多药物配体缀合物的制作方法

专利名称：：多药物配体缀合物的制作方法
技术领域：
：本发明涉及用于靶向药物释放的组合物和方法。尤其是，本发明涉及含两种或多种药物及其类似物和衍生物的配体缀合物，例如结合维生素受体的化合物和两种或多种药物的缀合物。背景哺乳动物免疫系统提供识别和消除肿瘤细胞、其它致病细胞和侵入性外源病原体的方式。虽然免疫系统通常提供强防御线，但有很多其中癌细胞、其它致病细胞或感染因子逃避宿主免疫反应并增生或持续与宿主致病性相伴的情况。已开发出消除例如复制瘤的化疗药物和放疗。但是，许多现有的化疗药物和放疗方案有不良副作用，因为它们的作用不仅破坏致病细胞，而且也影响正常宿主细胞例如造血系统的细胞。这些抗癌药物的不良副作用说明对开发新的对致病细胞群体有选择性和对宿主毒性小的疗法有需要。研究人员开发了通过使细胞毒化合物靶向此类细胞以破坏致病细胞的治疗方案。多个此类方案使用与抗体缀合的毒素，这些抗体与抗原特异性结合，或通过致病细胞过度表达，以期望使释放至正常细胞的毒素最少。用该方法开发出由导向致病细胞上的特异性抗原的抗体组成的某些免疫毒素，抗体与毒素例如蓖麻蛋白、假单胞菌外毒素、白喉(Diptheria)毒素和肿瘤坏死因子连接。这些免疫毒素靶向致病细胞例如具有^皮抗体识别的特异性抗原的肿瘤细胞(01snes,S.,/mmw"o/.7b^y,10,pp.291-295,1989;Melby,E丄.，C朋cwi^s.,53(8),pp.1755-1760，1993;Better,M.D.,PCT国际公布号WO91/07418,1991年5月30曰公布)。另一种靶向宿主中致病细月包群体例如癌细胞或异源病原体的方法是加强宿主对致病细胞的免疫应答，避免也可具有独立宿主毒性的化合物的给药需要。据报道，免疫疗法的一个策略是使抗体例如基因工程制备的多亚基抗体与肿瘤细胞表面结合，以暴露细胞表面上的抗体的恒定区，从而通过各种免疫系统介导的过程诱导杀灭肿瘤细胞(DeVita,V.T.,77era"o/Ca"cer，2ded.Philadelphia,Lippincott,1995;Soulillou,J.P.,美国专利号5,672,486)。但是因为难以定义肿瘤特异性抗原，所以这些方法很复杂。发明概述本文中阐述药物及其类似物和衍生物的配体缀合物。这些缀合物包含结合细胞受体的配体，这些配体与可輩巴向细胞的两种或多种药物共价连接。本文中所述缀合物还可包含使配体与药物连接的多价接头。在一个实施方案中，阐述结合受体的药物释^:缀合物。该药物释放缀合物含有细胞表面受体的配体、两种或多种药物或其类似物或衍生物，和任选多价接头，该缀合物通常可由下式代表(B)-(L)-(D)n其中(B)代表结合受体的部分；(D)代表通过结合受体的部分靶向细胞的药物或其类似物或衍生物，(L)代表多价4^头，n为大于l的整数。多价接头(L)可含有互相共1^介连接的多个接头。例如，多价接头(L)可含有一个或多个间隔基接头(ls),和/或可分离接头(lr),各自互相连接并通过一个或多个杂原子接头(k)与配体和药物连接。可选择这些不同的接头，按任何顺序排列，构建多价接头(L)。例如，可由一个或多个以下二价接头构建多价接头(L):<formula>formulaseeoriginaldocumentpage15</formula>其中a、b、c、d和e是整数例如在0-约4范围的整数，(ls)、(1H)和(lr)分别是间隔基接头，可分离接头、杂原子接头。可用于构建本文中所述多价接头的二价接头的其它示例性实例在美国专利申请序号10/765,336(也可在美国专利申请公布号US2005/0002942Al找到)和PCT国际公布号WO2006/012527中有阐述，所述文献通过引用整体结合到本文中。应理解，多价接头可将结合受体的部分与两种或多种药物按多种结构构型连接，包括但不限于以下示例性通式<formula>formulaseeoriginaldocumentpage16</formula>其中B是结合受体的配体，(L1)、(l)和(l^)各自是多价^l妄头，由一个或多个间隔基、可分离和/或杂原子接头构成，且(D1)、02和03各自是药物或其类似物或衍生物。其它变型包括其它药物或其类似物或衍生物、其它接头和(B)、(L)和(D)各自排列的其它构型也包括在本文中。在一种变型中，结合一个以上受体的配体包含在本文中所述药物释放缀合物中，药物释放缀合物包括但不限于以下示例性通式<formula>formulaseeoriginaldocumentpage16</formula>其中各B是结合受体的配体，(L1)、(L"和(I^)各自是多价接头，由一个或多个间隔基、可分离和/或杂原子接头构成，(D1)、02和03各自是药物或其类似物或衍生物。其它变型包括其它药物或其类似物或衍生物、其它接头和(B)、(L)和(D)各自排列的其它构型也包括在本文中。在一种变型中，结合受体的配体结合相同受体，在另一种变型中，结合受体的配体结合不同的受体。在一个本文中所述药物释》丈缀合物的示例性实施方案中，多价接头包含至少一个可分离接头(lr)。在另一个本文中所述药物释放缀合物的示例性实施方案中，多价接头包含至少两个可分离接头(lr)2。在另一个示例性方面，多价接头(L)包含至少一个可分离接头(lr)，该接头不是二硫化物(disulfide)可分离接头。在另一个示例性方面，多价接头(L)具有至少两个可分离接头(lr)2,其中一个可分离接头不是二硫化物可分离接头。可认识到，当一个以上的可分离接头包含在多价接头中时，那些可分离接头可相邻。还可认识到，当在多价接头中的两个可分离接头相邻时，这两个可分离接头可协同引起药物释放。在另一个实施方案中，多^f介接头包含至少一个由氨基酸形成的肽间隔基接头，在一个方面，肽包含天然氨基酸及其立体异构体。在另一个方面，肽^5l由天然氨基酸及其立体异构体形成。本文中所述配体通常包括细胞表面受体的配体。可用于本文中所述缀合物的示例性配体包括但不限于维生素和与维生素受体结合的其它部分、转运蛋白或其它与维生素特异性结合的表面存在的蛋白或其类似物或衍生物；由库筛选鉴定的肽配体；肿瘤细胞-特异性肽；胂瘤细胞-特异性适体；肿瘤细胞-特异性糖；肺瘤细胞-特异性单克隆或多克隆抗体；抗体的Fab或scFv(即单链可变域)片段例如靶向EphA2的抗体的Fab片段，或在转移性癌细胞上特异性表达的或唯一可达的其它蛋白；由组合库得到的小有机分子；生长因子例如EGF、FGF、胰岛素和胰岛素样生长因子；和同源多肽；抑生长素及其类似物；转铁蛋白；脂蛋白复合物；胆汁酸盐；选择蛋白；类固醇激素；含Arg-Gly-Asp的肽；类维生素A;各种半乳凝集素；S-阿片才羊受体配体；缩胆嚢素A受体配体；血管紧张素ATI或AT2受体的特异性配体；过氧化物酶体增殖物激活受体入配体；[3-内酰胺抗生素例如青霉素；包括抗微生物药在内的小有机分子；和与在胂瘤细胞表面或感染性生物体上优先表达的受体特异性结合的其它分子；抗微生物药和根据受体或其它细胞表面蛋白晶体结构设计的适合特定受体的结合袋的其它药物；胂瘤抗原或在肿瘤细力包表面上优先表达的其它分子的配体，或任何这些分子的片段。可起配体-药物缀合物结合部位作用的肿瘤-特异性抗原包括Ephrin家族蛋白膜的细胞外表位例如EphA2。在正常细胞中，EphA2表达限于细胞-细胞接点，但在转移性肺瘤细胞中，EphA2分布于整个细胞表面。因此，转移性细胞上的EphA2可与例如与药物或其类似物或衍生物缀合的抗体的Fab片段结合，而蛋白不能与正常细胞上的Fab片段结合，得到转移性癌细胞的特异性配体-药物缀合物。本文中所述药物及其各种类似物和衍生物一般是消除、杀灭、干扰和/或减少包括感染因子、癌、肿瘤等在内的致病细胞群体生长的转物。另外，可用于本文中所述乡获合物的药物及其各种类似物和衍生物可具有多种作用机理，它们包^"但不限于烷化剂、微管抑制剂包括稳定和/或使微管形成不稳定的那些，它们包括(3-微管蛋白剂、依赖细胞周期蛋白的激酶(CDK)抑制剂例如CDKNla、CDKNlb等；拓朴异构酶抑制剂；蛋白合成抑制剂；蛋白激酶抑制剂包括Ras、Raf、PKC、PI3K等抑制剂；转录抑制剂；抗叶酸剂、热激蛋白阻断剂等。在另一个实施方案中，阐述药用组合物。该药用组合物含本文中所述药物释放缀合物和组合应用的药学上可接受的载体、赋形剂和/或稀释剂。在另一个实施方案中，阐迷在具有致病细胞群体的宿主动物中消除致病细胞群体的方法。在一个示例性方面，致病细胞群体的各成员具有与结合受体的部分或其类似物或衍生物结合的可用结合部位，且该结合部位由致病细胞唯一表达、过度表达或优先表达。该方法包括给予宿主本文中所述药物释放缀合物或本文中所述其药用组合物的步骤。附图简述图1A表示相对于叶酸(、1.0),实施例9对叶酸受体的相对结合亲和力0,0.24)。图1B表示在过量叶酸存在(o)和无过量叶酸(O存在下，实施例9对KB细胞中311-胸苦结合的活性；实施例9的ICso为约58nM。图2表示相对于叶酸(，,1.0)，实施例11(園,0.21)对叶酸受体的相对结合亲和力。图3表示在过量叶酸存在(o)和无过量叶酸一)存在下，实施例11(多药物缀合物)对311-胸*结合的活性；实施例11的IC5Q=5nM。图4表示相对于实施例11+过量叶酸(b)，实施例11(a)对三种不同肺瘤细胞系(KB、4T-lcl2和ID8-cll》的体外细胞毒活性。图5A表示相对于未处理对照O),1fimol/kgTIW(6剂量)(')和2lnmol/kgTIW(6剂量)(T)的实施例11对Balb/c小鼠中FR阳性M109肿瘤的活性。图5B表示相对于未处理对照0),1nmol/kgTIW(6剂量)(')和2pmol/kgTIW(6剂量)(T)的实施例11对Balb/c小鼠重量无影响。图6表示相对于未处理对照(.)，在40pmol/kgEC20(铼络合物)存在(ci)和不存在O)下，1pmol/kgTIW实施例11持续2周(6剂量)对FR阳性KB肿瘤的活性；单独的实施例11显示5/5完全反应；实施例11+EC20显示0/5完全反应。图7表示相对于未处理对照(*)，在40nmol/kgEC20(铼络合物)存在(口)和不存在O)下，1^mol/kgTIW实施例11持续2周(6剂量)对nu/nu小鼠重量无影响。图8表示相对于未处理对照(a),在40nmol/kgEC20(铼络合物)存在(b)和不存在(c)下，1pmol/kgTIW实施例11持续2周(6剂量)对植入棵小鼠中s.c.人异种KB肺瘤的活性；单独的实施例11显示5/5完全反应；实施例11+EC20显示0/5完全反应。图9表示相对于未处理对照(a)，在40pmol/kgEC20(铼络合物)存在(b)和不存在(c)下，1pmol/kgTIW实施例11持续2周(6剂量)对棵小鼠重量无影响。图10表示相对于0,5,1/kgTIW(b)、1|nmol/kgTIW(c)和2pmol/kgTIW(d)的未缀合基线药物、丝裂霉素C和去乙酰长春碱单酰肼(desacetylvinblastinemonohydrazide)的混合物，并相对于未处理对照(a),2pmol/kgTIW实施例11(e)对棵小鼠中叶酸受体阳性人肿瘤的活性。图11表示相对于对照(a)，2,1/kgTIW实施例11持续2周(e)对棵小鼠重量无影响。在未缀合基线药物、丝裂霉素C和去乙酰长春碱单酰肼的混合物的所有三种剂量(0.5pmol/kgTIW(b)、1pmol/kgTIW(c)、2pmol/kgTIW(d》下，发生体重下降。在第20天前，终止高剂量(d)。图12表示相对于对照(a)，2pmol/kgTIW实施例11持续2周，对nu/nu小鼠中三种尺寸250mm3(b)、500mm3(c)和750mm3(d)的大KB肿瘤的活性。图13表示相对于对照(a)，相对于仅单一药物丝裂霉素C(b)、去乙酰长春碱单酰肼(c)的缀合物，或这两种单一药物缀合物的混合物(d)，实施例11(e)的活性。图14表示相对于对照(a)，2^mol/kgTIW实施例11(b)持续2周处理Bablb/c小鼠中叶酸受体阴性4T1肿瘤无活性。图14中数据表明相对于对照(a)，因这些肿瘤上无叶酸受体，实施例11(b)对肿瘤无任何作用。图15表示实施例12对FR阳性KB细胞中的311-胸苷结合的活性。详述本文中阐述药物及其类似物和衍生物的配体缀合物。这些缀合物包含结合细胞受体的配体，该配体包括细胞表面受体的配体，它们与可靶向细胞包括致病细胞的两种或多种药物共价连接。本文中所述缀合物还可包含使配体与药物连4妄的多价接头。阐述了结合受体的药物释》丈缀合物，其包含结合受体的部分(B)、多价接头(L)和两种或多种药物或药物类似物或药物衍生物(D)n，其中n大于或等于2。在本文中所述药物释放缀合物中，结合受体的部分(B)和两种或多种药物(D)n各自通过独立选择的杂原子接头(1H)与多价接头(L)结合。多价接头(L)包含一个或多个间隔基接头、杂原子接头和可分离接头及其任何顺序的组合。在一个实施方案中，阐述结合受体的药物释;^文缀合物。药物释》丈缀合物包含配体例如细胞表面受体的配体、两种或多种药物或其类似物或衍生物和任选多价接头，该药物释放缀合物通常可由下式代表(B)-(L)-(D)n其中(B)代表结合受体的部分；(D)代表通过结合受体的部分靶向细胞的药物或其类似物或衍生物；(L)代表多价接头，n为大于l的整数。多价接头(L)可包含多个互相共价连接的接头。例如，多价接头(L)可包含一个或多个间隔基接头(13)和/或可分离接头(l》，它们各自通过一个或多个杂原子接头(lH)与其它接头、配体和药物连接。可选择这些不同的接头，且可按任何顺序排列，构成多价接头(L)。例如，可由一个或多个以下二价接头构成多价接头(L):<formula>formulaseeoriginaldocumentpage22</formula>其中a、b、c、d和e为整数例如在0-约4范围的整数,(ls)、(1H)和(lr)分别为间隔基接头、可分离接头、杂原子接头。