专利名称：一种治疗肝炎的缓释制剂及其制备方法
技术领域：
本发明提供一种治疗肝炎的缓释制剂及其制备方法，具体地说，是以扯根菜(Penthorum chinense Pursh)为原料与药学上常用的缓释制剂辅料混合制备成的缓释制剂，本发明还涉及该缓释制剂的制备方法。
背景技术：
我国乙肝病毒携带者高达1.2亿之多，是社会上重要的传染源，给人民带来极大痛苦，也给整个社会带来了极大的经济负担，而积极采取治疗是乙肝防治过程中的重要环节。
已上市三类新药肝苏颗粒是郎酒集团·四川郎中药业有限公司引用苗族传统验方，采用乌蒙山原始森林独有的珍贵药材——古蔺扯根菜为主要原料，经过传统水提醇沉工艺制备而得的单方中药制剂。该产品对慢性活动性肝炎、乙型肝炎、急性病毒性肝炎均有显著疗效，具有降酶退黄快、滴度下降快、体征症状改善快、食欲增进快、精神复苏快的特点，同时还具有抗乙肝病毒的作用。经临床对照研究证实，肝苏颗粒对于治疗慢性活动性肝炎的临床显效率达90.1％，治疗急性黄疸性肝炎临床痊愈率达96.3％，对小儿急性乙肝的临床痊愈达90.48％，临床未见无效病例和毒副反应。
肝苏颗粒疗效明确，但是存在一系列问题，诸如剂型落后，剂量较大，患者需长期用药，服用不方便，更重要的是其作用的物质基础不明，导致在生产该药时下了一个大包围，患者在吸取有效成分的同时也吃了大量无效成分。
发明内容
针对以上问题，本发明的目的就是提供一种治疗肝炎的缓释制剂，它是一种新的剂型。
本发明的另一目的是提供该治疗肝炎的缓释制剂的制备方法。
扯根菜为双子叶植物药虎耳草科植物扯根菜的全草；性微温，味甘无毒，具有消肿利水，行气之功效，入肝肾二经，具有通经活血、行水化湿的功效。
本发明提供一种治疗肝炎的缓释制剂，它是由含有扯根菜(Penthorumchinense Pursh)的提取物与药学上可接受的缓释制剂的辅料混合制成的缓释制剂。所述的药学上可接受的缓释制剂的辅料是乙基纤维素、乙基甲基纤维素、乙基羟乙基纤维素、聚乙烯、聚氯乙烯、聚乙烯乙酸酯、聚甲基丙烯酸酯、硅橡胶、羟丙甲基纤维素、甲基纤维素、羧甲基纤维素钠、羟丙基甲基纤维素、羟丙基淀粉、聚乙烯吡咯烷酮、羧乙烯聚合体任意一种或几种的混合物。这些缓释辅料的原理是乙基纤维素(EC)为不溶性骨架材料，化学性质稳定，无毒，无药理活性，广泛用于缓释固体分散体，缓释效果好；羟丙甲基纤维素(HPMC)为亲水凝胶骨架材料，遇水或消化液膨胀，形成凝胶屏障而具控制药物溶出的性质，羟丙甲基纤维素用量少时，与乙基纤维素合用，有一定的致孔剂的作用，从而改善药物的溶出。故考滤选用乙基纤维素与羟丙甲基纤维素按一定的比例来调节药物的溶出速度。
具体地，所述的药学上可接受的缓释制剂的辅料是乙基纤维素、羟丙甲基纤维素，其中混合使用的比值范围是2∶1～1∶2。
所说的缓释制剂是缓释胶囊、缓释片剂、缓释颗粒剂、缓释丸剂，具体地是缓释胶囊。
所述的缓释制剂中含有没食子酸、槲皮素，以缓释制剂药物重量为基准，含量分别为2.05％～2.32％和3.26％～3.49％。
本发明还提供该治疗肝炎的缓释制剂的制备方法，它包含以下步骤a、制备含有扯根菜(Penthorum chinense Pursh)提取物的半成品；b、将a步骤所得半成品与药学上可接受的缓释制剂的辅料混合，制成缓释药剂。
其中a的具体步骤是i、取扯根菜加水煎煮，过滤，药液离心，取上清液，备用；ii、将i步骤得到的上清液，通过大孔吸附树脂，吸附其中的有效成分；iii、吸附了药液的大孔树脂，用水洗去树脂间未被吸附的杂质，再用有机溶剂将有效成分洗脱下来，回收有机溶剂浓缩干燥，即得半成品。
其中步骤i中扯根菜加水煎煮煎煮两次，每次一小时。步骤ii中所用的大孔吸附树脂为AB-8型、D101型、D140型、D141型、S-8型、NKA-9型、ZTC。
具体为AB-8型。
步骤iii中所用的有机溶剂是乙醇，乙醇洗树脂的具体方法是用50％～80％乙醇以6BV～12BV/h速度洗脱。
本发明还提供了该缓释制剂在制备治疗肝炎药中的应用。具体地，在制备治疗慢性活动性肝炎药、乙型肝炎、急性病毒性肝炎药中的应用。
通过制备得到干膏收率低、活性成分含量高的半成品。将药物半成品与药学上使用的缓释制剂辅料混合制备成含有一定数量、一定大小孔径孔隙的颗粒，通过颗粒骨架的孔隙、孔径和孔弯程度以及药物自身溶解度来控制药物在消化道内的释放速度，以达到缓释效果。该缓释制剂具有有效成分明确、含量高、剂量小、疗效显著、毒副作用低，剂型新颖美观。
显然，根据本发明的上述内容，按照本领域的普通技术知识和惯用手段，在不脱离本发明上述基本技术思想前提下，还可以做出其它多种形式的修改、替换或变更。
以下通过实例形式的具体实施方式
，对本发明的上述内容再作进一步的详细说明。但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实例。凡基于本发明上述内容所实现的技术均属于本发明的范围。
图1半成品生产工艺流程及工艺参数图2制剂成型工艺流程及工艺参数图3没食子酸对照品色谱4槲皮素对照品色谱5本发明药物色谱6三批本发明药物的体外释放度曲线(以没食子酸为指标)图7三批本发明药物的体外释放度曲线(以槲皮素为指标)具体实施方式
