，4，5，7a-五氮杂-对称引达省-8-酮(化合物5)的合成在室温下，把9.0g(40mmol)无环毒素、200ml DMF和2.8g氢化钠(80％)的溶液搅拌30分钟，然后向溶液中加入9.6g 2-溴-乙酰苯。在室温下搅拌溶液5小时，加入160ml氨，搅拌过夜。除去溶剂，得到一种残留物固体，用50ml水和30mL乙醇洗涤。把固体过滤出来，用丙酮洗涤，称得重量为8.0g(产率64％)。
在室温下，把8.0g(22.5mmol)这样得到的化合物[3-(2-羟基-乙氧基甲基)-6-苯基-3，5-二氢-1，3，4，5，7a-五氮杂-对称引达省-8-酮]、24ml乙酸酐和120ml吡啶的溶液搅拌5小时，然后浓缩，得到一种固体，用80ml甲苯洗涤。把固体过滤出来，用乙酸乙酯和少量的乙醇洗涤，称得重量为8.47g(产率99％)。
在75℃下，把732mg这样得到的化合物(3-(2-乙酰氧基-乙氧基甲基)-6-苯基-3，5-二氢-1，3，4，5，7a-五氮杂-对称引达省-8-酮)、552mg碳酸钾、60ml DMF和0.5mL氯代乙腈的溶液搅拌3.5小时。除去溶剂后，加入100mL氯仿，生成沉淀。把沉淀过滤出来，除去溶剂，得到一种残留物，通过柱色谱(硅胶)纯化，用氯仿/甲醇(50/1)洗脱，得到310mg化合物5。
1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ8.08(1H，s NCH＝N)；δ7.73(1H，s，N＝CH-C)；δ7.68～7.55(5H，m，benzen ring)；δ5.67(2H，s，NCH2O)；δ5.14(2H，s，NCH2CN)；δ4.22～3.84(4H，m，CH2CH2)；and δ2.04(3H，s，CH3).
元素分析计算值(％)C57.83；H4.58；N20.24测定值(％)C57.61；H4.33；N20.46实施例65-(3，4-二氯苯基甲基)-3-(2-乙酰氧基-乙氧基甲基)-6-(4-氯苯基)-3，5-二氢-1，3，4，5，7a-五氮杂-对称引达省-8-酮(化合物6)的合成在100℃下，把800mg化合物3、400mg碳酸钾、50mL DMF和423mg 3，4-二氯苄基氯的溶液搅拌18小时。除去溶剂，得到一种产物—化合物6，150mg(产率13.4％)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.84(1H，s NCH＝N)，δ7.72(1H，s，N＝CH-C)，δ7.47(2H，d，benzen ring，J＝8.5Hz)，δ7.36(2H，d，benzen ring，J＝8.5Hz)，δ7.29(1H，d，benzenring，J＝2.5Hz)，δ7.22(1H，d，benzen ring，J＝2.0Hz)，δ6.87(1H，dd，benzen ring，J＝2.5Hz，J＝2.0Hz)，δ5.55(2H，s，NCH2O)，δ5.23(2H，s，CH2C6H5)，δ4.22～3.84(4H，m，CH2CH2)，and δ2.04(3H，s，CH3).
实施例73，5-二苄基-6-(4-氯苯基)-3，5-二氢-1，3，4，5，7a-五氮杂-对称引达省-8-酮(化合物7)在室温下，把1.6g(4.0mmol)化合物3、700mg碳酸钾和140mL DMF的溶液搅拌30分钟，然后加入1.3mL苄基溴。在75℃下搅拌溶液3.5小时，浓缩。加入150ml氯仿，搅拌15分钟。除去不溶性颗粒，用另外的氯仿洗涤。浓缩合并后的氯仿溶液，得到一种残留物，残留物通过柱色谱(硅胶)纯化，用氯仿/甲苯/丙酮/甲醇(60/20/3/1)洗脱。得到100mg化合物7，产率5％。
HRMS C27H20ClN5O计算值465.1351，测定值465.0349221356。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.11(1H，s NCH＝N)；δ7.60(1H，s，N＝CH-C)；δ7.43～7.04(9H，d，benzen ring，)；δ5.55(2H，s，CH2C6H5)；and δ5.34(2H，s，CH2C6H5).