可用于构建本文中所述多价接头的二价接头的其他示例性实例在美国专利申请序号10/765,336(也可在美国专利申请公布号US2005/0002942Al找到)和PCT国际公布号WO2006/012527中有阐述，所述文献通过引用整体结合到本文中。可以理解，多价接头可按多种结构构型将结合受体的部分与两种或多种药物连接，包括但不限于以下示例性通式<formula>formulaseeoriginaldocumentpage23</formula>其中B为结合受体的配体，(L1)、(!/)和(L"各自为多价接头，由一个或多个间隔基、可分离和/或杂原子接头构成，(D1)、02和03各自为药物或其类似物或衍生物。包括其它药物或其类似物或衍生物、其它接头和(B)、(L)和(D)各自排列的其它构型的其它变型也包括在本文中。在一种变型中，结合一种以上受体的配体包含在本文中所述药物释;^文缀合物中，包括但不限于以下示例性通式<formula>formulaseeoriginaldocumentpage23</formula>其中各B为结合受体的配体，(L1)、(L勺和(L"各自为多价接头，由一个或多个间隔基、可分离和/或杂原子接头构成，(D1)、02和D3各自为药物或其类似物或衍生物。包括其它药物或其类似物或衍生物、其它接头和(B)、(L)和(D)各自排列的其它构型的其它变型也包括在本文中。在一种变型中，结合受体的配体结合相同受体，在另一种变型中，结合受体的配体结合不同受体。如上式所示，可以理解，一个以上的多价接头可包含在本文中所述药物释放缀合物中。可以理解，在一个方面，根据结合受体的配体和药物的构型选择接头的数目。例如，在一个其中接头共^介装配形成多价接头或多价接头的一部分方式的示例性实施方案中，杂原子接头、间隔基接头和可分离接头连接在一起形成下式多价基团<formula>formulaseeoriginaldocumentpage24</formula>其中该式也可以表示为(1》1一(《，)3-歸1-(1》2'其中(ls乂是三肽Asp-Asp-Asp，(18)2为Cys，(l》1为S-S，(ls)3为CH2CH2,(1h)1为O，(lr)2为C(O)NHNH，(ls)4为o>Lys，(ls)5为C(0)CH2CH2,(lr)3为S-S,(106为CH2CH2。可用于本文中所述缀合物的细胞表面受体的配体包括但不限于维生素和与维生素受体结合的其它部分、转运蛋白或其它与维生素特异性结合的表面存在的蛋白或其类似物或衍生物；由库筛选鉴定的肽配体；肿瘤细胞-特异性肽；肿瘤细胞-特异性适体；肿瘤细胞-特异性糖；肿瘤细胞-特异性单克隆或多克隆抗体；抗体的Fab或scFv(即单链可变域)片段例如导向EphA2的抗体的Fab片段，或在转移性癌细胞上特异性表达的或唯一可达的其它蛋白；由组合库得到的小有机分子；生长因子例如EGF、FGF、胰岛素和胰岛素样生长因子；和同源多肽；抑生长素及其类似物；转铁蛋白；脂蛋白复合物；胆汁酸盐；选择蛋白；类固醇激素；含Arg-Gly-Asp的肽；类维生素A;各种半乳凝集素；S-阿片样受体配体；缩胆嚢素A受体配体；血管紧张素ATI或AT2受体的特异性配体；过氧化物酶体增殖物激活受体X配体；P-内酰胺抗生素例如青霉素；包括抗微生物药在内的小有机分子；和与在肿瘤细胞表面或感染性生物体上优先表达的受体特异性结合的其它分子；抗;隞生物药和根据受体或其它细胞表面蛋白晶体结构设计的适合特定受体的结合袋的其它药物；肿瘤抗原或在肿瘤细胞表面上优先表达的其它分子的配体，或任何这些分子的片段。可起配体-药物或其类似物或衍生物缀合物结合部位作用的胂瘤-特异性抗原的实例包括Ephrin家族蛋白膜的细胞外表位例如EphA2。在正常细胞中，EphA2表达限于细胞-细胞接点，但在转移性胂瘤细胞中，EphA2分布于整个细胞表面。因此，转移性细胞上的EphA2可与例如与药物或其类似物或衍生物缀合的抗体的Fab片段结合，而蛋白不能与正常细胞上的Fab片段结合，得到转移性癌细胞的特异性配体-药物缀合物。在一个实施方案中，结合受体的部分是维生素或结合维生素受体的其类似物或衍生物，例如能结合维生素受体的维生素及其类似物和衍生物。可按照本文中所述方法和化合物使用的维生素包括肉碱、肌醇、硫辛酸、吡多醛、抗坏血酸、烟酸、泛酸、叶酸、核黄素、硫胺、生物素、维生素Bu、维生素A、D、E和K、其它相关维生素分子、其类似物和衍生物及其组合。这些维生素和它们的结合受体的类似物和衍生物构成示例性耙向实体，这些实体可通过本文中所述多价接头(L)与药物化合物或它们的类似物或衍生物偶联，制备药物释;^文缀合物。在一个示例性方面，维生素可以是叶酸、叶酸类似物或另一种结合叶酸受体的分子。可使用的示例性叶酸类似物包括亚叶酸、蝶酰聚谷氨酸、蝶酸及其其它氨基酸衍生物；和结合叶酸受体的蝶咬例如四氢蝶呤、二氢叶酸、四氢叶酸和它们的去氮杂(deaza)和二去氮杂类似物。术语"去氮杂"和"二去氮杂"类似物是指本领域公认的具有取代天然叶酸结构中一个或两个氮原子的碳原子的类似物。例如，去氮杂类似物包括l-去氮杂、3-去氮杂、5-去氮杂、8-去氮杂和10-去氮杂类似物。二去氮杂类似物包括例如1,5-二去氮杂、5,10-二去氮杂、8，10陽二去氮杂和5,8-二去氮杂类似物。前述叶酸类似物按惯例称为"叶酸"，反应它们与叶酸受体结合的能力。其它结合叶酸受体的类似物包括氨基蝶呤；曱氨蝶呤；N"-曱基叶酸；2-去氨基-羟基叶酸；去氮杂类似物例如1-去氮杂甲蝶呤或3-去氮杂甲蝶呤；和3',5'-二氯-4-氨基-4-脱氧—N^甲基蝶酰谷氨酸(二氯甲氨蝶呤)。能够与叶酸受体结合引发受体介导的药物释放缀合物胞吞转运的其它合适的配体包括叶酸受体的抗体。因此，在一个示例性方面，可用与叶酸受体的抗体复合的长春花化合物引发该复合物跨膜转运。维生素类似物和/或衍生物的示例性实施方案还包括生物素的4似物和书f生物，例如生物胞素、生物素亚;风、氧代生物素和其它与生物素受体结合的化合物等。可以认识到，本文中所述其它维生素的类似物和衍生物也包括在本文中。所述缀合物的任何形状应包括在本文中，这些形状由其中药物、结合受体的部分和各种多价接头连接的方式决定。在一个方面，本文中所述缀合物的总体三维形状是线性。在另一个方面，本文中所述缀合物的总体三维形状是"Y"或"T"形。在另一个方面，本文中所述缀合物的总体三维形状是"X"形或十字形。在另一个在一个本文中所述药物释》文缀合物示例性实施方案中，多价接头包括至少一个可分离接头(lr)。在本文中所述药物释放缀合物的另一个示例性实施方案中，多价接头包括至少两个可分离接头(lr)2。在另一个示例性方面，多价接头(L)包含至少一个可分离接头(l》，该接头不是二硫化物可分离接头。在另一个示例性方面，多价接头(L)具有至少两个可分离接头(lr)2，其中一个可分离接头不是二硫化物可分离接头。可以认识到，当一个以上的可分离接头包含在多价接头中时，那些可分离接头可相邻。还可以理解，当多价接头中的两个可分离接头相邻时，这两个可分离接头可协同导致药物释放。本文中使用的术语"可分离接头"又称为可断裂接头，是指包含至少一个可在生理条件下断裂的键(例如pH不稳定、酸不稳定、，易氧化或酶不稳定的键)的接头。应认识到，导致键断裂的此类生理条件包括例如在生理pH下发生的标准化学水解反应，或由于区室化到细胞器例如具有比胞质pH低的pH的核内体中所致。可以理解，本文中所述可断裂键可在可分离接头的任一端或两端，将可分离接头内的两个相邻原子连接和/或将其它接头或(B)和/或(D)连接。在可断裂键将可分离4妾头内的两个相邻原子连接的情况，键断裂后，可分离接头断裂为两个或多个片段。或者，在可断裂键位于可分离接头和另一部分例如杂原子接头、间隔基接头、另一个可分离4^头、药物或其类似物或衍生物，或维生素或其类似物或衍生物之间的情况，4建断裂后，可分离接头与其它部分分离。可通过例如在可断裂键上或附近改变取代例如在可断裂二硫键邻位包括a支链；增加具有可水解的硅-氧键的部分中硅上取代基的疏水性；使形成可水解的缩酮或缩醛部分的烷氧基同系化等，调节可断裂4定的不稳定性。本文中所述二价接头断裂的示例性机理包括以下1,4和1,6裂解机理其中x为内源性或外源性亲核体、谷胱甘肽或生物还原剂等，z或Z'中任一个为维生素或其类^f以物或衍生物，或药物或其类似物或彩f生物，或与多价接头的其它部分连接的维生素或药物部分。可以理解，尽管描述的以上裂解机理为协同机理，但可釆用任何数目的离散步骤，实现将多价"l妻头最终断裂为所示终产物。例如可认识到，也可通过将氨基曱酸酯部分酸催化消除，使键断裂，它可通过以上实例中所述(3硫芳基或二硫化物提供的稳定化得到邻位协助。在该实施方案的那些变型中，可分离接头是氨基甲酸酯部分。或者，可通过亲核进攻二硫基引发裂解，导致断裂，形成硫醇盐。该硫醇盐可在分子间置换碳酸或氨基甲酸部分，形成相应的硫杂环丙烷。在含节基的多价接头情况下，二硫键示例性断裂后，得到的苯基硫醇盐可通过形成共振稳定的中间体进一步断裂，释放石友酸或氨基甲酸部分。在其中任何情况下，可通过可与存在的化学、代谢、生理学或生物条件相关的任何机理，实现本文中所述示例性多价接头的可分离性质。可分离接头键断裂的其它示例性机理包括如下的氧镜辅助性裂解C02+H2N—Z其中Z为维生素或其类似物或衍生物，或药物或其类似物或衍生物，或各自为与多价接头的其它部分连接的维生素或药物部分，例如包括一个或多个间隔基接头、杂原子接头和/或其它可分离接头的药物或维生素部分。在该实施方案中，将氨基甲酸酯酸催化消除，导致C02和与Z连接的含氮部分释放，形成可被水或任何其它Lewis碱捕获的千基阳离子。另一个示例性机理涉及多价接头的键断裂后，可分离、间隔基和杂原子接头按释放的官能团化学辅助其它的键断裂或裂解又称为邻位协助断裂或裂解的方式排列。这种多价接头或其部分的示例性实施方案包括具有下式的化合物其中X为杂原子例如氮、氧或硫，n为选自0、1、2和3的整数，R为氢或取代基，该取代基包括能够诱导性或通过芳环共振稳定正电荷的取代基例如烷氧基等，Z或Z'中任一个为维生素或其类似物或衍生物，或药物或其类似物或衍生物，或与多价接头的其它部分连接的维生素或药物部分。可以认识到，其它取代基可存在于芳环、千基碳、氨基甲酸酯氮、链烷酸或亚甲基桥上，包括但不限于羟基、烷基、烷氧基、烷硫基、卣素等。辅助性裂解可包括涉及节基输中间体、苯炔中间体、内酯环化、氧镜中间体、(3-消除等的机理。还可认识到，除可分离接头断裂后裂解外，邻^f立协助机理还可促使可分离接头初始裂解。在该实施方案中，可环化的羟基链烷酸通过例如氧镄离子促使亚曱基桥裂解，并促使键断裂或可分离接头的键断裂后裂解。或者，酸催化氧镥离子-协助裂解亚曱基桥可起动该示例性多价接头或其片段的裂解级联。或者，酸催化水解氨基曱酸酯可促使可环化的羟基链烷酸(3消除，并通过例如氧输离子促使亚甲基桥断裂。可以认识到，在本文中所述代谢、生理或细胞条件下的键断裂或裂解的其它化学机理可引发这种裂解级联。可以认识到，在本文中所述代谢、生理或细胞条件下的键断裂或裂解的其它化学机理可引发这种裂解级联。在一个实施方案中，本文中所述多价接头为下式化合物o、.其中n为选自l-约4的整数；Ra和Rb各自独立选自氢和烷基，包括低级烷基例如任选支化的CVC4烷基；或Ra和Rb和相连的碳原子结合在一起形成碳环；R为任选取代的烷基、任选取代的酰基或适当选择的氮保护基团；并且(*)代表药物、维生素、显像剂、诊断试剂、其它多价接头或缀合物的其它部分的连接点。在另一个实施方案中，本文中所述多价接头包括下式化合物<formula>formulaseeoriginaldocumentpage30</formula>其中m是选自1-约4的整数；R为任选取代的烷基、任选取代的酰基或适当选择的氮保护基团；并且(*)代表药物、维生素、显像剂、诊断试剂、其它多价接头或缀合物的其它部分的连接点。在另一个实施方案中，本文中所述多价接头包括下式化合物<formula>formulaseeoriginaldocumentpage30</formula>其中m是选自1-约4的整数；R为任选取代的烷基、任选取代的酰基或适当选择的氮保护基团；并且(*)代表药物、维生素、显像剂、诊断试剂、其它多价接头或缀合物的其它部分的连接点。在另一个实施方案中，可分离、间隔基和杂原子接头可按多价接头键断裂后释放的官能团化学辅助其它键断裂或裂解的方式排列，化学辅助其它键断裂或裂解又称为邻位协助断裂或裂解。这种多价接头或其部分的示例性实施方案包括具有下式的化合物其中X为杂原子例如氮、氧或硫，n为选自0、1、2和3的整数，R为氢或取代基，包括能够诱导性或通过芳环共振稳定正电荷的取代基例如烷氧基等，符号(*)代表形成多价接头的其它间隔基、杂原子或可分离接头的连接点，或药物或其类似物或衍生物或维生素或其类似物或衍生物的连接点。可以认识到，其它取代基可存在于芳环、千基碳、链烷酸或亚甲基桥上，包括但不限于羟基、烷基、烷氧基、烷硫基、卣素等。辅助性裂解可包括涉及苄基锵中间体、苯炔中间体、内酯环化、氧錄中间体、(3-消除等的机理。还可认识到，除可分离接头断裂后裂解外，邻位协助机理还可促使可分离接头初始裂解。在另一个实施方案中，多价接头包含连接在一起形成下式所示多价3-硫代琥珀酰亚胺-l-基烷氧基甲氧基的杂原子接头、间隔基接头和可分离接头其中n为l-6的整数，烷基任选被取代，曱基任选被其它烷基或任选取代的芳基取代，它们各自由独立选择的R基团代表。符号(*)代表多价接头片段与本文中所述缀合物的其它部分的连接点。在另一个实施方案中，多^H妻头包含连接在一起形成下式所示多价3-硫代琥珀酰亚胺-l-基烷基羰基的杂原子接头、间隔基接头和可分离接头其中n为l-6的整数，烷基任选被取代。符号(*)代表多价接头片段与本文中所述缀合物的其它部分的连接点。在另一个实施方案中，多价接头包含连接在一起形成多价3-硫烷基磺酰基烷基(二取代的甲硅烷基)氧基的杂原子接头、间隔基接头和可分离接头，其中二取代的曱硅烷基4皮烷基和/或任选取代的芳基取代。