本发明是由含有扯根菜(Penthorum chinense Pursh)的提取物与药学上可接受的缓释制剂的辅料混合制成的缓释制剂。它包括制备含有扯根菜(Penthorum chinense Pursh)提取物的半成品及所得半成品与药学上可接受的缓释制剂的辅料混合，制成缓释药剂。
具体实施方式
是实例1 扯根菜(Penthorum chinense Pursh)半成品生产工艺取扯根菜1000g，加水12200ml浸泡至透心，加热煎煮一小时，滤过，再加水10000ml煎煮两次，每次一小时，滤过，合并药液。药液浓度以药材含量计为0.04～0.1g生药/ml，以浸膏含量计为6.65～16.4mg/ml。药液冷却至室温，高速离心20～30分钟，使药液达到澄清。上清液调节PH值到4～6，上于湿重为500g的AB-8型大孔吸附树脂上，上样流速为4BV～8BV/h(BV为树脂床体积)。待上样完成后，静置半小时～1小时，再用6BV～10BV蒸馏水以6BV～12BV/h速度流过树脂柱，洗至流出液几乎无色，molish反应阴性为止。再用2BV～4BV 50％～80％乙醇以6BV～12BV/h速度，洗脱被吸附成分，洗至流出液几乎无色。收集醇洗液，减压回收乙醇，浓缩药液，再真空干燥得半成品。所得半成品约20g，干膏收率为1.8～2.5％。其中大孔吸附树脂除了AB-8型(南开大学化工厂)，还可以用D101型(南开大学化工厂)、D140、D141(化工部晨光化工研究院)、S-8型、NKA-9型(南开大学化工厂)、ZTC(黄酮专用天津正天成澄清技术有限公司)等代替。
实例2 制剂成型工艺取乙基纤维素5～10g、羟丙甲基纤维素5～10g，加500～1000ml 70～95％乙醇溶解，再加250g扯根菜半成品，使其溶解在辅料溶液中，减压回收完乙醇，所得稠浸膏加25～50g乳糖，混合均匀，用95％乙醇制粒，过16目筛，50℃烘半小时，再过14目筛整粒，所得颗粒装1号胶囊1000粒。
实例3 没食子酸、槲皮素含量测定本发明药物中含有没食子酸和槲皮素，采用HPLC分别对两种成分进行含量测定。
1、没食子酸的含量测定1.1 仪器与试药惠普公司AgilentHPLC1100型系统，惠普P-586MMX200微机。
没食子酸对照品中国药品生物制品检定所提供。
试剂甲醇为高效液相色谱纯；水为重蒸馏水。
1.2 色谱条件色谱柱ODS-3(250×4.6mm，5μm)；流动相乙腈0.05％H3PO4(5∶95)；流速1ml/min；紫外检测波长275nm；色谱柱温30℃；检测灵敏度0.04AUFS。
1.3 样品测定供试品溶液的制备 精密称取本发明药物内容物0.2g，置50ml锥形瓶中，加甲醇25ml超声使溶解，转移至50ml量瓶中，再加甲醇定容，摇匀，用0.45um的微孔滤膜过滤，作为供试品溶液。
对照品溶液的制备 取没食子酸对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含0.012mg的溶液，作为对照品溶液。
测定法 精密吸取对照品溶液和供试品溶液各20μl，注入液相色谱仪，测定，即得。结果见表1表1 本发明药物中没食子酸的含量测定结果批号 没食子酸含量(mg/g) 平均值(mg/g)001001 20.4 21.0 20.220.5001002 21.4 20.9 21.221.2001003 23.7 22.8 23.123.22、槲皮素的含量测定2.1 仪器与试药惠普公司AgilentHPLC1100型系统，惠普P-586MMX200微机。
槲皮素对照品中国药品生物制品检定所提供。
试剂甲醇为高效液相色谱纯；水为重蒸馏水。
2.2 色谱条件色谱柱ODS-3柱(250×4.6mm，5μm)；流动相甲醇-0.2％磷酸溶液(55∶50)；流速1ml/min；紫外检测波长360nm；色谱柱温40℃；检测灵敏度0.04AUFS。
2.3 样品测定供试品溶液的制备精密称取本发明药物0.2g，置50ml圆底烧瓶中，加3％的盐酸甲醇液25ml，加热回流1.5小时，冷却，加甲醇定容至50ml，摇匀，用0.45um的微孔滤膜过滤，作为供试品溶液。
对照品溶液的制备 取槲皮素对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含0.012mg的溶液，作为对照品溶液。
测定法 精密吸取对照品溶液和供试品溶液各20μl，注入液相色谱仪，测定，即得。结果见表2表2 本发明药物中槲皮素的含量测定结果批号槲皮素含量(％) 平均值(％)001001 3.39 3.44 3.38 3.40001101 3.27 3.21 3.33 3.27010101 3.20 3.31 3.28 3.26实例四 体外释放度测定普通肝苏胶囊作为对照，以PH＝7.4磷酸盐缓冲液作为溶出介质，采用转篮法进行测定。具体为转速100±1r/min，温度37±0.5℃，释放介质为900mlPH＝7.4的磷酸盐缓冲液。在上述条件下，于不同时间点取样5ml(取样后立即补加5ml溶出介质)，加磷酸调PH＝3-4，用乙酸乙酯萃取三次，每次10ml，合并萃取液，回收乙酸乙酯，残渣加甲醇溶解成10ml，于275nm处测定其吸光度，并计算释放度。