实施例8抗肿瘤活性的筛选(NCI细胞线)针对由60种不同的NCI人类肿瘤细胞线组成的试验组，测定了上述稠合的三杂环化合物的细胞毒性活性。
发现，所有的试验化合物都对一种以上的细胞线有活性。确实，活性最小的化合物针对多达50种细胞线的GI50值＜10-4M。活性最强的化合物针对多达50种细胞线的GI50值＜大约10-6M。
其它实施方式本说明书中所公开的所有特征可以以任何组合方式组合。本说明书中公开的每个特征可以被能发挥同样、等同或相似目的的其它特征替换。因此，除非另外明确指出，公开的每个特征仅仅是一类等同的或相似的特征的一个实例。
根据上述描述，本领域技术人员可以容易地确定本发明的基本特征而不会偏离本发明的精神和保护范围，本领域技术人员还可以对本发明作各种改变和改良以使其适应各种用途和情况。例如，也可以对与本发明的稠合的三杂环化合物结构相似的化合物的抗肿瘤活性进行筛选，使用它们来实施本发明，因此，其它实施方式也在权利要求书的范围之内。
权利要求
1.下式的化合物 其中R1是H或烷基；R2是H、烷基、链烯基、芳基、杂芳基、环基或杂环基；R3和R4独立地为H、烷基、链烯基、芳基、杂芳基、环基、杂环基或(CRaRb)mX(CRcRd)nY；其中X是一条键、O、S或NRe；Y是烷氧基、芳氧基、杂芳氧基、OC(O)Re、C(O)Re、N(ReRe’)、NReC(O)Re’、S(O)2Re或SRe；m和n中的每一个独立地为1、2、3、4或5；Ra、Rb、Rc、Rd、Re和Re’中的每一个独立地为H、烷基、芳基、杂芳基、环基或杂环基；而R5是H或卤素。
2.权利要求1的化合物，其中R4是(CRaRb)mX(CRcRd)nY。
3.权利要求2的化合物，其中Ra、Rb、Rc和Rd中的每一个是H；X是O；而Y是OC(O)Re。
4.权利要求2的化合物，其中R2是烷基或芳基。
5.权利要求2的化合物，其中R3是烷基、链烯基或芳基。
6.权利要求2的化合物，其中R5是H。
7.权利要求6的化合物，其中R1是H。
8.权利要求7的化合物，其中R2是烷基或芳基。
9.权利要求8的化合物，其中R3是烷基、链烯基或芳基，Ra、Rb、Rc和Rd中的每一个是H，X是O，而Y是OC(O)Re。
10.权利要求1的化合物，其中R4是烷基、链烯基或芳基。
11.权利要求10的化合物，其中R2是烷基或芳基。
12.权利要求10的化合物，其中R3是烷基、链烯基或芳基。
13.权利要求10的化合物，其中R5是H。
14.权利要求13的化合物，其中R1是H。
15.权利要求14的化合物，其中R2是烷基或芳基。
16.权利要求15的化合物，其中R3是烷基、链烯基或芳基。
17.权利要求14的化合物，其中R3是烷基、链烯基或芳基。
18.下式的化合物 其中R1是H或烷基；R2是H、烷基、链烯基、杂芳基、环基或杂环基；R3是H、烷基、链烯基、芳基、杂芳基、环基、杂环基或(CRaRb)mX(CRcRd)nY；R4是(CRaRb)mX(CRcRd)nY；其中X是一条键、O、S或NRe；Y是OH；m和n中的每一个独立地为1、2、3、4或5；Ra、Rb、Rc和Rd中的每一个独立地为H、烷基、芳基、杂芳基、环基或杂环基；而R5是H或卤素。
19.权利要求18的化合物，其中Ra、Rb、Rc和Rd中的每一个是H；而X是O。
20.权利要求18的化合物，其中R5是H。
21.权利要求20的化合物，其中R1是H。
22.权利要求21的化合物，其中R2是烷基。
23.权利要求22的化合物，其中R3是烷基、链烯基或芳基，Ra、Rb、Rc和Rd中的每一个是H，而X是O。
24.下式的化合物 其中R1是H或烷基；R2是H、烷基、链烯基、杂芳基、环基或杂环基；R3是H、链烯基、芳基、杂芳基、杂环基或(CRaRb)mX(CRcRd)nY；R4是(CRaRb)mX(CRcRd)nY，其中X是一条键、O、S或NRe；Y是OH；m和n中的每一个独立地为1、2、3、4或5；Ra、Rb、Rc、Rd、Re和Re’中的每一个独立地为H、烷基、芳基、杂芳基、环基或杂环基；而R5是H或卤素。
25.权利要求24的化合物，其中Ra、Rb、Rc和Rd中的每一个是H；而X是O。
26.权利要求24的化合物，其中R5是H。
27.权利要求26的化合物，其中R1是H。
28.权利要求27的化合物，其中R2是烷基或芳基。
29.权利要求28的化合物，其中R3是链烯基或芳基，Ra、Rb、Rc和Rd中的每一个是H，而X是O。
30.一种治疗肿瘤的方法，包括给需要治疗的患者服用有效量的下式化合物 其中R1是H或烷基；R2是H、烷基、链烯基、芳基、杂芳基、环基或杂环基；R3和R4独立地为H、烷基、链烯基、芳基、杂芳基、环基、杂环基或(CRaRb)mX(CRcRd)nY；其中X是一条键、O、S或NRe；Y是ORe、OC(O)Re、C(O)Re、N(ReRe’)、NReC(O)Re’、S(O)2Re或SRe；m和n中的每一个独立地为1、2、3、4或5；Ra、Rb、Rc、Rd、Re和Re’中的每一个独立地为H、烷基、芳基、杂芳基、环基或杂环基；而R5是H或卤素。
31.权利要求30的方法，其中R4是(CRaRb)mX(CRcRd)nY。
32.权利要求31的方法，其中Ra、Rb、Rc和Rd中的每一个是H；X是O；而Y是ORe或OC(O)Re。
33.权利要求31的方法，其中R5是H。
34.权利要求33的方法，其中R1是H。
35.权利要求30的方法，其中R4是烷基、链烯基或芳基。
36.权利要求35的方法，其中R5是H。
37.权利要求36的化合物，其中R21是H。
38.权利要求37的化合物，其中R3是烷基、链烯基或芳基。
全文摘要
下式的稠合的三杂环化合物:R
文档编号A61K31/505GK1389463SQ0212215
公开日2003年1月8日 申请日期2002年5月31日 优先权日2001年5月31日
发明者李芳裕, 李芳全, 杨章安, 马维勇, 徐爱武, 吴秋业, 萧旭华 申请人:永信药品工业股份有限公司