在另一个实施方案中，多^f介接头包含连接在一起形成下式所示多价联硫基烷基羰基酰肼基或多<介3-硫代琥珀酰亚胺-l-基烷基羰基酰肼的杂原子接头、间隔基接头和可分离接头其中n为1-6的整数，烷基任选被取代，酰肼和多价接头(L)的(B)、(D)或其它部分形成腙。符号(*)代表多价接头片段与本文中所述缀合物的其它部分的连接点。在另一个实施方案中，多^f介接头包含连接在一起形成下式所示多价3-硫代琥珀酰亚胺-l-基烷氧基烷氧基烷叉基的杂原子接头、间隔基接头和可分离^t妄头其中各n为独立选自l-6的整数，各烷基独立选择并任选被例如烷基或任选取代的芳基取代，其中烷叉基和多价接头(L)的(B)、(D)或其它部分形成腙。符号(*)代表多价接头片段与本文中所述缀合物的其它部分的连接点。在另一个实施方案中，多^f介接头包含杂原子接头、间隔基接头和可分离接头，它们连接在一起形成多价3-硫基或3-联硫基芳基烷氧基羰基；3-硫基或3-联硫基芳基烷基氨基羰基；多价3-硫基或3-联硫基烷氧基羰基，或多价3-硫基或3-联硫基烷基氨基羰基，其中烷基羰基和多价接头(L)的(B)、(D)或其它部分形成碳酸酯、氨基曱酸酯或脲。例如，烷基为乙基。在另一个实施方案中，多^f介接头包含杂原子接头、间隔基接头和可分离接头，它们连接在一起形成多价3-联硫基烷基M,其中氨基和多价接头(L)的(B)、(D)或其它部分形成插烯(vinylogous)酰胺。例如，烷基为乙基。在另一个实施方案中，多价接头包含杂原子接头、间隔基接头和可分离接头，它们连接在一起形成多价l-烷氧基亚环烷基氧基、多价亚烷基氨基羰基(二羧基亚芳基)羧酸酯基、多价3-联硫基烷氧基羰基、多价3-联硫基烷氧基羰基酰肼基、多价。在另一个实施方案中，多价接头包含至少一个由氨基酸形成的肽间隔基接头。在一个方面，肽包括天然氨基酸及其立体异构体。在另一个方面，肽仅由天然氨基酸及其立体异构体形成。间隔基和寸分离接头的其它示例性实例如表1和2所示，其中(*)代表另一个接头与长春花生物碱或其类似物或衍生物的连接点，或与结合受体的部分的连接点。表l:设想的间隔基和杂原子接头及其组合<table>tableseeoriginaldocumentpage34</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage35</column></row><table>表2:设想的可分离和杂原子接头及其组合<table>tableseeoriginaldocumentpage35</column></row><table>任何种类的药物均可包含在本文中所述药物释放缀合物中。在一个示例性实施方案中，根据对一种或多种致病细胞群体活性选择药物。在一个方面，那些致病细月包是包括实体瘤在内的癌细胞。在另一个示例性实施方案中，根据对一种或多种致病细胞群体活性选择具有特定作用机理的药物。示例性的作用机理包括烷化剂；微管抑制剂，它们包括使微管形成稳定和/或不稳定的那些抑制剂，包括(3-微管蛋白剂；依赖细胞周期蛋白的激酶(CDK)抑制剂；拓朴异构酶抑制剂；蛋白合成抑制剂；蛋白激酶抑制剂，包括Ras、Raf、PKC、PI3K等抑制剂；转录抑制剂；抗叶酸剂；热激蛋白阻断剂等。示例性的烷化剂包括但不限于丝裂霉素CBI等。示例性的依赖细胞周期蛋白的激酶(CDK)抑制剂包括但不限于CYC202、seliciclib、R-roscovitine、AGM-1470等。示例性的拓朴异构酶抑制剂包括但不限于多柔比星、其它蒽环霉素等。示例性的蛋白合成抑制剂包括但不限于鸦胆丁等。包括Ras、Raf、PKC、PI3K等抑制剂在内的示例性的蛋白激酶抑制剂包括但不限于L-779、450、R115777等。示例性转录抑制剂包括但不限于a-鵝膏毒环肽(amanatin)、放线菌素等。示例性抗叶酸剂包括但不限于甲氨蝶呤等。示例性的热激蛋白阻断剂包括但不限于格尔德毒素等。包括使微管形成稳定和/或不稳定的那些抑制剂在内的示例性的微管抑制剂包括P-微管蛋白剂、微管毒素等。与选择的受体结合的示例性的微管毒素包括但不限于与长春花结合部位结合的抑制剂，例如arenastatin、多拉司他汀、软海綿素B(halichondrinB)、美登素、方莫新A(phomopsinA)、根霉素、稻曲霉素(ustiloxin)、长春碱、长春新碱等；与紫杉醇结合部位结合的稳定剂例如discodermalide、埃坡霉素(epothilone)、泰素、紫杉醇等；与秋水仙碱结合部位结合的抑制剂例如秋水仙碱、考布他汀、curacinA、鬼臼毒素、steganacine等；和与未定义位点结合的其它抑制剂例如自念珠藻环肽(cryptophycin)、tubulysins等。在一个本文中所述药物释》丈缀合物实施方案中，这些药物中的至少一种是微管抑制剂或其类似物或衍生物。在另一个实施方案中，这些药物中的至少一种是DNA烷化剂。在另一个实施方案中，这些药物中的至少一种是DNA烷化剂，这些药物中的至少一种其他药物是微管抑制剂，本文中所述生物^成包括长春花吲哚-二氢吲哚生物碱家族中所有成员，例如但不限于长春酰胺、长春石威、长春新碱、长春碱、长春朵灵、环氧长春碱、长春瑞滨、咪朵卡、西布曲明、托曲珠利、长春花酸等及其类似物和衍生物。在另一个本文中所述药物释;^文缀合物实施方案中，这些药物中的至少一种是P-糖蛋白(PGP)抑制剂。在另一个实施方案中，包含在本文中所述药物释放缀合物上的这些药物中的至少一种是PGP抑制剂，包含在药物释放缀合物上的这些药物中的至少一种其他药物是PGP底物。例如，按照该后一个实施方案，PGP底物是DNA烷化剂。关于该实施方案，可以认识到，将PGP抑制剂与PGP底物配对，例如DNA烷化剂包括但不限于任何丝裂霉素如丝裂霉素C、丝裂霉素A等可改善另外为PGP底物的药物的整体效能。在本文中所述可分离缀合物中，胞吞后，PGP抑制剂药物和PGP底物药物均在细胞中释放。按该方式，PGP抑制剂药物可改善PGP底物药物的整体效力和/或活性。另夕卜，PGP抑制剂可减少PGP表达，这又减少包含在本文中所述多药物缀合物上的一种或多种药物从致病细胞中流出。可以认识到，丝裂霉素或其类似物或衍生物例如丝裂霉素C可作为PGP抑制剂或PGP的下调剂操作使用。还可iU只到，长春花生物-喊或其类似物或衍生物例如长春碱类似物和衍生物可以是PGP底物，可通过PGP抑制剂或下调剂，防止它从致病细月包中流出。在另一个本文中所述药物释;^文缀合物实施方案中，这些药物中的至少一种是长春花生物碱或其类似物或衍生物。本文中所述长春花生物碱包括长春花吲咮-二氢吲哚生物碱家族中所有成员，例如但不限于长春酰胺、长春碱、长春新碱、长春碱、长春朵灵、环氧长春碱、长春瑞滨、咪朵卡、西布曲明、托曲珠利、长春花酸(vinblastinoicacid)等及其类似物和衍生物。如本文中提及，本文中所述缀合物中的可使用的长春花药物包括长春花巧I哚-二氢吲哚生物碱家族中所有成员例如长春酰胺、长春碱、长春新碱、长春碱、长春朵灵、环氧长春碱、长春瑞滨、咪朵卡、西布曲明、托曲珠利、长春花酸等及其类似物和衍生物。例如，此类类似物和衍生物包括美国专利号4,203,898中所述3-羰基叠氮化物(carboxazides);美国专利号4,166,810中所述4-去乙酰基长春碱-3-羰基酰肼的N、烷基和其它衍生物；Neussetal.r"ra/^/ra"丄e".783(1968)中所述环氧长春碱酰肼；Barnettetal.MedCAem.21:88(1978)中所述酰肼^f汙生物；美国专利号3,392,173和3,387,001中所述C-4酯衍生物；Langoneetal.^"a/.说'oc/ew.95:214(1979)中所述氧化得到的二羧酸衍生物；和EP0247792A2中所述长春花酰肼。各上述专利和出版物中有关制备长春花化合物的合成路线和反应条件的公开内容通过引用整体结合到本文中。在一个示例性实施方案中，长春花药物是下式化合物<formula>formulaseeoriginaldocumentpage38</formula>其中R^和W中的一个为H,另一个为乙基，且R为H，或W为乙基，R2和R3结合在一起形成-O-;R4、117和118各自独立选自H、烷基和酰基115和116各自独立选自烷基；RS为-NHNHR基团，其中R为H、烷基或酰基；R^为H或酰基；且R"为乙基。在一个方面，长春花药物是上式化合物，其中114和118各自为H;且R5、R6、R9和R"各自为甲基。在另一个实施方案中，阐述结合受体的药物释放缀合物，该缀合物含结合受体的部分、多价接头(L)、长春花生物碱药物或其类似物或衍生物和另一种药物或其类似物或衍生物，其中结合受体的部分、长春花生物碱和其它药物各自通过杂原子接头(lH)与多价接头(L)结合。多价接头(L)包含一个或多个间隔基接头、杂原子接头和可分离接头及其任何顺序的组合。在另一个实施方案中，包含在本文中所述药物释放缀合物上的这些药物中的至少一种是aclamycin或其类似物或衍生物。aclamycins及其类似物和衍生物可能是PGP流出泵底物。在一个方面，包含在本文中所述药物释放缀合物上的这些药物中的至少一种其他药物是DNA烷化剂例如丝裂霉素或其类似物或衍生物。在另一个实施方案中，包含在本文中所述药物释放缀合物上的这些药物中的至少一种是DNA合成抑制剂或其类似物或衍生物。在另一个实施方案中，包含在本文中所述药物释放缀合物上的这些药物中的至少一种是纺锤体形成抑制剂或其类似物或衍生物。在一个方面，包含在本文中所述药物释放缀合物上的这些药物中的至少一种是DNA合成抑制剂或其类似物或4汙生物，包含在本文中所述药物释放缀合物上的这些药物中的至少一种其他药物是纺锤体形成抑制剂或其类似物或衍生物。在另一个实施方案中，包含在本文中所述药物释;^缀合物上的这些药物中的至少一种是微管稳定剂或其类似物或衍生物。在另一个实施方案中，包含在本文中所述药物释放缀合物上的这些药物中的至少一种是微管合成抑制剂或其类似物或衍生物。在另一个实施方案中，包含在本文中所述药物释放缀合物上的这些药物中的至少一种是破坏微管稳定剂或其类似物或衍生物。在另一个实施方案中，包含在本文中所述药物释;^缀合物上的这些药物中的至少一种是凋亡诱导剂或其类似物或衍生物。在另一个实施方案中，包含在本文中所述药物释放缀合物上的这些药物中的至少一种是泰素或其类似物或衍生物。在另一个实施方案中，包含在本文中所述药物释放缀合物上的这些药物中的至少一种是抗叶酸剂或其类似物或衍生物。在另一个实施方案中，包含在本文中所述药物释力欠缀合物上的这些药物中的至少一种是甲氨蝶呤或其类似物或衍生物。在一方面，包含在本文中所述药物释放缀合物上的这些药物中的至少一种是抗叶酸剂或其类似物或衫于生物例如甲氨蝶呤，包含在本文中所述药物释放缀合物上的这些药物中的至少一种其他药物是泰素或其类似物或书f生物。在另一个实施方案中，包含在本文中所述药物释^:缀合物上的这些药物中的至少一种是叶酸或其类似物或衍生物。在另一个实施方案中，包含在本文中所述药物释》文缀合物上的这些药物中的至少一种是人表皮生长因子受体-2(HER-2)抑制剂或其类似物或衍生物。在另一个实施方案中，包含在本文中所述药物释放缀合物上的这些药物中的至少一种是放射性标记的化疗药物例如顺柏等。在一个方面，包含在本文中所述药物释放缀合物上的这些药物中的至少一种是抗叶酸剂或其类似物或衍生物例如曱氨虫莱呤，包含在本文中所述药物释放缀合物上的这些药物中的至少一种其他药物是叶酸或其类似物或衍生物。在另一方面，包含在本文中所述药物释放缀合物上的这些药物中的至少一种是泰素或其类似物或衍生物，包含在本文中所述药物释放缀合物上的这些药物中的至少一种其他药物是HER-2抑制剂或其类似物或衍生物。在另一方面，包含在本文中所述药物释》文缀合物上的这些药物中的至少一种是泰素或其类似物或衍生物；包含在本文中所述药物释放缀合物上的这些药物中的至少一种其他药物是放射性标记的化疗药物例如顺铂等；且包含在本文中所述药物释放缀合物上的这些药物中的至少一种其他药物是HER-2抑制剂或其类似物或衍生物。可通过常规合成方法制备本文中所述药物释放缀合物。根据所选择的杂原子接头和存在于间隔基接头上的官能团和可分离接头选择合成方法。一般而言，在RichardC.Larock,"C画/re/^腿VeOrg,'c7>朋—/7W加'o叫agw/cfeto/^w"/owa/p，ara"o朋,"VCHPublishers,Inc.NewYork(1989)和TheodoraE.Greene&PeterG.M.Wuts,"尸rafec"veGraw/w/ow(9rgam'ciS(y威as^,"第2版，JohnWiley&Sons,Inc.NewYork(1991)中有对有关键形成反应的阐述，所述文献通过引用整体结合到本文中。其它合成路线和反应条件在美国专利申请公布号US2005/0002942Al中阐述。例如，可用线性和汇集合成路线制备本文中所述药物释放缀合物。可用于此类路线的示例性中间体包括含多价接头的中间体，该多价接头在每一端包含偶联基团，该偶联基团适合与结合受体的部分或其类似物或衍生物，和长春花生物碱或其类似物或衍生物共价连接。可用于此类路线的其它示例性中间体包括含有与多价接头连接的结合受体的部分或其类似物或衍生物的中间体，多价接头含偶联基团。可用于此类路线的其它示例性中间体包括含有与多价接头连接的长春花生物碱或其类似物或衍生物的中间体，多价接头含偶联基团。在任一情况中，偶联基团可以是亲核试剂、亲电试剂或其前体。在一个示例性合成中间体实施方案中，偶联基团是Michael受体，多价接头包含具有式-C(O)NHN、-1^110;0)1^1^=或-012(^(0)>^=的可分离接头。在一个示例性方面，偶联基团和多价接头结合在一起形成下式化合物或其保护的衍生物<formula>formulaseeoriginaldocumentpage41</formula>其中(D)为长春花生物碱或其能够形成本文中所述腙的类似物或衍生物，n为整数例如1、2、3或4。