按实例1与实例2的方法制得三批样品(001001；001002；001003)，并采用测定没食子酸、槲皮素释放量为指标，考察本发明药物的释放度，按前述方法测定其体外释放度，结果见下表表3 三批样品的体外释放度测定结果(以没食子酸为指标)批号 时 间(h)1 2 4 6 8 10 1200100126.335.251.062.577.183.488.727.135.451.460.475.482.187.626.536.149.861.478.984.686.226.034.952.162.874.880.588.425.836.351.759.877.581.783.927.235.651.261.774.081.783.000100224.032.653.462.874.184.487.023.131.952.863.573.684.789.523.832.054.963.375.286.091.324.533.350.160.472.683.586.225.632.549.961.672.082.889.923.831.452.263.573.485.191.100100325.434.254.963.474.080.185.323.233.853.664.375.180.985.924.935.454.765.173.681.284.224.835.954.662.273.282.484.125.133.152.063.775.581.583.325.732.955.064.374.882.884.800100126.535.651.261.476.382.386.3X±SD ±0.57 ±0.53 ±0.78 ±1.17 ±1.85 ±1.44 ±2.3800100224.132.352.262.573.584.489.2X±SD ±0.84 ±0.66 ±1.93 ±1.26 ±1.13 ±1.14 ±2.1200100324.934.254.163.874.481.584.6X±SD ±0.87 ±1.21 ±1.16 ±0.99 ±0.90 ±0.99 ±0.93
表4 三批样品的体外释放度测定结果(以槲皮素为指标)批号 时间(h)1 2 4 6 8 10 12001001 27.437.656.267.977.987.395.628.038.056.967.076.388.896.427.936.457.365.276.285.994.329.336.257.666.777.087.696.226.438.156.464.475.686.296.824.336.158.868.376.388.097.4001002 24.935.855.565.173.288.194.323.634.255.064.372.187.694.625.836.256.866.574.787.293.727.335.858.363.773.586.392.824.234.156.663.272.985.492.226.434.957.465.572.285.894.9001003 25.335.355.163.275.184.294.425.835.955.763.074.484.194.124.734.454.660.573.683.395.826.634.056.464.375.582.993.225.533.256.062.874.885.095.524.036.153.362.673.884.492.7001001 27.237.157.266.676.687.396.1X±SD ±1.71 ±0.93 ±0.94 ±1.52 ±0.80 ±1.10 ±1.07001002 25.435.256.664.773.186.793.8X±SD ±1.39 ±0.89 ±1.21 ±1.22 ±0.96 ±1.07 ±1.06001003 25.334.955.262.774.584.094.3X±SD ±0.90 ±1.26 ±1.12 ±1.25 ±0.74 ±0.76 ±1.23结论普通肝苏胶囊在体外的释放较快，几乎是在胶囊崩解后全部释放。本发明药物释放缓慢，说明达到缓释的效果。
用DHBV感染鸭作为乙型肝炎动物模型来研究人类乙型肝炎发病机理、病毒复制过程及筛选有效的治疗药物，已为国内外学者所公认。文献已报道有关扯根菜提取物在对抗鸭乙型肝炎病毒有疗效；且有保肝解毒作用。
以下通过试验来进一步阐述本发明所述药物的有益效果。
实验一 本发明药物在狗体内的药代动力学及药效动力学1、本发明药物在狗体内的药代动力学研究通过比较了本发明药物与肝苏普通胶囊(来源于缓释胶囊的半成品，不加缓释辅料直接装胶囊而得)的体外释放度后，表明本发明药物的释放明显慢于肝苏普通胶囊，由于没食子酸是本发明药物中的有效成分之一，为了考查体外释放度的变化是否导致本发明药物体内药代动力学的变化，故以没食子酸作为其中的一个特征成分，从而建立了狗服用本发明药物后血样的处理、没食子酸的含量测定方法，并比较了本发明药物与肝苏普通胶囊在狗体内的药动学过程。