在本文中所述结合受体的药物释放缀合物中间体的另一个示例性方面，第二接头通过包含在第二接头上的烷基硫醇亲核体与上式化合物共价连接。在另一个示例性方面，结合受体的部分或其类似物或衍生物通过包含在该部分上的烷基^Jf亲核体与上式化合物共价连接。在另一个示例性实施方案中，偶联基团为杂原子例如氮、氧或硫，多价接头包含一个或多个杂原子接头和一个或多个间隔基接头，它们将结合受体的部分与偶联基团共价连接。在一个示例性方面，本文中所述中间体包括下式化合物或其保护的衍生物其中X为氧、氮或硫，m为整数例如l、2或3，其中(B)、ls和lH定义同本文。在一个示例性方面，lH为-NH-,m为1。在另一个示例性方面，lH为-NH-，m为l，X为-S-。在另一个示例性实施方案中，本文中所述中间体包括下式化合物或其保护的衍生物其中Y为H或取代基例如吸电子取代基，包括但不限于硝基、氰基、卣素、烷基磺酰基、羧酸衍生物等，其中(B)和ls定义同本文。在另一个本文中所述中间体的示例性实施方案中，偶联基团是Michael受体，多j介接头包含一个或多个杂原子4^头和一个或多个间隔基接头，它们将结合受体的部分与偶联基团共价连接。在一个示例性方面，偶联基团和多价接头连接在一起形成下式化合物或其保护的衍生物其中X为氧、氮或硫，m和n是独立选择的整数例如1、2或3,其中(B)、1s和1h定叉同本文。在另一个示例性方面，长春花生物碱或其类似物或衍生物通过包含在长春花生物碱上的烷基硫醇亲核体与上式化合物共价连接。在另一个示例性方面，所述中间体包括下式化合物或其保护的衍生物其中AA为一个或多个氨基酸，例如它们选自天然氛基酸或其立体异构体，X为氮、氧或硫，Y为氢或取代基例如吸电子取代基，包括但不限于硝基、氰基、卣素、烷基磺酰基、羧酸衍生物等，n和m是独立选择的整数例如l、2或3，p为整数例如l、2、3、4或5。AA也可以为任何其它氨基酸例如具有以下通式的任何氨基酸其中R为氢、烷基、酰基或合适的氮保护基，R'和R"为氢或取代基，每次出现时，它们各自独立选择，t为整数例如l、2、3、4或5。例如，R'和/或R"独立对应于但不限于天然氛基酸上存在的氢或侧链例如曱基、千基、羟基曱基、硫曱基、羧基、羧基甲基、胍基丙基等及其衍生物和保护的衍生物。上述式包括所有立体异构体变型。例如，氨基酸可选自天冬酰胺、天冬氨酸、半胱氨酸、谷氨酸、赖氨酸、谷氨酰胺、精氨酸、丝氨酸、鸟氨酸、苏氨酸等。在本文中所述结合维生素受体的药物释;^欠缀合物中间体的另一个示例性方面，药物或其类似物或衍生物包含烷基硫醇亲核体。-N(R)画(CR'R")t-C(O)画可用常规合成路线制备各以上中间体。其它合成路线和反应条件在美国专利申请公布号US2005/0002942Al和PCT国际公布号WO2006/012527中有论述。前述示例性实施方案用于举例说明本文中所述本发明，不应理解为或浮见为以任何方式对本文中所述本发明进行限制。例如，由以下示例性维生素-药物缀合物中间体通常代表的化合物将包括在本文中所述本发明中其中R和I^各自独立为氢或烷基例如甲基；lH为杂原子例如氧、硫、任选取代的氮或任选保护的氮等。两种或多种药物和任选的另外的结合受体的配体例如叶酸及其类似物和衍生物可在(lH)或存在的其它官能团例如酰胺氮或^^、酸羧酸酯基或胍氨基上与该示例性中间体共价连接。在另一个实施方案中，所述叶酸配体中间体具有下式其中m、n和q是独立选自0-约8的整数；AA为M酸，R1为氢、烷基或氮保护基，药物任选与(*)原子连接。在一个方面，AA为天然或非天然构型的天然氨基酸，在另一方面，片段(-NH-AA-C(OK)n中的一个或多个AA是亲水性氨基酸。在另一方面，片段(-NH-AA-C(O)-)n中的一个或多个AA是Asp和/或Arg。在另一个方面，整数o为1或更大。在另一方面，整数m为2或更大。药物或其类似物或衍生物和任选的另外的接头和另外的结合受体的配体可在2,o二氨基链烷酸片段的游离NH侧链或在由其中自由价表示的末端羧酸酯上与上式化合物连接。在另一个实施方案中，所述叶酸配体中间体具有下式其中m、n、q和p为独立选自0-约8的整数；AA为氨基酸，R1为氢、烷基或氮保护基，药物任选与(*)原子连接。在一个方面，AA为天然或非天然构型的天然氨基酸。在另一方面，(-NH-AA-C(0)-)n片段中的一个或多个AA是亲水性氨基酸。在另一方面，(-NH-AA-C(0)-)n片段中的一个或多个AA是Asp和/或Arg。在另一方面，整数o和p为l或更大。在另一方面，整数m为2或更大。药体可在2，0>二氨基链烷酸片段的游离NH侧链、在由其中自由价表示的半胱氨酰(cyteinyl)巯基或末端羧酸酯上与上式化合物连接。在另一个实施方案中，所述叶酸配体中间体具有下式其中m、n、q、p和r为独立选自0-约8的整数；AA为M酸，W为氢、烷基或氮保护基，药物任选与(*)原子连接。在一个方面，AA为天然或非天然构型的天然氨基酸。在另一方面，(-NH-AA-C(0)-)n片段中的一个或多个AA是亲水性氨基酸。在另一方面，(-NH-AA-C(O)-)n片段中的一个或多个AA是Asp和/或Arg。在另一个方面，整数o、p和r为1或更大。在另一方面，整数m为2或更大。药物或其类似物或衍生物和任选的另外的接头和另外的结合受体的配体可在2,o)-二氨基链烷酸片段的游离NH侧链、在由其中自由价HN^从表示的半胱氨酰巯基、丝氨酰幾基或末端羧酸酯上与上式化合物连接。在另一个实施方案中，描述了含丝裂霉素作为药物之一的叶酸配体中间体并具有下式其中m、n和q为独立选自0-约8的整数；AA为氨基酸。在一个方面，AA为天然或非天然构型的天然氨基酸。在另一方面，(-NH-AA-C(0)-)n片段中的一个或多个AA是亲水性氨基酸。在另一方面，(-NH-AA-C(0)-)n片段中的一个或多个AA是Asp和/或Arg。在另一方面，整数o为1或更大。在另一方面，整数m为2或更大。药物或其类似物或衍生物和任选的另外的接头和另外的结合受体的配体可在2,0>二氨基链烷酸片段的其他游离NH侧链或在由其中自由价表示的末端羧酸酯上与上式化合物连接。在另一个实施方案中，描述了含丝裂霉素和长春花生物碱的叶酸配体多药物缀合物并具有下式在另一个实施方案中，描述了含丝裂霉素、aclamycin和长春花生物碱的叶酸配体多药物缀合物并具有下式<formula>formulaseeoriginaldocumentpage47</formula>在另一个实施方案中，阐述药用组合物。该药用组合物含本文中所述药物释放缀合物和组合应用的药学上可接受的载体、赋形剂和/或稀释剂。在另一个实施方案中，阐述在具有致病细胞群体的宿主动物中消除致病细胞群体的方法。在一个示例性方面，致病细胞群体的膜具有与结合受体的部分或其类似物或衍生物结合的可用结合部位，该结合部位由致病细胞唯一表达、过度表达或优先表达。该方法包括给予宿主本文中所述药物释放缀合物或本文中所述其药用组合物的步骤。卵巢、乳腺、结肠、肺、鼻、喉、脑的上皮癌；和其它种类胂瘤细胞；感染因子、激活的巨嗜细胞、激活的单核细胞等。本文中所述药物释放缀合物可用于人临床医学和兽用。因此，用药物释放缀合物治疗的具有致病细胞群体的宿主动物可以是人，或在兽用情况中，可以是实验动物、畜牧动物、家畜或野生动物。可给予宿主动物本文中所述药物释放缀合物，这些动物包括但不限于人；实验动物如啮齿类动物(例如小鼠、大鼠、仓鼠等)、兔、猴、黑猩猩；家畜例如狗、猫和兔；畜牧动物例如母牛、马、猪、绵羊、山羊；和圈养的野生动物例如熊、熊猫、狮、虎、豹、象、斑马、长颈鹿、大猩猩、海S參和鲸鱼。本文中所述药物释放缀合物可用于治疗宿主动物中多种病原体和致病细胞。本文中使用的"致病细胞"表示癌细胞；感染因子例如细菌和病毒；细菌或病毒感染的细胞；能造成疾病状态的激活的巨嗜细胞；和唯一表达、优先表达或过度表达配体受体例如维生素受体或与维生素类似物或衍生物结合的受体的任何其它类型的致病细胞。致病细胞也可包括造成疾病状态的任何细胞，该疾病状态用药物释放缀合物治疗后导致疾病症状减轻。致病细胞还可以是在某些环境下致病的宿主细胞，例如对宿主疾病产生移植物反应但在其它环境下不致病的免疫系统细;包。因此，致病细胞群体可以是致瘤性癌细胞群体，它们包括良性胂瘤和恶性胂瘤，或它可以是非致瘤性。癌细胞群体可自发产生，或通过此类过程例如宿主动物的种系突变或体细胞突变产生，或它可通过化学、病毒或放射引起。本发明可用于治疗此类癌症例如癌、肉瘤、淋巴瘤、霍奇金病、黑素瘤、间皮瘤、伯基特淋巴瘤、鼻咽癌、白血病和骨髓瘤。癌细胞群体可包括但不限于口腔、曱状腺、内分泌、皮肤、胃、食管、喉、胰腺、结肠、膀胱、骨、卵巢、子宫颈、子宫、乳腺、睾丸、前列腺、直肠、肾、肝和肺癌。在其中致病细胞群体是癌细胞群体的实施方案中，给予的药物释放缀合物的作用是通过肿瘤实质减少或消除或肺瘤细胞增殖抑制测量的治疗反应。在肿瘤的情况中，消除可以是原发肿瘤细胞或转移细胞或原发肿瘤分离过程中的细胞消除。还应包括用药物释放缀合物预防性治疗，防止通过任何治疗方法包括外科手术除去肿瘤、放疗、化疗或生物疗法除去肿瘤后肿瘤恢复。预防性治疗可以是用药物释放缀合物进行初始治疗，例如按每日多剂量方案治疗，和/或可以是初始治疗后间隔数日或数月后采取的其它治疗或系列治疗。因此，消除上述任何致病细胞群体包括减少致病细胞的数目，抑制致病细胞增殖、防止致病细胞恢复的预防性治疗，或导致疾病症状减轻的致病细胞治疗。在消除癌细胞的情况中，本文中所述方法可与除去肿瘤的外科手术、放疗、化疗或生物疗法例如其它免疫疗法联用，免疫疗法包括但不限于单克隆抗体疗法、免疫调节剂治疗、免疫效应器细胞过继转移；造血生长因子、细胞因子和接种疫苗治疗。本文中所述方法也适用于引起多种感染性疾病的致病细胞群体。例如，本发明适用于此类致病细胞群体如细菌；包括酵母在内的真菌；病毒；病毒感染的细胞；支原体和寄生虫。可用本文中所述药物释放缀合物治疗的感染性生物是本领域中公认的造成动物发病的任何感染性生物，它们包括生物例如革兰氏阴性或革兰氏阳性球菌或杆菌类细菌。例如变形杆菌种、克雷伯杆菌种、普罗维登斯菌种、耶尔森菌种、欧文菌种、肠杆菌种、沙门菌种、沙雷菌种、气杆菌种、埃希杆菌种、假单胞菌种、志贺菌种、弧菌种、气单胞菌种、弯曲菌种、链球菌种、葡萄球菌种、乳杆菌种、微球菌种、莫拉菌种、杆菌种、梭菌种、棒状杆菌种、埃氏杆菌种、微球菌种、分支杆菌种、奈瑟菌种、嗜血杆菌种、类杆菌种、李斯特菌种、丹毒丝菌种、不动杆菌种、布鲁菌种、巴斯德菌种、弧菌种、黄杆菌种、梭杆菌种、链杆菌种、鞘杆菌种、军团杆菌种、密螺旋体种、包柔螺旋体种、钩端螺旋体种、放线菌种、诺卡菌种、立克氏体种和任何在宿主动物中造成疾病的其它细菌种，可用本文中所述药物释;^缀合物治疗。尤其关注的是对抗生素耐药的细菌例如抗生素抗性链球菌种和葡萄球菌(Staphlococcus)种，或对抗生素敏感但用抗生素治疗后造成再感染以致最终产生耐药生物的细菌。在不存在抗生素的情况下，对抗生素敏感但用抗生素治疗后造成再感染以致最终产生耐药生物的细菌可用本文中所述药物释放缀合物治疗，或可用本文中所述药物释放缀合物与低于正常给予宿主动物的剂量的抗生素联合治疗，避免产生这些抗生素抗性菌^^。也可用本文中所述药物释》丈缀合物治疗由病毒例如DNA和RNA病毒造成的疾病。此类病毒包括但不限于DNA病毒例如乳头状瘤病毒、细小病毒、腺病毒、疱渗病毒和痘苗病毒；RNA病毒例如沙粒病毒、冠形病毒、鼻病毒、呼吸合胞病毒、流感病毒、细小核糖核酸病毒、副粘病毒、呼肠病毒、反4争录病毒、慢病毒和杆状病毒。包括酵母在内的任何真菌、支原体种、寄生虫或造成动物疾病的其它感染性生物。可用本文中所述方法和药物释放缀合物治疗的真菌的实例包括生长成霉菌或酵母状的真菌，包括例如造成例如以下疾病的真菌癣、组织胞浆菌病、酵母病、曲霉病、隐球菌病、孢子丝菌病、球孢子菌病、类球孢子菌病、毛霉菌病、着色真菌病、皮肤真菌病、原壁菌病、镰刀菌病、糠疹、足分支菌病、类球孢子菌病、暗色丝状菌病、假性阿利什利菌病、孢子丝菌病、毛孢子菌病、肺嚢虫属感染和念珠病。还可用本文中所述药物释》文缀合物治疗寄生虫感染，包括但不限于以下寄生虫引起的感染绦虫属例如绦虫、Hymenolepsis;裂头绦虫属和棘球绦虫种；吸虫例如姜片虫属、异形吸虫属、后殖吸虫属、支睾吸虫属、片吸虫属；并殖吸虫属和血吸虫种；蛔虫例如蛲虫属、鞭虫属、蛔虫属、钩虫属、板口线虫属、类圓线虫属、毛线虫属、吴策线虫属、布氏丝虫属、罗阿属盘尾属；和龙线虫种；变形虫例如耐格里属和棘阿米巴种；和原虫例如疾原虫属、锥虫属、利什曼虫、弓形虫属、内阿米巴属、贾第鞭毛虫属、等孢子球虫属、隐孢子虫属和肠上皮细胞微孢子虫属(Enterocytozoon)。如果这些细胞优先表达配体受体例如维生素或其类似物或衍生物的受体，则药物释》文缀合物导向的致病细胞还可以是具有内源性病原体的细胞，例如病毒、支原体、寄生虫或细菌感染的细胞。在一个实施方案中，当配体与受体、转运蛋白或其它与配体特异性结合并在致病细胞上优先表达的表面存在的蛋白结合时，药物释放缀合物可内化到目标致病细胞中。这种内化作用例如可通过受体介导的胞吞实现。如果药物释放缀合物含可分离接头，则配体和长春花化合物可在细胞内解离，长春花4匕合物可在其细胞内靶上起作用。在另一个示例性实施方案中，药物释放缀合物的配体可与致病细胞结合，使长春花化合物与致病细胞表面紧密締合。然.后通过可分离接头断裂，释^:长春花化合物。例如，如果可分离接头是二硫基，则可通过蛋白质二硫键异构酶释方文长春花化合物。然后长春花化合物被致病细胞吸收，该致病细胞与结合受体的药物释放缀合物结合，或长春花化合物可^c与其密切相邻的另一个致病细胞吸收。或者，可通过细胞内蛋白质二硫键异构酶释i丈长春花化合物，其中可分离接头是二硫基。也可通过水解机制例如4安上述某些p消除机理进行的酸催化水解，或通过氧镜离子产生邻位切、助裂解或内酯锚(lactonmm)离子形成机制释放长春花化合物。一种或多种可分离接头的选择将决定从缀合物释放长春花化合物的机制。