1.1 仪器与试药Agilent 1100型HPLC系统(惠普公司)LD4-2低速离心机(北京医用离心机厂)TGL-16G台式高速离心机(上海医用分析仪器厂)XK96-A快速混匀器(江苏姜堰市新康仪器厂)本发明药物(自制，批号001003，规格0.28g/粒)肝苏普通胶囊(自制，批号001003，规格0.26g/粒)没食子酸对照品(中国生物制品检定所，批号0831-9501供含测用)1.2 方法采用随机实验设计方法，将4只狗随机分为两组，禁食12小时，取空白血清，再分别灌胃本发明药物0.211g/kg、肝苏普通胶囊0.185g/kg(相当于16.67g生药，临床成人日用剂量20倍)，灌胃后在规定的时间内取血5ml，室温放置30min，于低速离心机中离心10min，取血清样品2ml，再加2mol/L的HCl 1ml，快速混匀，加甲醇5ml，于快速离心器上快速混匀5min，低速离心，取上清液，再将沉淀加甲醇5ml，快速混匀5min，低速离心，将上清液合并，水浴蒸干，残渣加1ml甲醇使溶解，高速离心10min，取上清液，按上述色谱条件测定不同时间血清样品中没食子酸的含量。
表5 单剂量口服本发明药物后血清样品中没食子酸的经时血药浓度(μg/ml)时间(h) 1 2 3456 789 1013.325.8110.4518.2521.5720.20 16.1712.446.641.3324.016.3410.7119.6923.3219.97 16.2312.585.971.40X3.676.0810.5818.9722.4520.09 16.2012.516.311.37表6单剂量口服肝苏胶囊后血清样品中的没食子酸的经时血药浓度(μg/ml)时间(h) 1234567 89 101 13.2723 2228.2024.8916.599.95 4.981.67 --- ---2 11.5422.6125.3823.1114.637.57 4.051.32 --- ---X 12.4123.9226.7924.0015.618.76 4.521.50 --- ---
注经时血药浓度，是指在服药后不同时间段，测定得血药浓度，以此来判断药物在体内的释放、吸收、分布、代谢、排泄情况，选择该指标可反映缓释效果。
1.3 结果处理1.3.1 本发明药物及普通胶囊在狗体内的药动学参数经3P87药动学程序对表5、表6所列数据进行处理来选择室模型(梁文权.生物药剂学与药物动力学.人民卫生出版社.2000年6月)，该程序是药理实验中的一种常用的实验设计方法。拟合优度参数(“拟合度参数”是药理实验对实验数据进行科学处理的一种方法，使实验数据尽可能与真实值相近。)分别见表7、表8，室模型间的检验结果见表9、表10。
表7 本发明药物平均经时血药浓度的拟合优度参数Rec. No.Weighted Goodness Max.Max. RunNo. MeanWT sum of R Rof Error Error AICNo. Comp SquaresSquaresFit C-CI％Test1 1 1 1 0.154E+030.82030.6484 5.067 6.3398.758.37232 1 1 2 0.198E+030.81640.5480 7.035 8.27123.1 64.88233 1 1/C1 0.161E+020.82670.9632 1.638 9.7650.535.79134 1 1/C2 0.196E+020.86400.9552 2.215 10.06 79.641.76925 1 1/C/C 1 0.148E+010.81970.9966 0.496 12.84 57.211.91136 1 1/C/C 2 0.153E+010.86910.9965 0.619 12.69 56.516.2692表8 肝苏胶囊平均经时血药浓度的拟合优度参数Rec. No. WeightedGoodness Max. Max. RunNo. Mean WT sum of R R of ErrorErrorAICNo. CompSquaresSquares Fit C-CI ％ Test11 1 1 0.386E+020.97460.94093.106 3.74376.3 37.225 321 1 2 0.880E+030.5873-.347020.976 23.92100.066.239 131 1/C 1 0.621E+010.94530.99051.246 5.86 172.722.611 341 1/C 2 0.444E+020.57160.93204.713 23.92100.042.349 151 1/C/C 1 0.101E+010.89660.99850.503 8.70 48.4 8.080361 1/C/C 2 0.262E+010.57190.99601.144 23.92100.019.697 1
表9 本发明药物平均经时血药浓度室模型之间F检验Between 1 and 2 compartmentFvalue(Weight 1) -.4440145P value P＞0.05Fvalue(Weight 1/C)-.3589132P value P＞0.05Fvalue(Weight 1/C/C) -7.036652E-02Pvalue P＞0.05表10 肝苏普通胶囊平均经时血药浓度室模型之间F检验Between 1 and 2 compartmentFvalue(Weight 1) -.9561386P value P＞0.05Fvalue(Weight 1/C)-.8601718P value P＞0.05Fvalue(Weight 1/C/C) -.6140975P value P＞0.05由表9、表10可见，各室模型之间均无显著性差异。再根据表7、表8中，按AIC最小原则，本发明药物和普通胶囊均选择一室模型、权重(权重指某一指标在衡量实验结果好坏中所占重要程度)为1/C/C对个体经时血药浓度数据进行拟合。计算的各组药动学参数据见表11、表12表11 本发明药物在狗体内的药动学参数No A Ke Kat1/2(Ka) t1/2(Ke) T(peak) C(max) AUC CL/F(s)Mg/ml 1/h 1/h h hh μg/ml (μg/ml)*hmg/h/μg/ml1 149.2440 0.3927 0.46761.4824 1.7651 2.33079.5703 60.8638 1.93222 160.0600 0.3946 0.46941.4767 1 7565 2.320610.206464.6259 1.8197mean154.6520 0.3937 0.46851.4795 1.7608 2.32579.8884 62.7448 1.8759
表12 肝苏普通胶囊在狗体内的药动学参数NoA Ke Ka t1/2(Ka) t1/2(Ke) T(peak) C(max)AUC CL/F(s)Mg/ml 1/h 1/h h h hμg/ml(μg/ml)*h mg/h/μg/ml1 2120.4993 0.5819 0.5979 1.15931.19111.6952 21.1260 97.3606 1.20792 2105.1035 0.6089 0.6247 1.10951.13831.6213 19.8150 87.3320 1.3466mean 2112.8013 0.5954 0.6113 1.13441.16471.6582 20.4705 92.3463 1.2772表13 本发明药物与普通胶囊药动学参数据比较参数 AUC(0→∞) CmaxTmax MRT缓释胶囊 117.645821.57 5 5.5410121.736723.32 5 5.4598平均 119.691222.45 5 5.5004普通胶囊 124.179828.20 3 3.5625112.283525.38 3 3.5282平均 117.651726.79 3 3.4838成组T检验值0.2322 2.6153 44.3570P＞0.05 P＞0.05P＜0.01注t0.05，2＝4.303；t0.01，2＝9.925成组是指两组别的均值进行T检验，根据所得T值大小判断两组数据是否有显著性差异。
从表13可以看出，本发明药物与普通胶囊的Cmax(最大血药浓度)与AUC(AUC指药时曲线下面积，可反映药物在体内一段时间内累积释放量。)无显著性差异，而达峰时间为普通胶囊的1.67倍，平均滞留时间(MRT)有极显著性差异，表明本发明药物有明显的缓释作用，能在体内较长时间的保持较高的血药浓度。
2、本发明药物在狗体内的药效动力学研究本发明药物与肝苏普通胶囊的体外释放度、本发明药物及肝苏普通胶囊在狗体内的药代动力学，结果表明本发明药物的体外释放明显慢于肝苏普通胶囊，本发明药物在狗体内药代动力学表明，本发明药物的达峰时间、体内消除都较肝苏普通胶囊慢，为了考查本发明药物体外释放、药代动力学的改变是否导致了本发明药物的药效的改变，故以SGPT(血清谷丙转氨酶)为指标，该指标可特异性反映肝脏的病变程度，功能正常与否。测定狗给予本发明药物后不同时间体内的SGPT含量。从而来评价本发明药物的药效学。
2.1 仪器与试药Beckman 700型全自动生化仪(美国Beckman公司)；LDR4-8.4C低速冷冻离心机(北京离心机厂)；丙氨酸转移酶(ALT/GPT)试剂盒，规格4*50ml，批号000601)；本发明药物(自制)。
2.2 实验对象杂种犬8只，体重10-15kg，雌雄各半。
2.3 试验方法将8只杂种犬随机分为4组，每组2只，禁食16小时，CCL4肝损伤模型组、本发明药物组、肝苏普通胶囊组均腹腔注射40％四氯化碳花生油溶液0.2ml/kg，正常对照组腹腔注射等容积生理盐水。本发明药物及普通胶囊分别灌胃给予本发明药物0.211g/kg、肝苏普通胶囊内容物0.185g/kg(相当于16.67g生药，临床成人日用剂量20倍)，正常对照组和CCL4肝损伤模型对照组灌胃给予等容积蒸馏水，连续给药3天后，于造模后16h进行末次给药。分别于末次给药后15min、30min、1h、2h、4h、6h、8h、12h、16h、24h、36h、48h采集实验犬静脉血，静置1小时后，2500rpm，分离血清，于Beckman 700型全自动生化仪上测试血清SGPT值。SGPT升高表明肝脏受损加剧，升高抑制率可反映药物对肝脏的保护作用，抑制率越高，则保护作用越强。