可以认识到，这种选择可由药物释放缀合物待使用的条件预确定。在另一个示例性实施方案中，当接头不含可分离接头时，药物释放缀合物的配体部分可与致病细胞结合，使致病细胞表面上的长春花化合物靶向致病细胞，便于能与长春花化合物结合的其它分子攻击。或者，在该实施方案中，结合后，可使药物释放缀合物内化到目标细胞内，且配体部分和长春花化合物可在细胞内保持締合，并且长春花化合物发挥其作用不需与配体部分离解。在又另一个实施方案中，或在与其中药物释^:缀合物与维生素受体或另一个配体受体结合的上述实施方案组合时，缀合物可与血清中的可溶性维生素受体或血清蛋白例如白蛋白结合，导致缀合物的循环时间比未缀合的长春花化合物的长，且缀合物对致病细胞群体的活性比未缀合的长春花化合物的高。配体例如维生素的结合部位可包括能够与配体特异性结合的配体的受体，其中由致病细胞群体唯一表达、过度表达或优先表达受体或其它蛋白。由致病细胞唯一表达、过度表达或优先表达的表面存在的蛋白通常是在非致病细胞中不存在或存在的浓度较低的受体，提供选择性消除致病细胞的方法。药物释放缀合物与癌细胞或其它类型致病细胞上的受体结合的亲和力可以很高。配体自身可具有高结合亲和力，或可通过使用化学修饰的配体提高结合亲和力。在联合疗法中，本文中所述药物释放缀合物可与任何其它已知药物一起给予，无论这些已知药物是否为靶向的其他药物。示例性的其它药物包括但不限于肽、寡肽、retro-inverso寡肽、蛋白、其中至少一个非肽键取代肽键的蛋白类似物、脱辅基蛋白、糖蛋白、酶、辅酶、酶抑制剂、氨基酸及其衍生物、受体和其它膜蛋白、抗原及其抗体；半抗原及其抗体、激素、脂质、磷质、脂质体、毒素、抗生素、镇痛药、支气管扩张药、P-阻断剂、抗微生物药、降压药；心血管药包括抗心律失常药、强心甙、抗心绞痛药、血管舒张药；中枢神经系统药包括兴奋剂、促精神药、抗躁狂药和抗抑郁药；抗病毒药；抗组胺药；抗癌药包括化疗药、安定药、抗抑郁药、H-2拮抗剂、抗惊厥药、止吐药、前列腺素和前列腺素类似物；肌肉松弛药、抗炎物质、兴奋剂、减充血药、止吐药、利尿药、解痉药、平喘药、抗帕金森病药、祛痰药、止咳药、粘液溶解药；矿物和营养添加剂。在另一个示例性方面，其他药物可选自能够刺激内源性免疫反应的化合物。合适的化合物包括但不限于细胞因子或免疫细胞生长因子，例如白介素'1-18、千细胞因子、碱性FGF、EGF、G陽CSF、GM誦CSF、FLK-2配体、HILDA、MTP-lot、TGF画a、TGF誦(3、M-CSF、IFN-a、IFN-(3、IFN-y、可溶性CD23、LIF及其组合。可使用这些免疫刺激因子的治疗有效组合。在一个实施方案中，例如治疗有效量例如在每日多剂量方案中约O.lMlU/m"剂量/日-约15MlU/mV剂量/日的量的IL-2;和例如在每日多剂量方案中约0.1MlU/mV剂量/日-约7.5MlU/m々剂量/日的IFN-a可与药物释放缀合物一起使用，在具有致病细胞的宿主动物中消除、减少或抑制致病细胞(MIU=百万国际单位；m2=普通人的近似体表面积)。在另一个实施方案中，可按上述白介素和千扰素的治疗有效量使用IL-12和IFN-a，在再另一个实施方案中，可按上述白介素和干扰素的治疗有效量使用IL-15和IFN-a。在一个备选的实施方案中，可按上述治疗有效量联合使用IL-2、IFN-ot或IFN-y和GM-CSF。也可使用细胞因子的任何其它有效组合，包括其它白介素和干扰素和集落刺激因子的组合。另外，其它药物可以是本领域中已知的任何药物，它们是细胞毒或细胞抑制药物、促进肺瘤渗透性的药物、抑制肺瘤细胞增殖的药物、促进凋亡的药物、减少革巴细胞抗凋亡活性的药物，这些药物可用于治疗感染因子造成的疾病、增强对致病细胞的内源性免疫反应，或可用于治疗任何类型的致病细胞造成的疾病状态。示例性合适的其它药物包括肾上腺皮质素和皮质类固醇、烷化剂、抗雄激素药、抗雌激素药、雄激素、aclamycin和aclamycin衍生物、雌激素；抗代谢药例如阿糖胞苷、噤呤类似物、嗜啶类似物和甲氨蝶呤、白消安、卡铂、苯丁酸氮芥、顺铂和其它铂化合物；他莫昔芬、泰素、紫杉醇、紫杉醇衍生物、泰索帝@、环磷酰胺、道诺霉素、根霉素、T2毒素、植物生物碱、泼尼松、羟基脲、替尼泊苦、丝裂霉素、discodermolides、非长春花生物碱微管抑制剂、埃博霉素、tubulysin、环丙基苯并[e]吲哚酮、开环(化co-)环丙基苯并[e]吲哚酮、O-Ac-开环-环丙基苯并[e]吲哚酮、博来霉素和任何其它抗生素、氮芥、亚硝基脲、秋水仙碱、秋水仙碱衍生物、异秋水仙碱、硫代秋水仙碱、三苯甲基半胱氨酸、HalicondrinB;多拉司他汀例如多拉司他汀10;蝇蕈素例如a-蝇蕈素、喜树碱、伊立替康和其它喜树碱衍生物；格尔德毒素和格尔德毒素衍生物、雌莫司汀、诺考达唑、MAP4、秋水酰胺、长春酰胺、长春碱、长春新碱、长春碱、长春朵灵、环氧长春碱、长春瑞滨、咪朵卡、西布曲明、托曲珠利、长春花酸、美登素及其类似物和衍生物；吉西他滨；抗炎和促炎药物；肽和肽^^莫拟信号转导抑制剂；和任何其它本领域公认的药物或毒素。可用于联合疗法的其它药物包括青霉素、头孢菌素、万古霉素、红霉素、'克林霉素、利福平、氯霉素；氨基糖甙抗生素、庆大霉素、两性霉素B、阿昔洛韦、曲氟尿苷、更昔洛韦、齐多夫定、金刚烷胺、利巴韦林和任何其它本领域中公认的抗微生物化合物。任何上述其它药物的类似物或衍生物也可用于联合疗法。在另一个示例性实施方案中，提供药用组合物。当给予一个或多个剂量时，该药用组合物含有效消除宿主动物中致病细胞群体的量的药物释放缀合物。优选通过肠胃外例如皮内、皮下、肌内、腹膜内、静脉内或胸内给予宿主动物药物释放缀合物。或者，可通过其它医学上有效的方法例如口服给予宿主动物药物释放缀合物，可使用任何有效剂量和合适的治疗剂型包括纟爰释剂型。可用于口服剂型的示例性赋形剂包括但不限于玉米淀粉、明胶、乳糖、硬脂酸镁、碳酸氢钠、纤维素衍生物和淀粉羟乙酸钠。肠胃外剂型的实例包括溶于等渗盐水、5%葡萄糖或其它熟知的药学上可接受的液体载体例如液体醇、二醇、酯和酰胺的活性剂的水溶液。本发明肠胃外剂型可以是含一定剂量的药物释放缀合物的可溶解的冻干物形式。在本发明实施方案的一个方面，可给予任何数目的本领域中已知的緩释剂型，例如可使用美国专利号4,713,249;5，266,333和5,417,982中所述可生物降解的糖基质，所述文献通过引用结合到本文中，或可使用緩释泵(例如渗透泵)。可在给予药物释放缀合物之前、之后或同时给予宿主动物联合疗法中的其它药物，且给予的其它药物可以是含药物释放缀合物的同一组合物的一部分，或与药物释》文缀合物不同组合物的部分。有效剂量的其它药物可用于任何此类联合疗法。在另一个示例性方面，可4吏用一种以上的药物释放缀合物。例如，可按联合给药方案，用含不同配体的缀合物例如叶酸-长春花和维生素Bu-长春花缀合物等联合处理宿主动物。在另一个示例性实施方案中，可用含一种以上配体的缀合物例如含多个叶酸或多个维生素B12分子的一个缀合物，或含配体组合的同一缀合物例如与叶酸和维生素B12配体缀合的长春花化合物处理宿主动物。另外，还可以独立的药物释放缀合物，使用含不同种类的长春花化合物的药物释放缀合物。药物释》文缀合物的单位日剂量可变化很大，取决于宿主的病症、所治疗的疾病状态、缀合物的分子量、其给药途径和组织分布；和与其它治疗例如放疗或联合疗法中的其它药物联用的可能性。给予宿主动物的有效量取决于体表面积、重量和医师对患者病症的评价。有效剂量范围可为例如约1ng/kg-约1mg/kg;约1昭/kg-约500|ng/kg;约1(1g/kg-约訓|Llg/kg。可使用给予药物释放缀合物的任何有效方案。例如，可按单剂量给予药物释^:缀合物，或可分次按每日多剂量方案给药。另外，可使用交错给药方案例如1-3天/周代替每日治疗，为定义本发明的目的，将这种间歇或每日交错给药方案视为等同于每日治疗，并包括在本发明中。在一个示例性实施方案中，用药物释^:缀合物多次注射处理宿主动物，消除致病细胞群体。在一个实施方案中，例如在12-72小时间隔期间或48-72小时间隔期间，向宿主多次(优选约2至约50次)注射药物释放缀合物。可在初始注射后，在数日或数月间隔期间，给予宿主动物另外的药物释放缀合物注射液，另外的药物释放缀合物注射液可防止致病细胞所致的疾病4夫态复发。在一个示例性方面，可用于药物释放缀合物的维生素或其类似物或衍生物，包括与在激活的巨嗜细胞上特异性表达的受体例如与叶酸结合的叶酸受体结合的那些或其类似物或衍生物。叶酸连接的缀合物例如可用于杀灭或抑制造成宿主疾病状态的激活的巨嗜细胞的活性。当给予患激活的巨嗜细胞介导的疾病状态的宿主动物时，此类巨嗜细胞靶向缀合物的作用是将缀合的长春花化合物在激活的巨嗜细胞群体中集中并与E嗜细胞締合，杀灭激活的巨嗜细胞或抑制巨嗜细胞功能。消除、减少或使激活的巨嗜细胞群体失活的作用是终止或减少激活的巨嗜细胞介导的所治疗的疾病状态的发病特性。已知由激活的巨嗜细胞介导的示例性疾病包括类风湿性关节炎、溃疡性结肠炎、节段性回肠炎、银屑病、骨髓炎、多发性硬化、动脉粥样硬化、肺纤维化、肉瘤病、全身性硬皮病、器官移植排斥(GVHD)和慢性炎症。通常持续给予药物释放缀合物，直至疾病状态的症状减轻或消除。可通过肠胃外例如皮内、皮下、肌内、腹膜内或静脉内给予宿主动物药物释放缀合物和组合应用的药学上可接受的载体，以杀灭激活的巨嗜细胞或抑制激活的巨嗜细胞的功能。或者，可通过其它医学上的有效方法给予宿主动物药物释放缀合物，可按标准或緩释剂型给予有效剂量。可单独使用或与其它公认的治疗激活的巨嗜.细胞介导的疾病状态的治疗方法联合使用所述治疗方法。以下示例性实施方案无意且不应视为限制性的方案。例如，在本文中提供的各化合物中，用于形成接头的氨基酸的立体化学可任选选自天然L构型或非天然D构型。通过NMR、MS和/或UV光谱和/或说明的HPLC表征各实施例；必要时说明选择的特征信号。方法实施例方法实施例1抑制小鼠中肿瘤生长静脉内(i.v.)给予具有胂瘤的动物后，评价本文中所述化合物在皮下具有M109肿瘤的Balb/c小鼠中的抗肿瘤活性。在右腋窝的皮下组织中接种lx106M109细胞的肿瘤(to=60mm3平均肿瘤体积)约11天后，每周三次(TIW),通过i.v.注射给予小鼠(5/组)1500nmol/kg药物释放缀合物或等同剂量体积的PBS(对照)，连续3周。每间隔2天或3天，用卡尺测量各处理组的肿瘤生长。用方程V=axb"2计算肿瘤体积，其中"a"为胂瘤长度，"b"为宽度，单位为毫米。方法实施例2抑制小鼠中肿瘤生长静脉内(i.V.)给予具有肿瘤的动物后，评价本文中所述化合物在皮下具有KB肿瘤的nu/nu小鼠中的抗肿瘤活性。在右腋窝的皮下组织中接种1x106KB细胞的肿瘤(tQ=50-100mm3平均肿瘤体积)约8天后，每周三次(TIW),通过i.v.注射给予小鼠(5/组)5pmol/kg药物释放缀合物或等同剂量体积的PBS(对照)，连续3周。每间隔2天或3天，用卡尺测量各处理组的肿瘤生长。用方程V二axb"2计算肿瘤体积，其中"a"为肿瘤长度，"b"为宽度，单位为毫米。方法实施例3抑制细胞DNA合成用体外细胞毒测定评价本文中所述化合物，该测定用于预测药物抑制叶酸受体-阳性KB细胞生长的能力。化合物由按本文中所述方案制备的与各自的化疗药物连接的叶酸组成。在37°〇下，在至少100倍过量叶酸存在或不存在下，使KB细胞暴露于指定浓度的叶酸-药物缀合物长达7h。然后用新制培养基冲洗细胞一次，在37。C下，在新制培养基中温育72小时。用3H-胸苷结合测定，评价细胞存活力。如本文图中所示，剂量依赖性细胞毒性可测，在大多数情况中，IC5o值(结合至新合成DNA的3H-胸苦减少50%所需的药物缀合物浓度)在低纳摩尔浓度范围内。另夕卜，在过量游离叶酸存在下，这些缀合物的细胞毒性减低，证明观察到的杀灭细胞作用通过与叶酸受体结合介导。方法实施例4相对亲和力测定按照经稍微修改的前述方法(Westerhof,G.R.,J.H.Schoraagel，etal.(1995)A/o/.尸/2am7.48:459-471)，测定相对于叶酸的叶酸受体(FR)的亲和力。简而言之，将FR阳性KB细胞密集接种在24孔细胞培养板中，让其与塑料附着18h。在指定孔中，在递增浓度的试验物或叶酸存在和不存在下，用补充100nMSH-叶酸的不含叶酸的RPMI(FFRPMI)替换消耗的温育培养基。将细胞在37。C下温育60min,然后用pH7.4的PBS冲洗3次。将500plpH7.4的1%SDS/PBS加入各孔。然后收集细胞裂解产物，将其加入含5mL闪烁混合物的各瓶中，然后计数测定^L射性。阴性对照管仅含3H-叶酸/FFRPMI(无竟争剂)。阳性对照管含终浓度1mM叶酸，将在这些样品中测得的CPM(代表非特异性结合的标记)从所有样品中扣除。需要说明的是，相对亲和力定义为置换50。/。与KB细胞上的FR结合的311-叶酸所需化合物的摩尔比率的倒数，叶酸对FR的相对亲和力定为1。方法实施例54T-1肿瘤体积测定6-7周龄小鼠(雌性Balb/c种系)得自Harlan,Inc.，Indianapolis,IN。在进行该试验前，用不含叶酸的Harlan飼料饲养小鼠共计3周，并在试验期间用不含叶酸的Harlan飼料饲养小鼠。在右腋窝的皮下组织中接种叶酸受体-阴性4T-1肿瘤细胞(1><106细胞/动物)。接种肿瘤约5天后，当4T-1肿瘤平均体积为~100mm3时，每周三次(TIW)，通过i.v.注射给予小鼠(5/组)3pmol/kg药物释放缀合物或等同剂量体积的PBS(对照)，连续3周。每间隔2天或3天，用卡尺测量各处理组的肿瘤生长。用方程V=axb"2计算肿瘤体积，其中"a"为肿瘤长度，"b"为宽度，单位为毫米。方法实施例6重量测定在肿瘤接种后(PTI)指定天数，如相关肿瘤体积测定中所述样品图所示，在小鼠(5只小鼠/组)中测定小鼠的重量变化百分率。方法实施例7制备叶酸-肽的通用方法通过聚合物载体的顺序方法，用标准方法例如基于酸-敏感性Fmoc-AA-Wang树脂的Fmoc-策略，制备含肽的本文中所述接头。