2.4 试验结果表14 狗灌胃本发明药物后不同时间血清中SGPT值组别 服给药后SGPT值(U/mmol)15min 30min 1h 2h 4h 6h 8h 12h 16h 24h 36h 48h正常对照组78.32 85.39 79.4580.6477.9881.5680.3889.4292.0377.8375.3171.59±17.23 ±20.18 ±19.24 ±21.60 ±17.32 ±21.33 ±24.58 ±20.38 ±26.41 ±19.40 ±20.68 ±15.71CCL4肝损伤375.2 389.3 385.7389.4423.5441.3447.8513.1487.6421.3372.7319.5模型组±75.46 ±89.12 ±87.55 ±81.51 ±72.36 ±81.60 ±79.56 ±123.6 ±91.25 ±115.6 ±128.4 ±97.56SGPT值379.1 355.9 385.5382.9443.1441.1457.1473.8429.8441.3394.9346.3升高率(％)肝苏缓释 365.3 341.7 311.7301.9327.5331.2347.5420.7417.5401.5367.8311.5胶囊组±61.57 ±77.28 ±60.32 ±78.82 ±63.57 ±75.60 47.83±78.42 ±41.44 ±63.42 ±75.34 ±10.34SGPT值366.4 300.2 292.3274.4320.0306.1332.3370.5353.6415.9388.4335.1升高率(％)SGPT值3.35 15.65 20.1823.7828.3430.6027.3021.8017.735.76 3.23 1.64升高抑制率(％)肝苏普通 357.4 336.8 310.2289.6322.4351.8389.1460.8441.7419.6373.6316.4胶囊组±81.62 ±71.23 ±78.16 ±63.45 ±80.32 ±59.62 ±85.43 ±79.32 ±69.83 ±75.42 ±71.52 ±85.72SGPT值升高率(％)356.3 294.4 290.4259.132.24331.3384.1415.2380.0439.1396.1342.0SGPT值6.01 17.28 24.1632.3327.2324.8915.9712.3711.422.20 1.89 1.24升高抑制率(％)
2.5 结果处理2.5.1 本发明药物及普通胶囊药效动力学参数比较经3P87药动学程序对表14所列数据进行处理来选择合适的室模型，拟合优度参数分别见表15、表16，室模型间的检验结果见表17、表18。
表15 本发明药物平均药效-时间的拟合优度参数Rec.No. Weighted GoodnessMax.Max. RunNo. Mean WTsum of R R of Error Error AICNo. Comp Squares Squares Fit C-CI％Test11 1 1 0.688E+020.9747 0.94862.7654.00114.6 56.772421 1 2 0.157E+020.9941 0.98831.6172.4048.945.040931 1/C1 0.442E+010.9706 0.99670.7434.1640.525.831541 1/C2 0.172E+010.9932 0.99870.5362.3540.818.532651 1/C/C 1 0.313E+000.9644 0.99980.1984.4032.4-5.946561 1/C/C 2 0.245E+000.9862 0.99980.2023.5736.3-4.9026表16 肝苏普通胶囊平均药效-时间的拟合优度参数Rec. No.Weighted Goodness Max. Max. RunNo. Mean WTsum of R Rof Error Error AICNo. Comp Squares Squares Fit C-CI ％ Test11 1 1 0.317E+020.9875 0.9749 1.991 2.93 80.149.482 921 1 2 0.309E+020.9877 0.9756 2.268 2.88 83.653.154 931 1/C1 0.383E+010.9875 0.9970 0.692 3.25 74.324.105 941 1/C2 0.293E+010.9871 0.9977 0.699 3.76 55.224.907 1051 1/C/C 1 0.124E+010.9814 0.9990 0.394 4.83 71.110.606 761 1/C/C 2 0.410E+000.9831 0.9997 0.261 5.16 45.21.3027
表17 本发明药物平均药效-时间室模型之间F检验Between 1 and 2 compartmentFvalue(Weight 1) 10.14769P value P＜0.05Fvalue(Weight 1/C)4.692236P value P＞0.05Fvalue(Weight 1/C/C) .8381525P value P＞0.05表18 肝苏普通胶囊平均经时血药浓度室模型之间F检验Between 1 and 2 compartmentFvalue(Weight 1)8.311858E-02P valueP＞0.05Fvalue(Weight 1/C) .9163609P valueP＞0.05Fvalue(Weight 1/C/C)6.091291P valuep＜0.05由表17、表18可见，当权重为1时，本发明药物室模型之间有显著性差异。当权重为1/C/C时，肝苏普通胶囊室模型之间有显著性差。再根据AIC最小原则，按表15、表16中AIC值，本发明药物应选择、一室模型、权重为1/C/C对平均药效-时间数据进行拟合；肝苏普通胶囊选择二室模型、权重为1/C/C对平均药效-时间数据进行拟合，计算的各药效动力学参数据见表19表19 本发明药物在狗体内的药效动力学参数No A Ke Ka t1/2(Ka) t1/2(Ke) T(peak) C(max)AUC CL/F(s)μg/ml1/h 1/h h h hμg/ml(μg/ml)*h mg/h/μg/ml139.3382 0.0698 1.2075 0.57409.93162.6831 31.1177 531.06720.2214242.1205 0.0703 0.8335 0.83169.85843.3621 30.7109 548.53650.2144mean 40.7293 0.0701 1.0205 0.70289.89503.0226 30.9143 539.80190.2179
表20 肝苏普通胶囊在狗体内的药效动力学参数No A α Bβ Ka t1/2(Ka) t1/2α t1/2β K21 K10μg/ml1/h μg/ml 1/h 1/h h hh 1/h 1/h150.8605 0.1511 1.3980 0.0086 1.0634 0.65184.5868 80.5029 0.01300.1001253.7540 0.1457 1.3645 0.0007 0.9814 0.70634.7575 1007.1641 0.00490.0205mean 52.3073 0.1484 1.3812 0.0046 1.0224 0.67914.6721 543.83350.00890.0603表21 本发明药物及普通胶囊药效动力学参数比较参数AUC(0→∞)SGPT升高抑制率max(％) Tmax(h)MRT(h)缓释胶囊576.01 72 30.106 15.8789590.9988 31.106 15.4249平均583.5081 30.606 15.6519普通胶囊398.8494 32.012 12.7539438.2022 32.652 14.2610平均418.5258 32.332 13.5074成组T检验值 7.83662.9138 2.7250P＜0.05 P＞0.05P＞0.05注t0.05，2＝4.303；t0.01，2＝9.925从表21可以看出，本发明药物的AUC与普通胶囊有显著性差异，Tmax(血药浓度最大时的时间)为普通胶囊的3倍、MRT、最大SGPT升高抑制率无显著性差异。
2.5.2 本发明药物在狗体内的药代动力学与药效动力学的相关性研究表22 没食子酸在狗体内的血药浓度及本发明药物对狗体内SGPT的影响时间(h) 12468血药浓度(μg/ml) 3.67 6.08 18.9720.0912.51SGPT升高抑制率(％)20.1823.7828.3430.6027.30将本发明药物中没食子酸在狗体内的血药浓度C(g/ml)作为自变量，本发明药物对狗体内SGPT升高抑制率P(％)作为应变量进行线性回归，得方程为P＝19.539+0.530C，r＝0.956，df＝n-2＝3，查相关系数据临界相对值得r3，0.05＝0.878，r＞r3，0.05，表明药代动力学与药效动力学显著相关。
2.3 结论通过该实验的目的进一步证明缓释胶囊的缓释效果，因为仅仅通过药代动力学证明其血药浓度的缓释尚不能充分说明其缓释效果，只有结合特异的药理学指标变化才能更进一步证明其缓释效果。缓释胶囊较之普通胶囊的优点就是缓释、减少服用次数达到方便患者的目的。
从以上室模型的选择、药物动力学、药效动力学参数的估计以及体内外相关性、药动学与药效学相关性的考查，表明本发明药物在狗体内的药动学、药效学为一室模型，且有较好的体内外、药动-药效相关性。达峰时间及体内平均滞留时间都较肝苏普通胶囊长，达到了较好的缓释效果。
通过实施例的方式来进一步说明本发明，但并不因此将本发明限制在所述的实施例范围之中。
实施例1扯根菜(Penthorum chinense Pursh)半成品生产工艺取扯根菜1000g，加水12200ml浸泡至透心，加热煎煮一小时，滤过，再加水10000ml煎煮两次，每次一小时，滤过，合并药液。药液浓度以药材含量计为0.08g生药/ml，以浸膏含量计为13.124mg/ml。药液冷却至室温，高速离心30分钟，使药液达到澄清。上清液调节PH值到5，上于湿重为500g的AB-8型大孔吸附树脂上，上样流速为6BV/h(BV为树脂床体积)。待上样完成后，静置45分钟，再用8BV蒸馏水以10BV/h速度流过树脂柱，洗至流出液几乎无色，molish反应阴性为止。再用3BV 70％乙醇以10BV/h速度，洗脱被吸附成分，洗至流出液几乎无色。收集醇洗液，减压回收乙醇，浓缩药液，再真空干燥得半成品。所得半成品约20g，干膏收率为2.1％。