例如，通过流程1所示方法，由Wang树脂承栽的氨基酸和Fmoc保护的氨基酸合成，制备含叶酸的肽基片段Pte-Glu-(AA)n-NH(CHR2)C02H(3)。流程1<formula>formulaseeoriginaldocumentpage59</formula>(a)20%哌餘嫌；(b)Fmoc國AA-OH,PyBop,DIPEA,DMF;(c)Fmoc-Glu-O-t-Bu或Fmoc-Glu(y-O-t-Bu)-OH,PyBop,DIPEA,DMF;(d)7V10(TFA)-Pte-OH;PyBop,DIPEA,DMSO;(e)TFAA,(CH2SH)2,/-Pr3SiH;(f)NH4OH,pH9-10。在本文中所述方法的该示例性实施方案中，R,为Fmoc,R2为需要的适当保护的氨基酸側链。Wang是2-氯三苯甲基树脂，DIPEA为二异丙基乙胺。使用标准偶联方法例如PyBOP和本文中所述或本领域中已知的其它方法，其中偶l关剂示例性地用作活化剂，确保有效偶联。在每个偶联步骤后，在标准条件下例如用哌啶、氟化四丁铵(TBAF)等处理后，将Fmoc保护基除去。按流程l中所述，使用适当保护的氨基酸构建单元例如Fmoc-Glu-OtBu、A^°-TFA-Pte-OH等，在步骤(b)中，由Fmoc-AA-OH代表适当保护的氨基酸构建单元。因此，AA是指任何适当保护的氨基酸原料。可以理解，本文中使用的术语氨基酸是指具有被一个或多个碳分隔的胺和羧酸官能团的任何试剂，它们包括天然a和p氨基酸；和这些氨基酸的氨基酸衍生物和类似物。尤其是，在本文中所述叶酸-肽合成中，还可使用侧链被保护的氨基酸例如保护的丝氨酸、苏氨酸、半胱氨酸、天冬氨酸等。另外，在本文中所述叶酸-肽合成中，原料还可包4舌Y、5或更长的同源氨基酸。另外，在本文中所述叶酸-肽合成中，原料还可包括具有同系物侧链或另一种支链结构的氨基酸类似物例如正亮氨酸、异缬氨酸、(5-甲基苏氨酸、P-曱基半胱氨酸、|3,(3-二甲基半胱氨酸等。将涉及式Fmoc-AA-OH的Fmoc保护的氣基酸(AA)的偶联顺序(步骤(a)&(b》进行V'次，制备固相支持肽(2)，其中n为整数，可等于0-约100。最后偶联步骤结束后，将剩余的Fmoc基团除去(步骤(a)),使肽按顺序偶联到谷氨酸衍生物(步骤(c)),脱保护和与TFA保护的蝶酸偶联(步骤(d))。然后，用三氟乙酸、乙二硫醇和三异丙基硅烷处理后，使肽与聚合物载体解离(步骤(e))。这些反应条件导致同时除去可形成适当保护的氨基酸侧链一部分的"Bu、^Boc和Trt保护基。用碱处理后，将TFA保护基除去(步骤(f))，得到含叶酸的肽基片段(3)。按照方法实施例7(流程l)的通用方法，按照以下顺序，使Wang树脂结合的4-曱氧基三苯曱基(MTT)-保护的Cys-NH2反应1)a.Fmoc-Asp(OtBu)-OH,PyBOP,DIPEA;b.20%哌咬/DMF;2)a.Fmoc隱Asp(OtBu)-OH,PyBOP,DIPEA;b.20%派咬/DMF;3)a.Fmoc-Arg(Pbf)-OH,PyBOP,DIPEA;b.20%咪咬/DMF;4)a.Fmoc-Asp(OtBu)岡OH,PyBOP,DIPEA;b.20。/。嗛卩定/DMF;5)a.Fmoc-Glu-OtBu,PyBOP,DIPEA;b.20。/o哌^!t/DMF;6)N化-TFA曙蝶酸，PyBOP:DIPEA。将MTT、tBu和Pbf保护基用TFA/H20/TIPS/EDT(92.5:2.5:2.5:2.5)除去；用pH=9.3的NH4OH水溶液将TFA保护基除去。选择的&NMR(D20)S(ppm)8.68(s,1H,FAH-7),7.57(d,2H,J-8;4Hz，FAH-12&16)，6.67(d>2H,J9Hz,FAH-13&15),4.40-4.75(m，5H),4.35(m，2H)，4.16(叫1H),3.02(ra,2Hi)，2.55-2.95(m,8H)，2.42(m2H),2.00-2.30(叫2H)，1.55-1.90(叫2H),1.48(m2H);MS(ESI，m+H*)104(;.实施例2按照方法实施例7(流程l)的通用方法，按照以下顺序，使Wang树脂结合的4-曱氧基三苯曱基(MTT)-保护的Cys-NH2反应1)a.Fmoc-P-氨基丙氨酸(NH-MTT)-OH,PyBOP,DIPEA;b.20%喊"加娜;2)a.Fmoc-Asp(OtBu)-OH,PyBOP,DIPEA;b.20%哌咬/0娜；3)a.Fmoc-Asp(OtBu)-OH,PyBOP,DIPEA;b.20%哌啶/DMF;4)a.Fmoc國Asp(OtBu)-OH,PyBOP，DIPEA;b.20%派咬/DMF;5)a.Fmoc-Glu画OtBu,PyBOP,DIPEA;b.20%旅"加娜；6)N"画TFA-蝶酸，PyBOP,DIPEA。将MTT、tBu和TFA保护基用a.2。/o肼/DMF;b.TFA/H20/TIPS/EDT(92.5:2.5:2.5:2.5)除去。下表中所示为用于制备的试剂:<table>tableseeoriginaldocumentpage61</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage62</column></row><table>如下进行偶联步骤向肽合成容器中加入树脂、氨基酸溶液、DIPEA和PyBOP。鼓泡通入氩气1h,用DMF和IPA洗涤3x。用20%哌啶的DMF溶液使Fmoc脱保护3x(10min)，然后使各氨基酸偶联。继续偶联直至完成所有6个偶耳关步骤。最后，将树脂用2。/。肼的DMF溶液洗涤3x(5min),使蝶酸上的TFA保护基解离。用以下试剂使肽类似物从树脂解离92.5%(50ml)TFA、2.5%(1.34ml)H20、2.5%(1.34ml)三异丙基硅烷、2.5%(1.34ml)乙二硫醇，解离步骤操作如下加入25ml解离试剂，鼓泡1.5h,吸去溶液(drain)，用剩余试剂洗涤3x。蒸发至约5mL,用乙醚沉淀。离心，干燥。按以下方法纯化柱-WatersNovaPakC18300x19mm;《爰冲液A=10mM乙酸铵，pH5;B二CAN;l。/。B-20o/oB,40分钟，流速15ml/min，得到350mg(64%);HPLC-RT10.307min，100%纯，&HMR图谱与归属结构一致，MS(ES-):1624.8,1463.2，1462.3,977.1,976,2,975.1,974.1,486.8>477.8.实施例3按照方法实施例7(流程l)的通用方法，按照以下顺序，使Wang树脂结合的4-甲氧基三苯曱基(MTT)-保护的Cys-NH2反应1)a.Fmoc-(3-氨基丙氨酸(NH-IvDde)-OH,PyBOP,DIPEA;b.20。/。咪咬/DMF;2)a.Fmoc画Asp(OtBu)-OH,PyBOP,DIPEA;b.20。/。咪"加MF;3)a.Fmoc画Asp(OtBu)-OH,PyBOP,DIPEA;b.20%艰咬/DMF;4)a.Fmoc-Asp(OtBu)曙OH,PyBOP,DIPEA;b.20%哌啶/DMF;5)a.Fmoc-Glu-OtBu,PyBOP,DIPEA;b.20%^P^MF;6)N"-TFA-蝶酸，PyBOP,DIPEA。将MTT、tBu和TFA保护基用a.2。/o肼/DMF;b.TFA/H20/TIPS/EDT(92.5:2.5:2.5:2.5)除去。下表中所示为用于制备的试剂:<table>tableseeoriginaldocumentpage63</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage64</column></row><table>如下进行偶联步骤向肽合成容器中加入树脂、氨基酸的DMF溶液、DIPEA和PyBOP。鼓泡通入氩气1h,用DMF和IPA洗涤3x10ml。用20%哌啶的DMF溶液使Fmoc脱保护(3xl0ml)(10min)，然后使各氨基酸偶联。继续偶联直至完成6个偶联步骤。在偶联结束时，将树脂用2%肼的DMF溶液洗涤3x10ml(5min)，使蝶酸上的TFA保护基和(3-氨基丙氨酸上的IvDde保护基解离。最后，在DMF中，用DIPEA和PyBop将|3-氨基丙氨酸的游离胺基与Fmoc-硫代丙酸偶联。鼓泡通入氩气1h，用DMF和IPA洗涤3x10ml。将树脂在氩气下干燥30min。用以下试剂使肽类似物从树脂解离92.5%(50ml)TFA、2.5%(1.34ml)H20、2.5%(1.34ml)三异丙基硅烷、2.5%(1.34ml)乙二硫醇，解离步骤操作如下加入25ml解离试剂，鼓泡1.5h,吸去溶液，用剩余试剂洗涤3x。蒸发至约5mL,用乙醚沉淀。离心，干燥。按以下方法纯化柱-WatersNovaPakCi8300x19mm;緩冲液A=10mM乙酸铵，pH5;B=CAN;1%B-20%B,40分钟，流速15ml/min，得到450mg(65%);巾HMR图谱与归属结构一致。实施例4按照方法实施例7(流程l)的通用方法，按照以下顺序，使Wang树脂结合的MTT-保护的Cys-NH2反应1)a.Fmoc-Asp(OtBu)-OH，PyBOP,DIPEA;b.20yo哌咬/DMF;2)a，Fmoc-Asp(OtBu)-OH，PyBOP,DIPEA;b.200/o咪口加MF;3)a.Fmoc-Arg(Pbf)-OH,PyBOP,DIPEA;b.200/o哌咬/DMF;4)a,Fmoc-Asp(OtBu)-OH,PyBOP,DIPEA;b.20%哌吱/DMF;5)a.Fmoc隱Glu(y-OtBu)曙OH,PyBOP,DIPEA;b.20%哌啶/DMF;6)N^画TFA陽蝶酸，PyBOP,DIPEA。将MTT、tBu和Pbf保护基用TFA/H20/TIPS/EDT(92.5:2.5:2.5:2.5)除去；将TFA保护基用pH=9.3的NK(OH水溶液除去。^NMR图谱与归属结构一致。按照方法实施例7(流程l)的通用方法，按照以下顺序，使Wang树脂结合的MTT-保护的D-Cys-NH2反应1)a.Fmoc-D-Asp(OtBu)-OH,PyBOP,DIPEA;b.20%哌啶/0，；2)a.Fmoc-D-Asp(OtBu)-OH,PyBOP,DIPEA;b.20。/o哌^^/DMF;3)a.Fmoc-D-Arg(Pbf)-OH,PyBOP，DIPEA;b.20%哌咬/0嫌；4)a.Fmoc-D-Asp(OtBu)隱OH,PyBOP，DIPEA;b,20。/。哌。^/DMF;5)a.Fmoc-D-Glu-OtBu,PyBOP,DIPEA;b,20%咪咬/0碰；6)N、TFA-蝶酸，PyBOP,DIPEA。将MTT、tBu和Pbf保护基用TFA/H20/TIPS/EDT(92.5:2.5:2.5:2.5)除去；将TFA保护基用pH=9.3的NH4OH水溶液除去。！HNMR图谱与归属结构一致。实施例<formula>formulaseeoriginaldocumentpage65</formula>、实施例6<formula>formulaseeoriginaldocumentpage66</formula>在0。C下，将2-[(苯并三唑-l-基-(氧基羰基氧基)-乙基二硫基]-吡啶HC1(601mg)和378pLDIPEA依次加入脱乙酰基长春碱酰肼(668mg)的5mlDCM溶液中。让反应物升温至室温，搅拌3小时。TLC(15%MeOH/DCM)表明完全转化。混合物经硅胶层析(l:9MeOH/DCM)纯化。将合并的流分蒸发，将浓缩物再溶于DCM,用10%Na2CO3、盐水洗涤，干燥(MgS04)，蒸发至550mg(80%);HPLC誦RT12.651min,91%纯，HHMR图谱与归属结构一致，MS(ESI+):984.3,983.3,982.4,492.4,491.9,141.8。该方法的其它细节见美国专利申请公布号US2005/0002942Al所述，所述文献通过引用整体结合到本文中。实施例7按以下流程制备丝裂霉素C-乙基二硫化(disulfide)丙酸(a)二异丙基乙胺(DIPEA),MeOH,向氨基乙基二硫化丙酸(81mg,0.372mmol)的2mL甲醇(MeOH)溶液中加入DIPEA(0.13mL,0.746mmol)。向该溶液中緩慢加入丝裂霉素-A(100mg,0.286mmol)的MeOH(3.0mL)溶液。将得到的溶液搅拌3h。TLC(20。/。MeOH/CHCl3)分析表明反应完全。将溶剂减压除去，将残渣用硅胶柱纯化。梯度洗脱(10%-.20%MeOH7CHCl3/0.5%TEA),得到纯产物流分(110mg,77%)。选择的&NMR信号(CDCl3)5(ppm)3.50(d，1H),3,56(dd,1H),3.卯(t，2H):,4.15(d,1H),4.25(t，1H),4.68讽1H).实施例8按实施例7方法制备。实施例9在聚丙烯离心瓶中，将实施例2(82mg，0.084mmol)溶于5mL水，鼓泡通入氩气10min。在另一个烧瓶中，在0.1NNaHCO3溶液中鼓泡通入氩气10min，用0.1NNaHC03溶液将接头溶液的pH调至约6.9。将长春碱酰肼衍生物(实施例6,91mg,0.092mM)的5mL四氬呋喃(THF)溶液緩慢加入以上溶液中。在氩气下，将得到的澄清溶液搅拌15min-lh。通过分析型HPLC(10mM乙酸铵，pH=7.0和乙腈)监测反应进程。将THF蒸发，将水溶液过滤，注射到制备-HPLC柱(XTerra柱，19x300mM)上。用lmM磷酸钠pH=7.0和乙腈洗脱，得到含产物的纯流分，冷冻干燥48h后，将其分离(78mg,50%);C83H1()3N19026S2;实际质量1845.68;MW:1846.95;HPLC-RT15.113min.,100。/。純HHMR图谱与归属结构一致，MS(ES-):1846.6，1845.5,933.3,924.2,923.3，922.5，615.6,614.7，525.0.图21A和21B表示叶酸相对于实施例9的相对结合亲和力；和实施例9对3&胸苷结合的作用；缀合物的IC5o(58nM);叶酸和缀合物竟争结合叶酸受体，证明缀合物的特异性结合。按照方法实施例4和3，分别进行测定。图1B表示在有(o)和无(')过量叶酸的存在下，实施例9对KB细胞中SH-胸普结合的活性；实施例9的ICso为约58nM。实施例10在聚丙烯离心瓶中，将实施例3(56mg)溶于7.5mL水，鼓泡通入氩气10min。在另一个烧瓶中，在0.1NNaHC(V溶液中鼓泡通入氩气10min，用0.1NNaHC03溶液将实施例3溶液的pH调至6.9。将实施例6(44mg)的7.5mL四氬呋喃(THF)溶液緩慢加入实施例3溶液中。在氩气下，将得到的澄清溶液搅拌15min-lh。通过分析型HPLC(10mM乙酸铵，pH^7.0和乙腈)监测反应进程。将THF蒸发，将水溶液过滤，经制备-HPLC纯化，用lmM磷酸钠pH-7.0和乙腈洗脱，得到纯流分，将它们合并，在环境温度下蒸发，将得到的水溶液用0.1NHCl调至pH4.0。冷冻千燥48h后，将实施例10分离(61mg,64%)。^HMR图谱和LCMS数据与归属结构相符。实施例11<formula>formulaseeoriginaldocumentpage69</formula>方法A:按以下方法制备实施例11:<formula>formulaseeoriginaldocumentpage69</formula>(a)为DCC,DIPEA,THF;(b)为水/THF，pH8.5在氩气下，将丝裂霉素C-乙基二硫化丙酸(34.4mg,0.069mmol)溶于无水THF(1mL)，然后依次加入N-羟基琥珀酰胺(7.9mg,0.069mmol)、二环己基碳二亚胺(14.2mg,0.069mmol)。加入二异丙基乙胺(0.024mL,0.138mmol)，将得到的混合物搅拌3h。在聚丙烯离心^f瓦中，将叶酸长春石咸(实施例9,26mg,0.014mmol)溶于3mL水。用0.1NNaHC03将溶液的pH緩慢调至8.5。将按本文中所述制备的活化的丝裂霉素C衍生物的3mLTHF溶液加入该叶酸长春碱溶液中。将得到的溶液在氩气下搅拌15min-1h，其中通过分析型HPLC(10mM乙酸铵和乙腈pH二7.0)监测反应进程。将THF减压除去，将水溶液过滤，注射到制备-HPLC柱(X-terra柱，19x300mm)上。用1mM磷酸钠(pH二7.0)和乙腈洗脱，得到纯流分，^)寻其蒸发，冻干48h，得到12mg(50%，基于回收的原料)。&NMR和质语数据分别支持图9和10中所示归属结构。C103H127N23O32S4;实际质量2325.79;MW2327.51.HPLC-RT20.054min.,99。/。纯，HHMR图谱与归属结构一致，MS(ES+):1552.5，116.0,1165.3,1164,3,1148.4，744.9,746.4,745.6.方法B:在室温下，在氩气下，将无水DMF(4.5mL)注射到实施例10(103mg,48.7,ol)和实施例8(N02-PySSCH2CH2-MMC,33.4mg,1.25当量)的混合物中。向得到的溶液依次注射DIPEA(84.9^L,10当量)和DBU(72.9^L,IO当量)。在室温下，在氩气下，将反应混合物搅拌20分钟，然后在搅拌下，转移到乙醚(50mL)中。将得到的悬浮液离心，将沉淀用乙醚(15mLx2)洗涤，然后溶于磷酸盐緩沖液(9mL，1.25mM,pH6.8)，经制备HPLC(柱WatersXTerraRP18,7|tim，19x300mm;流动相A=1.25mM磷酸盐緩冲液，pH6.8，B=乙腈；方法10%B-40%B,25min,流速25mL/min)纯化。将11.72-13.88分钟的流分收集，冷冻干燥，得到105.8mg物质，该物质含有99.2mg和6.6mg磷酸盐。方法C:按以下方法制备实施例11，收率34%:(a)NHS,DCC-树脂，DIPEA,THF;(b)实施例7,DIPEA,DMSO图2表示叶酸(*,l.O)相对于实施例11(■，0.21)的相对结合亲和力。图2中数据表示缀合物对叶酸受体具有高的相对结合亲和力。按方法实施例4进行测定。图1B和3分别表示实施例9(具有一种药物)和11(具有一对药物)对311-胸苷结合的作用，实施例9缀合物的IC5o(58nM)和实施例11的IC50(5nM)。图IB和3中的数据还表明叶酸与缀合物竟争结合叶酸受体，证明缀合物的结合特异性。按方法实施例3进行测定。另夕卜，具有两种药物的实施例11证实对叶酸受体的活性比仅具有一种药物的实施例9高IO倍以上。图4表示实施例11(a)对三种不同肿瘤细胞系(KB,4T-lcl2和ID8-cll5)的体外细胞毒活性。另外，图4表示在过量叶酸(b)的存在下实施例11的细胞毒活性下降，表明实施例11对叶酸受体起作用。图5A和5B表示两种不同剂量(lpmol/kg&2^mol/kg)的实施例11对Balb/c小鼠中M109肺癌肿瘤的活性和对Balb/c小鼠重量的影响(用Balb/c小鼠测定M109胂瘤体积)。分别按照方法实施例1和6进行测定。实施例11抑制实体瘤生长，但在两种剂量下对小鼠的重量几乎无影响。另外即使在第20天停止给药后，较高的剂量(2nmol/kg)还强烈抑制肿瘤生长。垂直线对应于最后给药日(第20天)。用5只动物进行试验，在较高的剂量2pmol/kg下，所有5只动物均出现全面反应。图6表示与对照(a)相比，在40pmol/kgEC20(铼络合物)存在(b)和不存在(c)情况下，实施例11在1(imol/kgTIW时，连续2周对FR阳性KB肿瘤的活性。垂直虚线代表最后给药日。这些图表明实施例11抑制实体瘤生长，且其抑制作用被EC20铼络合物阻止(竟争性)。另外，这些图表明，相对于对照，用实施例11处理未显著影响试验动物的重量。EC20(铼络合物)是与铼螯合的下式化合物EC20的制备方法在美国专利申请公布号US2004/0033195Al中有论述，其合成方法描述通过引用结合到本文中。按照方法实施例2进行测定。在与叶酸受体的结合中，EC20是实施例11的竟争剂，结果表明实施例11具有特异性作用。图8表示在40pmol/kgEC20(铼络合物)力口入(b)和不加入(c)时，实施例11在1pmol/kgTIW时对棵小鼠中叶酸受体阳性s.c.移植的人异种KB肿瘤的活性。图8中的数据表明，通过(b)与(c)对比，实施例11抑制实体瘤生长，且其抑制作用被EC20铼络合物阻止(竟争性阻止)。另外，图8中数据还表明，相对于对照(a)，用实施例ll处理后未显著影响试验棵小鼠动物模型的重量。图10表示相对于未处理对照(a)，相对于0.5nmol/kgTIW(b);1pmol/kgTIW(c)和2pmol/kgTIW(d)的未缀合基线药物、丝裂霉素C和去乙酰基长春碱单酰肼的混合物，2pmol/kgTIW实施例11(e)对棵小鼠中叶酸受体阳性人肿瘤的活性。图10中的数据表示实施例11抑制实体瘤生长，所有5只试验动物均出现完全反应。相反，用0.5|imol/kgTIW(b)或1|nmol/kgTIW(c)基线药物的混合物处理，在5只试验动物任一只中均未出现完全反应。如表示基线药物和实施例11对试验动物重量作用的图11所示，在第20天前，因出现毒性，中止给予高剂量的2pmol/kgTIW基线药物的混合物(d)。图11表明在处理期间，相对于对照(a),实施例11(e)未显著影响试验动物的重量。图ll中的数据表明，与实施例ll相比，和与对照(a)相比，用低剂量的未缀合基线药物、丝裂霉素C和去乙酰基长春碱单酰肼的混合物(0.5pmol/kgTIW(b)和1pmol/kgTIW(c))长时间处理，造成试验动物重量显著下降。另外，高剂量(2pmol/kgTIW(d))未缀合基线药物的混合物造成重量下降最大，导致该试验中止。本文中所述化合物可用于治疗大的或建立的肿瘤。例如，实施例11对大肿瘤有效。图12表示2pmol/kgTIW实施例11，2周对大的(250mm3、500mm3和750mm3)s.c.KB肿瘤的活性。当肿瘤达到如对应于肿瘤体积的垂直箭头所示的三个目标体积之一时，开始用实施例11处理。图12中的数据表明，实施例11抑制大肿瘤生长，试验动物出现完全反应。图13表示相对于对照(a);各单独的单一药物缀合物、丝裂霉素C缀合物(b)和去乙酰基长春碱单酰肼缀合物(c)或这些单一药物缀合物的混合物(d),1pmol/kgTIW实施例11(e)连续两周处理对建立的s.c.KB肺瘤的活性。按1pmol/kgTIW的相同水平，给予各药物缀合物，连续两周处理。该图表明，实施例11的表现优于任一单一药物缀合物或两种单一药物缀合物的混合物。意外的是，单一药物缀合物的混合物的表现并不显著优于分别给药的单一药物缀合物，相对于对照，任何单一药物缀合物的给药方案均无统计学显著性。仅实施例11化合物优于对照。另外，这些数椐提示具有长春花药物和丝裂霉素药物两者对单一缀合物有协同作用。实施例12-14按照本文中所述方法和条件制备，包括上文实施例11中所迷方法。制备需要的硫代磺酸酯或吡咬基联硫基-活化的长春碱和马来酰亚胺-活化的长春碱衍生物的其它细节在美国专利申请公布号US2005/0002942Al中有论述。制备需要的丝裂霉素衍生物的其它细节在美国专利申请公布号US2005/0165227Al中有论述，所述文献的公开内容通过引用结合到本文中。实施例12图15表示100nM实施例12对在FR阳性KB细胞中3^1-胸苷结合相对于脉冲时间的活性。按方法实施例3进行测定。实施例1权利要求1.一种结合受体的药物释放缀合物，所述缀合物包含(a)结合受体的部分；(b)多价接头；和(c)两种或多种药物或其类似物或衍生物；其中所述结合受体的部分与所述多价接头共价连接；所述两种或多种药物或其类似物或衍生物与所述多价接头共价连接；且所述多价接头包含一个或多个选自以下的元件间隔基接头、可分离接头和杂原子接头及其组合。2.—种结合维生素受体的药物释放缀合物，所述药物释放缀合物具有下式(B)-(L)-(D)n其中(L)选自(ls)a、(lH)b和(lr)c及其组合；其中(1》为可分离接头，(ls)为间隔基接头，且(lH)为杂原子接头；(B)为结合维生素受体的部分，n为大于1的整数，且每次出现时，(D)是独立选择的药物或其类似物或衍生物；且a、b和c各自独立为O、1、2、3或4。3.—种结合维生素受体的药物释放缀合物，所述缀合物具有下式(B)画(L)-(D)n其中(L)选自(ls)a和(lH)b及其组合，其中(ls)为间隔基接头，且(1h)为杂原子接头；且a和b各自独立为O、1、2、3或4;且(B)为结合维生素受体的部分，n为大于1的整数，且每次出现时，(D)是独立选择的药物。4.权利要求l、2或3的药物释放缀合物，其中所述多价接头包括至少一个可分离接头，所述可分离接头不是二硫化物。5.权利要求l、2或3的药物释放缀合物，其中所述杂原子接头为氮、氧或硫原子，或选自式-nhi^NHR2-、-so-、-s(o)24。-nr3o-，其中r1、112和113各自独立选自氢、烷基、芳基、芳基烷基、取代的芳基、取代的芳基烷基、杂芳基、取代的杂芳基和烷氧基烷基。6.权利要求l、2或3的药物释放缀合物，其中所述间隔基接头选自羰基、硫代羰基、亚烷基、亚环烷基、亚烷基环烷基、亚烷基羰基、亚环烷基羰基、羰基烷基纟炭基、l-亚烷基琥珀酰亚胺-3-基、l-(羰基烷基)琥珀酰亚胺-3-基、亚烷基亚硫酰基、磺酰基烷基、亚烷基亚硫酰基烷基、亚烷基磺酰基烷基、羰基四氢-2h-吡喃基、羰基四氢呋喃基、l-(羰基四氢-2h-吡喃基)琥珀酰亚胺-3-基和l-(羰基四氢呋喃基)琥珀酰亚胺-3-基，其中所述间隔基接头各自任选^c一个或多个^取代基取代；其中各x1取代基独立选自烷基、烷氧基、烷氧基烷基、羟基、羟基烷基、氨基、氨基烷基、烷基氨基烷基、二烷基氨基烷基、卤素、卣代烷基、巯基烷基、烷硫基烷基、芳基、取代的芳基、芳基烷基、取代的芳基烷基、杂芳基、取代的杂芳基、羧基、羧基烷基、烷基羧酸酯基、烷基链烷酸酯基、胍基烷基、r、羰基、r"炭基烷基、r、酰基氨基和r:酰基氨基烷基，其中r4和r5各自独立选自氨基酸、氨基酸衍生物和肽，且其中116和R7各自独立选自氨基酸、氨基酸衍生物和肽。7.权利要求6的药物释放缀合物，其中所述杂原子接头为氮，且其中所述x1取代基和所述杂原子接头与它们连接的间隔基接头结合在一起形成杂环。8.权利要求7的药物释放缀合物，其中所述杂环选自吡咯烷、哌啶、嘿唑烷、异嗯唑烷、噻唑烷、异噻唑烷、吡咯烷酮、哌啶酮、嗯唑烷酮、异嘿唑烷酮、漆唑烷酮、异噻唑烷酮和琥珀酰亚胺。9.权利要求1、2或3的药物释放缀合物，其中所述可分离接头选自亚甲基、1-烷氧基亚烷基、1-烷氧基亚环烷基、1-烷氧基亚烷基羰基、1-烷氧基亚环烷基羰基、羰基芳基羰基、羰基(羧基芳基)氣基、羰基(二羧基芳基)羰基、卣代亚烷基羰基、亚烷基(二烷基甲硅烷基)、亚烷基(烷基芳基甲硅烷基)、亚烷基(二芳基甲硅烷基)、(二烷基曱硅烷基)芳基、(烷基芳基曱硅烷基)芳基、(二芳基甲硅烷基)芳基、氧基羰基氧基、氧基羰基氧基烷基、磺酰基烷基、亚氨基烷叉基、羰基烷叉基亚氨基、亚氨基环烷叉基、羰基环烷叉基亚氨基、亚烷基磺酰基、亚烷基硫基、亚烷基芳基硫基和羰基烷硫基，其中所述可分离接头各自任选被一个或多个X2取代基取代；其中各X"取代基独立选自烷基、烷氧基、烷氧基烷基、羟基、羟基烷基、氨基、氨基烷基、烷基M烷基、二烷基氨基烷基、卣素、卤代烷基、巯基烷基、烷硫基烷基、芳基、取代的芳基、芳基烷基、取代的芳基烷基、杂芳基、取代的杂芳基、羧基、羧基烷基、烷基羧酸酯基、烷基链烷酸酯基、胍基烷基、Rt羰基、R、羰基烷基、R、酰基氨基和R、酰基氨基烷基，其中R4和R5各自独立选自氨基酸、氨基酸衍生物和肽，且其中116和117各自独立选自氨基酸、氨基酸衍生物和肽。