实施例2 缓释胶囊剂的成型工艺取乙基纤维素5g、羟丙甲基纤维素5g，加1000ml 85％乙醇溶解，再加250g扯根菜半成品，使其溶解在辅料溶液中，减压回收完乙醇，所得稠浸膏加25g乳糖，混合均匀，用95％乙醇制粒，过16目筛，50℃烘半小时，再过14目筛整粒，所得颗粒装1号胶囊1000粒。
实施例3 缓释片剂制备工艺半成品工艺同缓释胶囊，将乙基纤维素(EC)3.3g、羟丙甲基纤维素(HPMC15KM)6.6g，加1000ml 85％乙醇溶解，再加250g扯根菜半成品，使其溶解在辅料溶液中，减压回收完乙醇，所得稠浸膏加25g乳糖，混合均匀，用95％乙醇制粒，过16目筛，50℃烘半小时，再过14目筛整粒，压片，即得。
实施例4 缓释颗粒剂制备工艺半成品工艺同前，制剂成型工艺为乙基纤维素(EC)6.6g、羟丙甲基纤维素(HPMC15KM)3.3g，加1000ml 85％乙醇溶解，再加250g扯根菜半成品，使其溶解在辅料溶液中，减压回收完乙醇，所得稠浸膏加乳糖10g、蔗糖15g适量混匀，95％乙醇制粒，过一号筛(12～14目)挤压制粒，60℃烘半小时，使含水在2％以内，过四号筛(60目)除去细小颗粒，即得。
实施例5 缓释蜜丸的制备半成品工艺同前，制剂成型工艺为乙基纤维素(EC)5g、羟丙甲基纤维素(HPMC15KM)5g，加1000ml 85％乙醇溶解，再加250g扯根菜半成品，使其溶解在辅料溶液中，减压回收完乙醇，所得稠浸膏加乳糖25适量混匀，70℃烘干，粉碎过六号筛，得细粉，加入适量炼蜜充分混匀，制丸块，使用自动制丸机制丸条、分粒、搓圆，制丸粒，80℃干燥，即得。
权利要求
1.一种治疗肝炎的缓释制剂，其特征在于它是由含有扯根菜(Penthorumchinense Pursh)的提取物与药学上可接受的缓释制剂的辅料混合制成的缓释制剂。
2.根据权利要求1所述治疗肝炎的缓释制剂，其特征在于所述的药学上可接受的缓释制剂的辅料是乙基纤维素、乙基甲基纤维素、乙基羟乙基纤维素、聚乙烯、聚氯乙烯、聚乙烯乙酸酯、聚甲基丙烯酸酯、硅橡胶、羟丙甲基纤维素、甲基纤维素、羧甲基纤维素钠、羟丙基甲基纤维素、羟丙基淀粉、聚乙烯吡咯烷酮、羧乙烯聚合体中的任意一种或几种的混合物。
3.根据权利要求2所述治疗肝炎的缓释制剂，其特征在于所述的药学上可接受的缓释制剂的辅料是乙基纤维素、羟丙甲基纤维素，其中混合使用的比值范围是1∶2～2∶1。
4.根据权利要求1所述的治疗肝炎的缓释制剂，其特征在于所说的缓释制剂是缓释胶囊、缓释片剂、缓释颗粒剂、缓释丸剂。
5.根据权利要求4所述的治疗肝炎的缓释制剂，其特征在于所说的缓释制剂是缓释胶囊。
6.根据权利要求4、5所述的治疗肝炎的缓释制剂，其特征在于它含有没食子酸、槲皮素，以缓释制剂药物重量为基准，没食子酸含量为2.05％～2.32％，槲皮素含量为3.26％～3.49％。
7.权利要求1所述的治疗肝炎的缓释制剂的制备方法，它包含以下步骤a、制备含有扯根菜(Penthorum chinense Pursh)提取物的半成品；b、将a步骤所得半成品与药学上可接受的缓释制剂的辅料混合，制成缓释制剂。
8.根据权利要求7所述治疗肝炎的缓释制剂的制备方法，其特征在于步骤a的具体步骤是i、取扯根菜加水煎煮，过滤，药液离心，取上清液，备用；ii、将i步骤得到的上清液，通过大孔吸附树脂，吸附其中的有效成分；iii、吸附了药液的大孔树脂，用水洗去树脂间未被吸附的杂质，再用有机溶剂将有效成分洗脱下来，回收有机溶剂浓缩干燥，即得半成品。
9.根据权利要求8所述治疗肝炎的缓释制剂的制备方法，其特征在于步骤a的具体步骤ii中所用的大孔吸附树脂为AB-8型、D101型、D140型、D141型、S-8型、NKA-9型、ZTC。
10.根据权利要求9所述治疗肝炎的缓释制剂的制备方法，其特征在于步骤a的具体步骤ii中所用的大孔吸附树脂为AB-8型。
11.根据权利要求8所述治疗肝炎的缓释制剂的制备方法，其特征在于步骤a的具体步骤iii中所用的有机溶剂是乙醇。
12.根据权利要求11所述治疗肝炎的缓释制剂的制备方法，其特征在于步骤a的具体步骤iii中乙醇洗树脂的具体方法是用50％～80％乙醇以6BV～12BV/h速度洗脱。
13.权利要求1～6所述的缓释制剂在制备治疗肝炎药中的应用。
全文摘要
本发明提供了一种治疗肝炎的缓释制剂及其制备方法，具体地说，含有扯根菜(Penthorum chinense Pursh)的提取物与药学上可接受的缓释制剂的辅料混合制成的缓释制剂。该缓释制剂含有没食子酸、槲皮素，以缓释药物重量为基准，含量分别为2.05％～2.32％和3.26％～3.49％。通过制备得到干膏收率低、活性成分含量高的半成品。该制剂具有有效成分明确、含量高、剂量小、疗效显著、毒副作用低，剂型新颖美观。
文档编号A61P1/16GK1541665SQ0311777
公开日2004年11月3日 申请日期2003年4月29日 优先权日2003年4月29日
发明者杨明, 杨荣平, 谢兴亮, 杨 明 申请人:成都中医药大学