10.权利要求9的药物释》文缀合物，其中所述杂原子接头为氮，且其中所述X2取代基和所述杂原子接头与它们连接的可分离接头结合在一起形成杂环。11.权利要求10的药物释力t缀合物，其中所述杂环选自吡咯烷、哌啶、嚼唑烷、异嚼唑烷、瘗唑烷、异瘗唑烷、吡咯烷酮、喊咬酮、嗯唑烷酮、异噁唑烷酮、p塞唑烷酮、异遙唑烷酮和琥珀酰亚胺。12.权利要求1、2或3的药物释放缀合物，其中所述杂原子接头为氮，且其中所述可分离接头和所述杂原子接头结合在一起形成二价基团，所述二价基团包括亚烷基氮丙啶-l-基、亚烷基羰基氮丙啶-l-基、羰基烷基氮丙啶-l-基、亚烷基亚硫酰基氮丙啶-l-基、亚硫酰基烷基氮丙啶-l-基、磺酰基烷基氮丙啶-l-基或亚烷基磺酰基氮丙啶-l-基，其中所述可分离接头各自任选^皮一个或多个X2取代基取代；其中各乂2取代基独立选自烷基、烷氧基、烷氧基烷基、羟基、羟基烷基、氨基、氨基烷基、烷基氨基烷基、二烷基氨基烷基、卤素、由代烷基、巯基烷基、烷硫基烷基、芳基、取代的芳基、芳基烷基、取代的芳基烷基、杂芳基、取代的杂芳基、羧基、羧基烷基、烷基羧酸酯基、烷基链烷酸酯基、胍基烷基、R"-羰基、R、羰基烷基、R、酰基氨基和R:酰基氨基烷基，其中R4和R5各自独立选自氨基酸、氨基酸衍生物和肽，且其中116和117各自独立选自氨基酸、氨基酸衍生物和肽。13.权利要求12的药物释J:缀合物，其中所述杂原子接头为氮，且所述可分离接头和所述杂原子接头结合在一起形成二价基团，所述二价基团包括亚烷基氮丙啶-l-基、羰基烷基氮丙啶-l-基、亚硫酰基烷基氮丙啶-l-基或磺酰基烷基氮丙啶-l-基。14.权利要求13的药物释放缀合物，其中所述间隔基接头选自羰基、硫代羰基、亚烷基羰基、亚环烷基羰基、羰基烷基羰基和l-(羰基烷基)琥珀酰亚胺-3-基，其中所述间隔基接头各自任选被一个或多个X1取代基取代；其中各X1取代基独立选自烷基、烷氧基、烷氧基烷基、羟基、羟基烷基、氨基、M烷基、烷基氨基烷基、二烷基氨基烷基、卤素、由代烷基、巯基烷基、烷硫基烷基、芳基、取代的芳基、芳基烷基、取代的芳基烷基、杂芳基、取代的杂芳基、羧基、羧基烷基、烷基羧酸酯基、烷基链烷酸酯基、胍基烷基、R"-羰基、RS-羰基烷基、R、酰基氨基和R:酰基氨基烷基，其中R4和R5各自独立选自M酸、tt酸衍生物和肽，且其中116和117各自独立选自氨基酸、氨基酸衍生物和肽；且其中所述间隔基接头与所述可分离接头连接形成氮丙啶酰胺。15.权利要求1、2或3的药物释放缀合物，其中所述药物或其类似物或衍生物中的至少一种是选自以下的长春花生物碱长春碱、脱乙酰基长春碱、长春酰胺、硫代长春酰胺及其类似物和衍生物。16.权利要求1、2或3的药物释放缀合物，其中所述药物是含有双键4定合的氮原子的药物或其药物衍生物，其中所述可分离接头选自亚烷基羰基氨基和l-(亚烷基羰基氨基)琥珀酰亚胺-3-基，且其中所述可分离接头与所述药物氮连接形成腙。17.权利要求1、2或3的药物释放缀合物，其中所述药物是含有硫原子的药物或其药物衍生物，所述可分离接头选自亚烷基硫基和羰基烷硫基，且其中所述可分离接头与所述药物硫连接形成二硫化物。18.权利要求6的药物释放缀合物，其中所述结合受体的部分是含有氮的叶酸，且所述间隔基接头选自亚烷基羰基、亚环烷基羰基、羰基烷基羰基和l-(羰基烷基)琥珀酰亚胺-3-基，其中所述间隔基接头与所述叶酸氮连接形成酰亚胺或烷基酰胺。19.权利要求18的药物释放缀合物，其中各^取代基独立选自烷基、羟基烷基、氨基、氨基烷基、烷基氨基烷基、二烷基氨基烷基、巯基烷基、烷硫基烷基、芳基、取代的芳基、芳基烷基、取代的芳基烷基、羧基、羧基烷基、胍基烷基、Rt羰基、R、羰基烷基、116-酰基氨基和R、酰基氨基烷基，其中114和115各自独立选自氨基酸、氨基酸衍生物和肽，且其中R"和W各自独立选自氨基酸、氨基酸衍生物和肽。20.权利要求6的药物释放缀合物，其中所述杂原子接头为氮，且所述间隔基接头选自亚烷基羰基、亚环烷基羰基、羰基烷基羰基和l-(羰基烷基)琥珀酰亚胺-3-基，其中所述间隔基接头各自任选被一个或多个X1取代基取代，且所迷间隔基接头与所述氮连接形成酰胺。21.权利要求6的药物释;^文缀合物，其中所述杂原子接头为硫，且所述间隔基接头选自亚烷基和亚环烷基，其中所述间隔基接头各自任选被氛基取代，且所述间隔基接头与所述硫连接形成硫醇。22.权利要求6的药物释》丈缀合物，其中所述杂原子接头为疏，且所述间隔基接头选自l-亚烷基琥珀酰亚胺-3-基和l-(羰基烷基)琥珀酰亚胺-3-基，且所述间隔基接头与所述硫连接形成琥珀酰亚胺-3-基硫醇。23.权利要求9的药物释放缀合物，其中所述杂原子接头为氧，且所述可分离接头选自亚甲基、1-烷氧基亚烷基、1-烷氧基亚环烷基、1-烷氧基亚烷基羰基和l-烷氧基亚环烷基a&，其中所述可分离接头各自任选被一个或多个X2取代基取代，且所述可分离接头与所述氧连接形成缩醛或缩酮。24.权利要求9的药物释;^文缀合物，其中所述杂原子接头为氧，且所述可分离接头为亚曱基，其中所述亚甲基被任选取代的芳基取代，且所述可分离接头与所述氧连接形成缩醛或缩酮。25.权利要求9的药物释》文缀合物，其中所述药物是含有氮原子的药物或其药物衍生物，所述杂原子接头是氮，且所述可分离接头选自羰基芳基羰基、羰基(羧基芳基)羰基、羰基(二羧基芳基)羰基，且所述可分离接头与所述杂原子接头氮连接形成酰胺，且还与所述药物氮连接形成酰胺。26.权利要求9的药物释》文缀合物，其中所述药物是含有氧原子的药物或其药物衍生物，所述杂原子接头是氮，且所述可分离接头选自羰基芳基羰基、羰基(羧基芳基)羰基、羰基(二羧基芳基)羰基，且所述可分离接头与所述杂原子接头氮连接形成酰胺，且还与所述药物氧连接形成酯。27.权利要求9的药物释;^丈缀合物，其中所述杂原子接头是氮，且所述可分离接头选自亚氨基烷叉基、羰基烷叉基亚氨基、亚氨基环烷叉基和羰基环烷叉基亚氨基，其中所述可分离接头各自任选被一个或多个X2取代基取代，且所迷可分离接头与所述氮连接形成腙。28.权利要求9的药物释;故缀合物，其中所述杂原子接头是氧，且所述可分离接头选自亚烷基(二烷基甲硅烷基)、亚烷基(烷基芳基甲硅烷基)、亚烷基(二芳基甲硅烷基)、(二烷基甲硅烷基)芳基、(烷基芳基甲硅烷基)芳基和(二芳基甲硅烷基)芳基，其中所述可分离接头各自任选被一个或多个x"取代基取代,且所述可分离接头与所述氧连接形成硅烷醇。29.权利要求1、2或3的药物释放缀合物，其中所述药物是含有氮原子的药物或其药物衍生物，且所述可分离接头为卣代亚烷基羰基，所述由代亚烷基羰基任选被一个或多个取代基乂2取代；其中各乂2取代基独立选自烷基、烷氧基、烷氧基烷基、羟基、羟基烷基、氨基、氨基烷基、烷基氨基烷基、二烷基烷基、囟素、囟代烷基、巯基烷基、烷硫基烷基、芳基、取代的芳基、芳基烷基、取代的芳基烷基、杂芳基、取代的杂芳基、羧基、羧基烷基、烷基羧酸酯基、烷基链烷酸酯基、胍基烷基、R、羰基、RS-羰基烷基、R、酰基氨基和R:酰基氨基烷基，其中R4和R5各自独立选自氨基酸、氨基酸衍生物和肽，且其中116和W各自独立选自氨基酸、氨基酸衍生物和肽；且所述可分离接头与所述药物或药物衍生物的氮连接形成酰胺。30.权利要求1、2或3的药物释放缀合物，其中所述药物是含有氧原子的药物或其药物衍生物，且所述可分离接头为亚烷氧基羰基或囟代亚烷基^^，所述亚烷氧基羰基或卣代亚烷基羰基任选被一个或多个X"取代基取代；其中各乂2取代基独立选自烷基、烷氧基、烷氧基烷基、羟基、羟基烷基、氨基、_烷基、烷基氨基烷基、二烷基M烷基、卤素、卣代烷基、巯基烷基、烷硫基烷基、芳基、取代的芳基、芳基烷基、取代的芳基烷基、杂芳基、取代的杂芳基、羧基、羧基烷基、烷基羧酸酯基、烷基链烷酸酯基、胍基烷基、R"-羰基、RS-羰基烷基、R、酰基氨基和R:酰基氨基烷基，其中R4和R5各自独立选自氨基酸、氨基酸衍生物和肽，且其中116和W各自独立选自氨基酸、氨基酸衍生物和肽；且所述可分离接头与所述药物或药物衍生物的氧连接形成碳酸酯或酯。31.权利要求1、2或3的药物释放缀合物，其中所述杂原子接头是氧，所述间隔基接头是任选被一个或多个^取代基取代的1-亚烷基琥珀酰亚胺-3-基，且所述可分离接头选自亚甲基、1-烷氧基亚烷基、1-烷氧基亚环烷基、1-烷氧基亚烷基羰基、l-烷氧基亚环烷基羰基，其中所述可分离接头各自任选净皮一个或多个X^又代基取代；其中各X"取代基独立选自烷基、烷氧基、烷氧基烷基、羟基、羟基烷基、氨基、氨基烷基、烷基氨基烷基、二烷基氨基烷基、卤素、卤代烷基、巯基烷基、烷硫基烷基、芳基、取代的芳基、芳基烷基、取代的芳基烷基、杂芳基、取代的杂芳基、羧基、羧基烷基、烷基羧酸酯基、烷基链烷酸酯基、胍基烷基、R、羰基、RS-羰基烷基、R、酰基氨基和R^酰基氨基烷基，其中R4和R5各自独立选自氨基酸、氨基酸衍生物和肽，且其中116和117各自独立选自氨基酸、氨基酸衍生物和肽；且其中所述间隔基接头和所述可分离接头各自与所述杂原子接头连接形成琥珀酰亚胺-1-基烷基缩醛或缩酮。32.权利要求1、2或3的药物释放缀合物，其中所述多价接头包含杂原子接头、间隔基接头和可分离接头，它们结合在一起形成3-硫代琥珀酰亚胺-1-基烷氧基甲氧基，其中所述曱基任选被烷基或取代的芳基取代。33.权利要求l、2或3的药物释;^缀合物，其中所述多价接头包含杂原子接头、间隔基接头和可分离接头，它们结合在一起形成3-硫代琥珀酰亚胺-l-基烷基羰基，其中所述羰基和所述药物或其类似物或衍生物一起形成酰基氮丙啶。34.权利要求1、2或3的药物释放缀合物，其中所述多价接头包含杂原子接头、间隔基接头和可分离接头，它们结合在一起形成l-烷氧基亚环烷基氧基。35.权利要求1、2或3的药物释放缀合物，其中所述多价接头包含间隔基接头、杂原子接头和可分离接头，它们结合在一起形成亚烷基氨基羰基(二羧基亚芳基)羧酸酯基。36.权利要求1、2或3的药物释放缀合物，其中所述多价接头包含可分离接头、间隔基接头和可分离接头，它们结合在一起形成联硫基烷基羰基酰肼，其中所述酰肼与所述药物或其类似物或衍生物一起形成腙。37.权利要求1、2或3的药物释放缀合物，其中所述多价接头包含杂原子接头、间隔基接头和可分离接头，它们结合在一起形成3-硫代琥珀酰亚胺-l-基烷基羰基酰肼，其中所述酰肼与所述药物或其类似物或衍生物一起形成腙。38.权利要求1、2或3的药物释放缀合物，其中所述多价接头包含杂原子接头、间隔基接头、杂原子接头、间隔基接头和可分离接头，它们结合在一起形成3-硫烷基石黄酰基烷基(二取代的曱硅烷基)氧基，其中所述二取代的甲硅烷基被烷基或任选取代的芳基取代。39.权利要求1、2或3的药物释放缀合物，其中所述多价接头包含多种间隔基接头，所述间隔基接头选自天然氨基酸及其立体异构体。40.权利要求1、2或3的药物释放缀合物，其中所述多价接头包含可分离接头、间隔基接头和可分离接头，它们结合在一起形成3-联硫基烷氧基羰基，其中所述羰基与所述药物或其类似物或衍生物一起形成碳酸酯。41.权利要求1、2或3的药物释放缀合物，其中所述多价接头包含可分离接头、间隔基接头和可分离接头，它们结合在一起形成3-联硫基芳基烷氧基羰基，其中所述羰基与所述药物或其类似物或衍生物一起形成碳酸酯，且所述芳基^f壬选被取代。42.权利要求1、2或3的药物释放缀合物，其中所述多价接头包含杂原子接头、间隔基接头、可分离接头、间隔基接头和可分离接头，它们结合在一起形成3-硫代琥珀酰亚胺-l-基烷氣基烷氧基烷叉基，其中所述烷叉基与所述药物或其类似物或衍生物一起形成腙，各烷基独立选择，且所述氧基烷氧基任选被烷基或任选取代的芳基取代。43.权利要求l、2或3的药物释放缀合物，其中所述多价接头包含可分离接头、间隔基接头和可分离接头，它们结合在一起形成3-联硫基烷氧基羰基酰肼。44.权利要求1、2或3的药物释放缀合物，其中所述多价接头包含可分离接头、间隔基接头和可分离接头，它们结合在一起形成3-联硫基烷基氨基，其中所述氨基与所述药物、药物类似物或药物衍生物一起形成插烯酰胺。45.权利要求44的药物释放缀合物，其中所述烷基为乙基。46.权利要求1、2或3的药物释放缀合物，其中所述多价接头包含可分离接头、间隔基接头和可分离接头，它们结合在一起形成3-联硫基烷基氨基羰基，其中所述羰基与所述药物、药物类似物或药物衍生物一起形成氨基曱酸酯。47.权利要求46的药物释放缀合物，其中所述烷基为乙基。48.权利要求1、2或3的药物释放缀合物，其中所述多价接头包含可分离接头、间隔基接头和可分离接头，它们结合在一起形成3-联硫基芳基烷氧基#緣，其中所述羰基与所述药物、药物类似物或药物衍生物一起形成氨基曱酸酯或氨基曱酰基氮丙啶。49.权利要求3的药物释方丈缀合物，其中至少一种药物是半抗原。50.权利要求53的药物释放缀合物，其中所述半抗原选自荧光素和二硝基苯基半抗原。51.—种药用组合物，所迷组合物包含权利要求1、2或3的药物释放缀合物及药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂。52.—种在具有致病细胞群体的宿主动物中消除致病细胞群体的方法，其中所述致病细胞群体的各成员具有维生素或其类似物或衍生物的可用结合部位，且其中所述结合部位由所述致病细胞唯一表达、过度表达或优先表达，所述方法包括给予所述宿主权利要求1、2或3的药物释放缀合物或其药用组合物的步骤。全文摘要本文中所述为治疗患者中致病细胞群体的化合物、药用组合物和方法。本文中所述化合物包括多种细胞毒药物和结合维生素受体的配体的缀合物。其中多种药物可相同或不同。类似地，结合维生素受体的配体可相同或不同。该缀合物还包含由一个或多个间隔基接头、杂原子接头和可分离接头形成的接头。文档编号A61K47/48GK101287500SQ200680038362公开日2008年10月15日申请日期2006年8月18日优先权日2005年8月19日发明者C·P·利蒙,I·R·弗拉霍夫申请人:恩多塞特公司